Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học dịch chiết ethanol của quả nhàu ở thành phố đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA - - NINH HỒNG PHÚC NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC DỊCH CHIẾT ETHANOL CỦA QUẢ NHÀU Ở THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Đà Nẵng, 5/2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC DỊCH CHIẾT ETHANOL CỦA QUẢ NHÀU Ở THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC SVTH : NINH HỒNG PHÚC LỚP : 11CHD GVHD : TH.S TRẦN THỊ NGỌC BÍCH Đà Nẵng, 5/2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐHSP CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ Tên SV: Ninh Hồng Phúc Lớp : 11CHD TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học dịch chiết ethanol nhàu thành phố Đà Nẵng NGUYÊN LIỆU, DỤNG CỤ VÀ THIẾT BỊ: - Nguyên liệu: Quả nhàu già thu hái huyện Hòa Vang, thành phố Đà Nẵng - Dụng cụ thiết bị: + Máy quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) + Máy đo sắc ký khí ghép phổ (GC-MS) + Bộ chưng ninh, tủ sấy, lị nung, cân phân tích + Các dụng cụ thí nghiệm đơn giản: chén sứ, cốc thủy tinh, bình tam giác, bình định mức, bếp cách thủy, bếp điện, đũa thủy tinh,… NỘI DUNG NGHIÊN CỨU - Xác định số tiêu vật lý hóa học độ ẩm, hàm lượng tro, hàm lượng kim loại nặng nhàu - Khảo sát khả chiết dung môi ethanol, methanol, dichoromethane, n- Hexane, etyl axetat điều kiện Từ chọn dung mơi tối ưu cho q trình chiết tách sau - Sau chọn dung môi tối ưu, tiếp tục khảo sát khả chiết với điều kiện: + Tỷ lệ rắn lỏng + Thời gian chưng + Nhiệt độ chưng  Từ đó, rút quy trình chưng ninh tối ưu hợp chất nhàu - Xác định định danh thành phần hóa học có dịch chiết nhàu phương pháp GC-MS GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN: Th.S Trần Thị Ngọc Bích NGÀY GIAO ĐỀ TÀI: 05/11/2014 NGÀY HỒN THÀNH: 15/04/2015 CHỦ NHIỆM KHOA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN PGS.TS Lê Tự Hải ThS Trần Thị Ngọc Bích Sinh viên hồn thành nhiệm vụ khóa luận nộp báo cáo cho Khoa vào ngày … Tháng… năm 2015 Điểm đánh giá kết quả: Ngày ………tháng … năm 2015 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG ( Ký ghi rõ họ tên DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt AAS GC GC-MS HPLC Tiếng Anh Atomic Absorption Spectrometer Gas Chromatography Gas Chromatography Mass Spectomery High Performent Liquid Chrogratomaphy Tiếng Việt Quang phổ hấp thụ nguyên tử Sắc ký khí Sắc ký khí ghép khối phổ Sắc ký lỏng hiệu cao áp LỜI CẢM ƠN Khơng có thành công mà không gắn liền với hỗ trợ, giúp đỡ dù hay nhiều, dù trực tiếp hay gián tiếp người khác Trong suốt thời gian thực khóa luận đến em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ quý Thầy Cô, gia đình bạn bè Với lịng biết ơn chân thành sâu sắc em xin gửi đến cô giáo hướng dẫn Ths.Trần Thị Ngọc Bích suốt thời gian vừa qua nhiệt tình dạy, giúp đỡ để em hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Em xin cảm ơn thầy cô khoa Hóa truyền đạt kinh nghiệm quý báu thời gian, nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thời gian học thực đề tài Cuối em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến bạn bè, người