Nghiên cứu tách chiết phân đoạn cao chiết có hoạt tính kháng oxy hóa từ lá sen (nelumbo nucifera geartn)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA NGUYỄN THỊ NGỌC MAI NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT PHÂN ĐOẠN CAO CHIẾT CĨ HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HĨA TỪ LÁ SEN (Nelumbo nucifera Geartn) Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm đồ uống Mã số: 60 54 02 LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng năm 2013 Cơng trình hồn thành tại: Trường đại học Bách Khoa – ĐHQGTPHCM Cán hướng dẫn khoa học: ………………………………… TS Ngô Đại Nghiệp Cán chấm nhận xét 1: …………………………………… PGS TS Đồng Thị Thanh Thu Cán chấm nhận xét 2: …………………………………… TS Trần Thị Ngọc Yên Luận văn thạc sĩ bảo vệ Trường Đại học Bách Khoa, ĐHQG Tp.HCM ngày 29 tháng năm 2013 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: Chủ tịch Hội đồng: TS Phạm Văn Hùng Phản biện 1: PGS TS Đồng Thị Thanh Thu Phản biện 2: TS Trần Thị Ngọc Yên Ủy viên: TS Ngô Đại Nghiệp Thư ký: TS Võ Đình Lệ Tâm Xác nhận Chủ tịch Hội đồng dánh giá LV Trưởng khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn sửa chữa (nếu có) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TS Phạm Văn Hùng TRƯỞNG KHOA KỸ THUẬT HOÁ HỌC ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TP.HCM CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA Độc lập – Tự – Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: Nguyễn Thị Ngọc Mai MSHV: 11110207 Ngày, tháng, năm sinh: 06/02/1987 Nơi sinh: An Giang Chuyên ngành: Công nghệ Thực phẩm đồ uống Mã số: 605402 I TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu tách chiết phân đoạn cao chiết có hoạt tính kháng oxy hóa từ sen (Nelumbo nucifera Gaertn) NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Nghiên cứu tách chiết hợp chất có hoạt tính kháng oxy hóa sen xác định số phân đoạn có hoạt tính kháng oxy hóa từ cao nước sen Nội dung nghiên cứu: o Khảo sát số thành phần sen o Khảo sát trình xử lý nguyên liệu: nhiệt độ sấy, thời gian sấy o Khảo sát trình trích ly: tỉ lệ ngun liệu : dung mơi, nhiệt độ nước trích ly, thời gian trích ly o Khảo sát khả bắt gốc tự phương pháp DPPH o Khảo sát lực khử o Khảo sát tách phân đoạn từ cao nước sen sắc ký cột NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: 21/01/2013 II NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 21/06/2013 III CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: TS Ngô Đại Nghiệp Tp.HCM, ngày……tháng……năm 2013 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MƠN ĐÀO TẠO TS Ngơ Đại Nghiệp TRƯỞNG KHOA KỸ THUẬT HOÁ HỌC i LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực đề tài em q thầy tận tình hướng dẫn bạn giúp đỡ để em hoàn thành luận văn tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn thầy Ngô Đại Nghiệp hướng dẫn, truyền đạt nhiều kiến thức, kinh nghiệm quý báu cho em giúp em có điều kiện thuận lợi để thực luận văn Em xin trân trọng biết ơn quý thầy cô Bộ môn Công Nghệ Thực Phẩm thuộc Khoa Kỹ Thuật Hóa Học – Trường Đại học Bách Khoa Tp.HCM tận tình giúp đỡ, truyền đạt cho em kiến thức bổ ích, để em hồn thành tốt luận văn Em xin chân thành cảm ơn anh, chị bạn thuộc phịng thí nghiệm Hợp chất có hoạt tính sinh học – Bộ mơn Sinh Hóa – Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên giúp đỡ em thời gian nghiên cứu Một lần em xin chân thành cảm ơn ! HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngơ Đại Nghiệp ii TĨM TẮT Trong nghiên cứu này, mục tiêu tách chiết xác định số phân đoạn có hoạt tính kháng oxy hóa từ sen Lá sen sấy 80oC thời gian 30 