Bài viết xuất phát từ lý do trên, chúng tôi đã thực hiện nghiên cứu điều kiện khử trùng mẫu vật nuôi cấy từ cây ngoài tự nhiên và tạo chồi in vitro ở cây Huyết dụ (Cordyline terminalis (L.) Kunth) nhằm xây dựng quy trình nhân giống bằng kỹ thuật nuôi cấy mô ở đối tượng này.
HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ NGHIÊN CỨU TẠO CHỒI IN VITRO Ở CÂY HUYẾT DỤ (CORDYLINE TERMINALIS (L.) KUNTH) Lê Văn Tƣờng Huân, Nguyễn Thị Diễm Mai Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế Ngày nay, với phát triển kinh tế - xã hội nhu cầu sử dụng cảnh người tăng nhanh Cây Huyết dụ (Cordyline terminalis (L.) Kunth) thuộc họ Agavaceae loại cảnh ưa chuộng Cây nhỏ, cao khoảng m, phân nhánh Lá mọc tập trung ngọn, hình lưỡi kiếm, dài 2050 cm, rộng 5-10 cm, gốc thắt lại, đầu thn nhọn, mép ngun lượn sóng, màu đỏ tía, cuống dài, có bẹ rãnh mặt Cụm hoa mọc thân, mọc thành chùm chùy phân nhánh, dài 30-40 cm, nhánh mang nhiều hoa màu trắng, mặt ngồi màu tía (Đỗ Huy Bích cs., 2006) Huyết dụ có màu sắc sặc sỡ thường trồng bồn cây, tạo thảm hay trồng dọc lối trang trí cho khn viên nhà ở, trường học, cơng ty, cơng viên, đường phố… Cây Huyết dụ chịu bóng bán phần nên trồng chậu để trang trí nội thất nơi cơng sở, hội trường, khách sạn, nhà Đây loài cảnh có giá trị Cây Huyết dụ cịn thuốc, rễ sử dụng Lá, rễ thu hái quanh năm dùng tươi hay phơi khơ Lá có vị nhạt, tính mát, bình, vào kinh can thận có tác dụng làm mát, cầm máu, tan ứ máu, giảm đau Lá dùng làm thuốc chữa rong huyết, băng huyết, xích bạch đới, thổ huyết, lỵ máu, đái máu, trĩ, ho máu, sốt xuất huyết Rễ chữa vết thương, phong thấp đau nhức (Đỗ Huy Bích cs., 2006) Huyết dụ sử dụng để hạ sốt giảm đau đầu (Wiart, 2012) Do có giá trị kinh tế, cảnh thuốc nên nhu cầu sử dụng Huyết dụ ngày nhiều Tuy vậy, phương pháp nhân giống chủ yếu giâm cành, với phương pháp thời gian nhân giống chậm, hệ số nhân giống thấp giống dễ bị nhiễm bệnh Việc sử dụng kỹ thuật nuôi cấy mô in vitro phương pháp hữu hiệu để giải khó khăn Đây phương pháp tiên tiến ứng dụng thành công giới Việt Nam đem lại hiệu kinh tế cao cho hàng loạt trồng Xuất phát từ lý trên, thực nghiên cứu điều kiện khử trùng mẫu vật nuôi cấy từ tự nhiên tạo chồi in vitro Huyết dụ (Cordyline terminalis (L.) Kunth) nhằm xây dựng quy trình nhân giống kỹ thuật ni cấy mơ đối tượng I ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu Huyết dụ (Cordyline terminalis (L.) Kunth) thuộc chi Cordyline, họ Agavaceae Phƣơng pháp nghiên cứu 2.1 Môi trường điều kiện nuôi cấy Môi trường dùng để nuôi cấy môi trường MS (Murashige Skoog, 1962) có bổ sung chất điều hịa sinh trưởng khác tùy theo mục đích thí nghiệm Nguồn carbon sucrose Mơi trường làm đặc agar, pH môi trường điều chỉnh đến 5,8 1193 TIỂU BAN TÀI NGUYÊN SINH VẬT Mẫu thí nghiệm cấy bình thủy tinh chứa mơi trường, đặt phịng ni cấy có nhiệt độ 25±2 °C, cường độ ánh sáng 2000-3000 lux, thời gian chiếu sáng 14 giờ/ngày 2.2 Nghiên cứu hiệu điều kiện khử trùng loại mẫu từ tự nhiên Các loại mẫu đỉnh chồi đoạn thân mang chồi nách lấy từ tự nhiên cắt bỏ lá, cho vào cốc, rửa vịi nước máy sau rửa với nước xà phịng lỗng Rửa xà phịng vịi nước máy tráng lại nước cất vơ trùng Khử trùng mẫu cách lắc mẫu cồn 70% vịng phút, sau dung dịch HgCl2 0,12% từ 25-30 phút Sau lắc với dung dịch khử trùng, mẫu rửa lại nước cất vơ trùng nhiều lần Mẫu sau cấy lên môi trường, theo dõi thu số liệu tỷ lệ mẫu nhiễm, tỷ lệ mẫu sống tỷ lệ mẫu chết 2.3 Nghiên cứu tạo chồi in vitro mẫu từ tự nhiên Đỉnh chồi đoạn thân mang chồi nách khoảng cm từ tự nhiên sau khử trùng cấy lên môi trường MS chứa 3% sucrose, 0,8% agar bổ sung Kinetin (KIN) với nồng độ 1-7 mg/L kết hợp với 0,1 mg/L α- Naphthalene acetic acid (NAA) để thăm dò khả tạo chồi điều kiện in vitro Số liệu thu sau tháng nghiên cứu 2.4 Xử lý thống kê Các thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên Mỗi thí nghiệm lặp lại lần để tính trung bình mẫu Số liệu xử lý phương pháp thống kê sinh học, phân tích Duncan‟s test (p