Ảnh hưởng của tinh dầu đến khả năng lưu giữ và bảo quản một số loại cây rau

MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU 1 1. Tổng quan tinh dầu 2 1.1. Khái niệm về tinh dầu 2 1.2. Phương pháp sản xuất tinh dầu 9 1.3. Phân loại tinh dầu 11 1.3.1. Phân loại tinh dầu theo nguồn gốc 11 1.3.2. Phân loại tinh dầu theo thành phần hoá học 11 1.4. Các đặc tính của tinh dầu 12 1.4.1. Hoạt tính kháng khuẩn của tinh dầu 12 1.4.2. Hoạt tính kháng nấm của tinh dầu 16 1.4.3. Hoạt tính chống oxy hóa của tinh dầu 17 1.5. Ứng dụng của tinh dầu trong các lĩnh vực 18 2. Ứng dụng của tinh dầu trong bảo quản thực phẩm 29 2.1. Các đặc tính của tinh dầu đối với việc bảo quản thực phẩm 29 2.2. Ứng dụng việc bảo quản tinh dầu đối với một số loại thực phẩm 33 3. Ảnh hưởng của tinh dầu trong lưu trữ và bảo quản rau củ quả 41 3.1. Phương pháp bảo quản thay thế chống thối củ bởi hạch nấm của Atiso Jerusalem bằng cách sử dụng tinh dầu tự nhiên 41 3.1.1. Vấn đề thối củ Atiso Jerusalem bởi nấm Sclerotium 42 3.1.2. Cơ sở phương pháp luận 43 3.1.3. Những kết quả quan trọng 44 3.2. Ức chế sự phát triển của mầm và tăng khả năng bảo quản của quá trình chế biến khoai tây bằng chất kháng khuẩn 55 3.2.1. Các vấn đề thường gặp trong bảo quản khoai tây 55 3.2.2. Thí nghiệm trên nguyên liệu khoai tây 56 3.2.3. Phương pháp xử lý 57 3.2.4. Kết quả và bàn luận 61 3.3. Tăng hàm lượng chất chống oxy hóa của mầm bông cải xanh bằng cách sử dụng tinh dầu trong quá trình bảo quản lạnh. 65 3.3.1. Phương pháp 65 3.3.2. Kết quả và bàn luận 67 3.4. Ứng dụng các chất chiết xuất từ thực vật để kiểm soát nấm mốc xám sau thu hoạch và khả năng nhạy cảm của táo với B. cinerea từ các ký chủ thực vật khác nhau 73 3.4.1. Các vấn đề rau quả với nấm B.cinerea 73 3.4.2. Phương pháp và vật liệu 75 3.4.3. Kết quả 78 3.5. Ứng dụng tinh dầu tổng hợp trong bảo quản rau củ 79 4. Đánh giá phương pháp bảo quản bằng tinh dầu trong bảo quản rau củ quả. 81 KẾT LUẬN 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 84   DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Một số loại tinh dầu và thành phần của chúng 9 Bảng 2: Hoạt tính kháng khuẩn của một số họ thực vật có chứa tinh dầu 16 Bảng 3: Các loại tinh dầu và vai trò của chúng 29 Bảng 4: Mức độ nghiêm trọng thối củ trung bình (%) của củ JA được xử lý bằng tinh dầu caraway và bị nhiễm S. rolfsii bằng hai phương pháp bảo quản 47 Bảng 5: Mức độ nảy mầm, giảm khối lượng và trọng lượng chất khô trung bình (%±2SD) của củ JA được xử lý bằng tinh dầu caraway và nhiễm S. rolfsii bằng hai phương pháp bảo quản. 50 Bảng 6: Hàm lượng trung bình của carbohydrate, inulin (mgg ± 2SD) và protein (%±2SD) của củ JA được xử lý bằng tinh dầu caraway và bị nhiễm S. rolfsii bằng hai phương pháp bảo quản. 52 Bảng 7: Hoạt động trung bình của các enzym peroxidase, polyphenoloxidase và hàm lượng phenol (% ± 2SD) của củ JA được xử lý bằng tinh dầu caraway và bị nhiễm S. rolfsii bằng hai phương pháp bảo quản. 55 Bảng 8: Đặc điểm nảy mầm và chất khô của khoai tây bằng chất chống nảy mầm trong mùa vụ 2012 – 2013 sau 4 tháng bảo quản. 