phút để đạt độ ẩm bảo quản 5,4% Để thu dịch chiết sen sử dụng nước có nhiệt độ 80oC, với tỉ lệ so với nước 1:25 thời gian 40 phút Lá sen xác định tổng hàm lượng polyphenol phương pháp Folin – Ciocalteau tổng hàm lượng flavonoid dựa phương pháp so màu quang học Hàm lượng polyphenol flavonoid sen 115,50 mg/g chất khô 14,85 mg/g chất khô Sau thu dịch chiết sen, tiến hành cô quay chân không để thu cao chiết Cao chiết tổng tiến hành kiểm tra hoạt tính kháng oxy hóa phương pháp: Khảo sát lực khử, phương pháp DPPH Hoạt tính cao chiết so sánh với chất kháng oxy hóa (vitamin C, BHA) Kết IC50 cao chiết 13,98 µg/ml Cao chiết sen tách phân đoạn kỹ thuật sắc ký mỏng sắc ký cột hở với hệ dung môi chloroform : metanol có độ phân cực tăng dần, kết thu phân đoạn ABSTRACT In this study, the target is extraction and identify antioxidant fractional extracts on lotus leaf Lotus leaf was dried in 80oC in 30 minutes to achieve moisture 5.4% To isolation lotus leaf extract use water in 80oC with rate 1:25 in 40 minutes Lotus leaf was identified the total polyphenol content using FolinCiocalteau method and the total flavonoid content using optical colorimetric method Polyphenols content and flavonoids content in lotus leaves is 115.50 ng/g dry plant material and 14.85 mg/g dry plant material After isolation lotus leaf extract, drying it in vacuum environment to be extractive powder Extractive powder were been test antioxidant activities using: Reducing power, DPPH method Antioxidant activities of extractive powder were compared to the antioxidants (vitamin C, BHA) Results of extracts IC50 is 13.98 µg/ml Extractive powder was separated fractional extracts using thin-layer chromato-graphy and classical opencolumn chromatography with solvents (chloroform : metanol) increasing polarization, results obtained at least fractional extracts HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp iii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn kết nghiên cứu riêng tôi, khơng chép Nội dung luận văn có tham khảo sử dụng tài liệu, thông tin đăng tải tác phẩm, tạp chí trang web theo danh mục tài liệu luận văn Tác giả luận văn Nguyễn Thị Ngọc Mai HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp iv MỤC LỤC ĐỀ MỤC Trang CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Tính thực tiễn ý nghĩa đề tài nghiên cứu 1.4 Nội dung khảo sát .2 1.5 Giới hạn đề tài .2 1.6 Kết dự kiên 1.7 Nơi thực đề tài CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN 2.1 Giới thiệu sen 2.2 Các hợp chất kháng oxy hóa có nguồn gốc tự nhiên 2.3 Các cơng trình nghiên cứu trước .12 CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 Sơ đồ nghiên cứu .15 3.1 Vật liệu dùng nghiên cứu 16 3.2 Các phương pháp nghiên cứu 17 3.3 Quy trình điều chế cao sen dự kiến 23 3.4 Tiến hành khảo sát 24 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 30 4.1 Kết khảo sát số thành phần sen 30 4.2 Kết khảo sát trình xử lý nguyên liệu 30 HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp v 4.2.1 Kết khảo sát nhiệt độ sấy 30 4.2.2 Kết khảo sát thời gian sấy 33 4.3 Kết khảo sát điều kiện trích ly hợp chất kháng oxy hóa sen .35 4.3.1 Kết khảo sát tỉ lệ ngun liệu : dung mơi trích ly (w/v) .35 4.3.2 Kết khảo sát nhiệt độ trích ly 37 4.3.3 Kết khảo sát thời gian trích ly .39 4.4 Kết kiểm tra hoạt tính kháng oxy hóa cao tổng 41 4.4.1 Kết kiểm tra hoạt tính bắt gốc tự DPPH cao tổng 41 4.4.2 Kết khảo sát lực khử cao tổng .43 4.5 Kết khảo sát tách phân đoạn cao tổng (cao nước sen) .44 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .49 5.1 Kết luận 49 5.2 Kiến