Nghiên cứu thành phần hóa học và một s tác dụng sinh học của cây mu ng truổng zanthoxylum avicennae (lam ) dc rutaceae

GI O Ụ V OT O ỌC YT DƢ C C  - BÙ GU Ễ B Ê Ù NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT S TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY MU NG TRUỔNG Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC Rutaceae Ng nh: ƣợc liệu - ƣợc học cổ truyền Mã số: 8720206 LUẬN V N TH GƢỜ ƢỚNG DẪN KHOA HỌC: S VÕ VĂ LẸO Thành phố Hồ Chí SĨ ƢỢC HỌC inh, năm 2019 LỜ CA OA Tôi cam đoan l cơng trình nghiên cứu tơi ác số liệu, kết nêu luận văn l trung thực v chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Bùi Nguyễn Biên Thùy TÓM TẮT LUẬ VĂ C SĨ DƢ C HỌC A 2017 – 2019 Chuyên ngành: ƣợc liệu - ƣợc học cổ truyền, mã số: 8720206 Tên đề tài: Nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học Muồng truổng Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC Rutaceae Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Võ Văn Lẹo Học viên thực hiện: Bùi Nguyễn Biên Thùy ặt vấn đề Muồng truổng loài bụi phổ biến Việt Nam, Trung Quốc,… có th nh phần hóa học alkaloid, coumarin, tinh dầu, flavonoid, … với nhiều tác dụng dƣợc lý quan trọng nhƣ kháng khuẩn, kháng viêm, gây độc tế b o, … ối tƣợng phƣơng pháp nghiên cứu Lá, thân Muồng truổng (Zanthoxylum avicennae (Lam.) Rutaceae) thu hái tháng 12 năm 2017 bán đảo Sơn Tr , Nẵng Dung mơi, hóa chất, dụng cụ thƣờng quy phịng thí nghiệm Khảo sát đặc điểm thực vật, độ tinh khiết nguyên liệu Chiết xuất, phân lập, xác định cấu trúc hợp chất tinh khiết Thử tác dụng chống oxy hóa (DPPH, FRAP) kháng viêm (ức chế biến tính albumin) Kết Khảo sát sơ thực vật học, xác định trình tự gen lồi Muồng truổng Bằng kỹ thuật chiết ngấm kiệt lắc phân bố lỏng lỏng: từ kg bột Muồng truổng thu đƣợc 85 g cao n-hexan; 220 g cao cloroform; 10,5 g cao ethyl acetat Từ kg bột thân-cành Muồng truổng thu đƣợc 30 g cao n-hexan; 60 g cao cloroform; g cao ethyl acetat Từ phân đoạn cao cloroform ethyl acetat Muồng truổng, phân lập đƣợc 10 hợp chất, lần lƣợt là: skimianin (296 mg), hydrangetin (12,73 mg), 8-methoxyanisocoumarin H (27,45 mg), schinifolin (189 mg), 2-n-pentyl-1-methylquinolin-4(1H)-on (21 mg), γ-fagarin (67 mg), uracil (2,02 mg), acid (E)-3-(1,4-dihydroxy-2,2,6-trimethylcyclohexyl) acrylic (7,4 mg), hesperidin (4 mg), 4-(2-hydroxyethyl)-2-methoxyphenyl-O-β-D-glucopyranosid (22 mg) Từ phân đoạn cao n-hexan cloroform thân-cành Muồng truổng, phân lập đƣợc 10 hợp chất, lần lƣợt daucosterol (50,5 mg), β-sitosterol (1000 mg), friedelin (44 mg), acid hexacosanoic (100 mg), trans-N-p-coumaroyl tyramin (20 mg), diosmetin (3,3 mg), luvangetin (70 mg), hesperetin (2,7 mg), acid 3,5-dihydroxy-4-methoxybenzoic (19 mg), acid indol-3-carboxylic (1,1 mg) ác cao phân đoạn chất tinh khiết cho tác dụng chống oxy hóa yếu hai mơ hình DPPH v FRAP ác cao phân đoạn chất tinh khiết cho tác dụng kháng viêm đáng kể: hydrangetin với IC50 = 11,2 µg/ml 4-(2-hydroxyethyl)-2-methoxyphenyl-O-β-D-glucopyranosid với IC50 = 13,1 µg/ml ết