Nghiên cứu quy trình thực hiện tiêu bản hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu các loại mô và cơ quan sinh dưỡng ở một số loài thực vật điển hình

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA TÀI NGUYÊN MÔI TRƯỜNG BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015-2016 XÉT GIẢI THƯỞNG "TÀI NĂNG KHOA HỌC TRẺ ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT" NĂM 2015-2016 NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH THỰC HIỆN TIÊU BẢN HIỂN VI CỐ ĐỊNH CẤU TRÚC GIẢI PHẪU CÁC LOẠI MƠ VÀ CƠ QUAN SINH DƯỠNG Ở MỘT SỐ LỒI THỰC VẬT ĐIỂN HÌNH Thuộc nhóm ngành khoa học: Tài Nguyên Môi Trường TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT KHOA TÀI NGUYÊN MÔI TRƯỜNG BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA CUỘC THI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM HỌC 2015-2016 XÉT GIẢI THƯỞNG "TÀI NĂNG KHOA HỌC TRẺ ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT" NĂM 2015-2016 NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH THỰC HIỆN TIÊU BẢN HIỂN VI CỐ ĐỊNH CẤU TRÚC GIẢI PHẪU CÁC LOẠI MÔ VÀ CƠ QUAN SINH DƯỠNG Ở MỘT SỐ LỒI THỰC VẬT ĐIỂN HÌNH Thuộc nhóm ngành khoa học: Tài Nguyên Môi Trường Sinh viên thực hiện: LÊ THỊ NGỌC Nam, Nữ: Nữ Dân tộc: Kinh Lớp, khoa: C14SH02, Khoa Tài Nguyên Môi Trường Năm thứ: Số năm đào tạo: Ngành học: Cao đẳng Sư phạm Sinh học Người hướng dẫn: Th.S Trần Thanh Hùng MỤC LỤC MỤC LỤC MỤC LỤC HÌNH MỤC LỤC BẢNG THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: Mục tiêu đề tài: Tính sáng tạo: Kết nghiên cứu: .7 Đóng góp mặt kinh tế - xã hội, giáo dục đào tạo, an ninh, quốc phòng khả áp dụng đề tài: Công bố khoa học sinh viên từ kết nghiên cứu đề tài .7 THÔNG TIN VỀ SINH VIÊN .9 CHỊU TRÁCH NHIỆM CHÍNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I SƠ LƯỢC VỀ SINH VIÊN: II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP DANH SÁCH THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI 11 MỞ ĐẦU 12 Lý chọn đề tài 12 Mục tiêu đề tài 13 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 13 3.1 Đối tượng nghiên cứu: 13 3.2 Phạm vi nghiên cứu: 13 Nội dung nghiên cứu 13 Thời gian nghiên cứu 13 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 14 1.1 Khái quát cấu trúc thể thực vật .14 1.1.1 Tế bào thực vật [1], [6] [9] 14 1.1.2 Mô thực vật [1], [6] [9] 14 1.1.2.1 Mô phân sinh .14 1.1.2.2 Mơ che chở (mơ bì) 15 1.1.2.3 Mô (mô nâng đỡ) 15 1.1.2.4 Mô dẫn .16 1.1.2.5 Mô mềm .17 1.1.2.6 Mô tiết 17 1.1.3 Các quan sinh dưỡng [1], [6] [9] 18 1.1.3.1 Rễ .18 1.1.3.2 Thân 19 1.1.3.3 Lá 23 1.2 Quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời cố định cấu trúc giải phẫu thực vật [1], [6] [9] 25 1.2.1 Quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời 25 1.2.2 Quy trình thực tiêu hiển vi cố định 26 1.3 Tình hình nghiên cứu liên quan đến đề tài 27 1.3.1 Trên giới .27 1.3.2 Ở Việt Nam .29 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 Vật liệu nghiên cứu 31 2.1.1 Mẫu vật .31 2.1.2 Các hóa chất, dụng cụ dùng thí nghiệm 