Các loài nấm thuộc chi Pycnoporus đã được nhiều nghiên cứu chứng minh có thể ức chế được nhiều loại vi khuẩn gây bệnh khác nhau, tuy nhiên đến nay chưa có nghiên cứu đi sâu khai thác các hợp chất kháng khuẩn của các loài nấm này tại Việt Nam. Nghiên cứu này đã chọn lọc và phân lập một chủng nấm thuộc chi Pycnoporus tại Việt Nam.
Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 11 46 Phân lập, định danh khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao chiết sinh khối nấm thuộc chi Pycnoporus Trương Nguyễn Thuận Thiên, Ngô Nguyên Vũ* Viện Kĩ thuật Công nghệ cao NTT, Đại học Nguyễn Tất Thành *nnvu@ntt.edu.vn Tóm tắt Các lồi nấm thuộc chi Pycnoporus nhiều nghiên cứu chứng minh ức chế nhiều loại vi khuẩn gây bệnh khác nhau, nhiên đến chưa có nghiên cứu sâu khai thác hợp chất kháng khuẩn loài nấm tại Việt Nam Nghiên cứu chọn lọc phân lập chủng nấm thuộc chi Pycnoporus tại Việt Nam Kết định danh cho thấy chủng nấm thu thập thuộc loài Pycnoporus sanguineus, đồng thời chủng nấm nuôi cấy chất rắn bao gồm mùn cưa thóc điều kiện phịng thí nghiệm để thu phần sinh khối Sinh khối nấm chiết xuất methanol để lấy cao tổng kiểm tra hoạt tính kháng khuẩn phương pháp dĩa giấy kháng sinh, kết cho thấy 150 mg cao chiết tiêu diệt chủng vi khuẩn gây bệnh bao gồm Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli Vibrio parahaemolyticus Kết nghiên cứu tạo tiền đề để sâu nghiên cứu chế phẩm hoạt tính kháng khuẩn lồi nấm tương lai Nhận 05.10.2020 Được duyệt 15.10.2020 Cơng bố 30.10.2020 Từ khóa hoạt tính kháng khuẩn, Pycnoporus sanguineus, kháng sinh, nấm ® 2020 Journal of Science and Technology - NTTU Mở đầu Các loài nấm hoại gỗ từ ngành Basidiomycota vốn biết đến với khả tổng hợp loại hợp chất có hoạt tính sinh học cao, tiêu biểu hoạt tính chống vi rút, kháng khuẩn, chống oxi hóa chống ung thư Trong Chi Pycnoporus chi nấm thuộc họ Polyporaceae, ngành Ascomycota, thuộc nhóm nấm mục gỗ trắng (white rot fungi) biết đến với khả tổng hợp chất có hoạt tính sinh học đáng lưu ý [1] Các lồi nấm thuộc chi Pycnoporus tìm thấy thân gỗ phần gỗ mục tại khu vực nhiệt đới ẩm nhiều nơi toàn giới, phổ biến loài Pycnoporus sanguineus Pycnoporus cinnabarinus [2] Các loài nấm này, bao gồm loài Pycnoporus cinnabarinus, Pycnoporus coccineus Pycnoporus sanguineus, tự tổng hợp sắc tố màu đỏ tươi, đỏ thẫm đỏ cam trình sinh trưởng, màu đỏ cam coi đặc điểm đặc trưng loài thuộc chi [1] Nhiều nghiên cứu chứng minh sắc tố đỏ lồi nấm Pycnoporus có thành phần bao gồm hợp chất cinnabarin, cinnabarinic acid tramesanguin, hợp chất thể hoạt tính chống oxi hóa, khả tẩy gốc tự do, kháng nấm, kháng ung thư, tính điều hịa miễn dịch, kháng Đại học Nguyễn Tất Thành khuẩn, hoạt tính chống viêm [1] Hoạt tính kháng khuẩn lồi nấm Pycnoporus nhiều nghiên cứu tiến hành tìm hiểu với khả ức chế nhiều loại vi khuẩn gây bệnh khác nhau, tiêu biểu vi khuẩn thuộc nhóm cầu khuẩn gram dương liên cầu khuẩn Streptococcus [2] Tuy nhiên chưa có nghiên cứu thật sâu vào khai thác khả sản xuất hợp chất kháng sinh loài nấm này, chưa có đánh giá cụ thể tiềm kháng khuẩn chúng tại Việt Nam Việc đánh giá tiềm kháng khuẩn khả phát triển loài nấm thuộc chi Pycnoporus điều kiện ni cấy nhân tạo tạo