Vi khuẩn E.coli tác hại và lợi ích

Vi khuẩn E.coli tác hại và lợi ích, Vi khuẩn E.coli tác hại và lợi ích, Vi khuẩn E.coli tác hại và lợi ích, Vi khuẩn E.coli tác hại và lợi ích, Vi khuẩn E.coli tác hại và lợi ích

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM TIỂU LUẬN CÁ NHÂN VI KHUẨN E.COLI: NHỮNG TÁC HẠI VÀ LỢI ÍCH Giáo viên hướng dẫn Sinh viên thực Ngành Khóa Lớp : Vương Thị Việt Hoa : : Chế biến thực phẩm : 2006 – 2010 : DH06BQ - 2008 - Mục lục LỜI GIỚI THIỆU PHẦN I: Mở đầu 1.1 Lịch sử phát vi khuẩn E.coli .4 1.2 Đặc điểm tế bào đặc điểm sinh hóa 1.3 Phân loại PHẦN II: Tổng quan tài liệu 2.1 Cấu tạo vi khuẩn E.coli .5 2.2 Những loại E.coli gây bệnh 12 PHẦN III: Phương pháp kiểm tra E.coli thực phẩm 3.1 Kỹ thuật màng petri 13 3.2 Kit Reveal - Kiểm tra E.coli O157:H7 13 3.3 Phương pháp sử dụng môi trường chuyên biệt chọn lọc để ni cấy E.coli sau pha lỗng .13 PHẦN IV: Kết quả, thào luận 4.1 Tác hại E.coli 14 4.2 Những ứng dụng E.coli 14 PHẦN V: Kết luận 5.1 Kết luận 16 5.2 Đề nghị 16 Tài liệu tham khảo 17 Lời giới thiệu Hiện nay, người dân nước ta quan tâm đến tình hình an tồn vệ sinh thực phẩm gần vụ việc vi phạm quy định vệ sinh an toàn thực phẩm diễn tràn lan nơi, lĩnh vực Dư luận hoang mang nghe báo đài đưa tin nước tương có độc tố 3-MCPD, sản phẩm sữa nhập từ Trung Quốc chứa chất melamin vượt tiêu chuẩn cho phép, dịch tả hoành hành nhiều nơi phát phấy khuẩn tả mắm tôm, vụ ngộ độc thực phẩm tập thể xảy khắp tỉnh, thành… gần vụ sản phẩm sữa tươi Vinamilk bị phát có vi khuẩn E.coli Việc phát E.coli sữa tươi Vinamilk khiến nhiều người lo sợ chí khơng dám uống sữa Thực E.coli tên gọi nhóm vi khuẩn (chứ khơng phải vi khuẩn nhất) Vi khuẩn E coli phổ biến có mặt môi trường hữu Ngay nước có kinh tế tiên tiến Mĩ Âu châu, người ta tìm thấy E coli số thực phẩm tất vi khuẩn E.coli gây bệnh cho người, phần lớn E.coli không gây ảnh hưởng đáng kể đến sức khỏe mà có số E.coli gây bệnh Tuy nhiên ngồi tác hại gây bệnh E.coli cịn có lợi ích khơng nhỏ nhà khoa học việc sử dụng E.coli để sản xuất insuline điều trị bệnh tiểu đường hay tổng hợp dược chất Artemisinin từ E.coli để chống bệnh sốt rét Bài báo cáo giúp người đọc hiểu rõ tác hại lợi ích vi khuẩn E.coli người Người viết xin chân thành cám ơn cô Vương Thị Việt Hoa hướng dẫn giúp đỡ tận tình để báo cáo hồn thành Do trình độ người viết cịn hạn chế nên trình thực báo cáo chắn khơng thể tránh khỏi thiếu sót Người báo cáo mong nhận ý kiến đóng góp người đọc để viết hoàn thiện TP Hồ Chí Minh tháng 11 năm 2008 Người viết báo cáo PHẦN I: Mở đầu 1.1 Lịch sử phát vi khuẩn E.coli: Escherichia coli (thường viết tắt E.coli) lồi vi khuẩn ký sinh đường ruột động vật máu nóng (bao gồm chim động vật có vú) Vi khuẩn cần thiết q trình tiêu hóa thức ăn thành phần khuẩn lạc ruột Sự có mặt E.coli nước ngầm thị thường gặp cho ô nhiễm phân E.coli thuộc họ vi khuẩn Enterobacteriaceae thường sử dụng làm sinh vật mô hình cho nghiên cứu vi khuẩn Nguồn gốc