Giáo trình Công nghệ sinh học thực vật: Phần 2 trình bày về nhân giống vô tính trong vườn ươm. Nội dung phần này trình bày yếu tố môi trường của nhân giống, kỹ thuật nhân giống một số cây phổ biến. Đây là tài liệu dành cho những ai quan tâm đến công nghệ sinh học thực vật.
Công nghệ Sinh học thực vật - 54 - PHẦN II NHÂN GIỐNG VÔ TÍNH TRONG VƯỜM ƯƠM CHƯƠNG I YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG CỦA NHÂN GIỐNG Trong mục đề cập đến yếu tố môi trường ảnh hưởng đến việc nhân giống, bao gồm yếu tố vi khí hậu môi trường nhân giống, khay, chậu trồng quản lý yếu tố thổ nhưỡng nhân giống sản xuất giống I CÁC YẾU TỐ CƠ BẢN VỀ VI KHÍ HẬU CỦA MÔI TRƯỜNG NHÂN GIỐNG Trong việc nhân giống chăm sóc cần phải đặc biệt quan tâm đến phương tiện thao tác nhằm tối ưu hóa phản ứng với yếu tố vi khí hậu thổ nhưỡng vốn tác động lên sinh trưởng phát triển cây, bao gồm ánh sáng, nước, nhiệt độ, không khí dinh dưỡng khoáng Thêm vào đòi hỏi bảo vệ chống lại tác động sâu bệnh độ mặn môi trường dinh dưỡng Những điều trình bày mục bao gồm cấu trúc, thao tác thiết bị dùng để nhân giống có tác dụng tối ưu hóa sinh trưởng phát triển 1.nh sáng nh sáng có tác dụng quan trọng việc giâm cành, nẩynầm sinh trưởng hạt, rễ mẫu cấy trình nhân giống ống nghiệm nh sáng điều khiển xạ, độ dài chiếu sáng (photoperiod) chất lượng sáng (chiều dài bước sóng) Độ dài chiếu sáng (photoperiod) Dựa đặc điểm tác động photoperiod lên đặc điểm sinh trưởng quan sinh sản, thực vật bậc cao chia thàng ba nhóm: ngày dài, ngày ngắn trung tính Cây ngày dài vốn hoa chủ yếu vào mùa hè hoa photoperiod tới hạn ánh sáng dài hơn; Cây ngày ngắn, Chrysanthemum, hoa khi photoperiod tới hạn ánh sáng không vượt qúa mức cần thiết; Cây trung tính, ví dụ hoa hồng, không chịu ảnh hưởng photoperiod Phát minh Garner Allard phản ứng với photoperiod cho thấy giai đoạn tối giai đoạn chiếu sáng có vai trò định sinh trưởng quan sinh sản Photoperiod thông thường kéo dài điều kiện ngày ngắn cuối mùa thu đầu mùa đông chiếu sáng bổ sung Ngược lại, photoperiod rút ngắn điều kiện ngày dài cuối mùa xuân mùa hè cách dùng vải plastic màu đen để che bớt ánh sáng GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 55 - Chất lượng ánh sáng Chất lượng ánh sáng mắt người lónh hội theo màu sắc, tức liên quan với chiều dài bườc sóng tia sáng Tia sáng đỏ có tác dụng kích thích hạt xà lách nẩy mầm, tia hồng ngoại lại ức chế trình Ngược lại, tia hồng ngoại lại có tác dụng kích thích ngày dài tạo củ, đặc biệt tỏi nh sáng màu lam kích thính cà chua in vitro tạo chồi Dùng vật liệu che phủ vườn ươm với phổ ánh sáng khác biện pháp dùng để kiểm tra sinh trưởng phát triển tốt dùng chất điều hoà sinh trưởng Biện pháp sử dụng rộng rãi công tác nhân giống ống nghiêm chăm sóc vườn ươm giai đoạn sau ống nghiệm Nước độ ẩm Điều tiết nước kiểm tra độ ẩm công việc quan trọng hoạt động nhân giống, biện pháp có hiệu việc điều khiển sinh trưởng Biện pháp làm mát thiết bị cho bay nước gián đoạn giúp kiểm tra môi trường nhân giống vườn ươm làm giảm độ nóng cành chiết, đặc biệt trường hợp phối hợp với chiếu sáng bổ sung để tăng cường quang hợp kích thích rễ Những nhân giống ống nghiệm thường nhân môi trường nước mà không cần đến dùng agar-agar Nhiệt độ Nhiệt độ ảnh hưởng đến việc nhân giống thực vật theo nhiều cách Hạt ngủ loài gỗ đánh thức kích thích nẩy mầm xử lý nhiệt độ thấp phối hợp với độ ẩm Nhiệt độ môi trường nhân giống điều chỉnh cho thích hợp cho việc rễ hạt nẩy mầm Trong công việc ghép thiết bị làm ấm sử dụng khu vực ghép để thúc đẩy lành vết ghép Thông thường, kết tốt đạt xử lý nhiệt khu vực tiến hành ghép xử lý toàn vườn ươm nhà ghép Khí trao đổi khí Tốc độ hô hấp cao xảy hạt nẩy mầm trình hình thành rễ bất định phần gốc cành chiết Các trình hiếu khí đòi hỏi cung cấp oxy vắng mặt CO2 nơi nhân giống Sự nẩy mầm hạt bị ngăn cản vỏ hạt cứng hạn chế trao đổi khí Cũng tương tự vậy, trao đổi khí nơi hình thành rễ giảm sút cành chiết bị cản trở môi trường bão hòa nước làm hạn chế thâm nhập không khí Trong đặt vường ươm khô hạn khí khổng bị đóng làm hạn chế trao đổi khí đẫn đến quang hợp bị hạn chế Trong trình nhân giống nhà kín nồng độ CO2 giảm sút xuống mức tối ưu, làm hạn chế quang hợp sinh trưởng Sự tích lũy ethylene (C2H2) gây hại cho trình bảo quản, vận chuyển nhân giống Dinh dưỡng khoáng Để tránh stress sinh trưởng yếu hân giống càn phải cung cấp cho mẹ đủ dinh dưỡng Trong trình nhân giống chất dinh dưỡng