Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học của một số dịch chiết metanol của rễ cây thầu dầu

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA NGUYỄN THỊ LÝ Đề tài: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT METANOL CỦA RỄ CÂY THẦU DẦU KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƢ PHẠM Đà Nẵng, Năm 2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA Đề tài: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT METANOL CỦA RỄ CÂY THẦU DẦU KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƢ PHẠM Sinh viên thực hiện: NGUYỄN THỊ LÝ Lớp: 11SHH Giáo viên hƣớng dẫn: TS TRẦN MẠNH LỤC Đà Nẵng, Năm 2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM Độc lập – tự – hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên: Nguyễn Thị Lý Lớp : 11SHH Tên đề tài: “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết metanol rễ thầu dầu” Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị  Nguyên liệu: Rễ thầu dầu  Dụng cụ, thiết bị: Bộ chƣng ninh, bếp điện, bình tam giác có nút nhám, phễu chiết, cốc thủy tinh, tủ sấy, lò nung… Nội dung nghiên cứu  Xác định độ ẩm, hàm lƣợng tro, hàm lƣợng kim loại rễ thầu dầu  Khảo sát điều kiện ảnh hƣởng đến trình chƣng ninh: nhiệt độ, thời gian, tỉ lệ rắn-lỏng số lần chƣng ninh  Xác định thành phần hóa học rễ thầu dầu từ cao methanol qua phân đoạn lỏng-lỏng: n-hexan, clorofom, etylaxetat Giáo viên hƣớng dẫn: TS Trần Mạnh Lục Ngày giao đề tài: 04/2014 Ngày hoàn thành đề tài: 04/2015 Chủ nhiệm khoa Giáo viên hƣớng dẫn PGS.TS Lê tự Hải TS Trần Mạnh Lục Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho khoa ngày tháng năm 2015 Kết điểm đánh giá Ngày….tháng….năm 2015 LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cảm ơn thầy giáo TS Trần Mạnh Lục giao đề tài tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ cho em suốt thời gian nghiên cứu hoàn thành tốt khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo môn thầy cô công tác phịng thí nghiệm khoa hóa trƣờng Đại học Sƣ phạm – Đại học Đà Nẵng giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian nghiên cứu làm khóa luận vừa qua Bƣớc đầu làm quen với nghiên cứu khoa học nên khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận đƣợc ý kiến đóng góp, bổ sung thầy để em thu nhận thêm nhiều kiến thức kinh nghiệm cho thân sau Cuối em xin kính chúc q thầy sức khỏe, hạnh phúc thành công sống nhƣ nghiệp giảng dạy Em xin chân thành cảm ơn Đà Nẵng, ngày……tháng…… năm 2015 Sinh viên Nguyễn Thị Lý MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài .1 Mục đích nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 3.1 Đối tƣợng nghiên cứu .1 3.2 Phạm vi nghiên cứu Nội dung nghiên cứu 4.1 Nghiên cứu lý thuyết 4.2 Phƣơng pháp nghiên cứu thực nghiệm Ý nghĩa đề tài 5.1 Ý nghĩa khoa học 5.