Đang tải... (xem toàn văn)
BÁO CÁO THỰC HÀNHĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƯỢNG VITAMIN B12 BẰNGQUANG PHỔ UVVISNguyên tắc của phương pháp đo phổ UVVIS phổ hấp thụ tử ngoại và khả kiến: Dựa trên sự hấp thụ ánh sáng (bức xạ điện từ) của dung dịch chất nghiên cứu ở vùng tử ngoại (UV) và khả kiến (VIS). Định luật cơ bản của sự hấp thụ ánh sáng của dung dịch là định luật Lambert Beer:A= ɜ.l.C = E_1cm(1%).l.CII. Chuẩn bị1. Hóa chất2. Dụng cụII. Định tính vitamin B121. So sánh phổ của 2 dung dịchChuẩn bị: Pha loãng dung dịch tiêm vitamin B12 để có nồng độ khoảng 0.0100% (100 µgml) Tiến hành: Kết quả:2.Dựa vào đặc trưng của phổVới vitamin B12 ,dung dịch 0,0030% trong nước có 3 cực đại hấp thụ ở 3 bướcsóng 361±1 nm, 550±2 nm, 278±1 nm. Tỷ số độ hấp thụ ở 361nm với độ hấp thụ ở 278nm là 1,70 đến 1,90; tỷ số độ hấp thụ ở 361nm với độ hấp thụ ở 550nm là 3,15 đến 3,45 Tiến hành Quét phổ trong cuvet thạch anh với bước sóng từ 240640nm. Tính các tỷ số hấp phụ. So sánh với tỷ số của B12. Ta có kết quả của mẫu thử D:Kết luận: Trong dung dịch mẫu thử có chứa vitamin B12II. Định lượng vitamin B121. Phương pháp đo trực tiếp.2. Phương pháp đường chuẩn3. Phương pháp so sánh . Theo nguyên tắc so sánh thì ta chọn một điểm so sánh càng gần với nồng độ của chất cần xác định thì phép so sánh càng chính xác.Khi dùng ba phương pháp khác nhau để tính nồng độ dung dịch thử, ta thu đượccác kết quả có độ chênh lệch khá nhỏ
...dịch thử D có chứa vitamin B12 * Kết quả: - Phổ dung dich chuẩn vitamin B12 (100ppm vừa pha) (hình ảnh) - Phổ dung dịch mẫu chuẩn vitamin B12( hình ảnh) - Nhận xét: Hai phổ tương... có cực đại hấp thụ giống chứng tỏ có vitamin B12 dung dịch thử - Kết luận: Trong dung dịch mẫu thử có chứa vitamin B12 2.Dựa vào đặc trưng phổ Với vitamin B12 ,dung dịch 0,0030% nước có cực đại... mẫu thử có chứa vitamin B12 II Định lượng vitamin B12 Phương pháp đo trực tiếp - Đo mật độ quang dung dịch phân tích mẫu thử bước sóng 361nm: A=1,072521 - Độ hấp thụ riêng vitamin B12 bước song