Khảo sát mối liên quan giữa các đột biến gen với một số bất thường cấu trúc tai ở trẻ điếc bẩm sinh

TW jfcfc «s> «> *4: LỚI CAM ƠN Lời em xin bộ)- to iòng biềt ơn đền Ban Giám hiẽỉi Phòng Dào lạo Dai học Trường Dạt học Y Hà Nội Phơng Cịng tác Chinh oi c sinh Sinh viên Trường Dạt học Y Hà NỘI, cóc mòn, khoa phòng nơi em lừng học tập dà lao điều kĩèn thuận lợt cho em suốt trinh học tập tàm huin ván Với lòng biết im xàti sue, em xin cam ơn PGS.TS Nguyen Thi Trang, giang viên Bỡ mòn Y Sinh học - Di truyền Truông Dai Hoc YHà Nội cô dừ khơi gợi ỷ tương tủn tinh cht bưo nin tàm hưởng đản em suổt q tĩinh em thực híẻn khóa luận Em xin gũi lời câm ơn chân thành den thầy cò mòn YSinh học - Di truyẽn Truông Dại học Y Hà Nội khoa Tai Mùi Họng bênh vĩèn Dại học Y Hà Nội dà tụo điều kiên thuận lơỉ giúp dở em Ví' tư liêu dè hoan thành ỉuụn vãn Xtn gia lài Cam ơn tên CÕC bênh nhãn vù gia dinh hỹnh nhãn dà dỏng ỹ tham gỉứ nghiên cừu Cuóỉ em xm guĩ lài cam ơn ĩởi gia dính hạn hè dà luân dồng hành, giúp dờ bẽn chia em nhùng khò khàn trang quà trinh học tập tụi Trường Dại hục YHaNỏi thin gian thực hiên luận vãn Em xin chân thảnh câm ơn Hà Nội ngày 11 thang 05 nám 2021 Sln h nén Cao Minh Hng -w ã* M ôG LềI CAM DOAN Túi la Cao Minh Hưng sinh viên khoa 2015 2021 chuyên ngành Bac sỳ đa khoa, Truông Đại học Y Ha Nội XÚI cam đoan: Đây luận vin đo ban thân tói true ticp thực hiên hướng dân cùa PGS.TS Nguyen Thj Trang, giang viên môn Y Sinh học l)i truyền, Truong i>ựi hục Y Ha Nội Cịng trinh khơng trúng lập với bât ký nghiên cửu nao khác dà cong bó Việt Nam Các sồ liệu vả thòng tin nghiên cứu ỉa hoan toàn chinh xác tnmg thực khách quan, đà xác nhận vã chầp nhận cua sơ IWI nghiên cứu cho phép lẩy sổ liệu Tỏi xin hỗn tồn chiu tiàch nhiựni tnróc pháp lu.it vể nhùng cam kết náy Hà Nội ngày- Ị ì thõng 05 nàm 2021 Giang viên hiróng dàn Người vict cam đoan PGS.TS.N'guycn Thị Trang Cao Minh Hưng TWM*M«K> «“ *4: MỤC LỤC ĐẠT VÁN ĐỀ _ CHƯƠNG l.TỚNGQUAN _ _ _ 1.1 Khai niệm điẻc bàm sinh 1.2 Ty lộ khiếm thinh bâm sinh tĩòi the giới nước Nguyen nhãn gây dice bâm sinh •• 1.3.1 Nguyên nhân di truyền - l 32 Nguyên nhản khỏng di truyền •• 1.4 Một sổ hội chứng hèn quan đèn khiếm thínhbâm sinh 15 16 1.4.1 Hội chứng Waardenbuig 1.4 Hội chứng Pendred 1.43 Hội chứng NÍEL AS 20 1.5 Ki’thuật giãi trinh tự gen thể hệ 21 CHƯƠNG DÔI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PIIÁP N< ;I1IÉN cứt 22 2.1 Thin gian vã địa diem nghiên cứu 2.2 Dổi tưựng nghiên cúu 22 22 •f TỊ 2.2.1 Tiéu chuẳn lựa chọn 2.22 Tiêu chuân loai trử 2.3 Phương pháp nghiên cưu 23 2.3.1 Thiết ke nghiên cuu _ 23 • •••••••••••• 2.32 Cỡ mẫu — _ 2.33 Nội dung nglencỳu 23 I If !