tên gọi: năm 1885, Munchen, bác sĩ nhi khoa tên Theodor Escherich quan tâm đến phát quan trọng Louis Pasteur Robert Kock vi khuẩn Cùng với việc nghiên cứu bệnh tiêu chảy, Escherich tỏ rõ mối lưu ý tới vi sinh vật đường ruột trẻ em qua nhiều thí nghiệm lâm sàng Vi khuẩn Escherich phát từ tã lót trẻ em cơng bố với tên gọi Bacterium coli commune Chỉ năm sau vi khuẩn giới chuyên môn đổi tên thành Escherich nhằm tri ân người có cơng khám phá Năm 1895, thiên hạ lại gọi tên Bacillus coli Năm 1896, gọi thành Bacterium coli Sau nhiều kiểu gọi, đến năm 1991, vi khuẩn định danh thống toàn cầu Escherichia coli 1.2 Đặc điểm tế bào đặc điểm sinh hóa: Escherichia coli vi khuẩn chủ yếu nhóm Coliforms, chúng có phân vi khuẩn thị gây bệnh – thị nguy có vi khuẩn gây bệnh đường ruột Đặc điểm tế bào: trực khuẩn Gram (–) khơng bào tử, có phản ứng oxidase âm, lên men dường lactose dương, phát triển 440C Đặc điểm sinh hóa: sinh nhiều axid mơi trường glucoza, sinh indol (phản ứng ind +), sinh axit (phản ứng MR +), không sinh axeton (phản ứng VP –), sản sinh CO2 H2 theo tỉ lệ 1:1, sử dụng xitrat nguồn cacbon Khả gây bệnh tiêu chảy sinh nội độc tố Hình 1:Vi khuẩn E.coli chụp kính hiển vi 1.3 Phân lọai E.coli: 1.2.1 Phân loại khoa học: Vực (domain): Ngành (phylum): Lớp (class): Bộ (ordo): Họ (familia): Chi (genus): Loài (species): Bacteria Proteobacteria Gamma Proteobacteria Enterobacteriales Enterobacteriaceae Escherichia E coli Bảng 1: Phân loại khoa học vi khuẩn E.coli 1.2.2 Phân loại theo nhóm gây bệnh: gồm nhóm EHEC (Enterro Haemorhagi E.coli): cịn gọi E.coli O157:H7, tác nhân gây bệnh đường tiêu hóa nhiêm trọng vi khuẩn sinh độc tố, gây viêm ruột gây xuất huyết, đau bụng EPEC (Enterro pathogenic E.coli): gây bệnh (tiêu chảy) cho trẻ sơ sinh ETEC (Enterro toxingenic E.coli): sinh độc tố ruột EIEC (Enterro invasive E.coli): gây bệnh lị EAEC (Enterro adherent E.coli) PHẦN II: Tổng quan tài liệu 2.1 Cấu tạo vi khuẩn E.coli: Vi khuẩn E.coli dài khoảng 3µm gồm phần chính: màng tế bào, tế bào chất, thể nhân (DNA) tiên mao Hình 2: Cấu tạo vi khuẩn E.coli 2.1.1 Màng tế bào (cell membrane): Màng tế bào giúp trì hình thái vi khuẩn, hỗ trợ cho chuyển động tiên mao, giúp tế bào đề kháng với áp suất thẩm thấu, hỗ trợ trình phân cắt tế bào, cản trở xâm nhập số chất có phân tử lớn, liên quan đến tính kháng nguyên, tính gây bệnh, tính mẫn cảm với thực khuẩn thể Năm 1884, H.Christian Gram nghĩ phương pháp nhuộm phân biệt để phân chia vi khuẩn thành nhóm khác : vi khuẩn Gram dương (G +) vi khuẩn Gram âm (G –) Hiện phương pháp sử dụng rộng rãi đinh danh phân lọai vi sinh vật Theo phương pháp E.coli thuộc nhóm vi khuẩn Gram âm (G –) Hình 3: Cấu tạo đơn giản màng tế bào vi khuẩn (G –) Màng tế bào vi khuẩn Gram âm (G –) gồm thành phần: – 20% peptydoglycan (tỷ lệ % khối lượng khô thành tế bào), 20% lipid, hàm lượng protein cao khơng có axit teicoic Trong đó: - Peptydoglycan loại polyme xốp, bền vững, cấu tạo thành phần : N – Acetylglucosamine, N – Acetylmuramic acid Tetrapeptide chứa D – L – acid amin Hình 4: Cấu tạo peptydoglycan - Màng sinh chất: cấu tạo hai lớp phospholipide chiếm khoảng 20% khối lượng màng protein chiếm khoảng 80% khối lượng màng Có chức chủ yếu:  Khống chế qua lại chất dinh dưỡng, sản phẩm trao đổi chất  Duy trì áp suất thẩm thấu tế bào  Là nơi sinh tổng hợp thành phần thành tế bào polyme bao nhày, tổng hợp enzyme, protein chuỗi hô hấp  Là nơi tiến hành q trình phosphoryl hóa  Cung cấp lượng cho hoạt động tiên mao Hình 5: Sự xếp thành phần màng tế bào vi khuẩn (G –) 2.1.2 Tế bào chất (Cytoplasm): Là phần vật chất dạng keo nằm bên màng sinh chất, chứa tới 80% nước Trong tế bào chất có protein, acid nucleic, hydrat carbon, lipid, ion vô nhiều nhiều chất khác có khối lượng phân tử thấp Bào quan đáng lưu ý tế bào chất ribosom (ribosome) Ribosom nằm tự tế bào chất chiếm tới 70% trọng lượng khô tế bào chất Ribosom gồm tiểu phần (50S 30S), hai tiểu phần kết hợp với tạo thành ribosom 70S (ở sinh vật có nhân thật cấu tạo Ribosom 80S) Hình 6: Hai tiểu phần 50S 30S tạo thành Ribosom 70S vi khuẩn Trong tế bào chất vi khuẩn cịn gặp chất dự trữ hạt glycogen, hạt PHB (Poly – β – hydroxybutyrat), Cyanophycin, Phycocyanin, hạt dị nhiễm sắc (metachromatic body), giọt lưu huỳnh 2.1.3 Thể nhân (Nuclear body): Thể nhân vi khuẩn dạng nhân nguyên thuỷ, chưa có màng nhân nên khơng có hình dạng cố định, cịn gọi vùng nhân Khi nhuộm màu tế bào thuốc nhuộm Feulgen thấy thể nhân màu tím Đó nhiễm sắc thể (chromosome) dạng vòng chứa sợi DNA xoắn kép (ở xạ khuẩn Streptomyces gặp nhiễm sắc thể dạng thẳng) Nhiễm sắc thể vi khuẩn Escherichia coli dài tới 1mm, có khối lượng phân tử 3.109, chứa 4,6.106 cặp base nitơ Thể nhân phận chứa đựng thơng tin di truyền vi khuẩn Hình 7: Thể nhân tế bào vi khuẩn E.coli Trong tế bào nhiều vi khuẩn cịn gặp DNA ngồi NST Đó DNA xoắn kép có dạng vịng khép kín, có khả chép độc lập, chúng có tên Plasmid 2.1.4 Tiên mao (Flagellum): Tiên mao định khả phương thức di động vi khuẩn, nhiên tất vi khuẩn có tiên mao Tiên mao sợi lơng dài, kính hiển vi quang học thấy rõ nhuộm theo phương pháp riêng Dưới kính hiển vi điện tử thấy rõ cấu trúc sợi tiên mao Để xác định xem vi khuẩn có tiên mao hay khơng cịn có cách thử gián tiếp nhằm biết khả di động chúng Cấy que cấy nhọn đầu vào môi trường thạch đứng chứa 0.4% thạch (agar-agar), gọi môi trường thạch mềm Nếu thấy vết cấy lan nhanh xung quanh chứng tỏ vi khuẩn có tiên mao, có khả di động Hình 8: Tiên mao vi khuẩn E.coli Tiên mao gốc (basal body), gồm trụ nhỏ gắn với đĩa trịn (vi khuẩn G –) có dạng vịng nhẫn (ring), ký hiệu vòng L, P, S M Vịng L nằm ngồi cùng, tương ứng với lớp liposaccarid màng ngồi; vịng P tương ứng với lớp peptidoglycan, vịng S tương ứng với lớp khơng gian chu chất; vòng M nằm Vi khuẩn (G–) có vịng: vịng ngồi tương ứng với thành tế bào vòng tương ứng với màng sinh chất Xuyên vòng trụ nhỏ có đường kính nm Bao bọc tiên mao phần