Nghiên cứu hóa học và phân lập một vài hợp chất trong phân đoạn kém phân cực của hạt bìm bìm biếc (impomoea hederacea jacq convulvulaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG NGHIÊN CỨU HÓA HỌC VÀ PHÂN LẬP MỘT VÀI HỢP CHẤT TRONG PHÂN ĐOẠN KÉM PHÂN CỰC CỦA HẠT BÌM BÌM BIẾC (IMPOMOEA HEDERACEA JACQ CONVULVULACEAE) Chủ nhiệm đề tài: TS Phạm Đơng Phương Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG NGHIÊN CỨU HĨA HỌC VÀ PHÂN LẬP MỘT VÀI HỢP CHẤT TRONG PHÂN ĐOẠN KÉM PHÂN CỰC CỦA HẠT BÌM BÌM BIẾC (IMPOMOEA HEDERACEA JACQ CONVULVULACEAE) Chủ nhiệm đề tài: TS Phạm Đông Phương Ký tên Thành phố Hồ Chí Minh – 2019 MỤC LỤC I ĐẶT VẤN ĐỀ…………………………………………………………… II NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ………… 2.1 Ngun vật liệu, dung mơi hóa chất dụng cụ nghiên cứu…… 2.2 Phương pháp nghiên cứu……………………………………………….2 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU…………………………………………………….4 3.1 Kết thử tinh khiết………………………………………………… 3.2 Hàm lượng chất chiết được…………………………………………….4 3.3 Kết phân tích sơ thành phần hóa thực vật của Thổ phục linh….5 3.4 Chiết xuất và phân tách phân đoạn……………………………… 3.5 Phân lập cao n-hexan SKC nhanh (VLC)……………………… 3.6 Phân lập phân đoạn nH2 của VLC sắc ký cột cổ điển ………… 3.7 Phân lập cao CHCl3……………………………………………………7 3.8 Xác định cấu trúc chất phân lập……………………………………9 III KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ………………………………………………… 11 IV TÀI LIỆU THAM KHẢO…………………………………………… 12 I ĐẶT VẤN ĐỀ: Hạt Bìm bìm biếc vị thuốc sử dụng từ lâu nền y học cổ truyển của nước ta nhiều nước giới với tác dụng tẩy xổ, tăng sức co bóp của ruột, thơng mật và đơi dùng để trị giun Hiện nay, nước ta có nhiều chế phẩm thuốc có nguồn gốc tự nhiên chứa vị thuốc này để chữa phòng ngừa bệnh về gan mật như: sản phẩm Boganic (công ty Traphaco), sản phẩm Bổ gan thông mật (công ty Sohaco)… Ngoài ra, theo nghiên cứu gần đây, dịch chiết hạt Bìm bìm biếc cịn có tác dụng chống oxy hóa, kháng viêm… Tuy nhiên, Việt Nam chưa có nhiều cơng trình nghiên cứu cơng bố về tác dụng sinh học hoạt chất phân lập từ hạt Bìm bìm biếc Với giá trị sử dụng vậy, việc khảo sát tác dụng sinh học nghiên cứu phân lập hoạt chất từ hạt Bìm bìm biếc cần thiết Vì vậy, đề tài “Nghiên cứu hóa học phân lập vài hợp chất phân đoạn phân cực của hạt Bìm bìm biếc” (Semen Ipomoeae hederaceae Jacp., Họ Convolvulaceae) tiến hành với mục tiêu sau: - Thu mẫu nguyên liệu (Bìm bìm biếc) - Nghiên cứu thành phần hóa thực vật - Chiết xuất hoạt chất toàn phần EtOH - Phân tách cao cồn thành phân đoạn đơn giản phương pháp phân bố lỏng – lỏng với dung mơi có độ phân cực tăng dần - Phân lập vài hợp chất phân đoạn phân cực II NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Ngun