31 2.2 Phương pháp nghiên cứu tài liệu 32 2.3 Phương pháp nghiên cứu phịng thí nghiệm 33 2.3.1 Thu mẫu 33 2.3.2 Thực tiêu hiển vi cố định 33 2.4 Bố trí thí nghiệm .34 Chương 3:KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 35 3.1 Kết khảo sát thời gian nhuộm lát cắt ngang qua thân Trầu không (Piper betle) 35 3.2 Kết khảo sát thời gian khử nước lát cắt ngang qua thân Trầu không (Piper betle) 36 3.3 Kết khảo sát thời gian nhuộm khử nước mẫu vật khác 39 3.4 Kết xây dựng tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu mô quan sinh dưỡng thực vật 41 3.4.1 Bộ tiêu hiển vi cố định cấu trúc loại mô thực vật 41 3.4.1.1 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc biểu bì Lẻ bạn (Rhoeo discolor) 41 3.4.1.2 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc mô che chở (mơ bì) thứ cấp thân Dâu tằm (Morus alba) 42 3.4.1.3 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc mô dày thân Húng quế (Ocimum basilicum) .42 3.4.1.4 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc mô dẫn thân Khổ qua (Momordica charantia) 43 3.4.1.5 Tiêu hiển vi cố định tế bào đá phân nhánh Chè (Camellia chinensis) 44 3.4.1.6 Tiêu hiển vi cố định ống tiết thân Trầu không (Piper bettle) 45 3.4.2 Bộ tiêu hiển vi cố định cấu trúc quan sinh dưỡng thực vật 45 3.4.2.1 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si (Ficusbenjamina) 45 Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si (Hình 3.15) 45 3.4.2.2 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngô (Cucurbia pepo) 46 3.4.2.3 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc rễ cỏ Mỹ (Pennisetum polystachyon) 47 3.4.2.4 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp thân cỏ Lào (Eupatorium ordoratum) 48 3.4.2.5 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm (Morus alba) .49 3.4.2.6 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thân cỏ Mầm trầu (Eleusine indica) 50 3.4.2.7 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc Đa búp đỏ (Ficus elastica) 51 3.4.2.8 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc cỏ Tranh (Imperata cylindrica) 52 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ .54 Kết luận .54 Khuyến nghị .55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 Tiếng Việt 56 Tiếng Anh 56 PHỤ LỤC 58 MỤC LỤC HÌNH Hình 3.1 Lát cắt ngang qua thân Trầu không (Piper betle) sau nhuộm kép xanh mêtilen cácmin son phèn với thời gian phút phút (a), phút phút (b), phút phút (c) .36 Hình 3.2 Lát cắt ngang qua thân Trầu không (Piper betle) sau khử nước qua cồn xylen với thời gian 10 giây phút (a), 30 giây phút (b), 50 giây phút (c) 38 Hình 3.3 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc biểu bì Lẻ bạn 41 Hình3.4 Cấu trúc biểu bì Lẻ bạn 41 Hình3.5 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc mơ che chở (mơ bì) thứ cấp thân Dâu tằm 42 Hình 3.6 Cấu trúc mơ che chở (mơ bì) thứ cấp thân Dâu tằm 42 Hình 3.7 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc mô dày thân Húng quế .43 Hình 3.8.Cấu trúc mơ dày thân