luận đề nghị Các kết thu đƣợc phù hợp với nhiều nghiên cứu trƣớc lồi Muồng truổng Các hợp chất hydrangetin, 8-methoxyanisocoumarin H, schinifolin, uracil, acid (E)-3-(1,4-dihydroxy-2,2,6trimethylcyclohexyl) acrylic, 4-(2-hydroxyethyl)-2-methoxyphenyl-O-β-D-glucopyranosid, friedelin, acid hexacosanic, trans-N-p-coumaroyl tyramin, hesperetin, acid 3,5-dihydroxy-4methoxybenzoic lần đƣợc phân lập từ Muồng truổng Cần thực thêm thử nghiệm tác dụng sinh học chất tinh khiết phân lập đƣợc phân lập phân đoạn giàu tiềm SUMMARY THESIS OF MASTER OF PHARMACY - COURSE 2017 - 2019 Major: Pharmacognosy - Traditional Pharmacy, code: 8720206 Research title: Research on chemical composition and some biological effects of Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC Rutaceae Science instructor: PhD Vo Van Leo Practitioner: Bui Nguyen Bien Thuy Introduction Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC is a common shrub in Vietnam, China, has the main chemical components are alkaloids, coumarins, essential oils, flavonoids, with many important pharmacological effects such as antibacterial, anti-inflammatory, cytotoxic effect, Materials and methods Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC Rutaceae collected in December 2017 in Son Tra Peninsula, Da Nang Solvents, chemicals, routine laboratory equipment Investigation of plant characteristics and purity of raw materials Extraction, isolation, determine the structure of compounds Test the antioxidant (DPPH, FRAP) and anti-inflammatory effects Results Preliminary survey on botany, determining the genetic sequence of Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC kg of leaves powder was extracted with 80% ethanol The ethanol extract was concentrated under reduced pressure at 35 oC, stored in cold condition to remove chlorophyll The residue (600 g) was diluted with water and distributed with n-hexan, chloroform, and ethyl acetate to give n-hexan (85 g), chloroform (220 g), ethyl acetate extract (10,5 g), respectively kg of stems was extracted with 80% ethanol, The residue (150 g) was diluted with water and distributed with n-hexan, chloroform, ethyl acetate to give n-hexan (30 g), chloroform (60 g), ethyl acetate extract (4 g), respectively From the chloroform and ethyl acetate fraction of the leaves, 10 compounds were isolated: skimianine (296 mg), hydrangetin (12.73 mg), 8-methoxyanisocoumarin H (27.45 mg), schinifoline (189 mg), 2-n-pentyl-1-methylquinoline-4 (1H) -on (21 mg), γ-fagarin (67 mg), uracil (2.02 mg), (E) -3- (1,4-dihydroxy-2,2,6-trimethylcyclohexyl) acrylic acid (7.4 mg), hesperidin (4 mg), 4-(2hydroxyethyl)-2-methoxyphenyl-O-β-D-glucopyranosid (22 mg) From the n-hexane and chloroform fraction of the stems, 10 compounds were isolated: Daucosterol (50.5 mg), β-sitosterol (1000 mg), friedeline (44 mg), hexacosanic acid (100 mg), trans-Npcoumaroyl tyramin (20 mg), diosmetin (3.3 mg), luvangetine (70 mg), hesperetin (2.7 mg) ), 3,5dihydroxy-4-methoxybenzoic acid (19 mg), indole-3-carboxylic