chủ yếu sử dụng cho cách dùng phân nước phối hợp với tưới đưa phân vào môi trường nuôi cấy GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 56 - ống nghiệm Cành chiết thông thường bón tưới phân sau rễ hình thành II KHAY, CHẬU TRỒNG CÂY Ngày có nhiều loại khay, chậu dùng để trồng sáng chế nhằm mục đích giảm giá thành sản phẩm Giá trị loại khay, chậu tạo điều kiện để cành cắt rễ thuận lợi sinh trưởng nhanh 1.Khay phẳng đáy Khay phẳng đáy có lỗ thoát nước phía đáy làm kim loại, plastic gỗ Điểm thuận lợi loại khay cho phép di chuyển dễ dàng Trước khay thường đóng gỗ, sau chúng làm kim loại, kim loại thường có tác dụng độc hại cho Ngày phổ biến loại khay làm plastic (polyethylene, polystyrene) với kích thước khác nhau, phổ biến kích thước 28 x 53 cm Nếu cần, khay người ta thường chia làm hàng chục hàng trăm ngăn, ngăn trồng để chúng rễ sinh trưởng cách độc lập Chậu đất nung Chậu đất nung sử dụng từ lâu để trồng hoa cảnh Nhu7ợc điểm chủ loại chậu chứa nhiều lỗ thông nên dễ bị nước Ngoài ra, chúng dễ vỡ đặc biệt đường kính hình tròn chúng yếu tố không tiết kiệm mặt Sau thời gian sử dụng muối độc tích lũy thành lọ dễ gây độc trước sử dụng lại cần phải rửa cho Ngày chậu đất nung sử dụng để trồng loại thương phẩm, trừ số loại đặc biệt Chậu plastic Chậu nhựa hình tròn hình vuông có nhiều ưu điểm: chúng không thông thoáng sử dụng nhiều lần, nhẹ, chiếm chỗ cất giữ xếp vào Một số loại nhựa có tíng dòn, dễ vỡ cẩn thận sử dụng lâu, số khác, làm polyethylene, dai bền Những chậu nhỏ dùng cành chiết rễ trục tiếp, tròng sau ống nghiệm để quen khí hậu dùng phổ biến Chậu plastic khử trùng nước, phần lớn côn trùng gây hại tiêu diệt cách ngâm chậu nườc 70oC vòng phút rửa dung dịch nước tẩy Clorox, Purex v.v Những chất ức chế tác động tia tử ngoại sử dụng để ngăn cản tác hại loại tia ánh sáng mặt trời plastic Chậu sợi Các loại chậu với kích thước khác nhau, tròn vuông, chế tạo từ sợi loại thân gỗ trộn lẫn với phân Ở trạng thái khô chúng bảo quản với thời gian không hạn chế Khi chậu bị thối rữa lý sinh học, GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 57 - chúng chôn vào đất với trồng Các chậu làm than bùn sử dụng thuận tiện trồng thời gian ngắn trước chuyển sang chậu lớn đem trồng đồng Chậu giấy Chậu giấy chậu làm giấy cuộn tròn sử dụng phổ biến việc nhân giống hạt loại cảnh rừng Chúng thuận tiện cho việc giới hoá khâu nhồi đất, gieo hạt tạo điều kiện để rễ phát triển tốt Một đặc điểm thuận lợi chậu giấy dễ bị yếu tố sinh học làm cho thối rữa trồng dễ dàng trồng sang chậu lớn trồng đất mà không sợ làm tổn thương rễ Một số chậu loại xử ly hydroxyde đồng để kích thích sinh trưởng rễ làm chậm tốc độ hư hại chậu Túi polyethylene Túi polyethylene sử dụng rộng rãi để trồng con, đặc biệt châu Âu, c NewZerland chúng rẻ so với chậu plastic sử dụng thuận tiện, số túi thường dễ rách Thông thường tíi màu đen, tốt sử dụng loại túi màu đen bên màu trắng bên Màu trắng bên có tác dụng phản chiếu ánh sáng nhiệt, làm cho môi trường bên chịu ảnh hưởng lượng mặt trời Nhược điệm túi polyethylene dễ làm cho rễ bị tổn thương Khay trồng gỗ Những khay gỗ kích thước lớn thường dùng để nhân giống số lượng lớn thời gian dài Cây trồng khay tồn từ tháng đến năm nhiều năm rễ làm quen với khí hậu trươc tiêu thụ III QUẢN LÝ CÁC YẾU TỐ THỔ NHƯỢNG TRONG NHÂN GIỐNG VÀ SẢN XUẤT CÂY GIỐNG Các vật liệu khác dùng hạt nẩy mầm cho cành cắt rễ Để có kết tốt cần phải tuân thủ quy định sau đây: 1/ Chất trồng phải đủ chắn đủ chặt để giữ cắt hạt chỗ trình rễ nẩy mầm Thể tích khối chất trồng cần phải ổn định ẩm khô; độ co đáng sau chất trồng bị khô la điều cần tránh 2/ Chất trồng cần có độ phân hủy cao (để đạt tỉ lệ 20C/1N) để đề phòng khả khó hấp thụ nitơ thiếu hụt đáng trình sản xuất 3/ Chất trồng cần dễ làm ẩm vừa phải (không ẩm quá) giữ độ ẩm cần thiết để làm giảm nhu cầu tưới nước GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 58 - 4/ Chất trồng phải thông thoáng vừa phải để tránh ứ đọng nước tưới tạo điều kiện để rễ tiếp xúc với oxy 5/ Không chứa hạt cỏ dại, giun nguồn bệnh khác 6/ độ mặn cao 7/ Có thể khử trùng nhiệt theo nguyên tắc Pasteur hóa xử lý hóa chất mà không gây tác hại cho trồng 8/ Có khả trao đổi cation cao để trì khả dinh dưỡng cho 9/ Có chất lượng ổn định nhiều lần trồng cây, kể khả hoa kết 10/ Chất trồng dễ tìm giá chấp nhận Môi trường nhân giống sử dụng nghề làm vườn trồng rừng hỗn hợp càc thành phần hữu vô với thành phần khác có tình