tiền đề phát triển loại kháng sinh sản xuất từ loài nấm tương lai Vật liệu phương pháp 2.1 Vật liệu: Các chủng vi khuẩn sử dụng nghiên cứu mua từ sưu tập vi khuẩn American Type Culture Collection ATCC, bao gồm loài vi khuẩn gram dương (Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 29213 Streptococcus pyogenes ATCC 19615) chủng vi khuẩn gram âm (Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 11 Escherichia coli ATCC 25922 Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802) Các loại môi trường Czapez, môi trường thạch Potato dextrose agar (PDA), môi trường Saboraugh, môi trường Tryptic soy agar (TSA), cao nấm men glucose cung cấp Công ty Himedia, Ấn Độ 2.2 Phân lập mẫu nấm Các nấm hình tai màu đỏ tươi đỏ thẫm thu thập thời điểm từ tháng đến tháng (thời điểm có lượng mưa nhiều) từ thân mục tại khu vực Thủ Đức, Bình Dương Đồng Nai Các tai nấm sau thu thập bảo quản điều kiện khơ thống đưa phịng thí nghiệm thuộc Viện Kĩ thuật Cơng nghệ cao, Đại học Nguyễn Tất Thành để tiến hành phân lập, định danh lưu trữ giống Mẫu tai nấm tươi ghi nhận chụp ảnh hình thái, màu sắc kích thước vịng ngày kể từ thời điểm thu thập thân gỗ Hình thái bào tử mẫu nấm quan sát ghi nhận kính hiển vi quang học độ phóng đại 40x Sau xác định hình thái mẫu nấm trùng khớp với mô tả [3], mẫu nấm phân lập dòng theo phương pháp cấy truyền tơ nấm Các tai nấm mang phịng thí nghiệm lau sơ khăn giấy tẩm nước cất cho sạch bớt đất cát bào tử mốc bề mặt Một phần mơ nấm kích thước khoảng x mm cắt trực tiếp từ tai nấm, sau rửa dung dịch ethanol 70% giây, dung dịch canxi hypoclorit 5% giây rửa lại nhiều lần nước cất trước cấy bề mặt đĩa môi trường chọn lọc để phát triển sợi tơ nấm Các đĩa cấy mơ nấm ủ nhiệt độ phịng (250C - 260C) ngày sợi nấm bắt đầu phát triển từ phần mô nấm cấy Các sợi nấm quan sát 24 cấy chuyền nhiều lần qua đĩa môi trường thu thể sợi đồng thuần, khơng cịn lẫn với mốc vi khuẩn Dòng tơ nấm sau đạt độ gửi định danh phương pháp sinh học phân tử giải trình tự tại Cơng ty Macrogen, Hàn Quốc 2.3 Khảo sát nhu cầu dinh dưỡng Để chọn thành phần dinh dưỡng phù hợp với nhu cầu chủng nấm, chủng khảo sát tốc độ sinh trưởng môi trường Czapez, môi trường thạch Potato dextrose agar (PDA), môi trường PDA bổ sung 1% cao nấm men, môi trường Saboraugh, môi trường Tryptic soy agar (TSA), môi trường thạch glucose 2% Chủng nấm cấy lên dĩa thạch tại thời điểm ủ 260C Mỗi 24 tiếng, chiều dài phát triển tơ nấm mặt dĩa thạch đo chiều khác lấy số trung bình, lặp lại ngày suốt ngày liên tục 2.4 Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn cao chiết sinh khối nấm dung môi hữu Nuôi cấy thu thập sinh khối nấm: Cơ chất rắn chuẩn bị để nuôi cấy nấm Pycnoporus sp chuẩn bị 47 cách phối trộn hai loại nguyên liệu thơng dụng để ni nấm thuộc nhóm nấm hoại gỗ thóc mùn cưa Hạt thóc ngâm nước tiếng đồng hồ giữ lại hạt nguyên, loại bỏ hạt lép hạt có dấu hiệu bị mọt cắn Mùn cưa sàng lọc để loại bỏ mảnh lớn rác vụn, sau mang ngâm dung dịch nước pha CaCO 2% Sau 12 tiếng, mùn cưa vắt nước phối trộn với thóc theo tỉ lệ 1:1 Cơ chất sau phối trộn bổ sung nước đến độ ẩm 60% mang hấp khử trùng lần trước cấy mẫu tơ nấm vào Các bịch chất nuôi điều kiện độ ẩm khơng khí 80%, nhiệt