acid (1.1 mg) The fractions and compounds gave weak antioxidant effects on the two models DPPH and FRAP The fractions and compounds had significant anti-inflammatory effects: hydrangetin with IC50 = 11.2 µg/ml and 4-(2-hydroxyethyl)-2-methoxyphenyl-O-β-D-glucopyranosid with IC50 = 13.1 µg/ml Conclusion The results are consistent with previous studies on the Zanthoxylum avicennae Hydrangetin, 8methoxyanisocoumarin H, schinifolin, uracil, acid (E)-3-(1,4-dihydroxy-2,2,6-trimethylcyclohexyl) acrylic, 4-(2-hydroxyethyl)-2-methoxyphenyl-O-β-D-glucopyranosid, friedelin, hexacosanic acid, trans-N-p-coumaroyl tyramine, hesperetin, 3,5-dihydroxy-4-methoxybenzoic acid were isolated from Zanthoxylum avicennae for the first time MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CHỮ VI T TẮT iv DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤ SƠ Ồ ix ẶT VẤN Ề HƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .2 1.1 THỰC VẬT HỌC 1.1.1 Vị trí phân loại thực vật học 1.1.2 ặc điểm họ Cam (Rutaceae) 1.1.3 ặc điểm chi Zanthoxylum L 1.1.4 ặc điểm loài Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.2.1 Thành phần hóa học số lồi thuộc chi Zanthoxylum Việt Nam 1.2.2 Thành phần hóa học loài Zanthoxylum avicennae 1.3 TÁC DỤNG ƢỢC LÝ M T SỐ LOÀI THU C CHI ZANTHOXYLUM CÓ Ở VIỆT NAM 11 1.3.1 Chống oxy hóa 11 1.3.2 Kháng viêm, giảm đau .11 1.3.3 ộc tính tế bào – Chống khối u 12 1.3.4 Tác dụng chống co thắt .13 1.3.5 Kháng khuẩn 14 1.3.6 Kháng nấm .14 1.3.7 Kháng virus .14 1.3.8 Kháng côn trùng 15 1.4 CÔNG DỤNG .15 1.5 VIÊM, CHẤT KH NG VIÊM, PHƢƠNG PH P S NG LỌC TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM .15 1.5.1 ại cƣơng viêm 15 1.5.2 Một số chất trung gian hóa học phản ứng viêm .16 1.5.3 Tác động kháng viêm coumarin 17 1.5.4 Một số phƣơng pháp s ng lọc tác dụng kháng viêm 17 1.6 GỐC TỰ DO, CHẤT CHỐNG OXY HÓA, M T SỐ PHƢƠNG PH P SÀNG LỌC TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA 19 1.6.1 Gốc tự 19 1.6.2 Ảnh hƣởng gốc tự 19 i 1.6.3 Tác động chống oxy hóa coumarin, flavonoid 21 1.6.4 Một số phƣơng pháp s ng lọc tác dụng chống oxy hóa 22 HƢƠNG ỐI TƢỢNG V PHƢƠNG PH P NGHIÊN ỨU 25 2.1 ỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU .25 2.2 DUNG MƠI, HĨA CHẤT, THI T BỊ 25 2.2.1 Dung mơi, hóa chất 25 2.2.2 Dụng cụ, trang thiết bị .26 2.3 PHƢƠNG PH P NGHIÊN ỨU .27 2.3.1 Khảo sát thực vật học mẫu dƣợc liệu 27 2.3.2 ịnh danh dƣợc liệu phƣơng pháp giải trình tự ADN 28 2.3.3 Thử tinh khiết 28 2.3.4 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật 28 2.3.5 Chiết xuất, phân lập hợp chất 28 2.3.6 Xác định cấu tr c chất phân lập đƣợc 29 2.3.7 Thử tác dụng sinh học .30 2.3.7.1 Chuẩn bị mẫu thử sinh học 30 2.3.7.2 Tác dụng chống oxy hóa 31 2.3.7.3 Tác dụng kháng viêm 34 HƢƠNG K T QUẢ NGHIÊN CỨU 37 KHẢO SÁT THỰC VẬT HỌC .37 3.1.1 ặc điểm hình thái 37 3.1.2 Bóc tách biểu bì 38 3.1.3 Vi phẫu 38 3.1.4 Soi bột 40 ỊNH DANH BẰNG PHƢƠNG PH P GIẢI TRÌNH TỰ ADN 40 3 THỬ TINH KHI T 40 3.3.1 ộ ẩm 40 3.3.2 ộ tro 41 3.3.3 H m lƣợng chất