TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ, Trường Đại học Khoa học, ĐH Huế Tập 13, Số (2018) PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN VI KHUẨN CỐ ĐỊNH NITROGEN TỪ ĐẤ Ồ ỞT Phạm Thị Ngọ Sn ọ uĐ ị ả u* rường Đại học Khoa họ Đại học Huế *Email: baochau1601@gmail.com Ngày nhận bài: 23/4/2018; ngày hoàn thành phản biện: 11/6/2018; ngày duyệt đăng: 4/7/2018 TÓM TẮT Đ ọ n ng ng ệ n ng u n u n ng ng ng r u u n ố ạt từ 6,03x 10 - 17,71 x 10 CFU/g nh N, từ n ng n n n r g n r ng Kết cho th y: số ng vi khu n cố ế n n ng ng ệ ng r ng r u nh nitrogen mẫu t khô Phân lậ ến n P n n t r ng rau c 66 chủng vi khu n cố n chọn c hai chủng V17 V27 có khả n ng ố nh nitrogen mạnh Kết giải trình tự gen: chủng V17 Microbacterium testaceumvà chủng V27 Bacillus arbutinivorans Từ khóa: phân lập, n chọn, vi khu n cố nh nitrogen MỞ ĐẦU H ện n r u ng khơng an tồn n ế ư ng n ọ uố rừ u r ng r u ng ng ng Vì ậ , ệ ự ện ản xu r u n n ẽg ngườ ản xu n ng ng ản Đ ản r u n n ì ộ n n n ng ng ệ ữu ự ự ần ế Chính ậ , ệ ng ệ n ậ n ộ n n r n ả ự ậ ả ệ n ộ gả ý r ng xu ế r n ủ n n n ng ng ệ ữu b n ững.P n b n ữu n ản ộ n u ủng n ậ ống u n ọn ậ ộ u u n u n ế ngu n ngu n ệu ữu n u n ng ả n ng u ung n ng r ng g ần ả Trong u n ổb b n ng ậ ến ng n u n ậ u n ọn ủng u n ố n nitrogen ng uốn ì r ủng ự ố n N ạn ù ùng n ẹ ủ ng ế n ọ r r ng r u 125 Phân lập tuyển chọn vi khuẩn cố định nitrogen từ đất t ng ƢƠ Á I uởtn ên ỨU 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu Các chủng vi khu n có khả n ng ố n N c phân lập từ mẫu loại rau Cả Tần T Ng … 2.2 ƣơ p áp ghiên cứu -Đ n P t vùng rễ m thu mẫu: r ng r u ng r u Ngọ P n ố Tu H n - P ng n ậ ếm số ng tế bào: sử d ng ng phân lập vi khu n cố n N r n rường Ashby Đếm số ng tế bào vi khu n b ng ng ếm gián tiếp thông qua số ng khu n lạc mọc r n rường thạ ĩ [2] - Sàng lọc vi khu n có khả n ng ố nh N: tiến hành nuôi c y trực tiếp vi khu n r n rường Ashby thạ ĩ nhiệ ộ 300C khoảng thời gian 4-7 ng u x n n rư ng phát tri n khu n lạc thạ ĩ - P ng u n chọn chủng vi khu n có khả n ng ố nh N: nuôi c y chủng vi khu n 50 mL rường d ch th Ashby u kiện lắc 120 vòng/phút, nhiệ ộ 30 C sau ngày Thu d ch nuôi c x n ng N-NH4+tạo thành b ng ng u i thuốc thử Nessler [1] Phần cặn c s xác nh sinh khối vi khu n nh số ặ m hình thái, sinh hóa phân loại chủng vi khu n: quan sát khu n lạc vi khu n r n rường Ashby thạ ĩ Qu n ìn ế bào b ng ng n uộm Gram [2] Phân loại chủng vi khu n b ng giải trình tự 16S rRNA tra c u Gen Bank nh danh loài vi khu n [6,7] bìn - Xử lý số liệu: thí nghiệ c lặp lại ba lần, số liệu c tính giá tr trung n ANOVA (Dun n’ test p