Nghiên cứu phân lập và cố định chủng vi khuẩn pseudomonas có khả năng xử lý các hợp chất chứa nitơ trong nước thải nuôi tôm

ĈҤI HӐ&Ĉ¬1 ҸNG 75Ѭ Ӡ1*Ĉ ҤI HӐ&6Ѭ3+ ҤM KHOA SINH ±0Ð,75Ѭ ӠNG BÙI ANH THI NGHIÊN CӬU PHÂN LҰP VÀ CӔĈӎ NH CHӪNG VI KHUҬN PSEUDOMONAS CÓ KHҦ1Ă1*; Ӱ LÝ CÁC HӦP CHҨT CHӬ$1,7Ѫ7521*1Ѭ ӞC THҦI NI TƠM Ĉ¬NҸNG - 1ăP ĈҤI HӐ&Ĉ¬1 ҸNG 75Ѭ Ӡ1*Ĉ ҤI HӐ&6Ѭ3+ ҤM KHOA SINH ±0Ð,75Ѭ ӠNG BÙI ANH THI NGHIÊN CӬU PHÂN LҰP VÀ CӔĈӎ NH CHӪNG VI KHUҬN PSEUDOMONAS CÓ KHҦ1Ă1*; Ӱ LÝ CÁC HӦP CHҨT CHӬ$1,7Ѫ7521*1Ѭ ӞC THҦI NUÔI TÔM NGÀNH: CƠNG NGHӊSINH HӐC CÁN BӜ+ѬӞNG DҮN: ThS NGUYӈN THӎ/$13+ѬѪ1* Ĉ¬NҸNG - 1ăP LӠ,&$0Ĉ2$1 7{LFDPÿRDQÿk\OjF{QJWUuQKQJ &iFVӕOLӋXNӃWTXҧQrXWURQJNK DLF{QJEӕWURQJEҩWNǤF{QJWUuQKQ Ĉj1ҹQJQJj\ tháng QăP 2016 Sinh viên Bùi Anh Thi LӠI CҦ0Ѫ1 Vӟi lòng biӃ W ѫQ ҳ c VkX nhҩ t em xin V gӱi tӟi Ths NguyӉ n ThӏLan 3KѭѫQJÿmW ҥ RÿL Ӆ u kiӋ n tӕ t nhҩ Wÿ Ӈcho em hồn thành khóa luұ n tӕt nghiӋ p Em xin chân thành cҧ PѫQ thҫ y cô khoa Sinh ±0{LWUѭ ӡQJWUѭ ӡQJĈ ҥ i hӑ F6ѭ3K ҥ m ÿmK ӛtrӧtұ n WkPKѭ ӟng dү n trao dӗ i kiӃ n thӭc nhӳng QăPTXDJL~SHPKRjQWKjQKNKyDOX ұ n Do kiӃ n thӭc cịn nhiӅ u hҥ n chӃnên sӁkhơng tránh khӓ i nhӳng sai sót, vұ y em rҩ t mong nhұ Qÿѭ ӧc sӵgóp ý quý báu tӯquý thҫ y cô Em FNJQJ[LQJ ӱi lӡi cҧ PѫQW ӟi bҥ n bè YjJLDÿuQK ÿm quan tâm, JL~Sÿ ӥÿӇem hồn thành khóa luұ n tӕ t nghiӋ p Sau em xin kính chúc quý thҫ y cô khoa Sinh ±0{L7Uѭ ӡngĈ ҥ i hӑ F6ѭSK ҥ PĈ ҥ i hӑ FĈj1 ҹ ng sӭc khӓ e công tác tӕt Trân Trӑ ng! Ĉj1 ҹ ng, ngày tháng QăP 2016 Sinh viên Bùi Anh Thi MӨC LӨC MӢĈҪU Ĉ һ t vҩ Qÿ Ӆ Mөc tiêu éQJKƭD éQJKƭDNKRDK ӑ c éQJKƭDWK ӵc tiӉ n &+ѬѪ1* TӘNG QUAN TÀI LIӊU 1.1 NghӅnuôi tôm vҩ Qÿ ӅP{LWUѭ ӡng nuôi tôm 1.1.1 Tình hình ni tơm ӣViӋ t Nam thӃgiӟi 1.1.2 Các vҩ Qÿ ӅP{LWUѭ ӡng nuôi tôm 1.2 Thành phҫ n hӧp chҩ t