Nghiên cứu tác dụng giảm chỉ số lipid máu và khả năng kháng khuẩn của cao ethanol từ lá xoài non (Mangifera indica L.)

Sử dụng cao ethanol từ lá xoài non, theo phương pháp nghiên cứu của Gupta (2010) xác định giá trị MIC và phương pháp MTT của Sakarkar (2011) đã cho thấy cao ethanol từ lá xoài non có khả năng kháng một số chủng vi sinh vật gây bệnh thường gặp ở người, nhưng lại không có khả năng ức chế các dòng tế bào ung thư biểu mô biểu bì miệng KB, ung thư gan Hep G2, ung thư phổi LU-1, ung thư vú MCF-7.

BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM - HỘI NGHỊ KHOA HỌC QUỐC GIA LẦN THỨ DOI: 10.15625/vap.2020.00099 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG GIẢM CHỈ SỐ LIPID MÁU VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA CAO ETHANOL TỪ LÁ XOÀI NON (Mangifera indica L.) Trần Thị Phương Liên*, Trần Thu Hòa, Phạm Phương Thu Tóm tắt: Sử dụng cao ethanol từ xồi non, theo phương pháp nghiên cứu Gupta (2010) xác định giá trị MIC phương pháp MTT Sakarkar (2011) cho thấy cao ethanol từ xoài non có khả kháng số chủng vi sinh vật gây bệnh thường gặp người, lại khơng có khả ức chế dòng tế bào ung thư biểu mơ biểu bì miệng KB, ung thư gan Hep G2, ung thư phổi LU-1, ung thư vú MCF-7 Ngoài cao ethanol từ xồi non có khả làm giảm số số lipid máu chuột béo phì thực nghiệm glucose, triglyceride, cholesterol LDL-c đồng thời làm tăng số HDL-c (với giá trị p < 0,05) Từ khóa: Giảm lipid máu, kháng khuẩn, xoài non MỞ ĐẦU Theo Đỗ Tất Lợi (2006) xồi có vị chua ngọt, tính mát, có tác dụng làm mát, lợi tiểu, chống sa nội tạng, được dùng trị bệnh hô hấp ho, viêm phế quản cấp hay mạn tính, phù thũng Viện Dược liệu (2001), cho thấy số nghiên cứu xoài Việt Nam thực từ năm 1989, cơng trình nghiên cứu sau chứng minh được khả kháng khuẩn sâu răng, chống viêm xồi; tìm số chủng men dịch chiết xồi; cơng nghệ tách chiết sản xuất mangiferin từ xoài Tuy nhiên việc nghiên cứu tác dụng giảm số lipid máu từ đối tượng chưa được nghiên cứu nước quốc tế VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Mẫu thực vật: Cây xoài Mangifera indica L, phận sử dụng non, được thu thành phố Nam Định - Nam Định Mẫu động vật: Chuột bạch chủng Swiss (chuột đực nặng 18 - 20 g) viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Tế bào ung thư có nguồn gốc từ trung tâm chủng giống Hoa Kỳ ATCC Mỹ gồm: ung thư biểu mơ biểu bì miệng KB, ung thư gan Hep G2, ung thư phổi LU-1 ung thư vú MCF-7 Các chủng vi sinh vật: E.faecalis ATCC13124, S.aureus ATCC25923, B.cereus ATCC13245, E.coli ATCC25922, P.aeruginosa ATCC27853, S.enterica ATCC12228, C.clbicans ATCC1023 có nguồn gốc từ Trung tâm chủng giống Hoa Kỳ ATCC Mỹ Trường Đại học Sư phạm Hà Nội *Email: liensp2@yahoo.com PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 799 2.2 Phương pháp nghiên cứu Tách chiết cao ethanol xoài non Mangifera indica L.: 2000 g xồi non được nghiền nhỏ sau được ngâm ethanol 90% theo tỉ lệ mẫu: dung mơi = : (kg/V), nhiệt độ phịng vịng 45 ngày (q trình được lặp lại lần) Gộp dịch chiết, lọc qua giấy lọc cất loại dung môi thu được cao ethanol Nghiên cứu ảnh hưởng cao ethanol từ xoài non lên chuột gây béo phì Tạo chuột béo phì được tiến hành theo phương pháp tác giả Srinivasan cộng sự, (2005): Chuột bình thường với cân nặng từ 18 - 20 g Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp, được chia thành hai nhóm, ni tuần: nhóm đối chứng được ni theo chế độ ăn bình thường khối lượng thể trung bình là: 42,23g ± 1,43; nhóm ni béo phì chế độ thức ăn giàu lipid, khối lượng thể trung bình chuột tăng lên đến 59,28 g ± 5,75; Sự sai khác khối lượng thể nhóm chuột ni béo so với nhóm chuột đối chứng có ý nghĩa thống