Mục tiêu của nghiên cứu này nhằm đánh giá tác dụng bảo vệ tế bào NG 108-15 của hỗn hợp cao chiết từ các dược liệu bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm, đương quy so sánh với cao bạch quả riêng lẻ. Đối chứng dương được dùng trong nghiên cứu này là cao chiết bạch quả. Trong nghiên cứu này, đầu tiên chúng tôi tiến hành thăm dò để lựa chọn được nồng độ H2O2 và nồng độ mẫu nghiên cứu phù hợp.
www.vanlongco.com dependence, WHO Press, pp 5-7, 38-47 Doosti F., Dashti S., Tabatabai S M., Hosseinzadeh H (2013), Traditional Chinese and Indian medicine in the treatment of opioid-dependence: a review, Avicenna Journal of Phytomedicine, 3(3), 205215 Maleki N A., Maleki S A., Bekhradi R (2013), Suppressive effects of Rosa damascena essential oil on naloxoneprecipitated morphine ưithdrawal signs in male mice, Iranian Journal of Pharmaceutical Research, 12(3), 357-361 Broseta I., Rodríguez-Arias M., Stinus O L., Miđarro J (2002), Ethological analysis of morphine withdrawal with different dependence programs in male mice, Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry, 26(2), 335-347 Rafael M., Luis S., George F K (1996), Neurobiological Mechanisms of Opiate Withdrawal, Springer-Verlag, Heidelberg, Germany, 11-91 Xiang X H., Wang H L., Wu W R., Guo Y., Cao D Y., Wang H S., Zhao Y (2006), Ethological analysis of scopolamine treatment or pretreatment in morphine dependent rats, Elsevier, 88(2006), 183-190 Gellert VF, Holtzman SG (1978), Development and maintenance of morphine tolerance and dependence in the rat by scheduled access to morphine drinking solutions, Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 205(3), 536-546 Maldonado R., Micó J A., Valverde O., Saavedra M C., Leonsequi I., Gibert-Rahola J (1991), Influence of different benzodiazepines on the experimental morphine abstinence syndrome, Psychopharmacology, 105(2), 197-203 10 Suzuki T., Tsuda M., Narita M., Funada M., Mizoquchi H., Misawa M (1996), Diazepam pretreatment suppresses morphine withdrawal signs in the mouse, Elsevier, 58(4), 349-357 Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 (Trang 104 - 109) TÁC DỤNG BẢO VỆ TẾ BÀO THẦN KINH CỦA HỖN HỢP CAO CHIẾT TỪ CÁC DƯỢC LIỆU BẠCH QUẢ, HOÀNG KỲ, ĐAN SÂM, ĐƯƠNG QUY SO SÁNH VỚI CAO BẠCH QUẢ TRÊN DÒNG TẾ BÀO NG 108-15 Trần Việt Hùng1, Phạm Thị Nguyệt Hằng2,* Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương; 2Viện Dược liệu *Email: pnhang2004@yahoo.com (Nhận ngày 19 tháng năm 2017) Tóm tắt Mục tiêu nghiên cứu nhằm đánh giá tác dụng bảo vệ tế bào NG 108-15 hỗn hợp cao chiết từ dược liệu bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm, đương quy so sánh với cao bạch riêng lẻ Đối chứng dương dùng nghiên cứu cao chiết bạch Trong nghiên cứu này, chúng tơi tiến hành thăm dị để lựa chọn nồng độ H2O2 nồng độ mẫu nghiên cứu phù hợp Tiếp theo, đánh giá khả bảo vệ tế bào khỏi tổn thương gây H2O2 mẫu nghiên cứu cao chiết bạch thử nghiệm MTT Kết cho thấy mẫu nghiên cứu cao chiết bạch với liều từ 10-200 µg/ml có tác dụng bảo vệ tế bào khỏi tổn thương gây H2O2, phụ thuộc nồng độ Từ khóa: Bảo vệ tế bào thần kinh, NG108-15, Cao chiết bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm, đương quy, H2O2, MTT Summary Neuroprotective Effect of Combined Crude Extracts (Ginkgo biloba Lin., Radix Astragali, Radix Salviae miltiorhizae, Radix Angelicae sinensis) in Comparison with Ginkgo biloba Extract Against H2O2-Induced NG108-15 Cells Damage The aim of this study is to evaluate the neuroprotective effect of combined crude extracts, including Ginkgo biloba Lin., Radix Astragali, Radix Salviae miltiorhizae and Radix Angelicae sinensis by measuring the protection of neuroblastoma cells from H2O2-induced oxidative injury Ginkgo biloba extract was used as positive control We first conducted to investigate the concentrations of H2O2, combined crude extract and Ginkgo biloba extract for this study Next, the neuroprotective effect of combined crude extract and Ginkgo biloba extract were assessed by measuring the cell viability and protection against H2O2induced damage cells by MTT assay The results showed that both combined crude extract and the Ginkgo biloba extract at the concentration of 10-200 µg/ml were concentration-dependently effective in protecting the cells from H 2O2-induced injury Keywords: Neuroprotective activity, NG108-15 cells, Crude extracts of Ginkgo biloba Lin., Radix Astragali, Radix Salviae miltiorhizae, Radix Angelicae sinensis, MTT assay Đặt vấn đề Rối loạn thoái hóa thần kinh não nguyên nhân dẫn đến suy giảm trí nhớ/nhận thức vận động quần thể 104 người già, Alzheimer, Parkinson Huntington bệnh chiếm tỷ lệ cao [1] Các bệnh thường xuất giai đoạn trung niên giai đoạn sau 60 tuổi Bệnh thối Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 www.vanlongco.com hóa thần kinh khơng thuộc mức độ cấp tính hay gây tử vong tức bệnh tăng lên từ từ không ngừng Người bệnh khả tự lập, sống phụ thuộc vào gia đình cần trợ giúp xã hội, tạo gánh nặng cho cộng đồng Tỷ lệ bệnh nhân Parkinson chiếm khoảng 6,3 triệu người giới, bệnh thường xuất độ tuổi sau 60 Bệnh nhân không điều trị bị tàn phế sớm tử vong Bệnh Alzheimer xuất độ tuổi sớm (khoảng từ 45 đến 60 tuổi), tỷ lệ mắc thấp so với Parkinson, nhiên người ta thấy tỷ lệ mắc bệnh tăng dần theo thời gian Bệnh Huntington tiến triển sớm (khoảng từ 35-40 tuổi) cho có khả di truyền cao Hiện chưa có phương pháp điều trị hiệu cho bệnh thối hóa thần kinh Do việc nghiên cứu thuốc/sản phẩm có tác dụng bảo vệ thối hóa thần kinh hứa hẹn nghiên cứu phát thuốc điều trị bệnh Dược liệu sử dụng làm thuốc y học cổ truyền ngăn chặn/điều trị rối loạn thối hóa thần kinh Rất nhiều nghiên cứu chứng minh cao chiết từ dược liệu chất phân lập từ dược liệu có hoạt tính bảo vệ tế bào thần kinh Đáng ý số dược liệu bạch quả, nghệ, gừng, chè xanh, cà phê, quế, nghệ tây Nhóm chất phân lập từ dược liệu kể biết đến monoterpen, sesquiterpen, triterpen, alcaloid, flavonoid lignin [2, 3] Mục tiêu nghiên cứu nhằm đánh giá tác dụng bảo vệ thần kinh kháng stress oxy hóa gây H2O2 tế bào NG 108-15 hỗn hợp cao chiết từ dược liệu bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm, đương quy so sánh với cao bạch Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng, hóa chất, ngun vật liệu - Dịng tế bào: Tế bào NG108-15 Giáo sư