chӭDQLWѫWURQJQѭ ӟc thҧ i nuôi tôm 1.2.1 Các chҩ t hӳXFѫ 1.2.2 Hӧp chҩ WQLWѫWURQJQѭ ӟc thҧ i 1.2.2.1 Nitrogen (N) 1.2.2.2 Ammonia (NH3) ammonium (NH4+) 1.2.2.3 Nitrite (NO2-) nitrate (NO3-) &iFSKѭѫQJSKiS[ ӱOêQѭ ӟc thҧ i nuôi tôm 3KѭѫQJSKiSFѫK ӑ c hóa hӑc 3KѭѫQJSKiSVLQKK ӑ c 10 1.3.2.1 Ӭng dөng vi sinh vұ t xӱOêQѭ ӟc thҧ i ao nuôi 11 1.3.2.2 Vi khuҭ n Pseudomonas 12 1.2.3.3 Qui trình chuyӇ n hóa 14 1.4 Các nghiên cӭXWURQJYjQJRjLQѭ ӟc vӅӭng dө ng chӫ ng vi khuҭ n Pseudomonas nhҵ m xӱOêQѭ ӟc thҧ i 15 1.4.1 Các nghiên cӭXQѭ ӟc 15 &iFQJKLrQFӭXWURQJQѭӟF 16 &+ѬѪ1* ĈӔ,7Ѭ ӦNG, NӜ,'81*9¬3+ѬѪ1*3+È3 CӬU 17 Ĉ ӕLWѭ ӧng nghiên cӭu 17 2.2 Nӝ i dung nghiên cӭu 17 Ĉ ӏ DÿL Ӈ m nghiên cӭu tҥ i phịng thí nghiӋ m 17 3KѭѫQJSKiSQJKLrQF ӭu 17 3KѭѫQJSKiSWKXP ү u 17 3KѭѫQJSKiSSKkQO ұ p chӫ ng vi khuҭ n Pseudomonas sp 18 3KѭѫQJSKiSQKX ӝm Gram 18 3KѭѫQJSKiSÿiQKJLiKR ҥ t tính khӱNH4+ WURQJQѭ ӟc 20 3KѭѫQJSKiSÿiQKJLiNK ҧQăQJ[ ӱlý hӧp chҩ t cӫDQLWѫWURQJ ӟc thҧ i thӵc nghiӋ m cӫa chӫ ng vi khuҭ n 20 2.4.6 Quy trình làm chӃphҭ m 21 3KѭѫQJSKiSÿiQKJLiFK Ӄphҭ m 22 &+ѬѪ1* KӂT QUҦVÀ THҦO LUҰN 24 3.1 KӃ t quҧphân lұ p chӫ ng vi khuҭ n 24 3.2 KӃ t quҧnhuӝm Gram 26 3.3 KӃ t quҧÿiQKJLiKR ҥ t tính phân giҧ LDPPRQLXPWURQJQѭ ӟc cӫa chӫng vi sinh vұ t 28 3.4 KӃ t quҧÿiQKJLiKR ҥ t tính thӵc nghiӋ m 29 3.5 KӃ t quҧlàm chӃphҭ m xӱOêQѭ ӟc thҧ i 30 3.5.1 Chuҭ n bӏchҩ t mang 30 3.5.2 Nhân giӕ ng vi sinh vұ t 32 ĈѭDYLVLQKY ұ t vào chҩ t mang 32 3.6 KӃ t quҧÿiQKJLiFK Ӄphҭ m 32 KӂT LUҰ19¬Ĉ ӄNGHӎ 38 TÀI LIӊU THAM KHҦO 39 DANH MӨC CHӲ VIӂT TҲT VSV : Vi sinh vұ t cs : Cӝ ng sӵ VK : Vi khuҭ n DANH MӨC BҦNG, BIӆU Danh mөc bҧng Bҧng Tên bҧng Trang 3.3 ĈiQKJLiKR ҥ t tính 26 3.4 HiӋ u quҧxӱlý cӫa chӫng vi sinh vұ t 27 3.5 Thành phҫ n chҩ t mang 28 Danh mөc biӇ u BiӇ Xÿ ӗ Tên biӇ Xÿ ӗ Trang 3.6a S+WKD\ÿ әi theo thӡi gian xӱlý 31 3.6b NH4+ -N WKD\ÿ әi theo thӡi gian xӱ lý 32 3.6c N tәQJWKD\ÿ ә i theo thӡi gian xӱlý 32 3.6d BOD5 Yj&2'WKD\ÿ әi theo thӡi gian xӱlý 33 3.6e '2WKD\ÿ әi theo thӡi gian xӱlý 34 DANH MӨC CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang 3.1a Vào mү u 22 3.1b Các dòng khuҭ n lҥ c 22 3.1c Các chӫ ng vsv phân lұ Sÿѭ ӧc Yjÿ һ FÿL Ӈ m 3.2 KӃ t quҧnhuӝm Gram vsv Gѭ ӟi kính hiӇ n vi 25 3.3 /ѭ ӧQJ1D2+1ÿmGQJ 26 3.4a 7KQJÿ ӵQJQѭ ӟc thҧ i chӃphҭ m 30 3.4b ĈѭDFK Ӄphҭ PYjRQѭ ӟc thҧ i 30 23-24 MӢĈҪU Ĉ һt vҩQÿ Ӆ ViӋ W1DPÿDQJEѭ ӟc vào thӡi kǤcông nghiӋ p hóa, hiӋ Qÿ ҥ i hóa nӅ n kinh tӃnhҵ Pÿ ҥ t mөc tiêu chiӃ QOѭ ӧc trӣthành mӝWÿ ҩ WQѭ ӟc công nghiӋ p tiên tiӃ n YjRQăP6RQJVRQJ vӟi hoҥ Wÿ ӝ QJÿ Ӈcó thӇÿҥ Wÿѭ ӧc mөc tiêu phát triӇ QÿyP ӝt nhӳng nhiӋ m vөquan trӑ ng không thӇthiӃ u bҧ o vӋmôi WUѭ ӡng phát triӇ n bӅ n vӳng NhӳQJQăPJ ҫ Qÿk\QKL Ӆ u ngành công nghiӋ p phát triӇ QYѭ ӧt bұ c, ÿyQJjQKWK ӫy sҧ n mӝt nhӳng ngành kinh tӃPNJLQK ӑQÿyQJJyS Ӆ u cho nӅ n công nghiӋ p cӫDQѭ ӟc ta Sҧ QOѭ ӧng thӫy sҧ n không nhӳQJÿiS ӭng nhu cҫ u thӵc phҭ PWURQJQѭ ӟc mà xuҩ t khҭ u sang thӏ WUѭ ӡng khác Tuy nhiên mһ t trái cӫa viӋ c phát triӇ n kinh tӃQKDQKOjÿ Ӈlҥ i nhiӅ uҧ QKKѭ ӣng xҩ u ÿӃ QP{LWUѭ ӡngÿ һ c biӋ t chҩ WOѭ ӧng nguӗ QQѭ ӟc NӃ XNK{QJÿѭ ӧc sӵquan tâm cӫa quyӅ QFNJQJQKѭQJѭ ӡLGkQP{LWUѭ ӡng sӕ ng sӁngày giҧ m sút [15] Trong công nghiӋ p thӫy sҧ QQJjQKQX{LW{PFNJQJ ӑ ng Ngoài viӋ c ÿyQJJySWtFKF ӵFWKuFNJQJÿ Ӈlҥ i nhiӅ u mһ t tiêu cӵFĈ ӇWăQJQăQ suҩ t lӧi nhuұ QQJѭ ӡLQX{LW{PÿmNK{QJQJ ӯQJWăQJP ұ Wÿ ӝthҧgiӕ ng, sӱ dө ng thuӕc hóa chҩ t phịng chӳa bӋ nh, cҧOѭ ӧQJGѭWK ӭFăQVDX FKăQQX{L WiFÿ ӝ ng xҩ Xÿ Ӄ QP{LWUѭ ӡng Qѭ ӟc, gây ô nhiӉ m Vì vұ y phát triӇ n nghӅQX{LW{PWKHRKѭ ӟng bӅ n vӳng vӟLP{LWUѭ ӡng vҩ Qÿ ӅÿDQJU ҩ Wÿѭ ӧc quan tâm [1], [20] Sӵtӗn tҥ i cӫa Gѭ Oѭ ӧng chҩ t sau nuôi mӝt nhӳng nguyên nhân lӟn gây ô nhiӉ PP{LWUѭ ӡQJQѫLWL Ӄ p nhұ n nguӗ n thҧ i 1ѭ ӟc ao nuôi tôm sau sӱdө ng thuӝ FQKyPQѭ ӟc thҧ LÿDWKjQKSK ҫ QWURQJÿyFiF ӧp chҩ t chӭa + 1LWѫ1+ m tӍlӋcao NH3 dҥ QJNKtÿ ӝc cho tôm, 3, NH4 , NO3 NO2 ) chiӃ 19 vү n giӳÿѭ ӧc màu tím cӫa gentians, cịn vi khuҭ n Gram âm bҳ t màu hӗ ng cӫa fucshin - Vұ t liӋ u: + Dung dӏ ch tím gentians: g tím kӃ t tinh hồ tan 20 ml etanol 95% 0,8 g ammon oxalat hoà tan 80 POQѭ ӟc cҩ t Trӝn hai dӏ ch nói lҥ i vӟi nhau, giӳ48 giӡrӗ i lӑc Bҧ o quҧ n lӑtӕi + Dung dӏ ch Lugol: Hoà tan g Iod (Iodine) 3-5 POQѭ ӟc cҩ t, thêm g KI (Kali iodide), khuҩ y cho tan hӃ WWKrPQѭ ӟc cҩ WFKRÿ ӫ300 ml Bҧ o quҧ n lӑtӕi + Dung dӏ ch alcohol 90% + Dung dӏ ch fucshin kiӅ m - &iFEѭ ӟc tiӃ n hành + Dàn tiêu bҧ n cӕÿӏ nh tiêu bҧ n: Dùng que cҩ y vô trùng lҩ y mӝt vi khuҭ n tӯӕ ng giӕng thҥ ch nghiêng hoà vào giӑ WQѭ ӟc muӕi sinh lý ӣgiӳa phiӃ Q NtQK Ӈkhơ trongÿphịng thí nghiӋ m Cӕÿӏ nh tiêu bҧ n bҵ QJ FiFK K nhanh ngӑn lӱDÿqQF ӗ n 2-3 lҫ Qÿ Ӈgҳ n chһ t vi khuҭ n vào phiӃ n kính ViӋ c cӕÿӏ nh nhҵ m mөFÿtFKJL Ӄ t chӃ t vi khuҭ n, gҳ n chһ t vi khuҭ n vào phiӃ n kính làm vӃ t bôi bҳ t màu tӕWKѫQYuFiFW Ӄbào chӃ t bҳ t màu tӕWKѫQFiFW Ӄbào sӕ ng + Nhuӝm bҵ ng dung dӏ FK WtP JHQWLDQV Ӄ n phút, WURQJ rӱa  Qѭ ӟc + Nhuӝm thêm dung dӏ ch lugol giӳtrong phút, rӱDQѭ ӟc + Khӱmàu: Nhӓdung dӏ ch alcohol 90%, giӳkhoҧ QJJLk\F Ӄ n vӯa thҩ y mҩ t màu), rӱDQѭ ӟc + Nhuӝm tiӃ p bҵ ng dung dӏ ch Fucshin phút, rӱDQѭ ӟFÿ Ӈkhô - KӃ t quҧ : quan sát ӣvұ t kính dҫ u 100x NӃ u nhuӝPÿ~QJYLNKX ҭ n Gram GѭѫQJE ҳ t màu tím, Gram âm bҳ t màu hӗ ng 20 2.4.4 3K˱˯QJSKiSÿiQKJLiKR ̩t tính kh͵NH4+ WURQJQ˱ ͣc 7KHRSK˱˯QJSKiSIRFPDOLQ Nguyên