Tuyển chọn và khảo sát khả năng sinh amylase của một số chủng nấm sợi từ rừng ngập mặn cần giờ tp hồ chí minh

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SỰ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - - Nguyễn Thị Lan Hương TUYỂN CHỌN VÀ KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SINH AMYLASE CỦA MỘT SỐ CHỦNG NẤM SỢI TỪ RỪNG NGẬP MẶN CẦN GIỜ TP HỒ CHÍ MINH CHUYÊN NGÀNH: VI SINH VẬT Mã số: 604240 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS.TRẦN THANH THỦY Tp.Hồ Chí Minh - 2009 Trang LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Trần Thanh Thủy dìu dắt giúp đỡ tơi từ thực luận văn tốt nghiệp đến thực luận văn thạc sĩ sinh học Cơ ln có mặt bên cạnh, giúp đỡ em gặp khó khăn suốt trình nghiên cứu, thực luận văn Tôi xin ghi nhớ công ơn PGS.TS Lương Đức Phẩm ln tận tình hướng dẫn, bảo tơi q trình thực luận văn Tơi gửi lời cảm ơn đến thầy cô phịng thí nghiệm Vi sinh – Sinh hóa, trường Đại học Sư phạm tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành cơng viêc nghiên cứu thực luận văn Xin chân thành cảm ơn bạn học viên Cao học khóa 17 18 ngành Vi sinh vật học, trường Đại học Sư phạm TpHCM nhiệt tình giúp đỡ tơi suốt q trình nghiên cứu thực luận văn Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình bạn bè ln động viên, giúp đỡ suốt thời gian qua TpHCM, tháng năm 2009 NGUYỄN THỊ LAN HƯƠNG Trang LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu luận văn trung thực thể qua kết thí nghiệm chưa cơng bố Tác giả luận văn Nguyễn Thị Lan Hương MỞ ĐẦU RNM Cần quần thể TV đa dạng sinh học Chiến tranh, bom đạn loại chất độc hóa học hủy hoại gần hoàn toàn khu rừng Từ năm 1978 đến nay, Thành ủy UBND Tp.HCM phục hồi thành công HST RNM đa dạng độc đáo Đồng thời, từ tạo nên địa điểm lý tưởng phục vụ cho nghiên cứu khoa học du lịch sinh thái Khu dự trữ sinh RNM Cần Giờ nơi lưu giữ nhiều nguồn gen SV quý hiếm, bền vững có khả chịu đựng điều kiện khắc nghiệt MT sống Trong đó, ĐV TV nghiên cứu thống kê chi tiết Riêng hệ VSV phong phú RNM Cần Giờ cịn nhiều bí ẩn chưa khai thác mức Trong số VSV NS chiếm số lượng lớn, giữ vai trị quan trọng tuần hồn vật chất lượng nhờ có hệ enzym phong phú cellulase, protease, amylase,… Nổi bật ứng dụng nhiều hệ enzym thủy phân NS amylase Loại enzym phân giải tinh bột mang lại vị cho thiên nhiên người nghiên cứu từ lâu, đến nhà khoa học biết rõ Hiện amylase hệ enzym quan trọng ngành cơng nghệ sinh học chúng ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực khác công nghiệp thực phẩm, dược phẩm, công nghiệp lên men, công nghiệp dệt, Tiếp tực tìm hiểu, khám phá bí ẩn cấu trúc đặc tính amylase để nâng cao hiệu suất xúc tác chúng đề tài hấp dẫn nhiều nhà nghiên cứu Tuy vậy, nước ta chưa lưu ý nhiều đến lĩnh vực nghiên cứu sản xuất chế phẩm amylase từ VSV NS Việc sản xuất amylase từ NS có nhiều ưu việt rút ngắn q trình sản xuất, tận dụng nguồn nguyên liệu, phế phẩm nơng nghiệp góp phần giảm nhiễm MT, enzym có hoạt tính cao giảm giá thành sản phẩm so với enzym có nguồn gốc từ TV ĐV Đặc biệt thu chủng NS có khả sinh amylase cao sinh trưởng điều kiện khắc nghiệt RNM Cần Giờ có ích bổ sung thêm chủng NS có đặc tính q, đầy tiềm ứng dụng sản xuất thức ăn chăn nuôi Mặc dù vậy, việc nghiên cứu NS sinh amylase từ RNM chưa khai thác mức Trước thực tế này, nhằm đa dạng hóa nguồn thu nhận amylase từ NS, mong muốn thu nhận nguồn amylase mang đặc tính q, chúng tơi tiến hành đề tài “Tuyển chọn khảo sát khả sinh amylase số chủng NS từ RNM Cần Giờ Tp.HCM” Mục đích đề tài Tuyển chọn chủng NS sinh amylase cao từ RNM Cần Giờ Nhiệm vụ đề tài - Phân lập chủng NS thu nhận từ RNM Cần Giờ - Tuyển chọn số chủng NS có khả sinh amylase cao - Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa phân loại đến loài NS tuyển chọn - Khảo sát điều kiện ảnh hưởng đến khả sinh trưởng, tổng hợp amylase chủng NS chọn - Nghiên cứu số tính chất enzym thu - Khảo sát đặc tính sinh học khác - Thu nhận amylase bán tinh khiết so sánh với enzym thương mại thị trường Đối tượng phạm vi nghiên cứu - Các chủng NS phân lập từ xã: Long Hòa, Lý Nhơn, An Thới Đơng, Tam Thơn Hiệp Bình Khánh RNM Cần Giờ, Tp.HCM - Đề tài tiến hành nghiên cứu PTN Vi sinh – Sinh hóa, khoa Sinh học, trường Đại học Sư