vật liệu, dung mơi hóa chất dụng cụ nghiên cứu 2.1.1 Nguyên liệu Nguyên liệu hạt Bìm bìm biếc semen Ipomoeae hederaceae (xuất xứ Trung Quốc, Công ty BV Pharma cung cấp) rửa nước, sấy khô xay bột thô để chiết xuất cho thử sinh học phân lập hợp chất tinh khiết 2.1.2 Ngun liệu, dung mơi, hóa chất, thiết bị nghiên cứu - Dung môi: cồn 96%, methanol, n-hxan, chloroform, ethylacetat, ether dầu hỏa đạt tiêu chuẩn tinh khiết phân tích (AR) đạt tiêu chuẩn phân tích dùng SKLM, SKC Dung môi cho UPLC: methanol, acetonitril, nước cất cho HPLC 2.1.3 Dụng cụ trang thiết bị: - Cột sắc ký: cột cổ điển (6 × 80 cm), cột sephadex LH-20 (2 × 60 cm), ct Sunfire C18 (250 ì 4,6 mm; àm) v tiờn ct Sunfire C18 (12,5 ì 4,6 mm; àm) - SKLM dùng silica gel F254 tráng sẵn nền nhôm (Merck, Art 1.05554) - SKC dùng silica gel hạt vừa (Trung Quốc), cỡ hạt 40- 63µm và silica gel hạt mịn (Merck) cỡ hạt 15- 40µm) Máy quay Buchi R300 (Nhật Bản) Bể siêu âm Ultrasonic Bath (Đức) Tủ sấy Gallentkamp (Anh) Nồi cách thủy Memmert WB-14 (Đức) Cột sắc ký dụng cụ thí nghiệm thơng thường phịng thí nghiệm của Bộ mơn Dược liệu Phịng nghiên cứu hóa hợp chất tự nhiên thuộc Trung tâm Đào tạo nghiên cứu phát triển thuốc nguồn gốc tự nhiên – ĐH Y Dược Tp HCM - Máy đo khối phổ (Micromass Quattro microTM API – Waters) - Máy đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) BRUKER - AV - 500, Viện hóa học thuộc Viện Hàn lâm Khoa học cơng nghệ Việt nam - Hà nội - Cột sắc ký: cột cổ điển (6 × 80 cm), cột sephadex LH-20 (2 × 60 cm), cột Sunfire C18 (250 × 4,6 mm; àm) v tiờn ct Sunfire C18 (12,5 ì 4,6 mm; µm) - Phần mềm EMPOWER truy xuất hình ảnh, số liệu cho định tính, định lượng máy HPLC 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Xác định độ tinh khiết - Xác định độ ẩm: Thực hiện theo Dược điển Việt Nam IV, phụ lục 9.6, PL-182 - Xác định tro tồn phần tro khơng tan HCl: Thực hiện theo Dược điển Việt Nam IV, phụ lục 9.8 phụ lục 9.7., phương pháp - Xác định hàm lượng chất chiết theo phụ lục 12.10 DĐVN IV [2] 2.2.2 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật: Theo phương pháp Ciuley cải tiến 2.2.3 Chiết xuất và phân tách phân đoạn - Chiết xuất: bột hạt Bìm bìm biếc chiết xuất phương pháp ngấm kiệt với dung môi cồn 50 % Dịch chiết thu cô giảm áp thu hồi dung môi, thu cao cồn toàn phần - Phân tách phân đọan đơn giản: cao cồn tồn phần pha lỗng với nước theo tỉ lệ (1:1) tạo thành hỗn dịch lắc phân bố với dung môi n-hexan, chloroform, ethyl acetat n-butanol phần cịn lại khơng tan dung môi Các dịch sau lắc phân bố cô áp suất giảm thu cao tương ứng - Kiểm tra cao chiết SKLM 2.2.4 Phân lập, kết tinh kiểm tra độ tinh khiết sắc ký 2.2.4.1 SKC nhanh Điều