Nghiên cứu nhân giống in vitro phi điệp tím hòa bình (dendrobium anosmum linld ) bằng kỹ thuật nuôi cấy lát mỏng

LỜI CẢM ƠN Trong thời gian đƣợc học tập nghiên cứu Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp - Trƣờng Đại học Lâm Nghiệp với hƣớng dẫn nhiệt tình, đầy tâm huyết thầy, giúp cho em có thêm đƣợc kiến thức kinh nghiệm quý báu sống Đƣợc đồng ý ban lãnh đạo Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp – Trƣờng Đại học Lâm Nghiệp giáo viên hƣớng dẫn em xin đƣợc thực đề tài “Nghiên cứu nhân giống in vitro Phi điệp tím Hịa Bình (Dendrobium anosmum Linld.) kỹ thuật ni cấy lát mỏng” Có đƣợc kết trƣớc hết em xin đƣợc gửi lời cảm ơn sâu sắc tới cô giáo Th.s Nguyễn Thị Thơ TS Khuất Thị Hải Ninh tận tâm hƣớng dẫn bảo, động viên em truyền đạt cho em kiến thức vô quý giá quãng thời gian học tập Em xin cảm ơn cô Th.s Nguyễn Thị Thơ, giúp đỡ bảo tận tình cho em nhiều không kiến thức mà cịn kinh nghiệm cơng việc sống Bên cạnh đó, em xin gửi lời cảm ơn tới thầy, tồn cán viên chức môn Tài nguyên thực vật rừng giúp đỡ, tạo điều kiện đóng góp ý kiến q báu để q trình thực nghiên cứu em thuận lợi Em xin đƣợc gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè ln sát cánh bên em Trong trình thực đề tài nhiều hạn chế kinh nghiệm thân nên khơng thể tránh đƣợc sai sót nên em mong nhân đƣợc lời nhận xét đóng góp thầy, để đề tài em đƣợc hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Sinh viên thực Nguyễn Thị Hảo i MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH vi ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu Phi điệp tím Hịa Bình (Dendrobium anosmum Lindl.) 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái: 1.1.3 Đặc điểm sinh học Phi điệp tím 1.1.4 Phân bố 1.1.5 Một số điều kiện sinh thái 1.1.6 Giá trị sử dụng 1.1.7 Phƣơng pháp nuôi cấy lớp mỏng tế bào: 1.1.8 Những nghiên cứu nhân giống in vitro chi Dendrobium: 1.1.9 Những nghiên cứu nhân giống phƣơng pháp cắt lát mỏng 12 1.1.10 Những nghiên cứu nhân giống phƣơng pháp cắt lát mỏng chi Dendrobium 15 CHƢƠNG MỤC TIÊU, NỘI DUNG, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Mục tiêu 20 2.2 Nội dung 20 2.2.1 Nghiên cứu kỹ thuật tạo mẫu in vitro 20 2.2.2 Nghiên cứu khả tái sinh chồi lan Phi điệp tím từ lát mỏng 20 2.2.3 Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi lan Phi điệp tím 20 2.3 Vật liệu nghiên cứu, địa điểm điều kiện bố trí thí nghiệm: 20 2.3.1 Vật liệu nghiên cứu 20 ii 2.3.2 Địa điểm điều kiện bố trí thí nghiệm: 20 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu: 21 2.4.1 Phƣơng pháp tạo mẫu lan Phi điệp tím Hịa Bình 21 2.4.2 Phƣơng pháp tái sinh chồi từ lát cắt mỏng 21 2.4.3 Phƣơng pháp nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh chồi 23 2.