62 Bảng 9: Đường khử, acid amin, peroxidase của khoai tây khi sử dụng chất chống nảy mầm trong mùa vụ 2012 – 2013 sau 4 tháng bảo quản. 63 Bảng 10: Chất lượng của sản phẩm khoai tây được xử lý bằng chất chống mọc mầm trong mùa vụ 2012 – 2013 sau khi bảo quản 4 tháng 64 Bảng 11: Đặc tính sinh dưỡng của hạt bông cải xanh đã qua xử lý với các loại tinh dầu khác nhau trước khi bảo quản lạnh 66 Bảng 12: Sàng lọc thực vật bằng GLC đối với mầm bông cải xanh 3 ngày tuổi được sản xuất từ hạt đã qua xử lý với tinh dầu trước khi bảo quản lạnh. 67 Bảng 13: Sự ức chế phát triển sợi nấm của B.cinerea trên táo bằng các chiết xuất khác nhau so với mẫu đối chứng ở thời điểm 7 ngày sau khi cấy 78 Bảng 14: Tỷ lệ bệnh trên táo xử lý bằng dịch chiết ở 7 ngày sau khi cấy 78 DANH MỤC HÌNH Hình 1: Ví dụ về sesquiterpenes béo, đơn và hai vòng, hydrocacbon và oxy 6 Hình 2: Ví dụ về các monoterpen béo, đơn và hai vòng, hydrocacbon và oxy 7 Hình 3: Ví dụ về allyl và isoallyl phenols 8 Hình 4: Cây và củ của Atiso Jerusalem 42 Hình 5: Ảnh hưởng tinh dầu Caraway và Spearamint lên sự ức chế nấm sợi S.rolfsii 44 Hình 6: Hạt Caraway và tinh dầu 45 Hình 7: Mentha spicata (spearmint) 46 Hình 8: Rêu than bùn Sphagnum 49 Hình 9: Khoai tây đã mọc mầm 56 Hình 10: Solanin 56 Hình 11: Cymbopogon martini 57 Hình 12: Cymbopogon flexuosus 58 Hình 13: Cymbopogon Winterianus 58 Hình 14: Ocimum sanctum 59 Hình 15: Carum carvi 59 Hình 16: Artemisia annua 60 Hình 17: Lavendula officinalis 60 Hình 18: Tổng hàm lượng phenol bị ảnh hưởng bởi dầu cỏ xạ hương so với xử lý đối chứng ở các thời gian bảo quản khác nhau. 69 Hình 19: Khả năng thu gom tận gốc DPPH do bị ảnh hưởng bởi dầu cỏ xạ hương so với việc xử lý đối chứng ở các khoảng thời gian bảo quản khác nhau 70 Hình 20: Tổng hàm lượng flavonoid bị ảnh hưởng bởi dầu cỏ xạ hương so với xử lý đối chứng ở các thời gian bảo quản khác nhau 71 Hình 21: Tổng hàm lượng glucosinolate bị ảnh hưởng bởi dầu cỏ xạ hương so với điều trị đối chứng tại thời điểm 0 và 15 ngày 72 Hình 22: Mức glucosinolate tổng số và béo, thơmindole trong bông cải xanh ở mầm 3 ngày tuổi và trưởng thành khi thu hoạch. 73 Hình 23: Đường kính vết bệnh trên táo sau xử lý với nồng độ dịch chiết khác nhau 77 LỜI MỞ ĐẦU Tinh dầu là một lĩnh vực rất lớn và quan trọng của hợp chất thiên nhiên. Nghiên cứu tinh dầu sẽ góp phần phát triển hoá hữu cơ, đặc biệt sinh tổng hợp hữu cơ qua vi sinh vật, qua công nghệ biến đổi gen và nuôi cấy mô tế bào. Hơn nữa, nói đến tinh dầu là nói đến hương liệu, nói đến chất thơm, nói đến gia vị vì hầu hết tinh dầu phục vụ cho các lĩnh vực này và làm thuốc phục vụ cho đời sống. Việc nghiên cứu và phát triển tinh dầu trở thành ngành có nhiều tiềm năng và triển vọng và đặc biệt là ứng dụng của tinh dầu với ngành công nghệ thực phẩm nói riêng Bất kì một loại thực phẩm nào nếu bảo quản ở nhiệt độ phòng và điều kiện khí quyển bình thường đều sẽ giảm dần chất lượng và từ từ bị vi sinh vật xâm nhập dẫn đến thối rữa. Xuất phát từ những yêu cầu thực tiễn trong ngành công nghệ thực phẩm và bảo quản sau thu hoạch, con người cần