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƢƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu họ thầu dầu (Euphorbiaceae) 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Phân loại khoa học 1.1.3 Phân bố 1.1.4 Đặc điểm thực vật 1.1.5 Bộ phận sử dụng, thành phần hóa học cơng dụng 1.1.6 Một số thuốc từ thầu dầu 13 1.2 Các phƣơng pháp nghiên cứu .13 1.2.1 Phương pháp trọng lượng 13 1.2.2 Các phương pháp chiết 14 1.2.3 Phương pháp quang phổ UV – Vis 15 1.2.4 Phương pháp sắc ký ghép khối phổ (GC-MS) 16 CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm 17 2.2 Nguyên liệu .18 2.2.1 Thu hái nguyên liệu .18 2.2.2 Xử lý nguyên liệu 18 2.3 Hóa chất thiết bị - dụng cụ thí nghiệm 18 2.3.1 Hóa chất .18 2.3.2 Thiết bị, dụng cụ thí nghiệm 18 2.4 Phƣơng pháp xác định số hóa lý rễ thầu dầu 19 2.5 Khảo sát điều kiện chiết tách hợp chất rễ thầu dầu dung môi metanol theo phƣơng pháp chƣng ninh 21 2.6 Chiết tách hợp chất rễ thầu dầu từ cao metanol qua phân đoạn chiết lỏng-lỏng 22 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 3.1 Thu nguyên liệu 26 3.2 Kết khảo sát thơng số hóa lý 26 3.3 Kết khảo sát ảnh hƣởng điều kiện chiết tách hợp chất rễ thầu dầu dung môi metanol theo phƣơng pháp chƣng ninh 28 3.4.1 Dịch chiết n-hexan 32 3.4.2 Dịch chiết clorofom .36 3.4.3 Dịch chiết Etylaxetat 37 3.4.4 Dịch chiết metanol 39 3.4.5 Tổng hợp kết định danh cấu tử dịch chiết .41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 KẾT LUẬN .49 Xác định đƣợc số tiêu hóa lý: 49 Khảo sát điều kiện thích hợp cho q trình chƣng ninh rễ thầu dầu dung môi metanol .49 Thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu dung môi .49 KIẾN NGHỊ .49 PHỤ LỤC 53 DANH MỤC CÁC HÌNH Số liệu hình Tên hình Trang 1.1 Cây thầu dầu 1.2 Cây thầu dầu mọc vùng đất hoang 1.3 Lá thầu dầu 1.4 Hoa thầu dầu 1.5 Quả thầu dầu 1.6 Hạt thầu dầu 1.7 Dầu hạt thầu dầu 2.1 Bộ chƣng ninh bột rễ thầu dầu 22 2.2 Chiết lỏng – lỏng dung môi n-hexan 23 2.3 Chiết lỏng – lỏng dung môi clorofom 23 2.4 Chiết lỏng – lỏng dung môi etylaxetat 23 a) Cây thầu dầu 3.1 b) Rễ thầu dầu c) Rễ thầu dầu băm nhỏ 26 d) Bột rễ thầu dầu 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 Đồ thị biểu diễn ảnh hƣởng nhiệt độ đến trình chƣng ninh Đồ thị biểu diễn ảnh hƣởng thời gian đến trình chƣng ninh Đồ thị biểu diễn ảnh hƣởng tỉ lệ rắn-lỏng đến trình chƣng ninh Đồ thị biểu diễn ảnh hƣởng số lần chƣng 29 30 31 32 ninh Sắc kí đồ GC dịch chiết n-hexan từ rễ thầu 33 dầu 3.7 3.8 3.9 Sắc kí đồ GC dịch chiết clorofom từ rễ thầu dầu Sắc kí đồ GC dịch chiết etylaxetat từ rễ thầu dầu Sắc kí đồ GC dịch chiết metanol từ rễ thầu dầu 36 37 39 DANH MỤC CÁC BẢNG Số liệu bảng Tên bảng Trang 3.1 Kết khảo sát độ ẩm rễ thầu dầu 27 3.2 Kết khảo sát hàm lƣợng tro rễ thầu dầu 27 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 Kết hàm lƣợng số kim loại rễ thầu dầu Kết khảo sát ảnh hƣởng nhiệt độ đến trình chƣng ninh Kết khảo sát ảnh hƣởng thời gian đến trình chƣng ninh Kết khảo sát ảnh hƣởng tỉ lệ rắn–lỏng đến trình chƣng ninh Kết khảo sát ảnh hƣởng số lần chƣng ninh Thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu dung mơi n-hexan Thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu dung mơi clorofom Thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu dung mơi etylaxetat Thành phần hóa học dịch rễ thầu dầu dung môi metanol Tổng kết thành phần hóa học dịch chiết dung môi khác 28 29 30 31 32 34 36 38 40 41 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Việt Nam nằm vùng nhiệt đới có thảm thực vật phong phú, có họ thầu dầu (Euphorbiaceae) họ lớn, đa dạng Cây thầu dầu có tên khoa học Ricinus communis L…, thuộc họ thầu dầu (Euphorbiaceae) Thầu dầu thuộc loại thảo niên (loài trồng Trung Âu) hay lƣỡng niên (loài trồng Nam Âu) lƣu niên (loài trồng vùng nhiệt đới), xuất phát từ vùng Đơng Châu Phi, sau đƣợc trồng nhiều nơi giới đƣợc thích ứng hóa để trồng vùng ơn đới Hoa Kỳ.