phía ngồi bao ngắn có hình móc (hook) Sợi tiên mao (filament) dài khoảng 10-20 mm có đường kính khoảng 13-20 nm Đường kính bao hình móc 17 nm Khoảng cách vịng S vòng M mm, vòng P vòng L nm, vòng P vịng S 12 nm Đường kính vịng 22 nm, đường kính lỗ vịng 10 nm Khoảng cách từ mặt ngồi vịng L đến mặt vòng M 27 nm Sợi tiên mao cấu tạo loại protein có tên flagellin, có trọng lượng phân tử 30 000 - 60 000 Một số vi khuẩn có bao lơng (sheath) bao bọc suốt chiều dài sợi, trường hợp chi Bdellovibrio hay vi khuẩn tả Vibrio cholera Hình 9: Cấu tạo sợi tiên mao vi khuẩn Các tiểu phần (subunit) flagellin tổng hợp từ hạt ribosom nằm gần màng sinh chấy tổng hợp nên qua lõi mà tạo dần thành sợi tiên mao Tiên mao vi khuẩn có loại khác tuỳ lồi : - Khơng có tiên mao (vơ mao, atrichia) - Có tiên mao mọc cực ( đơn mao, monotricha) - Có chùm tiên mao mọc cực ( chùm mao, lophotricha) - Có chùm tiên mao mọc cực ( song chùm mao, amphitricha) - Có nhiều tiên mao mọc khắp quanh tế bào (chu mao, peritricha) Kiểu xếp tiên mao liên quan đến hình thức di động vi khuẩn Tiên mao mọc cực giúp vi khuẩn di động theo kiểu tiến – lùi Chúng đảo ngược hướng cách đảo ngược hướng quay tiên mao Vi khuẩn chu mao di động theo hướng tiên mao chuyển động theo hướng ngược lại Khi tiên mao khơng tụ lại hướng vi khuẩn chuyển động theo kiểu nhào lộn Tốc độ di chuyển vi khuẩn có tiên mao thường vào khoảng 20 – 80 µm/giây, nghĩa giây vi khuẩn chuyển động khoảng cách lớn gấp 20 – 80 lần so với chiều dài thể chúng Các chi vi khuẩn thường có tiên mao Vibrio, Spirillum, Pseudomonas, Escherichia, Shigella, Salmonella, Proteus Ở chi Clostridium, Bacterium, Bacillus, có lồi có tiên mao có lồi khơng Ở cầu khuẩn có chi Planococcus có tiên mao Xoắn thể có dạng tiên mao đặc biệt gọi tiên mao chu chất (periplasmic flagella), hay gọi sợi trục (axial fibrils), xuất phát từ cực tế bào quấn quanh thể Chúng giúp xoắn thể chuyển động nhờ uốn vặn tế bào theo kiểu vặn nút chai 10 Hình 10: Tiên mao chu chất xoắn thể Hình 11: Cơ chế chuyển động uốn vặn tế bào xoắn thể  Khuẩn mao: Khuẩn mao (hay tiêm mao, nhung mao, fimbriae) sợi lông mảnh, ngắn mọc quanh bề mặt tế bào nhiều vi khuẩn (G –) Chúng có đường kính khoảng 7-9 nm, rỗng ruột (đường kính 2-2,5 nm), số lượng khoảng 250-300 sợi/ vi khuẩn Kết cấu khuẩn mao giản đơn nhiều so với tiên mao Chúng có tác dụng giúp vi khuẩn bám vào giá thể ( nhiều vi khuẩn gây bệnh dùng khuẩn mao để bám chặt vào màng nhầy đường hơ hấp, đường tiêu hố, đường tiết niệu người động vật) 11 Hình 12: Khuẩn mao vi khuẩn E.coli 2.2 Những loại E.coli gây bệnh: Có hàng trăm loại giống E.coli sống cách vơ hại máy tiêu hóa người động vật Tuy nhiên, có vài loại E.coli tạo độc chất vô độc hại gây tiêu chảy máu, số trường hợp nghiêm trọng gây nhiễm trùng máu, suy thận Những loại E.coli khác gây nhiễm trùng đường tiểu loại nhiễm trùng nghiêm trọng khác Loại vi khuẩn lan truyền qua thức ăn nước bị nhiễm bẩn lây truyền từ người sang người