tìm ra những cách bảo quản thịt, cá, rau củ quả phù hợp với từng điều kiện và tối ưu hoá nó. Với mong muốn trên cũng như hạn chế việc sử dụng các hóa chất trong bảo quản thực phẩm thì việc sử dụng tinh dầu là một phương pháp hiệu quả và an toàn. Đề tài tiểu luận của nhóm chúng em hôm nay sẽ thảo luận về đề tài “ẢNH HƯỞNG CỦA TINH DẦU ĐẾN KHẢ NĂNG LƯU GIỮ VÀ BẢO QUẢN MỘT SỐ LOẠI CÂY RAU”. Trong quá trình làm không tránh khỏi những sai sót mong cô góp ý và chỉnh sửa để bài tiểu luận trở nên hoàn thiện hơn.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA ĐÀO TẠO CHẤT LƯỢNG CAO - - TIỂU LUẬN MÔN HỌC: CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT RAU QUẢ VÀ NƯỚC GIẢI KHÁT ĐỀ TÀI: ẢNH HƯỞNG CỦA TINH DẦU ĐẾN KHẢ NĂNG LƯU GIỮ VÀ BẢO QUẢN MỘT SỐ LOẠI CÂY RAU GV hướng dẫn: Th.S Đặng Thị Ngọc Dung Nhóm (Lớp Thứ – Tiết 13_15) Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 12 năm 2020 ĐIỂM SỐ Tiêu chí Nội dung Bố cục Trình bày Tổng Điểm NHẬN XÉT Ký tên Th.S Đặng Thị Ngọc Dung MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU 1 Tổng quan tinh dầu 1.1 Khái niệm tinh dầu 1.2 Phương pháp sản xuất tinh dầu .9 1.3 Phân loại tinh dầu 11 1.3.1 Phân loại tinh dầu theo nguồn gốc 11 1.3.2 Phân loại tinh dầu theo thành phần hoá học 11 1.4 Các đặc tính tinh dầu .12 1.4.1 Hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu 12 1.4.2 Hoạt tính kháng nấm tinh dầu 16 1.4.3 Hoạt tính chống oxy hóa tinh dầu 17 1.5 Ứng dụng tinh dầu lĩnh vực 18 Ứng dụng tinh dầu bảo quản thực phẩm 29 2.1 Các đặc tính tinh dầu việc bảo quản thực phẩm .29 2.2 Ứng dụng việc bảo quản tinh dầu số loại thực phẩm .33 Ảnh hưởng tinh dầu lưu trữ bảo quản rau củ 41 3.1 Phương pháp bảo quản thay chống thối củ hạch nấm Atiso Jerusalem cách sử dụng tinh dầu tự nhiên 41 3.1.1 Vấn đề thối củ Atiso Jerusalem nấm Sclerotium .42 3.1.2 Cơ sở phương pháp luận 43 3.1.3 Những kết quan trọng 44 3.2 Ức chế phát triển mầm tăng khả bảo quản trình chế biến khoai tây chất kháng khuẩn 55 3.2.1 Các vấn đề thường gặp bảo quản khoai tây 55 3.2.2 Thí nghiệm nguyên liệu khoai tây 56 3.2.3 Phương pháp xử lý 57 3.2.4 Kết bàn luận 61 3.3 Tăng hàm lượng chất chống oxy hóa mầm bơng cải xanh cách sử dụng tinh dầu trình bảo quản lạnh 65 3.3.1 Phương pháp 65 3.3.2 Kết bàn luận 67 3.4 Ứng dụng chất chiết xuất từ thực vật để kiểm soát nấm mốc xám sau thu hoạch khả nhạy cảm táo với B cinerea từ ký chủ thực vật khác 73 3.4.1 Các vấn đề rau với nấm B.cinerea 73 3.4.2 Phương pháp vật liệu 75 3.4.3 Kết 78 3.5 Ứng dụng tinh dầu tổng hợp bảo quản rau củ 79 Đánh giá phương pháp bảo quản tinh dầu bảo quản rau củ 81 KẾT LUẬN 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 84 DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Một số loại tinh dầu thành phần chúng Bảng 2: Hoạt tính kháng khuẩn số họ thực vật có chứa tinh dầu 16 Bảng 3: Các loại tinh dầu vai trò chúng 29 Bảng 4: Mức độ nghiêm trọng thối củ trung bình (%) củ JA xử lý tinh dầu caraway bị nhiễm S rolfsii hai phương pháp bảo quản 47 Bảng 5: Mức độ nảy mầm, giảm khối lượng trọng lượng chất khơ trung bình (%±2SD) củ JA xử lý tinh dầu caraway nhiễm S rolfsii hai phương pháp bảo quản 50 Bảng 6: Hàm lượng trung bình carbohydrate, inulin (mg/g ± 2SD) protein (% ±2SD) củ JA xử lý tinh dầu caraway bị nhiễm S rolfsii hai phương pháp bảo quản 52 Bảng 7: Hoạt động trung bình enzym peroxidase, polyphenoloxidase hàm lượng phenol (% ± 2SD) củ JA xử lý tinh dầu caraway bị nhiễm S rolfsii hai phương pháp bảo quản 55 Bảng 8: Đặc điểm nảy mầm chất khô khoai tây chất chống nảy mầm mùa vụ 2012 – 2013 sau tháng bảo quản .62 Bảng 9: Đường khử, acid amin, peroxidase khoai tây sử dụng chất chống nảy mầm mùa vụ 2012 – 2013 sau tháng bảo quản 63 Bảng 10: Chất lượng sản phẩm khoai tây xử lý chất chống mọc mầm mùa vụ 2012 – 2013 sau bảo quản tháng .64 Bảng 11: Đặc tính sinh dưỡng hạt bơng cải xanh qua xử lý với loại tinh dầu khác trước bảo quản lạnh 66 Bảng 12: Sàng lọc thực vật GLC mầm cải xanh ngày tuổi sản xuất từ hạt qua xử lý với tinh dầu trước bảo quản lạnh 67 Bảng 13: Sự ức chế phát triển sợi nấm B.cinerea táo chiết xuất khác so với mẫu đối chứng thời điểm ngày sau cấy 78 Bảng 14: Tỷ lệ bệnh táo xử lý dịch chiết ngày sau cấy .78 DANH MỤC HÌN Hình 1: Ví dụ sesquiterpenes béo, đơn hai vịng, hydrocacbon oxy Hình 2: Ví dụ monoterpen béo, đơn hai vòng, hydrocacbon oxy Hình 3: Ví dụ allyl isoallyl phenols Hình 4: Cây củ Atiso Jerusalem 42 Hình 5: Ảnh hưởng tinh dầu Caraway Spearamint lên ức chế nấm sợi S.rolfsii 44 Hình 6: Hạt Caraway tinh dầu 45 Hình 7: Mentha spicata (spearmint) .46 Hình 8: Rêu than bùn Sphagnum 49 Hình 9: Khoai tây mọc mầm 56 Hình 10: Solanin 56 Hình 11: Cymbopogon martini .57 Hình 12: Cymbopogon flexuosus 58 Hình 13: Cymbopogon Winterianus .58 Hình 14: Ocimum sanctum 59 Hình 15: Carum carvi .59 Hình 16: Artemisia annua .60 Hình 17: Lavendula officinalis .60 Hình 18: Tổng hàm lượng phenol bị ảnh hưởng dầu cỏ xạ hương so với xử lý đối chứng thời gian bảo quản khác .69 Hình 19: Khả thu gom tận gốc DPPH bị ảnh hưởng dầu cỏ xạ hương so với việc xử lý đối chứng khoảng thời gian bảo quản khác 70 Hình 20: Tổng hàm lượng flavonoid bị ảnh hưởng dầu cỏ xạ hương so với xử lý đối chứng thời gian bảo quản khác .71 Hình 21: Tổng hàm lượng glucosinolate bị ảnh hưởng dầu cỏ xạ hương so với điều trị đối chứng thời điểm 15 ngày .72 Hình 22: Mức glucosinolate tổng số béo, thơm/indole cải xanh mầm ngày tuổi trưởng thành thu hoạch 73 Hình 23: Đường kính vết bệnh táo sau xử lý với nồng độ dịch chiết khác .77 LỜI MỞ ĐẦU Tinh dầu lĩnh vực lớn quan trọng hợp chất thiên nhiên Nghiên cứu tinh dầu góp phần phát triển hoá hữu cơ, đặc biệt sinh tổng hợp hữu qua vi sinh vật, qua công nghệ biến đổi gen nuôi cấy mô tế bào Hơn nữa, nói đến tinh dầu nói đến hương liệu, nói đến chất thơm, nói đến gia vị hầu hết tinh dầu phục vụ cho lĩnh vực làm thuốc phục vụ cho đời sống Việc nghiên cứu phát triển tinh dầu trở thành ngành có nhiều tiềm triển vọng đặc biệt ứng dụng tinh dầu với ngành công nghệ thực phẩm nói riêng Bất kì loại thực phẩm bảo quản nhiệt độ phòng điều kiện khí bình thường giảm dần chất lượng từ từ bị vi sinh vật xâm nhập dẫn đến