Đánh giá độc tính và tác dụng chống loét dạ dày tá tràng của chế phẩm dạ dày HP Gia Phát trên thực nghiệm

BỌ GIÁO DỤC VÀ DÀO TẠO BỌ Y TẾ TRƯỜNG DẠI HỌC Y HÀ NỘI Btl THỊ NGỌC ÁNH ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG CHĨNG LT DẠ DÀY TẢ TRÀNG CỦA CHÉ PHÀM DẠ DÀY HP GIA PHÁT TRÉN THỤC NGHIỆM KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP BÁC sĩ V KHOA KHỎA 2015-2021 Giàng viên hướng dẫn: TS TRÀN THANH TÙNG Hà Nội-2021 LỊI CẢM ƠN Vái tất ca tình cảm kinh trọng, xin bày to lông biết on tới: TS Trần Thanh Tùng Phó trưởng Bộ môn Dược lý Trường Dại học Y Hã -W -ÍMtận Qỉ ugc V Hl Nội người đà trực tiếp chi bao tinh cho từ nhùng bước đầu quã trinh nghiên cứu khoa học đến trinh hoãn thiện khỏa luận Thầy người đà truyền cho dam mê nghị lực công việc, kinh nghiệm quý báu sống, định hướng tương lai PGS.TS Phạm Thị vân Anh Trướng Bộ Dược lý Tnrờng Dại học Y Hã Nội đà tạo diều kiện tốt nhất, giúp dị vả cho tơi đóng góp quý báu nghiên cứu BSNT Đặng Thị Thu Hiên, giâng viên Bộ môn Dược lý Trường Dại hợc Y Hà Nội người dà đống hãnh, dộng viên chi dần tỏi nhiột tình ưong trinh nghiên cửu Tôi xin gùi lời cam on tới tồn thê thầy cơ, anh chị kỳ thuật viên Bộ môn Dưực lý Trưởng Đại học Y Hà Nội đà ln gần gũi giúp dị tịi trinh học tập nghiên cứu Bộ mòn Tòi xin cam on Phòng Dào tạo Dại học Trường Dạỉ học Y Hà Nội đà tạo mụi diều kiện thuận lọi suốt trinh học tập trưởng Cuối cũng, xin bày to lõng kinh yêu sáu sắc đến bỗ mẹ, anh chi bạn bè đà ln bẽn hỗ trợ, cị vù động viên tịi hồn thành khỏa luận Hà Nội ngày 18/05/2021 Sinh viên Bũi Thị Ngọc Ánh -ÍM Qỉ ugc V Hl LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan khóa luận tổt nghiệp ban tliản tỏi trực tiếp thực hướng dần cua TS Trần Thanh Tùng Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực vả chưa công bỗ bẳt kỳ công trinh khác Nốu sai xin hoàn toàn chịu trách nhiệm Người Viet cam đoan Bùỉ Thị Ngọc Ánh -ÍM CỊỈ ugc V Hl MỤC LỤC TÀI LIỆU THAM KHAO -ÍM Qỉ ugc V Hl DANH -MỤC TỪ MÉT TÁT DDHP : Dạ dày HP Gia Phát ECL : enterochromaffin-like cell (tẻ bào tict histamin) EGF : epidermal growth factor (yêu tô phát Iriên thượng bí) EGFR : epidermal growth factor receptor H2RA HC1 HP LDso LDDTT NSAID : histamme-2 receptor antagonist (thuốc kháng receptor histamin-2) : acid hydrochloric : Helicobacter pylori : lethal dose 50 (liêu gây chét 50% số động vật) : loét dày - tá trảng : non-steroidal anti-inflammatory drug (thuốc chóng viêm khơng steroid) : polymerase chain reaction (phan ứng khucch đại chuỗi) PCR PDGF : platelet-derived growth factor (yếu lố phải trién nguồn gổc liêu cẩu) : prostaglandin PG : proton pump inhibitor (thuốc ức chê bơm proton) PPI : ulcer index (chi sổ loét) ƯI : vascular endothelial growth factor VEGF (yếu tô phát then nội mô mạch máu) : p fibroblasts growth factor PFGF (yểu tồ phát tricn nguyên bào sợi P) DANH MỤC BẢNG Bang 4.1 Kct qua nghiên cứu độc tinh cấp dược liệu DDHP 46 DANH MỤC BIÉU ĐÒ Biêu đỗ 3.1 Anh hưởng cua DDHP tởi thê trọng chuột 30 Biêu dồ 40 3.2 Tỷ lệ % chuột cỏ lũtili anh LDDTT cảc lò DANH MỤC HÌNH ÁNH -ÍM CỊỈ ugc V Hl TĨM TÁT Nghiên cúu phát triển thuổc có nguồn gốc dược liệu hướng di điểu trị loét dãy tã trảng (LDDTT) Dê cung cắp thêm chửng vê tinh an toàn hiệu qua cùa thuỏc y học cô truyên đê tài tiên hành nhảm đánh giá dộc tinh tảc dụng chống LDDTT cua chế phàm Dạ dãy HP Gia Phát (DDHP) trẽn thực nghiộtn Dộc tính cấp dược nghiên cứu trài chuột trảng phương pháp Litchfield-Wilcoxon, độc tinh bán tnrờng diễn dược nghiên cửu chuột cống trắng theo hướng đản cua Tố chức Y tề giới vá Bộ Y Te Việt Nam Tác dụng chồng LDDTT dược nghiên cửu mõ hình gảy loét cysteamin chuột cống trảng Ket qua nghiên cửu cho thầy: không quan sát thấy độc tinh cấp cho chuột uổng DDHP đến liều cao 663,75 g/kg chưa tính dược LDS0 cua chế phàm DDHP liều 6.37 g.'kg'ngay vả 19.11 g/kg/ngày không anh hường đến toàn trạng, the trọng, chi số đánh giá chức tạo máu mức dộ tốn thương tế bào gan chức vã mò bệnh học gan thận chuột DDHP ca liều 6.37 g/kg/ngày vã 19.11 gkg'ngay lâm giám tý lệ lt, so ó lt, chì sô loét, mức độ tốn thương trcn mô bộnh học dụ đày tá tràng chuột dược gảy loét bang cysteamin Như vậy, DDHP khơng biêu dộc tính cấp dộc tinh trưởng diễn có tảc dụng chống LDDTT trcn động vật thực nghiệm Tù khóa: Dạ dày HP Gia Phát, loét dãy - tá tràng, CVS tea min, dộng vật thực nghiệm ĐẠT VÁN ĐÈ Loét dày tà trảng (LDDTT) lã bệnh dường tiêu hóa phổ biến trẽn tồn giới vái ti lệ mắc mái hàng năm tir 58 đền 142 100.000 người- nâm [1] Ờ vùng Châu