Thực phẩm thức ăn bị nhiễm E.coli khó bị phát mùi vị màu sắc khơng có thay đổi Ngồi nhóm vi khuẩn E.coli gây bệnh phân lọai cịn có nhóm VTEC (Verocytotoxin-producing E.coli), AEEC (Attaching and effacing E.coli) loại E.coli gây bệnh Tùy vào địa phương độ tuổi, vi khuẩn có ảnh hưởng khác đến bệnh tiêu chảy Chẳng hạn ETEC nguyên nhân hàng đầu gây tiêu chảy trẻ em nước phát triển (như nước ta) yếu tố gây tiêu chảy trẻ em nước phương Tây Trong vi khuẩn trên, VTEC xem vấn nạn y tế toàn cầu, vi khuẩn thủ phạm gây nhiều nạn dịch tiêu chảy giới thời gian 20 năm qua  E.coli O157:H7: Là dòng E.coli gây bệnh trầm trọng người E.coli 0157:H7 sản xuất độc tố lethal gây bệnh tiêu chảy nặng, thận hư chí tử vong E.coli O157:H7 lây từ trâu bị qua người ăn thịt sống chưa đủ chín, sữa phô-mai không khử trùng, nước bị ô nhiễm thực phẩm bị sản phẩm từ thịt bị sống làm nhiễm E.coli O157:H7 làm ô nhiễm rau quả, nước trái không khử trùng, bị lây qua thú vật vườn thú Việc viêm nhiễm E.coli O157:H7 lây lan tay, thực phẩm, nước đồ vật bị người khác sờ vào trở nên ô nhiễm từ phân người bị nhiễm bệnh đưa vào miệng người khác Điều trị thuốc trụ sinh điều không nên làm bệnh tiêu chảy E.coli O157:H7 gây làm cho bệnh nặng Đa số người bệnh đỡ vài ngày mà khơng cần có điều trị đăc biệt Không dùng lọai thuốc chống tiêu chảy cho bệnh tiêu chảy E.coli O157:H7 gây thuốc làm cho bệnh nặng 12 PHẦN III: Phương pháp kiểm tra E.coli thực phẩm 3.1 Kỹ thuật màng petri: Kỹ thuật màng pêtri (Petrifilm) dùng kiểm tra E.Coli cho kết nhanh Trong kỹ thuật này, môi trường dinh dưỡng dạng đông khô cố định giá thể mỏng phủ màng bảo vệ Khi sử dụng lớp màng bảo vệ tách phần để bổ sung 1ml dịch mẫu lên bề mặt mơi trường, sau phủ lại Một đĩa nhựa đặt màng bảo vệ để tạo thành khuôn trịn Mơi trường dinh dưỡng hỗ trợ cho tăng trưởng VSV thời gian ủ số khuẩn lạc xuất đếm trực tiếp Ưu điểm kỹ thuật dễ thao tác, tiết kiệm không gian ủ bảo quản, thời hạn sử dụng lâu không cần hấp tiệt trùng Tuy nhiên giá thành lại cao Ngồi Petrifilm cịn có nhiều phương pháp phát E.Coli nhanh như: phương pháp lai phân tử (Hybridization), phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction)…các phương pháp cần có thiết bị kỹ thuật phức tạp giá thành cao 3.2 Kit Reveal - Kiểm tra E.coli O157:H7: Hệ thống kiểm tra E.Coli O157:H7 theo phương pháp Reveal cho thu hồi nhanh Escherichia coli O157:H7 thực phẩm, cho phép xác định sở nhận vi khuẩn Thử nghiệm: thực thử nghiệm, phần (120 µl) mơi trường làm giàu đặt vào cổng mẫu dụng cụ Mẫu chảy qua dụng cụ dịng lateral, cho kết nhìn thấy Nếu dịng triển khai có vạch vùng kiểm tra, mẫu âm tính với E.Coli O157:H7E Nếu xuất hai vạch mẫu dương tính với E.Coli O157:H7E Có hai phương pháp kiểm tra trong 20 Hình 13: Bộ Kit kiểm tra E.coli O157:H7 3.3 Phương pháp sử dụng môi trường chuyên biệt chọn lọc để nuôi cấy trực tiếp E.coli sau pha loãng: Thành phần thực phẩm làm phản ứng dương tính giả Trong E.coli có enzyme glucuronidase