độ 250C 30 ngày tơ nấm phủ kín tồn chất Các bịch chất sau đưa vào điều kiện chiếu sáng đèn theo chu kì 12 sáng 12 tối khối sinh khối có sắc tố đỏ hình thành Chiết xuất tạo cao chiết tổng từ sinh khối nấm: Cao chiết tơ nấm sử dụng làm chất kháng khuẩn thí nghiệm chiết xuất từ phần tơ nấm trồng chất rắn sử dụng dung môi methanol Cụ thể, cụm sinh khối nấm sau thu hoạch nghiền chai chứa methanol với hạt thủy tinh sinh khối nghiền nát hoàn tồn Sau đó, dung mơi methanol cho thêm vào hỗn hợp đạt tỉ lệ gram sợi nấm: mL dung mơi Các bình đựng hỗn hợp nghiền nấm dung mơi đậy kín để ngăn không cho dung môi bay giữ máy lắc liên tục Sau 48 giờ, sợi nấm ngâm hỗn hợp ép để tất dịch chiết khỏi sinh khối thay dung môi Qui trình lập lại lần Hỗn hợp ngâm sinh khối nấm sau lọc bỏ cặn gia nhiệt máy cô quay 55 0C để thu cao chiết Phần cao chiết tơ nấm hòa tan lại trong DMSO với nồng độ 50 mg/mL Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn cao chiết nấm: Qui trình kiểm tra hoạt tính kháng khuẩn đĩa giấy kháng sinh thực tương tự qui trình chuẩn EUCAST [4] Các chủng vi khuẩn pha lỗng mơi trường Mueller Hinton (Mueller Hinton Broth MHB) đến nồng độ 108 CFU/mL Dịch khuẩn sau đo OD với nồng độ tương đương 10 CFU/mL cấy trải lên bề mặt đĩa petri có chứa mơi trường MHA agar cho vi khuẩn phết kín bề mặt thạch Đĩa thạch chứa vi khuẩn đặt lên mảnh giấy trịn đường kính mm tẩm 150 mg cao chiết nấm Sau đó, đĩa thạch đặt vào tủ ấm 370C 24 Đối chứng âm DMSO Hoạt tính ức chế khuẩn đánh giá cách đo đường kính vịng ức chế vi sinh vật Thí nghiệm lặp lại lần lấy giá trị đường kính trung bình Kết thảo luận 3.1 Hình thái định danh mẫu nấm Quả thể nấm chi Pycnoporus chọn mang hình thái dẹp, hình dạng tổng quan gần vỏ sị, khơng có cuống nấm, tai nấm mỏng viền dày dần đến tới gốc, Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 11 48 phẳng uốn lượn tùy vị trí phát sinh Từ gốc mọc phát sinh nhiều tai nấm chen Mặt tai nấm xù xì có phần lồi lõm Hình Đặc điểm thể mẫu nấm Pycnoporus sp thu thập A: Mặt cắt ngang thể B: Hình thái tơ nấm kính hiển vi quang học độ phóng đại 100x C: Hình thái bào tử D: Mặt thể E: Vân nấm F: Kích thước tai nấm G.Mặt thụ tầng H: Mặt cắt ngang thể cho thấy ống bào tử phần thụ tầng I: Phản ứng hóa đen với 5% KOH Tai nấm có độ ẩm cao, tiếp xúc nhẹ tay thu lượng nhỏ dịch chứa sắc tố đỏ cam tiết từ tai nấm Màu đỏ cam, thiên màu đỏ Tai nấm có vân màu đỏ, cam màu trắng xen kẽ theo hình vịng cung dọc theo bề ngang Kích thước tai nấm khoảng x cm, dày – mm tai nhỏ x cm, dày - mm tai lớn Phần thụ tầng có màu đỏ cam, sậm mặt tai nấm, chứa lỗ bào tử với kích thước 0,5 - mm, phân bố từ phần tới rìa tai nấm Mặt cắt ngang nấm cho thấy tầng thụ tầng chứa lỗ bào tử hình trụ dài khoảng - mm, chiếm khoảng 50% độ dày thể Khi thử nghiệm sinh hóa KOH 5%, giọt dung dịch KOH làm nấm hóa đen sau giây tiếp xúc (Hình 1) Phản ứng PCR khuếch đại vùng ITS mẫu nấm cặp mồi ITS1 ITS4 tạo sản phẩm có kích thước gần 500 bps Sản phẩm PCR gửi đến Công ty Macrogen (Hàn Quốc) để tinh chế giải trình tự Trình tự giải tại vùng ITS chủng nấm phân lập sau: 3’_GCTTCGAGTCTGAGGGGTTGTAGCTGGCCTTCC GGGGCATGTGCACACCCTGCTCATCCACTCTACAC CTGTGCACTTACTGTAGGTTTGGCGTGGGCTTCGG