Á Thái Bính Dương, ti lệ lưu hành bệnh có giám 20 năm qua ước tinh có 5% dãn số loét tá trâng vã 9.9% dản số loét dày [2] Tại Việt Nam theo sổ nghiên cửu tiền hành bệnh viện, nàm 2010 2014 có 14-17% sổ bệnh nhân dược nội soi dường tiêu hóa trài cỏ LDDTT [3] [4] Đặc diêm chinh cua LDDTT bệnh thường diền biến mụn tính, cỏ tính chất chu ki khiến ngưởi bệnh khó chịu, anh hưởng đến chất lượng sống cịng việc Bệnh dẫn dến biến chứng nặng xuất huyết tiêu hóa thung dụ dãy hẹp mịn vị ung thư hóa Trên thể giới, sổ lượt nhập viện loét chay máu giam dáng kè li lộ tư vong cịn trì từ 5- 10% Ti lộ từ vong thũng dày có the lên đen 20% phụ thuộc vào tuổi bệnh mắc [5] [6], [7] Ngây cư chê bệnh sinh LDDTT dược cho lã cân bang giừa cãc yếu tồ cõng vã yểu tố bao vệ niêm mạc Vi diều trị chu yểu phương pháp nội khoa làm giam yếu tổ công vã tăng cường yếu tố bao vệ Kháng sinh diệt Helicobacter pylori (HP), thuốc ửc chc bơm proton (PPI), kháng receptor H2 (H2RA) thuốc trung hòa acid dịch vị thuốc yếu dược dũng nay, có hiệu qua tốt dự phơng điều ưị lt song vần cịn số tác dụng khơng mong muốn Bẻn cạnh dó, nhiều vị thuồc nguồn gốc từ thiên nhiên đà dược chứng minh có tác dụng chồng loét tương tự thuốc y hục dại bàng thư nghiệm cã người dộng vật với tác dụng khơng mong muốn, giúp cho người bệnh cõ thèm lựa chọn diều trị [8] Vi việc tiếp tục tim kiếm thuốc mõi từ dược liệu dang hưởng nghiên cứu dược nhà -■c -ÍM Qỉ ugc V Hl khoa học quan tám dặc biệt cãc quắc gia với nguồn nguyên liệu sần có phong phú Việt Nam Viên nang cứng Dạ Dãy HP Gia Phát (DDHP) che phàm kết lK.jp vị thuốc y hục cò truyền dà dược sư dụng rộng rài dàn gian dưực nghiên cứu có tác dụng chống I.DDTT cam thào ò tặc cốt bụch thược, sãi hồ [9] [10] [11] [12] Tuy nhiên, cho den chưa có nghiên cửu tác dụng chống LDDTT lính an tồn kết hợp tìiànli phần củng chế phàm Dê lãm 1Ồ vấn đề de tải “Dủnh giá độc tinh tác dụng chổng loét dọ dày tá tràng cùa chề phẩm Dụ dày HP Gia Phát thực nghiệm " dược tiến hãnh với hai miK? tiêu: Xác dịnh dộc tinh cắp dộc tính bán trường diễn cùa DDHP dộng vật thực nghỉệm Dánh mơ giáhình tác gáy dụngloét chồng loét dụ dày -àtá tràng cùatrang DDHP bang cysteamin chuột cổng CHƯƠNG TÒNG QUAN 1.1 Loét dày - tá tràng theo quan diêm y học dại 1.1.1 Mỏ học dày - tá trâng vã sinh lý bãi tiết dịch vị l.ỉ.l.L MÒ học dày rá ưàng Thành ống tiêu hỏa chinh thức có cấu trúc bán suốt chiều dãi bao gồm lớp áo đồng tàm tính từ ngoái: tầng niêm mạc (chia thảnh lớp: lớp bicu mò lớp đệm lớp nicm) tầng niêm mạc tâng cơ, tâng mạc Tuy nhiên, câc doạn cưa ơng tiéu hỏa có chức nâng khác nên clnìng có cấu trúc riêng dê phù hựp với chức nâng sinh lý [13] • MƠ hục dày Biêu mô phu niêm mạc dày biêu mô trụ đơn tạo thành từ loại tế bảo có khã tiết chất nhầy đê bao vệ niêm mạc khơi lác dộng cua HC1 -■c -ÍM Qỉ ugc V Hl 53 vật mang khơi u dần tới tâng trọng lượng giam lượng mô mờ Theo đỗi suốt thời gian nghiên cửu nhận thấy, chuột cống trâng cà lõ (lò uổng dung mỏi lỏ uống thuổc thư) ăn uổng vả hoạt dộng bính thường, mắt sáng, lịng mượt, phản khị Chuột ca lơ tăng cân rõ khơng có khác biệt có ý nghía giừa mức độ tảng cân lò chứng lò uống thuốc thư Như DDHP liêu 6.37 g/kg/ngày (tương đương liều dự kiến lảm sàng) 19.11 glcg/ngãy (gấp lần liều dự kiến lãm sàng) 28 ngày không gây anh hường tới tinh trạng chung phát tri ôn cua chuột 4.1.2.2 Anh hưởng Cua DDIỈP quan tạo nưiu Hệ tạo màu lả quan quan trọng cùa thê có liên quan mật thiết den hoạt động, chức cùa quan khác Vỉ máu dóng vai trờ phương tiện vận chuyên chất nên tế bào mâu mâu sè tiếp xúc với nồng dộ dâng ke chất độc hại Ngoải mức độ tăng sinh, biệt hóa cua te bảo mâu rối loạn chức tạo máu có thê biêu cua dộc tinh dãi ngày thuốc thư gáy Theo Tồ chức Y tề giới, nhiều chi sổ huyết học nghiên cứu, đặc diêm dộc tính cua thuốc câng dành giá dược chinh xác lum [60] Vi nghiên cửu tiến hãnh đánh giá thòng số VC số lượng vã chất lượng cua dỏng tế bão máu ngoại vi: hồng cầu bạch cầu tiếu cầu Hồng cầu mats’ hemoglobin có vai trơ hơ hấp tể bào: vận chuycn oxy dền mõ vã thãi co2 qua phôi, số lượng hống cẩu, hãm lượng hemoglobin vã thê tích trung binh hổng cầu lả thịng sổ quan trọng dii đê đánh giá tỉnh trạng định hướng nguyên nhãn thiếu máu Hematocrit phần tràm thê tích khối huyết cầu ưong máu toàn phần, cỏ the giam đo tan máu màu tàng trường hợp mẩl nước Bạch cầu tham gia xào trình viêm, lả yểu tồ quan trụng hàng rào miễn dịch cua thê Bính thường, hai thành phan chiếm ty lệ cao bạch cầu da nhãn trung tính hạch cầu ỉympho Tiêu Cíìu tham gia