chất bổ sung cho Thành phần hữu bao gồm than bùn, vỏ rêu mục mùn cưa, khô, vỏ trấu thường dùng tính dễ bị oxy hóa kết cấu rắn chúng làm giảm độ thông khí môi trường chúng có tỉ lệ C/N cao dẫn đến vấn đề liên quan đến dinh dưỡng Thành phần vơ thô dùng để cải thiện việc tưới tiêu làm cho môi trường thông thoáng Loại thành phần bao gồm cát (tránh dùng cát mịn), sạn, đá bọt, xỉ, đá phiến sét, đá trân châu, nhựa polystyrene, hạt đất sét Không có hổn hợp lý tưởng Một hỗn hợp chất trồng thích hợp phụ thuộc vào loại nhân giống, mùa vụ hệ thống canh tác; giá tính dễ tìm môi trường yếu tố cần quan tâm thành phần sau môi trường nhân giống cần sử dụng hệ thống nhân giống Đất Đất bao gồm vật liệu trạng thái rắn, lỏng khí để đáp ứng nhu cầu sinh trưởng bình thường cho thành phần cần có tỉ lệ thích hợp Bộ phận có trạng thái rắn đất bao gồm hai thành phần vô hữu Thành phần vô bao gồm phần lại đá mẹ sau bị phong hóa Chúng thay đổi từ hạt sạn hạt coloid nhỏ đất sét Kết cấu đất xác định tỉ lể tương đối hạt hạt thô chủ yếu làm nhiệm vụ khung nâng đỡ cho hạt lại, hạt coloid làm nhiệm vụ nơi lưu giữ chất dinh dưỡng cho Thành phần hữu đất bao gồm thể sống chết Thành phần sống bao gồm chủ yếu côn trùng, sâu bọ, nấm, vi khuẩn rễ cây, thành phần chết gồm có xác đ65ng vật thực vật giai đoạn phân giải khác Tàn dư xác ( thường gọi mùn), phần lớn có kích thước coloid nơi giữ nước chất dinh dưỡng cho GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 59 - Phần có trạng thái lỏng đất, tức dung dịch đất, bao gồm nước chứa muối hòa tan với số lượng khác với oxy khí CO2 hòa tan Các nguyên tố khoáng, nước số CO2 vào thực vật từ dung dịch đất Phần có trạng thái khí đất quan trọng sinh trưởng Trong loại đất tưới nước sũng nước nước thay cho không khí, làm cho rễ sinh trưởng yếu thiếu số vi sinh vật hiếu khí lượng oxy cần thiết cho tồn chúng Kết cấu đất khoáng phụ thuộc vào tỉ lệ tương đối cát, (những hạt có đường kính 0,05-2mm), bùn (đường kính 0,05-0,002mm) đất sét (những hạt nhỏ 0,002mm) Tương phản với khái niệm kết cấu, khái niệm cấu trúc đất thể cách bố trí loại hạt cát, bùn đất sét khối đất Những hạt đất cá biệt phối hợp với để tạo thành hạt có kích thước hình dạng khác Cát Cát cấu tạo từ hạt đá nhỏ đường kính 0.05-2,0mm, hình dạng thành phần khoáng chúng tùy thuộc vào kiểu đá Cát thạch anh cấu tạo chủ yếu từ phức hệ silic chủ yếu dùng cho mục đich nhân giống Cát loại môi trường nặng số môi trường dùng để rễ Một m cát khô nặng khoảng 135 Kg Tốt xông khói tiệt trùng nước trước dùng chúng chứa hạt cỏ dại loại vi sinh vật có hại khác Cát không chứa chất dinh dưỡng khoáng tính đệm khả trao đổi ion Nó dùng chủ yếu phối hợp với chất hữu Than bùn Than bùn hình thành từ xác thực vật vốn sống vùng đầm lầy tích lũy nước trạng thái bị phân hủy phần Sự thiếu oxy đầm lầy làm chậm trình phân hủy số xác thực vật vi khuẩn tác dụng chất hóa học Thành phần loại than bùn khác biến đổi phạm vi rộng, phụ thuộc vào môi trường sống khối thực vật trước đó, trạng thái phân hủy, hàm lượng khoáng độ acid Người ta phân biệt nhóm than bùn than bùn rêu, than bùn lách sậy than bùn đất mùn Than bùn rêu có độ phân hủy bắt nguồn từ rêu nước loại rêu khác Màu sắc thay đổi từ nâu vàng đến nâu đậm Loại than bùn có độ giữ ẩm cao (15 lần trọng lượng khô), có độ acid cao (pH từ 3,2 đến 4,5) chứa lượng nhỏ nitơ (chỉ khoảng 1%), chứa hoàn toán không chứa phospho kali Loại than bùn chủ yếu dùng nghề làm vườn để phủ lên luống trồng Than bùn lách sậy hình thành từ xác cỏ, lách, sậy loại sống đầm lầy khác Loại than bùn biến đổi rộng màu sắc, từ màu nâu đến màu đen Nó không dùng với mục đích nhân giống trồng Than bùn đất mùn loại than bùn có độ phân hủy cao hình thành từ xác loài thực vật khác có nguồn gốc không rõ Nó bắt nguồn từ GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 60 - loại than bùn rêu lách sậy Nó có màu nâu đậm đen với khả giữ ẩm thấp có hàm lượng nitơ từ 2,0 đến 3,5% Khi sử dụng hỗn hợp loại than bùn chúng cần đánh cho tơi làm ẩm trước trộn với Trộn liên tục vật liệu hữu thô than bùn rêu, rêu nước vào môi trường nhân giống làm giảm độ ẩm Nước khó thấm vào nhiều hạt than bùn khô chí sau tưới Đây phương pháp tốt để phòng ngừa tình trạng thiếu nước phối hợp với chất làm ẩm có bán thị trường Aqua-Gro vốn có khả làm tăng tính thấm nước khối chất trồng Than bùn sàn phẩm có tính đồng chứa nhiềui loại hạt cỏ dại, côn trùng nguồn bệnh khác, cần khử trùng chúng trước sử dụng