Nghiên cứu chiết tách lá cây chùm ngây bằng phương pháp soxhlet và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết etanol tổng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA NGUYỄN THỊ HUỲNH PHƯƠNG NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH LÁ CÂY CHÙM NGÂY BẰNG PHƯƠNG PHÁP SOXHLET VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG DỊCH CHIẾT ETANOL TỔNG TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Đà Nẵng- Năm 2019 MỞ ĐẦU LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI Ngày việc nghiên cứu, sàng lọc hợp chất thiên nhiên có tác dụng dược lý hướng nhiều nhà khoa học nước quan tâm Từ có định hướng cho việc chiết xuất để tìm loại thuốc việc điều trị bệnh Chính việc nghiên cứu thành phần hóa học từ cỏ thiên nhiên có ý nghĩa khoa học thực tiễn cao Việt Nam nước có khí hậu nhiệt đới gió mùa, nhiều loại địa hình nên có nguồn động thực vật đa dạng Vậy nên nguồn thực vật có hoạt tính sinh học dồi phong phú Ngay từ xa xưa, ông cha ta sử dụng nguồn tài nguyên thực vật làm thuốc chữa bệnh bơi ngồi da, sử dụng trực tiếp hay sắc uống… Ngày nay, nhà khoa học dựa vào khoa học kĩ thuật để tìm hiểu phân tích hoạt chất có tác dụng sinh học thực vật, dược liệu tìm câu trả lời thành phần hoạt chất chế tác dụng chúng[8] Trên sở nhận thức tầm quan trọng cơng dụng làm thuốc cỏ có nước ta, tơi chọn lồi có nhiều giá trị kinh tế, đặc biệt làm thuốc, chùm ngây họ chùm ngây để nghiên cứu Chùm ngây loại nằm danh sách loại hữu dụng bậc giới Các phận cùm ngây vừa làm thực phẩm, vừa làm dược phẩm, chí làm thực phẩm chức Tất phận chứa nhiều khoáng chất nguyên tố vi lượng quý giá Do vậy, chùm ngây khuyến khích trồng nhiều quốc gia giới, đặc biệt nước nghèo Các tổ chức phi phủ Trees for Life International, Church World Service, Educational Concerns for Hunger Organization Volunteer Partnerships for West Africa ủng hộ cho chùm ngây "nguồn dinh dưỡng tự nhiên cho nước nhiệt đới" Ở Việt Nam, trước đây, chùm ngây biết đến vị thuốc nam dùng để điều trị số bệnh thông thường dân gian Thế gần đây, nhờ phát y học, hoa đặc biệt chùm ngây ăn bổ dưỡng cho thể nên nhiều địa phương bắt đầu trồng, kinh doanh loại rau này.Với tính đa dạng phong phú thế, nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học, ứng dụng phương pháp xác định cấu trúc nghiên cứu hoạt tính sinh học số hợp chất có chùm ngây Việt Nam hướng nghiên cứu có nhiều triển vọng có ý nghĩa khoa học thực tiễn Do tơi lựa chọn đề tài: “Nghiên cứu chiết tách chùm ngây phương pháp Soxhlet xác định thành phần hóa học dịch chiết etanol tổng” làm đề tài khóa luận tốt nghiệp MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Tìm điều kiện thích hợp chiết tách chất chùm ngây - Định danh, xác định thành phần hóa học dịch chiết từ - Thăm dị hoạt tính kháng viêm chống oxi hóa dịch chiết từ chùm ngây ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI NGHIÊN CỨU - Lá chùm ngây thu hái Đà Nẵng - Phạm vi nghiên cứu: Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết - Xác định thành phần số hợp chất dịch chiết từ chùm ngây - Q trình thí nghiệm tiến hành phịng thí nghiệm hóa hữu trường Đại học Sư Phạm- Đại học Đà Nẵng PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 4.