Michihisa Tohda, Trường Đại học Toyama, Nhật Bản cung cấp - Mẫu nghiên cứu hỗn hợp cao chiết từ dược liệu bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm đương quy so sánh với cao bạch quả, cung cấp từ Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 đề tài cấp Sở khoa học Công nghệ thành phố Hà Nội “Nghiên cứu bào chế đánh giá tác dụng hoạt huyết thực nghiệm hỗn hợp cao chiết bào chế từ dược liệu bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm đương quy” PGS.TS Trần Việt Hùng làm chủ nhiệm đề tài năm 2011 - Mẫu đối chiếu: Cao chiết bạch thành phần đơn lẻ hỗn hợp cao chiết Cả mẫu nghiên cứu mẫu đối chiếu hòa tan dung dịch DMSO, đảm bảo nồng độ dung dịch DMSO tế bào 0,25% - Máy móc trang thiết bị: Tủ nuôi cấy tế bào Sanyo (Nhật Bản), tủ lạnh -80oC, máy đọc ELISA hãng Themo (Đức), máy ly tâm, bể nước gia nhiệt máy móc khác… - Hóa chất: mơi trường ni cấy Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM) huyết thai bê (In vitrogen); hypoxanthin, aminopterin thymidin (Wako); [3-(4,5Dimethylthiazol-2,5-diphenyltetrazolium bromid] - MTT (Sigma) hóa chất khác… 2.2 Phương pháp nghiên c u - Nuôi cấy tế bào: Tế bào NG 108-15 ni cấy mơi trường DMEM có chứa 100 μM hypoxanthine, μM aminopterin, 16 μM thymidine 10% huyết thai bê Tế bào trì điều kiện 5% CO2, 95% khơng khí, 37oC Sau tế bào đạt đến pha log, tiến hành gặt tế bào cấy trải tế bào đĩa 96 giếng, với nồng độ 2x104 tế bào/giếng - Thăm dò nồng độ H2O2: Tế bào cấy trải đĩa 96 giếng nuôi cấy 48 xử lý H2O2 với nồng độ khác (50, 100, 200, 400, 800 µM) tiếp tục đươc nuôi cấy Mỗi nồng độ đánh giá ba giếng Cuối c ng, đánh giá khả sống sót tế bào thử nghiệm MTT [4] - Thử mẫu nghiên cứu: Sau 48 nuôi cấy, tế bào xử lý mẫu thử mẫu đối chiếu nồng độ khác (10, 100, 150 200 µg/ml) giờ, sau thêm H2O2 nồng độ 100 µM (pha đệm phosphat 0,1 M, pH 7,4) Tiếp tục ủ tế bào Cuối c ng đánh giá khả sống sót tế bào thử nghiệm MTT 105 www.vanlongco.com - Đánh giá khả sống sót tế bào: khả sống sót tế bào thần kinh sau thử thuốc nghiên cứu H2O2 đánh giá thử nghiệm MTT Cách tiến hành: Tế bào xử lý dung dịch MTT Sự tạo thành dạng tinh thể formazan tím hịa tan DMSO đo bước sóng 540 nm sử dụng máy đọc ELISA Khả sống sót tế bào tính theo cơng thức: % tế bào sống = [OD540 tế bào xử lý mẫu thử]/ [OD540 tế bào không xử lý mẫu thử] x 100 - Thí nghiệm tiến hành lặp lại lần Kết tính giá trị trung bình ± SEM tất nhóm nghiên cứu Kết bàn luận 3.1 Ảnh hưởng H2O2 khả sống sót tế bào NG 108-15 Tế bào NG 108-15 dạng lai u thần kinh đệm chuột cống (glioma C6BU) u nguyên bào thần kinh (neuroblastoma N18TG2) chuột nhắt Dòng tế bào sử dụng rộng rãi mơ hình nghiên cứu thần kinh sinh lý điện nghiên cứu dược lý Sau ủ tế bào với H2O2 nồng độ khác nhau, đánh giá khả sống sót tế bào thử nghiệm MTT Kết Hình cho thấy: Ở nồng độ 50 µM H2O2 không gây chết cho tế bào Nồng độ 100 – 800 µM H2O2 gây chết tế bào phụ thuộc vào nồng độ, với tỷ lệ sống sót tế bào 57,3%; 56,0%; 31,0% 31,0% Hình Ảnh hưởng H2O2 khả sống sót tế bào NG 108-15 106 Trong nghiên cứu này, H2O2 lựa chọn để gây tổn thương tế bào H2O2 tác nhân quan trọng gây chết tế bào thần kinh cho đóng vai trị tiến triển nhiều bệnh