Than bùn rêu tương đối đắt nên sử dụng công tác nhân giống Nó thay chất trồng khác vỏ nghiền vụn Tuy nhiên, than bùn thành phần hữu sử dụng vườn ươm Than bùn rêu nước Than bùn rêu nước thương phẩm gọi tắt than bùn rêu xác rêu non nước bắt nguồn từ nhóm thực vật thuộc chi Sphagnum S.papillosum, S capilaceum S palustre Loại than bùn cần thiết cho mục đích nhân giống, giá cao nên có phần hạn chế mức độ sử dụng Đây loại vật liệu tương đối không bị nhiễm mầm bệnh, trọng lượng nhẹ có khả giữ ẩm cao, có khả hấp thu nước 10-20 lần lượng Nó dễ xé nhỏ tay máy trước sử dụng Nó chứa khoáng nên dùng chúng trồng cần phải bón chất dinh dưỡng pH than bùn rêu nước vào khoảng 3,5-4,0 Trong chúng thường có chứa số nấm vi khuẩn gây bệnh cho trồng nên phải thận trọng sử dụng Vermiculite Vermiculite loại khoáng dạng mica có khả nở đáng kể đun nóng Khi nở có trọng lượng nhẹ (90-150 Kg/m3) có phản ứng trung tính với tính đệm tốt không tan nước Nó có khả hấp thu lượng nước đáng kể – từ 40 đến 54 lít m3 Vermiculite có khả trao đổi ion tương đối cao giữ chất dinh dưỡng tương đối lâu để sử dụng dần Nó có chứa manhê kali cần bón lượng bổ sung từ nguồn phân khác Perlite Perlite vật liệu silic màu xám trắng núi lửa phun lên Quặng thô perlite nhiền vụn, sau đốt nóng lò luyện kim đến 760oC Ở nhiệt độ phần nước hạt bốc hơi, làm cho hạt phồng trở nên nhẹ, cân nặng khoảng 80 -100 Kg/m3 Nếu xử lý nhiệt độ cao tạo sản phẩm vô trùng Thông thường, hạt có đường kính 1,6-3,0 mm sử dụng rộng rãi công tác nhân giống Perlite giữ lượng nước nặng gấp ba bốn lần lượng thân, có pH từ 6,0 đến 8,0 tính đệm Khác GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 61 - với vermiculite, khả trao đổi ion không chứa chất dinh dưỡng khoáng Perlite có vài vấn đề với thực vật nhạy cảm với fluoride, fluoride rửa cách tưới mạnh Đây loại vật liệu quý giá việc làm cho chất tròng thông thoáng Perlite sử dụng phối hợp với than bùn môi trường phổ biến để giúp cành chiết chóng rễ Đất sét nung tổ hợp khác Những tổ hợp ổn định tạo loại khoáng chất đất sét, tro đốt tán nhỏ v.v đốt nhiệt độ cao Chúng giá trị dinh dưỡng vật liệu thông thoáng, khó phân huỷ hấp thụ nước tốt Mục đích quan trọng củ loại vật liệu làm thay đổi tính chất vật lý hỗn hợp chất trồng Vỏ xé nhỏ vỏ bào Vỏ xé nhỏ tán thành bột loại gỗ mềm, tùng bách, thông, linh sam loại gỗ cứng sồi, thích dùng làm vật liệu để trộn với thành phần khác, đặc biệt với than bùn để tạo thành chất trồng rẻ tiền Trước dùng làm môi trường nuôi trồng vỏ thông đập thành mảnh vụn, thường trộn với phân compost, chất thành đống tưới nước cần Vỏ tươi chứa chất gây độc cho hợp chất phenol, nhựa, terpene tannin Chế thành phân trộn 10-14 ngày trước sử dụng làm giảm đáng kể hàm lượng hợp chất phenol vỏ cây, cải thiện đáng kể khả giữ ẩm môi trường nhiệt độ đống vỏ trộn cà ng cao lượng côn trùng vi sinh vật gây bệnh sống giảm Vì trọng lượng giá thành loại chất trồng tương đối thấp, nên sử dụng rộng rãi để làm môi trường nhân giống trồng Do khả giữ ẩm tốt nên tần số lần tưới lượng nước tưới giảm đáng kể Nhựa tổng hợp Loại vật liệu sử dụng châu Âu số vùng Bắc Mỹ để thay cát perlite Bông polystyrene có tính giản nở mạnh nên cải thiện chế độ tưới tính thoáng khí Đây vật liệu trung tính, không hấp thụ nước không bị mục nát khó tổ chức thàng dạng môi trường đồng Các vấn đề môi trường việc sản xuất chế phẩm khó khăn việc tiêu thụ tiêu thụ hạn chế việc sử dụng sản xuất Phân compost Ở số nước thuật ngữ phân compost đồng nghóa với khối môi trường dùng để nhân giống trồng cây.; nhiên, định nghóa từ phân compost sản phẩm tạo trình phân hủy sinh học khối chất thải hữu điều kiện có kiểm tra Quá trình phân hủy xảy theo giai đoạn sau đây: 1/ Giai đoạn khởi đầu kéo dài vài ngày, thời gian xảy phân hủy chất dễ phân hủy tan nước; GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 62 - 2/ Giai đoạn thứ hai kéo dài vài tháng, thời gian nhiệt độ nâng cao hợp chất cellulose bị phân hủy; 3/ giai đoạn cuối giai đoạn ổn định phân hủy chậm lại, nhiệt độ hạ xuống vi sinh vật sinh trưởng khối phân, bao gồm vi khuẩn, nấm giun tròn sinh vật lớn sinh vật nhiều chân, bét ve, cánh cứng, sên phát với số lượng đáng kể Phân compost chế tạo phần lớn từ chứa nhiều muối hòa tan ức chế sinh trưởng trồng, độ mặn giảm cách ngâm nước trước dùng Trong tương lai, diện tích canh tác giảm dần áp lực môi trường việc quay vòng phế liệu, việc sử dụng phân compost chế tạo từ chất thải, phân