Ở Việt Nam, thầu dầu thƣờng mọc hoang tỉnh nhƣ Hà Giang, Bắc Ninh, Vĩnh Phúc, Phú Thọ, Đà Nẵng…Về công dụng y học, phận thầu dầu có tác dụng riêng, rễ thầu dầu có tác dụng lớn Rễ thầu dầu đƣợc dùng làm thuốc trị phong thấp, đau nhức khớp, đòn ngã sƣng đau, sài uốn ván, động kinh, tinh thần phân liệt nhƣng chƣa có nghiên cứu rễ thầu Vì vậy, tơi chọn đề tài: “ Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết metanol rễ thầu dầu” làm luận văn tốt nghiệp Mục đích nghiên cứu - Tìm điều kiện thích hợp chiết tách chất rễ thầu dầu - Định danh, xác định thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 3.1 Đối tượng nghiên cứu Rễ thầu dầu đƣợc thu hái quận Liên Chiểu – Đà Nẵng 3.2 Phạm vi nghiên cứu - Khảo sát yếu tố ảnh hƣởng (nhiệt độ, thời gian, tỉ lệ rắn / lỏng, số lần chiết) đến trình chƣng ninh - Xác đinh thành phần số chất dịch chiết số dung mơi hữu - Q trình thí nghiệm đƣợc tiến hành phịng thí nghiệm hóa học trƣờng Đại học Sƣ Phạm, Đại học Đà Nẵng 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Trịnh Đình Chính, Nguyễn Thị Bích Tuyết (2003), Giáo trình hợp chất tự nhiên, Đại học Huế [2] Lê Văn Đăng (2005), Chuyên đề số hợp chất thiên nhiên, NXB Đại học quốc gia TP.Hồ Chí Minh [3] Phạm Hồng Hộ (1980), Cây cỏ Việt Nam, tập 1, NXB Giáo dục [4] GS.TS Phạm Thanh Kì, Dược liệu học (tập II) sách đào tạo dƣợc sĩ đại học [5] Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học [6] AOAC 971.21(2010), AOAC 986.15(2010), AOAC 999.11(2010) [7]TCVN 5613:1991 [8]TCVN 1611:2007 Tiếng Anh [9] Fresney R.I (1993), “Culture of animal Cells; John Wiley & Sons Inc., New York”, A manual of basis techniques, 3nd Edition [10] Scudiero D.A., Shoemaker R.H., Kenneth D.P., Monks A., Tierney S., Nofziger T.H., Currens M.J., Seniff D., Boyd M.R (1998), “Evaluation of a soluable tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lines”, Cancer Reseach.48,pp.4827-4833 Websites [11] http://www.duoclieu.org/2012/02/thau-dau-ricinus-communis-l-ho-thau-dau.html [12] http://duocthaothucdung.blogspot.com/2011/12/ricin-cay-thau-dau-hay-đu đủ tía.html [13] http://thalassemia.vn/tin-tuc/suc-khoe-doi-song/thong-tin-y-duoc/%E2%80%9Dcua-ricin-4569.aspx [14] http://duoclieu.net/Thuchanh/thuc%20hanh%2010.html [15] http://botanyvn.com/cnt.asp?param=new&newsid=986 51 [16]http://www.baomoi.com/Vitamin-E-co-tac-dung-chong-laohoada/138/10278540.epi [17] http://www.botanyvn.com Trung tâm liệu Việt Nam [18]http://moli.vn/content/de-co-doi-mi-dai-cong-voi-dau-thau-dau.html [19] http://www.aristatek.com/newsletter/mar08/mar08ts.aspx [20] http://botanyvn.com/cnt.asp?param=news&newsid=1129 [21] http://en.wikipedia.org/wiki/Ricin [22] http://mji.ui.ac.id/journal/index.php/mji/article/view/1085 [23] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21658378 [24] http://www.xnkhoachat.com/2012/06/acid-stearic-cong-dung-acid-stearic.html [25] http://en.wikipedia.org/wiki/Linoleic_acid [26]http://www.trc-canada.com/detail.php?CatNum=R495550&CAS=524-403&Chemical_Name=Ricinine&Mol_Formula=C8H8N2O2&Synonym=1,2-Dihydro4-methoxy-1-methyl-2-oxo-3-pyridinecarbonitrile; 1,2-Dihydro-4-methoxy-1-methyl2-oxonicotinonitrile; Recinine; NSC 409913; NSC 642604; Ricinin [27] http://www.chemicalbook.com/ChemicalProductProperty_EN_CB2202950.htm [28] http://en.wikipedia.org/wiki/Phytol [29] http://encyclopedia2.thefreedictionary.com/Phytol [30] http://www.naturalwellbeing.com/learning-center/Phytol [31] http://en.wikipedia.org/wiki/Palmitic_acid [32] http://en.wikipedia.org/wiki/Paeonol [33] http://en.wikipedia.org/wiki/sterol [34] http://en.wikipedia.org/wiki/campesterol [35] http://en.wikipedia.org/wiki/Stigmasterol [36]http://suckhoedoisong.vn/y-hoc-co-truyen/thuoc-tu-thau-dau-tia20090812084350405.htm [37] http://tailieu.vn/doc/cac-phuong-phap-tach-chiet-1229426.html [38] http://tai-lieu.com/tai-lieu/phuong-phap-hap-thu-phan-tu-uv-vis-1095/ [39] http://tailieu.vn/tag/phuong-phap-gc-ms.html 52 [40]http://www.wattpad.com/5409380-ph%C6%B0%C6%A1ng-ph%C3%A1pph%C3%A2n-t%C3%ADch-kh%E1%BB%91i-l%C6%B0%E1%BB%A3ng [41] http://en.wikipedia.org/wiki/Stigmastanol [42] http://www.serum.vn/2014/02/tac-dung-cua-vitamin-e-400-iu-lam-ep.html [43] http://www.rsc.org/learn-chemistry/resource/rws13863629/furfural [44]http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/173401?lang=en®ion=VN 53 PHỤ LỤC Phổ khối số chất Phổ MS 1,2-Benzenedicarboxylic acid,butyl-2-ethylhexylester phổ đối chứng Phổ MS 9,12,15-Octadecatrienoic acid, (Z,Z,Z)- phổ đối chứng 54 Phổ MS Heptadecanoic acid phổ đối chứng Phổ MS 1,2-Benzenedicarboxylic acid, mono(2-ethylhexyl) ester phổ đối chứng 55 Phổ MS 4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl- phổ đối chứng Phổ MS 2-Furancarboxylic acid, hydrazide vad phổ đối chứng 56 Phổ MS 2-Furancarboxaldehyde, 5-methyl- phổ đối chứng Phổ MS 2-Furancarboxaldehyde, 5-(hydroxymethyl)- phổ đối chứng 57 Phổ MS 2,5-Furandicarboxaldehyde phổ đối chứng phổ đối chứng Phổ MS Stigmasterol phổ đối chứng 58 Phổ MS Gama-sitosterol phổ đối chứng Phổ MS Campesterol phổ đối chứng 59 Phổ MS vitamin E phổ đối chứng Phổ MS stigmastanol phổ đối chứng 60 Phổ MS Ethanon, 1- (2-hydroxy-4-metoxyphenyl) phổ đối chứng Phổ MS n-hexadecanoic axit phổ đối chứng 61 Phổ MS Octadecanoic acid phổ đối chứng Phổ MS 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)- phổ đối chứng 62 Phổ MS Phytol phổ đối chứng Phổ MS Phytol phổ đối chứng 63 Phổ MS 1,2,3-Benzenetriol phổ đối chứng Phổ MS Furfural phổ đối chứng 64 ... ảnh hƣởng số lần chƣng ninh Thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu dung mơi n-hexan Thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu dung mơi clorofom Thành phần hóa học dịch chiết rễ thầu dầu dung...ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA Đề tài: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT METANOL CỦA RỄ CÂY THẦU DẦU KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP... Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết metanol rễ thầu dầu? ?? làm luận văn tốt nghiệp Mục đích nghiên cứu - Tìm điều kiện thích hợp chiết tách chất rễ thầu dầu - Định danh, xác