phạm Tp.HCM thời gian từ tháng năm 2008 đến tháng năm 2009 Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vài nét khái quát RNM Cần Giờ RNM (Mangrove) thuật ngữ dùng để loài TV khu rừng có nhiều lồi sống vùng giao thoa đất liền biển Chúng mọc tốt vùng khí hậu nóng ẩm [4] Theo GS Phan Nguyên Hồng (1995), diện tích RNM giới khoảng 16.670.000 ha, khu vực Châu Á chiếm diện tích lớn Theo số liệu Bộ Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn cho thấy, năm 1943 diện tích RNM Việt Nam 400.000 ha, đến năm 1996 giảm 290.000 279.000 vào năm 2006 Với diện tích RNM Việt Nam chiếm phần lớn khu vực RNM nguyên sinh tự nhiên khơng cịn Đa số RNM rừng trồng (62%) lại rừng thứ sinh nghèo rừng tái sinh bãi bồi HST RNM phân bố dọc bờ biển Việt Nam thuộc 28 tỉnh thành phố, tập trung chủ yếu tỉnh đồng sông Cửu Long, bán đảo Cà Mau hai tỉnh phía Bắc Nam Định Thái Bình Các tỉnh đồng sơng Cửu Long có diện tích RNM chưa đến 100.000 Riêng RNM Cần Giờ hay rừng Sác, sau nỗ lực khôi phục thành cơng, có diện tích rừng đất rừng 38.664 [74] Với diện tích đạt trên, với độ đa dạng sinh học bậc RNM Đông - Nam Á , RNM Cần Giờ Tổ chức Văn hóa, Khoa học Giáo dục LHQ (UNESCO) công nhận Khu dự trữ sinh giới từ tháng 1-2000 Đây Khu dự trữ sinh RNM nước ta xem “lá phổi” quan trọng Tp.HCM [69] Khu dự trữ sinh RNM Cần Giờ hình thành hạ lưu sơng Đồng Nai – Sài Gịn nằm cửa ngõ Đông Nam Tp.HCM: Về tọa độ địa lý: vĩ độ Bắc 10o22’ – 100o40’09”, kinh độ Đông 106046’ – 107°00’59” Về ranh giới, phía Bắc Cần Giờ giáp tỉnh Đồng Nai, phía Nam giáp biển Đơng, phía Tây giáp tỉnh Tiền Giang Long An, phía Đơng giáp tỉnh Bà Rịa – Vũng Tàu Chiều dài khu vực từ Bắc xuống Nam 35km, từ Đông sang Tây 30km Tổng diện tích Khu dự trữ sinh RNM Cần Giờ 75.740 ha, đó: vùng lõi 4.721 ha, vùng đệm 41.139 ha, vùng chuyển tiếp 29.880 [5] RNM Cần Giờ phát triển đầm mặn mới, phù sa sông mang đến lắng đọng tạo thành đất Đất tạo tổng hợp trình lắng tụ trầm tích đất sét, phèn hóa nhiễm mặn Cho đến lớp đất sâu chưa kết chặt nên khả tạo thành đất rắn chắc, có hàm lượng lưu huỳnh dạng khử cao lượng muối cao khơng có lợi cho nơng nghiệp [21] Khí hậu nóng ẩm chịu chi phối quy luật gió mùa cận xích đạo với mùa mưa từ tháng đến tháng 10, mùa khô từ tháng đến tháng Lượng mưa trung bình từ 1300 đến 1400mm hàng năm Độ ẩm cao nơi khác khu vực Tp.HCM: mùa mưa 79 – 83%, mùa khơ 74 – 77% Nhiệt độ trung bình 25,8oC, biên độ dao động nhiệt ngày từ đến 7oC Chế độ bán nhật triều không Độ mặn dao động 1,8 – 3% [5] RNM Cần Giờ có 150 lồi TV, lồi chủ yếu bần trắng, mấm trắng, quần hợp đước đôi - bần trắng xu ổi, trang, đưng v.v… loại nước lợ bần chua, quần hợp mái dầm – ô rô, dừa lá, ráng, v.v… Thảm cỏ biển với loài ưu Halophyla sp., Halodule sp., Thalassia sp.; đất canh tác nông nghiệp trồng lúa, khoai mỡ, loại đậu, dừa v.v…; vườn ăn trái Thảm TV MT sống cho nhiều loài ĐV, theo thống kê năm 1999 như: 700 lồi ĐV thuỷ sinh khơng xương sống, lồi lưõng thê, 31 lồi bị sát, 137 lồi cá, khoảng 130 lồi chim nhiều ĐV có xương sống có sách đỏ Việt Nam Ngồi cịn có 63 lồi phiêu SV, 130 lồi tảo [4] Tuy chưa có nhiều số liệu thống kê hệ NS RNM Cần Giờ, thấy lồi TV ĐV nguồn thức ăn tốt cung cấp cho hệ NS RNM Cần Giờ NS mắt xích quan trọng chuỗi thức ăn, tác nhân phân giải chất hữu cơ, cung cấp thức ăn cho SV khác HST, nhân tố thiếu tham gia khép kín chu trình sinh địa hóa RNM Cần Giờ HST nằm lưu vực ven bờ có nhiều thành phần C phức tạp thủy triều đưa vào NS có khả sinh loại amylase, protease, cellulase, chitinase, phân hủy chất hữu để sử dụng đồng thời góp phần làm giảm nhiễm MT RNM Cần Giờ Đặc biệt nơi có nguồn tinh bột sẵn có cây, thân (nhất mục thân mục) nguyên liệu cho amylase phân giải tạo glucose cho hoạt động sống chúng Hình 1.1 Bản đồ tổng quan RNM Cần Giờ vị trí xã thu mẫu [65] Ký hiệu : vị trí thu mẫu Do đặc điểm trên, RNM Cần Giờ có vai trị “lá phổi xanh” làm giảm ô nhiễm MT, giảm nóng lên Trái đất ngăn ngừa tình trạng dâng lên nước biển RNM Cần Giờ “chiếc lọc sinh học” xử lý chất thải, xử lý chất dinh dưỡng từ đất liền giữ vai trị vùng đệm chống lại dịng chảy nhiễm đồng thời lọc thức ăn cho ĐV biển; giúp bảo vệ loài ĐV đất liền nước triều lên cao sóng lớn; bảo vệ bờ biển cửa sơng tránh tình trạng tác