Húng quế .43 Hình 3.9.Tiêu hiển vi cố định cấu trúc mô dẫn thân Khổ qua 44 Hình 3.10 Cấu trúc mô dẫn thân Khổ qua 44 Hình 3.11 Tiêu hiển vi cố định tế bào đá phân nhánh Chè 44 Hình 3.12 Tế bào đá phân nhánh Chè 44 Hình 3.13 Tiêu hiển vi cố định ống tiết Trầu không 45 Hình 3.14 Ống tiết Trầu không .45 Hình 3.15 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si 46 Hình 3.16.Cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si .46 Hình 3.17 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngơ 47 Hình 3.18 Cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngơ 47 Hình 3.19 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc rễ Cỏ Mỹ .48 Hình 3.20 Cấu trúc rễ Cỏ Mỹ 48 Hình 3.21 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp thân Cỏ lào 49 Hình 3.22 Cấu trúc sơ cấp thân Cỏ lào 49 Hình 3.23 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm .50 Hình 3.24 Cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm 50 Hình 3.25 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thân Cỏ mần trầu 51 Hình 3.26 Cấu trúc thân Cỏ mần trầu .51 Hình 3.27 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc Đa búp đỏ 52 Hình 3.28 Cấu trúc Đa búp đỏ .52 Hình 3.29 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc Cỏ tranh 53 Hình 3.30 Cấu trúc Cỏ tranh 53 MỤC LỤC BẢN Bảng 2.1Danh sách mẫu vật thí nghiệm .31 Bảng 3.1 Kết khảo sát thời gian nhuộm lát cắt ngang .35 Bảng 3.2 Kết khảo sát thời gian khử nước lát cắt ngang 37 Bảng 3.3 Kết khảo sát thời gian nhuộm khử nước mẫu vật khác 39 UBND TỈNH BÌNH DƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Thông tin chung: - Tên đề tài: Nghiên cứu quy trình thực tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan sinh dưỡng số lồi thực vật điển hình - Sinh viên thực hiện: Lê Thị Ngọc – Đàng Thị Phin – Võ Thị Thu Ngân - Lớp: C14SH02 - Khoa: Tài Nguyên Môi Trường - Năm thứ: - Số năm đào tạo: - Người hướng dẫn: Th.S Trần Thanh Hùng Mục tiêu đề tài: Nghiên cứu quy trình thực tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan sinh dưỡng số loài thực vật điển hình Xây dựng tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan sinh dưỡng số loài thực vật điển hình Tính sáng tạo: Nghiên cứu, đề xuất quy trình cụ thể, chi tiết đơn giản hóa giúp giáo viên học sinh tiêu tạm thời, cố định để quan sát cấu trúc mô, quan sát cấu trúc quan sinh dưỡng dễ dàng với hóa chất dụng cụ đơn giản Quy trình sau nghiên cứu sử dụng để sản xuất tiêu cố định với quy mô nhỏ để cung cấp tiêu cố định cấu trúc mô quan sinh dưỡng thực vật phục vụ cách chủ động, hiệu cho dạy thực hành có liên quan đến cấu trúc mô quan sinh dưỡng thực vật phổ thông mà có thị trường Kết nghiên cứu: Quy trình cải tiến để thực tiêu hiển vi tạm thời cố định giúp quan sát cấu trúc mô quan sinh dưỡng thực vật Bộ tiêu hiển vi cố định cấu trúc mô quan sinh dưỡng thực vật gồm 140 tiêu Đóng góp mặt kinh tế - xã hội, giáo dục đào tạo, an ninh, quốc phòng khả áp dụng đề tài: Cung cấp quy trình chi tiết, cụ thể, đơn giản hóa giúp giáo