thối rữa Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn ngành công nghệ thực phẩm bảo quản sau thu hoạch, người cần tìm cách bảo quản thịt, cá, rau củ phù hợp với điều kiện tối ưu hố Với mong muốn hạn chế việc sử dụng hóa chất bảo quản thực phẩm việc sử dụng tinh dầu phương pháp hiệu an tồn Đề tài tiểu luận nhóm chúng em hôm thảo luận đề tài “ẢNH HƯỞNG CỦA TINH DẦU ĐẾN KHẢ NĂNG LƯU GIỮ VÀ BẢO QUẢN MỘT SỐ LOẠI CÂY RAU” Trong trình làm khơng tránh khỏi sai sót mong góp ý chỉnh sửa để tiểu luận trở nên hoàn thiện 1 Tổng quan tinh dầu 1.1 Khái niệm tinh dầu Khái niệm tinh dầu để chất lỏng không tan nước chứa hợp chất hữu tan lẫn vào nhau, dễ bay có mùi thơm đặc trưng Tinh dầu chiết xuất từ phần khác thuốc thơm (hoa, chồi, hạt, lá, cành, vỏ cây, thảo mộc, gỗ, rễ) Tinh dầu Martin Petozilka, Charles Ehret, tinh dầu sản phẩm thu phương pháp cất lôi nước từ nguyên liệu thực vật Việc sử dụng tinh dầu quan trọng việc bảo vệ thực vật, chúng có tác dụng kháng khuẩn, chống ký sinh trùng, diệt côn trùng, kháng vi rút, kháng nấm đặc tính chống oxy hóa Nhu cầu ngày tăng ngành công nghiệp dược phẩm, nước hoa mỹ phẩm Hơn nữa, việc sử dụng tinh dầu ngành công nghiệp thực phẩm, chất chống oxy hóa, hương liệu chất tạo màu, tăng lên chúng sử dụng để bảo quản thực phẩm Tinh dầu ngun liệu cho ngành cơng nghiệp thực phẩm dược phẩm Chúng có hoạt động sinh học quan trọng tiết lộ thường xuyên năm gần Tuy nhiên, ngành công nghiệp tìm kiếm ứng dụng thực tế phát triển loại thuốc tự nhiên có chứa hợp chất hoạt tính từ tinh dầu, nhu cầu cấp thiết phải tiêu chuẩn hóa nguồn nguyên liệu thực vật Để điều đạt được, cần phải biết yếu tố khác ảnh hưởng đến việc sản xuất tinh dầu thực vật, số lượng chất lượng Người ta biết thực vật sản xuất tinh dầu chất chuyển hóa thứ cấp để phản ứng với căng thẳng sinh lý, công mầm bệnh yếu tố sinh thái Ngoài ra, tự nhiên, tinh dầu cơng nhận hợp chất phịng vệ chất thu hút loài thụ phấn, tạo điều kiện thuận lợi cho sinh sản loài thực vật Đổi lại, biến thể môi trường quan trọng khả sản xuất hợp chất Xem xét tất yếu tố , vấn đề liên quan đến việc trồng thơm biến đổi xảy thay đổi số lượng chất lượng sản xuất tinh dầu Được thúc đẩy quan tâm ngày tăng người tiêu dùng thành phần tự nhiên mối quan tâm họ khả gây hại phụ gia tổng hợp, nhu cầu toàn cầu tinh dầu ngày tăng nay, 250 loại tinh dầu bán thị trường hàng năm thị trường quốc tế Thành phần hóa học tinh dầu Thành phần hóa học loại tinh dầu phức tạp có khoảng 20 đến 60 thành phần hoạt tính sinh học khác loại tinh dầu Tuy nhiên, nhìn chung có 2-3 thành phần với nồng độ cao (20-70%) so với thành phần khác có bảng thành phần chung Nói chung, thành phần tinh dầu biết đến tecpen, chủ yếu mono- sesquiterpenes Trong số trường hợp, dẫn xuất hydrocacbon (ví dụ, nhựa thông, tạo α- β-pinen) số trường hợp khác, thành phần oxy (ví dụ, đinh hương, tạo thành eugenol) Một số yếu tố ảnh hưởng đến thành phần mơi trường, giai đoạn chín mùa thu hoạch phương pháp khai thác Tinh dầu chất chuyển hóa thứ cấp hình thành thực vật, chất chuyển hóa bảo vệ thực vật chống lại điều kiện