ãã*ãããôôãã Dụo đửc Y học nghi én c ưu 25 CHƯƠNG KÉT QƯÃ NGHIÊN CƯL 26 3.1 Đặc d lẻm chung - — il».t IMMÌ4U lit 26 3.1.1 Giỏi • ••••••••• •• •••••••••••••••••••• ••••••••••• ••••• 26 tAỉ < c' *4: 13 Tiền sứ thai sán 3.1.4 Tinh trang cẩu trúc tai 27 3.2 Kct phát đột biển gcn gây điềc bãni ánh bẵng kỳ thuạt NGS 23 3.3 Bước đầu tim hiêu sổ đột biền gen mang únh chat di truyền giừa 3.1 Tien SƯ gia dinh ««»>»a*re*r f««eer If e ft fat va v«v«*«v^ea*«wt««*av*v«*«f 30 3.32 Ty lộ loại dột biển gen xuất hiộn gia đính tre dice bâm 3.3 Xảy dựng sỗ pha lrê lllltllllll mill lillHI Illi 111 >■ HIMI lllltlllKIUillllllllll 32 CtlƯƠNG BẢN LUẬN 34 4.1 Đặc diêm chung.— _ 34 11 Giới 34 4.12 Tuôi t imltmmmMMiMtmaoa* tltmmtl mmmmi im*l 34 4.13 Tiền sư thai san Maaaaa* letMimmmnmm mo ta aeeeata ããã ô1M ããããããã ôãããããã a 33 4.14 Tinh trang câu tĩũc tai • ••• tiiiniiiii IIIIIIIIIIIII teanitM I atMa taaeaaaaaaa aeaaaaat aeate 35 4.2 Khao sát dột tnẽn gen liên quan khiần thinh bám sinh bâng kỹ 4.3 Bước đau tim hiểu số đột biền gen mang rinh chắt di truyền giừa bênh nhãn gia dinh _ 39 4.3.1 Tiền sư gia dinh ã ãããããã a ãããã> ôe aaaaaae ae te a ae a aa a ae aa aaa a a 1« e* taaMa aaaaaaaaaaeeeavvaaaaeaae 39 4.32 Ty lộ cãc loai dột biên gen xuất gia đinh tre điếc bám sinh te imnmitimmaimi»itt»at Iitinm at Illium If ta imniM IIIMI mmmttiiiiiniimi 39 33 Xảy đựng sồ pha hệ 39 KẾT LUẬN 41 KIẾN NGHỈ 42 TÀI LIỆU THAM KH AO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ MÉT TÁT ABR Auditory’ Brainstem Response Đo diên thinh giac thản nâo PTA Pure Tone Average Ngưỡng nghe trung binh ADN Add Deaxinbonixldc ADN ARN Acid Ribonucleic ARN ASSR Auditory Steady Slate Đo đáp ứng trang thải bên Response vững thinh giác Cat lóp vị tinh CLVT MRI Magnetic Resonance Imaging Chụp cộng hương tú KTBS Khiêm thinh bãni sinh ĐCỎT Diện cưc óc tai GJB2 GapJunctionBeta Gen GJB2 GJB3 Gap Junction Beta Gen GJB3 NGS Next-Generation Sequencing Giai trinh tự gen the hộ Nhiêm sâc thô NST OAE Otoacoustic Emissions Do âm óc tai PCR Polymerase chain Reaction Phan ứng chuỗi Polymerase (phân ứng khuếch đụi gen) SLC26A4 Solute carrier family 26 (anion Gen SLC26A4 exchanger), membet WHO Worid Health Organization Tô chức y 1c thè giới ws Waardcnburg Syndrome Hội chúng Waardenburg d\TP deoxynucleoside triphosphate Các nudeotid A T G, c TWM*M«K> *4: DANH MỤC BANG VÀ BIÊƯ IM) Bang 1.1 Tiêu chuàn chân đoán hội chững Waardenburg type 17 Bang 1.2 Phân loại hội chứng Waadenburg Theo kicu gen 17 Bang 3.1 Tỵ lộ cãc loại dột biẽn genxuẳt nhóm nghiên cứu 28 Báng 32 Tỳ lệ cảc loại đột biền genxuầt gia đính 31 Biêu đồ 3.1 Phản bó đói lượng nghiên cứu theo giỏi _ 26 Biêu đồ 3.2 Phân bó dồi lưụng nghiên cứu tlieo nhỏtn tuổi 26 Biểu đo 3.3 Phân bổ doi nrựng nghiên cửu theo tiền sư thai sân 27 Biêu đổ 3.4 Phân bố dỗi tưụng nghiên cửu theo tiền sư gia ỡnh 30 -w ã* CN ôG DANH MC HÌNH ỉ linh 1.1 Các nguyên nhân gây điếc bám sinh Hình 12 Vi tri gen GJB2 I lính 1.3 Hĩnh cắt ngang ốc tai cho thấy nhóm te hao biêu hicn connexin26 lính 1.4 Vị tri gen SLC26A4 ■ IMMMI at (Iiiiiin IIIIIHÌIIIII iMiuaia HIM* lũ Hình 1.5 Gen ty thè vi irícic độlbicn M IIIIIIIIIHIIIMIHIMIIIMI ItlKllltlllll* II Hình 1.6 Vi tri gen TMC1— 13 Ilinh 1.7 Vị tn cùa gen SOXIO ã ãããããHI IMItl ããããããããããã ôã 14 Hỡnh 1.8 Vi tri gen GJB3 15 Hình 2.1 Các bước chợn bệnh nhân nghiên cứu 24 Hĩnh 3.1 Gia hệ 32 Hmh Gia hc ãããããããã.