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 24 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 3.1 Kết tạo mẫu 25 3.2 Kết tái sinh chồi từ lát cắt mỏng 26 3.2.1 Kết ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả tái sinh chồi…… 26 3.2.2 Kết ảnh hƣởng thời gian chiếu sáng đến khả tái sinh chồi 28 3.3 Kết ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh chồi Phi điệp tím Hịa Bình 30 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 33 4.1 Kết luận 33 4.2 Tồn 33 4.3 Kiến nghị 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT STT Ký hiệu Giải thích MS Murasighe Skoog (1962) IBA - Indole butyric acid NAA Α - Naphthaleneacetic acid Kinetin – furfuryl aminopurine BAP – Benzyl aminopurine 2,4 - D 2,4 – Dichlorophenoxyacetic acid TDZ Thidiazuron CTTN Cơng thức thí nghiệm PLBs Protocom – like bodies 10 tTCL traverse thin cell layer (lớp cắt mỏng theo chiều ngang) 11 lTCL Longitudinal thin cell layre (lớp mỏng tế bào cắt theo chiều doc) 12 IAA – indole acetic acid 13 KC Knudson C, 1965 14 CW Nƣớc dừa 15 2ip N6- (2-isopentyl) adenine 16 WPM Woody Plant Medium 17 tTCL_L Lát cắt mỏng ngang 18 tTCL- R Lát cát mỏng ngang rễ 19 tTCL - C Lát cát mỏng ngang cuống 20 GA3 Gibberellin A3 21 RE Robert Ernst, 1979 22 VW Vacin and Went, 1949 23 MVW modified Vacin and Went iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm thống kê kết nghiên cứu 21 Bảng 2.2: Bố trí thí nghiệm biểu thu thập số liệu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng tới khả tái sinh chồi từ lát mỏng lan Phi điệp tím Hịa Bình 22 Bảng 2.3 Bố trí thí nghiệm ảnh hƣởng thời gian chiếu sáng đến khả tái sinh chồi Phi điệp tím 23 Bảng 2.4: Bố trí thí nghiệm ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng tới khả nhân nhanh chồi từ lát mỏng lan Phi Điệp Tím Hịa Bình 23 Bảng 3.1 Kết tạo mẫu từ chồi Phi điệp tím 25 Bảng 3.2 Kết ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng lên khả tái sinh chồi Phi điệp tím 27 Bảng 3.3 Kết ảnh hƣởng thời gian chiếu sáng đến khả tái sinh chồi Phi điệp tím 29 Bảng 3.4 Kết nhân nhanh chồi Phi điệp tím Hịa Bình 30 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Ảnh lan Phi điệp tím Hịa Bình Hình 3.1 Chồi lan Phi điệp tím Hịa bình tái sinh mơi trƣờng vào mẫu 26 Hình 3.2 Chồi tái sinh môi trƣờng: 28 Hình 3.3 Chồi Phi điệp tím Hịa bình tái sinh điều kiện ánh sáng 30 Hình 3.4 Chồi Phi điệp tím Hịa Bình sau tuần nuôi cấy môi trƣờng nhân nhanh chồi 32 vi ĐẶT VẤN ĐỀ Phi điệp tím Hịa Bình có tên gọi khác giã hạc hay giả hạc thuộc chi hồng thảo có tên khoa học Dendrobium anosmum Lindl Phi điệp tím Hịa Bình giống lan quý rừng nhiệt đới đƣợc nhiều ngƣời chơi lan ƣa chuộng không khuôn đẹp, sai hoa mà đẹp màu sắc lẫn hình dáng Cánh hoa tao nhã, cánh có phủ lơng mịn có ánh kim, lƣỡi thƣờng có hai mắt tím đậm, phận mơi hoa có cấu trúc phức tạp độc đáo Phi điệp tím Hịa Bình có hƣơng thơm đặc biệt, dễ chịu, thoang thoảng mà hầu nhƣ khơng có loại hƣơng liệu nhân tạo sánh đƣợc Phi điệp tím Hịa Bình đặc trƣng riêng so với loại Phi điệp có nơi phân bố khác hình dạng, màu sắc hoa Hoa Phi điệp tím hịa bình có cánh hoa to hơn, có màu đậm có hƣơng thơm đặc biệt