hại xói lở bão, sóng hệ thống đê biển, giảm chi phí tu bổ đê điều hàng năm; nơi có lợi nhuận kinh tế cao, cung cấp nguồn hải sản phong phú để sử dụng nước xuất nguồn lợi khác từ rừng, RNM HST có suất sinh học cao HST, nơi hội tụ đa dạng SV biển đất liền Vì thế, cịn PTN sống để nghiên cứu khả chịu đựng phục hồi tổ hợp gen, khả phát tán định cư dạng sống [74] 1.2 Sơ lược NS 1.2.1 Hình thái cấu trúc NS NS VSV có nhân chuẩn, dị dưỡng Sợi nấm có vách ngăn lớp nấm bậc cao Ascomycetes, Basidiomycetes, Deuteromycetes hay khơng có vách ngăn nấm bậc thấp Oomycetes Zygomycetes Các sợi nấm vừa phát triển theo chiều dài tăng trưởng phân nhánh tạo hệ sợi nấm gọi khuẩn ty Hệ sợi nấm phát triển thành dạng KL khác tùy theo chất rắn, lỏng hay mềm KL NS phát triển từ bào tử có dạng trịn hay gần trịn Bề mặt KL mượt, nhung mịn, nhẵn bóng, dạng bột, dạng sợi, dạng hạt, dạng xốp, phẳng, có vết khía xun tâm, có rãnh hay lồi lõm khơng đều; mép KL trơn hay cưa tùy vào loại nấm khác [11, 13, 61, 78] Phần lớn sợi nấm có dạng suốt, số sợi nấm mang sắc tố tạo nên màu tối hay màu sặc sỡ Sắc tố số nấm cịn tiết ngồi MT làm đổi màu khu vực có nấm phát triển Một số nấm tiết chất hữu tạo nên tinh thể bề mặt KL Vì bào tử nấm thường có màu nên KL thường có màu Hình thái, kích thước màu sắc, bề mặt KL…có ý nghĩa định việc định tên nấm [3, 61] NS sinh sản chủ yếu bào tử Bào tử NS hình thành theo kiểu vơ tính hay hữu tính Bào tử vơ tính gồm dạng bào tử trần hay bào tử kín, bào tử trần phổ biến Trong sinh sản hữu tính, NS có hình thức đẳng giao, dị giao tiếp hợp [11] NS ngày quan tâm nghiên cứu ngày sâu rộng chúng có khả sinh nhiều chất có hoạt tính sinh học cao ứng dụng rộng rãi đem lại nhiều nguồn lợi kinh tế cao tạo loại enzym, chất KS, axit hữu cơ, chất có khả phân giải nguồn cacbuahydro (ứng dụng xử lý ô nhiễm MT tràn dầu), Hình 1.2 Sự phát triển sợi nấm [61] Hình 1.3 KL chủng Penicillium [64] Hình 1.4 Một số dạng bào tử NS [68, 70, 79]  Khả sinh enzym ngoại bào Enzym sản xuất từ VSV ngày nhiều VSV nhóm đối tượng sử dụng nguồn sản xuất enzym theo quy mô công nghiệp So với ĐV TV, việc thu nhận enzym từ VSV nói chung NS nói riêng có nhiều ưu điểm như: tốc độ sinh sản nhanh, enzym thu có hoạt tính cao, q trình sinh trưởng phát triển tổng hợp enzym VSV hồn tồn khơng phụ thuộc vào khí hậu bên ngồi, nguồn ngun liệu dùng sản xuất enzym theo quy mô công nghiệp rẻ tiền dễ kiếm (đây lợi quan trọng) VSV sinh tổng hợp lúc nhiều loại enzym khác Ngày nay, nhiều loại enzym ngoại bào NS nghiên cứu, sản xuất ứng dụng phổ biến như: amylase, protease, cellulase, pectinase, chitinase, [9, 25] Phụ lục 20: Ảnh hưởng thời gian đến hoạt độ glucoamylase hai chủng NS Thời gian (giờ) 24 36 48 60 72 84 96 108 120 Số lần Asp.oryzae ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ Trung bình Phương sai 0,080 160,000 2488,889 0,121 242,000 3764,444 0,110 220,000 3422,222 0,098 196,000 3048,889 0,079 158,000 2457,778 0,060 120,000 1866,667 0,046 92,000 1431,111 0,025 50,000 777,778 0,012 24,000 373,333 0,076 152,000 2364,444 0,118 236,000 3671,111 0,112 224,000 3484,444 0,100 200,000 3111,111 0,078 156,000 2426,667 0,063 126,000 1960,000 0,048 96,000 1493,333 0,027 54,000 840,000 0,009 18,000 280,000 0,079 158,000 2457,778 0,123 246,000 3826,667 0,110 220,000 3422,222 0,105 210,000 3266,667 0,075 150,000 2333,333 0,064 128,000 1991,111 0,043 86,000 1337,778 0,022 44,000 684,444 0,007 14,000 217,778 0,078 156,667 2437,037 0,121 241,333 3754,074 0,111 221,333 3442,963 0,101 202,000 3142,222 0,077 154,667 2405,926 0,062 124,667 1939,259 0,046 91,333 1420,741 0,025 49,333 767,407 0,009 18,667 290,370 4,33E-06 17,33333 4194,239 6,33E-06 25,33333 6130,041 1,33E-06 5,333333 1290,535 0,000013 52 12582,72 4,33E-06 17,33333 4194,239 4,33E-06 17,33333 4194,239 6,33E-06 25,33333 6130,041 6,33E-06 25,33333 6130,041 6,33E-06 25,33333 6130,041 Sai số 0,002 4,163 64,763 0,003 5,033 78,295 0,001 2,309 35,924 0,004 7,211 112,173 0,002 4,163 64,763 0,002 4,163 64,763 0,003 5,033 78,295 0,003 5,033 78,295 0,003 5,033 78,295 Phụ lục 20 (tt) Thời gian (giờ) 24 36 48 60 72 84 96 108 120 Số lần Trung Asp protuberus bình ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ 0,012 24,000 373,333 0,018 