ãããã.ããããããããã.ããããããããã ã.ã) với qưy trình gổnv bước sau: Lấy Iml máu tươi chống dơng bàng ETDA Ly tàm 1300 vịng phút nhiội dộ thưởng (20*C) s phủi Loai bo dtch nôi u nhiệt độ - 20°C 40 phut Rà dõng Ư nhiệt độ thường Cho them thè tích kit tách bang thê tích mảu (Tuy nhièn bước chúng tỏi cỏ cai tiến nhầm giam thê tích cua hỏa chất tách chiết, gỏp phần giâm giã thảnh mà vàn đàm bao chất lượng) Tiến hành Vortex thin gian 10 giây u 99 °C ưong 25 phui Ly tâm 1300 vộng/pbủt 20 phút 10 Hút địch nồi sang eppendor vó trùng lo *4: 20 Dio Bích Tr 12 11 2014 NÙ 16274524 02 07 2018 21 Dinh Tùng I) 04 12 2010 Nam 17614309 03 07-2018 22 Bui Báo L 28 04 2013 NÙ 17648245 10 07-2018 23 Lẻ Tien D 27 08 2013 Nani 17667672 18 07/2018 24 Vũ Hoảng Klin Ng 08 02 2012 NO 17668252 25 07 2018 2S Mạc l>uy D 06 11 2012 Nam 17685708 27/07/2018 24 Nguyen Pham Tuân H 13 04 2015 Nam 17683820 31 07-2018 27 Lẻ Gia Ph 31 01 2011 Nam 17670850 17 08 2018 28 Búi Hai D 06 06 2015 Nam 17689735 20 08 2018 29 Nguyen Tien D 01 08 2014 Nam 17695662 23 08 2018 30 Nguyen Khánh H 12 02 2015 Nam 17695777 23 03 2018 31 Trân Nguyên Ngọc L 07 09 2013 NO 17712086 24 08 2018 32 VO Kim Ng 01 01 2011 NO 17716865 31 08 2018 33 Tíãh Phương D 12 05 2015 NO 16278652 03 09 2018 34 Nguyen Khánh A 19 06 2014 NO 17772853 03 09 2018 35 Nguyền Phương L 01 09 2011 NO 16322197 07 09 2018 36 Nguyên Huyền Tr 18 02 2015 NO 17793051 10 09 2018 37 Nguyên Học Qiioc H 28 03 2015 Nam 17821978 17.09'2018 38 Nguyen Due L 20 092011 Nam 17823844 24 09 2018 39 Buj Thanh M 25 05.2011 NO 17832698 27 09 201S 40 Dỗ Quốc Kh 02 2015 Nam 17833119 01 10 2018 41 Dâo l.inh D 08 11 2011 NO 1621999? 05 10 2018 TWM*M«K> *4: 43 Phạm Nguyên Việt A 27 09 2011 Nam 17886231 08 10 2018 43 Nguyen Hoàng H 03 04 2012 Nam 16322065 15 10 201S 44 Tâng Thị Phương A 09 04 2014 NO 17958787 29.10 2018 45 Nguyen Nhá Ư 31 12 2015 NỬ 18031172 06 11 2018 46 Mai Huyền Ph 01 09 2006 NO 18032758 26.11’2018 47 u Vin V 23 01 2012 Nam 18040536 03 12 2018 43 Lé Thu Th IS 09 2011 NO 1814030$ 0701 2019 49 Hoang Gia B 09 12 2012 Nam 18053110 28 02 2019 50 Nguyen Thị Yen N 31 08 2014 NO 180429S1 05 03 2019 51 DỖGiaư 04 2013 Nam 18152083 12.03 2019 52 Trin Hai M 20 08 2015 Nani 18243431 15 03 2019 53 Bui Phạm Ha V 01 04 2014 NO 182683S2 29 03 2019 54 VO Hoàng Hãi A 30 0.2014 NO 1S2S9468 02 04 2019 55 Nguyen Minh Tr 10 06 2015 Nam 18331205 05 04 2019 56 Nguyen B.1O N 9 2011 Nam 18362195 10 04 2019 57 Nguyen Hừu Thãi Q 06 07.2016 Nam 18373638 15 04 