kê với p = 0,034 Chuột béo phì được chia thành lô: lô không được điều trị lô được điều trị ngày cách cho uống cao ethanol xoài non 14 ngày xét nghiệm số lipid huyết (cholesterol toàn phần, triglyceride, HDL-c, LDL-c) máy xét nghiệm sinh hóa tự động (Phịng Hóa sinh - Bệnh viện Sóc Sơn - Hà Nội) Đánh giá hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định: Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao ethanol xoài non lên vi khuẩn được thực phương pháp nhỏ dịch tác giả Gupta cộng (2010) Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào: Hoạt tính gây độc tế bào được thực dựa phương pháp MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5 - diphenyltetrazolium) tác giả Sakarkar D M., Deshmukh V N (2011) Xử lý số liệu Các số liệu thu được được biểu diễn dạng giá trị trung bình  sai số (SE), số liệu được xử lý thống kê phần mềm MS Excel với phép thử t-test cho mẫu độc lập phân tích Anova một, hai nhân tố với mức ý nghĩa p < 0,05 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết tách chiết cao ethanol Từ 2000 g xồi non được phơi khơ nghiền nhỏ, đem ngâm với ethanol 90% vòng 45 ngày nhiệt độ phịng (q trình được lặp lại lần) Gộp dịch chiết lại, lọc qua giấy lọc cất loại dung môi thu được 422,68 g cao ethanol, đạt được hiệu suất chiết rút 21,134% khối lượng so với mẫu thực vật ban đầu 3.2 Ảnh hưởng cao ethanol xoài non tới số lipid máu chuột béo phì Từ kết Hình cho thấy có khác biệt rất lớn lơ chuột béo phì khơng điều trị lơ chuột béo phì được điều trị cao ethanol xoài non số lipid Cụ thể sau điều trị: số TC giảm 62,16% từ 6,03 mmol/L xuống 2,82 mmol/L BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM 800 với p = 0,022 ; số TG giảm 62,59% từ 2,54 mmol/L xuống 0,95 mmol/L với p = 0,03; số LDL-c giảm 85,49% từ 3,91 mmol/L xuống 0,567 mmol/L với p = 0,014 Chỉ số glucose huyết giảm 40,08% từ 8,93 mmol/L xuống 5,35 mmol/L với p = 0,024, điều chứng minh đường huyết chuột được cải thiện Ngược lại với số trên, số HDL-c lại tăng 56,70% từ 0,97 mmol/L lên 1,52 mmol/L với p = 0,031, dấu hiệu khả quan HDL được mệnh danh “lipoprotein tốt”, hoạt động vận chuyển cholesterol dư thừa từ tế bào ngoại vi gan để đào thải qua đường mật, điều phần giải thích được lượng TC TG giảm Hình Đồ thị biểu diễn biến động số sinh hóa lơ chuột điều trị khơng điều trị cao ethanol xồi non Chú thích: - TC: Cholesterol tồn phần - TG: Triglyceride - HDL-c: Lipoprotein liên kết cholesterol có tỉ trọng cao - LDL-c: Lipoprotein liên kết cholesterol có tỉ trọng thấp So sánh kết thu được với nghiên cứu tác giả Trần Thị Phương Liên (2015), (2016), thấy cao ethanol xồi non có tác dụng tương tự cao ethanol ổi (Lantana Camara L.) cao ethanol loài đương quy (Angelica sinensis) việc giảm số glucose, TC, TG, LDL-c tăng số HLD-c Kết chứng tỏ hoàn tồn sử dụng xồi non việc hỗ trợ giảm số lipid máu glucose huyết 3.3 Kết thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định Từ Bảng cho thấy mẫu cao ethanol xồi non có hoạt tính ức chế mạnh tất mẫu vi sinh vật thử hoạt tính, chí cao nhiều so với chất kháng sinh được điều chế vào sử dụng từ lâu y học PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 801 Bảng Kết thử hoạt tính kháng sinh cao phân đoạn EtOH từ xoài non Tên chất Gram + E faecalis S.aureus B.cereus Mẫu cao 128 256 256 Streptomycin 256 256 128 Tetramycin 16 64 Kanamycin 128 Nystatin Cyclohexamide - E.coli 256 32 128 - Đơn vị MIC (g/ml) Gram Nấm men P aeruginosa S.enterica C.clbicans 256 256 128 256 128 256 256 64 16 32 Chú thích: (-) Khơng có biểu ức chế, vi khuẩn phát triển bình thường Giá trị MIC xác định hàm lượng cao ethanol xoài non ống nghiệm khơng có vi khuẩn phát