chiết đƣợc .41 PHÂN TÍ H SƠ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 41 CHI T XUẤT VÀ PHÂN LẬP LÁ MUỒNG TRUỔNG 42 3.5.1 Chiết xuất Muồng truổng .42 3.5.2 Phân lập cao cloroform Muồng truổng 44 3.5.3 Phân lập cao ethyl acetat Muồng truổng .47 3.6 CHI T XUẤT VÀ PHÂN LẬP THÂN MUỒNG TRUỔNG 49 3.6.1 Chiết xuất thân Muồng truổng 49 3.6.2 Phân lập cao n-hexan thân Muồng truổng (cao AT) 49 i 3.6.3 Phân lập cao cloroform thân Muồng truổng (cao BT) 51 3.7 KIỂM TRA TINH KHI T CỦA CÁC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ƢỢC 53 3.7.1 Kiểm tra độ tinh khiết sắc ký lớp mỏng 53 3.7.2 Kiểm tra độ tinh khiết hệ thống sắc ký lỏng 58 3.8 X ỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ƢỢC .66 3.8.1 Hợp chất ZA1 66 3.8.2 Hợp chất ZA2 68 3.8.3 Hợp chất ZA3 70 3.8.4 Hợp chất ZA4 73 3.8.5 Hợp chất ZA5 76 3.8.6 Hợp chất ZA6 78 3.8.7 Hợp chất ZA9 80 3.8.8 Hợp chất ZA10 81 3.8.9 Hợp chất ZA11 84 3.8.10 Hợp chất ZA12 87 3.8.11 Hợp chất ZA13 89 3.8.12 Hợp chất ZA15 90 3.8.13 Hợp chất ZA16 91 3.8.14 Hợp chất ZA17 94 3.8.15 Hợp chất ZA18.1 .95 3.8.16 Hợp chất ZA19.1 .97 3.8.17 Hợp chất ZA20 99 3.8.18 Hợp chất ZA21.1 .101 3.8.19 Hợp chất ZA23 103 3.8.20 Hợp chất ZA26 104 3.9 THỬ TÁC DỤNG SINH HỌC 107 3.9.1 Tác dụng chống oxy hóa 107 3.9.1.1 Phƣơng pháp đánh bắt gốc tự DPPH 107 3.9.1.2 Phƣơng pháp FRAP .110 3.9.2 Tác dụng kháng viêm 112 BÀN LUẬN 115 K T LUẬN V Ề NGHỊ .117 TÀI LIỆU THAM KHẢO .120 PHỤ LỤC 127 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ tắt STT Chữ nguyên 13 13 1 br broad d doublet C-NMR C-Nuclear Magnetic Resonance H-NMR VN H-Nuclear Magnetic Resonance Ý nghĩa Cộng hƣởng từ hạt nhân C13 Cộng hƣởng từ hạt nhân proton ỉnh rộng ỉnh đôi DEPT DMSO ƣợc điển Việt Nam Distortionless Enhancement by Polarization Transfer dimethyl sulfoxide DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl EC50 Effective concentration 50% 10 HBV Vi rút viêm gan B 11 HMBC 12 HSQC 13 HPLC 14 HTCO Hepatitis B virus Heteronuclear Multiple Bond Correlation Heteronuclear Single Quantum Correlation High-performance liquid chromatography Hoạt tính chống oxy hóa 15 IC50 Inhibitory concentration 50% Nồng độ ức chế 50% 16 J Coupling constant Hằng số ghép 17 LC50 Lethal concentration 50 18 m multiplet 19 MIC Minimum Inhibitory Concentration 20 MHz Mega Hertz 21 MS Mass Spectrometry Phổ khối 22 NMR Nuclear Magnetic Resonance Cộng hƣởng từ hạt nhân 23 ppm parts per million Phần triệu 24 PDA Photodiode Array Dãy diod quang 25 PTFE Polytetrafluoroethylene 26 s singlet 27 SKC Sắc ký cột 28 SK Sắc ký đồ Nhiều đỉnh ỉnh đơn 29 SKLM Sắc ký lớp mỏng 30 t triplet 31 TLTK Tài liệu tham khảo 32 TT Thuốc thử 33 UCBT Ức chế biến tính 34 UV-Vis 35 UPLC 36 VLC Ultraviolet and Visible Ultra Performance Liquid Chromatography Vacuum liquid chromatography 37 VS Vanillin-acid sulfuric ỉnh ba Tử ngoại khả kiến Sắc ký cột chân khơng i DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh loài Zanthoxylum avicennae Hình 3.2 ặc điểm hình thái Muồng truổng 38 Hình 3.3 Bóc tách