GGCCTCCGGGCTCTGAGGCATTCTGCCGGCCTATG TATCACTACAAACACATAAAGTAACAGAATGTATT CGCGTCTAACGCATCTAAATACAACTTTCAGCAAC GGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAG CGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCA GTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACCTTGCGCTC CTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTC ATGGAATTCTCAACCCACACGTCCTTGTGATGTTG CGGGCTTGGATTTGGAGGCTTGCTGGCCCTCTGCG GTCGGCTCCTCTTGAATGCATTAGCTTGATTCCGTG CGGATCGGCTCTCAGTGTGATAATTGTCTACGCTG TGACCGTGAAGCGTTTGGCGAGCTTCTAACCGTCC TGTATGGGACAACTTCTTGACATCTGACCTCAAAT CAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA AAAAACGGGGATAAGAAA_5’ Kết BLAST với ngân hàng trình tự NCBI (Trung tâm Thơng tin Công nghệ Sinh học Quốc gia, Thư viện Y khoa Quốc gia Mĩ) cho kết trùng khớp tới 99,9% với loài Trametes sanguinea, hay ngày Pycnoporus sanguineus (L.) Murrill (1904) 3.2 Tốc độ sinh trưởng tơ nấm môi trường thạch dinh dưỡng Tốc độ tăng trưởng loài nấm Pycnoporus sanguineus khảo sát vịng ngày trình bày Bảng Hình đây: Bảng Tốc độ phát triển tơ nấm Pycnoporus sanguineus loại thạch môi trường (đơn vị: mm) Ngày Loại môi trường Czapez Medium 1,5 4,5 10,5 15 21,5 28,8 35,6 Potato dextrose medium Potato dextrose bổ sung cao nấm men Saboraugh medium 1,2 5,5 9,8 15,4 21 29 37 0,9 5,5 11,2 16 23,5 30 39 8,5 12 16 22 28 Tryptic soy medium 0,2 1,9 3,5 12 13,5 Malt extract agar 0,9 3,5 9,3 14,8 20,5 27,2 36 Glucose 2% 8,5 13 18,5 24,1 31,5 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 11 49 45 Czapez Medium 40 Potato dextrose medium 35 Potato dextrose bổ sung cao nấm men Saboraugh medium 30 25 20 Tryptic soy medium 15 10 Malt extract agar Glucose 2% -5 Thời gian (Ngày) Hình So sánh tốc độ phát triển chủng Pycnoporus sanguineus loại thạch môi trường khác Kết khảo sát tốc độ tăng trưởng loài nấm Pycnoporus sanguineus loại môi trường dinh dưỡng cho thấy loài nấm phát triển nhanh môi trường thạch khoai tây PDA PDA bổ sung cao nấm men, Malt extract agar, Crapez, Saborough môi trường glucose 2% Môi trường Tryptic soy agar (TSA) cho kết mọc tơ nấm chậm loại Tuy nhiên, tốc độ mọc lan tơ nấm nhanh chưa hẳn chứng minh loại môi trường tốt cho q trình sinh trưởng phát triển bình thường lồi nấm triển bình thường Từ nhận định lồi nấm chuộng thành phần dinh dưỡng với nguồn carbon tinh bột cao nấm men sử dụng nguồn nitrogen bổ sung 3.3 Hoạt tính kháng khuẩn cao chiết sinh khối nấm dung mơi hữu cơ: Hình Hình thái tơ nấm Pycnoporus sanguineus mơi trường dinh dưỡng khác sau ngày phát triển A: Môi trường Malt extract agar B: Môi trường PDA bổ sung cao nấm men C: Môi trường Czapez D: Môi trường Saboraugh E: Môi trường glucose 2% F: Môi trường PDA không cao nấm men Kết đánh giá hình thái sắc tố tơ nấm sau ngày phát triển dĩa thạch (Hình 3) cho thấy bên cạnh tốc độ mọc lan tơ nấm, thành phần dinh dưỡng mơi trường có ảnh hưởng định đến khả sinh sắc tố độ dày mật độ tơ nấm phát triển Môi trường PDA bổ sung cao nấm men (hình 3B) cho Pycnoporus sanguineus khả phát triển tốt với mật độ tơ nấm dày hình thành sắc tố rõ ràng loại môi trường thử nghiệm Tuy tốc độ phát triển chủng nấm môi trường thạch glucose 2% (Hình 3E) tương đương tốc độ phát triển PDA, lớp tơ nấm mỏng sau