hoa Phi điệp khu vực phân bố khác Ngoài giá trị làm cảnh, Phi điệp tím Hịa Bình cịn có giá trị làm thuốc để điều trị nhiều bệnh da, suy nhƣợc thần kinh tăng cƣờng sức đề kháng cho thể Vì vậy, Phi điệp tím Hịa Bình mang lại hiệu kinh tế cao [13], [17] Lan Phi điệp nói riêng loại lan thân thịng nói chung khách ƣa chuộng nhƣng mua họ cần rõ mặt hoa nhƣ nào? Vì thực tế, mặt hoa lan đa dạng Vì vậy, với phƣơng pháp gieo hạt khơng thể đảm bảo giống có mặt hoa giống nhƣ mẹ Vì cần thiết phải nhân giống vơ tính Tuy nhiên, nhân vơ tính cách nhân kei lại có hạn chế nguồn mẫu ban đầu Phƣơng pháp ni cấy lát mỏng tế bào giải vấn đề Chính lý trên, lựa chọn thực đề tài “Nghiên cứu nhân giống in vitro Phi điệp tím Hịa Bình (Dendrobium anosmum Linld.) kỹ thuật nuôi cấy lát mỏng” CHƢƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1.Giới thiệu Phi điệp tím Hịa Bình (Dendrobium anosmum Lindl.) 1.1.1 Vị trí phân loại Phi Điệp tím Hịa Bình (Dendrobium anosmum Lindl.) thuộc: Giới: Plantae Ngành: Magnoliophyta Lớp: Monocotyledoneae Phân lớp: Liliidae Bộ: Orchidales Họ: Orchidaceae Chi: Dendrobium Nguồn: https://www.pinterest.com Hình 1.1 Ảnh lan Phi điệp tím Hịa Bình 1.1.2 Đặc điểm hình thái: Thân: Phi điệp tím Hịa Bình thuộc dạng thân thịng, thân dài tới m bng rũ xuống Phi đệp tím Hịa Bình mọc thành cụm, thuộc nhóm đa thân thân có giả hành Gỉa hành chứa diệp lục, dự trữ nƣớc chất dinh dƣỡng cần thiết cho phát triển giả hành trì sống Thân chia thành nhiều đốt, đốt chứa mắt ngủ Độ dài đốt phụ thuộc vào độ tuổi cây, mơi trƣờng… Màu sắc thân Phi điệp tím Hịa Bình đa dạng từ màu xanh, chấm tím tím tùy giai đoạn, đƣờng kính thân tới 1,5 cm vào mùa nghỉ Thân già đời trƣớc thƣờng khơ teo, màu nâu tím vàng nhƣ rơm, bóng [13], [17] Lá: Lá đơn mọc cách, xếp so le, mọng nƣớc, dài 10 -15 cm, rộng từ -4 cm Mép nguyên, hệ gân song song, đầu nhon [17] Rễ: Phi điệp tím Hịa Bình thuộc loại rễ bì sinh, đƣờng kính nhỏ khoảng 1,5 – mm, có hình trụ Rễ dài, chóp rễ có màu xanh [17] Hoa: Hoa Phi đệp tím khơng mọc giả hành mà mọc giả hành cũ Hoa Phi điệp tím Hịa Bình thƣởng nở vào cuối xn – đầu hè (tháng – dƣơng lịch), hoa to tới 10 cm, mọc từ – đốt rụng Trên cánh có phủ lơng mịn có ánh kim, lƣỡi thƣờng có hai mắt tím đậm Hoa có hƣơng thơm ngào ngạt lâu tàn (2 – tuần lễ) Nhiều hoa phát hoa, mạnh khỏe tới 50 – 70 hoa [13], [17] Quả: Quả Hồng thảo Phi điệp tím Hịa Bình thuộc loại nang, nở theo – đƣờng nứt dọc Khi chín nở ra, mảnh vỏ cịn dính lại với phía đỉnh phía gốc Bên chứa nhiều hạt, chín hạt có màu vàng Hạt cấu tạo phôi chƣa phân hóa, chứa đầy khơng khí Hạt nhiều nhỏ, toàn hạt nặng phần mƣời mg, nhẹ nên dễ phát tán nhờ gió [17] 1.1.3 Đặc điểm sinh học Phi điệp tím Thân: Là đa thân, có thân giả hay giả hành chứa diệp lục, quan dự trữ nƣớc chất dinh dƣỡng để trì sống lâu loài đơn thân Cấu tạo giả hành gồm nhiều mô mềm chứa đầy dịch nhầy, phía ngồi có lớp biểu bì với vách tế bào dày, nhẵn bóng bảo vệ để tránh nƣớc mặt