kiện SK: - Cột sắc ký: x 50 cm - Pha tĩnh: silica gel hạt trung bình: (40-63 µm, Merck), khối lượng: 400 g - Mẫu: 30 g cao n-butanol - Dung môi khai triển: n-hexan – DCM (85:15), sau tăng tỉ lệ DCM đến dung môi n-hexan – DCM (6:4) - Thể tích lọ hứng: 80 ml - Kiểm tra phân đoạn SKLM, hệ dung môi: n-hexan – DCM (5:5), n-hexan – EtOAc (7:3) - Kiểm tra gộp phân đoạn: hứng phân đoạn, kiểm tra SKLM, phát hiện đèn UV 254 nm, UV 365 nm và TT VS Các phân đoạn gần giống gộp chung lại, thu hồi dung môi áp suất giảm (cô quay chân không) 2.2.4.1 Phân lập SKC cổ điển Điều kiện SK: - Cột sắc ký: x 40 cm - Pha tĩnh: 150 g silica gel kích thước hạt hạt 0,040 – 0,063 mm (Merck) - Mẫu: g phân đoạn n-H2 - Dung môi khai triển: n-hexan – DCM (4:6) - Thể tích hứng ống nghiệm: 20 ml - Kiểm tra phân đoạn SKLM, hệ dung môi: n-hexan – DCM (3:7), n-hexan – EtOAc (7:3), phát hiện UV 254/365 nm thuốc thử VS 2.2.6 Xác định cấu trúc chất phân lập Chất tinh khiết phân tích phương pháp phổ khối (MS), HPLC-PDA, NMR, so sánh đối chiếu với liệu về phổ NMR, MS của chất tương tự công bố tài liệu Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) đo máy BRUKER – AV – 500, Viện hóa học thuộc Viện hàn lâm Khoa học công nghệ Việt nam – Hà nội Mẫu hòa tan CD3OD CD3COCD3 với TMS chất chuẩn nội Phổ proton (1H-NMR) đo 500 MHz, phổ carbon (13C-NMR) đo 125 MHz Độ dịch chuyển hóa học tính theo thang ppm (δTMS = 0) với chuẩn tín hiệu của TMS Các số ghép (J) tính Hertz (Hz) III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Kết thử tinh khiết Bảng 3.1 Kết tro tồn phần, tro khơng tan acid Lần đo Độ ẩm (%) Độ tro toàn phần (%) 9,15 9,48 9,66 Trung bình 9,43 5,67 3.2 Hàm lượng chất chiết Thực hiện mẫu dược liệu thu mua với dung môi là methanol điều kiện nhiệt độ phòng, dựa theo phụ lục 12.10 (DĐVN IV) Tiến hành lần lấy kết trung bình Kết ghi nhận Bảng 3.2 Bảng 3.2 Kết xác định hàm lượng chất chiết bột hạt Bìm bìm biếc Lần đo Hàm lượng chất chiết (%) 8,15 8,64 8,34 Trung bình 8,38 Hàm lượng chất chiết trung bình của dược liệu 8,38 % 3.3 Kết phân tích sơ thành phần hóa thực vật của Thổ phục linh (Bảng 3.2.): Bảng 0.3 Kết phân tích sơ thành phần hóa thực vật Nhóm hợp chất Dịch chiết ether Dịch chiết cồn Dịch chiết nước Kết luận Chất béo +++ Có Tinh dầu - Khơng +++ Có Triterpenoid tự Coumarin - + Alkaloid - + - Có Antraglycosid - - - Khơng Flavonoid - - - Không Glycosid tim - - Không Anthocyanosid - - Không Proanthocyanidin - - Khơng Polyphenol ++ ++ Có Tanin ++ + Có Saponin + + Có Acid hữu + + Có + Có ++ Có Hợp chất polyuronic Chất khử ++ Có Sơ kết luận: Hạt Bìm bìm biếc có chất béo, alkaloid, coumarin, polyphenol, tanin, saponin, acid hữu cơ, hợp chất polyuronic, chất khử 3.4 