sinh vật căng thẳng phi sinh học ( Lê Ngọc Thạch, 2003) Tinh dầu bao gồm chất chuyển hóa thực vật thứ cấp ưa béo dễ bay hơi, đạt khối lượng trọng lượng phân tử 300 Trong định nghĩa tinh dầu, chúng xác định mạnh mẽ với tecpen, chủ yếu mono- sesquiterpenes Tuy nhiên, với việc xác định loại hợp chất khác, cụ thể phenol allyl isoallyl, định nghĩa ban đầu thay đổi Người ta tìm thấy tecpen khác với số lượng nguyên tử cacbon cao , chủ yếu diterpen Các chất khác xác định dầu dễ bay thu cách chưng cất Điều thực tế nhiều chất chuyển hóa thực vật khác chất béo, coumarin, anthraquinon số ancaloit định chưng cất, số hợp chất có nguồn gốc từ glycoside, biến đổi trình chưng cất Nói chung, thành phần tinh dầu hình thành mono- sesquiterpenes Trong số trường hợp, dẫn xuất hydrocacbon (ví dụ, nhựa thông, tạo α- β-pinen) trường hợp khác, thành phần 3.3.2.3.3 Hàm lượng Glucosinolates Thời gian bảo quản có khác biệt đáng kể hàm lượng glucosinolate mẫu phân tích Dầu cỏ xạ hương làm tăng đáng kể hàm lượng glucosinolate mầm ngày tuổi so với nghiệm thức đối chứng Hơn nữa, dầu cỏ xạ hương có giá trị tổng số glucosinolate cao: 27.02 μg/g F.W, giảm nhẹ lên đến 26.43 μg / g F.W vào ngày thứ 15 Khi kết thúc bảo quản, phần trăm thay đổi giảm khoảng 2.18% (hình 21) Trong nghiệm thức đối chứng, tổng hàm lượng glucosinolate giảm cao quan sát thấy, đạt khoảng 49.12% kết thúc bảo quản 68 Hình 21: Tổng hàm lượng glucosinolate bị ảnh hưởng dầu cỏ xạ hương so với điều trị đối chứng thời điểm 15 ngày Hàm lượng glucosinolates cải xanh trưởng thành so với mầm Ở rau mầm: tổng mức glucosinolate 27.02 μg/g FW cao so với hoa đầu 7.37 (Hình 22) Glucoraphanin chất chống oxy hóa mạnh mẽ glucosinolate béo nhiều có rau mầm Glucoraphanin đạt cao 16.24, tiếp thtinh dầu glucoerucin 5.9 glucoiberm 1.2 μg/g FW Mặt khác, bơng hoa / đầu bơng có chứa mức độ cao chất thơm /indolylglucosinolate, ntinh dầuglucobrassicin: 2.11 tiếp thtinh dầu glucobrassicin: 1.67 69 Hình 22: Mức glucosinolate tổng số béo, thơm/indole cải xanh mầm ngày tuổi trưởng thành thu hoạch 3.4 Ứng dụng chất chiết xuất từ thực vật để kiểm soát nấm mốc xám sau thu hoạch khả nhạy cảm táo với B cinerea từ ký chủ thực vật khác 3.4.1 Các vấn đề rau với nấm B.cinerea Botrytis cinerea loại nấm có nhiều ký chủ nên dễ tìm thấy chúng mầm bệnh nhiều loại trồng trước sau thu hoạch Theo đánh giá gần đây, nấm B cinerea đưa vào vị trí thứ hai danh sách 10 tác nhân gây bệnh hàng đầu dựa tầm quan trọng mặt khoa học kinh tế (Dean cộng sự, 2012) Hơn 200 loài trồng hai mầm toàn giới ước tính ký chủ B cinerea (Williamson cộng sự, 2007) Nhìn chung, chi phí tồn cầu cho việc kiểm soát nấm mốc xám (các biện pháp nuôi cấy, thuốc diệt thực vật, thuốc diệt nấm phổ rộng, kiểm soát sinh học) dễ dàng lên tới tỷ € / năm Tác động việc hao hụt sản phẩm xảy bất chấp việc kiểm soát dịch bệnh, giảm chất lượng chuỗi bán lẻ, có khả cao nhiều (Dean et al., 2012) Một nghiên cứu gần FAO ước tính tổng lượng trái rau sản xuất toàn cầu, khoảng 15% đến 50% bị 70 giai đoạn sau thu hoạch, chủ yếu mầm bệnh thối rữa (FAO, 2011) Tổn thất cao