LVTS-Cát sâm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HẢI NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BIỆT MỘT SỐ LOẠI CÁT SÂM Ở BẮC GIANG VÀ QUẢNG NINH LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HẢI NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BIỆT MỘT SỐ LOẠI CÁT SÂM Ở BẮC GIANG VÀ QUẢNG NINH LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC LIỆU - DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 8720206 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thị Bích Thu PGS.TS Trần Văn Ơn HÀ NỘI 2019 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, tơi xin gửi lời biết ơn chân thành, lịng kính trọng tới PGS.TS Nguyễn Thị Bích Thu PGS.TS Trần Văn Ơn – người trực tiếp hướng dẫn tận tình, chu đáo, ln động viên khích lệ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian thực luận văn Xin chân thành cảm ơn ThS Nghiêm Đức Trọng, chị Chu Thị Thoa, DS Lê Thiên Kim với thầy cô anh chị em Bộ môn Thực vật – Trường Đại học Dược Hà Nội ln tận tình, tạo điều kiện thuận lợi hết lòng giúp đỡ tơi q trình thực luận văn Bộ môn Xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Dược liệu, tồn thể anh chị Khoa Hố phân tích - Tiêu chuẩn, Viện Dược liệu tạo điều kiện, giúp đỡ, động viên tơi hồn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Cục Quản lý Y, Dược cổ truyền – Bộ Y tế, tồn thể đồng nghiệp Phịng Quản lý Dược cổ truyền tạo điều kiện, xếp công việc hợp lý, động viên tơi q trình học tập hoàn thành luận văn Và cuối xin gửi lời cảm ơn tới bạn bè, người thân gia đình ln tạo điều kiện, quan tâm, giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu Hà Nội, ngày 28 tháng 03 năm 2019 Học viên Phạm Văn Hải MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật chi Callerya 1.1.1 Vị trí phân loại chi Callerya 1.1.2 Đặc điểm thực vật khóa phân loại chi Callerya 1.1.3 Phân bố chi Callerya giới Việt Nam 1.2 Đặc điểm thực vật loài chi Callerya Việt Nam 12 1.2.1 Callerya atropurpurea (Wall.) Schot 12 1.2.2 Callerya cinerea (Benth.) Schot 12 1.2.3 Callerya cochinchinensis Gagn 13 1.2.4 Callerya eurybotrya Drake 13 1.2.5 Callerya fordii (Dunn) Schot 14 1.2.6 Callerya oosperma (Dunn) Z Wei & Pedley 14 1.2.7 Callerya reticulata var reticulata 15 1.3 Tổng quan Cát sâm (Callerya speciosa (Champ.) Schot) 15 1.3.1 Đặc điểm thực vật 15 1.3.2 Phân bố sinh thái 17 1.3.3 Thành phần hóa học 17 1.3.4 Tác dụng công dụng 26 1.3.5 Một số thuốc có Cát sâm 27 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.2 Địa điểm nghiên cứu 29 2.3 Phương pháp nghiên cứu 30 2.3.1 Phương tiện nghiên cứu 30 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu 30 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 34 3.1 Đặc điểm thực vật mẫu nghiên cứu thu hái Bắc Giang Quảng Ninh 34 3.1.1 Đặc điểm hình thái chung mẫu nghiên cứu 34 3.1.2 Đặc điểm hình thái loài Callerya speciosa (Champ.) Schot 35 3.1.3 Đặc điểm hình thái lồi Callerya fordii (Dunn) Schot 39 3.1.4 Đặc điểm hình thái loài Callerya sp 42 3.1.5 So sánh đặc điểm hình thái mẫu nghiên cứu 44 3.1.6 Đặc điểm giải phẫu Callerya speciosa (Champ.) Schot 46 3.1.7 Đặc điểm giải phẫu Callerya fordii (Dunn) Schot 53 3.1.8 Đặc điểm giải phẫu Callerya sp 59 3.2 Định tính thành phần hóa học xác định hàm lượng flavonoid toàn phần mẫu nghiên cứu 61 3.2.1 Đặc điểm sắc ký đồ TLC định tính nhóm chất flavonoid Cát sâm 61 3.2.2 Đặc điểm sắc ký đồ TLC định tính nhóm chất saponin Cát sâm 64 3.2.3 Khảo sát hàm lượng flavonoid tổng số Cát sâm 66 CHƯƠNG IV: BÀN LUẬN 68 4.1 Về đặc điểm thực vật phân bố 68 4.1.1 Về đa dạng loài mẫu nghiên cứu 68 4.1.2 Về xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu 68 4.1.3 So sánh đặc điểm thực vật mẫu nghiên cứu với mẫu mô tả theo tài liệu nước 70 4.2 Về đặc điểm giải phẫu thân, bột rễ 82 4.2.1 Về đặc điểm giải phẫu thân, 82 4.2.2 Về đặc điểm bột rễ phân biệt loài 