nghị 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO I PHỤ LỤC IV HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngơ Đại Nghiệp vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1: Cây sen sen .5 Hình 2.2: Cấu trúc flavonoid Hình 2.3: Cơng thức cấu tạo tannin gallic 10 Hình 2.4: Cơng thức cấu tạo chlorophyll a b .12 Hình 3.1: Phản ứng bắt gốc tự DPPH chất kháng oxy hóa 17 Sơ đồ 3.1: Quy trình thực nghiệm, tiến hành khảo sát .15 Sơ đồ 3.2: Quy trình điều chế cao tổng nước dự kiến 24 Sơ đồ 3.3: Quy trình điều chế cao tổng 28 Hình 4.1: Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến hàm lượng flavonoid polyphenol 31 Hình 4.2: Sự ảnh hưởng thời gian sấy đến hàm lượng flavonoid polyphenol 34 Hình 4.3: Sự ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu : nước đến hàm lượng flavonoid polyphenol dịch chiết .36 Hình 4.4: Ảnh hưởng nhiệt độ nước trích ly đến hàm lượng flavonoid polyphenol .38 Hình 4.5: Sự ảnh hưởng thời gian trích ly đến hàm lượng flavonoid polyphenol .40 Hình 4.6: Cao tổng sen 41 Hình 4.7: Năng lực khử cao tổng, vitamin C BHA .44 Hình 4.8: Kết sắc ký lớp mỏng (TLC) phân đoạn cao tổng 46 HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp vii DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1: Một số thành phần sen 30 Bảng 4.2: Kết khảo sát nhiệt độ sấy sen .31 Bảng 4.3: Ảnh hưởng thời gian sấy đến độ ẩm, hàm lượng flavonoid polyphenol .33 Bảng 4.4: Kết khảo sát tỉ lệ nguyên liệu : dung mơi trích ly (w/v) 36 Bảng 4.5: Sự ảnh hưởng nhiệt độ đến trình trích ly 38 Bảng 4.6: Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian đến q trình trích ly 40 Bảng 4.7: Hoạt tính bắt gốc tự DPPH cao tổng 42 Bảng 4.8: Nồng độ IC50 cao tổng, vitamin C BHA .42 Bảng 4.9: Năng lực khử cao tổng, vitamin C BHA .43 Bảng 4.10: Kết sắc ký cột silica gel 60 cao nước (0,5g) sen 45 Bảng 4.11: Khả bắt gốc tự DPPH phân đoạn cao chiết 47 HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp - 49 - CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Qua trình nghiên cứu, chúng tơi rút kết luận sau: Hàm lượng flavonoid có sen 14,85 mg/g chất khơ Hàm lượng polyphenol có sen 115,50 mg/g chất khơ Nhiệt độ thích hợp cho trình sấy sen 80oC thời gian sấy 30 phút Độ ẩm sen sau sấy đạt 5,4% Các thơng số thích hợp cho q trình trích ly: - Tỉ lệ ngun liệu : nước 1:25 - Nhiệt độ nước dùng để trích ly 80oC - Thời gian trích ly thích hợp để thu hàm lượng flavonoid polyphenol cao 40 phút Hoạt tính kháng oxy hóa cao tổng: - Khả bắt gốc tự DPPH cao tổng nồng độ 50 µg/ml 79,40%, giá trị IC50 cao tổng nồng độ 13,98 µg/ml - Năng lực khử cao tổng 27,91% lực khử vitamin C 20,69% lực khử BHA Kết tách phân đoạn từ cao nước sen: Thu phân đoạn khác phân đoạn cho kết dương tính với thuốc thử nhận diện hợp chất phenol, phân đoạn có hoạt tính bắt gốc tự DPPH 5.2 Kiến nghị Cần mở rộng phạm vi nghiên cứu đề tài theo hướng: HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp - 50 - Khảo sát ảnh hưởng độ tuổi sen thu hái đến hàm lượng flavonoid polyphenol Khảo sát tiếp phân đoạn thu lượng cao nhiều phân đoạn cho hoạt tính cao để thu đơn chất Khảo sát ảnh hưởng dung mơi trích ly đến hiệu suất thu hồi chất có hoạt tính sinh học mở rộng hướng ứng dụng ngành dược liệu Khảo sát thêm hợp chất có khả kháng oxy hóa khác có sen tìm phương pháp tách chiết hợp chất Nghiên cứu ứng dụng cao nước từ sen vào ngành công nghệ chế biến thực phẩm, đặc biệt ứng dụng sản phẩm nước giải khát HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp I TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Lâm Thị Kim Châu, Văn Đức Chín Ngơ Đại Nghiệp (2004), Thực tập lớn sinh hóa, Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh [2] Nguyễn Hữu Chấn (2000), Những vấn đề hóa sinh học đại – tập 1, Nhà xuất Khoa Học Kỹ Thuật [3] Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, 783 – 786 [4] Lê Văn Việt Mẫn, Lại Quốc Đạt, Nguyễn Thị Hiền, Tôn Nữ Minh Nguyệt Trần Thị Thu Trà (2011), Công nghệ chế biến thực phẩm, Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh [5] Hồng Thị Tuyết Nhung (2012), Nghiên cứu chiết xuất tinh chế conessin, kaempferol, nuciferin từ dược liệu làm chất chuẩn đối chiếu kiểm nghiệm thuốc, Luận án Tiến sĩ, Trường Đại học Dược Hà Nội [6] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, Nhà xuất Đại Học Quốc Gia TP.Hồ Chí Minh, 73- 282 [7] Nguyễn Phước Tuyên (2008), Kỹ thuật trồng sen, Nhà xuất Nông Nghiệp [8] M Atanassova, S Georgieva and K Ivancheva (2011), Total phenolic and total flavonoid contents, antioxidant capacity and biological contaminants in medicinal herbs, Journal of the University of Chemical Technology and Metallurgy 46 (1): 81 – 88 [9] P.Arjun, S.Mohana Priya, P.S.Saranya Sivan, M.Krishnamoorthy and K Balasubramanian (2012), Antioxidant and antimicrobial activity of Nelumbo nucifera Gaertn leaf extracts, J Acad Indus Res.Vol [10] M.G Ferruzzi, V Böhm, P.D Courtney and S.J Schwartz (2006), Antioxidant and Antimutagenic Activity of Dietary Chlorophyll Derivatives Determined by Radical Scavenging and Bacterial Reverse Mutagenesis Assays, Journal of Food Science 67: 2589 – 2595 [11] Isabel C.F.R Ferreira, Paula Baptista, Miguel Vilas-Boas and Lillian Barros (2007), Free-radical scavenging capacity and reducing power of wild edible mushrooms from northeast Portugal: Individual cap and stipe activity, Food HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp II Chemistry 100: 1511–1516 [12] Ali Ghasemzadeh, Hawa Z E Jaafar and Asmah Rahmat (2010), Antioxidant Activities, Total Phenolics and Flavonoids Content in Two Varieties of Malaysia Young Ginger (Zingiber officinale Roscoe), Molecules 15: 4324 – 4333 [13] Bibhabasu Hazra, Santanu Biswas, Nripendranath Mandal (2008), Antioxidant and free radical scavenging activity of Spondias pinnat, BMC Complementary and Alternative Medicine [14] Bo Huang, Xiaoquan Ban, Jingsheng He, Jing Tong, Jun Tian and Youwei Wang (2010), Hepatoprotective and antioxidant activity of ethanolic extracts of edible lotus(Nelumbo nucifera Gaertn) leaves, Food Chemistry 120: 873–878 [15] Chang-Ho Jeong, Hee-Rok Jeong, Sung-Gil Choi and Ho Jin Heo (2012), Antioxidant and Neuronal Cell Protective Effects of Aqueous Extracts from Lotus Leaf Tea, Journal of Agriculture & Life Science 46(2): 115-127 [16] Habsah Mohamada, Faridah Abas, Dharma Permana, Nordin H Lajis, Abdul Manaf Alib, Mohd Aspollah Sukari, Taufiq Y Y Hin, Hiroe Kikuzaki and Nobuji Nakatani (2004), DPPH Free Radical Scavenger Components from the Fruits of Alpinia rafflesianaWall ex Bak (Zingiberaceae), Verlag der Zeitschrift für Naturforschung 59: 811 – 815 [17] Dongmei Yang ME, Qiushuang Wang ME, Leqin Ke BE, Jianmei Jiang BE and Tiejin Ying PhD (2007), Antioxidant activities of various extracts of lotus (Nelumbo nuficera Gaertn) rhizome, Asia Pac J Clin Nutr 16: 158-163 [18] Lan Zhang, Ying Shan, Keji Tang and Ramesh Putheti (2009), Ultrasoundassisted extraction flavonoids from Lotus (Nelumbo nuficera Gaertn) leaf and evaluation of its anti-fatigue activity, International Journal of Physical Sciences Vol (8): 418 – 422 [19] Yan-Bin Wu, Li-Jun Zheng, Jian-Guo Wu, Ti-Qiang Chen, Jun Yi and JinZhong Wu (2012), Antioxidant Activities of Extract and Fractions from Receptaculum Nelumbinis and Related Flavonol Glycosides, International Journal of Molecular Sciences 13: 7163-7173 HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp III [20] Ming-Jiuan Wu, Lisu Wang and Ching-Yi Weng (2003), Antioxidant Activity of Methanol Extract of the Lotus Leaf (Nelumbo nucifera Geartn) The American Journal of Chinese Medicine 31: 687 – 698 [21] Lisu Wang, Jui-Hung Yen, Hsiao-Ling Liang and Ming-Jiuan Wu (2003), Antioxidant Effect of Methanol Extracts from Lotus Plumule and Blossom (Nelumbo nucifera Geartn), Journal of Food and Drug Analysis, Vol 11, No 1: 60 – 66 HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp IV PHỤ LỤC A Phương trình đường chuẩn Đường chuẩn Catechin Đường chuẩn acid gallic Phương trình đường chuẩn đường tổng HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp V B Một số hình ảnh mẫu tiến hành thí nghiệm Hình 1: Xác định hàm lượng polyphenol (trái) flavonoid (phải) sen Hình 2: Lá sen sau sấy bột cao thô HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngơ Đại Nghiệp VI Hình 3: Thí nghiệm khả bắt gốc tự DPPH phân đoạn C Kết phân tích anova KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ANOVA CỦA KHẢO SÁT NHIỆT ĐỘ SẤY ANOVA Table for Flavonoid by Nhiet say Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 11.4827 2.87067 4083.84 0.0000 Within groups 0.00702933 10 0.000702933 Total (Corr.) 11.4897 14 Multiple Range Tests for Flavonoid by Nhiet say -Method: 95.0 percent LSD Nhiet say Count Mean Homogeneous Groups -100 2.723 X 90 3.67367 X 70 4.042 X 80 4.48067 X 60 5.369 X -Contrast Difference +/- Limits HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp VII 60 - 70 *1.327 0.0482342 60 - 80 *0.888333 0.0482342 60 - 90 *1.69533 0.0482342 60 - 100 *2.646 0.0482342 70 - 80 *-0.438667 0.0482342 70 - 90 *0.368333 0.0482342 70 - 100 *1.319 0.0482342 80 - 90 *0.807 0.0482342 80 - 100 *1.75767 0.0482342 90 - 100 *0.950667 0.0482342 -* denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Polyphenol by Nhiet say Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 780.963 195.241 22129.45 0.0000 Within groups 0.0882267 10 0.00882267 Total (Corr.) 781.051 14 Multiple Range Tests for Polyphenol by Nhiet say -Method: 95.0 percent LSD Nhiet say Count Mean Homogeneous Groups -100 23.3487 X 90 27.92 X 70 34.9563 X 80 37.0177 X 60 44.0663 X -Contrast Difference +/- Limits -60 - 70 *9.11 0.170882 60 - 80 *7.04867 0.170882 60 - 90 *16.1463 0.170882 60 - 100 *20.7177 0.170882 70 - 80 *-2.06133 0.170882 70 - 90 *7.03633 0.170882 70 - 100 *11.6077 0.170882 80 - 90 *9.09767 0.170882 80 - 100 *13.669 0.170882 90 - 100 *4.57133 0.170882 -* denotes a statistically significant difference KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ANOVA CỦA KHẢO SÁT THỜI GIAN SẤY ANOVA Table for Flavonoid by Thoi gian say Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 13.8115 2.7623 13308.70 0.0000 Within groups 0.00249067 12 0.000207556 Total (Corr.) 13.814 17 Multiple Range Tests for Flavonoid by Thoi gian say HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp VIII -Method: 95.0 percent LSD Thoi gian say Count Mean Homogeneous Groups -10 4.216 X 60 5.76 X 20 5.81533 X 50 6.158 X 40 6.293 X 30 7.133 X -Contrast Difference +/- Limits -10 - 20 *-1.59933 0.0256296 10 - 30 *-2.917 0.0256296 10 - 40 *-2.077 0.0256296 10 - 50 *-1.942 0.0256296 10 - 60 *-1.544 0.0256296 20 - 30 *-1.31767 0.0256296 20 - 40 *-0.477667 0.0256296 20 - 50 *-0.342667 0.0256296 20 - 60 *0.0553333 0.0256296 30 - 40 *0.84 0.0256296 