vào nhiều bước chè dõng cấm máu có thê giảm -ÍM Qỉ ugc V Hl 54 sổ lượng rối loạn sinh máu túy tăng phá húy ngoại xi Theo kết qua nghiên cứu từ bang 3.1 đền 3.7 chuột uống DDHP liều 6.37 g/kg/ngày xà 19.11 g kg'ngày sau tuần tuần có cảc chì số: sổ lượng hồng cầu hãm lượng huyết sẳc tố hematocrit, thê tich trung binh hồng cầu sổ lượng bạch cầu còng thức bụch cầu sổ lượng tiều cầu dều khơng khác biệt cỏ ỷ nghía so với trước uóng thuốc so với nhõm chững cã thời điềm nghiên cứu Như DDHP lieu 6.37 g/kg/ngảy 19.11 g/kg/ngây 28 ngày không gày ảnh hưởng đến chức nàng tạo màu cua chuột 4.12.3 Anh hướng cùa DDHP đền chữc nâng gan mửc độ hoại tể bào gan mỏ bệnh học gan Gan nơi xay quã trinh chuyến hóa thai trữ thuôc dam nhiệm nhiều chức quan trọng Vi vậy, nghiên cửu đ(>c tinh cần thiết phai đánh giá hoạt dộng chức nàng mức độ tôn thương cùa gan thuốc gãy [60] Gan có vai ưị tơng hợp giảng hóa cholesterol, tống hợp albumin Giíim chức gan có thè gãy rối loạn chuyên hỏa lipid, giám albumin máu Ngồi albumin máu có thê giám hắp thu tàng trường hợp cư thê mắt nước (nơn tiêu chay) Chun hóa vã tiết mật lả chức nãng quan trọng cua gan đánh giá thông qua nồng độ bilirubin trực tiếp vã gián ticp máu Khi hống cầu bị san phấm giáng hóa cùa hemoglobin biliverdin dược chuyên thành bilirubin giãn tiếp Tại gan bilirubin giãn tiếp liên hợp với acid glucuronic dê trư thành bilirubin trực tiếp thai trừ khỏi gan qua dường mật Như bilirubin toàn phần (gom ca trực tiếp giản tiếp) sè tảng cỏ phá vỡ hồng cầu suy giám chức nâng gan tắc mật AST vã ALT cãc enzym cõ tế bào gan nống độ máu cua chúng Sc tảng cao cỏ tượng tế báo gan bị thoái hõa hoại tứ giãi enzym vào mâu Ngoài tế bào gan AST cịn dưực tim thấy hồng cẩu te bào «£ Hgc V Hl Hl -ÍM Qỉ ugc V 55 cư tim cư xương Hơn khác với ALT tập trung bão tương tể bào gan AST phần lớn cỏ mật ti thê nên SC táng chậm ALT Vi AL T đậc hiệu nhạy AST dành giã tổn thương tể bão gan Ngoài mức độ tồn thương gan dược kiếm chứng qua xét nghiệm mõ bệnh học dôi bị anh hướng trước cảc chi số VC enzym gan chức nâng gan Các tổn thương có the gặp bao gồm hĩnh anh thoái hõa hoại tứ tể bão thâm nhập tế bào viêm, xơ hóa Trong nghiên cứu trước dây anh hướng lèn gan chuột cưa sổ dược liệu chề phẩm DDHP dà dược bão cáo Bầc sài hỗ chứa saikosaponin gảy dục gan phụ thuộc liều vã thời gian, thông qua sưess oxy hõa rỗi loạn chuyên hỏa lipid [61] Tuy nhiên, rề cam tháo vã tam thất lại có tảc dụng bao vộ gan chuột trẽn mô hĩnh thực nghiệm [62] [63] Kết nghiên cửu từ bang 3.8 đen 3.12 cho thấy chuột ló trị có hoạt độ AST ALT nồng độ cholesterol toàn phằn nồng độ albumin, nồng độ bilimbin tồn phần khác biệt khơng có ý nghfa so với nhỏm chứng so sánh thời diêm uống thuốc vã sau uống thuốc tuần tuần Kct qua mô bệnh học cho thảy không cõ tổn thương ca VC dại thê vi the cua gan chuột cá lõ nghiên cứu Như DDHP liều 6.37 g/kg/ngãy vã 19.11 g kg ngày 28 ngày không gây huy hoại tế bào gan không anh hường dến chức nâng mõ bệnh học gan chuột ỉ.2.4 Anh hường cua DDHP đền chức nàng thận mổ bệnh học thận Thận có vai trị giữ thảng bàng nội mói: điều hịa nước diện giài thăng bảng kiềm toan, diều hòa huyết áp tham gia vào trinh tụo hồng cầu vã lọc chât dộc hại kliòi co thê Thận lã nơi lưu lượng dòng mâu di qua lứn nhât Cãc tế bão ống thận, cầu thận nit nhạy cam vã dề bị tổn thương hoi độc chắt Vi đánh giá chức nâng hình thái thận lã việc cần thiết nghiên cứu độc tính bán trường diễn Chúc nâng lọc cùa thận thường dược dành giá qua cãc chi sỗ ure creatinin -ÍM Qỉ ugc V Hl 56 huyết tương Ưrc sân phâm cua quã trinh phàn hủy protein từ thực phẩm, dược lọc qua cầu thận tái hấp thu phần ỡ ỗng thận nên phụ thuộc nhiều vào che độ ân Creatinin chất chuyển hóa cuổi trình hoạt động cúa blip tiết Crcatinin dược lọc cầu thận không dưực tái hấp thu ống thận Vi lý xét nghiệm creatinin mâu lả chi số dâng tin cậy him dê đảnh giã chức lọc cua cầu thận theo dỏi tiến triển cua chức thận Kct qua tuần nghiên nghiên cứu cứu chuột ó bang 23.13 lị uống cho DDHP thấy có saunồng tuần độ vã creatinin huyết tương khơng khác biệt có ý nghía so với nhóm chửng vả so với trước uống thuốc Hơn nửa hình anh đại the vả vi the thận chuột ca lõ nghiên cứu dcu không thấy tổn thương bệnh lý Như DDHP liều 6.37 g/kg/ngày 19.11 g/kg/ngảy 28 ngày không anh hưởng đến chức nâng mô bệnh học thận chuột Điều nảy lã phù họp với sổ nghiên cửu độc tính thận cua vị dược liệu DDHP đà dược cõng bỗ chí cịn có tam thất lã vị thuốc CĨ tãc dụng bao vệ chống xơ hóa kè thận, bao vệ thận trẽn thực nghiệm [63] Từ kết qua nghiên cứu cỏ the dưa nhận định rang, viên nang cứng DDHP liều 6.37 g dược liệu/kg/ngày 19.11 g dược liệu kg'ngáy uổng liên tục 28 ngày khơng gây dộc tính bân trưởng diễn chuột cống trâng: không làm anh hương đen tinh ưạng chung, càn nặng, chi sỗ đánh giá chức cùa quan tạo mảu chức cầu trúc gan thận 4.2 Đánh giá tác dụng báo vệ cua DDHP mỏ hình gãy LDDTT cysteamỉn chuột cống trắng LDDTT bệnh thưởng gặp cộng đồng Theo nghiên cứu tnrớc ti lệ lưu hành bệnh dân số thể giới nói chung vào khoang 5-10% [7], Hiện ti lệ lưu hãnh măc cỏ giám, dậc biệt nước phát triên việc phát hiộn diều trị HP thay dôi nhận thức VC vần đề sứ dụng NSAID Cảc thuốc y học đại dcm lại hiệu quà diều trị bệnh tốt song vần côn tì lệ bệnh nhân tái phát vã chill tác dụng khơng mong muốn cua thuốc Do dó xu hướng phố biến Việt Nam nhiều nước trẽn giới lã sư dụng thuốc cỏ nguồn gốc từ dược liệu với nhùng ưu diêm «£ Hgc V Hl Hl -ÍM Qỉ ugc V 57 nguồn dược liệu sần cỏ phong phú it tác dụng phụ Viên nang DDHP chế phẩm gồm vị dược liộu dã sư dựng từ lâu dân gian với tác dụng bao vệ niêm mạc d«ạ dãy tã tĩãng Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu tác dụng điều trị LDDTT kết hvp thành phần củng chế phẩm Trên sờ dó nhăm cung cấp bàng chứng khoa học tảc dụng cúa thuồc dỏng y phòng diều trị LDDTT chúng tòi tiến hãnh đánh giá tác dụng báo vệ dày tá trâng cua chế phâm DDHP trẽn mô hinh gáy loét động vật thực nghiệm • Mị hình gãy LDDTT Trẽn giới có nhiều nìó hình thực nghiệm gảy LDDTT bang tác nhàn NS AID (indomethacin, aspirin), glucocorticoid, ethanol, acid acetic, cysteamin stress, phầu thuật thút môn vị [64] Các mô hỉnh xảy dựng sỡ chế bệnh sinh cua bệnh: táng yếu tổ gáy loét giam yếu tồ báo vệ niêm mạc nghiên cứu dùng cysteanán gày mỏ hĩnh vi dề thực vả gảy lt rị thơng qua nhiều chế đirực sư dụng rộng rài nghiên cứu LDDTT Cystcamin HSCH NH (0-mercaptoethylanỉn) làdụng san phàm giáng hóa có cua cịng cystein thức hóa Cystcamin học dược nhờ sư kết dụng họp vói pantothenat thê dêmất tạo (vitamin tìiành co-enzym B5) adenosin Ayếu (CoA) ưiphosphat tri bệnh cystinosis, [62] Trẽn cystin lãm sàng, niệu cystcamin Các nghiên dược cứu dùng ttẻn dế chuột điều dã niêm chi rằng, dày cysteamin tá trâng, lãm táng giam nồng nồng độ độ gastrin cua somatostatin huyết tương sau uổng gây tàng dạt tict nồng acid độ cao dịch vị tã [63] trang [64] làm giam Cysteamin san xuất tả tráng, chất nhầy dần dền kiềm tinh giam từ đáp tuyến ứng trung Brunner hòa với tảng acid nhu cua động dịch Ngoài tã trâng cystcamin (chắt nhầy, lãm dịch tâng mật sinh dịch tụy) gốc [65] oxy hóa [69] giam (chất có loại tãc bo co gốc mạch), tự tâng cán bang biêu giừa endothelin-1 tổ sinh mạch (VEGF pFGF, PDGF) vã 2CH 2mạc 2, ire chc sính mạch (endostatin, angiostatin), gây tòn thương chậm lien Ỡ niêm mạc dãy tả trảng [70] hiệu q gáy mơ hình lt cùa cysteamin, kết q nghiên cửu cùa đề tãi tương đồng với cãc nghiên cửu khác giới Việt Nam Cysteanin 400mg/kg uổng lần sau 24 gảy LDDTT chuột rở rẹt so với lò chủng sinh học với 100% chuột bị lt Tơn thương bao gồm trợt nịng, sung huyết, ò viêm loét thâm nhiêm nhiều te bào lympho đáy nhiêu te bào thối hóa hoại tữ có ổ loét sâu het niêm mạc vã tuyền đen sát lớp viêm • Chứng (lương dưực sữ dụng nghiên cứu Với che gây bệnh cúa cystcaniin trên, chứng dương sư dụng mị hình thuốc làm giam tiết acid dịch vị thuốc H2RA hay PPI Tuy nhiên, cãc PPI thị trường thường bão chế dạng viên nai^ -ÍM Qỉ ugc V Hl 58 viên nén bao tan ruột đe tránh bị phả huy acid dịch vị không thê mơ hay nghiền viên thuốc cho chuột uống qua kim dầu tủ Vì nghiên cửu dũng thuốc H2RA làm chứng dương đê so sánh hiệu qua cua che phâm nghiên cứu Ket qua cho thay, chuột uống Ranitidin 50 mg/kg/ngày ngày lãm giam mức độ loét rỏ rệt so với chuột lô mơ hình sơ chuột lt lỏ (p < 0.05) vã Sơ ỗ loét trung binh, chi sỗ loét trung bình (p< 0,001) • hiệu q cua cliề phẩm ngliỉẽn cứu Theo kết qua nghiên cửu mậc dù 100% chuột uống DDHP đcti xuất hình ảnh LDDTT nhiên sổ ô loét chi sổ loét giám rồ rệt so với lỏ mõ hình với p < 0.01 lô uống DDHP liều thấp p < 0,05 lỏ uống DDHP liều cao Không cõ khác biệt klũ so sảnh giả trị số ỏ loét trung binh chi số loét hai lô DDHP liều thấp vá liều cao vã không cô khác biệt với lõ uống ranitidin Hĩnh anh giãi phẫu bệnh câng mửc dộ tổn thương nhẹ lô dược điều trị bàng ranitidin DDHP với nhiều xiing niêm mạc binh thường it ổ loét sâu sát niêm, lì thâm nhiễm lympho bào vã cãc tề bào thối hóa hoại tứ Kct qua nghiên cửu nảy phù hợp với nghiên cứu trước tác dụng