thối hóa thần kinh H2O2 tiền chất oxy hóa mạnh, gây tổn thương tổ chức mơ giống gốc tự •OH gây độc nhiều quan Trong số gốc tự có chứa oxy H2O2 đóng vai trị quan trọng tạo từ hầu hết nguồn stress oxy hóa H2O2 ngoại sinh vào tế bào gây độc tính thấm qua màng mạnh [5] Sự cân hình thành gốc tự gốc oxy phản ứng chế chống oxy hóa nội sinh thể chứng minh có liên quan đến bệnh thối hóa thần kinh bệnh Alzheimer, Parkinson, Huntington, tâm thần phân liệt, xơ vữa động mạch… Các gốc oxy tự gây tổn thương acid nucleic, protein, thúc đẩy kết tập bất thường protein cytoskelet, bất hoạt enzym chuyển hóa kích thích rối loạn chức ty thể tạo thành gốc nitơ phản ứng dẫn đến tạo thành stress oxy hóa [6, 7] Do vậy, tăng khả chống oxy hóa kết hợp với việc bảo vệ chống thối hóa thần kinh [8] 3.2 Tác dụng thuốc khả sống sót tế bào NG 108-15 Để nghiên cứu tác dụng bảo vệ tế bào mẫu nghiên cứu, tiến hành đánh giá tác dụng mẫu thử tế bào không bị xử lý H2O2 Nồng độ mẫu nghiên cứu mẫu đối chiếu sử dụng 10, 100, 150 200 µg/ml Kết cho thấy: - Mẫu nghiên cứu không độc tế bào nồng độ 10 100 µg/ml, với tỷ lệ phần trăm sống sót tế bào 102,7% 92,4% Tuy nhiên nồng độ 150 200 µg/ml, mẫu thử có tác dụng kích thích tăng sinh tế bào, với tỷ lệ phần trăm sống sót 153,2% 156,5% (Hình 2A) - Mẫu đối chiếu cao chiết bạch cho thấy tác dụng kích thích tăng sinh tế bào NG 108-15 phụ thuộc nồng độ, với tỷ lệ phần trăm sống sót 132,7%; 150,0%; 193,2% 224,1% (Hình 2B) Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 www.vanlongco.com Hình Ảnh hưởng mẫu nghiên cứu (A) cao chiết bạch (B) khả sống sót tế bào NG 108-15 3.3 Tác dụng bảo vệ tế bào NG 108-15 mẫu nghiên c u Sau thăm dò ảnh hưởng H2O2 khả sống sót tế bào thần kinh, lựa chọn nồng độ 100 µM làm nồng độ gây tổn thương tế bào để thử thuốc Kết cho thấy: - Ở nồng độ 100 µM, H2O2 cịn 55% số lượng tế bào NG 108-15 sống sót - Tế bào NG 108-15 sau gây tổn thương 100 µM H2O2 điều trị mẫu nghiên cứu với dải nồng độ từ 10 đến 200 µg/ml có tác dụng bảo vệ tế bào tránh khỏi tổn thương phụ thuộc nồng độ, với tỷ lệ sống sót 70,0%; 92,7%; 140,8% 135,1% (Hình 3A) - Cao chiết bạch sử dụng làm mẫu đối chiếu, có tác dụng bảo vệ tế bào khỏi tổn thương gây H2O2 mà cịn kích thích mạnh khả tăng sinh, phụ thuộc vào nồng độ (10-200 µg/ml), với tỷ lệ sống sót tế bào 126,8%; 139,2%; 144,6% 191,9% (Hình 3B) Hình Ảnh hưởng mẫu nghiên cứu (A) cao chiết bạch (B) tế bào NG 109-15 bị tổn thương H2O2 Bạch có tên khoa học Ginkgo biloba Lin., Họ Bạch Quả (Ginkgoaceae) Bạch phân bố chủ yếu Trung Quốc, số Nhật Bản Bộ phận dùng làm thuốc phơi hay sấy khô Lá bạch chứa hai nhóm hoạt chất: hợp chất flavonoid (quercetin, kaempferol isorhamnetin) terpen Cao Bạch tiêu chuẩn hóa dùng y học điều trị triệu chứng thiểu tuần hoàn não nhẹ vừa (hội chứng sa sút trí tuệ) thối hóa tiên phát, sa sút trí tuệ tuần hồn kết hợp hai dạng với triệu chứng: Suy giảm trí Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 nhớ, rối loạn tập trung, tâm trạng trầm cảm, chóng mặt, ù tai nhức đầu Rất nhiều cơng trình nghiên cứu giới chứng minh cao chuẩn hóa từ bạch có tác dụng bảo vệ tế bào thần kinh khỏi tổn thương thiếu máu não in vivo; bảo vệ tế bào thần kinh khỏi tổn thương H2O2 in vitro, dọn gốc tự do; giảm stress oxy hóa [9, 10] Như vậy, kết nghiên cứu chúng tơi hồn tồn phù hợp với cơng trình nghiên cứu giới chứng minh Hồng kỳ (Radix Astragali) rễ củ phơi hay sấy khô hoàng kỳ - Astragalus 107 www.vanlongco.com membranaceus (Fisch.) Bunge., thuộc họ Đậu (Fabaceae) Hoàng kỳ chứa saccharose, glucose, tinh bột, chất nhầy, gơm; cịn có cholin, betain, nhiều loại acid amin, calycosin, astragalosid I-V, III Một số nghiên cứu giới chứng minh astragalosid IV có tác dụng bảo vệ tế bào thần kinh, chống đột quỵ thơng qua chế chống oxy hóa, chống viêm chống apoptosis [11] Đan sâm (Radix Salviae multiorhizae) rễ phơi hay sấy khô đan sâm, Salvia multiorrhiza Bunge, họ Hoa mơi (Lamiaceae) Đan sâm có chất ceton tanshinon I, - II – III Đan sâm chứng minh có tác dụng giảm rối loạn tuần hoàn vi mạch, làm giãn động mạch tĩnh mạch nhỏ, mao mạch, tăng tuần hoàn vi mạch Tanshinon II hoạt chất đan sâm, có tác dụng làm giảm kích thước nhồi máu tim cấp Ngồi ra, đan sâm cịn có tác dụng chống oxy hóa, loại bỏ gốc tự có hại cho thể Đương quy (Radix Angelicae sinensis) rễ phơi hay sấy khô đương quy, Angelica sinensis (Oliv.) Diels, thuộc họ Hoa tán (Apiaceae) Rễ đương quy chứa tinh dầu 0,2%, có 40% acid tự Tinh dầu gồm có thành phần chủ yếu sau: Ligustilid, n-butyliden phthalid, O-valerophenon acid carbocylic, bergapten, dodecanol, tetradecanol, safrol, pcymen, carvacrol, cadinen Đương quy biết đến với công dụng hoạt huyết, bổ huyết, thơng mạch; Giảm rối loạn tuần hồn vi mạch, làm giãn động mạch tĩnh mạch nhỏ, mao mạch Được sử dụng hội chứng huyết hư, thiếu máu, đặc biệt chứng can huyết hư – thường gặp người già xơ cứng động mạch, cao huyết áp Nghiên cứu dược lý đại chứng minh đương quy có tác dụng chống oxy hóa, giảm nhồi máu, phù não cải thiện suy giảm trí nhớ/nhận thức mơ hình động vật thiếu máu não cục [12] Kết nghiên cứu cho thấy không riêng cao chiết bạch mà hỗn hợp cao chiết từ dược liệu liệu kể có tác dụng bảo vệ tế bào khỏi tổn thương gây H2O2 Kết luận Từ kết rút kết luận sau: Hỗn hợp cao chiết từ dược liệu bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm, đương quy; cao chiết bạch riêng lẻ có tác dụng bảo vệ tế bào khỏi tổn thương gây H2O2, nồng độ nghiên cứu từ 10-200 µg/ml Lời cảm ơn: Kết thu nghiên c u sản phẩm đề tài cấp Sở khoa học Công nghệ thành phố Hà Nội “Nghiên c u bào chế đánh giá tác dụng hoạt huyết thực nghiệm hỗn hợp cao chiết bào chế từ dược liệu bạch quả, hoàng kỳ, đan sâm đương quy”, 2011 Nhóm tác giả xin chân thành cảm ơn tài trợ kinh phí nghiên c u Sở khoa học Công nghệ thành phố Hà Nội Tài liệu tham khảo Brookmeyer R., Johnson E Ziegler-Graham K., Arrighi H M (2007) Forecasting the global burden of Alzheimer’s disease, Alzheimer's & Dementia, 3(3), 186-191 Praseetha P K., Pratheeba P., Somasundaram L., Sakthivel G (2016), Plant based indian traditional medicine for neurodegenerative diseases - a novel Approach to treat Alzheimer, International Journal of Pharma and Bio Sciences, 7(4), 83 – 92 Adams M., Gmünder F., Hamburger M (2007), Plants traditionally used in age related brain disorders—A survey of ethnobotanical