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết - Thu thập, tổng hợp tài liệu, tư liệu nguồn nguyên liệu, phương pháp nghiên cứu hợp chất tự nhiên, thành phần hóa học ứng dụng chùm ngây - Tổng hợp tài liệu phương pháp lấy mẫu, chiết tách xác định thành phần hóa học chất từ thực vật - Tổng hợp tài liệu đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hóa học ứng dụng chùm ngây 4.2 Phương pháp nghiên cứu thực nghiệm - Phương pháp lấy xử lí mẫu - Phương pháp trọng lượng xác định độ ẩm - Phương pháp tro hóa mẫu xác định hàm lượng hữu - Phương pháp AAS xác định hàm lượng kim loại nặng - Phương pháp chiết: Chiết Soxhlet dung môi etanol - Phương pháp xác định thành phần hóa học, định danh, xác định cấu trúc cấu tử phương pháp sắc kí khí khối phổ (GC- MS) - Phương pháp sinh học thăm dị hoạt tính kháng viêm chống oxi hóa Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI Những kết nghiên cứu góp phần cung cấp thơng tin có ý nghĩa khoa học thành phần hố học hoạt tính sinh học chất chiết tách từ chùm ngây, qua góp phần nâng cao giá trị ứng dụng chùm ngây ngành dược liệu Bố cục khóa luận gồm: Mở đầu Chương Tổng quan tài liệu Chương Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu Chương Kết thảo luận Kết luận kiến nghị CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY CHÙM NGÂY 1.1.1 Sơ lược chùm ngây 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.2 GIÁ TRỊ SỬ DỤNG CỦA CÂY CHÙM NGÂY 1.2.1 Giá trị dinh dưỡng 1.2.2 Giá trị y học 1.3 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÓ TRONG CÂY CHÙM NGÂY 1.3.1 Vitamin E 1.3.2 Stigmasterol 1.3.3 Axit oleic 1.4 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ CÂY CHÙM NGÂY 1.4.1 Trên giới 1.4.2 Tại Việt Nam CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT, THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 2.1.1 Nguyên liệu Mẫu chùm ngây tươi thu hái phường Hòa Hiệp Nam, quận Liên Chiểu, thành phố Đà Nẵng Sau đó, xử lý sơ bộ, rửa sạch, phơi bóng râm từ 1-2 ngày đem sấy đến khô nhiệt độ 50℃, xay nhỏ bảo quản bình thủy tinh kín Bột chùm ngây mịn, màu xanh lục, có mùi thơm đặc trưng chùm ngây Hình 2.1 Lá chùm ngây tươi Hình 2.2 Lá chùm ngây khơ Hình 2.3 Bột chùm ngây 2.1.2 Hóa chất thiết bị nghiên cứu Dung môi chiết Etanol: C2H6O; M= 46.07g/mol; chất lỏng khơng màu tan hồn tồn nước, khối lượng riêng D= 0.789g/ml; nhiệt độ sơi 78℃ Một số hóa chất khác sử dụng Các thiết bị xác định cấu trúc chất: Phổ khối GC-MS Máy quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) Khoa Sinh trường Đại Học Sư