Chiết xuất và phân tách phân đoạn Làm ẩm kg bột hạt Bìm bìm biếc EtOH 50% 15 phút, sau chiết ngấm kiệt với 40 lít EtOH 50%, chiết lần Tổng dịch chiết thu 120 lít, thu hồi dung mơi áp suất giảm, thu 1,14 kg cao tồn phần Cao hòa tan với lượng nước cất vừa đủ (1:1), lắc phân bố với dung môi n-hexan, chloroform, ethyl acetat n-butanol Các dịch sau lắc phân bố cô áp suất giảm cho cao n-hexan có lẫn nhiều dầu béo (30 g), cao chloroform (23 g), cao etyl acetat (32 g), cao n-butanol (15 g) Kết chiết xuất, phân tách cao trình bày Bảng 3.4 Sơ đồ 3.1: Bảng 0.4 Kết phân tách cao phân đoạn từ cao tồn phần Bìm bìm biếc Dịch chiết Cao Khối lượng (g) n-hexan Cao n-hexan 30 Chloroform Cao CF 23 EtOAc Cao EtOAc 32 n-butanol Cao n-butanol 15 Bột dược liệu (9 kg) EtOH 50% Dịch cồn Cô thu hồi cồn Cao lỏng + nước, lắc phân bố chloroform n-hexan Dịch chloroform Dịch n-hexan Ethyl acetat Dịch ethyl acetat Cô thu hồi Cô thu hồi Cao n-hexan Cao chloroform n-butanol Dịch n-butanol Cô thu hồi Cao ethyl acetat Cơ thu hồi Cao n-butanol Hình 3.1 Sơ đồ chiết xuất phân bố lỏng - lỏng cao Bìm bìm biếc 3.5 Phân lập cao n-hexan SKC nhanh (VLC) - Điều kiện sắc ký: phần phương pháp nghiên cứu Tiến hành: - Cao n-hexan (30 g) sắc ký cột chân không với điều kiện: Chuẩn bị mẫu: Hòa tan 20 g cao n-hexan lượng tối thiểu CHCl3, trộn đều với lượng tối thiểu silica gel để thu bột tơi xốp Cột VLC: Nạp silica gel cỡ hạt 40 – 63 µm lên cột ổn định côt Nạp mẫu: Nạp mẫu dạng bột khô chuẩn bị Pha động: n-hexan – DCM (85:15), sau tăng tỉ lệ DCM đến dung môi n- hexan – DCM (6:4) - Thể tích lọ hứng: 80 ml - Kiểm tra phân đoạn SKLM, hệ dung môi: n-hexan – DCM (3:7), n-hexan – EtOAc (7:3) Theo dõi trình tách bầng SKLM, khai triển với hệ hệ n-hexan – EtOAc (7:3), phát hiện UV 254/365 nm thuốc thử VS Gộp phân đoạn chứa vết có Rf tương tự Kết quả; Sau sắc ký cột nhanh thu phân đoạn, đó: - Phân đoạn nH2 có vết, với vết có hàm lượng lớn vết lại - Các phân đoạn nH5 nH6 có khối lượng lớn thành phần phức tạp Phân đoạn nH1, nH3, nH4 nH7 có khối lượng nên khơng tiếp tục phân lập 3.6 Phân lập phân đoạn nH2 của VLC sắc ký cột cổ điển 3.6.1 Thăm dị hệ dung mơi sắc ký Tiến hành: SKLM phân đoạn (nH2) với số hệ dung môi: n-hexan – DCM (3:7), nhexan – DCM (4:6), phát hiện UV 254/ 365 nm, thuốc thử VS và chọn hệ n-hexan – DCM (4:6) có khả tách tốt SKC 3.6.2 Phân lập SKC-1 Điều kiện sắc ký: phần phương pháp nghiên cứu Kết quả: Sau triển khai thu phân đoạn, đó: - Phân đoạn ( nH2-2), xuất hiện kết tủa thu hồi bớt dung môi Tiến hành kết tinh phân đoạn MeOH, lọc lấy tinh thể, đặt tên IH1 (36 mg) - Phân đoạn nH2-3, xuất hiện kết tủa sau cô thu hồi bớt dung môi Tiến hành kết tinh phân đoạn tủa của nH2-3 MeOH, lọc lấy tinh thể, đặt tên IH2 (25 mg) - Các phân đoạn cịn lại dạng dầu, có khối lượng không nhiều thành phần phức tạp nên không tiếp tục xử lý 3.7 Phân lập cao CHCl3 Cao CHCl3 (23 g) chiết nóng với dung môi DCM, lọc lấy dịch Cô thu hồi bớt dung mơi thấy có tủa, lọc lấy tủa (430 mg) Kết tinh lại tủa EtOH, lọc, sấy khô chân không, thu chất kết tinh màu vàng, gọi CL1 (240 mg) Kiểm tra độ tinh khiết CL1 sắc ký lớp mỏng mỏng silicagel, chạy khai triển với ba hệ dung môi CF - EA (8:2), Cf-MeOH (9:1) EA Kết quả: hệ dung môi, CL11 đều cho vết gọn sắc ký đồ CL1 tắt quang với UV 254 nm, phát quang với UV 365 nm, cho vết màu tím với thuốc thử VS Kiểm tra tinh khiết UPLC - Chuẩn bị mẫu: CL1 pha dung môi methanol, nồng độ 0,1mg/ml - Điều kiện sắc ký: phần Phương pháp nghiên cứu Hình 3.1 Sắc ký đồ UPLC kiểm tra tinh khiết CL1 Tên peak Thời gian lưu (phút) Diện tích peak % diện tích peak Peak 12,922 42155 0,24 CL1 15,022 17177055 99,76 Kết kiểm tra UPLC, CL1 có độ tinh khiết 99,76 % 3.8 Xác định cấu trúc chất phân lập 3.7.1 Xác định cấu trúc nH1 nH2 - IH1 kết tinh (trong methanol) dạng tinh thể khơng màu, cho màu tím khơng bền với thuốc thử VS sắc ký lớp mỏng - IH2 bột kết tinh thể hình kim nhỏ màu trắng, tan CHCl3, tan MeOH, EtOAc Trên mỏng silica gel F254; vết SGH2 không hiện vết UV 254/365, cho vết với thuốc thử VS - Trên phổ MS (APCI+), IH1 cho phân mảnh có m/z 397,37 = [M-H2O+H]+, M=414,37, tương ứng với công thức C29H50O với =5 - SKLM: Các hợp chất IH1 IH2 chất chuẩn β-sitosterol stigmasterol (BM Dược liệu cung cấp) hòa CHCl3, triển khai SKLM với hệ dung môi: nhexan – CHCl3 (3:7); CHCl3 – EtOAc (9:1); n-hexan – EtOAc (4: 6) Kết quả: Cả hai chất IH1 IH2 đều cho vết SKLM, phát hiện soi UV thuốc thử VS phù hợp với chất chuẩn Kết luận: IH1 IH2 β-sitosterol stigmasterol 3.7.2 Xác định cấu trúc CL1 - CL1 phân lập từ cao chloroform, dạng kết tinh màu vàng nhạt, tan DCM, CHCl3, ethyl acetat, tan tốt methanol Trên SKLM cho thấy CL1 tắt quang UV 254 nm, phát quang UV 365 nm, hiện màu tím với thuốc thử VS - Phổ MS: Phổ MS của CL1 cho tín hiệu ion m/z [M-H]- = 207,39 cho phép nhận định khối lượng phân tử 208, kết hợp phổ 13C-NMR có 11 tín hiệu phổ 1H-NMR có 12 tín hiệu công thức phân tử phù hợp C11H12O4 (Ω = 6) Quan sát phổ 13C-NMR kết hợp phổ DEPT của CL1 cho thấy 11 tín hiệu cộng hưởng của carbon Trong carbon bậc IV, nhóm carbon bậc III, carbon bậc II carbon bậc I Tất carbon bậc IV và III đều vùng trường thấp đặc trưng của OH alcol carbon sp2 của nối đơi và vịng thơm Có tín hiệu δC 166,4 ppm tín hiệu nhóm – COO-, tín hiệu -CH3 (δC = 17 ppm, tín hiệu δC 59 ppm –O-CH2- Kết hợp với liệu phổ HMBC, COSY, cấu trúc của CL1 xác định ethyl caffeat Tương