trời hun nóng Củ giả hành có màu xanh bóng, với làm nhiệm vụ quang hợp [17] Lá: Là quan cung cấp dinh dƣỡng quang hợp Lá thƣờng rụng vào mùa thu, đông thắt ngon bƣớc vào mùa nghỉ [17] Rễ: Rễ Phi Điệp Tím Hịa Bình thuộc rễ bì sinh, xung quanh rễ thật đƣợc bao bọc lớp mô xốp giúp dễ dàng hút nƣớc, muối khoáng ngăn chặn ánh sáng mặt trời gay gắt Chóp rễ có màu xanh cây, phần rễ có sắc lạp khơng bị ngăn mơ xốp nên giúp quang hợp [13] Hoa: Bên hoa có cột nhị nhụy nằm hoa, mang phần đực phía phần phía trƣớc mặt Nhị gồm hai phần bao phấn hốc phấn Bao phấn nằm cột nhị nhụy cịn hốc phấn lõm lại mang khối phấn thƣờng song song với bao phấn Khối phấn gồm tồn hạt phấn dính lại với nhau, cứng [13] 1.1.4 Phân bố Phi điệp tím có xuất xứ nhiều nơi đặc biệt Đông Nam Á nhƣ: Lào, Campuchia, Thái Lan [17] Tại Việt Nam có tỉnh nhƣ Cao Bằng, Hịa Bình, Phú Thọ, Thanh Hóa, Tây Ninh…Tuy nhiên, tùy vào xuất xứ mà Phi điệp tím mang đặc trƣng riêng Đặc biệt, Phi điệp tím Hịa Bình có hình dạng, màu sắc, hƣơng thơm vẻ đẹp độc đáo riêng biệt so với phi điệp khác cánh hoa to hơn, màu sắc hƣơng thơm đặc biệt [17] 1.1.5 Một số điều kiện sinh thái 1.1.5.1 Ánh sáng Phi điệp tím ƣa sáng nên trồng nơi có nhiều ánh sáng nhƣng khơng nên phơi dƣới thời tiết nắng nóng ngày, dễ bị cháy non Tốt nên có thêm lớp lƣới che bảo vệ cây, giúp hấp thụ đủ lƣợng ánh sáng cần thiết ngày Cây trồng không nên chỗ râm quá, quặt quẹo, PHỤ LỤC Phụ biểu kết tạo mẫu Tylemausach * CTTN Crosstabulation CTTN Total phut phut phut Count 10 15 % within CTTN 66.7% 26.7% 6.7% 33.3% Count 11 14 30 % within CTTN 33.3% 73.3% 93.3% 66.7% Count 15 15 15 45 % within CTTN 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% maunhiem Tylemausach mau sach Total Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2-sided) Pearson Chi-Square 12.600a 002 Likelihood Ratio 13.445 001 Linear-by-Linear Association 11.880 001 N of Valid Cases 45 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 5.00 ` Tylemausach TS * CTTN Crosstabulation CTTN Khongtaisinh Tylemausach TS Count phut phut 10 Total 22 % within CTTN 66.7% 26.7% 53.3% 48.9% Count Taisinh phut 11 23 % within CTTN 33.3% 73.3% 46.7% 51.1% Count Total 15 15 15 45 % within CTTN 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2-sided) Pearson Chi-Square 4.980a 043 Likelihood Ratio 5.140 077 522 470 Linear-by-Linear Association N of Valid Cases 45 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 7.33 ` Phụ biểu kết tái sinh chồi từ lát cắt mỏng Tylemautaisinh * CTTN Crosstabulation CTTN Count khongtaisinh % within CTTN Tylemautaisinh Count taisinh % within CTTN Count Total % CTTN within Total LM1 LM2 LM3 LM4 LM5 LM6 LM7 40 28 49 36 25 52 48 278 44.4% 46.7% 70.0% 60.0% 41.7% 57.8% 80.0% 56.7% 50 32 21 24 35 38 12 212 55.6% 53.3% 30.0% 40.0% 58.3% 42.2% 20.0% 43.3% 90 60 70 60 60 90 60 490 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% ` Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2-sided) Pearson