biểu bì dƣới biểu bì 38 Hình 3.4 Vi phẫu Muồng truổng: A-tổng quát, B-sơ đồ, C-chi tiết 39 Hình 3.5 Các cấu tử có bột Muồng truổng 40 Hình 3.6 Sắc ký đồ phân đoạn từ cao B Muồng truổng 45 Hình 3.7 Sắc ký đồ phân đoạn từ cao phân đoạn Muồng truổng 46 Hình 3.8 Sắc ký đồ phân đoạn từ cao C Muồng truổng 48 Hình 3.9 Sắc ký đồ phân đoạn từ cao AT thân Muồng truổng 50 Hình 3.10 Sắc ký đồ phân đoạn từ cao BT thân Muồng truổng 52 Hình 3.11 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA1, ZA2, ZA3, ZA4, ZA5, ZA6 hệ nhexan – ethyl acetat (1:1) 54 Hình 3.12 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA1, ZA2, ZA3, ZA4, ZA5, ZA6 hệ cloroform – methanol (95:5) 54 Hình 3.13 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA9, ZA10, ZA11, ZA12 hệ ethyl acetat – methanol – nƣớc (100:17:13) 55 Hình 3.14 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA9, ZA10, ZA11, ZA12 hệ ethyl acetat – methanol – acid acetic (5:5:1) 55 Hình 3.15 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA17, ZA16, ZA15, ZA13 hệ cloroform 56 Hình 3.16 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA17, ZA16, ZA15, ZA13 hệ cloroform – methanol (95:5) 56 Hình 3.17 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA18.1, ZA19.1, ZA20, ZA21.1, ZA23, ZA26 hệ cloroform – ethyl acetat – acid formic (70:30:2) 57 Hình 3.18 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết ZA18.1, ZA19.1, ZA20, ZA21.1, ZA23, ZA26 hệ cloroform – methanol – acid formic (90:10:2) 57 Hình 3.19 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống UPLC ZA1 59 Hình 3.20 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống UPLC ZA2 60 Hình 3.21 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống UPLC ZA3 60 Hình 3.22 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống UPLC ZA4 61 Hình 3.23 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống UPLC ZA5 61 Hình 3.24 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống UPLC ZA6 62 Hình 3.25 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống HPLC ZA9 62 Hình 3.26 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống UPLC ZA11 63 Hình 3.27 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết hệ thống HPLC ZA12 63 Hình 3.28 Cơng thức hóa học v tƣơng quan HM ZA1 67 Hình 3.29 Cơng thức hóa học v tƣơng quan HM ZA2 69 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-135 Phụ lục 4.268 Phổ 1H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) trích vùng δH 2,4-4,0 ZA21.1 Phụ lục 4.269 Phổ 13C-CPD (DMSO-d6, 125 MHz) ZA21.1 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-136 Phụ lục 4.270 Phổ 13C-CPD (DMSO-d6, 125 MHz) trích vùng δC 50-190 ZA21.1 Phụ lục 4.271 Phổ 13C-DEPT (DMSO-d6, 125 MHz) ZA21.1 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-137 Phụ lục 4.272 Phổ HSQC (DMSO-d6, 125/500 MHz) ZA21.1 Phụ lục 4.273 Phổ HSQC (DMSO-d6, 125/500 MHz) trích vùng δH 5,9-6,9 δC 94-118 ZA21.1 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-138 Phụ lục 4.274 Phổ HSQC (DMSO-d6, 125/500 MHz) trích