30 - 50 *0.975 0.0256296 30 - 60 *1.373 0.0256296 40 - 50 *0.135 0.0256296 40 - 60 *0.533 0.0256296 50 - 60 *0.398 0.0256296 -* denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Polyphenol by Thoi gian say Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 610.716 122.143 9219.87 0.0000 Within groups 0.158974 12 0.0132478 Total (Corr.) 610.875 17 Multiple Range Tests for Polyphenol by Thoi gian say -Method: 95.0 percent LSD Thoi gian say Count Mean Homogeneous Groups -10 30.261 X 60 36.414 X 50 38.4817 X 20 43.5463 X 40 45.222 X 30 47.3473 X -Contrast Difference +/- Limits -10 - 20 *-13.2853 0.204761 10 - 30 *-17.0863 0.204761 10 - 40 *-14.961 0.204761 10 - 50 *-8.22067 0.204761 10 - 60 *-6.153 0.204761 20 - 30 *-3.801 0.204761 20 - 40 *-1.67567 0.204761 HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp IX 20 - 50 *5.06467 0.204761 20 - 60 *7.13233 0.204761 30 - 40 *2.12533 0.204761 30 - 50 *8.86567 0.204761 30 - 60 *10.9333 0.204761 40 - 50 *6.74033 0.204761 40 - 60 *8.808 0.204761 50 - 60 *2.06767 0.204761 -* denotes a statistically significant difference KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ANOVA CỦA KHẢO SÁT TỈ LỆ TRÍCH LY ANOVA Table for Flavonoid by Ti le trich ly Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3.21473 0.803682 12.76 0.0006 Within groups 0.629822 10 0.0629822 Total (Corr.) 3.84455 14 Multiple Range Tests for Flavonoid by Ti le trich ly -Method: 95.0 percent LSD Ti le trich ly Count Mean Homogeneous Groups -1:20 13.1117 X 1:40 13.854 X 1:25 14.081 XX 1:30 14.3273 X 1:35 14.3973 X -Contrast Difference +/- Limits -1:20 - 1:25 *-0.969333 0.456569 1:20 - 1:30 *-1.21567 0.456569 1:20 - 1:35 *-1.28567 0.456569 1:20 - 1:40 *-0.742333 0.456569 1:25 - 1:30 -0.246333 0.456569 1:25 - 1:35 -0.316333 0.456569 1:25 - 1:40 0.227 0.456569 1:30 - 1:35 -0.07 0.456569 1:30 - 1:40 *0.473333 0.456569 1:35 - 1:40 *0.543333 0.456569 -* denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Polyphenol by Ti le trich ly Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1366.94 341.736 143.00 0.0000 Within groups 23.898 10 2.3898 Total (Corr.) 1390.84 14 Multiple Range Tests for Polyphenol by Ti le trich ly -Method: 95.0 percent LSD HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp X Ti le trich ly Count Mean Homogeneous Groups -1:20 54.5533 X 1:40 78.2417 X 1:25 78.2853 X 1:30 78.5013 X 1:35 78.636 X -Contrast Difference +/- Limits -1:20 - 1:25 *-23.732 2.81241 1:20 - 1:30 *-23.948 2.81241 1:20 - 1:35 *-24.0827 2.81241 1:20 - 1:40 *-23.6883 2.81241 1:25 - 1:30 -0.216 2.81241 1:25 - 1:35 -0.350667 2.81241 1:25 - 1:40 0.0436667 2.81241 1:30 - 1:35 -0.134667 2.81241 1:30 - 1:40 0.259667 2.81241 1:35 - 1:40 0.394333 2.81241 -* denotes a statistically significant difference KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ANOVA CỦA KHẢO SÁT NHIỆT ĐỘ TRÍCH LY ANOVA Table for Flavonoid by Nhiet trich ly Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 47.9963 11.9991 11.27 0.0010 Within groups 10.6436 10 1.06436 Total (Corr.) 58.6399 14 Multiple Range Tests for Flavonoid by Nhiet trich ly -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -70 4.953 X 100 5.712 X 60 6.71467 XX 90 8.02067 X 80 10.01 X -Contrast Difference +/- Limits -60 - 70 1.76167 1.8769 60 - 80 *-3.29533 1.8769 60 - 90 -1.306 1.8769 60 - 100 1.00267 1.8769 70 - 80 *-5.057 1.8769 70 - 90 *-3.06767 1.8769 70 - 100 -0.759 1.8769 80 - 90 *1.98933 1.8769 80 - 100 *4.298 1.8769 90 - 100 *2.30867 1.8769 -* denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Polyphenol by Nhiet trich ly HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp XI Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 922.031 230.508 16.29 0.0002 Within groups 141.486 10 14.1486 Total (Corr.) 1063.52 14 Multiple Range Tests for Polyphenol by Nhiet trich ly -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -70 59.337 X 60 65.0263 X 100 73.5717 X 90 75.3337 XX 80 81.5 X -Contrast Difference +/- Limits -60 - 70 5.68933 6.84312 60 - 80 *-16.4737 6.84312 60 - 90 *-10.3073 6.84312 60 - 100 *-8.54533 6.84312 70 - 80 *-22.163 6.84312 70 - 90 *-15.9967 6.84312 70 - 100 *-14.2347 6.84312 80 - 90 6.16633 6.84312 80 - 100 *7.92833 6.84312 90 - 100 1.762 6.84312 -* denotes a statistically significant difference KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ANOVA CỦA KHẢO SÁT THỜI GIAN TRÍCH LY ANOVA Table for Flavonoid by Thoi gian trich ly Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 57.7703 14.4426 3710.96 0.0000 Within groups 0.0389187 10 0.00389187 Total (Corr.) 57.8092 14 Multiple Range Tests for Flavonoid by Thoi gian trich ly -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -10 8.522 X 20 8.88633 X 50 12.2127 X 40 12.7897 X 30 13.0023 X -Contrast Difference +/- Limits -10 - 20 *-0.364333 0.113495 HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp XII 10 - 30 *-4.48033 0.113495 10 - 40 *-4.26767 0.113495 10 - 50 *-3.69067 0.113495 20 - 30 *-4.116 0.113495 20 - 40 *-3.90333 0.113495 20 - 50 *-3.32633 0.113495 30 - 40 *0.212667 0.113495 30 - 50 *0.789667 0.113495 40 - 50 *0.577 0.113495 -* denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Polyphenol by Thoi gian trich ly Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1797.84 449.461 9821.11 0.0000 Within groups 0.457647 10 0.0457647 Total (Corr.) 1798.3 14 Multiple Range Tests for Polyphenol by Thoi gian trich ly -Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups -10 75.808 X 20 77.8267 X 50 79.573 X 30 86.4523 X 40 105.78 X -Contrast Difference +/- Limits -10 - 20 *-2.01867 0.389191 10 - 30 *-10.6443 0.389191 10 - 40 *-29.972 0.389191 10 - 50 *-3.765 0.389191 20 - 30 *-8.62567 0.389191 20 - 40 *-27.9533 0.389191 20 - 50 *-1.74633 0.389191 30 - 40 *-19.3277 0.389191 30 - 50 *6.87933 0.389191 40 - 50 *26.207 0.389191 -* denotes a statistically significant difference HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp XIII LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ tên: Nguyễn Thị Ngọc Mai Nơi sinh: An Giang Ngày, tháng, năm sinh: 06 – 02 – 1987 Địa liên lạc: Ấp Phú Hòa, xã Phú Hữu, huyện An Phú, tỉnh An Giang QUÁ TRÌNH ĐÀO TẠO 2006 – 2010: Học đại học Trường Đại học Kỹ thuật Công nghệ TP Hồ Chí Minh 2011 – 2013: Học cao học Trường Đại học Bách Khoa TP Hồ Chí Minh BÀI BÁO CÔNG BỐ “NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT PHÂN ĐOẠN CAO CHIẾT CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA TỪ LÁ SEN (Nelumbo nucifera Gaertn)” HVTH: Nguyễn Thị Ngọc Mai GVHD: TS Ngô Đại Nghiệp ... TÀI: Nghiên cứu tách chiết phân đoạn cao chiết có hoạt tính kháng oxy hóa từ sen (Nelumbo nucifera Gaertn) NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Nghiên cứu tách chiết hợp chất có hoạt tính kháng oxy hóa sen xác... hoạt tính kháng oxy hóa hợp chất hướng đến sử dụng sen công nghiệp giải khát 1.6 Kết dự kiến Thu phân đoạn cao chiết có hoạt tính kháng oxy hóa từ sen chứng minh có mặt hợp chất kháng oxy hóa cao. .. nghiên cứu trƣớc Đã có nhiều cơng trình nghiên cứu tách chiết thành phần polyphenol kiểm tra hoạt tính từ phần sen lá, thân rễ, đài sen 2.3.1 Nghiên cứu sen Nhiều cơng trình nghiên cứu tách chiết