cắt methyl umbelliferyl gluconuride (MUG) tạo thành methyl umbelliferone chất phát quang màu xanh ánh sáng tia cực tím bước sóng 366nm MUG kết hợp mơi trường Lauryltryptose Mơi trường lại sử dụng bước nuôi cấy để xác định E.coli theo phương pháp MPN Sau ủ 37oC 24h, ta kiểm tra ống phát sáng, ống có phát quang sinh ống dương tính Những dịng E.coli khơng có enzyme glucuronidase cho kết âm tính 13 nhiên có vài lịai sinh vật có khả phát quang môi trường nên kết không xác PHẦN IV: Kết quả, thảo luận 4.1 Tác hại E.coli: 4.1.1 Đối với bệnh tiêu chảy dịch tả: Năm 2004 nhà nghiên cứu Việt – Úc tiến hành nghiên cứu để biết tần số diện E coli thực phẩm Trong nghiên cứu này, nhà nghiên cứu chợ Thành phố Hồ Chí Minh lấy 50 mẫu thịt bò, 30 mẫu thịt gà, 50 mẫu thịt heo, 50 mẫu hải sản (tơm, sị, cua, ghẹ, v.v…) Sau phân tích, họ phát 90% mẫu thịt hải sản hàm chứa E.coli Một nghiên cứu khác 258 heo Cần Thơ vào năm 2002 cho thấy khoảng 9% phân heo bị nhiễm E.coli Theo nhà nghiên cứu vi khuẩn E.coli gây bệnh tiêu chảy, tiêu chảy nhiều vi khuẩn, siêu vi khuẩn, vật kí sinh gây số đó, E.coli nguyên nhân Theo ước tính có khoảng 4% người bị nhiễm E.coli mắc bệnh tiêu chảy trường hợp tiêu chảy bệnh tả Khoảng 15% bệnh nhân tiêu chảy cấp tính bị nhiễm vi khuẩn V.Cholera, nhiên trẻ em việc nhiễm E.coli có khả làm tăng nguy mắc bệnh tiêu chảy 4.1.2 Trong sữa tươi: Vừa qua việc sữa tươi công ty cổ phần Vinamilk bị phát nhiễm khuẩn E.coli gây xôn xao dư luận, khiến người tiêu dùng hoang mang Nhiều người từ việc chuyển sang dùng sữa Vinamilk (do lọai sữa ngọai thị trường bị phát có chứa độc chất melamine) tẩy chay lọai sữa doanh nghiệp Nguyên nhân bắt nguồn từ việc người dân tỉnh Tiền Giang sử dụng sữa tươi tiệt trùng có đường nhãn hiệu Vinamilk phát bịch sữa bị căng phồng lên vỡ sữa có mùi bịch sữa hạn sử dụng Các bịch sữa Trung tâm Y tế dự phòng tỉnh Tiển Giang xét nghiệm kết luận bịch sữa bị phồng, căng cứng, sữa vón cục lợn cợn màu trắng ngà có mùi chua, tổng số vi khuẩn hiếu khí, Coliforms E.coli cao mức quy định nhiều lần Trước thông tin này, Vinamilk đề nghị Thanh tra Bộ y tế đến làm việc Nhà máy sữa Thống Nhất, nơi sản xuất sữa tiệt trùng FINO bị cho nhiễm bẩn Đồn lấy mẫu từ lơ hàng gửi xét nghiệm Kết xét nghiệm Viện Vệ sinh y tế công cộng công bố ngày, mẫu sữa nói khơng phát nhiễm khuẩn Vinamilk cho mẫu sữa Trung tâm Y tế dự phòng Tiền Giang xét nghiệm mẫu sữa bị nhiễm khuẩn bảo quản không cách Do vậy, mẫu sữa đại diện cho lô sữa Vẫn chưa biết việc khẳng định việc phát vi khuẩn E.coli thực phẩm (cụ thể sữa tươi) nguy đe dọa tới sức khỏe người tiêu dùng 4.2 Những ứng dụng E.coli: Vi khuẩn E.coli khơng gây hại mà cịn có lợi ích to lớn 4.2.1 Dùng để điều chế insulin: Trong năm 2005, nhu cầu insulin dùng trị bệnh tiểu đường ước tính khoảng 4.000 đến 5.000 kg dự kiến năm 2010 16.000 kg Nhu cầu insulin giới vượt qua số vài tấn/năm nguồn cung cấp insulin cho trị bệnh tiểu đường 14 thiếu hụt Từ thập niên 