PhạmĐại Học Đà Nẵng Ngồi cịn dùng số trang thiết bị khác máy cô quay chân khơng, cân phân tích, chiết soxhlet, cốc thủy tinh, giấy lọc, phễu chiết, loại pipet, tủ sấy, lò nung, 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1 Xác định số tiêu hóa lý 2.2.1.1 Độ ẩm 2.2.1.2 Hàm lượng tro 2.2.1.3 Hàm lượng kim loại nặng 2.2.1.4 Hàm lượng Protein 2.2 PHƯƠNG PHÁP CHIẾT MẪU THỰC VẬT 2.2.1 Kỹ thuật chiết Soxhlet 2.2.3 Phương pháp phổ hấp thụ nguyên tử AAS 2.2.4 Phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH KHÁNG VIÊM VÀ CHỐNG OXI HÓA 2.3.1 Phương pháp đánh giá hoạt tính kháng viêm 2.3.2 Phương pháp đánh giá hoạt tính quét gốc tự DPPH 2.4 SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM Lá chùm ngây tươi Rửa phơi bóng râm 1-2 ngày Sấy khơ 50℃, xay nhỏ, bảo quản kín -Đo độ ẩm -Hàm lượng tro Bột chùm ngây -Hàm lượng kim loại nặng Chiết Soxhlet với Etanol Khảo sát thời gian chiết, tỉ lệ R/L Dịch chiết (Etanol) Cô đuổi dung môi - Đo GC-MS Cao (Etanol) - Đo hoạt tính sinh học Cao (Chloroform) Cao (Nước) Hình 2.8 Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU HÓA LÝ 3.1.1 Độ ẩm Độ ẩm bột chùm ngây xác định phương pháp trọng lượng với khối lượng bột chùm ngây ban đầu 3g kết trình bày bảng 3.1 Bảng 3.1 Kết khảo sát độ ẩm bột chùm ngây STT m+ m1 (gam) m2 (gam) W (%) 45.985 45.786 6.630 37.755 37.554 6.700 40.067 39,862 6.823 39,707 39.507 6.677 42,988 42.786 6.673 W trung bình (%) 6.701 Nhận xét: Kết độ ẩm trung bình bột chùm ngây 6.071% phù hợp so với tiêu chuẩn bảo quản dược liệu quy định Dược điển Việt Nam (≤ 13%) Với độ ẩm ta bảo quản bột chùm ngây thời gian dài mà không bị hư hỏng, khơng có thay đổi mặt cảm quan, ngun liệu có độ ổn định tốt, phù hợp cho trình nghiên cứu 3.1.2 Hàm lượng tro Bột chùm ngây đem tro hóa lượng bột xác định độ ẩm, khối lượng bột chùm ngây ban đầu 3g Bằng phương pháp xác định hàm lượng tro toàn phần theo Dược điển Việt Nam 5, hàm lượng tro nguyên liệu xác định trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2 Kết khảo sát hàm lượng tro bột chùm ngây STT m1 (gam) m3 (gam) H (%) 42.985 43,175 6.333 34.755 34.943 6.267 37.067 37.255 6.167 36,707 36.902 6.500 39,988 40.325 6.633 H trung bình (%) 6.380 Nhận xét: Hàm lượng tro trung bình mẫu bột chùm ngây 6.380 % So với tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam quy định hàm lượng tro tồn phần khơng vượt q 20% đạt tiêu chuẩn Như vậy, hàm lượng tro bột chùm ngây chấp nhận Qua dự đoán bột chùm ngây chứa lượng chất vơ cơ, có mặt muối số kim loại Na, K, Ca, Fe, Cu, 3.1.3 Hàm lượng protein Kết đo hàm lượng protein bột chùm ngây 23.4g/100g Từ cho thấy chùm ngây giàu protein mang lại giá trị dinh dưỡng cao Lượng protein cao nhiều lần so với thực phẩm khác Đây loại tốt cho sức khỏe cần nghiên cứu ứng dụng nhiều vào sống Hàm lượng protein chứng tỏ bột chùm ngây sử dụng loại thực phẩm sử dụng ngày 3.1.4 Hàm lượng