ghi nhận nước phát triển Châu Phi Châu Á, quốc gia thiếu công nghệ cần thiết để kéo dài thời gian bảo quản sản phẩm tươi sống Trong số mầm bệnh sau thu hoạch, B cinerea coi loài phổ biến quan trọng Các loại rau ăn nhỏ dễ bị mốc xám sau thu hoạch bao gồm atisô, táo, măng tây, đậu, củ cải đường, blackberry, việt quất, cải xanh, bắp cải, cà rốt, súp lơ, cần tây, dưa chuột, nho, cà tím, endive, nho, cải xoăn, kaki, kiwi, tỏi tây, đậu lăng, chanh, rau diếp, hành tây, đậu, đậu phộng, tiêu, lê, đào, mận, lựu, khoai tây, bí ngơ, mâm xơi, dâu tây, anh đào ngọt, cà chua nhiều loại khác (Droby and Lichter, 2007; Romanazzi, 2013) Sự lây nhiễm B cinerea xảy trước thu hoạch, giai đoạn đồng ruộng , chúng tồn tiềm ẩn bảo quản, mầm bệnh lợi dụng để phát triển bệnh từ độ ẩm tương đối cao nhiệt độ thấp , làm chậm khả phòng vệ vật chủ Khi bắt đầu nhiễm bệnh, nhìn thấy vùng hình trịn sẫm màu hơn, nơi mô mềm phận khác, sau phân hóa nhiều, có màu từ trắng đến xám, tùy thuộc vào lượng ánh sáng, phát triển từ vị trí nhiễm trùng Nhiễm trùng vết hở tự nhiên vết thương học xảy Thông thường, B cinerea phát triển từ thối bên cạnh khỏe mạnh, gây cố diện rộng hàng hóa, đơi làm hỏng tồn lơ Thật vậy, mầm bệnh tiến triển thành nhiễm trùng nhiệt độ bảo quản (thường 0–5 ° C), sức đề kháng giảm Quế, pimento nguyệt quế sử dụng ngành công nghiệp thực phẩm tinh dầu chất chiết xuất chúng nghiên cứu khả sử dụng chống lại vi khuẩn nấm bệnh để bảo vệ sau thu hoạch Táo loại trái phổ biến, sản xuất rộng rãi việc bảo vệ chúng áp dụng nhiều vùng khác nhau, B cinerea mầm bệnh có hại sau thu hoạch Thơng qua nhằm mục đích điều tra hoạt tính chống nấm chiết xuất quế, pimento nguyệt quế ống nghiệm chống lại nấm mốc xám sau thu hoạch (B cinerea) táo, để xác định tính nhạy cảm táo với B cinerea từ ký chủ thực vật khác sau ứng dụng chiết xuất từ thực vật, để phân tích thành phần hóa học chất chiết xuất 71 3.4.2 Phương pháp vật liệu Các chất chiết xuất từ quế, đinh hương nguyệt quế trước đánh giá hoạt động chống nấm điều kiện in vitro phát có tiềm chống lại nấm mốc xám sau thu hoạch Do đó, nghiên cứu nhằm mục đích điều tra hoạt tính kháng nấm chiết xuất quế, đinh hương nguyệt quế ống nghiệm chống lại nấm mốc xám sau thu hoạch táo để xác định tính nhạy cảm táo với B cinerea từ ký chủ thực vật khác nhau, phân tích thành phần hóa học chất chiết xuất Táo (cv “Connell Red”) xử lý với nồng độ chất chiết xuất khác cấy vi khuẩn B cinereaphân lập từ táo dâu tây sau đánh giá hoạt tính kháng nấm in vitro Kết cho thấy hầu hết nồng độ chất chiết xuất khảo sát không đủ hiệu đánh giá khảo nghiệm sau thu hoạch, chứng minh tác dụng kháng nấm in vitro cao Táo bị nhiễm B cinerea phân lập từ dâu tây Để kết luận, chiết xuất quế tìm thấy hiệu chống lại nấm mốc xám táo; nhiên, nồng độ cao chất chiết xuất yêu cầu để ức chế hiệu B cinerea trái trình bảo quản Botrytis cinerea (gây bệnh mốc xám) bệnh gây nguy hiểm nghiêm trọng, mối đe dọa với ngành an ninh lương thực tồn cầu Vì khả ảnh hưởng đến tất giai đoạn sản xuất trở nên kháng thuốc với chất diệt nấm Kkhi nhiệt độ, độ ẩm cao làm