vùng δH 2,5-5,5 δC 40-80 ZA21.1 Phụ lục 4.275 Phổ HMBC (DMSO-d6, 125/500 MHz) ZA21.1 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-139 Phụ lục 4.276 Phổ HMBC (DMSO-d6, 125/500 MHz) trích vùng δH 9,0-12,0 δC 90-170 ZA21.1 Phụ lục 4.277 Phổ HMBC (DMSO-d6, 125/500 MHz) trích vùng δH 5,4-7,2 δC 75-170 ZA21.1 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-140 Phụ lục 4.278 Phổ HMBC (DMSO-d6, 125/500 MHz) trích vùng δH 3,0-6,0 δC 80-200 ZA21.1 Phụ lục 4.279 Phổ 1H-1H COSY (DMSO-d6, 500 MHz) ZA21.1 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-141 Phụ lục 4.280 Phổ 1H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) ZA23 Phụ lục 4.281 Phổ 13C-CPD (DMSO-d6, 125 MHz) ZA23 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-142 Phụ lục 4.282 Phổ 1H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) ZA26 Phụ lục 4.283 Phổ 1H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) trích vùng δH 7,1-8,0 ZA26 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-143 Phụ lục 4.284 Phổ 13C-CPD (DMSO-d6, 125 MHz) ZA26 Phụ lục 4.285 Phổ 13C-CPD (DMSO-d6, 125 MHz) trích vùng δC 110-165 ZA26 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-144 Phụ lục 4.286 Phổ HSQC (DMSO-d6, 125/500 MHz) ZA26 Phụ lục 4.287 Phổ HSQC (DMSO-d6, 125/500 MHz) trích vùng δH 7,1-8,1 δC 110-134 ZA26 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-145 Phụ lục 4.288 Phổ HMBC (DMSO-d6, 125/500 MHz) ZA26 Phụ lục 4.289 Phổ HMBC (DMSO-d6, 125/500 MHz) trích vùng δH 7,0-8,2 δC 105-140 ZA26 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-146 Phụ lục 4.290 Phổ 1H-1H COSY (DMSO-d6, 500 MHz) ZA26 Phụ lục 4.291 Phổ 1H-1H COSY (DMSO-d6, 500 MHz) trích vùng δH 7,1-8,1 ZA26 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-147 PHỤ LỤC THỬ TÁC DỤNG SINH HỌC Phƣơng pháp PPH TP A B C D 600 (300) 500 (250) 400 (200) 300 (150) 250 (125) 200 (100) 100 (50) 0.510 0.618 0.737 0.887 0.998 1.115 1.226 0.510 0.619 0.739 0.887 0.993 1.116 1.228 0.510 0.619 0.739 0.887 0.989 1.116 1.228 0.605 0.701 0.805 0.923 0.985 1.053 1.260 0.605 0.702 0.806 0.924 0.986 1.052 1.263 0.605 0.703 0.808 0.924 0.986 1.053 1.263 0.287 0.358 0.488 0.715 0.797 0.938 1.145 0.288 0.359 0.526 0.714 0.798 0.942 1.144 0.288 0.359 0.527 0.715 0.797 0.942 1.145 0.283 0.384 0.545 0.725 0.813 0.926 1.093 0.280 0.383 0.544 0.727 0.813 0.928 1.091 0.280 0.383 0.543 0.727 0.814 0.928 1.094 0.205 0.365 0.472 0.623 0.735 0.805 0.994 0.202 0.36 0.471 0.621 0.737 0.806 0.993 0.205 0.364 0.472 0.621 0.737 0.806 0.992 200 125 100 75 50 0.668 0.465 0.384 0.267 0.222 0.669 0.462 0.385 0.266 0.222 0.669 0.460 0.385 0.266 0.223 0.288 0.184 0.170 0.085 0.101 0.288 0.184 0.170 0.085 0.101 0.287 0.184 0.170 0.085 0.102 1.053 0.631 0.465 0.394 0.284 1.053 0.629 0.466 0.394 0.284 1.054 0.629 0.466 0.395 0.284 1.552 1.202 1.014 0.837 0.609 1.555 1.205 1.015 0.838 0.609 1.555 1.205 1.016 0.838 0.609 Phƣơng pháp FRAP TP A B C Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-148 D 0.993 0.753 0.580 0.375 0.274 0.992 