Chi-Square 32.115a 000 Likelihood Ratio 33.390 000 Linear-by-Linear Association 9.784 002 N of Valid Cases 490 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 25.96 ` Tyletaisinhthechoi * CTTN Crosstabulation CTTN LM1 Count 69 khongtaisinh LM2 LM3 LM4 LM5 LM6 LM7 58 66 57 58 83 58 Total 449 % within 76.7% 96.7% 94.3% 95.0% 96.7% 92.2% 96.7% 91.6% CTTN Tyletaisinhthechoi Count 21 taisinh 41 5.7% 5.0% 3.3% 7.8% 3.3% 8.4% 70 60 60 90 60 490 % within 23.3% 3.3% CTTN Count 90 Total 60 % within 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% CTTN ` Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2-sided) Pearson Chi-Square 33.812a 000 Likelihood Ratio 27.815 000 Linear-by-Linear Association 13.063 000 N of Valid Cases 490 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 5.02 ` Tyletaisinhchoi * CTTN Crosstabulation CTTN LM1 Count 61 khongtaisinh Total LM2 LM3 LM4 LM5 LM6 LM7 30 53 39 27 59 50 319 % within 67.8% 50.0% 75.7% 65.0% 45.0% 65.6% 83.3% 65.1% CTTN Tyletaisinhchoi Count 29 taisinh 30 17 21 33 31 10 171 % within 32.2% 50.0% 24.3% 35.0% 55.0% 34.4% 16.7% 34.9% CTTN Count 90 Total 60 70 60 60 90 60 490 % within 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% CTTN ` Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2-sided) Pearson Chi-Square 29.235a 000 Likelihood Ratio 29.707 000 Linear-by-Linear Association 1.326 249 N of Valid Cases 490 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 20.94 ` Descriptives SOCHOITB 95% N Mean Std Deviation Confidence Interval Mean Std Error Lower Bound Upper Bound for Minimum Maximum LM1 1.0530 17653 10192 6145 1.4916 91 1.25 LM2 2.2000 10000 05774 9516 1.4484 1.10 1.30 LM3 1.0000 00000 00000 1.0000 1.0000 1.00 1.00 LM4 1.0000 00000 00000 1.0000 1.0000 1.00 1.00 LM5 3.4490 11776 06799 1.1565 1.7415 1.36 1.58 LM6 2.1273 11060 06385 8525 1.4020 1.00 1.20 LM7 1.0000 00000 00000 1.0000 1.0000 1.00 1.00 Total 21 1.1185 17629 03847 1.0382 1.1987 91 1.58 ` Test of Homogeneity of Variances SOCHOITB Levene Statistic df1 df2 Sig 5.029 14 006 ANOVA SOCHOITB Sum of Squares df Mean Square Between Groups 487 081 Within Groups 135 14 010 Total 622 20 F Sig 8.448 001 SOCHOITB Duncana Subset for alpha = 0.05 CTTN N LM3 1.0000 LM4 1.0000 LM7 1.0000 LM1 1.0530 LM6 2.1273 LM2 2.2000 LM5 Sig 3.4490 170 102 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ` 1.000 Tylemautaisinhchoi * CTTN Crosstabulation CTTN Tylemautaisinh choi khongtaisinh Taisinh Total Total AS1 AS2 AS3 24 29 36 89 % within CTTN 48.0% 58.0% 90.0% 63.6% Count 21 51 % within CTTN 52.0% 42.0% 10.0% 36.4% Count 50 40 140 Count 26 50 % within CTTN 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2-sided) Pearson Chi-Square 17.970a 000 Likelihood Ratio 20.366 000 Linear-by-Linear Association 16.181 000 N of Valid Cases 140 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 14.57 ` Descriptives SochoiTB 95% N Mean Confidence Std Std