literature, Journal of Ethnopharmacology, 113(3), 363-381 Mosmann T (1983), Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays, Journal of Immunological Methods, 65(1-2), 55-63 Kawpoomhae K., Sukma M., Ngawhirunpat T., Opanasopit P., Sripattan A (2010), Antioxidant and neuroprotective effects of standardized extracts of Mangifera indica leaf, Thai Journal of Pharmaceutical Sciences, 34(1), 32-43 Yan M H., Wang X., Zhu X (2013), Mitochondrial defects and oxidative stress in Alzheimer disease and Parkinson disease, Free Radical Biology and Medicine, 62, 90-101 Bayir H A., Kapralov A., Jiang J., Huang Z., Tyurina Y Y., Tyurin V A., Zhao Q., Belikova N A., Vlasova II, Maeda A., Zhu J., Na H M., Mastroberardino P G., Sparvero L J., Amoscato A A., Chu C T., Greenamyre J T., Kagan VE (2009), Peroxidase mechanism of lipid-dependent cross-linking of synuclein with cytochrome C: Protection against apoptosis versus delayed oxidative stress in parkinson disease, Journal of Biological Chemistry, 284(23), 15951-15969 Henchcliffe C., Beal M F (2008), Mitochondrial biology and oxidative stress in Parkinson disease pathogenesis, Nature Clinical Practice Neurology, 4(11), 600-609 Jiang X., Nie B., Fu S., Hu J., Yin L., Lin L., Wang X., Lu P., Xu X M (2009), EGb761 Protects hydrogen peroxide-induced death of spinal cord neurons through inhibition of intracellular ROS production and modulation of apoptotic regulating genes, Journal of Molecular Neuroscience, 38(2), 103-113 10 Mechírová E., Domoráková I., 108 Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 www.vanlongco.com Danková M., Danielisová V., Burda J (2009), Effect of noradrenalin and EGb 761 pretreatment on the ischemia-reperfusion injured spinal cord neurons in rabbits, Cellular and Molecular Neurobiology, 29(6-7), 991-998 11 Wang H L,, Zhou Q, H,, Xu M, B,, Zhou X, L,, Zheng G, Q, (2017), Astragaloside IV for experimental focal cerebral ischemia: Preclinical evidence and possible mechanisms, Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 1-13 12 Kuang X., Yao Y., Du J R., Liu Y X., Wang C Y., Qian Z M (2006), Neuroprotective role of Z-ligustilide against forebrain ischemic injury in ICR mice, Brain Research, 1102(1), 145-153 Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 (Trang 109 - 113) KHẢO SÁT TÁC DỤNG CỦA CÁC BỘT CHIẾT TỪ SÂM VIỆT NAM TRỒNG TRÊN SỰ RÚT NGẮN GIẤC NGỦ PENTOBARBITAL GÂY BỞI STRESS CÔ LẬP Dương Hồng Tố Quyên1, Nguyễn Thị Thu Hương2, Nguyễn Minh Đức3,4,* Bệnh viện Y Học Cổ Truyền Hồ Chí Minh, 2Trung tâm Sâm Dược liệu Hồ Chí Minh Khoa Dược, Đại học Y Dược Hồ Chí Minh, 4Khoa Dược, Đại học Tơn Đức Thắng Hồ Chí Minh *Email: ducng@hcm.vnn.vn (Nhận ngày 14 tháng năm 2017) Tóm tắt Sâm Việt Nam (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) với thành phần hóa học chủ yếu saponin, đặc biệt majonosid R2 saponin thuộc nhóm occotilol Trước có nghiên cứu chứng minh sâm Việt Nam hoang dại majonosid R2 có tác dụng tăng lực, chống stress, chống trầm cảm, chống oxy hóa, giúp giấc ngủ tốt Mục đích nghiên cứu đánh giá tác dụng bột chiết cồn 45% từ sâm Việt Nam trồng tuổi rút ngắn giấc ngủ pentobarbital gây stress cô