thân, gia đình ln bên cạnh giúp đỡ tận tình, đóng góp ý kiến bổ ích tạo động lực lớn để em hồn thành tốt khóa luận Trong q trình thực khóa luận, q trình báo cáo, khó tránh khỏi sai sót Đồng thời trình độ lý luận kinh nghiệm thực tiễn hạn chế nên khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận ý kiến đóng góp thầy, cô để em học thêm nhiều kinh nghiệm học quý giá làm hành trang bước vào đời MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu .1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Nội dung phương pháp nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ THỰC VẬT 1.1.1 Mô tả thực vật 1.1.1.1 Tên gọi 1.1.1.2 Vị trí phân loại 1.1.1.3 Đặc điểm hình thái 1.1.1.4 Đặc điểm vi phẩu 1.1.2 Đặc điểm phân bố sinh thái 1.1.3 Bộ phận dùng, thu hái chế biến .8 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC .9 1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ VÀ CÔNG DỤNG 12 1.3.1 Tác dụng dược lý 12 1.3.1.1 Theo kinh nghiệm dân gian 12 1.3.1.2 Theo nghiên cứu khoa học 14 1.3.2 Công dụng 15 1.3.3 Các thuốc chữa bệnh từ Nhàu .16 1.4 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU 17 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 17 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 18 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 NGUYÊN LIỆU .20 2.1.1 Nguồn gốc 20 2.1.2 Sơ chế xử lí nguyên liệu 20 2.2 DỤNG CỤ, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 21 2.2.1 Dụng cụ, thiết bị .21 2.2.2 Hóa chất 22 2.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU .22 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.4.1 Phương pháp xác định tiêu hóa lý .23 2.4.1.1 Xác định độ ẩm nguyên liệu phương pháp phân tích khối lượng 23 2.4.1.2 Xác định hàm lượng tro nguyên liệu phương pháp tro hóa mẫu 25 2.4.2 Phương pháp chiết 26 2.4.3 Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) 26 2.4.4 Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) 28 2.5 XÂY DỰNG QUY TRÌNH NGHIÊN CỨU 29 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 31 3.1 XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU HÓA LÝ 31 3.1.1 Xác định độ ẩm nhàu già 31 3.1.1.1 Dụng cụ, thiết bị 31 3.1.1.2 Cách tiến hành .32 3.1.1.3 Kết thực nghiệm .33 3.1.2 Xác định hàm lượng tro 34 3.1.2.1 Dụng cụ, thiết bị 34 3.1.2.2 cách tiến hành 34 3.1.2.3 Kết thực nghiệm .35 3.1.3 Xác định hàm lượng kim loại nhàu già phương pháp AAS 35 3.1.3.1 Dụng cụ, thiết bị 35 3.1.3.2 Cách tiến hành .36 3.1.3.3 Kết sau đo .36 3.2 KHẢO SÁT KHẢ NĂNG CHIẾT CỦA CÁC DUNG MÔI METHANOL, ETHANOL, DICHLOROMETHANE, ETYL AXETAT, n- HEXANE 37 3.2.1 Mục tiêu 37 3.2.2 Cách tiến hành 37 3.2.3 Kết thực nghiệm 37 3.3 KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH CHIẾT XUẤT QUẢ NHÀU GIÀ BẰNG DUNG MÔI ETHANOL 39 3.3.1 Ảnh hưởng tỷ lệ rắn (g)/lỏng (ml) .39 3.3.1.1 Mục tiêu 39 3.3.1.2 Cách tiến hành .39 3.3.1.3 Kết thực nghiệm: 40 3.3.2 Ảnh hưởng thời gian chiết xuất 41 3.3.2.1 Mục tiêu 41 3.3.2.2 Cách tiến hành .42 3.3.2.3 Kết thực nghiệm: 43 3.3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết 44 3.3.3.1 Mục tiêu 44 3.3.3.2 Cách tiến hành: 44 3.3.3.3 Kết thực nghiệm: 44 3.4 XÁC ĐỊNH VÀ ĐỊNH DANH CÁC THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG DỊCH CHIẾT ETANOL 70º BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-MS 46 3.4.1 Mục tiêu 46 3.4.2 Điều kiện chạy sắc ký 46 3.4.3 Kết xác định thành phần hóa học dịch chiết mẫu nhàu già .46 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO .52 PHẦN PHỤ LỤC 55 DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Kết xác định độ ẩm mẫu 33 Bảng 3.2 Kết xác định hàm lượng tro mẫu .35 Bảng 3.3 Kết xác định hàm lượng kim loại nặng 36 Bảng 3.4 Kết khảo sát dung môi tối ưu 37 Bảng 3.5 Kết khảo sát tỷ lệ rắn lỏng 40 Bảng 3.6 Kết khảo sát thời gian chiết 43 Bảng 3.7 Kết khảo sát nhiệt độ chiết 44 Bảng 3.8 Một số cấu tử định danh dịch chiết ethanol 70º nhàu già 48 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] GS.TS Nguyễn Văn Đàn (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội [2] Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội [tr 306, 307] [3] PGS.TSKH Lê Thành Phước – CN Trần Tích (2007), Hóa Phân tích – Lý thuyết thực hành, NXB Y học, [tr 137, 138] [4] Nguyễn văn Quý(2011), Nghiên cứu ứng dụng enzym pectinase chiết tách dịch nhàu thử nghiệm sản xuất nước giải khát từ nhàu, [5] Phan Tống Sơn, Lê Đăng Doanh (1977), Thực hành hoá học hữu cơ, tập 1,2, Nhà xuất Khoa học kĩ thuật, Hà Nội [6] Ngô Văn Thu (1998), Bài giảng dược liệu, Tập I, Trường Đại học Dược Hà Nội, [tr 252-253] [7] Tôn Thị Thu Thùy (2003), Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học nhàu, Luận văn tốt nghiệp Dược sỹ Đại học, Trường Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh [8] Nguyễn Đoan Trang (2013), Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học số dịch chiết rễ dứa dại Cù Lao Chàm, Quảng Nam, Luận văn tốt nghiệp cử nhân hóa dược, Trường Đại học sư phạm Đà Nẵng [9] Nguyễn Hoài Trung (2005), Xây dựng phương pháp chiết xuất tối ưu tiêu chuẩn hóa thành phần cao nhàu, Luận văn tốt nghiệp Dược sỹ Đại học, Trường Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh [10] Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hoàng Việt, Các phương pháp sắc ký, Nhà xuất Khoa Học Kỹ Thuật – 1985 [11] Bùi Xuân Vững, Giáo trình phân tích cơng cụ, Đại học Đà Nẵng, [tr 3036, 80-99] 52 Luận văn thạc sĩ kỹ thuật, Trường đại học Đà Nẵng [12] Abbott L., Shimazu C (1985), “The geographic origin of the plants most commonly used for medicin by Hawaiians”, Journal of Ethnopharmacology, 14, pp 213 - 222 [13] Abbott L.A (1992), Traditional Hawaiian uses of plants, Bishop museum Press, Honolulu, Hawaii, 3, pp 97-199 [14] Hirazumi A., Furusawa E (1999), “An immonomodulatory polysaccharide - rich substance from the fruit juice Morinda citrifolia (Noni) with antitumour activity”, Phytother Res, Aug, 13(5), pp 380 - 387 [15] Hirazumi A., Furusawa E., Chou S (1994), “Anticancer activity of Morinda citrifolia on intraperitoneally implanted Liwis lung carcinoma in syngenic mice”, Proc West pharmacol, 37, pp 145-146 [16] Hirazumi A., Furusawa E., Chou S.C (1994), “Anticancer activity of Morinda citrifolia (Noni) on intraperitoneally implanted Lewis lung carcinoma and retroviral leukemia in mice”, Proc Annu Meet Am Assoc Cancer, Res, 35, pp A2854 [17] Hirazumi A., Furusawa E., Chou S.C (1996), “Immunomodulation contributes to the anticancer activity of morinda citrifolia (noni) fruit juice”, Proc West Pharmacol Soc, 39, pp.7-9 [18] Hiramatsu T., Imoto M., Koyano T (1993), “Induction of normal phenotypes in RAS transformed cells by damnacanthal from morinda citrifolia”, Cancer letter, 73, pp 161 - 166 [19] Levand O., Larson HO (1979), “Some chemical constituents of Morinda citrifolia”, Planta Med, Jun, 36(2), pp 186-187 [20] Liu G., Bode A., Ma W.Y., Sang S (2001), “Two novel glycosides from the fruits of Morinda citrifolia (noni) inhibit AP - transactivation and cell transformation in the mouse epidermal JB6 cell line”, Cencer Res,61(15), Phytother Res, 16(7), pp 5749-5756 [21] Mucller B.A., Scott M.K., Sowinski K (2000), “Noni juice (Morinda citri folia): hidden potential for hyperkalemia?, Am J Kidney 53 Dis, 35(2), pp.310-312 [22] Ram V.J., Kumari S (2001), “Natural products of plant origin as anticancer agents”, Drug News Perspect, Oct, 14(8), pp 465-482 [23] Saluder J.P., Garson M.J., Franzblau S.G., Aguinaldo A.M (2002), “Antitubercular constituents from the hexane fraction of Morinda citrifolia Linne”, Phytother Res, 16(7), pp 683-685 [24] Solomon N (1998), Liquid island NONI (Morinda citrifolia), Woodland Publishing Pleasant Grove, USA [25] Stalman M., Koskamp A., Luderer R (2003), “Regulation of anthraquinone biosynthesis in cell culture of Morinda citrifolia”, Journal Plant physiol, Jun, 160(6), pp 607-614 [26] Su B.N, Pawlus A.D (2005), "Chemical constituents of the fruits of Morinda citrifolia (Noni) and their antioxidant activity", J Nat Prod., 68 (4), pp 592 - 595 [27] Wang M.Y., West B.J., Jensen C.J (2002), “Morinda citrifolia (Noni): a literature review and recent advances in Noni research”, Acta Pharmacol Sin, Dec, 23(12), pp.1127-1141 [28] Wang M.Y., Kikuzaki H., Jin Y (2000), “Novel glycosides from noni (Morinda citrifolia), J Nat Prod, 63(8), pp 1182-1183 [29] Wang M.Y., Su C (2001), “Cancer preventive effect of Morinda citrifolia (Noni)”, Annals of the NewYork Academy of sciences, 952, pp 161 - 168 [30] Wang M., Kikuzaki H., Csiszar K (1999), “Novel trisaccharide fatty acid ester identified from the fruits of Morinda citrifolia (Noni), J Agric Food Chem, 47(2), pp 4880 - 4482 [31] Wang M.Y., Kikuzaki H., Jin Y (2000), “Novel glycosides from noni (Morinda citrifolia), J Nat Prod, 63(8), pp 1182-1183 [32] http://doan.edu.vn/do-an/tong-quan-ve-cay-nhau-morinda-citrifolia-l24515/ [33] http://vi.wikipedia.org/wiki/Nh%C3%A0u 54 PHẦN PHỤ LỤC 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 ...ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC DỊCH CHIẾT ETHANOL CỦA QUẢ NHÀU Ở THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC... cứu chiết tách xác định thành phần hóa học dịch chiết ethanol nhàu thành phố Đà Nẵng? ?? Mục đích nghiên cứu - Xây dựng quy trình chiết hợp chất hóa học nhàu - Xác định thành phần hóa học nhàu Đối... vi nghiên cứu  Đối tượng nghiên cứu: - Quả nhàu địa bàn thành phố Đà Nẵng  Phạm vi nghiên cứu: - Quả nhàu - Chiết, xác định thành phần hóa học dịch chiết nhàu - Xây dựng quy trình chiết tách