0.752 0.580 0.375 0.277 0.991 0.755 0.580 0.375 0.275 Kháng viêm MẪU ZA cao phân đoạn OD Nồng độ (μg/ml) Thử không ZA-A 0.127 0.125 2.5 0.006 0.125 0.128 0.129 0.127 3.19 0.013 0.131 0.131 0.128 0.130 6.65 12.5 0.035 0.139 0.138 0.142 0.140 16.49 25 0.071 0.149 0.151 0.152 0.151 36.44 50 0.132 0.155 0.153 0.157 0.155 81.65 0.004 0.11 0.113 0.116 0.113 2.5 0.009 0.123 0.12 0.123 0.122 9.84 0.018 0.121 0.123 0.128 0.124 15.43 12.5 0.042 0.132 0.138 0.141 0.137 24.20 25 0.084 0.147 0.144 0.142 0.144 51.86 50 0.174 0.194 0.194 0.194 0.194 84.04 0.004 0.11 0.113 0.116 0.113 25 0.004 0.112 0.119 0.114 0.115 11.44 50 0.008 0.098 0.104 0.101 0.101 25.80 100 0.012 0.078 0.072 0.075 0.075 49.73 125 0.016 0.059 0.052 0.058 0.056 67.82 250 0.035 0.048 0.046 0.045 0.046 90.96 0.004 0.11 0.113 0.116 0.113 25 0.004 0.116 0.114 0.114 0.115 11.70 50 0.005 0.104 0.105 0.102 0.104 21.28 100 0.008 0.081 0.082 0.082 0.082 41.22 125 0.012 0.073 0.075 0.076 0.075 50.00 250 0.026 0.069 0.064 0.062 0.065 68.88 0.004 0.11 0.115 0.113 0.113 0.004 0.121 0.122 0.123 0.122 Thử không ZA-TP % Ức chế 0.126 Thử không ZA-D delta 0.123 Thử không ZA-C Sau biến tính 0.004 Thử khơng ZA-B Trước biến tính 2.5 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 5.85 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-149 0.014 0.117 0.121 0.119 0.119 16.22 12.5 0.025 0.105 0.108 0.107 0.107 34.84 25 0.041 0.085 0.081 0.083 0.083 66.49 50 0.083 0.098 0.098 0.098 0.098 88.03 delta % Ức chế MẪU ZA CHẤT TINH KHIẾT OD Nồng độ (μg/ml) Thử không ZA-2 0.123 0.126 0.127 0.125 2.5 0.004 0.116 0.119 0.115 0.117 10.11 0.004 0.109 0.101 0.105 0.105 19.41 12.5 0.004 0.068 0.065 0.062 0.065 51.33 25 0.004 0.039 0.037 0.039 0.038 72.61 50 0.005 0.005 0.006 0,009+ 0.006 99.60 0.004 0.11 0.113 0.116 0.113 2.5 0.004 0.123 0.123 0.123 0.123 5.05 0.004 0.116 0.114 0.115 0.115 11.44 12.5 0.004 0.097 0.094 0.095 0.095 27.13 25 0.004 0.076 0.076 0.076 0.076 42.55 50 0.005 0.065 0.061 0.064 0.063 53.46 0.004 0.11 0.113 0.116 0.113 2.5 0.004 0.111 0.114 0.115 0.113 12.77 0.004 0.097 0.094 0.095 0.095 27.13 12.5 0.004 0.067 0.064 0.065 0.065 51.06 25 0.004 0.046 0.046 0.046 0.046 66.49 50 0.005 0.035 0.031 0.034 0.033 77.39 Thử khơng ZA-12 Sau biến tính 0.004 Thử khơng ZA-4 Trước biến tính Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... ƣợc học cổ truyền, mã s? ??: 8720206 Tên đề tài: Nghiên cứu thành phần hóa học s? ?? tác d? ?ng sinh học Mu? ? ?ng tru? ?ng Zanthoxylum avicennae (Lam. ) DC Rutaceae Ng? ?ời hƣ? ?ng dẫn khoa học: TS Võ Văn Lẹo Học. .. chƣa có nghiên cứu tác d? ?ng dƣợc lý loài [11], [48], [80], [82] ể đ? ?ng góp mặt khoa học thực tiễn loài Mu? ? ?ng tru? ?ng, đề t i ? ?Nghiên cứu thành phần hóa học s? ?? tác d? ?ng sinh học Mu? ? ?ng tru? ?ng Zanthoxylum. .. [7] Một s? ?? thuốc có Mu? ? ?ng tru? ?ng [7]: - Viêm gan, v? ?ng da: rễ Mu? ? ?ng tru? ?ng, Ban, Nhân trần, Bồi ng? ?i, vị 15 g, s? ??c u? ?ng ngày - Đau nhức r? ?ng: rễ Mu? ? ?ng tru? ?ng, tách lấy vỏ rễ, rửa s? ??ch, nhai, ng? ??m