lập Đồng thời so sánh tác dụng với bột chiết cồn 45% từ nhân sâm trồng tuổi Kết cho thấy bột chiết sâm Việt Nam trồng năm tuổi ba liều thử nghiệm 50 mg/kg, 100 mg/kg 200 mg/kg kéo dài thời gian ngủ pentobarbital tương ứng 60,6% với p < 0,01, 114,8% (p < 0,05) 32% (p < 0,05) so với lô chứng stress Bột chiết nhân sâm có liều 50 mg/kg có tác dụng kéo dài thời gian ngủ pentobarbital 61,7% (p < 0,05) so với lô chứng stress Bột chiết nhân sâm liều 100, 200 mg/kg chưa thể tác dụng điển hình Từ khóa: Sâm Việt Nam trồng, Nhân sâm, Pentobarbital, Stress cô lập, Panax vietnamensis, P.ginseng Summary Study on the Effect of Cultivated Vietnamese Ginseng Extracts on Social Isolation Stress–Induced Decrease in Pentobarbital Sleeping Time in Mice Many previous studies revealed that wild Vietnamese ginseng (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) has many saponin constituents, expecially the major occotilol-type saponin majonoside R2 which has more characteristic effects such as antifatigue, anti-stress, anti-depression, and antioxidant effects, causing better sleep The aim of this study is to investigate effect of six-year-old cultivated Vietnamese ginseng 45% ethanol extract on social isolation stress-induced decrease in sleeping time Sixyear-old cultivated Panax ginseng extract was used as reference extract The results indicated that Vietnamese ginseng extract at doses of 50, 100, and 200 mg/kg lengthened pentobarbital sleeping time in socially isolated mice by 60.6%, 114.8%, and 32% respectively compared with untreated stress control Only cultivated Panax ginseng extract at dose of 50 mg/kg exhibits the increase in the pentobarbital-induced sleep, while doses of 100 and 200 mg/kg presents no considerable effects Keywords: Cultivated Vietnamese ginseng, Panax ginseng, Pentobarbital, Social isolation stress Đặt vấn đề Stress nguyên nhân gây chứng trầm cảm rối loạn lo âu, rối loạn giấc ngủ Sâm Việt Nam (Panax vietnamensis Ha et Grushv., thuộc họ Nhân sâm-Araliaceae), chứng minh có tác dụng bổ, tăng lực, chống stress điều hòa chức biến dưỡng thể [1] Tuy nhiên, nguồn sâm Việt Nam hoang dại gần cạn kiệt, đa số Tạp chí Dược liệu, tập 22, số 2/2017 nguồn sâm Việt Nam thị trường chủ yếu từ trồng trọt Nhưng chưa có nghiên cứu có hệ thống tác dụng dược lý sâm Việt Nam trồng, quy kết nghiên cứu trước sâm Việt Nam hoang dại cho sâm trồng khơng thuyết phục Do đó, mục đích nghiên cứu đánh giá tác dụng chống stress sâm Việt Nam trồng rút ngắn giấc ngủ pentobarbital gây stress 109 ... tế bào NG 108-15 hỗn hợp cao chiết từ dược liệu bạch quả, ho? ?ng kỳ, đan sâm, đư? ?ng quy so sánh với cao bạch Đối tư? ?ng phư? ?ng pháp nghiên cứu 2.1 Đối tư? ?ng, hóa chất, ngun vật liệu - D? ?ng tế bào: ... kết luận sau: Hỗn hợp cao chiết từ dược liệu bạch quả, ho? ?ng kỳ, đan sâm, đư? ?ng quy; cao chiết bạch ri? ?ng lẻ có tác d? ?ng bảo vệ tế bào khỏi tổn thư? ?ng gây H2O2, n? ?ng độ nghiên cứu từ 10-200 µg/ml... bào: Tế bào NG1 08-15 Giáo sư Michihisa Tohda, Trư? ?ng Đại học Toyama, Nhật Bản cung cấp - Mẫu nghiên cứu hỗn hợp cao chiết từ dược liệu bạch quả, ho? ?ng kỳ, đan sâm đư? ?ng quy so sánh với cao bạch quả,