viên học sinh thực tiêu hiển vi loại mô quan sinh dưỡng số loài thực vật cách dễ dàng, hiệu Quy trình đơn giản hóa giúp tiết kiệm đáng kể thời gian, hóa chất, dụng cụ trình thực tiêu hiển vi loại mô quan sinh dưỡng số lồi thực vật phục vụ tốt cho cơng tác dạy học, thực hành Sinh học Quy trình thực tiêu hiển vi cố định đề tài áp dụng để sản xuất loại tiêu cố định cấu trúc giải phẫu mô quan sinh dưỡng thực vật Bộ tiêu hiển vi cố định để tài sử dụng giảng dạy thực hành học phần Thực vật học (Hình thái – Giải phẫu thực vật), Sinh học đại cương, Cơ sở Tự nhiên Xã hội (phần Sinh học) trường Đại học Thủ Dầu Một dạy học môn Sinh học lớp trường Trung học sở Các sản phẩm đề tài chuyển giao cho phịng thí nghiệm Sinh học thuộc khoa Tài nguyên Môi trường, Đại học Thủ Dầu Một Cung cấp thêm cho thị trường thiết bị giáo dục nước tiêu thực vật phục vụ hiệu việc dạy học Công bố khoa học sinh viên từ kết nghiên cứu đề tài Nhận xét người hướng dẫn đóng góp khoa học sinh viên thực đề tài: Nhóm sinh viên thực đề tài có lực nghiên cứu khoa học tốt Trong trình nghiên cứu, sinh viên tuân thủ theo chuẩn mực đạo đức quy trình nghiên cứu khoa học Kết nghiên cứu khách quan, trung thực có đóng góp quan trọng cho khoa học thực tiễn Cụ thể kết đề tài nghiên cứu quy trình thực tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan sinh dưỡng số lồi thực vật điển hình Xây dựng tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan sinh dưỡng số lồi thực vật điển hình Kết nghiên cứu đề tài phần giải số khó khăn giáo viên học sinh cơng tác dạy học thực hành thực vật học bậc phổ thơng Đề tài có tính ứng dụng cao, đáp ứng nhu cầu thực tiễn giảng dạy sinh học trường phổ thơng Có thể vận dụng quy trình sau nghiên cứu vào thực tế sản xuất quy mô nhỏ tiêu thực vật mô quan sinh dưỡng nhằm cung cấp tiêu với giá thành thấp dễ quan sát sử dụng Ngày tháng năm Xác nhận lãnh đạo khoa Người hướng dẫn Trần Thanh Hùng UBND TỈNH BÌNH DƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc THÔNG TIN VỀ SINH VIÊN CHỊU TRÁCH NHIỆM CHÍNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I SƠ LƯỢC VỀ SINH VIÊN: Ảnh 4x6 Họ tên: LÊ THỊ NGỌC Sinh ngày: 24/02/1996 Nơi sinh: Bình Dương Lớp: C14SH02 - Khóa: 2014 - 2017 Khoa: Tài Nguyên Môi Trường Địa liên hệ: Ấp Đồng Bà Ba – xã Long Hòa – huyện Dầu Tiếng – tỉnh Bình Dương Điện thoại: 0968809270 - Email: ngoclebd242@gmail.com II QUÁ TRÌNH HỌC TẬP * Năm thứ 1: Ngành học: Cao đẳng Sư phạm Sinh học - Khoa: Khoa học tự nhiên Kết xếp loại học tập: Khá Sơ lược thành tích: Đạt học bổng học kỳ năm học 2014-2015 * Năm thứ 2: Ngành học : Cao đẳng Sư phạm Sinh học - Khoa: Tài Nguyên Môi Trường Kết xếp loại học tập: Khá Sơ lược thành tích: Ngày tháng năm 3.4.1.6 Tiêu hiển vi cố định ống tiết thân Trầu không (Piper bettle) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định ống tiết thân Trầu không (Hình 3.13) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, chúng xác định ống tiết lát cắt ngang qua thân Trầu khơng, có ống tiết nằm trung tâm thân Quan sát vật kính x40, ống tiết khoang trống giới hạn vài lớp tế bào sống có chức tiết, bắt màu hồng Hình 3.14 Ống tiết Trầu khơng (1.Mơ mềm, 2.Ống tiết, 3.Bó gỗ, 4.Bó libe) Hình 3.13 Tiêu hiển vi cố định ống tiết Trầu không 3.4.2 Bộ tiêu hiển vi cố định cấu trúc quan sinh dưỡng thực vật 3.4.2.1 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si (Ficusbenjamina) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si (Hình 3.15) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si gồm phần sau (Hình 3.16): - Biểu bì gồm tế bào dài, có vách mỏng, xếp sát Trên biểu bì rễ phụ Si, khơng thấy có mặt lơng hút - Vỏ sơ cấp: 45 + Mô mềm vỏ gồm tế bào vách mỏng cellulose, xếp thành vòng đồng tâm + Nội bì lớp tế bào vỏ sơ cấp Ở rễ phụ Si không thấy đai caspari - Trụ + Vỏ trụ nằm lớp nội bì, gồm – lớp tế bào + Hệ thống dẫn gồm bó gỗ bó libe xếp xen kẽ Gỗ phân hóa hướng tâm + Ruột bao gồm tế bào mơ mềm, vách mỏng cellulose xếp sít Hình 3.15 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si Hình 3.16.Cấu trúc sơ cấp rễ phụ Si (1.Biểu bì, 2.Nhu mơ, 3.Vỏ trụ, 4.Nội bì, 5.Gỗ, 6.Libe, 7.Ruột) 3.4.2.2 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngơ (Cucurbia pepo) Chúng tơi xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngơ (Hình 3.17) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngơ gồm phần sau (Hình 3.18): - Vỏ thứ cấp giới hạn phía tầng phát sinh trụ, lớp bần Thành phần chủ yếu vỏ thứ cấp libe thứ cấp 46 - Gỗ thứ cấp có bó gỗ thứ cấp xếp theo hướng li tâm Xen kẽ bó gỗ có tia ruột Hình 3.17 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngơ Hình 3.18 Cấu trúc thứ cấp rễ Bí ngơ (1 Bần, Libe thứ cấp, Tầng phát sinh trụ, Bó gỗ thứ cấp, Tia ruột, Bó gỗ sơ cấp cịn lại) 3.4.2.3 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc rễ cỏ Mỹ(Pennisetum polystachyon) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc rễ cỏ mỹ (Hình 3.19) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc rễ Cỏ mỹ gồm phần sau (Hình 3.20): - Biểu bì gồm lớp tế bào xếp sít Một số tế bào kéo dài tạo thành lông hút - Vỏ sơ cấp + Ngoại bì gồm khoảng lớp tế bào thấm suberin nằm sát với lớp biểu bì + Mơ mềm vỏ gồm tế bào sống, có vách mỏng cellulose + Nội bì gồm lớp tế bào xếp sít Các tế bào biểu bì có vách hai vách tiếp tuyến dày hóa gỗ tạo nên đai caspri hình chữ U - Trụ + Trụ bì gồm lớp tế bào hóa mơ cứng xếp xen kẽ với nội bì 47 + Hệ thống dẫn có số lượng bó mạch nhiều Các bó gỗ xếp thành vịng liên tục Ở bó gỗ có mạch gỗ lớn, xung quanh có sợi gỗ + Ruột bao gồm tế bào mô mềm, vách mỏng cellulose xếp sít Hình 3.19 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc rễ cỏ Mỹ Hình 3.20 Cấu trúc rễ cỏ Mỹ (1 Lông hút, Biểu bì, Ngoại bì, Mơ mềm vỏ, Nội bì với đai caspari (10), Vỏ trụ, Libe, Bó gỗ ) 3.4.2.4 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp thân cỏ Lào(Eupatorium ordoratum) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc sơ cấp thân cỏ Lào(Hình 3.21) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc sơ cấp thân Cỏ lào gồm phần sau (Hình 3.22): - Biểu bì gồm lớp tế bào xếp sít Trên lớp biểu bì có lông che chở đa bào - Vỏ sơ cấp gồm hai loại mô dày mô mềm vỏ Lớp mô dày gồm tế bào có vách dày cellulose nằm sát với lớp biểu bì Mơ mềm vỏ gồm tế bào có vách mỏng cellulose nằm phía lớp mơ dày - Trụ + Trụ bì gồm lớp tế bào xếp sít + Hệ thống dẫn gồm bó mạch xếp thành vịng Mỗi bó mạch gồm bó gỗ libe xếp chồng lên Bó libe ngồi, bó gỗ trong, xen kẽ tầng trước phát sinh + Ruột bao gồm tế bào mô mềm, vách mỏng cellulose xếp sít 48 Hình 3.22 Cấu trúc sơ cấp thân cỏ Lào Hình 3.21 Tiêu hiển vi cố định (1 Biểu bì, Mơ dày, Libe, Mô mềm vỏ, cấu trúc sơ cấp thân cỏ Lào Lông che chở đa bào, Gỗ sơ cấp, Mô mềm ruột, Trụ bì, Tầng trước phát sinh) 3.4.2.5 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm (Morus alba) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm (Hình 3.23) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm gồm phần sau (Hình 3.24): - Vỏ thứ cấp bao gồm lớp bần phía ngồi, tầng phát sinh vỏ lớp vỏ lục phía Cả lớp tạo thành chu bì Trên chu bì cịn có lỗ vỏ - Tầng phát sinh trụ nằm xen gỗ thứ cấp libe thứ cấp Bó gỗ phân hóa li tâm - Libe thứ cấp gỗ thứ cấp - Ruột gồm tế bào mơ mềm xếp sít Hình 3.23 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm Hình 3.24 Cấu trúc thứ cấp thân Dâu tằm (1 Lỗ vỏ, Tầng phát sinh trụ, Vỏ lục, 49 Tầng phát sinh vỏ, Mô mềm ruột, Bần, Libe, Gỗ, Biểu bì) 3.4.2.6 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thân cỏ Mầm trầu (Eleusine indica) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc thân Cỏ Mầm trầu (Hình 3.25) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc thân cỏ Mầm trầugồm phần sau (Hình 3.26): - Biểu bì gồm lớp tế bào có vách ngồi hóa cutin dày - Có – lớp tế bào mơ mềm nằm sát biểu bì - Vịng mơ cứng phát triển, gồm – 11 lớp tế bào hình đa giác vách dày - Nhiều bó mạch xếp khơng thứ tự từ vịng mơ cứng vào Mỗi bó mạch gồm có libe gỗ xếp chồng lên nhau, khơng có tầng phát sinh trụ xen chúng - Mơ mềm ruột gồm tế bào có vách mỏng cellulose Kích thước Hình 3.25 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc thân cỏ Mầm trầu Hình 3.26 Cấu trúc thân cỏ Mầm trầu (1 Biểu bì, Mơ mềm, Vịng mơ cứng, Bó dẫn, Mơ cứng, Libe, Gỗ) 3.4.2.7 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc Đa búp đỏ (Ficus elastica) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc Đa búp đỏ (Hình 3.27) Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc Đa búp đỏ gồm phần sau (Hình 3.28): 50 - Mặt mặt giới hạn hai lớp biểu bì kép, gồm nhiều lớp tế bào Biểu bì dày biểu bì Cả biểu bì có tế bào kéo dài, dự trữ canxi cacbonat, tạo thành túi đá Lớp biểu bì có nhiều lỗ khí - Phần thịt bao gồm loại mô: mô giậu mô xốp + Mô giậu: gồm lớp tế bào có hình dài, xếp sít nhau, nằm sát với lớp biểu bì + Mơ xốp: nằm mơ giậu tiếp với biểu bì dưới, gồm tế bào đa giác cạnh trịn, khơng đều, xếp rời rạc tạo nên nhiều khoảng trống chứa khí - Các bó dẫn: bó dẫn nằm khối thịt lá, chỗ tiếp giáp mô giậu mô xốp làm thành hệ gân