36,000 560,000 0,057 114,000 1773,333 0,083 166,000 2582,222 0,082 164,000 2551,111 0,068 136,000 2115,556 0,052 104,000 1617,778 0,028 56,000 871,111 0,021 42,000 653,333 0,010 20,000 311,111 0,017 34,000 528,889 0,057 114,000 1773,333 0,087 174,000 2706,667 0,083 166,000 2582,222 0,070 140,000 2177,778 0,057 114,000 1773,333 0,032 64,000 995,556 0,023 46,000 715,556 0,010 20,000 311,111 0,030 60,000 933,333 0,058 116,000 1804,444 0,082 164,000 2551,111 0,078 156,000 2426,667 0,068 136,000 2115,556 0,051 102,000 1586,667 0,029 58,000 902,222 0,024 48,000 746,667 0,011 21,333 331,852 0,022 43,333 674,074 0,057 114,667 1783,704 0,084 168,000 2613,333 0,081 162,000 2520,000 0,069 137,333 2136,296 0,053 106,667 1659,259 0,030 59,333 922,963 0,023 45,333 705,185 Phương sai Sai số 1,33E-06 0,001 5,333333 2,309 1290,535 35,924 5,23E-05 0,007 209,3333 14,468 50653,5 225,063 3,33E-07 0,001 1,333333 1,155 322,6337 17,962 7E-06 0,003 28 5,292 6775,309 82,312 7E-06 0,003 28 5,292 6775,309 82,312 1,33E-06 0,001 5,333333 2,309 1290,535 35,924 1,03E-05 0,003 41,33333 6,429 10001,65 100,008 4,33E-06 0,002 17,33333 4,163 4194,239 64,763 2,33E-06 0,002 9,333333 3,055 2258,436 47,523 Phụ lục 21: Ảnh hưởng nhiệt độ đến hoạt động α-amylase Nhiệt độ (oC) 30 40 50 60 70 80 90 100 Asp.oryzae ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ 0,635 3,205 44,876 0,651 3,286 46,007 0,675 3,407 47,703 0,650 3,281 45,936 0,578 2,918 40,848 0,356 1,797 25,159 0,004 0,020 0,283 0,000 0,000 0,000 Số lần 0,631 3,185 44,594 0,657 3,317 46,431 0,673 3,397 47,562 0,648 3,271 45,795 0,579 2,923 40,919 0,352 1,777 24,876 0,006 0,030 0,424 0,000 0,000 0,000 0,637 3,216 45,018 0,653 3,296 46,148 0,682 3,443 48,198 0,649 3,276 45,866 0,576 2,908 40,707 0,353 1,782 24,947 0,005 0,025 0,353 0,000 0,000 0,000 Trung bình 0,634 3,202 44,829 0,654 3,300 46,196 0,677 3,416 47,821 0,649 3,276 45,866 0,578 2,916 40,824 0,354 1,785 24,994 0,005 0,025 0,353 0,000 0,000 0,000 Phương sai Sai số 9,333E-06 0,0002378 0,0466148 9,333E-06 0,0002378 0,0466148 2,233E-05 0,0005691 0,1115426 0,000001 2,548E-05 0,0049944 2,333E-06 5,946E-05 0,0116537 4,333E-06 0,0001104 0,0216426 0,000001 2,548E-05 0,0049944 0,000 0,000 0,000 0,003055 0,015422 0,215905 0,003055 0,015422 0,215905 0,004726 0,023856 0,33398 0,001 0,005048 0,070671 0,001528 0,007711 0,107952 0,002082 0,010508 0,147114 0,001 0,005048 0,070671 0,000 0,000 0,000 Phụ lục 21 (tt) Nhiệt độ (oC) 30 40 50 60 70 80 90 100 Asp.protuberus ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ 0,612 3,089 43,251 0,622 3,140 43,958 0,627 3,165 44,311 0,582 2,938 41,131 0,248 1,252 17,527 0,007 0,035 0,495 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Số lần 0,613 3,094 43,322 0,620 3,130 43,816 0,632 3,190 44,664 0,583 2,943 41,201 0,251 1,267 17,739 0,003 0,015 0,212 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,610 3,079 43,110 0,621 3,135 43,887 0,628 3,170 44,382 0,581 2,933 41,060 0,250 1,262 17,668 0,002 0,010 0,141 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Trung bình 0,612 3,088 43,227 0,621 3,135 43,887 0,629 3,175 44,452 0,582 2,938 41,131 0,250 1,260 17,644 0,004 0,020 0,283 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Phương sai Sai số 2,333E-06 5,946E-05 0,0116537 0,000001 2,548E-05 0,0049944 7E-06 0,0001784 0,0349611 0,000001 2,548E-05 0,0049944 2,333E-06 5,946E-05 0,0116537 0,000007 0,0001784 0,0349611 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,001528 0,007711 0,107952 0,001 0,005048 0,070671 0,002646 0,013356 0,186979 0,001 0,005048 0,070671 0,001528 0,007711 0,107952 0,002646 0,013356 0,186979 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Phụ lục 22: Ảnh hưởng nhiệt độ đến hoạt động glucoamylase hai chủng NS Nhiệt độ (oC) 30 40 50 60 70 80 90 100 Số lần Trung Asp.oryzae ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ 0,076 152,000 2364,444 0,092 184,000 2862,222 0,124 248,000 3857,778 0,112 224,000 3484,444 0,010 20,000 311,111 0,001 2,000 31,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,083 166,000 2582,222 0,087 174,000 2706,667 0,131 262,000 4075,556 0,107 214,000 3328,889 0,015 30,000 466,667 0,001 2,000 31,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,082 