bao vệ dãy tá tràng da chế cua loại dược liệu DDHP: - ô tặc cốt (mai mực) với thành phần chu yếu calci caibonat vốn dược coi lả chất trung hòa acid tự nhiên côn chứa chitin cõ tác dụng làm lành vet thương tàng yếu tố sinh mạch (10) [68] Lifeng Qui vã cs (2020) nghiên cứu trẽn mỏ hình gảy loét dày bàng indomethacin cho thấy, ò tặc cốt liều 3g/kg gây tàng tiết EGF PGE2 kích hoạt yếu tố chống oxy hóa tốt omcprazol có tác dụng bao vệ niêm mạc dãy chuột [72] - Licorice (dịch chiết rc cam thao) cõ tác dụng bao vệ niêm mạc dãy cách chống oxy hóa tâng nồng độ PG dường tiêu hóa táng tiết «£ Hgc V Hl Hl -ÍM Qỉ ugc V 59 chất nhầy, chữa catbenoxolon lãm giám tiết gastrin, acid [73], Ngoài licorice chứa flavonoid cõ tãc dụng ức chc HP ưong thi nghiệm in vitro, kè ca với vi khuẩn khảng clarithromycin amoxicillin [74] - Tam thất chửa 20 (S>ginsenoside Rg3 cõ ĩàc dụng bao vệ dày chuột trẽn mỏ hĩnh gảy loét bang acid acetic, ethanol, stress thõng qua chể: chống oxy hóa tâng lưu lượng dỏng máu tưới niêm mac (do giám nồng độ endothelin-1 tâng nồng độ oxid niưic) tảng phục hồi tãi tạo tế bão bi cu mô (do tâng nồng độ EGF EGFR) [75] - Bupleuran sài hồ cỏ tảc dụng phòng ngừa diều ữị loét dãy chuột cảc mõ hinh gây loét acid acetic, ethanol, stress, thất môn vị lảm giam tiết acid pepsinogen, tạo thảnh kíp áo polysaccharide bao vệ niêm mạc dọn dẹp gốc tự Tác dụng nảy không phụ thuộc lieu xay cá đường uống, tiêm da tiêm mãng bụng [76] - Dịch chiết methanol rẻ bạch thược liều 10 mg/kg có tãc dựng bao vệ dãy chuột dược gảy loét bang HCl-ethanol (88.8% so với tác dựng bao vệ cua chửng dương Sucralfat 75.9%) Cơ chế dưực cho lã bạch thưục chứa catechin vả paitagalloyglucose cỏ tảc dụng loại bờ gốc tự paeoniílorin tạo protein sốc nhiệt Hsp70 lã yểu tố nội sinh bao vệ tế bão khõi stress từ môi trưởng [77] [78] Ngồi pentagalloyglucose cịn ức che bơm H+/K+-ATPase làm giam tiết acid dịch vị [11], - Nghiên cứu cua Đào Thị Vui cộng năm 2007 chi ràng thành phần coumarin, flavonoid, chất nhày có ưong sảm bổ chỉnh có tảc dụng bao vệ dãy hổi phục loét dãy ức chế vi khuẩn HP trẽn in vitro (giâm 76.7% vả 82.5% lượng vi khuân HP sau 24 giở tiếp xúc), giam co thắt trơn, trung hịa acid, kích thích tiết nhẩy [79] Nhưhình viên nang với cứng sựDDHP phổi dà hợp thề cua cácớ tác loại dụng dược chống liệu LDDTT ke trên, mó gây loét bang cysteamin chuột cổng trắng -ÍM Qỉ ugc V Hl KÉT LUẬN Qua kết nghiên cứu độc tinh cấp độc lính bân trưởng điền nghiên cúu tác dụng chống loét dây - tã trâng cua viên nang cứng DDHP mõ hình thục nghiệm, chúng tỏi xin đưa số kết luận sau: Dộc tính ■ Dộc tính cấp Chế phẩm DDHP khơng biêu độc tinh cắp chuột trầng liều cao có thè cho uống 663.75 g dược liệu/kg (liều gấp 52.1 lần liều tương dương dự kiên lâm sàng) * Dộc tính bán trường điền Che phàm DDHP khơng gây độc tính bán trường diễn trài chuột cổng trang cho chuột uống lieu 6.37 g'kg ngày (lieu tương đương dự kiên lâm sàng) liều 19.11 g/kg/ngày (gấp lần liều lương đương dự kiến lảm sàng) tuần liẻn tục: khơng làm anh hương đến tình ưạng chung, the trọng, cảc chi số đảnh giá chức tạo máu chức nâng gan mức độ huy hoại tế bào gan chức nàng lọc cua thận, không anh hường đen hinh anh giai phẫu bệnh gan vã thận Tác dụng chống loét dày - tá tràng Che phâm DDHP liều 6.37 g'kg.'ngảy 19.11 g/kg/ngảy uống ngày cỏ kha nàng chống loét dãy tà tràng chuột cổng trấng trèn mỏ hình gáy loét bang cysteamin thê qua việc làm giam tý lệ loét, sổ loét, chi số loét mức độ tốn thương mõ bệnh học Tác dụng cua mức lieu tương dương 61 KI ÉN NGHỊ Từ kết nghiên cứu độc tinh vả tác dụng cua viên nang cứng DDHP trãi thực nghiệm chúng lõi đề xuất số kiến nghị sau: Làm rò che tác dụng cua chế phàm thông qua đánh giá chi số như: nống dộ acid pH dịch vị nồng độ prostaglandin I11Ị chi sổ chống oxy hóa máu (SOD MDA) ■ Tien hành nghiên cửu lâm sàng đê khảng tính an sơ toàn khoa vã hiệu học đê phát cua chế triến phẩm thành thuốc người bệnh,định từ dó cớ TÀI LIỆU THAM KHÁO Azhari H Underwood F King J et al (2018) The global incidence of peptic ulcer disease and its complications at the turn of the 21st century: A systematic renew: 1199 Off J Am Coll Gastroenterol ACG 113.684 Leow A.H.-R Lim Y.-Y Liew W.