tác H-H COSY Tương tác H-C HMBC Hình 3.2 Cấu trúc hóa học tương quan HMBC, COSY CL1 Bảng 3.5 Bảng so sánh phổ NMR CL1 ethyl caffeat CL1 (DMSO-d6, 500 MHz) C (C ppm) Ethyl caffeat [21] (DMSO-d6,600 MHz) (H ppm) m (J, Hz) HMBC 1H COSY (C ppm) 1H (H ppm) 125,5 - - 127,5 - 114,7 7,04 (1H;d; Hz) C6, C3, C1’ 115,2 7,18 (1H; d 1,5 Hz) 148,3 - - 148,7 - 145,5 - - 145,5 - 115,7 6,76 (1H; d; Hz) C1, C4, C3 H5/H6 116,3 6,88 (1H; d; 8,4 Hz) 121,3 6,98 (1H;dd 1,5; Hz) C4, C1’, C3 H6/H5 122,4 7,05 (1H; dd; 1,5 Hz) 1’ 144,9 7,47 (1H;d; 16 Hz) C3’, C2, C6 H1’/H2’ 146,2 7,55 (1H; d; 16,2 Hz 2’ 114,0 6,25 (1H; d; 16 Hz) C1, C3’ H2’/H1’ 115,6 6,29 (1H; d; 15,6 Hz) 3’ 166,5 - - 167,4 4’ 14,4 1,24(3H;t; Hz) C5’ 14,6 1,26 (3H; t; 4,8 Hz) 5’ 59 4,15 (2H;q; Hz) C4’, C3’ 60,5 4,18 (2H; q; 7,2 Hz) -OH 9,35 (C5-OH) -OH 9,32 (C4-OH) Kết luận: IH1 ethyl caffeat 10 IV KẾT LUẬN Sau thực hiện, đề tài đạt kết sau: - Xác định độ tinh khiết của dược liệu: độ ẩm 8,83%, tro toàn phần (5,14%), tro không tan acid (0,93%) - Sơ thành phần hóa học, xác định thân rễ Bìm bìm biếc có chứa: chất béo, alkaloid, coumarin, polyphenol, tanin, saponin, acid hữu cơ, hợp chất polyuronic, chất khử - Từ kg dược liệu chiết xuất cồn 96% , phân tách thành phân đoạn: cao n-hexan, cao CHCl3, cao EtOAc, cao n-butanol và cao nước - Từ cao n-hexan phân lập β-sitosterol stigmasterol từ cao CHCl3 phân lập caffeat ethyl 11 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Bộ môn Dược liệu, Khoa Dược – Đại học Y Dược TP HCM (2007), Phương pháp nghiên cứu dược liệu, trang 25 – 50 Bộ Y tế (2010), “Dược điển Việt Nam IV”, NXB Y học Hà Nội Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, tập 1, tr 166-167 Đỗ Tất Lợi (2000), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 444-446 Viện dược liệu (2006), Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ thảo dược, NXB Khoa học kỹ thuật TÀI LIỆU TIẾNG ANH Abou-Chaar C I et al (1996), “Alkaloids of an Ipomoea seed commonly known as Kaladana in Pakistan” Lebanese Pharm J 9, pp 93-109 Ahmad, M et al (2011), “Determination of LD50 and ED50 by dose response relationship and assessment of toxicological and non toxicological behaviour of Ipomoea hederacea” J Pharm Res., (4), pp 1176–1178 A V Badarinath, K Mallikajuna Rao et al, (2010), “Corrections and considerations”, International Journal of PharmTech Research, 2, pp 1276-1285 Atolovich M.P.D Prenzler et al, (2002), “Methods for testing antioxidant activity”, Analyst, 127, pp 183-198 10 Jung D Y et al (2008), “Triterpenoid saponins from the seeds of pharbitis nil”, Chemical and Pharmaceutical Bulletin 56 (2), pp 203-206 11 Kim K H et al (2011), “Bioactive phenolic constituents from the seeds of Pharbitis nil”, Chemical and Pharmaceutical Bulletin 59 (11), pp 1425-1429 12 Kim K H et al (2014), “Identification of Antitumor Lignans from the Seeds of Morning Glory (Pharbitis nil)” journal of agricultural and food chemistry 62 (31), pp 7746-7752 13 Li, L., L.