1920 năm đầu thập niên 1980, insulin tạo cách cô lập từ tuyến tụy động vật heo bò Tuy nhiên, insulin người có khác biệt thành phần acid amin so với insulin bị insulin heo Do gây tác dụng không mong muốn (như dị ứng) sử dụng insulin có nguồn gốc từ heo hay bị Ngồi ra, q trình sản xuất tinh insulin từ động vật cịn gặp nhiều khó khăn Sau đó, phương pháp bán tổng hợp insulin người từ insulin heo bò phát triển cách sử dụng phản ứng chuyển peptide (transpeptidation) sử dụng trypsin Nhiều phương pháp sản xuất insulin tái tổ hợp phát triển phương pháp sản xuất tập đoàn Eli Lilly, phương pháp sản xuất biểu chuỗi A chuỗi B riêng biệt cách sử dụng Escherichia coli, sau thu chuỗi A chuỗi B, trộn với in vitro tạo cầu nối disulfur Phương pháp có hiệu sản xuất thấp Do đó, Eli Lilly phát triển phương pháp cải tiến hơn, phương pháp biểu proinsulin thay biểu chuỗi A B riêng biệt phương pháp cũ, tạo cầu nối disulfur in vitro, sau phân cắt peptide C khỏi hai chuỗi A B trypsin carboxypeptidase, tạo thành insulin Hiện tại, người ta tiếp tục phát triển phương pháp sản xuất insulin tái tổ hợp Công ty Hoechst đưa phuơng pháp sản xuất insulin bao gồm: biểu dạng dẫn xuất insulin biểu preproinsulin E.coli, tạo cầu nối disulfur invitro, sau xử lý lysylendopeptidase clostripain/carboxypeptidase B, cuối tạo insulin Mới nhất, Công ty Bio-Technology General đưa phương pháp Trong phương pháp này, dạng protein dung hợp (fusion protein) bao gồm superoxide dismutase (SOD) gắn với proinsulin biểu tế bào E.coli Bằng cách này, hiệu suất trình biểu protein hiệu trình hình thành cầu nối Sau đó, proinsulin chuyển thành insulin nhờ xử lý với trypsin carboxypeptidase B Bằng cách tương tự thế, người ta đưa ngày nhiều phuơng pháp sản xuất insulin tái tổ hợp cải tiến nhièu để nâng cao hiệu trình biểu protein, hình thành cầu nối disulfur, chuyển proinsulin thành insulin 4.2.2 Tổng hợp dược chất Artermisinin từ E.coli để phòng bệnh sốt rét: Tầm quan trọng Artemisinin điều trị bệnh sốt rét xác định đề cao từ nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng viện nghiên cứu giới Hiện Artemisinin sử dụng thay cho Chloroquin, đặc biệt trường hợp bệnh nhân kháng thuốc Gần đây, ngành sinh học tổng hợp ứng dụng thành công việc tổng hợp hoạt chất thiên nhiên Artemisinin E.coli Nghiên cứu thành công mang lại nhiều hứa hẹn tính khả thi việc sản xuất Artemisinin để đáp ứng nhu cầu lớn lao việc điều trị sốt rét nước, gồm Việt Nam, nơi mà bệnh vấn đề nan giải y tế gây tổn thất kinh tế lớn lao 15 PHẦN V: Kết luận, đề nghị: 5.1 Kết luận: Vi khuẩn E.coli ứng dụng sản xuất insulin để điều trị bệnh tiểu đường tổng hợp dược chất Artermisinin để phòng bệnh sốt rét diện thực phẩm chúng lại trở thành mối đe dọa đến sức khỏe người E coli xâm nhập vào thịt gia cầm hay thịt heo trình làm thịt Nếu thịt bị nhiễm khơng nấu chín (71°C), vi khuẩn sống sót thịt bị nhiễm khuẩn Ngoài ra, số thực phẩm rau cải, trái sữa tươi (sữa chưa tiệt trùng phương pháp