ngày, gần suốt khơng có sắc tố sinh Có thể quan sát thấy glucose đơn khơng đủ cho lồi nấm phát Hình Bịch chất ni cấy Pycnoporus sanguineus A:Bịch chất sau cấy tơ nấm Pycnoporus sanguineus B: Khối sinh khối nấm mang sắc tố đỏ hình thành sau tháng phát triển chất Để thu sinh khối có hoạt tính kháng khuẩn, mẫu tơ nấm cấy vào bịch chất phối trộn 50% thóc 50% mùn cưa, độ ẩm 60% (Hình 4A) Các bịch chất ủ tối 30 ngày tơ nấm phủ kín chất, sau mở miệng bịch đưa sáng 30 ngày để thúc đẩy phát triển sinh khối tiền thể hình thành sắc tố (Hình 4B) Sau tháng, phần sinh khối nấm tách khỏi chất chiết xuất dung mơi methanol Phần cao chiết hịa vào DMSO sử dụng cho thí nghiệm kiểm tra hoạt tính kháng khuẩn Kết vịng kháng khuẩn từ cao chiết sinh khối nấm trình bày Bảng Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 11 50 Bảng Kết thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn cao chiết nấm Pycnoporus sanguineus phương pháp đĩa giấy kháng sinh chủng vi khuẩn Chủng vi khuẩn Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Staphylococcus aureus ATCC 29213 Escherichia coli ATCC 25922 Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Gram Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) + 16,8 ± 0,74 + 17,3 ± 2,51 + 23,5 ± 0,5 - 10 ± 0,00 - 14 ± 1,12 - 13,3 ± 0,57 Bước đầu thử nghiệm phương pháp tẩm đĩa giấy cho thấy 150 mg cao chiết nấm Pycnoporus sanguineus thể hoạt tính kháng khuẩn chống lại lồi khuẩn sử dụng thí nghiệm Đặc biệt, hoạt tính Pycnoporus sanguineus có hiệu diệt khuẩn chống lại chủng vi khuẩn gram dương tốt vi khuẩn gram âm, với Staphylococcus aureus nhạy cảm nhóm gram dương, Escherichia coli có sức chống chịu cao chiết nấm nhóm gram âm Kết thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết tơ nấm Pycnoporus sanguineus cho thấy qui trình ni cấy lồi nấm chất thóc bảo tồn khả sinh hoạt chất kháng khuẩn chúng cho dù chưa đến thời điểm hình thành thể Do kết luận hoạt tính kháng khuẩn loài nấm phụ thuộc nhiều vào khả sản xuất sắc tố chúng, đại diện cho màu đỏ cam đặc trưng thể Kết luận kiến nghị Nghiên cứu thành công việc phân lập, định danh, nuôi cấy khảo sát hoạt tính kháng khuẩn lồi nấm Pycnoporus sanguineus chủng mọc hoang dại tại Việt Nam Pycnoporus sanguineus vốn biết chủng nấm có hoạt tính phổ rộng, với khả ức chế nhiều loại vi khuẩn gây bệnh, đặc biệt loài cầu khuẩn gram dương thuộc chi Streptococcus [6] Loài nấm Pycnoporus sanguineus nghiên cứu có khả sản xuất nhiều hợp chất hoạt tính khác với nhiều ứng dụng tiềm men laccase, hợp chất chống oxi hóa, Cinnabarine có hoạt tính kháng khuẩn chí kháng viêm [6, 7] Qua bước đầu nuôi cấy kiểm tra thành công khả sinh hoạt chất kháng khuẩn sinh khối nấm Pycnoporus sanguineus phòng thí nghiệm, nghiên cứu tạo tiền đề để tiến hành nghiên cứu sâu tiềm sản xuất kháng sinh từ loài nấm tương lai Lời cảm ơn Nghiên cứu tài trợ Quĩ phát triển Khoa học Công nghệ - Đại học Nguyễn Tất Thành, mã số đề tài 2020.01.008/HĐ-KHCN Tài liệu tham khảo Kuang LM, Lin HO, Hsu FL, Lin YL (2010) Anti-inflammatory principles of cultivated Pycnoporus sanguineus Journal Chinese Medical 21, 75–83 V Sharma, AK Jaitly (2017), Optimization of Growth of Two Wild Species of Pycnoporus Collected