kim loại Bảng 3.3 Hàm lượng số kim loại nặng bột chùm ngây Kim loại Hàm lượng bột chùm ngây Hàm lượng cho phép (mg/kg) (mg/kg) Kẽm (Zn) KPH ≤ 40.00 Chì (Pb) KPH ≤ 0.30 Đồng (Cu) 2.13 ≤ 30.00 Nhận xét: Kết cho thấy hàm lượng kim loại nặng mẫu bột chùm ngây có đồng nằm giới hạn cho phép sử dụng, an tồn, khơng ảnh hưởng đến sức khỏe người Hàm lượng kim loại nặng thấp cho phép bột chùm ngây sử dụng làm dược liệu, thực phẩm Căn theo định số 46/2007/QĐ-BYT y tế ngày 19/12/2007 “ Quy định giới hạn tối đa nhiễm sinh học hóa học thực phẩm” 3.2 KẾT QUẢ KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH CHIẾT TÁCH BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾT SOXHLET Trong khuôn khổ đề tài này, thực việc chiết mẫu theo kỹ thuật chiết Soxhlet để điều chế cao tổng etanol khảo sát yếu tố ảnh hưởng dến phương pháp chiết Khảo sát tỉ lệ rắn/ lỏng (R/L), thời gian chiết xác định điều kiện tối ưu để chiết bột chùm ngây với dung môi etanol phương pháp Soxhlet Bộ dụng cụ Soxhlet sử dụng cho trình nghiên cứu Soxhlet 500ml 3.2.1 Khảo sát tỉ lệ rắn lỏng Để xác định tỉ lệ rắn/lỏng ta chiết Soxhlet với lượng bột chùm ngây khoảng 10g, thể tích dung mơi etanol thay đổi từ 100ml đến 300ml, vòng 10 Thu dịch chiết, cô đuổi dung môi đến khối lượng không đổi đem cân Bảng 3.4 Kết khảo sát tỉ lệ rắn/lỏng chiết Soxhlet etanol STT Thể tích (ml) Thời gian (giờ) m (g) mcao (g) % mcao (%) 100 10 10.002 0.998 9.978 150 10 10.003 1.172 11.716 200 10 10.001 1.356 13.559 250 10 10.003 1.353 13.525 300 10 10.001 1.354 13.538 Nhận xét: Qua kết bảng 3.4 ta thấy thể tích dung mơi tăng khối lượng cao chiết nhiều Tuy nhiên khối lượng cao chiết bắt đầu giảm khảo sát 250ml 300ml Nguyên nhân tăng lượng dung mơi chiết, cấu tử có bột chùm ngây hịa tan dung mơi nhiều Lượng dung mơi chiết nhiều hàm lượng cấu tử có cao chiết tăng dẫn dến khối lượng cao chiết tăng lên Khi cấu tử hịa tan gần hết dung mơi khối lượng cao chiết tăng chậm có xu hướng không đổi Như vậy, tỉ lệ rắn lỏng tối ưu bột chùm ngây chiết với etanol phương pháp Soxhlet 1/20 3.2.2 Khảo sát thời gian chiết Soxhlet Sử dụng phương pháp chiết Soxhlet với tỉ lệ rắn lỏng 1/20 gồm khoảng 10g bột chùm ngây 200ml dung môi etanol Tiến hành chiết mẫu với thời gian khác nhau, 2, 4, 6, 8, 10 Thu dịch chiết cô đuổi dung môi đến khối lượng không đổi cân Bảng 3.5 Kết khảo sát thời gian chiết Soxhlet bột chùm ngây etanol STT Tỉ lệ R/L Thời gian m (g) mcao (g) % mcao (%) (g/ml) (giờ) 1/20 10.002 0.989 9.978 1/20 10.003 1.133 11.716 1/20 10.001 1.376 13.559 1/20 10.003 1.493 13.525 1/20 10 10.001 1.489 13.538 Nhận xét: Kết bảng 3.5 ta thấy, thời gian chiết tăng khối lượng cao chiết thu nhiều Khối lượng cao chiết tăng từ đến 10 bắt đầu giảm khảo sát 10 Nguyên nhân tăng thời gian chiết, cấu tử có bột chùm ngây hòa tan dung mơi nhiều Tuy nhiên đến lúc đó, cấu tử hòa tan gần hết dung mơi khối lượng cao