-C et al (2016) Time trends in upper gastrointestinal diseases and Helicobacter pylori infection in a multiracial Asian population a 20-year experience over three time periods Aliment Pharmacol Ther 43(7) 831 837 Tung L Nguyen (2010) Helicobacter pylori infection and gastroduodenal diseases in Vietnam: a cross-sectional, hospital-based study BMC Gastroenterology 114(10) 17 Quach D.T Hiyama T Shimanioto F et al (2014) Value of a new sticktype rapid urine test for the diagnosis of Helicobacter pylori infection in the Vietnamese population World J Gastroenterol 20(17) 5087-5091 Lanas A Garda-Rodnguez L.A Polo-Tomás M et al (2011) The changing face of hospitalisation due to gastrointestinal bleeding and perforation Aliment Pharmacol Ther, 33(5) 585 591 Mahni H Kautiainen H Virta L.J et al (2014) Incidence and complications of peptic ulcer disease requiring hospitalisation have markedly decreased in Finland Aliment Pharmacol Titer 39(5) 496 506 Lanas A and Chan F.K.L (2017) Peptic ulcer disease Lancet LondEngl 390(10094) 613 624 Bi W.-P Man H.-B and Man M.-Q (2014) Efficacy and safety of herbal medicines in treating gastric ulcer: A review World J -ÍM Qỉ Hgc V Hl 62 Gastroenterol WJG 20(45) 17020 17028 Mamedov N.A and Egamberdieva D (2019) Phytochemical Constituents and Pharmacological Effects of Licorice: A Review Plant and Human Health Volume 3: Pharmacology and Therapeutic Uses Springer International Publishing Cham 21 10 Mostoufi A Bavarsad N Aiyanfar s et al (2018) New Natural Marine Antacid Drug from Cuttlebone Pharm Sei 24(3) 227-234 11 EMA Committee on Heibal Medicinal Products (HMPC) (2017) Assessment report on Paeonia lactiflora Pallas, radix (Paeoniae radix alba) 12 H Y (1995) Structure and pharmacological activity of pectic polysaccharides from the loots of Bupleurum falcatum L Nihon Yakurtgaku Zasshi Folia PhannacolJpn, 106(3) 229 237 13 Trịnh Binh (2015) Mỏ-Phỏi phần Mó học, Nhã xuầt ban y học Hà Nội 14 Bộ môn Sinh lý Trưởng Đại học Y Hà Nội (2016) Sính lý học Nhà xuất ban y học Há Nội 15 Dan L Longo and Anthony s Fauci (2010) HARRISON'S Gastroenterology and Hepatology-, The McGraw-Hill New York 16 Jerrold R Turner (2014) The gastrointestinal tract Robbins and Con an pathologic basis of disease 9th Elsevier Saunders Canada 749 819 17 Feldman M Richardson C.T Lam S.K et al (1988) Comparison of gastric acid secretion rates and rerum pepsinogen I and II concentrations in occidental and oriental duodenal ulcer patients Gastroenterology 95(3), 630 635 18 Richardson C.T (1990) Role of aggressive factors in the pathogenesis of peptic ulcer disease Scand J Gastroenterol Suppl 174 37-43 19.Osefo N., Ito T and Jensen R.T (2009) Gastric acid hypersecretory states: Recent insights and advances Cwr Gasưoenterol Rep, 11(6) 433- 441 20 Sonnenberg A Turner K.O and Genta R.M (2020) Low Prevalence of Helicobacter pylori-Positive Peptic Ulcers in Private Outpatient Endoscopy Centers in the United States Am J Gastroenterol 115(2) 244 250 21 Zhou Y Boudreau D.M and Freedman A.N (2014) Trends in the use of aspirin and nonsteroidal anti-inflammatory dngs in the general U.S population Pharmacoeptdemiol Drug Saf 23(1) 43-50 22 Mark Feldman (2021) NSAIDs (including aspirin): Pathogenesis of gastroduodenal toxicity UpToDate -ÍM Qỉ Hgc V Hl 63 23 Castellsague J Riera-Guardia N Calingaert B et al (2012) Individual NS AIDS and upper gasưointestinal complications: a systematic review and meta-analysis of observational studies (tire SOS project) Drug Saf, 35(12) 1127-1146 24.Sesler J.M (2007) Stress-related mucosal disease in the intensive care unit: an update on prophylaxis AACN Adv Crit Care 18(2) 119 126 Levenstein s Psychological Sưess Rosenstock Increases s Jacobsen Risk for R Peptic et al Ulcer (2014) Regardless of Helicobacter pylori Infection or Use of Nonsteroidal Anti-inflammatory Gastroenterol Hepatol 13(3) 498 506 Drugs Clin 25 Deding u Ejlskov L., Grabas M.PJK., et al (2016) Perceived stress as a risk factor for peptic ulcers: a register-based cohort study BMC Gastroenterol, 16(140), 12 26 Matty p Biswas K Roy s et al (2003) Smoking and the pathogenesis of gastroduodenal ulcer - recent mechanistic update Mol Cell Biochem 253(1-2) 329 33 s 27 Yandrapu H and Sarosiek J (2015) Protective Factors of the Gastric and Duodenal Mucosa: An Overview Cto r Gastroenterol Rep 17(6) 24 31 28 Rees W.D.W and Shorrock CJ (1988) “Aggressive” and "Protective” Factors in the Pathogenesis of Peptic Ulcer Disease Prostaglandins and Leukotrienes in Gastrointestinal Diseases Springer Berlin 59-Ỗ4 29 Choi S.-H Kim D.