2019 58 Nguyen Phuong A 19 11 2005 NO 18071621 19 04 2019 59 Thăn Thị Quỳnh Ch 04 11 2014 NO 18071607 25 04 2019 60 Nguyen Đẳc Ph 04 05 2014 Nam 180’2530 30 04 2019 61 Nguyen Đúc T 24 12.2015 Nam 18073117 03 05 2019 62 Phọm Trung H 18 07 2012 Nam 18081416 08 05 2019 63 Nguyen Xuân K 14 2011 Nam 18110514 10 05’2019 TWM*M«K> *4: 64 Nguyen Bao Ng 01 01 2016 Nử 13120320 13 05’2019 65 Thun Dire H 01 01 2014 Nam L8121204 16 05 2019 66 Lẻ Ngợc Kim Ch 30 12 2007 Nừ 18120619 21 05 2019 67 Nguyen Hoàng s 09 2013 Nam 19032812 23 05 2019 68 Vang Quang Th 11 05 2017 Nam 19051708 29 05 2019 69 Dinh Hoảng Ph 08 07 2016 Nam 19051709 04 06 2019 70 Vủ Duy D 12 08 2011 Nam L9062517 07 06 2019 71 Phạm Thj Liah A 01 01 2016 Nù 19060425 10 06 2019 72 Nguyen Hoàng Linh D 01 01 2012 Nừ 19060810 14 06 2019 73 Nguyen Gia H 18 05 2015 Nam 19060309 19 06 2019 74 Nguyên Trần Khánh H 02 2011 Nam 19070215 25 06 2019 75 Chu Trằn Nhật M 19 2013 Nam 16212040 28 06 2019 76 Tiiẻu Thị B 15 06 2013 Nử 16211659 01 07’2019 77 Nguyen Th iPli lí ơngL 11 2014 Nù 17529812 05 07’2019 78 Nguyen Ngọc M 22 11 2015 Nữ 17636445 09 07’2019 79 Nguyen Ngọc A 12 08 2010 Nù 17780627 11 07'2019 80 Phạm B JỠ s 04 02 2015 Nữ 17917255 12/07 2019 81 Ngọc Gia H 15 02 2012 Nam 16075515 15.07’2019 82 Lãm Thu Th 12 09 2016 Nử 17871960 18 07 2019 83 Trần ThaoL 09 11 2011 Nử 19071531 23 07 2019 84 Thái Gia B 17.05 2015 Nam 19072709 29.07’2019 85 Ngỏ Gia B 22 08 2014 Nam 19081205 01 08 2019 TWM*M«K> *4: 86 Nguyên Mụnh D 24 04 2018 Nam 19OSI209 05 08 2019 87 Chu Due M 04 11.2013 Nam 19091609 09.08 2019 88 Dinh Duy M 21 03 2016 Nam 19100211 12 08 2019 89 Ngó Bao Ng 10 09 2017 Nừ 19100411 15 08 2019 90 Bui Ánh Ng 26 01 2017 Nữ 19100416 20 08 2019 91 Nguyen ĐảnglXrc A 28 07 2018 Nam 19100411 23 08 2019 92 Nguyen Hai L 29 11 2012 Nam 19101415 28 08 2019 9Ĩ Nguyen Sinh Ph 21 11.2013 Nam 16204332 30 08 2019 94 Dinh Như s 28 07,2014 Nam 1904060$ 03 09 2019 95 Hoàng Mai Ph 15 05 2018 Nữ 19101801 06 09 2019 96 Bùi Minh D 07 05 2011 Nam 17590220 10 09 2019 97 Nguyen Trung K 28 06 2011 Nam 18052721 13 09 2019 93 Nguyền Vù II, 04 09.2011 Nam 16322115 18 09 2019 99 Kim Dữc H 08 05 2016 Nam 19102101 20 09 2019 100 Phùng Hoàng Hai D 21 11 2017 Nam 19110803 01 10 2019 -w ã* CN ôG ... cẩu trúc điếc Các độĩ biến nên gen GJB2 XÍT-TL MT-TH đêu khơng phát hiên bĩu thường cấu tnic tai Độc biền gen SLC26A4, MT-RNR1, TMC1 cỏ ca trường 36 hợp bằt thường vá không but thường cấu trúc tai. .. biểu bất ihuững cấu trúc tai nong vả hụi chửng ws Các dột biến TMC1 MT-RNR1, MT-TH MT-TL chiếm ti lộ rát nho cac nghiên cứu Hiện chưa có nhiều dánh giã VC tương quan giừa đột biến gen nảy VỚI... dột biến SOXIO đêu có biêu hicn bắr thưởng tai Theo nghiên cửu cua Kenna có khoang 10% đổi tượng có đột biên gen GJB2 biêu hiụn bắt thường cẩu trúc tai riong nhiên khơng lương quan giũa đột