Cây cải xoăn (Brassica oleracea) thuộc họ Cải (Brassicaceae) là một trong những thực phẩm giàu dinh dưỡng với nhiều lợi ích cho sức khỏe. Những nghiên cứu gần đây cho thấy cây cải xoăn có tác dụng trong việc ngăn ngừa ung thư, chống oxy hóa. Tuy nhiên những hiểu biết về hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm vẫn chưa được tìm hiểu. Nghiên cứu này nhằm khẳng định và đánh giá một số tác dụng sinh học của cây cải xoăn.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN, KHÁNG NẤM TỪ CAO CHIẾT CÂY CẢI XOĂN (BRASSICA OLERACEA) Phạm Ngọc Khơi* TĨM TẮT Đặt vấn đề: Cây cải xoăn (Brassica oleracea) thuộc họ Cải (Brassicaceae) thực phẩm giàu dinh dưỡng với nhiều lợi ích cho sức khỏe Những nghiên cứu gần cho thấy cải xoăn có tác dụng việc ngăn ngừa ung thư, chống oxy hóa Tuy nhiên hiểu biết hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm chưa tìm hiểu Nghiên cứu nhằm khẳng định đánh giá số tác dụng sinh học cải xoăn Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Trong nghiên cứu xác định hợp chất tự nhiên có cải xoăn để đánh giá khả kháng khuẩn kháng nấm từ cao chiết Kết quả: Các hợp chất tự nhiên có cải xoăn polyphenol, flavonoid, tannin alkaloid xác định cao chiết Cao chiết có khả kháng lại năm loại vi khuẩn Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae; kháng lại hai loại vi nấm Candida albicans Candida tropicalis Tuy nhiên, cao chiết khơng có khả kháng lại hai loại vi khuẩn Staphylococcus aureus Staphylococus epidermidis nồng độ khảo sát Kết luận: Nghiên cứu lần đầu xác định hợp chất tự nhiên có cải xoăn qua nhằm đánh giá khả kháng khuẩn kháng nấm Từ khóa: cải xoăn (Brassica oleracea), kháng khuẩn, kháng nấm ABSTRACT TO INVESTIGATE THE ANTIBACTERIAL AND ANTIFUNGAL ACTIVITIES OF EXTRACT IN BRASSICA OLEACEA Pham Ngoc Khoi * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 - No 3- 2019: 78-84 Background: Kale (Brassica oleracea) is one of the rich nutrient foods with many health benefits Recent studies have shown that kale is effective in preventing cancer, antioxidants However, the studies of antimicrobial and antifungal activities are still unknown In this study, we confirm and evaluate some biological effects of kale Material and method: The aim of this study is to determine the natural compounds in Brassica oleracea to use in antimicrobial and antifungal activities Result: In this study, natural compounds found in kale such as polyphenol, flavonoid, tannin and alkaloid have been identified These extracts are against five bacterial pathogens such as Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae; to two fungal pathogens like Candida albicans and Candida tropicalis However, this extract does not have the ability to be against two bacterial pathogens such as Staphylococcus aureus and Staphylococus epidermidis at investigated concentrations Conclusion: In this study, for the first time, we were carried out to to determine the natural compounds in kale to use in antimicrobial and antifungal activities *Bộ môn Mô Phôi - Di truyền, Khoa Y học sở, Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch, TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: TS Phạm Ngọc Khôi ĐT: 0909 097 802 Email: pnkhoi@pnt.edu.vn 