gia cầm gia súc, bùn hữu từ chất thải thành phố v.v đóng vai trò ngày quan trọng công tác nhân giống chăm sóc trồng GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 63 - CHƯƠNG II KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG MỘT SỐ CÂY PHỔ BIẾN I KÍCH THÍCH TẠO RỄ Quá trình sinh trưởng thực vật điều hòa số hóa chất học sử dụng chúng với liều thấp Các nhà làm vườn thường sử dụng chất kích thích sinh trưởng công tác nhân giống mà số hoạt động khác, ví dụ việc kích thích tạo Các chất kích thích sinh trưởng tác dụng phạm vi nồng độ thấp hẹp Thí dụ chất kích thích sinh trưởng kích thích tạo qủa nồng độ, kích thích rễ nồng độ khác; sử dụng nồng độ thứ ba khác với hai nồng độ trước chí ức chế sinh trưởng Vì để thu nhận kết mong muốn việc sử dụng chất kích thích sinh trưởng cần phải tuân thủ tuyệt đối quy định nồng độ Cần lưu ý sử dụng chất kích thích sinh trưởng mang lại hiệu quả.Tác dụng chúng liên quan chủ yếu với tăng cường khả rễ tự nhiên cành giâm Phytohormone có tác dụng thúc đẩy trình làm tăng số rễ hình thành Nếu cành giâm lấy từ khỏe mạnh vào thời gian năm thuận tiện cho việc rễ việc sử dụng phytohormone không cần thiết Chỉ sử dụng chúng đâu chúng phát huy tác dụng kích thích Phần lớn chất kích thích rễ có bán thị trường sản xuất dạng bột pha với bột amiang Amiang tác dụng trình sinh trưởng phát triển dụng không làm hại đến mà có tác dụng “pha loãng” phytohormone Amiang thường dùng để pha trộn với acid βindolilbutyric (IBA), acid β-indolilacetic (IAA) với acid naphtylacetyic (NAA) Nồng độ IBA bột amiang thường vào khoảng 8%; để kích thích cành giâm non rễ nồng độ IBA cần giảm lần Bột phytohormone sử dụng cho nhiều mục đích khác bột pha chế từ NAA Thông thường nồng độ NAA bột amiang dùng để kích thích rễ cành giâm hóa gỗ vào khoảng 0,8%; để kích thích rễ cành giâm non sử dụng nồng độ lần Điều cần đáng lưu ý nhà làm vườn sử dụng bột NAA + amiang đem lại nhiều lợi ích việc kích thích sinh trưởng trồng Thông thường, để ngăn cản sinh trưởng nấm, khuẩn yếu tố gây thối chỗ cắt cành chiết người ta thường bổ sung loại chất diệt nấm sát khuẩn khác khác vào bột phytohormone Các chất kích thích rễ sử dụng dạng dung dịch Trong trường hợp cần hòa tan chế phẩm nước dung môi hữu cơ, ví dụ ethanol Tuy nhiên trường hợp nhân giống cách giâm GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 64 - rễ sử dụng chế phẩm hòa tan Người ta chưa sản xuất loại phytohormone để phục vụ cho trường hợp nhân giống II SỬ DỤNG PHYTOHORMONE KÍCH THÍCH CÀNH CHIẾT RA RỄ Trong trrường hợp sử dụng phytohormone kích thích cành chiết rễ cần ý hai điều sau đây: 1/ Nồng độ phytohormone dùng để kích thích rễ giết chết số rễ sinh trưởng; 2/ Mặc dù vỏ hấp thụ phytohormone phấn lớn phytohormone thấm váo cành chiết qua chồi nách Vì xử lý cành chiết bột phytohormone nên xử lý phần gốc, tránh để phần lại cành dính phytohormone Nhờ tác dụng phytohormone rễ bắt đầu hình thành Nhưng rễ sinh trưởng tiếp xúc với vết tích phytohormone lại chúng chết Điều xảy với thực vật, điều kiện định mát rễ chết nghiêm trọng nên chọn biện pháp thỏa đáng để giữ cho cành chiết sống vấn đề cần thiết Trong trường hợp bột phytohormone khó dính vào cành chiết trước xử lý nên nhúng cành chiết vào nước Việc làm có ý nghóa cành chiết xanh Dung dịch phytohormone nước pha chế cách hòa lượng cần thiết phytohormone thể tích nước định Sau ngâm cành chiết từ 12 đến 24 vào dung dịch Vì nồng độ phytohormone nước thấp bột vỏ hấp thụ lượng phytohormone hạn chế nên độ sâu cành ngâm dung dịch ý nghóa quan trọng Nếu sử dụng dung dịch phytohormone cồn cần ngâm cành thời gian hạn chế, sau lấy cho dung dịch chảy hết, cồn bay hơi, cành chiết lại chế phẩm phytohormone Chủ động làm cho cành chiết bị thương Vì biện pháp kích thích rễ cách xử lý phytohormone không đạt kết mong muốn tất loại cành chiết nên phải sử dụng biện pháp khác để kích thích cành chiết rễ, đặc biệt biện pháp kích thích hình thành phytohormone tự nhiên cành chiết Trong cành số loài thực vật lớp vỏ lớp gỗ có lớp mô ngăn cản hình thành rễ Nếu làm tổn thương lớp rễ bắt đầu hình thành Với mục đích dùng dao sắc cắt đoạn vỏ dài 2–3cm rạch số đường dài 3–4cm sâu vào lớp gỗ Phương pháp đặc biệt có hiệu việc nhân giống đỗ quyên Rhododendron số loài cảnh có giá trị khác Tuy nhiên cần phải thận trọng sử dụng phương pháp vết thương dễ bị nhiễm trùng thối rữa Phương pháp làm bị thương cành chiết thường sử dụng giâm cành hóa gỗ Đối với cành xanh non thương không cần GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 65 - thiết sử dụng Hơn nửa biện pháp đòi hỏi người giâm cành phải có nhiều kinh nghiệm đảm bảo tỉ lệ thành công cao III NHÂN GIỐNG CÂY TRỒNG TỪ RỄ Trong việc nhân giống trồng từ rễ điều quan trọng phải biết cách tạo rễ cho đoạn rễ chiết vào thời gian khác năm Tính thời vụ khả rễ đoạn rễ chiết phát từ năm 50 kỷ 20 Trong nhiều trường hợp cố gắng nhân giống từ đoạn rễ chiết thực không thời vụ bị thất bại Có thể tính biến động phụ thuộc thời vụ khả nhân giống từ đoạn rễ chiết nguyên nhân kết không ổn định hoạt động nhân giống nhiều nhà làm vườn từ rễ Vì vậy, việc chọn thời điểm thích hợp cho công việc quan trọng cho trường hộp cụ thể để đạt kết mong muốn Nhiều nhà làm vườn cho thời gian thích hợp cho công việc giâm cành từ rễ thời kỳ sinh trưởng Tuy nhiên ý tưởng lúc Đôi kết tốt lại thu vào đầu cuối thời kỳ sinh trưởng Cũng có số loại nhân giống từ rễ quanh năm Chuẩn bị mẹ Trước cắt đoạn rễ để chiết cần phải chuẩn bị mẹ để thu rễ phát triển mạnh có khả tạo nhiều chồi non Khả tạo chồi từ rễ đặc trưng cho nhiều loài thực vật Nhiệm vụ nhà làm vườn tìm biện pháp đẩy mạnh khả Qui trình nhân giống từ rễ bao gồm bước sau đây: 1/ Trước bắt đầu mùa sinh trưởng đào mẹ lên cắt bỏ hết rễ sinh trưởng Dùng dao cắt bỏ rễ lớn gần cổ rễ Sau trồng lại cắt bỏ rễ (1,2,3) 2/ Do cân đối rễ phận thân cành mặt đất nên dẫn đến tăng cường hình thành rễ để giúp khôi phục cân Bộ rễ sinh khỏe có nhiều khả tạo chồi (4) Những rễ khỏe sinh vào đầu thời kỳ sinh dưỡng Sau tốc độ sinh trưởng chúng giảm dần dừng lại bước vào thời kỳ ngủ nghỉ Có nhiều khả chồi sinh đoạn rể sinh trưởng vào mùa xuân Đây khu vực sử dụng để chiết cành 3/ Để thu nhận vật liệu cần thiết cho việc giâm cành, đào mẹ lên cắt bỏ phần mặt đất Rửa rễ giủ đất để làm lộ rễ non thích hợp cho việc nhân giống Cắt chúng khu vực cổ rễ (cần cắt ngang) Cây mẹ trồng lại chỗ cũ (5,6) Đầu nhỏ đoạn rễ giống cắt thành góc nhọn, cắt bỏ rễ bên rễ lông để việc giâm sau thực dễ dàng (7) Việc cắt bỏ phần rễ mẹ GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 66 - tạo điều kiện kích thích mẹ sinh rễ để lại sử dụng cho công việc nhân giống vào mùa sau Kích thước đoạn rễ chiết Nếu từ rễ thu đoạn rễ giống kích thước đoạn ý nghóa đặc biệt Nếu cần phải làm việc với rễ sinh trưởng nhanh để từ thu nhận nhiều đoạn rễ giống kích thước đoạn rễ giống có ý nghóa Kích thước tối thiểu đoạn rễ giống cho phép loại xác định sở hiệu cao việc nhân giống từ chúng Ở có hai yếu tố cần quan tâm Một đoạn rễ chiết cần chứa đủ chất dinh dưỡng cần cho việc tạo chối sinh trưởng tái sinh; hai lượng chất GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 67 - dinh dưỡng cần đủ để trì trình hoạt động sống trình phân hóa Như vậy, kích thước đoạn rễ giống xác định nhu cầu trì chúng mức độ cao trình hoạt động sống mô khả tái sinh Vì hệ thống rễ bị cắt năm trước sử dụng cho việc nhân giống nên bề dày chiều dài rễ hình thành vòng năm gần bq82ng Chiều dài đoạn rễ giống dùng để trồng vườn đất trống vào khoảng 10cm, chúng cần phải nằm đất gần 16 tuần Để trồng vườn ươm không sưởi ấm thời gian nẩy chồi xảy sau khoảng tuần nên đoạn rễ giống cần vào khoảng 5cm Nếu trồng vười ươm sưởi ấm (với nhiệt độ 18-20oC) thời gian nẩy mầm sau khoảng tuần, chiều dài đoạn rễ giống cần 2-3cm Xác định đầu đầu gốc đoạn rễ giống Khi nhân giống rễ điều đặc biệt quan trọng phải tuân thủ tính phân cực đoạn rễ giống trồng Nhiều người cho rễ giống cần phải trồng cách đặt chúng nằm ngang sau cắt rễ thành đoạn xác định đầu trên, đầu chúng chồi nách Tuy nhiên, nhân giống rễ cành không đặt nằm ngang Đặt rễ thẳng đứng theo chiều trên, làm cho mọc từ chúng sinh trưởng nhanh Nếu đặt rễ nằm ngang sinh trưởng yếu Để không nhầm lẫn đầu đầu cắt đoạn rễ giống cần cắt ngang đầu gần cổ rễ cắt xiên đầu đối diện Kích thích tạo chồi sinh trưởng Công việc quy trình nhân giống từ rễ kích thích tạo chồi để từ hình thành Hiện chưa có chất kích thích sinh trưởng dùng cho mục đích này, chế phẩm dùng để kích thích sinh trưởng chồi nách nhân giống cành hoàn toàn không thích hợp nhân giống từ rễ chúng thể tác dụng ức chế Mặt khác, rễ giống trồng đất thường bị thối nhiễm loại nấm bệnh khác Vì việc sử dụng biện pháp phòng trừ nhiễm bệnh cần thiết Biện pháp tốt bôi loại bột trừ nấm, ví dụ captan Cho đoạn rễ giống vào túi polyethylen thêm bột trừ nấm (khoảng thìa càphê captan cho khoảng 100 đoạn