Gân gồm có gân gân Ở bó dẫn gồm có gỗ libe xếp chồng Giữa bó gỗ bó libe khơng có diện có tầng phát sinh Xung quanh bó dẫn có vịng mơ cứng mơ dày Hình 3.27 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc Đa búp đỏ Hình 3.28 Cấu trúc Đa búp đỏ (1 Biểu bì trên, Túi đá, Bó mạchnhỏ (gân con), Mơ giậu, Biểu bì dưới, Mơ xốp, Mơ cứng, Bó gỗ, Libe, 10 Mô dày) 3.4.2.8 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc cỏ Tranh(Imperata cylindrica) Chúng xây dựng 10 tiêu hiển vi cố định cấu trúc cỏ Tranh(Hình 3.29) 51 Khi quan sát tiêu kính hiển vi vật kính x10, cấu trúc cỏ Tranhgồm phần sau (Hình 3.30): - Mặt mặt giới hạn hai lớp biểu bì Cả biểu bì phủ lớp cutin có lỗ khí Trên lớp biểu bì cịn có tế bào đặc biệt lớn tế bào bên cạnh, xếp thành hình quạt gọi tế bào vận động có vai trị cuộn hay mở phiến - Thịt có cấu tạo đồng nhất, khơng phân thành mô giậu hay mô xốp, gồm tế bào mơ mềm hình trịn hay đa giác xếp để hở khoảng trống gian bào - Các bó dẫn (gỗ libe) nằm khối mơ đồng hóa, số lượng nhiều Các bó dẫn xếp song song, bó lớn bó nhỏ xếp xen kẽ Mơ cứng tạo thành vịng bao quanh bó mạch Mơ cứng tập trung thành cụm nhỏ nằm sát với lớp biểu bì Hình 3.29 Tiêu hiển vi cố định cấu trúc cỏ Tranh Hình 3.30 Cấu trúc cỏ Tranh (A Gân giữa, B Phiến lá, 1.Biểu bì trên, Mơ mềm, Tế bào vận động, Libe, Biểu bì dưới, Goox, Mô cứng, Mô mềm chưa diệp lục) 52 KẾT LUẬNVÀ KHUYẾN NGHỊ 1.Kết luận - Chúng xác định thời gian nhuộm, khử nước thích hợp hồn thiện quy trình thực tiêu hiển vi cố định cấu trúc loại mô quan sinh dưỡng số loài thực vật điển hình Quy trình gồm bước sau: Bước 1: Cắt mẫu loại nội dung tế bào + Mẫu vật sau thu cắt lát mỏng máy cắt tiêu cầm tay microtome + Ngâm mẫu vào javen: Thời gian ngâm mẫu thay đổi từ 10 – 30 phút tùy vào độ cứng mẫu vật + Rửa nước cất (3 lần) + Ngâm vào acid acetic khoảng 10 phút để loại hết javen cịn sót lại + Rửa nước cất (3 lần) Bước 2: Nhuộm kép xanh methylen son phèn + Nhuộm phẩm nhuộm xanh (methylene blue) thời gian phút + Rửa nước cất (3 lần) + Nhuộm carmine son phèn thời gian phút + Rửa nước cất (3 lần) Bước 3: Khử nước + Công thức khử nước: Cồn 50o → Cồn 60o → Cồn 70o → Cồn 80o → Cồn 90o → Cồn 100o → Cồn 100o → Xylen nguyên chất → Xylen nguyên chất + Thời gian khử nước 30 giây qua dung dịch cồn phút lần qua xylen 53 Bước 4: Gắn tiêu Nhỏ lên phiến kính giọt keo dán lame, vớt vi phẫu đặt vào giọt keo đậy kính lại, để tiêu nằm ngang nơi thống gió thời gian ngày - Chúng tơi vận dụng quy trình để xây dựng tiêu hiển vi cố định loại mô quan sinh dưỡng thực vật gồm 140 tiêu 2.Khuyến nghị - Có thể sử dụng kết nghiên cứu để thực tiêu hiển vi cố định mẫu thực vật tương tự - Giai đoạn khử nước quy trình thực tiêu hiển vi cố định có sử dụng xilen – hóa chất độc hại cho người sử dụng Vì vậy, cần tiếp tục nghiên cứu xây dựng quy trình khơng sử dụng xylen để khử nước đảm bảo kết tốt - Bộ tiêu hiển vi cố định sử dụng giảng dạy học phần có liên quan đến Hình thái – Giải phẫu học thực vật trường Đại học Cao đẳng Bộ tiêu vận dụng dạy