tҳ c: Ion NH4+ sӁtác dөng vӟL+&+2WURQJQѭ ӟc tҥ RUDOѭ ӧng D[LW$[LWÿѭ ӧFÿ ӏ QKOѭ ӧng bҵ ng NaOH 4NH4+ + 6CH2O Ỉ (CH2)6N4 + 4H+ + 6H2O TiӃ n hành: 7UXQJ ӧng KzD HCOOH Oѭ focmalin bҵ ng NaOH (thêm vài giӑ t SKHQROSKWKDOHLQÿ Ӄ n có màu hӗ QJ 7KrPOѭ ӧQJQѭ ӟc cҫ QÿRYjRWiF ө ng vӟi dung dӏ ch focmalin, dQJ1D2+ÿ ӏ QKOѭ ӧQJOѭ ӧQJD[LWWKHRSK WUrQ;iFÿ ӏ QKOѭ ӧng NH4+ lҥ i, so sánh vӟLOѭ ӧng thêm vào VӟLSKѭѫQJSKiSWUrQWDiSG ө QJQKѭVDX - Thêm g NH4Cl vào 10 POQѭ ӟc cҩ WVDXÿyWKrPNKR ҧ ng 10 POQѭ ӟc có chӭa vi khuҭ n cҫ QÿiQKJLiKR ҥ t tính vào - ĈӇ5 ngày ӣnhiӋ Wÿ ӝSKzQJYjÿiQKJLiOѭ ӧng NH4+ (sau ngày) bҵ ng NaOH So sánh vӟi kӃ t quҧWUѭ ӟc xӱlý - Ӣmү Xÿ ӕi chӭng ta thêm 1g NH4Cl vào 20 ml Qѭ ӟc cҩ t 2.4.5 3K˱˯QJSKiSÿiQKJLi kh̫QăQJ[ ͵lý hͫp ch̭t cͯDQLW˯WU Q˱ ͣc th̫ i th͹c nghi͏ m cͯa chͯng vi khu̱n ĈӇ[iFÿ ӏ QKÿѭ ӧc hoҥ t tính cӫ a chӫ ng vi khuҭ n thӵc nghiӋ m, tӭc mү XQѭ ӟc thҧ i thӵc tӃta tiӃ n hành thӵc hiӋ QQKѭVDX - Lҩ y 450 ml mү XQѭ ӟc thҧ i - Thêm 50 POQѭ ӟc chӭa vi khuҭ n vào mү XQѭ ӟc thҧ i - ĈӇtrong ngày ӣnhiӋ Wÿ ӝSKzQJÿRKjPOѭ ӧQJQLWѫW әng (N tәng) + QLWѫDPRQ1+ i kӃ t quҧÿ ӕi chӭng /N) So sánh vӟ - Mү u ÿӕ i chӭng thӵc hiӋ QWѭѫQJW ӵQKѭQJNK{QJ bәsung VSV - Mү Xÿѭ ӧc gӱLÿ Ӄ QWUXQJWkPNKtWѭ ӧng thӫ\YăQWKjQKSK ӕĈj1 ҹ QJÿ Ӈ ÿR Hai chӍsӕQLWѫW ә ng QLWѫDPRQÿѭ ӧFÿRWKHRSKѭѫQJSK 21 - TәQJ13KѭѫQJSKiS60(:: 4500-N: 2012 - NH4+13KѭѫQJSKiS60(::1+ 3B.F: 2012 2.4.6 Quy trình làm ch͇pẖ m &iFEѭ ӟc tiӃ n hành: Ĉӕi vӟi chҩ t mang - Chӑn chҩ t mang: phӕ i trӝ n nhiӅ u loҥ i nguyên liӋ u vӟLQKDXÿrÿ ҧ m bҧ o GLQKGѭ ӥng Chӑn chҩ WPDQJOj[ѫG ӯa, cám gҥ o bӝ t ngô vӟi tӍlӋQKѭVDX ;ѫG ӯa : 60kg Vӓtrҩ u : 40kg Cám gҥ o : 5kg Cám ngô (bӝt ngô) : 5kg ;ѫG ӯa cҫ n phҧ Lÿѭ ӧc xӱOêWUѭ ӟc phӕ n trӝn vӟi nguyên liӋ u khác bҵ QJSKѭѫQJSKiSQJkPWURQJQѭ ӟc vôi 5-7 