164,000 2551,111 0,090 180,000 2800,000 0,127 254,000 3951,111 0,104 208,000 3235,556 0,015 30,000 466,667 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 bình Phương sai Sai số 0,080 160,667 2499,259 0,090 179,333 2789,630 0,127 254,667 3961,481 0,108 215,333 3349,630 0,013 26,667 414,815 0,001 1,333 20,741 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 1,433E-05 57,333333 13873,251 6,333E-06 25,333333 6130,0412 1,233E-05 49,333333 11937,449 1,633E-05 65,333333 15809,053 8,333E-06 33,333333 8065,8436 3,333E-07 1,3333333 322,63374 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,004 7,572 117,785 0,003 5,033 78,295 0,004 7,024 109,259 0,004 8,083 125,734 0,003 5,774 89,810 0,001 1,155 17,962 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Phụ lục 22 (tt) Nhiệt độ (oC) 30 40 50 60 70 80 90 100 Số lần Trung Asp protuberus ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ 0,059 118,000 1835,556 0,072 144,000 2240,000 0,086 172,000 2675,556 0,061 122,000 1897,778 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,063 126,000 1960,000 0,065 130,000 2022,222 0,085 170,000 2644,444 0,059 118,000 1835,556 0,001 2,000 31,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,064 128,000 1991,111 0,065 130,000 2022,222 0,087 174,000 2706,667 0,057 114,000 1773,333 0,002 4,000 62,222 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 bình Phương sai Sai số 0,062 124,000 1928,889 0,067 134,667 2094,815 0,086 172,000 2675,556 0,059 118,000 1835,556 0,001 2,000 31,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 7E-06 28 6775,3086 1,633E-05 65,333333 15809,053 1E-06 967,90123 4E-06 16 3871,6049 0,000001 967,90123 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,003 5,292 82,312 0,004 8,083 125,734 0,001 2,000 31,111 0,002 4,000 62,222 0,001 2,000 31,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Phụ lục 23: Ảnh hưởng nhiệt độ đến độ bền α-amylase Nhiệt độ (oC) 30 40 50 60 70 80 90 100 Số lần Trung Asp.oryzae ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ 0,684 3,453 48,339 0,684 3,453 48,339 0,680 3,433 48,057 0,572 2,887 40,424 0,527 2,660 37,244 0,423 2,135 29,894 0,123 0,621 8,693 0,067 0,338 4,735 0,000 0,000 0,000 0,688 3,473 48,622 0,688 3,473 48,622 0,682 3,443 48,198 0,573 2,892 40,495 0,524 2,645 37,032 0,420 2,120 29,682 0,127 0,641 8,975 0,063 0,318 4,452 0,000 0,000 0,000 0,688 3,473 48,622 0,687 3,468 48,551 0,682 3,443 48,198 0,572 2,887 40,424 0,524 2,645 37,032 0,418 2,110 29,541 0,126 0,636 8,905 0,068 0,343 4,806 0,000 0,000 0,000 bình Phương sai Sai số 0,687 3,466 48,528 0,686 3,465 48,504 0,681 3,439 48,151 0,572 2,889 40,448 0,525 2,650 37,102 0,420 2,122 29,706 0,125 0,633 8,857 0,066 0,333 4,664 0,000 0,000 0,000 5,33E-06 0,000136 0,026637 4,33E-06 0,00011 0,021643 1,33E-06 3,4E-05 0,006659 3,33E-07 8,49E-06 0,001665 3E-06 7,64E-05 0,014983 6,33E-06 0,000161 0,031631 4,33E-06 0,00011 0,021643 7E-06 0,000178 0,034961 0,000 0,000 0,000 0,00231 0,01166 0,16321 0,00208 0,01051 0,14711 0,00115 0,00583 0,0816 0,00058 0,00291 0,0408 0,00173 0,00874 0,12241 0,00252 0,0127 0,17785 0,00208 0,01051 0,14711 0,00265 0,01336 0,18698 0,000 0,000 0,000 Phần % 100,00 99,95 99,22 83,35 76,46 61,21 18,25 9,61 0,00 Phụ lục 23 (tt) Nhiệt độ (oC) 30 40 50 60 70 80 90 100 Số lần Trung Asp protuberus bình Phương sai ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ 0,619 3,125 43,746 0,619 3,125 43,746 0,604 3,049 42,686 0,501 2,529 35,406 0,473 2,388 33,428 0,239 1,206 16,890 0,008 0,040 0,565 0,002 0,010 0,141 0,000 0,000 0,000 0,618 3,120 43,675 0,618 3,120 43,675 0,608 3,069 42,968 0,505 2,549 35,689 0,479 2,418 33,852 0,241 1,217 17,032 0,013 0,066 0,919 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,620 3,130 43,816 0,619 3,125 43,746 0,608 3,069 42,968 0,504 2,544 35,618 0,476 2,403 33,640 0,240 1,212 16,961 0,009 0,045 0,636 0,001 0,005 0,071 0,000 0,000 0,000 0,619 3,125 43,746 0,619 3,123 43,722 0,607 3,062 42,874 0,503 2,541 35,571 0,476 2,403 33,640 0,240 1,212 16,961 0,010 0,050 0,707 0,001 0,005 0,071 0,000 0,000 0,000 0,000001 2,55E-05 0,004994 3,33E-07 8,49E-06 0,001665 5,33E-06 0,000136 0,026637 4,33E-06 0,00011 0,021643 