học môn Sinh học trường Phổ thông 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Nguyễn Bá (2009), Giáo trình Thực vật học, Nxb Giáo dục, Hà Nội [2] Quách Văn Toàn Em (2008), “Nghiên cứu đặc điểm thích nghi giải phẫu sinh lí lồi cóc đỏ (Lumnitzera littorea (Jack) Voigh.) với độ mặn khác giai đoạn vườn ươm”, Tạp chí khoa học Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chí Minh, (14), tr 80 – 88 [3] Nguyễn Thị Hà (2013), “Thực tiêu hiển vi cố định mô máu chuột đồng phương pháp nhuộm kép Wright – Giemsa”, Tạp chí khoa học trường Đại học Cần Thơ, (28), tr 74 – 78 [4] Klein, R M & Klein, D T (1979), Phương pháp nghiên cứu thực vật, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội [5] Nguyễn Thị Bé Nhanh (2012), Nghiên cứu đặc điểm thích nghi hình thái, cấu tạo sinh thái số lồi thực vật điển hình Khu du lịch sinh thái Gáo Giồng, huyện Cao Lãnh, tỉnh Đồng Tháp, Báo cáo tổng kết đề tài, Đại học Sư phạm Đồng Tháp [6] Hoàng Thị Sản & Nguyễn Phương Nga (2004), Hình thái – Giải phẫu học thực vật, Nxb Đại học Sư phạm, Hà Nội [7] Hoàng Thị Sản & Hoàng Thị Bé (2005), Phân loại học thực vật, Nxb Đại học Sư phạm, Hà Nội [8] Klein, R M & Klein, D T (1979), Phương pháp nghiên cứu thực vật, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội [9] Nguyễn Nghĩa Thìn (2006), Thực vật có hoa, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội, Hà Nội Tiếng Anh [10] Ahmed, H O & Kordofani, M A (2012), “Leaf and Stem Anatomy of five species from the genus Heliotropium L (Boraginaceae) in Sudan”, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, (10), pp 4575-4581 55 [11] Eltahir, A S & AbuEReish, B I (2011), “Microscopical Studies on the leaf and petiole of Vernonia amygadlina Del.”, Advances in Applied Science Research, (2), pp 398-406 [12] Johansen, D A (1940), Plant microtechnique, McGraw-Hill Book Company, INC, the United States of America 56 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH NGHIÊN CỨU TẠI PHỊNG THÍ NGHIỆM Hình PL1: Cắt mẫu máy cắt cầm tay Hình PL2: Tẩy nọi dung tế bào Microtome Javen Hình PL3: Rửa Javen nước cất Hình PL4: Ngâm acid acetid 57 Hình PL5: Rửa acid acetid Hình PL6: Nhuộm Methylene blue nước cất Hình PL7: Rửa nước cất Hình PL8: Nhuộm carmine son phèn Hình PL9: Rửa nước cất Hình PL10: Khử nước qua nồng độ cồn Hình PL11: Qua xylen nguyên chất cố Hình PL12: Tiêu hồn chỉnh định mẫu keo canada 58 59 ... Mục tiêu đề tài: Nghiên cứu quy trình thực tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan sinh dưỡng số lồi thực vật điển hình Xây dựng tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan. .. phẫu mô quan sinh dưỡng thực vật Sau hoàn thiện quy trình thực tiêu hiển vi cố định, tiến hành xây dựng tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu mô quan sinh dưỡng thực vật Bộ tiêu hiển vi cố định. .. sinh dưỡng thực vật gồm: thân, rễ Nội dung nghiên cứu Nghiên cứu quy trình thực tiêu hiển vi cố định cấu trúc giải phẫu loại mô quan sinh dưỡng số loài thực vật điển hình Xây dựng tiêu hiển vi