ngày nhҵ m khӱchҩ t chát (tanin) - 3KDQѭ ӟc vôi: tӍlӋ5 kg vôi: 200 L Qѭ ӟc Khuҩ y trӝQÿ Ӆ u vơi tan hồn tồn dung dӏ ch có màu trҳ QJÿ Ӆ u - /jPѭ ӟW[ѫG ӯDÿ ҧ o trӝ Qÿ Ӆ u, kiӇ PWUDÿ ӝҭ m khoҧ ng 50-Ojÿ ҥ t - Ӫÿӕ QJ[ѫG ӯDWUѭ ӟc ӫphҧ i làm sҥ ch mһ t bҵ ng, ӫkín bҵ ng bҥ t nilon, thӡi gian ӫtӯ7-10 ngày - KiӇ m tra lҥ i chҩ t mang: có màu nâu sү m, mӅ m xӕp - Khӱtrùng chҩ WPDQJÿ Ӈnguӝ i Ĉӕi vӟi giӕ ng: - Nhân giӕng cҩ p 1: 0{LWUѭ ӡng nuôi cҩ \OjP{LWUѭ ӡng phân lұ p ±môi WUѭ ӡng SW-LB Các chӫng vi sinh vұ Wÿѭ ӧc nuôi ӕng nghiӋ m (bҧ o quҧ n ӣnhiӋ Wÿ ӝ28-300C Sau 2-3 ngày chuҭ n bӏnhân giӕ ng cҩ p - Nhân giӕng cҩ S0{LWUѭ ӡng nuôi cҩ \FNJQJOjP{LWUѭ ӡng phân lұ p (SW-/% QKѭQJOjP{LWUѭ ӡng lӓng (không bәVXQJDJDU 0{LW ӡng sau 22 ÿѭ ӧc chuҭ n bӏthì khӱtrùng bҵ ng nӗ i hҩ SWURQJSK~W6DX Ӄ n hành nuôi cҩ y lӓng, lҳ c máy lҳ c 2.4.7 3K˱ ˯QJSKiSÿiQKJLiFK ͇pẖ m Sau chӃphҭ m hoàn thành ta tiӃ QKjQKÿiQK giá hiӋ u quҧxӱlý cӫa chӃphҭ m Thu mү XQѭ ӟc tӯkhu vӵc lҩ y mү XQѭ ӟFÿѭ ӧFÿ ӵng thùng vӟi thӇ WtFKQѭ ӟc 20 L Mү XQѭ ӟFÿѭ ӧFÿ һ t ӣ(ngoài trӡLQKѭP{LWUѭ ӡng tӵnhiên) TiӃ n hành thêm chӃphҭ PYjRYjÿiQKJLiWK{QJTX ӍsӕBOD5, COD, S+'2YjÿăFEL Ӌ t chӍsӕ1LWѫW ә QJYj1LWѫDPR n [24], [29] x ChӍsӕDO (dyssolved oxygen): nhu cҫ XR[\KzDWDQWU ӟc cҫ n thiӃ t cho sӵhô hҩ p cӫa thӫy sinh Ðây thông sӕvô quan trӑQJÿ ӕ i vӟi hӋthӕ ng xӱlý hiӃ u khí nӃ u thiӃ u oxi vi sinh vұ t hơ hҩ p hiӃ u khí dӉbӏ chӃ WYjNKLÿyFiFYLVLQKY ұ t hô hҩ p tùy tiӋ QQKѭFiFYLVLQK ұ t dҥ ng sӧi làm hӗ ng bùn, khó lҳ ng dү n dӃ n giҧ m hiӋ u quҧcӫa trình xӱlý x ĈӝpH: mӝt nhӳng chӍWLrX[iFÿ ӏ QKÿ ӕi vӟLQѭ ӟc cҩ SYjQѭ ӟc thҧ i ChӍsӕnày cho ta biӃ t cҫ n thiӃ t phҧ LWUXQJKzDKD\NK{ ӧng hóa chҩ t cҫ n thiӃ t trình xӱOêÿ{QJNHRW ө, khӱkhuҭ n x ChӍsӕCOD (Nhu cҫu oxy hóa hӑc ±Chemical Oxygen