Interval for Mean Deviation Error Lower Upper Bound Bound Minimum Maximum AS1 3.5333 08083 04667 1.3325 1.7341 1.46 1.62 AS2 2.2167 14012 08090 8686 1.5647 1.08 1.36 AS3 5333 12583 07265 2208 8459 40 65 Total 1.0944 45432 15144 7452 1.4437 40 1.62 Test of Homogeneity of Variances SochoiTB Levene Statistic 320 df1 df2 Sig 738 ANOVA SochoiTB Sum of df Mean Square F Sig .000 Squares Between Groups 1.567 784 Within Groups 084 014 Total 1.651 ` 55.972 Phụ biểu kết nhân nhanh chồi Descriptives Hesonhanchoi 95% Confidence Interval N Mean Std Std for Mean Deviation Error Lower Upper Bound Bound Minimu Maximu m m NN1 2,8567 ,28148 ,16251 2,1574 3,5559 2,56 3,12 NN2 6,1700 1,24591 ,71933 3,0750 9,2650 4,75 7,08 NN3 3,2767 ,99771 ,57603 ,7982 5,7551 2,20 4,17 NN4 4,4333 ,81402 ,46998 2,4112 6,4555 3,67 5,29 Total 12 4,1842 1,54783 ,44682 3,2007 5,1676 2,20 7,08 Test of Homogeneity of Variances Hesonhanchoi Levene Statistic df1 df2 Sig 1,898 ,208 ANOVA Hesonhanchoi Sum of df Mean Square F Sig Between Groups 19,774 6,591 ,009 Within Groups 6,579 ,822 Total 26,353 11 Squares ` 8,015 Descriptives Hesonhanchoi N Mean Std Std 95% Confidence Minimum Maximum Deviation Error Interval for Mean Lower Upper Bound Bound NN1 2,8567 ,28148 ,16251 2,1574 3,5559 2,56 3,12 NN2 6,1700 1,24591 ,71933 3,0750 9,2650 4,75 7,08 NN3 3,2767 ,99771 ,57603 ,7982 5,7551 2,20 4,17 NN4 4,4333 ,81402 ,46998 2,4112 6,4555 3,67 5,29 Total 12 4,1842 1,54783 ,44682 3,2007 5,1676 2,20 7,08 Test of Homogeneity of Variances Hesonhanchoi Levene Statistic df1 df2 Sig 1,898 ,208 ANOVA Hesonhanchoi Sum of df Mean Square F Sig Between Groups 19,774 6,591 ,009 Within Groups 6,579 ,822 Total 26,353 11 Squares ` 8,015 Descriptives Kichthuocchoi 95% N Mean Std Std Deviation Error Confidence Interval for Mean Minimum Maximum Lower Upper Bound Bound NN1 2,5667 ,45004 ,25983 1,4487 3,6846 2,12 3,02 NN2 1,9433 ,19553 ,11289 1,4576 2,4291 1,78 2,16 NN3 2,3333 ,29366 ,16954 1,6039 3,0628 2,13 2,67 NN4 1,7067 ,16166 ,09333 1,3051 2,1082 1,56 1,88 Total 12 2,1375 ,43105 ,12443 1,8636 2,4114 1,56 3,02 Test of Homogeneity of Variances Kichthuocchoi Levene Statistic df1 df2 Sig ,951 ,461 ANOVA Kichthuocchoi Sum of df Mean Square F Sig Between Groups 1,338 ,446 ,030 Within Groups ,706 ,088 Total 2,044 11 Squares ` 5,050 ... đề tài ? ?Nghiên cứu nhân giống in vitro Phi điệp tím Hịa Bình (Dendrobium anosmum Linld. ) kỹ thuật ni cấy lát mỏng? ?? CHƢƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1.Giới thiệu Phi điệp tím Hịa Bình (Dendrobium. .. 20 2.2.1 Nghiên cứu kỹ thuật tạo mẫu in vitro 20 2.2.2 Nghiên cứu khả tái sinh chồi lan Phi điệp tím từ lát mỏng 20 2.2.3 Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi lan Phi điệp tím 20 2.3... Phi điệp tím từ lát mỏng - Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả tái sinh chồi từ lát cắt mỏng - Ảnh hƣởng ánh sáng đến khả tái sinh chồi từ lát cắt mỏng 2.2.3 Nghiên cứu kỹ thuật nhân