9E-06 0,000229 0,04495 0,000001 2,55E-05 0,004994 0,000007 0,000178 0,034961 0,000001 2,55E-05 0,004994 0,000 0,000 0,000 Sai số % 0,001 0,00505 0,07067 100,00 0,00058 0,00291 0,0408 99,95 0,00231 0,01166 0,16321 98,01 0,00208 0,01051 0,14711 81,31 0,003 0,01514 0,21201 76,90 0,001 0,00505 0,07067 38,77 0,00265 0,01336 0,18698 1,62 0,001 0,00505 0,07067 0,16 0,000 0,000 0,000 0,00 Phụ lục 24: Ảnh hưởng nhiệt độ đến độ bền glucoamylase Nhiệt độ (oC) Số lần Asp.oryzae ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD 30 Glucose Hoạt độ ΔOD 40 Glucose Hoạt độ ΔOD 50 Glucose Hoạt độ ΔOD 60 Glucose Hoạt độ ΔOD 70 Glucose Hoạt độ ΔOD 80 Glucose Hoạt độ ΔOD 90 Glucose Hoạt độ ΔOD 100 Glucose Hoạt độ Trung bình 0,128 256,000 3982,222 0,127 254,000 3951,111 0,087 174,000 2706,667 0,045 90,000 1400,000 0,009 18,000 280,000 0,001 2,000 31,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,127 254,000 3951,111 0,127 254,000 3951,111 0,079 158,000 2457,778 0,042 84,000 1306,667 0,007 14,000 217,778 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,128 256,000 3982,222 0,125 250,000 3888,889 0,076 152,000 2364,444 0,048 96,000 1493,333 0,006 12,000 186,667 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,128 255,333 3971,852 0,126 252,667 3930,370 0,081 161,333 2509,630 0,045 90,000 1400,000 0,007 14,667 228,148 0,000 0,667 10,370 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Phương sai Sai số % 3,33E-07 0,001 1,333333 1,155 322,6337 17,962 100 1,33E-06 0,001 5,333333 2,309 1290,535 35,924 98,96 3,23E-05 0,006 129,3333 11,372 31295,47 176,905 63,19 0,000009 0,003 36 6,000 8711,111 93,333 35,25 2,33E-06 0,002 9,333333 3,055 2258,436 47,523 5,74 3,33E-07 0,001 1,333333 1,155 322,6337 17,962 0,26 0,000 0,000 0,000 0,00 0,000 0,000 0,000 0,00 0,000 0,000 0,000 0,00 Phụ lục 24 (tt) Nhiệt độ (oC) Asp protuberus ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD 30 Glucose Hoạt độ ΔOD 40 Glucose Hoạt độ ΔOD 50 Glucose Hoạt độ ΔOD 60 Glucose Hoạt độ ΔOD 70 Glucose Hoạt độ ΔOD 80 Glucose Hoạt độ ΔOD 90 Glucose Hoạt độ ΔOD 100 Glucose Hoạt độ Số lần 0,090 180,000 2800,000 0,087 174,000 2706,667 0,050 100,000 1555,556 0,030 60,000 933,333 0,002 4,000 62,222 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,087 174,000 2706,667 0,088 176,000 2737,778 0,047 94,000 1462,222 0,029 58,000 902,222 0,001 2,000 31,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Trung bình Phương sai Sai số % 0,085 0,087 6,33E-06 0,003 170,000 174,667 25,33333 5,033 2644,444 2717,037 6130,041 78,295 100 0,086 0,087 0,000001 0,001 172,000 174,000 2,000 2675,556 2706,667 967,9012 31,111 99,62 0,048 0,048 2,33E-06 0,002 96,000 96,667 9,333333 3,055 1493,333 1503,704 2258,436 47,523 55,34 0,029 0,029 3,33E-07 0,001 58,000 58,667 1,333333 1,155 902,222 912,593 322,6337 17,962 33,59 0,000 0,001 0,000001 0,001 0,000 2,000 2,000 0,000 31,111 967,9012 31,111 1,15 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,00 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,00 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,00 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,00 Phụ lục 25: Ảnh hưởng pH đến hoạt động α-amylase pH 2,5 3,5 4,5 5,5 6,5 7,5 Asp.oryzae ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ 0,107 0,540 7,562 0,290 1,464 20,495 0,432 2,181 30,530 0,596 3,009 42,120 0,678 3,423 47,915 0,694 3,503 49,046 0,687 3,468 48,551 0,672 3,392 47,491 0,606 3,059 42,827 0,572 2,887 40,424 0,532 2,686 37,597 0,474 2,393 33,498 0,402 2,029 28,410 Số lần 0,110 0,555 7,774 0,291 1,469 20,565 0,427 2,155 30,177 0,596 3,009 42,120 0,678 3,423 47,915 0,698 3,523 49,329 0,689 3,478 48,693 0,673 3,397 47,562 0,610 3,079 43,110 0,570 2,877 40,283 0,537 2,711 37,951 0,478 2,413 33,781 0,398 2,009 28,127 0,110 0,555 7,774 0,288 1,454 20,353 0,426 2,150 30,106 0,592 2,988 41,837 0,680 3,433 48,057 0,695 3,508 49,117 0,690 3,483 48,763 0,673 3,397 47,562 0,605 3,054 42,756 0,568 2,867 40,141 0,536 2,706 37,880 0,475 2,398 33,569 0,403 2,034 28,481 Trung bình 0,109 0,550 7,703 0,290 1,462 20,471 0,428 2,162 30,271 0,595 3,002 42,026 0,679 3,426 47,962 0,696 3,512 49,164 0,689 3,476 48,669 0,673 3,396 47,538 0,607 3,064 42,898 0,570 