-M Lee J., et al (2017) Endoscopic characteristics of infection-associated peptic ulcers Helicobacter 22(6) el2427 30 Kim Y Yokoyama s Watari J., et al (2012) Endoscopic and clinical features of gastric ulcers in Japanese patients with or without Helicobacter pylori infection who were using NSAIDs or low-dose aspirin J Gastroenterol, 47(8) 904 -911 31 Xia H.H., Wong B.C Wong K.W., et al (2001) Clinical and endoscopic characteristics of non-Helicobacter pylori non-NSAID duodenal ulcers: a long-term prospective study Aliment Pharmacol Titer, 15(12), 1875 1882 32 Wang Y.-K Kuo F.-C Liu C.-J., et al (2015) Diagnosis of Helicobacter pylori infection: Current options and developments World J Gastroenterol ff’JG 21 (40) 11221 11235 33 Bertram G Katzung Susan B Masters, and Anthony J Trevor (2012) Basic & Clinical Pharmacology, McGraw Hill New York 34 John w Jacobs and Joel E Richter (2016) Role of H2 RA and proton pump inhibitor therapy in ưeating reflux disease Diagnosis and treatment of gastroesophageal reflux disease, springer Cham, Switzerland 71 92 35 Khoa Tiêu hóa Bệnh viện Bạch Mai (2017) Hướng dản điều Trị số -ÍM Qỉ Hgc V Hl 64 bệnh lý tiêu hóa thưởng gặp 36 Dỏ Tất Lợi (2004) Nhừng thuốc vị thuốc Việt Nam Nhã xuất ban y hục Hà Nội, tr 65, 75, 175, 289 85 633,813,863 3s World Health Organization (1999) WHO monographs on selected medicinal plants Geneva 67 183 195 39 Lee Y.-C., Cheng C.-W., Lee H.-J.j el al (2017) Apple Polyphenol Suppresses Indomethacin-Induced Gastric Damage in Experimental Animals by Lowering Oxidative Stress Status and Modulating the MAPK Signaling Pathway J Med Food 20(11) 1113 1120 40 Đào Thị Vui Nguyen Trọng Thông, and Nguyền Thượng Dong (2007) Tảc dụng biio vẹ hôi phục lt dày trẽn mị hình gảy lt bảng indomethain cua rề cu Sàm báo Thanh Hóa (Hibiscus sagittifolius var septentrionalis Gag.) Dược Học 371 35 37 41.Sebai H Jabri M.-A Souli A et al (2014) Protective effect of Artemisia campesưis extract against aspirin-induced gastric lesions and oxidative stress in rat RSCAdv 4(91) 49831-49S41 42 Bak>gun M.E., Besong E.E., Obimma J.N et al Gastroprotective Effect of Ethanolic Extract of Vigna Subterranea in Ethanol-induced Gastric Mucosal Ulceration in Rats Indian J Physiol Pharmacol 62(3) 347-358 43 Mitra p Ghosh T., and Mitra P.K (2013) Anti-peptic Ulcer Activity of TLC Separated Fractions of Root Extract of Astilbe rivularis in rats EurJ Biolechnol Biosci 1(1) 47-52 44 Phạtn Bã Tuyến Nguyền Trọng Thông Dỗ Thị Phương cs (2012) Nghiên cứu tãc dụng kháng Helicobacter Pylori chòng loét tá tràng cùa HPmax Tạp Chí Nghiên Cửu YHọc 3(80) 109 115 45 s s., Muthuraman A-, N.s G et al (2010) Effect of Citrus kama Peel Extract on Stress Induced Peptic Ulcer in Rat J Biol Sci, 10(3), 231 236 46 Takem L (2014) Anti-secretory, gastroprotective and anti-ulcer activities of aqueous extract of Phragmanthera capitata s Balle in rats Int J Phann Sci Res, 5, 3560-3565 47 Cục Khoa học Cóng nghệ vã Dào tạo - Bộ Y tế (2015) Hướng dần thư nghiệm tiên lảm sàng vã lảm sàng thuốc dỏng y thuốc từ dược liệu 48 World Health Organization (2013) Working group on the safety’ and efficacy of herbal medicine 49.Szelenyi I and Thiemer K (1978) Distention ulcer as a model for testing of drugs for ulcerogenic side effects Arch Toxicol 41(1) 99-105 50 Zhang Aili, Hu Yutao, Pan Weidong, et al (2014) Intra-gastric floating -ÍM Qỉ Hgc V Hl 65 type cuttlebone sustained release tablet for treating gastric ulcer and preparation method thereof CN103479674A 51 Đào Thị Vui Nguyền Trụng Thông Nguyền Thượng Dong vả cs (2006) Nghiên cứu độc tinh cấp anh hường cùa rề cu sâm bão (Radix Hibisci sagittifolii) dôi với thè trạng hệ thông tạo máu động vật thực nghiệm Dược Hục 360 36-39 52 Thanabhom s Jaijoy K Thamaree s et al (2006) Acute and subacute toxicity study of the ethanol extract from Lonicera japonica Thunb J Ethnopharmacol, 107(3) 370-373 53 Gupta M- Sasmal S.K Karmakar N et aL (2016) Experimental Evaluation of Antioxidant Action of Aqueous Extract of Glycyrrhiza glabra Linn Roots in Potassium Dichromate Induced Oxidative Stress by Assessment of Reactive Oxygen Species Levels 8(8) 54 Kim K.-H Gam C.-O Choi S.