rễ giống dài 2-3cm) Buộc túi lại lắc để bột thuốc bám vào rễ giống Sau mở túi bắt đầu trồng (8,9) Trồng Rễ giống cần trồng vào môi trường giữ chúng ổn định trạng thái đứng thẳng, bảo vệ chúng không bị khô đảm bảo điều kiện thông thoáng cho rễ Khi bắt đầu hình thành chồi cần phải cung cấp đủ chất dinh dưỡng Thích hợp trồng chậu để xuất dễ dàng lấy chúng trồng lại Chọn chậu có kích thước thích hợp, đoạn rễ giống trồng GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 68 - cách 2,5-4 cm Ví dụ chậu với đường kính cm trồng khoảng đoạn rễ Chất trồng tốt đất trộn với than bùn Cho chất trồng vào chậu, nén nhẹ để thấp mặt chậu cm Dùng nhọn chọc lỗ trồng đoạn rễ giống vào đó, đầu đoạn rễ vừa lấp đất Phủ lên mặt đất lớp cát thô để vừa nén lớp chất trồng phía dưới, vừa tạo điều kiện thông thoáng cho số chồi sinh từ đoạn rễ trồng không cần tưới nước Dán nhãn cho chậu đặt chúng vào nơi thích hợp (10,11,12,13) GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 69 - Chăm sóc Để giữ chế độ thoáng khí cho chất trồng, cần tưới nên dùng lượng nước tối thiểu để vừa kích thích sinh trưởng chồi, vừa hạn chế phát sinh nấm bệnh Khi trtồng vào chất trồng đủ ẩm hoàn toàn không cần phải tưới nước Thông thường, chồi phát triển thành non có xanh chưa sinh rễ Rễ xuất sau phần gốc cành non sinh Trước xuất rễ không nên tưới nước để trách gây thối Khi cành non bắt đầu sinh trưởng cần chuyển chậu đến nơi đủ ánh sáng tưới nước phân loãng IV NHÂN GIỐNG TỪ VẢY CỦ Một số nhân giống vảy củ Chúng ta lấy hoa lys làm ví dụ cho phương pháp nhân giống Các nhà sản xuất hoa thường trồng lys từ nguyên củ.m Mặc dù phương pháp đảm bảo nhược điểm hệ số nhân giống thấp Để nâng cao hệ số nhân giống ta tách vảy bên củ để sản xuất Công việc tiến hành sau: 1/ Dùng dao sắc tách vảy phía khỏi củ (1,2) 2/ Cho số vảy tách vào túi polyethylene có chứa sẵn bột thuốc trừ nấm, ví dụ captan lắc cho bột thuốc tẩm vảy 3/ Trộn vảy với khoảng lần thể tích than bùn cát túi khác (3) 4/ Dán nhãn vào túi, thổi cho túi căng phồng buộc chặt đặt nơi thông thoáng (4) 5/ Khi củ xuất phần gốc vảy lấy chúng khỏi túi (5) 6/ Trồng củ hình thành vào chậu đất pha cát Từ chúng mọc thành ((6) 7/ Chờ đến trưởng thành rụng hết đào lên để lấy củ trồng vào vụ sau (7,8) GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật 5 - 70 V NHÂN GIỐNG TỪ LÁ Một số loài thực vật, đặc biệt loài thuộc họ Begoniaceae (Thu hải đường), nhân giống Lá dùng để nhân giống vừa kết thúc hình thành Những chưa đạt kích thước cuối tiếp tục sinh trưởng cần phải tiêu dùng lượng cho việc hoàn thành trình sinh trưởng phát triển nên chấty dinh dưỡng chúng chưa sẵn sàng phục vụ cho việc tạo con, làm cho dễ bị thối làm cho thời gian xuất bị kèo dài Đối với vừa hoàn thành trình sinh trưởng đạt kích thước cuối cùng, chúng xảy nhanh chóng trình tích lũy chất dinh dưỡng, cường độ cao trình trao đổi chất chúng cho phép chúng vượt qua tổn thất có cho dù thời gian tái sinh kéo dài Vào thời điểm đủ non trẻ có đầy đủ khả tạo Nếu để già khả giảm xuống Để nhân giống, cần sử dụng nguyên vẹn để tái sinh Đặc biệt quan trọng không bị sâu hại nhiễm bệnh Do công việc nhân giống từ thực chủ yếu cới trồng nhà nhà kính nên tính thời vụ việc nhân giống ý nghóa quan trọng, thực việc nhân giống quanh năm Thời gian cho việc nhânngiống phụ thuộc vào yếu tố nhiệt độ: vào mùa đông, nhiệt độ môi trường thấp nên tốc độ tái sinh chậm mùa hè Lá tách khỏi mẹ dễ bị khô héo Để hạn chế tốc độ khô héo cần phải tạo điều kiện môi trường thích hợp, ví dụ tiến hành nhân giống phòng kín chậu nhân giống cần bọc hộp kính túi polyethylene Nguyên nhân thất bại phổ biến việc nhânngiống từ cuống phiến bị thối trước hình thành Vì cần phải đặc biệt quan tâm đến việc khử trùng môi trường, mẫu cấy dụng cụ nuôi cấy GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 71 - Phương pháp nhân giống từ đơn giản đáng tin cậy sử dụng nguyên vẹn với cuống Điều hạn chế cách nhân giống từ giống tạo vài Nguyên nhân chủ yếu thất bại bị thối bị bệnh, phải sử dụng pháp phòng trừ sử dụng dụng cụ chất trồng vô trùng Nhân từ thực quanh năm, miễn sử dụng non vừa đến độ trưởng thành Chất trồng pha chế cách trộn lẫn hai phần giưa than bùn cát thô Quy trình nhân giống từ bao gồm bước sau đây: 1/ Cho chất trồng vào khay trồng với kích thước thích hợp, nén chặt vứa phải cho mức chất trồng thấp mặt chậu khoảng cm (1) 2/ Dùng dao sắt dao cạo râu cắt đạt yêu cầu nhân giống (2) 3/ Cắt bớt