2,877 40,283 0,535 2,701 37,809 0,476 2,401 33,616 0,401 2,024 28,339 Phương sai Sai số 3E-06 7,64E-05 0,014983 2,33E-06 5,95E-05 0,011654 1,03E-05 0,000263 0,051609 5,33E-06 0,000136 0,026637 1,33E-06 3,4E-05 0,006659 4,33E-06 0,00011 0,021643 2,33E-06 5,95E-05 0,011654 3,33E-07 8,49E-06 0,001665 7E-06 0,000178 0,034961 4E-06 0,000102 0,019978 7E-06 0,000178 0,034961 4,33E-06 0,00011 0,021643 7E-06 0,000178 0,034961 0,001732 0,008743 0,122406 0,001528 0,007711 0,107952 0,003215 0,016227 0,227177 0,002309 0,011658 0,163209 0,001155 0,005829 0,081604 0,002082 0,010508 0,147114 0,001528 0,007711 0,107952 0,000577 0,002914 0,040802 0,002646 0,013356 0,186979 0,002 0,010096 0,141343 0,002646 0,013356 0,186979 0,002082 0,010508 0,147114 0,002646 0,013356 0,186979 Phụ lục 25 (tt) pH 2,5 3,5 4,5 5,5 6,5 7,5 Asp.protuberus ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ 0,000 0,000 0,000 0,110 0,555 7,774 0,320 1,615 22,615 0,584 2,948 41,272 0,621 3,135 43,887 0,609 3,074 43,039 0,582 2,938 41,131 0,543 2,741 38,375 0,498 2,514 35,194 0,479 2,418 33,852 0,452 2,282 31,943 0,427 2,155 30,177 0,413 2,085 29,187 Số lần 0,000 0,000 0,000 0,116 0,586 8,198 0,324 1,636 22,898 0,583 2,943 41,201 0,622 3,140 43,958 0,608 3,069 42,968 0,588 2,968 41,555 0,540 2,726 38,163 0,495 2,499 34,982 0,477 2,408 33,710 0,453 2,287 32,014 0,427 2,155 30,177 0,416 2,100 29,399 0,000 0,000 0,000 0,115 0,581 8,127 0,323 1,630 22,827 0,582 2,938 41,131 0,621 3,135 43,887 0,610 3,079 43,110 0,586 2,958 41,413 0,539 2,721 38,092 0,499 2,519 35,265 0,479 2,418 33,852 0,455 2,297 32,155 0,428 2,161 30,247 0,417 2,105 29,470 Trung bình 0,000 0,000 0,000 0,114 0,574 8,033 0,322 1,627 22,780 0,583 2,943 41,201 0,621 3,136 43,910 0,609 3,074 43,039 0,585 2,955 41,366 0,541 2,729 38,210 0,497 2,511 35,147 0,478 2,415 33,804 0,453 2,288 32,038 0,427 2,157 30,200 0,415 2,097 29,352 Phương sai Sai số 0 1,03E-05 0,000263 0,051609 4,33E-06 0,00011 0,021643 0,000001 2,55E-05 0,004994 3,33E-07 8,49E-06 0,001665 0,000001 2,55E-05 0,004994 9,33E-06 0,000238 0,046615 4,33E-06 0,00011 0,021643 4,33E-06 0,00011 0,021643 1,33E-06 3,4E-05 0,006659 2,33E-06 5,95E-05 0,011654 3,33E-07 8,49E-06 0,001665 4,33E-06 0,00011 0,021643 0 0,003215 0,016227 0,227177 0,002082 0,010508 0,147114 0,001 0,005048 0,070671 0,000577 0,002914 0,040802 0,001 0,005048 0,070671 0,003055 0,015422 0,215905 0,002082 0,010508 0,147114 0,002082 0,010508 0,147114 0,001155 0,005829 0,081604 0,001528 0,007711 0,107952 0,000577 0,002914 0,040802 0,002082 0,010508 0,147114 Phụ lục 26: Ảnh hưởng pH đến hoạt động glucoamylase pH 2,5 3,5 4,5 5,5 6,5 7,5 Asp.oryzae ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ 0,035 70,000 1088,889 0,057 114,000 1773,333 0,126 252,000 3920,000 0,155 310,000 4822,222 0,164 328,000 5102,222 0,159 318,000 4946,667 0,156 312,000 4853,333 0,152 304,000 4728,889 0,137 274,000 4262,222 0,074 148,000 2302,222 0,017 34,000 528,889 0,002 4,000 62,222 0,000 0,000 0,000 Số lần 0,029 58,000 902,222 0,053 106,000 1648,889 0,127 254,000 3951,111 0,158 316,000 4915,556 0,167 334,000 5195,556 0,153 306,000 4760,000 0,152 304,000 4728,889 0,148 296,000 4604,444 0,134 268,000 4168,889 0,072 144,000 2240,000 0,019 38,000 591,111 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,030 60,000 933,333 0,058 116,000 1804,444 0,127 254,000 3951,111 0,163 326,000 5071,111 0,158 316,000 4915,556 0,159 318,000 4946,667 0,150 300,000 4666,667 0,149 298,000 4635,556 0,135 270,000 4200,000 0,069 138,000 2146,667 0,012 24,000 373,333 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Trung bình 0,031 62,667 974,815 0,056 112,000 1742,222 0,127 253,333 3940,741 0,159 317,333 4936,296 0,163 326,000 5071,111 0,157 314,000 4884,444 0,153 305,333 4749,630 0,150 299,333 4656,296 0,135 270,667 4210,370 0,072 143,333 2229,630 0,016 32,000 497,778 0,001 1,333 20,741 0,000 0,000 0,000 Phương sai 1,03E-05 41,33333 10001,65 7E-06 28 6775,309 3,33E-07 1,333333 322,6337 1,63E-05 65,33333 15809,05 0,000021 84 20325,93 0,000012 48 11614,81 9,33E-06 37,33333 9033,745 4,33E-06 17,33333 4194,239 2,33E-06 9,333333 2258,436 6,33E-06 25,33333 6130,041 0,000013 52 12582,72 1,33E-06 5,333333 1290,535 0 Sai