-H et al (2012) Mouse Single Oral Dose Toxicity Test of Bupleuri Radix Aqueous Exưacts Toxicol Res 28(1) 11 IS 55 Li X., Li X Huang N et al (2018) A comprehensive review and perspectives on pharmacology and toxicology of saikosaponins Phyto medicine 50 73 s 56 Ancưceanu R Zbarcea C.E Cojocaiu-Toma M et al (2016) Nonclinical toxicity and phytotoxicity of herbal extracts Farmacia, 64(5) 763-769 57 Yuqing Zhao (2015) Panax notoginseng (Bulk.) F.H Chen 4E094E03 (Sanqi Notoginseng) Dietary Chinese Herbs: Chemisưy, Pharmacology and Clinical Evidence Springer Wien 185-193 58 UNECE (United Nations Economic Commission for Europe) (2013) Part Health Hazards Globally Harmonized System for the Classification and Labeling of Chemicals (GHS) Geneva 59.OECD (2000) Guidance Document on the Recognition Assessment and Use of Clinical Signs as Human Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation OECD Series on Testing and Assessment Palis OECD Publishing 60 World Health Organization General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of Traditional Medicine Li X- hepatotoxicity Li X Lu inJ., mice et al.lipid (2017) metabolism Saikosaponins induced Altem and oxidative Med, 17(1) stress: 219 avia proteomic study BMCdvsregulation Complement -ÍM Qỉ Hgc V Hl 61 Jung J.-C Lee Y.-H Kim S.H., et al (2016) Hepatoprotective effect of licorice, the root of Glycyrrhiza uralensis Fischer, in alcohol-induced fatty liver disease BMC Complement Aỉtern Med 16: 19 62 Wang T Guo R Zhou G., et aL (2016) Traditional uses, botany, phytochemistry, phaimacology and toxicology of Panax notoginseng (Burk.) F.H Chen: A review JEthnopharmacol 188 234 258 63 Adinorteỵ M.B., Ansah c Galyuon I., et aL (2013) In Vivo Models Used for Evaluation of Potential Antigastroduodenal Ulcer Agents Ulcers 2013 e796405 64 Miller S.L and Schlesinger G (1993) Prebiotic syntheses of vitamin coenzymes: I Cysteamine and 2-mercaptoethanesulfonic acid (coenzyme M) J Mol Evol 36(4) 302-307 65 Szabo s and Reichlin s (1981) Somatostatin in rat tissues is depleted by cysteamine administration Endocrinology 109(6) 2255 2257 67.Shimoda H Takeno s Noguchi T et al (1996) Effect of cysteamine on gastric nene fibers containing gastrin-releasing peptide in the rat J Gastroenterol 31(6) 768 776 68 Kirkegaard p., Poulsen S.S Haise c et al (1981) The effect of cysteamine on the Brunner gland secretion in the rat Scand J Gastroenterol 16(1), 93 96 69 Szabo s Pihan G., Gallagher G.T et al (1984) Role of local secretory and motility changes in the pathogenesis of experimental duodenal ulcer Sc and J Gastroenterol Suppl 92 106 111 70 Szabo s Deng X Khomenko T., et al (2007) New Molecular Mechanisms of Duodenal Ulceration Ann N Y Acad Sci 1113(1) 238 255 71 Lee K.M., Shim H Lee G.S., et al (2013) Chitin from the Extract of Cuttlebone Induces Acute Inflammation and Enhances MMP1 Expression Biomol Ther 21(3) 246-250 72 QÌU L Yao L., Fang Y., et al (2020) Effect of Cuttlebone on Healing of Indomethacin-Induced Acute Gasưic Mucosal Lesions in Rats EvidBased Complement Ahern Med ECAM 2020 73 Mamedov N.A and Egamberdieva D (2019) Phytochemical Constituents and Pharmacological Effects of Licorice: A Review Plant and Human Health Volume 3: Pharmacology and Therapeutic Uses, springer International Publishing, Cham 21 74 Fukai T Marumo A., Kaitou K et aL (2002) Anti-Helicobacter pylori flavonoids from licorice extract Life Sei 71(12) 1449 1463 -ÍM CỊỈ ugc -c -ÍM CỊỈ ugc VV HlHl 75 Zhang K-, Liu Y Wang c., et al (2019) Evaluation of the gastroprotective effects of 20 (S)-ginsenoside Rg3 on gastric ulcer models in mice J Ginseng Res 43(4) 550-561 76 Matsumoto T Sun X Hanawa T et al (2002) Effect of tile antiulcer polysaccharide fraction from Bupleurum falcatum L on the healing of gastric ulcer induced by acetic add in rats Phyiorher Res PTR 16 91 77 Bae J.-Y., Kim C.Y Kim H.J et al (2014) Differetres in the Chemical Profiles and Biological Activities of Paeonia lactiflora and Paeonia obovata J Med Food, 18(2), 224-232 7S.Asai M Kawasliima D Katagiri K et al (2011) Protective effect of a molecular chaperone inducer, paeoniflorin, on the HC1- and ethanoltriggered gastric mucosal injury Life Sci, 88(7) 350 357 79 Đảo Thị Vui (2007) Nghiên ciiu thánh phẩn hoá hục vã tảc động dược lý theo hướng diêu trị loét dày cua rễ cu sảm báo (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr họ Bòng (Malvaceae) Viện Được liệu Hà Nội -c -ÍM CỊỈ ugc V Hl ... “Dủnh giá độc tinh tác dụng chổng loét dọ dày tá tràng cùa chề phẩm Dụ dày HP Gia Phát thực nghiệm " dược tiến hãnh với hai miK? tiêu: Xác dịnh dộc tinh cắp dộc tính bán trường diễn cùa DDHP dộng... biêu dộc tính cấp dộc tinh trưởng diễn có tảc dụng chống LDDTT trcn động vật thực nghiệm Tù khóa: Dạ dày HP Gia Phát, loét dãy - tá tràng, CVS tea min, dộng vật thực nghiệm ĐẠT VÁN ĐÈ Loét dày tà... dộng vật thực nghỉệm Dánh mơ giáhình tác gáy dụnglt chồng loét dụ dày -? ?tá tràng cùatrang DDHP bang cysteamin chuột cổng CHƯƠNG TÒNG QUAN 1.1 Loét dày - tá tràng theo quan diêm y học dại 1.1.1