78 Hội Nghị Khoa Học Công Nghệ Trường ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học Keyword: kale, antibacterial, antifungal ĐẶT VẤN ĐỀ Cây cải xoăn (Brassica oleracea) thuộc họ Cải (Brassicaceae) thực phẩm giàu dinh dưỡng trái đất mệnh danh “nữ hoàng rau xanh” có nhiều lợi ích cho sức khỏe có chứa lượng lớn acid béo omega-3 loại vitamin(4) Bên cạnh nguồn cung cấp vitamin A, vitamin C vitamin K tuyệt vời cải xoăn cung cấp chất xơ nhiều chất khống cần thiết cho sức khỏe folate, sắt, calci, kali, mangan phospho(1,4) Những nghiên cứu trước cơng bố cho thấy cải xoăn có tác dụng việc ngăn ngừa ung thư, chống oxy hóa, giảm cholesterol, giảm nguy mắc bệnh mạch vành, giúp cải thiện thị lực, tốt cho não giúp kiểm soát cân nặng(1,5) Tuy nhiên hiểu biết hoạt tính sinh học chưa cơng bố cách đầy đủ đặc biệt hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu nhằm đánh giá hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn điều kiện nuôi trồng Việt Nam ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Vật liệu nghiên cứu Cây cải xoăn thu hái vào tháng năm 2017 vườn rau đạt tiêu chuẩn VietGAP thuộc thành phố Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng, nơi có điền kiện khí hậu, thổ nhưỡng phù hợp cho việc trồng, chăm sóc cho sản phẩm cải xoăn có chất lượng tốt Việt Nam Các chủng vi khuẩn vi nấm thử nghiệm dùng nghiên cứu Bộ môn Sinh học phân tử, Khoa Dược, Trường Đại học Quốc tế Hồng Bàng cung cấp Địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực Phòng thí nghiệm Bộ môn Công nghệ sinh học, Khoa Khoa học ứng dụng, Đại học Tôn Đức Thắng Bộ môn Sinh học phân tử, Khoa Dược, Trường Đại học Quốc tế Hồng Bàng Bố trí thí nghiệm Xử lý mẫu cải xoăn → Kiểm nghiệm vật liệu (dựa theo Dược điển Việt Nam V): xác định độ ẩm, định tính sơ thành phần hóa học cải xoăn phương pháp hóa học → Tách chiết vật liệu phương pháp ngấm kiệt → Thu cao chiết từ cải xoăn → Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn Xử lý mẫu cải xoăn Mẫu cải xoăn thu hái phải làm sạch, loại bỏ tạp chất, không đạt yêu cầu chất lượng, cảm quan Sau mẫu cải xoăn sấy nhiệt độ 40 - 50°C phơi khô đến khối lượng không đổi Nghiền nhỏ nguyên liệu máy xay học Nghiền nhỏ nhằm mục đích tăng diện tích tiếp xúc mẫu cải xoăn với dung mơi q trình trích ly giúp tăng hiệu q trình trích ly Trong q trình thực cần lưu ý khơng nên nghiền mẫu to, nhỏ Mẫu nghiền to dẫn đến hiệu trích ly khơng cao, mẫu nghiền q nhỏ gây khó khăn q trình lọc để thu dịch chiết sau tiến hành trích ly Xác định độ ẩm cải xoăn Sau sấy phơi khô nghiền nhỏ nguyên liệu cần tiến hành xác định độ ẩm nguyên liệu, từ độ ẩm xác định hàm lượng chất khơ có mẫu nguyên liệu Tiến hành xác định độ ẩm nguyên liệu máy đo độ ẩm tự động Tiến hành cho vào đĩa cân máy tối thiểu 0,5 g mẫu ngun liệu, sau đậy nắp bật cơng tắc máy Máy bắt đầu làm việc cho kết độ ẩm mẫu nguyên liệu Sau máy kết thúc trình làm việc tiến hành ghi nhận kết độ ẩm nguyên liệu hình máy, dọn vệ sinh tắt máy(2,7) Phương pháp tách chiết Hội Nghị Khoa Học Công Nghệ Trường ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch 79 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Sau chuẩn bị cải xoăn, ngâm g bột khô cải xoăn vào 200 ml dung mơi ethanol bình ngấm