Demand): ChӍsӕQj\ÿѭ ӧc dùng rӝ QJUmLÿ Ӈÿ һ FWUѭQJFKRKjPOѭ ӧng chҩ t hӳXFѫF ӫa Qѭ ӟc thҧ i sӵô nhiӉ m cӫDQѭ ӟc tӵnhiên ChӍsӕCOD biӇ u thӏcҧOѭ ӧng chҩ t hӳXFѫNK{QJWK Ӈbӏoxy hóa bҵ ng vi sinh vұ WGRÿyQyFyJL ӏFDRKѫQ %2'Ĉ ӕi vӟi nhiӅ u loҥ LQѭ ӟc thҧ i, giӳa BOD COD có mӕLWѭѫQJTXDQ ҩ t ÿӏ nh vӟi x ChӍsӕBOD (Nhu cҫ u oxy sinh hóa ±Biochemical Oxygen Demand): nhu cҫ XR[\VLQKKyDOjOѭ ӧng oxy cҫ n thiӃ Wÿ Ӈoxy hóa chҩ t hӳXFѫFyWU Qѭ ӟc bҵ ng vi sinh vұ t (chӫyӃ u vi khuҭ n) hoҥ i sinh, hiӃ u khí BOD chӍ tiêu thông dө ng nhҩ Wÿ Ӈ[iFÿ ӏ nh mӭFÿ ӝô nhiӉ m cӫDQѭ ӟc thҧ i 23 x N tәng: tә QJKjPOѭ ӧQJQLWѫ FyWURQJQѭ ӟc thҧ i bào gӗm: QLWѫSURWH QLWѫSKLSURWHLQ x 1LWѫDPR n (NH4+/N): Oѭ ӧQJQLWѫWURQJFiFSKkQ ӱprotein, hӧp chҩ t hӳu Fѫ« 24 &+ѬѪ1* KӂT QUҦVÀ THҦO LUҰN 3.1 KӃ t quҧphân lұ p chӫng vi khuҭn Tӯmү XQѭ ӟFWKXÿѭ ӧc tҥ i khu vӵc ni tơm Nam Ơ, thành phӕĈj1 ҹ ng tiӃ n hành pha lỗng mү XYjÿѭDYjRP{LWUѭ ӡng ni cҩ y (SW-LB) Hình 3.1a: Vào m̳ u Hình 3.1b: Các dịng khu̱ n l̩c Sau 2-3 ngày khuҭ n lҥ c xuҩ t hiӋ n, chӑ n tӯng chӫ QJFyÿ һ FÿL Ӈ m khác nuôi riêng tӯQJÿƭDSHFWULYjVDXÿyF ҩ y chuyӅ n vào nghiӋ Pÿ Ӈÿѭ ӧc dòng thuҫ n KӃ t quҧ Tӯnhӳng khuҭ n lҥ c riêng rӁÿѭ ӧc lӵa chӑn, qua cҩ y chuyӅ QWKXÿѭ ӧc dòng khuҭ n lҥ c thuҫ n Các vi khuҭ n tuyӇ n chӑn Fy һ F ÿӇ m ÿL cӫa dòng vi khuҭ n Pseudomonas (màu trҳ ng hay vàng) Ĉk\O jFѫV ӣEѭ ӟFÿ ҫ Xÿ Ӈ[iFÿ ӏ nh dòng vi khuҭ n cҫ n phân lұ p KӃ t quҧGѭ ӟLÿk\OjFK ӫQJÿѭ ӧc chӑQFyÿ һ c ÿL Ӈ m cҧ PTXDQQKѭFK ӫ ng Pseudomonas, ký hiӋ u P1, P2, P3, P4, P5, P6 25 Tên P1 Khuҭ n lҥ c WUrQÿƭDSHFWUL Khuҭ n lҥ c ӕng nghiӋ m Ĉһ FÿL Ӈ m Trҳ ng sӳa, bӅ mһ t nhҹ n Vàng P2 Trҳ QJÿ өc P3 26 Trҳ ng sӳa P4 9jQJÿ ө c P5 Trҳ QJÿ өc P6 Hình 3.1c: Các chͯng vsv phân l̵ Sÿ˱ ͫc Yjÿ ̿FÿL ͋ m 3.2 KӃ t quҧnhuӝm Gram Vi khuҭ n Pseudomonas