số 0,003 6,429 100,008 0,003 5,292 82,312 0,001 1,155 17,962 0,004 8,083 125,734 0,005 9,165 142,569 0,003 6,928 107,772 0,003 6,110 95,046 0,002 4,163 64,763 0,002 3,055 47,523 0,003 5,033 78,295 0,004 7,211 112,173 0,001 2,309 35,924 0,000 0,000 0,000 Phụ lục 26 (tt) pH 2,5 3,5 4,5 5,5 6,5 7,5 Asp protuberus ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ ΔOD Glucose Hoạt độ 0,017 34,000 528,889 0,042 84,000 1306,667 0,072 144,000 2240,000 0,086 172,000 2675,556 0,092 184,000 2862,222 0,090 180,000 2800,000 0,085 170,000 2644,444 0,079 158,000 2457,778 0,043 86,000 1337,778 0,010 20,000 311,111 0,003 6,000 93,333 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Số lần 0,018 36,000 560,000 0,041 82,000 1275,556 0,074 148,000 2302,222 0,083 166,000 2582,222 0,092 184,000 2862,222 0,087 174,000 2706,667 0,086 172,000 2675,556 0,082 164,000 2551,111 0,045 90,000 1400,000 0,009 18,000 280,000 0,005 10,000 155,556 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,020 40,000 622,222 0,045 90,000 1400,000 0,070 140,000 2177,778 0,087 174,000 2706,667 0,091 182,000 2831,111 0,090 180,000 2800,000 0,088 176,000 2737,778 0,078 156,000 2426,667 0,040 80,000 1244,444 0,012 24,000 373,333 0,002 4,000 62,222 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Trung bình 0,018 36,667 570,370 0,043 85,333 1327,407 0,072 144,000 2240,000 0,085 170,667 2654,815 0,092 183,333 2851,852 0,089 178,000 2768,889 0,086 172,667 2685,926 0,080 159,333 2478,519 0,043 85,333 1327,407 0,010 20,667 321,481 0,003 6,667 103,704 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Phương sai 2,33E-06 9,333333 2258,436 4,33E-06 17,33333 4194,239 4E-06 16 3871,605 4,33E-06 17,33333 4194,239 3,33E-07 1,333333 322,6337 3E-06 12 2903,704 2,33E-06 9,333333 2258,436 4,33E-06 17,33333 4194,239 6,33E-06 25,33333 6130,041 2,33E-06 9,333333 2258,436 2,33E-06 9,333333 2258,436 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Sai số 0,002 3,055 47,523 0,002 4,163 64,763 0,002 4,000 62,222 0,002 4,163 64,763 0,001 1,155 17,962 0,002 3,464 53,886 0,002 3,055 47,523 0,002 4,163 64,763 0,003 5,033 78,295 0,002 3,055 47,523 0,002 3,055 47,523 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 Phụ lục 27: So sánh hoạt độ amylase thu với chế phẩm amylase lưu hành thị trường, Khả dịch hóa Enzym Asp,oryzae Asp,protuberus Chế phẩm amylase (VSHNĐ) Chỉ số ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ ΔOD Tinh bột Hoạt độ 0,340 1,716 720,848 0,320 1,615 678,445 0,192 0,969 4.070,671 Số lần 0,410 0,420 2,070 2,120 869,258 890,459 0,324 0,327 1,636 1,651 686,926 693,286 0,212 0,205 1,070 1,035 4.494,700 4.346,290 Khả đường hóa Trung bình 0,390 1,969 826,855 0,324 1,634 686,219 0,203 1,025 4.303,887 Phương sai Sai số 0,002 0,048 8.540,499 0,000 0,000 55,438 0,000 0,003 46.298,493 0,044 0,220 92,415 0,004 0,018 7,446 0,010 0,051 215,171 Số lần Trung Phương sai Sai số bình ΔOD 0,016 0,017 0,015 0,016 0,000 0,001 Asp,oryzae 32,000 34,000 30,000 32,000 4,000 2,000 Glucose Hoạt độ 7.466,667 7.933,333 7.000,000 7.466,667 217.777,778 466,667 ΔOD 0,010 0,017 0,014 0,014 0,000 0,004 Asp,protuberus Glucose 20,000 34,000 28,000 27,333 49,333 7,024 Hoạt độ 4.666,667 7.933,333 6.533,333 6.377,778 2.685.925,926 1.638,879 Chế phẩm ΔOD 0,028 0,026 0,030 0,028 0,000 0,002 amylase 56,000 52,000 60,000 56,000 16,000 4,000 Glucose (VSHNĐ) Hoạt độ 261.333,333 242.666,667 280.000,000 261.333,333 348.444.444,444 18.666,667 Đơn vị tính áp dụng cho phụ lục đến phụ lục 27: Tinh bột mg/ml; Họat độ tinh bột: UI/g/phút; Glucose: µg/ml; Họat độ glucose: UI/g/phút, Enzym Chỉ số ... khảo sát khả sinh amylase số chủng NS từ RNM Cần Giờ Tp. HCM” Mục đích đề tài Tuyển chọn chủng NS sinh amylase cao từ RNM Cần Giờ Nhiệm vụ đề tài - Phân lập chủng NS thu nhận từ RNM Cần Giờ - Tuyển. .. Tuyển chọn số chủng NS có khả sinh amylase cao - Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa phân loại đến lồi NS tuyển chọn - Khảo sát điều kiện ảnh hưởng đến khả sinh trưởng, tổng hợp amylase. .. cứu vào MT xốp thích hợp - Xác định ảnh hưởng nhiệt độ khả sinh amylase chủng NS nhiệt độ nuôi cấy từ 25, 30, 35, 40, 45 v 50oC - Khảo sát khả sinh amylase đo OD d Ảnh hưởng độ mặn MT đến khả sinh