kiệt, đặt vào bể điều nhiệt 50 °C phút, thêm vào 10 ml nước cất sau tiếp tục chiết 50°C bể điều nhiệt Sau khoảng thời gian xác định, rút nhỏ giọt dịch chiết phía dưới, đồng thời bổ sung thêm dung mơi phía cách cho dung môi chảy chậm liên tục qua lớp cải xoăn nằm yên Lọc lấy dịch làm mẫu thử(2,7) chuyển sang màu cam đến nâu đỏ chứng tỏ có diện alkaloid dịch chiết Thêm vào ml HCl lắc nhẹ, sau thêm ml thuốc thử Mayer, xuất màu trắng sữa chứng tỏ có diện alkaloid dịch chiết Còn nhỏ từ từ hết ml thuốc thử Bouchardat, để yên quan sát, dung dịch xuất kết tủa màu nâu, nâu đỏ vàng đậm dương tính với alkaloid Định tính sơ thành phần hóa học cải xoăn Mỗi thuốc thử cho vào ống nghiệm riêng lẻ để khảo sát diện thành phần hóa học Thuốc thử sử dụng Liebermann Burchard Cô cạn dung mơi, hòa lại dung mơi hữu lấy ml dịch chiết, nghiêng ống thêm vào hết ml thuốc thử Nếu dung dịch có màu đỏ đến nâu đỏ thuốc thử Liebermann - Burchard chứng tỏ có diện hợp chất steroid Khảo sát diện polyphenol Thuốc thử sử dụng FeCl3 5% (CH3COO)2Pb 10% Cho ml dịch chiết cho vào ống nghiệm Thêm vào vài giọt FeCl3 5%, để yên quan sát, dung dịch chuyển sang màu xanh đen, xanh đâm, xanh rêu/nâu nhạt chứng tỏ có diện polyphenol Hoặc thêm vài giọt thuốc thử (CH3COO)2Pb 10%, xuất kết tủa trắng dương tính với polyphenol Khảo sát diện hợp chất flavonoid Sử dụng phản ứng cyanidin để định tính flavonoid cách lấy dịch chiết cho vào ống nghiệm, thêm bột magnesium sau nhỏ từ từ hết ml HCl đậm đặc Sau - phút dung dịch có màu đỏ cam, đỏ thẫm, nâu đỏ đỏ tươi chứng tỏ có diện flavonoid (các dẫn xuất flavone, flavonol) mẫu Khảo sát diện hợp chất tannin Thuốc thử sử dụng tương tự khảo sát diện polyphenol gelatin 1% Thêm giọt gelatin 1%, xuất tủa bơng trắng chứng tỏ có diện tannin Khảo sát diện alkaloid Thuốc thử sử dụng Dragendorff, Mayer Bouchardat Hút ml dịch chiết cho vào ống nghiệm Thêm vào ml HCl lắc nhẹ, sau thêm ml thuốc thử Dragendorff, dung dịch 80 Khảo sát diện steroid Khảo sát diện saponin Xác định số tạo bọt dựa vào số tạo bọt để đánh giá nguyên liệu chứa saponin Chỉ số bọt số ml nước để hòa tan saponin g nguyên liệu cho cột bọt cao cm sau lắc Chỉ số tạo bọt tính theo cơng thức: CBS = 100 * (10 / i), CSB số tạo bọt, i số thứ tự ống nghiệm có cột bọt cao cm Bịt miệng ống nghiệm lắc 30 lần/30 giây Ðể yên 15 phút đo chiều cao cột bọt Nếu số bọt < 100 ngun liệu khơng chứa saponin, ngược lại số bọt > 100 chứng tỏ có diện saponin nguyên liệu(2,3,7) Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn tiến hành kỹ thuật khuếch tán dịch cao chiết từ đĩa giấy tẩm dịch cao chiết Cao chiết tẩm lên đĩa giấy với nồng độ định đặt lên bề mặt đĩa thạch dinh dưỡng trải vi khuẩn vi nấm Trong trình ủ, hợp chất cao chiết có hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm khuếch tán môi trường thạch ức chế phát triển vi khuẩn, nhờ mà tạo vòng vô khuẩn Dựa Hội Nghị Khoa Học Công Nghệ Trường ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 vào đường kính vòng vơ khuẩn để đánh giá cao chiết cải xoăn có khả khăng kháng khuẩn, kháng nấm với loại vi khuẩn, nấm hay khơng Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn thử nghiệm loại vi khuẩn Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococus epidermidis