chiết tăng chậm có xu hướng khơng đổi.Vậy thời gian chiết tối ưu chiết Soxhlet bột chùm ngây dung môi etanol 3.2.3 Kết điều chế cao chiết Kết điều chế cao tổng etanol, cao chiết chloroform cao chiết nước trình bày bảng 3.6 Bảng 3.6 Khối lượng cao chiết phân đoạn Loại cao Khối lượng (g) Etanol 15.314 Chloroform 10.647 Nước 2.732 10 Nhận xét: Lượng cao thu cao chloroform 69,52% cao nước 17,84% so với cao tổng Vậy tổng lượng cao thu phân đoạn 87,36%, đảm bảo trình thu nhận cao Cao thu chloroform thu nhiều so với cao nước Trong đề tài này, chọn cao chiết etanol để định danh phương pháp GC-MS đo hoạt tính sinh học kháng viêm chống oxi hóa 3.3 KẾT QUẢ ĐO HOẠT TÍNH KHÁNG VIÊM VÀ CHỐNG OXI HĨA CỦA DỊCH CHIẾT ETANOL TỪ BỘT LÁ CHÙM NGÂY 3.3.1 Kết đo hoạt tính chống oxi hóa Chất đối chứng ascorbic acid dùng để kiểm soát độ ổn định đánh giá hoạt tính ức chế tương đương Hóa tính ascorbic acid hóa tính nhóm chức lacton, nhóm hydroxyl, liên kết đơi, song quan trọng nhóm chức endiol Chính nhóm định tính axit tính khử acid ascorbic nhờ mà ascorbic acid có khả bắt gốc tự Trong nghiên cứu hoạt tính chống oxi hố phương pháp qt gốc tự DPPH ascorbic acid hay sử dụng để làm chất đối chứng Bảng 3.7 Kết đo hoạt tính chống oxi hóa DPPH Tên mẫu Nồng độ thử % (µg/ml) Inhibition 100 8.29 1.85 500 32.66 2.02 10 19.79 2.74 50 95.30 0.06 Sai số Cao etanol Ascorbic acid Nhận xét: Kết từ 2.8 cho thấy nồng độ thử nghiệm 100g/ml cao etanol bột chùm ngây có tỉ lệ ức chế tỉ lệ ức chế ascorbic acid có nồng độ 10g/ml Khi nồng độ thử nghiệm cao etanol 500g/ml gấp 10 lần nồng độ thử nghiệm ascorbic acid tỉ lệ ức chế thấp nhiều so với tỉ lệ ức chế 11 ascorbic acid Sai số trình đo hoạt tính lớn Cao etanol từ bột chùm ngây có tỉ lệ ức chế thấp 50%.Từ kết luận cao etanol bột chùm ngây khơng có khả chống oxi hóa 3.3.2 Kết đo hoạt tính kháng viêm Bảng 3.8 Hoạt tính ức chế sản sinh nitric oxide (NO) tế bào RAW264.7 % Ức chế Sai số % Tế bào sống Sai số Control 100.00 0.32 92.85 1.37 LPS 0.00 0.49 100.00 0.89 30 µg/ml 36.60 1.79 75.81 1.28 100 µg/ml 56.86 1.07 59.64 0.80 0.3 µM 27.45 1.85 89.66 0.86 µM 86.47 0.59 81.25 1.35 Tên mẫu Cao Etanol Cardamonin Nồng độ Nhận xét: Kết bảng 3.9 cho thấy cao etanol bột chùm ngây nồng độ 30µg/ml 100µg/ml có hoạt tính ức chế sản sinh NO gây độc cho tế bào RAW 264.7 Tỉ lệ ức chế sản sinh NO dịch chiết etanol thấp so với tỉ lệ ức chế NO cardamonin.Tuy nhiên, dịch chiết etanol gây độc cho tế bào so với cardamonin Tỉ lệ ức chế sản sinh NO dịch chiết etanol nồng độ 100g/ml lớn 50% đồng thời tỉ lệ tế bào sống sót thấp Vậy kết luận cao etanol bột chùm ngây có hoạt tính chống viêm hoạt tính yếu gây độc cho tế bào cụ thể tế bào RAW264.7 3.4 KẾT QUẢ KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETANOL CỦA BỘT LÁ CÂY CHÙM NGÂY BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-MS Kết định danh thành phần hóa học có cao