82 4.3 Về đặc điểm sắc ký đồ thành phần hóa học 83 KẾT LUẬN 85 KIẾN NGHỊ 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 1: PHIẾU GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÁC MẪU NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 2: GIẤY CHỨNG NHẬN MÃ SỐ TIÊU BẢN CÁC MẪU NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 3: ẢNH TIÊU BẢN CỦA CÁC MẪU TRÊN THẾ GIỚI PHỤ LỤC 4: ẢNH TIÊU BẢN CỦA CÁC MẪU NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 5: ẢNH GIẢI PHẪU THÂN, LÁ VÀ BỘT RỄ MẪU NGHIÊN CỨU DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT APCI-MS: Atmospheric Pressure Chemical Ionization Mass Spectroscopy COSY: Correlation Spectroscopy C.: Callerya DEPT: Distortionless Enhancement by Polarization Transfer ESI-MS: ElectroSpray Ionization Mass Spectroscopy EtOAc: Ethyl acetat EtOH: Ethanol HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation HMQC: Heteronuclear Multiple-Quantum Correlation HPLC: High-Performance Liquid Chromatography HPTLC: High – Performance Thin Liquid Chromatography NMR: Nuclear magnetic resonance NOESY: Nuclear Overhauser Spectroscopy MeOH: Methanol SKLM: Sắc ký lớp mỏng TLC: Sắc ký lớp mỏng TLTK: Tài liệu tham khảo DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Danh sách mẫu nghiên cứu 28 Bảng 3.1 Đặc điểm phân biệt lồi mang tên Cát sâm Bắc Giang Quảng Ninh 45 Bảng 3.2 Giá trị Rf vết phát quang màu xanh xuất sắc ký đồ TLC định tính flavonoid 62 Bảng 3.3 Giá trị Rf vết xuất màu hồng vàng sắc ký đồ TLC định tính saponin 64 Bảng 3.4 Hàm lượng flavonoid toàn phần (tính theo catechin) mẫu Cát sâm 66 Bảng 4.1 So sánh đặc điểm mẫu nghiên cứu (M1, M3) với Callerya speciosa (Champ.) Schot theo Thực vật chí Trung Quốc, Thực vật chí đại cương Đơng Dương Thực vật chí Campuchia, Lào Việt Nam 71 Bảng 4.2 So sánh đặc điểm mẫu nghiên cứu (M2, M4) với lồi Callerya fordii (Dunn) Schot theo Thực vật chí Trung Quốc Thực vật chí Campuchia, Lào Việt Nam 75 Bảng 4.3 So sánh đặc điểm mẫu nghiên cứu M6 với số loài chi Callerya phân bố Việt Nam 78 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh Cát sâm xóm Khe Táu, xã Yên Định, 16 huyện Sơn Động, tỉnh Bắc Giang 16 Hình 1.2 Các alcaloid phân lập từ Cát sâm 18 Hình 1.3 Các coumarin lignan phân lập từ Cát sâm 22 Hình 1.4 Các terpenoid steroid phân lập từ Cát sâm 23 Hình 1.5 Các saponin phân lập từ Cát sâm 24 Hình 1.6 Các acid hữu phân lập từ Cát sâm 25 Hình 3.1 Hình ảnh mẫu nghiên cứu thực địa 34 Hình 3.2 Đặc điểm hình thái thân, mẫu nghiên cứu 35 Hình 3.3 Đặc điểm hình thái quan sinh dưỡng Callerya speciosa (Champ.) Schot 37 Hình 3.4 Đặc điểm hình thái hoa Callerya speciosa (Champ.) Schot 38 Hình 3.5 Đặc điểm hình thái Callerya speciosa (Champ.) Schot 39 Hình 3.6 Đặc điểm hình thái Callerya fordii (Dunn) Schot 41 Hình 3.7 Đặc điểm hình thái thân, Callerya sp 43 Hình 3.8 Đặc điểm hình thái hoa Callerya sp 44 Hình 3.9 Đặc điểm vi phẫu thân Callerya speciosa (Champ.) Schot 47 Hình 3.10 Đặc điểm vi phẫu Callerya speciosa (Champ.) Schot 49 Hình 3.11 Đặc điểm vi phẫu rễ Callerya speciosa (Champ.) Schot 51 Hình 3.12 Đặc điểm bột rễ Callerya speciosa (Champ.) Schot 52 Hình 3.13 Đặc điểm giải phẫu thân Callerya fordii (Dunn) Schot 54 Hình 3.14 Đặc điểm giải phẫu Callerya fordii (Dunn) Schot 56 Hình 3.15 Đặc điểm giải phẫu rễ Callerya fordii (Dunn) Schot 57 Hình 3.16 Đặc điểm bột rễ Callerya fordii (Dunn) Schot 58 Hình 3.17 Đặc điểm giải phẫu thân Callerya sp 59 Hình 3.18 Đặc điểm giải phẫu Callerya sp 61 Hình 3.19 Sắc ký đồ TLC định tính flavonoid mẫu Cát sâm 62 Hình 3.20 Mối quan hệ gần gũi mẫu Cát sâm dựa theo sắc ký đồ TLC nhóm chất flavonoid 64 Hình 3.21 Sắc ký đồ TLC định tính saponin mẫu Cát sâm 65 Hình 4.1 Hình ảnh mẫu nghiên cứu (M1) loài C speciosa Thực vật chí Trung Quốc 74 Hình 4.2 Hình ảnh mẫu nghiên cứu (M2) lồi C fordii (Dunn) Schot Thực vật chí Trung Quốc 77