Streptococcus pneumoniae với loại vi nấm Candida albicans Candida tropicalis Môi trường sử dụng cho vi khuẩn TSA vi nấm sabouraud Thể tích mơi trường sử dụng cho đĩa 20 ml, sau đổ đĩa để đĩa khô tự nhiên 72 trước sử dụng Số đĩa petri sử dụng cho loại vi khuẩn, nấm đĩa (thí nghiệm lặp lại lần) Dung môi sử dụng để pha cao chiết DMSO (dimethyl sulfoxide), ngồi DMSO sử dụng làm mẫu đối chứng Chuẩn bị cao chiết: cao chiết cải xoăn pha thành nồng độ 60, 80 100 mg/ml dung môi DMSO Cân 500 mg cao chiết hòa tan hồn tồn ml dung môi DMSO, nồng độ cao chiết lúc 100 mg/ml Tiếp tục pha loãng cao chiết cải xoăn xuống nồng độ 80 60 mg/ml Chuẩn bị huyền dịch vi khuẩn, vi nấm: loại vi khuẩn, vi nấm pha thành huyền dịch nước muối sinh lý 0,9% Chuẩn độ đục vi khuẩn, nấm tương đương với độ đục chuẩn Mc Farland 0,5 cách thêm nước muối sinh lý 0,9% Lúc nồng độ huyền dịch vi khuẩn tương đương 108 CFU (số đơn vị khuẩn lạc, colony-forming unit) Trải vi khuẩn, vi nấm lên mặt thạch dinh dưỡng: sử dụng đầu tip vô trùng hút 100 ml loại vi khuẩn, nấm cho vào mặt đĩa thạch khác Sử dung que tăm vô trùng để trải vi khuẩn, nấm lên mặt thạch Sau trải vi khuẩn, nấm lên mặt thạch Để mặt thạch khô tự nhiên 15 phút Đặt đĩa giấy tẩm dịch cao chiết lên mặt thạch: sau mặt thạch trải vi khuẩn khô, dùng kẹp hấp khử trùng gắp đĩa giấy vô Nghiên cứu Y học trùng đường kính mm đặt lên mặt thạch Mỗi đĩa thạch đặt đĩa giấy, đĩa giấy đặt cách cm Sau đó, dùng đầu tip vơ trùng hút 20 µl mẫu đối chứng cao chiết nồng độ 60, 80, 100 mg/ml nhỏ lên đĩa giấy đặt sẵn mặt thạch Các đĩa thạch ủ 37°C 24 Đọc kết quả: sau 24 giờ, xung quanh đĩa giấy có xuất vòng kháng khuẩn, chứng tỏ dịch cao chiết nồng độ đĩa giấy có khả ức chế phát triển loại vi khuẩn loại nấm Đường kính vòng kháng khuẩn đo đơn vị milimet (mm) Khả kháng khuẩn, nấm dịch cao chiết đánh giá theo T Johnson cộng (1995): kháng khuẩn (đường kính vòng kháng từ 1,0 cm hơn); kháng khuẩn trung bình (đường kính vòng kháng từ 1,1 - 1,5 cm); kháng khuẩn mạnh (đường kính vòng kháng lớn 1,6 cm)(6,8) Phương pháp xử lý số liệu Mỗi thí nghiệm lặp lại ba lần sử dụng phầm mềm thống kê SAS 8.1 Excel 2007 để tính giá trị trung bình, độ lệch chuẩn sai khác có ý nghĩa ba lần lặp lại Từ đó, biết kết thí nghiệm có ý nghĩa khơng yếu tố có ảnh hưởng lên kết thí nghiệm không Kiểm định Tukey thực để đánh giá mức độ khác biệt có ý nghĩa giá trị với mức ý nghĩa P < 0,05 KẾT QUẢ Kết kiểm tra độ ẩm nguyên liệu Kết xác định độ ẩm mẫu nguyên liệu cải xoăn phương pháp sử dụng máy đo độ ẩm tự động 11,25% Cao chiết cải xoăn thu sau cô quay dạng sệt dự trữ 4°C để sử dụng cho thí nghiệm sau Kết định tính số hợp chất tự nhiên Khảo sát định tính sơ hợp chất có cải xoăn nhằm chọn hợp chất thích hợp cho thí nghiệm cần nghiên cứu Dịch chiết chiết với tỷ lệ nguyên liệu:dung môi 1:20 (g/mL), chiết 24 nhiệt độ Hội Nghị Khoa Học Công Nghệ Trường ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch 81 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 phòng Kết khảo sát định tính trình bày Bảng Từ kết định tính, ta thấy cải xoăn có hợp chất tự nhiên polyphenol, flavonoid, tannin, alkaloid; không chứa hợp chất steroid, saponin Kết khảo sát khả kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn Khả kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn xác định dựa khả ức chế phát triển vi khuẩn vi nấm, thể qua đường kính vòng kháng khuẩn, kháng nấm tạo đĩa petri trình bày Hình dòng vi khuẩn Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, vòng vơ khuẩn tạo nồng độ cao chiết khảo sát thấp (60 mg/ml) Ngược lại cao chiết cải xoăn khơng có khả kháng hai dòng vi khuẩn Staphylococcus aureus, Staphylococus epidermidis Hình mơ tả khả kháng nấm cao chiết cải xoăn hai loài nấm Candida albicans Candida tropicalis Kết thử nghiệm cho thấy cao chiết cải xoăn có khả kháng hai loài nấm dùng thử nghiệm vòng vơ khuẩn xuất với nồng độ cao chiết thấp dùng khảo sát (60 mg/ml) cách khác biệt có ý nghĩa thống kê nồng độ khảo sát từ 60 mg/ml đến 100 mg/ml Kết mơ tả Hình cho thấy cao chiết cải xoăn có khả kháng khuẩn năm Bảng Kết định tính số hợp chất tự nhiên có cải xoăn Stt Hợp chất Polyphenol Flavonoid Tannin Alkaloid Steroid Saponin - âm tính, + dương tính, Thuốc thử Dung dịch FeCl3 5% (CH3COO)2Pb 10% Phản ứng cyanidin Gelatin 1% Dragendorff Mayer Bouchardat Liebermann - Burchard Phản ứng tạo bọt ++ dương tính rõ, Hiệu kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn chủng vi khuẩn vi nấm trình bày Bảng Kết cho thấy đường kính vòng kháng khuẩn, kháng nấm tỷ lệ thuận với nồng độ cao chiết cải xoăn, nghĩa khả kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn tăng tăng nồng độ cao chiết Trong hiệu kháng khuẩn cảu cao chiết cải xoăn với chủng vi khuẩn Acinetobacter 82 Hiện tượng Dung dịch màu xanh đen Tủa trắng Dung dịch màu nâu đỏ Tủa trắng Dung dịch màu nâu đỏ Kết tủa trắng Kết tủa màu nâu đỏ Dung dịch không đổi màu CSB < 100 Kết luận +++ + +++ + +++ +++ ++ - +++ dương tính rõ baumannii cao đáng kể khác biệt có ý nghĩa thống kê với chủng vi khuẩn lại tất nồng độ khảo sát Trong nghiên cứu cho thấy có năm bảy chủng vi khuẩn hai chủng nấm gây bệnh khảo sát nhạy cảm với với cao chiết cải xoăn, điều chứng minh thảo dược, cỏ thay kháng sinh thương mại việc điều trị nhiễm khuẩn, nhiễm nấm với mức độ an toàn cao Hội Nghị Khoa Học Công Nghệ Trường ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học Hình Khả kháng khuẩn cao chiết cải xoăn A: Acinetobacter baumannii, B: Escherichia coli, C: Klebsiella pneumoniae, E: Staphylococcus aureus, F: Staphylococus epidermidis, D: Pseudomonas aeruginosa, G: Streptococcus pneumoniae Hình Khả kháng nấm cao chiết cải xoăn A: Candida albicans, B: Candida tropicalis (1): cao chiết cải xoăn với nồng độ 60 mg/ml, (ĐC): đối chứng âm DMSO, (2): cao chiết cải xoăn với nồng độ 80 mg/ml, (3): cao chiết cải xoăn với nồng độ 100 mg/ml Bảng Đường kính vòng vơ khuẩn cao chiết cải xoăn với loại vi sinh vật Loại vi sinh vật Acinetobacter baumannii Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Staphylococus epidermidis Streptococcus pneumoniae Candida albicans Candida tropicalis Đường kính vòng vơ khuẩn (mm) Nồng độ cao chiết (mg/ml) 60 80 100 11,52 ± 0,20 15,42 ± 0,12 21,64 ± 0,23 7,54 ± 0,16 8,84 ± 0,34 10,86 ± 0,14 8,65 ± 0,18 9,48 ± 0,13 10,83 ± 0,08 12,01 ± 0,08 14,45 ± 0,24 18,58 ± 0,23 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 11,74 ± 0,11 13,39 ± 0,07 16,40 ± 0,04 7,45 ± 0,54 11,64 ± 0,14 13,57 ± 0,14 9,50 ± 0,27 11,87 ± 0,33 12,86 ± 0,12 BÀNLUẬN Dịch chiết cải xoăn có chứa số hợp chất tự nhiên polyphenol, flavonoid, tannin Mẫu đối chứng DMSO 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 alkaloid Cao chiết cải xoăn có khả kháng lại năm loại vi khuẩn Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Hội Nghị Khoa Học Công Nghệ Trường ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch 83 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae; kháng lại hai loại vi nấm Candida albicans Candida tropicalis Cao chiết khơng có khả ức chế phát triển hai loại vi khuẩn Staphylococcus aureus Staphylococus epidermidis nồng độ khảo sát KẾT LUẬN Nghiên cứu nhằm khẳng định đánh giá số tác dụng sinh học cải xoăn định tính nhóm hợp chất tự nhiên cải xoăn phương pháp hóa học nhằm khảo sát khả kháng khuẩn kháng nấm cao chiết cải xoăn Nghiên cứu có giới hạn nên nhiều khía cạnh chưa thể thực được, xin đề nghị số vấn đề cần nghiên cứu định tính thêm hợp chất tự nhiên khác dịch chiết cải xoăn, nghiên cứu ứng dụng dịch chiết cải xoăn vào lĩnh vực thực phẩm chức năng, dược phẩm công nghệ thực phẩm Cần nghiên cứu tinh cao chiết cải xoăn để thay số loại kháng 84 sinh thương mại với mục đích chữa trị số bệnh liên quan đến nhiễm khuẩn, nhiễm nấm TÀI LIỆU THAM KHẢO Đỗ Tất Lợi (2001) “Những thuốc vị thuốc Việt Nam” Nhà xuất Y học Nguyễn Kim Phi Phụng (2007) “Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ” Nhà xuất Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Minh Cẩm Tiên, Phạm Ngọc Khơi (2016) “Nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm, kháng oxy hóa hợp chất polyphenol chiết xuất từ rễ mướp gai (Lasia spinosa L.)” Y học TP Hồ Chí Minh, Tập 20(20):436-446 Phạm Hồng Hộ (2003) “Cây cỏ Việt Nam”, Nhà xuất Trẻ TP Hồ Chí Minh Phạm Ngọc Khơi (2018) “Khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa từ cao chiết polyphenol cải xoăn (Brassica oleracea)” Y học TP Hồ Chí Minh, Tập 6, Phụ số 22, 14-18 Phạm Ngọc Khôi, Nguyễn Bùi Minh Tâm (2016) “Khảo sát khả kháng khuẩn dịch chiết bromelain từ Dứa (Ananas comosus) vi khuẩn Shigella Salmonella ứng dụng phòng ngừa điều trị bệnh đường tiêu hóa” Y học TP Hồ Chí Minh, Tập 20, Phụ số 5, 21-26 Trần Hùng (2007) “Phương pháp nghiên cứu dược liệu”, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Trần Linh Thước (2006) “Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mỹ phẩm” Nhà xuất Giáo dục Ngày nhận báo: 24/12/2018 Ngày phản biện nhận xét báo: 21/01/2019 Ngày báo đăng: 20/04/2019 Hội Nghị Khoa Học Công Nghệ Trường ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch ... khả kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn Khả kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn xác định dựa khả ức chế phát triển vi khuẩn vi nấm, thể qua đường kính vòng kháng khuẩn, kháng nấm tạo... chiết vật liệu phương pháp ngấm kiệt → Thu cao chiết từ cải xoăn → Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn Xử lý mẫu cải xoăn Mẫu cải xoăn thu hái phải làm sạch, loại bỏ tạp... kính vòng vơ khuẩn để đánh giá cao chiết cải xoăn có khả khăng kháng khuẩn, kháng nấm với loại vi khuẩn, nấm hay khơng Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm cao chiết cải xoăn thử nghiệm loại vi khuẩn