cuống dài, để lại khoảng cm (3) 4/ Cắm cuống vào khay chất trồng với góc độ định để nằm bề mặt chất trồng Sau trồng xong tưới qua lưới dung dịch loãng chất trừ nấm (4) 5/ Giữ cho chất trồng đủ độ ẩm cần thiết không bị khô héo; đảm bảo để nhiệt độ môi trường vào khoảng 20oC để khay trồng cần đặt vào nơi đủ ánh sáng để tạo điều kiện tổng hợp chất hữu cần thiết cần cho tái sinh Tuy nhiên, cần lưu ý ánh sáng nhiều làm cháy bỏng Do cần phải che bớt ánh sáng loại (5) 6/ Sau 5-6 tuần xuất Lấy khỏi chậu để trồng vào chậu khác (6) GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 72 - VI NHÂN GIỐNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾT CÀNH Chiết cành phương pháp thông dụng nhà làm vườn Mục đích công việc kích thích rễ cành, sau cắt đoạn cành rễ đem trồng Trong việc nhân giống chiết cành trạng thái cành ảnh hưởng đáng kể đến kết công việc Để thu kết tốt nhà làm vườn cần tạo điều kiện để sinh nhiều cành khỏe, sinh trưởng nhanh có sức rễ tốt Để kích thích rễ biện pháp thường dùng bóc bỏ vòng vỏ (1), dùng dây thép cuộn chặt khu vực vỏ (2) cắt chéo đoạn thân lồng vào chỗ cắt doạn que diêm (3) Dùng rêu, dớn mục, chất trồng xốp giàu dinh dưỡng bó chỗ cắt (4,5) Đến khu vực bó rễ dùng kéo cắy đoạn cành chiết đem trồng (6,7) GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 73 - VII NHÂN GIỐNG CÂY ĐỖ QUYÊN Đỗ quyên (Rhododendron) nhóm cảnh có giá trị thẫm mỹ Có thể nhân giống chúng phương pháp dâm cành Thành công trường hợp nhân giống Đỗ quyên hoa lớn đỗ quyên lùn Đỗ quyên hoa lớn Trước bắt đầu nhân giống cần phải chuẩn bị chất trồng để cành chiết không bị khô héo 1/ Trộn hai phần than bùn cát thô vào chậu cho mức chất trồng thầp mức chậu khoảng cm 2/ Cắt bỏ bớt đỉnh cành chiết (1,2) 3/ Phần cành chiết rạch đường vào vỏ cành chiết sâu khoảng cm xử lý đoạn gốc phytohormone (víi dụ IBA 0,8%) để kích thích rễ (3) 4/ Trồng cành chiết vào môi trường đặt chậu trồng vào nơi có hệ thống phun sương nhiệt độ khoảng 21oC (4) 5/ Hàng tuần phun thuốc trừ nấm cành chiết rễ (5) GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 74 - VIII GHÉP CÀNH Ghép cành tiếp ghép hai phận khác loại trồng để sau chùng dính liền tiếp tục sinh trưởng Trong số hai phận dùng để ghép phận gọi cành ghép, tức phận cần nhân giống; phận gọi gốc ghép Gốc ghép thường rễ phần gốc Có nhiều khiểu ghép Chúng ta làm quen với kiểu phổ biến Tùy thuộc vào phận cành ghép sử dụng phân biệt hai kiểu ghép ghép ghép mắt Ghép sử dụng đoạn ngọng giống làm ghép; ghép mắt trường hợp dùng đoạn cành để ghép, tạo điều kiện cho chồi nách sinh trưởng Ghép Phương pháp ghép phổ biến dễ thành công ghép nêm với thao tác sau đây: 1/ Lấy đoạn cành non kể gống trồng cần nhân giống, ví dụ cành hồng giống tốt, cành cam quýt cắt thành dạng nêm (1); 2/ Cây dùng làm gốc ghép cắt bỏ phần chẻ đôi đoạn có chiều dài tương đương với chiềi dài nêm đ4a thực với cành ghép (2); 3/ Cho cành ghép gốc ghép lồng vào dùng polythylene băng lại (3); 4/ Trồng gốc ghép ghép với cành ghép vào chậu chăm sóc cành ghép sinh trưởng (4) GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 75 - Ghép mắt Ghép mắt thực nhiều cách Sau hai phương pháp ghép mắt phổ biến - Ghép dạng lưỡi: 1/ Cắt cành ghép gốc ghép hình vẽ đặt chúng vào (1); 2/ Dùng băng polyethylene băng khu vực ghép lại (2); 3/ Cắt bỏ chồi sinh trưởng gốc ghép, để chồi cành ghép sinh trưởng (3) - Ghép dạng chữ T GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 76 - Kiểu ghép dùng dùng phổ biến việc ghép hoa hồng nhiều loạincây khác Công việc bao gồm: 1/ Trên gốc ghép cắt phần võ hai đường dang chữ T (1); 2/ Cắt mắt cành ghép (2); 3/ Đặt mắt cành ghép vào bên chữ T chủ gốc ghép (3); (4) 4/ Dùng băng polyethylene băng chỗ ghép chờ tử mắt ghép sinh trưởng GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học ... việc giâm sau thực dễ dàng (7) Việc cắt bỏ phần rễ mẹ GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 66 - tạo điều kiện kích thích mẹ sinh rễ để lại sử dụng cho công việc nhân... cần cho việc tạo chối sinh trưởng tái sinh; hai lượng chất GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 67 - dinh dưỡng cần đủ để trì trình hoạt động sống trình phân hóa Như... trọng công tác nhân giống chăm sóc trồng GS.TS Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Công nghệ Sinh học thực vật - 63 - CHƯƠNG II KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG MỘT SỐ CÂY PHỔ BIẾN I KÍCH THÍCH TẠO RỄ Quá trình sinh