-W Xu, Y.-F Jiang, C.-J Xi, H.-Q Wang and Y.-R Suo (2004), "Isolation, characterization and crystal structure of natural eremophilenolide from Ligularia sagitta", Zeitschrift für Naturforschung B, 59 (8), pp 921-924 14 Meira, M et al (2012), “Review of the genus Ipomoea: Traditional uses, chemistry and biological activities”, Revista Brasileira de Farmacognosia, 22 (3), pp 682–713 15 Miller, J.H et al (2005) Forest Plants of the Southeast and Their Wildlife Uses, University of Georgia Press 16 Nasir, E.; Ali, S.I (1995), Flora of Pakistan; Shamim Printing Press: Karachi, Pakistan 12 17 Pham-Huy L A et al (2008), "Free Radicals, Antioxidants in Disease and Health",International Journal of Biomedical Science : IJBS, (2), pp 89-96 18 Saied S (2005), studies in the chemical constituents of Murraya paniculata and Ipomoea hederacea, University of Karachi, Karachi 19 Shahzaman M A A et al (2011), “Ipomoea hederacea: an Imperative Source for Natural Antioxidants”, Asian J Pharm Biol Res (4), pp 5-6 20 Singh B et al (2012), “Chemical investigation of seed of Ipomoea hederacea and its biological activity”, J Chem Pharm Res 4, pp 1441-1448 21 Takhtajan A (2009), Flowering Plants, Springer 2nd Ed, pp 534 22 Xiang, M., H Su, J Hu and Y Yan (2011), "Isolation, identification and determination of methyl caffeate, ethyl caffeate and other phenolic compounds from Polygonum amplexicaule var sinense", Journal of Medicinal Plants Research, (9), pp 1685-1691 23 Yashpal K et al (1947), “Chemical examination of the fixed oil from Ipomoea hederacea”, Ind Soap J 13, pp 77-80 24 Zia-Ul-Haq M et al (2011), “Antimicrobial screening of selected flora of Pakistan”, Archives of Biological Science.63 (3), pp 691-695 Tiếng Pháp 25 Lecomte, H et Humbert, et al (1907 - 1952), Flore générale de l'Indo-chine., I - VII, et suppléments, Masson et Cie, Editeurs, Paris 13 ... VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG NGHIÊN CỨU HÓA HỌC VÀ PHÂN LẬP MỘT VÀI HỢP CHẤT TRONG PHÂN ĐOẠN KÉM PHÂN CỰC CỦA... phân lập từ hạt Bìm bìm biếc Với giá trị sử dụng vậy, việc khảo sát tác dụng sinh học nghiên cứu phân lập hoạt chất từ hạt Bìm bìm biếc cần thiết Vì vậy, đề tài ? ?Nghiên cứu hóa học phân lập vài. .. lập vài hợp chất phân đoạn phân cực của hạt Bìm bìm biếc? ?? (Semen Ipomoeae hederaceae Jacp., Họ Convolvulaceae) tiến hành với mục tiêu sau: - Thu mẫu nguyên liệu (Bìm bìm biếc) - Nghiên cứu thành