triển Như vậy, nói cao EtOH từ xồi non có tính kháng viêm cao với chủng vi sinh vật được sử dụng thí nghiệm Đây triển vọng tốt cho nghiên cứu chuyên sâu chủng vi sinh vật khác thách thức y tế dịch tễ học 3.4 Kết thử hoạt tính độc tế bào invitro Cao ethanol từ xồi non được thử hoạt tính gây độc dịng tế bào có nguồn gốc từ ATCC gồm: ung thư biểu mơ biểu bì miệng KB, ung thư gan Hep G2, ung thư phổi LU-1, ung thư vú MCF-7, chất đối chứng Eilipticine - có hiệu trị liệu đặc biệt nhiều loại ung thư Kết nghiên cứu cho thấy cao ethanol từ xoài non nồng độ cao nhất 256 μg/mL khơng có khả ức chế dịng tế bào ung thư KẾT LUẬN Cao ethanol từ xồi non có khả làm giảm số số lipid máu glucose giảm 40,08%, TC giảm 62,16% triglyceride, TG giảm 62,59%, LDL-c giảm 85,49% ; số HDL-c lại tăng 56,70% Ngoài dịch chiết từ xồi non có khả kháng số chủng vi sinh vật gây bệnh thường gặp người, nhiên lại không biểu khả gây độc số tế bào ung thư TÀI LIỆU THAM KHẢO Trần Thị Phương Liên, 2015 Nghiên cứu số thành phần hố sinh, độc tính cấp tác dụng giảm trọng lượng cao chiết ethanol bơng ổi (Lantana Camara L.), Tạp chí Khoa học Trường ĐHSPHN Trần Thị Phương Liên, 2016 Nghiên cứu tác dụng giảm đường huyết số số máu cao chiết ethanol loài đương quy (Angelica sinensis) thu thập Sìn Hồ - Lai Châu, Hội nghị khoa học quốc gia lần thứ hai, Đà Nẵng Đỗ Tất Lợi, 2006 Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Y học, Hà Nội Viện Dược liệu, 2001 Góp phần nghiên cứu nguồn nguyên liệu xoài Việt Nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội BÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM 802 Gupta et al., 2010 Antibacterial activities of ethanolic extracts of plants used in flok medicine, Int J Res Ayurveda Pharm., 1(2): 529-535 Sakarkar D M., Deshmukh V N., 2011 Ethnopharmacological review of traditional medicinal plants for anticancer activity Int J Pharm Tech Res., 3: 298-308 Srinivasan K., Viswanad B., Asrat L., Kaul C L., Ramarao P., 2005 Combination of hight-fatdiet-fet and low-does STZ treated rat: A model for type diabetes and pharmacological screening, Department Pharmacological Reseach, 52: 313-320 STUDY ON THE EFFECT OF LIPID INDICATORS REDUCTION AND ANTIMICROBIAL PROPERTIES OF ETHANOL EXTRACTED FROM YOUNG MANGO LEAVES (Mangifera indica L.) *Tran Thi Phuong Lien*, Tran Thu Hoa, Pham Phuong Thu Abstract: Using ethanol extracted from Mangifera indica L leaves, by Gupta method (2010) to determine the MIC value and the MTT method of Sakarkar (2011), the results showed that this extract is resistant to some common strains of pathogenic microorganisms in humans, but does not inhibit some cancer cell lines such as: oral cell carcinoma (KB), liver carcinoma (Hep G2), lung carcinoma (LU-1) and breast adenocarcinoma (MCF-7) Additionally, this extract can reduce some blood lipid indexes such as triglyceride, cholesterol, and LDL-c and increase HDL-c This change is statistically significant with p < 0.05 Keywords: Mangifera indica L., antimicrobial, lipid indicators, young mango leaves Hanoi Pedagogical University *Email: liensp2@yahoo.com ... thấy cao ethanol từ xoài non nồng độ cao nhất 256 μg/mL khơng có khả ức chế dòng tế bào ung thư KẾT LUẬN Cao ethanol từ xồi non có khả làm giảm số số lipid máu glucose giảm 40,08%, TC giảm 62,16%...PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 799 2.2 Phương pháp nghiên cứu Tách chiết cao ethanol xoài non Mangifera indica L.: 2000 g xoài non được nghiền... chất kháng sinh được điều chế vào sử dụng từ lâu y học PHẦN II NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 801 Bảng Kết thử hoạt tính kháng sinh cao phân đoạn EtOH từ xoài