vi khuҭ n Gram âm, nhuӝ m Gram chúng sӁbҳ t màu hӗ ng cӫa thuӕc nhuӝm 27 Tӯ6 chӫ QJÿmSKkQO ұ Sÿѭ ӧc tiӃ n hành lên kính, kӃ t quҧthӇhiӋ n ӣbҧ ng sau: P1 Hình que dài P4 Hình que ngҳ n P2 Hình que P5 Hình que P3 *UDPGѭѫQJ P6 Hình que Hình 3.2: K͇ t qu̫nhu͡P*UDPYVYG˱ ͣi kính hi͋ n vi 1KѭY ұ y qua kӃ t quҧnhuӝm Gram ta thҩ y: Trong chӫQJÿmFK ӑn có chӫng vi khuҭ n Gram âm (bҳ t màu hӗ ng) chӫ ng P1, P2, P4, P5, P6 Có chӫ ng P3 bҳ WPjXWtP*UDPGѭѫQJ  Các chӫng Gram âm ÿѭ ӧc giӳlҥ Lÿ Ӈ ÿiQKJLiKR ҥ t tính phân giҧ i hӧp chҩ WQLWѫ 28 3.3 KӃ t quҧÿiQKJLiKR ҥt tính phân giҧ i ammonium WURQJQѭ ӟc cӫa chӫng vi sinh vұt Tӯ5 chӫ QJÿm[iFÿ ӏ QKÿѭ ӧc vi khuҭ n Gram âm, tiӃ QKjQKÿiQK hoҥ t tính phân giҧ i ammonium (hӧp chҩ t chӭD QLWѫ  bҵ QJ SKѭѫQJ S focmalin Ta có bҧ ng kӃ t quҧsau: Bҧng 3.3: ĈiQKJLiKR ̩ t tính Chӫng vi khuҭ n /ѭ ӧng NH4+ ban /ѭ ӧng NH4+ ÿҫ u lҥ i Phҫ QWUă m xӱlý P1 1g 0,79g 21% P2 1g 0,84g 16% P4 1g 0,67g 33% P5 1g 0,9g 10% P6 1g 0,92g 9% 1ѭ ӟc cҩ t 1g 0,97g 3% 7DFyOѭ ӧQJ1D2+ÿmGQJÿ Ӈchuҭ Qÿ ӝnӗQJÿ ӝNH4+ cịn lҥ Lÿѭ ӧc thӇ hiӋ n ӣhình sau: Chӫng Chӫng Chӫng ĈmGQJPOGG1D2+ ĈmGQJPOGG1D2+ ĈmGQJ 1N 1N NaOH 1N Hình 3.3: /˱ ͫQJ1D2+1ÿmGQJ ... KHOA SINH ±0Ð,75Ѭ ӠNG BÙI ANH THI NGHIÊN CӬU PHÂN LҰP VÀ CӔĈӎ NH CHӪNG VI KHUҬN PSEUDOMONAS CÓ KHҦ1Ă1*; Ӱ LÝ CÁC HӦP CHҨT CHӬ$1,7Ѫ7521*1Ѭ ӞC THҦI NUÔI TÔM NGÀNH: CÔNG NGHӊSINH HӐC CÁN BӜ+ѬӞNG... ÿӅtài ? ?Nghiên cӭu phân lұp cӕÿӏ nh chӫng vi khuҭn Pseudomonas có khҧQăQJ x? ?lý hӧp chҩt chӭD1LWѫ Qѭ ӟc thҧ LQX{LW{P´ Mөc tiêu Phân lұ p tuyӇ n chӑ n chӫ ng VK Pseudomonas sp có khҧQăQJ[ ? ?lý hӧp... nLWѫWURQJQѭ ӟc thҧ i nuôi tôm 1.2.1 Các ch̭ t hͷXF˯ Dӵa vào khҧQăQJFyWK ? ?phân hӫy nh? ?vi sinh vұ WFyWURQJQѭ ӟc mà ta có th? ?phân chҩ t hӳXFѫWKjQKKDLQKyP Các chҩ t hӳXFѫG ? ?phân hӫ\ĈyOjFiFK