tăng phát triển, hình thành bào tử nấm Botrytis spp Bảo vệ thực vật bền vững giúp chống lại nấm bệnh táo, đặc biệt nấm mốc xám B.cinerea gây có đột biến gen liên quan đến việc kháng hóa chất Có nhiều loại tinh dầu thực vật có khả giúp bảo quản sản phẩm thực phẩm Vì vậy, nghiên cứu ứng dụng chiết xuất thiên nhiên lĩnh vực thực phẩm ngày tăng Và vấn đề khảo sát thực vật để ức chế hoạt tính điều kiện nấm mốc sau thu hoạch Các thành phần chiết xuất loại thơm như: quế, đinh hương, nguyệt quế có tính kháng khuẩn, giàu chất chống oxy hóa hoạt chất khác 72 Dầu quế ức chế số chủng phân lập, phát triển từ nấm bệnh nghiên cứu chất bảo quản sinh học tiềm làm ảnh hưởng đến cấu trúc tế bào mầm bệnh khác Chất hoạt động chống nấm mốc đánh giá chống laoij nấm gây hư hỏng, kiểm soát bệnh gỉ sắt đậu, nấm Aspergillus spp Dịch chiết từ đinh hương có diện chất sinh học giúp ức chế vi khuẩn gây bệnh, nấm mốc xám dâu tây gây độc tố cho nấm mốc Aspergillus flavus Tinh dầu cỏ xạ hương, bạc hà, hương thảo, sả cam, quýt cho thấy có ứng dụng khả quan với nấm mốc xám táo Tóm lại, sử dụng tinh dầu chiết xuất rừ dầu quế, đinh hương, nguyệt quế có khả chống lại vi khuẩn nấm bệnh để bảo vệ sau thu hoạch Do đó, nghiên cứu giúp điều tra hoạt tính có tinh dầu để giúp chống lại nấm mốc xám phát triển táo, xác định tính nhạy cảm táo với vi sinh vật B.cinerea từ ký chủ thực vật khác Thí nghiệm cho hoạt động chống nấm chất chiết xuất chống lại nấm mốc xám sau thu hoạch cách: quan sát thấy táo xử lý chiết xuất quế 800 microL/L Trái đem khử trùng bề mặt ethanol 70%, rửa lại nước lần sau để khơ tự nhiên phịng vơ trùng Tiếp đến, làm rách tế bào 7mm sâu 5mm theo chiều dọc tâm táo Chuẩn bị hỗn hợp phun từ dịch chiết nước vô trùng theo nồng độ là: 2200 2600 microL/L đinh hương; 400 800 microL/L quế; 2600 3000 microL/L nguyệt quế Phun lên 5ml dung dịch, để khô 30 phút phịng vơ trùng Tiếp đến phích cắm 7mm B.cinerea cô lập từ táo dâu tây đặt vào vết cắt vừa táo đặt túi ziplock ủ nhiệt độ 250C, thí nghiệm lặp lại lần lần quả có vết cắt Với mẫu đối chứng táo phun nước cất vơ trùng Từ để tính hoạt tính kháng nấm giống cơng thức tính ức chế phát triển sợi nấm: % = (dc – dt) / dc x 100 Với: dc: đường kính tổn thương mẫu đối chứng (mm) dt: đường kính tổn thương mẫu có vết cắt (mm) 73 Đánh giá tính nhạy cảm Táo với B.cinerea xử lý chất chiết xuất đếm DAI dựa theo công thức để đưa kết luận Tỷ lệ mắc bệnh = (số tổn thương nhiễm trùng / tổng số tổn thương đánh giá) x 100 Kết thu hoạt động chống nấm chất chiết xuất chống B cinerea sau thu hoạch Ở hình 23 cho thấy: tổn thương B.cinerea dâu tây gây khơng có khác biệt lớn táo đối chứng so với táo xử lý có chất chiết xuất DAI Xử lý đinh hương 2200 microL/L, quế 400 microL/L, 800 microL/L 3000 microL/L nguyệt quế giúp làm giảm đáng kể tổn thương B.cinerea so với mẫu đối chứng DAI Vết thương nhỏ DAI Hình 23:thích: Đường kính vết bệnh táo sau xử lý với nồng độ dịch chiết khác Chú Với (a) thối nấm B.cinerea dâu; (b) thối táo B.cinerea; DAI- ngày sau cấy Những chữ giống cho thấy không khác đáng kể phương pháp xử lý với (p