etanol bột chùm ngây trình bày bảng 3.9 12 Bảng 3.9 Thành phần hóa học cao etanol bột chùm ngây Peak Tr Area (%) Name 25.809 0.83 Cyperenone 27.427 1.12 7-Isopropenyl1-14--dimethyl1-4,4.5,6,7,8hexahydro -3H-naphthal 27.756 0.46 6-hydroxy-4,4,7--trimethyl-5,6,7,7-tetrahydrobenzofuran-2(4H) 29.216 1.57 Neophytadiene 32.639 5.18 Phytol 39.328 1.62 -Tocopherol 39.964 4.70 -Tocopherol 40.923 0.56 Campesterol 41.230 0.55 Stigmasterol 10 41.832 3.29 -Sitosterol 11 42.017 3.25 Isofucosterol 12 42.310 1.94 -Amyrin 13 42.668 0.75 33-Norgorgosta-5,24(28)-dien-3-ol 14 42.828 0.52 Lupeol Nhận xét: Từ kết bảng 3.9 cho thấy phương pháp GC-MS định danh 14 chất cao etanol bột chùm ngây Trong đó, Phytol chiếm hàm lượng cao (5.18%), tiếp -Tocopherol chiếm 4.70%, -Sitosterol chiếm 3.29%, Isofucosterol chiếm 3.25%, -Amyrin chiếm 1.94% Thành phần hóa học cao etanol bột chum ngây chủ yếu sterol hydrocacbon 13 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Trong trình nghiên cứu, đề tài đạt kết sau: - Độ ẩm bột chùm ngây 6.071% - Hàm lượng tro bột chùm ngây 6.38% - Hàm lượng kim loại nặng: phát đồng có hàm lượng 2,13mg/kg, khơng phát chì kẽm Hàm lượng kim loại nặng nằm khoảng giói hạn cho phép theo quy định Bộ y tế - Hàm lượng Protein 23,4g/100g - Thời gian chiết tối ưu bột chùm ngây etanol - Tỉ lệ rắn lỏng bột chùm ngây dung môi etanol 1/20 thu khối lượng cao chiết lớn - Điều chế cao tổng etanol từ 100g bột chùm ngây thu 15.314g cao, từ thấy hiệu suất chiết 15.314% - Điều chế cao chloroform thu 10,647g cao cao nước thu 2.732g cao so với lượng cao tổng etanol 87,36% - Xác định thành phần hóa học cao tổng etanol định danh tổng cộng 14 cấu tử phương pháp GC-MS - Phương pháp đánh giá hoạt tính quét gốc tự DPPH xác định cao etanol bột chùm ngây khơng có hoạt tính chống oxi hóa - Cao etanol từ bột chùm ngây có hoạt tính kháng viêm yếu gây độc cho tế bào thử nghiệm tế bào RAW264.7 KIẾN NGHỊ Trong q trình nghiên cứu tơi có kiến nghị sau: -Tiếp tục phân lập, xác định cấu trúc hợp chất tinh khiết có hoạt tính sinh học cao, phục vụ cho y học.Tiếp tục nghiên cứu định danh thành phần hóa học phận chùm ngây để có nguồn tài liệu tổng quan chùm ngây - Thăm dị hoạt tính sinh học khác cao từ bột chùm ngây 14 ... chiết tách chùm ngây phương pháp Soxhlet xác định thành phần hóa học dịch chiết etanol tổng? ?? làm đề tài khóa luận tốt nghiệp MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Tìm điều kiện thích hợp chiết tách chất chùm ngây. .. - Phương pháp chiết: Chiết Soxhlet dung môi etanol - Phương pháp xác định thành phần hóa học, định danh, xác định cấu trúc cấu tử phương pháp sắc kí khí khối phổ (GC- MS) - Phương pháp sinh học. .. dụng chùm ngây - Tổng hợp tài liệu phương pháp lấy mẫu, chiết tách xác định thành phần hóa học chất từ thực vật - Tổng hợp tài liệu đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hóa học ứng dụng chùm ngây