Pasteur) bị nhiễm E.coli Phân người động vật bị nhiễm E.coli xâm nhập vào ao, hồ, sơng, hay nói chung nguồn nước sinh hoạt Chúng ta bị nhiễm E.coli qua nguồn nước bị nhiễm khuẩn hay nước chưa khử trùng chlorine, vi khuẩn lây truyền từ người sang người Khi bị nhiễm E.coli người bị nhiễm cảm thấy đau thắt bao tử nơn ói Triệu chứng thường bắt đầu hay ngày sau bị phơi nhiễm vi khuẩn E.coli Phần lớn bệnh nhân hồi phục sau vài ngày hay tuần sau mắc bệnh khơng cần đến bác sĩ họ khơng biết bị nhiễm E.coli Ngồi ra, nhiều người bị nhiễm mà khơng có triệu chứng khơng mắc bệnh Khi bệnh nhân bị nhiễm E.coli nghiêm trọng (tức làm rối loạn máu suy thận), số triệu chứng sau thường ghi nhận: - Da trở nên xanh xao - Cảm lạnh - Cảm thấy yếu - Đi tiểu nước tiểu - Có vết thâm tím người 5.2 Đề nghị: Như vậy, bệnh nhân nhiễm E.coli thường tự hồi phục Liệu pháp điều trị chủ yếu nghỉ ngơi uống nhiều nước Tiêu chảy làm cho thể nước nhiều bình thường, uống nước chín quan trọng Uống nước thường xuyên với liều lượng khoảng 200 – 300 ml lần giúp chống lại tình trạng nước Nếu người bệnh bị tiêu chảy nghi tiêu chảy nhiễm E.coli, khơng nên sử dụng thuốc chống tiêu chảy uống thuốc chống tiêu chảy làm cho q trình tiêu hóa chậm lại, tạo hội cho thể hấp thu độc tố vi khuẩn E.coli sản xuất Nước thực phẩm bị nhiễm E.coli khơng có biểu đặc biệt, nên khó mà biết nước uống thức ăn mà dùng hàng ngày có bị nhiễm E.coli hay khơng Vì vậy, cần có biện pháp phịng ngừa nhiễm khuẩn sau: - Nấu chín thịt heo, gà, bị, v.v… với nhiệt độ tối thiểu 71°C - Trong nhà bếp, thường xuyên rửa tay với nước nóng hay xà phòng, đặc biệt sau tiếp xúc với thịt - Rửa kĩ dụng cụ nhà bếp dao, thớt sau sử dụng cắt rau hay thịt - Tránh dùng sữa chưa qua tiệt trùng phương pháp Pasteur - Sử dụng nước mưa hay nước khử trùng chlorine, tránh uống nước bơi lội sông hay ao hồ - Nếu cần, nên sử dụng chanh để diệt vi khuẩn rau cải hay mắm tôm 16 Tài liệu tham khảo Vương Thị Việt Hoa Vi sinh thực phẩm Đại học Nông Lâm TP HCM Synthetic Biology: Vũ khí giúp tổng hợp dược chất Artermisinin từ E.coli để phòng chống bệnh sốt rét Web sites: http://www.sinhhocvietnam.com/ Insulin công nghệ sản xuất insulin giới Web sites: http://www.sinhhocvietnam.com/ Có nên tập trung vào vi khuẩn E.coli Web sites: http://www.ykhoanet.com/ E.coli Web sites: http://vi.wikipedia.org/ 17 ... tươi Vinamilk bị phát có vi khuẩn E.coli Vi? ??c phát E.coli sữa tươi Vinamilk khiến nhiều người lo sợ chí khơng dám uống sữa Thực E.coli tên gọi nhóm vi khuẩn (chứ khơng phải vi khuẩn nhất) Vi khuẩn... góp người đọc để vi? ??t hồn thiện TP Hồ Chí Minh tháng 11 năm 2008 Người vi? ??t báo cáo PHẦN I: Mở đầu 1.1 Lịch sử phát vi khuẩn E.coli: Escherichia coli (thường vi? ??t tắt E.coli) loài vi khuẩn ký sinh... Escherich tỏ rõ mối lưu ý tới vi sinh vật đường ruột trẻ em qua nhiều thí nghiệm lâm sàng Vi khuẩn Escherich phát từ tã lót trẻ em công bố với tên gọi Bacterium coli commune Chỉ năm sau vi khuẩn