from Foothill of Uttarakhand International Journal of Agriculture Innovations and ResearchVolume 6, Issue 1, 2319-1473 Téllez-Téllez M, Villegas E3, Rodríguez A, Acosta-Urdapilleta ML, O’Donovan A, Díaz-Godínez G (2016) Mycosphere Essay 11: Fungi of Pycnoporus: Morphological and molecular identification, worldwide distribution and biotechnological potential Mycosphera 7.10.5943 Matuschek E, Brown DF, Kahlmeter G (2014) Development of the EUCAST disk diffusion antimicrobial susceptibility testing method and its implementation in routine microbiology laboratories Clin Microbiol Infect 2014 Apr;20(4):O255-66 Suay I, Arenal F, Asensio FJ, Basilio A, Cabello MA, Díez MT, García JB, del Val AG, Gorrochategui J, Hernández P, Peláez F, Vicente MF 2000 Screening of basidiomycetes for antimicrobial activities Antonie Van Leeuwenhoek 2000 Aug;78(2):129-39 Smânia EF, Smaünia A, Loguercio-Leite C (1997) Optimal parameters for cinnabarin synthesis by Pycnoporus sanguineus Journal of Chemical Technology & Biotechnology 70, 57–59 Kuang LM, Lin HO, Hsu FL, Lin YL (2010) Anti-inflammatory principles of cultivated Pycnoporus sanguineus Journal Chinese Medical 21, 75–83 Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Cơng nghệ Số 11 51 Isolation, identification and investigation of antibacterial activity of biomass crude extract from Pycnoporus fungi Truong Nguyen Thuan Thien, Ngo Nguyen Vu* Nguyen Tat Thanh Institute of High Tech, Nguyen Tat Thanh University * nnvu@ntt.edu.vn Abtract Genus Pycnoporus has been known to have antimicrobial activities against numerous pathogenic bacteria, but so far there have been no in-depth studies to exploit the antibacterial compounds of these fungi in Vietnam This study selected and successfully isolated one fungus sample that belongs to genus Pycnoporus in Vietnam The fungi sample was identified as Pycnoporus sanguineus and was successfully cultured in laboratory in solid substrate of rice bran and sawdust The fungal biomass was extracted with methanol for crude extract and then its antibacterial activity was tested via disc diffusion method The Pycnoporus sanguineus crude extract at 150 mg showed antibacterial activity against strains of bacteria, including Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Vibrio parahaemolyticus This result opens a premise for further in-depth research on the antimicrobial active compounds from fungi in the future Keywords Antibacterial activity, Pycnoporus sanguineus, antibiotic, fungus Đại học Nguyễn Tất Thành ... 12 tối khối sinh khối có sắc tố đỏ hình thành Chi? ??t xuất tạo cao chi? ??t tổng từ sinh khối nấm: Cao chi? ??t tơ nấm sử dụng làm chất kháng khuẩn thí nghiệm chi? ??t xuất từ phần tơ nấm trồng chất rắn... ngâm sinh khối nấm sau lọc bỏ cặn gia nhiệt máy cô quay 55 0C để thu cao chi? ??t Phần cao chi? ??t tơ nấm hòa tan lại trong DMSO với nồng độ 50 mg/mL Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn cao chi? ??t nấm: ... tính kháng khuẩn Kết vịng kháng khuẩn từ cao chi? ??t sinh khối nấm trình bày Bảng Đại học Nguyễn Tất Thành Tạp chí Khoa học & Công nghệ Số 11 50 Bảng Kết thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn cao chi? ??t