Nghiên cứu tinh sạch chondroitin sulfate bằng phương pháp hóa học và hóa lý

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA NGUYỄN THỊ LỆ VIÊN NGHIÊN CỨU TINH SẠCH CHONDROITIN SULFATE BẰNG PHƢƠNG PHÁP HÓA HỌC VÀ HÓA LÝ Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số: 60540101 LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng 07 năm 2018 CƠNG TRÌNH ĐƢỢC HỒN THÀNH TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA –ĐHQG -HCM Cán hƣớng dẫn khoa học: GS TS Đống Thị Anh Đào Cán chấm nhận xét 1: TS Lê Ngọc Liễu Cán chấm nhận xét 2: TS Nguyễn Hoài Hƣơng Luận văn thạc sĩ đƣợc bảo vệ Trƣờng Đại học Bách Khoa, ĐHQG TP HCM Thời gian: Ngày 17 tháng 07 năm 2018 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: Chủ tịch Hội đồng Phản biện Phản biện Ủy viên Ủy viên : PGS.TS Lê Nguyễn Đoan Duy : TS Lê Ngọc Liễu : TS Nguyễn Hoài Hƣơng : TS Trần Thị Thu Trà : TS Trần Thị Ngọc Yên Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá LV Trƣởng Khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn đƣợc sửa chữa (nếu có) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƢỞNG KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên : Nguyễn Thị Lệ Viên Ngày, tháng, năm sinh : 01/07/1994 Chuyên ngành : Công nghệ thực phẩm MSHV : 1770308 Nơi sinh Mã số : Phú Yên : 60540101 I TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu tinh Chondroitin Sulfate phƣơng pháp hóa học hóa lý II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: ˗ Tổng quan tài liệu Chondroitin Sulfate, nguyên liệu sụn ức gà; phƣơng pháp siêu âm, enzyme dùng việc thủy phân để thu nhận dung dịch Chondroitin Sulfate thơ; phƣơng pháp lọc màng hóa học để tinh ˗ Phân tích số thành phần hóa học sụn ức gà ˗ Khảo sát phƣơng pháp xử lý nguyên liệu sụn: hóa học (NaOH), sinh học (enzyme Alcalase), vật lý (chần) ˗ Thiết lập quy trình cơng nghệ trích ly, khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến thu nhận dung dịch Chondroitin Sulfate thô từ sụn ức gà phƣơng pháp vật lý (sóng siêu âm) sinh học (chế phẩm enzyme: Alcalase) ˗ Tối ƣu hóa q trình thu nhận dung dịch Chondroitin Sulfate thô ˗ Thiết lập quy trình cơng nghệ, khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến trình tinh Chondroitin Sulfate phƣơng pháp lọc màng hóa học ˗ Tối ƣu hóa trình tinh Chondroitin Sulfate ˗ Đánh giá chất lƣợng bột CS sau tinh phƣơng pháp: HPLC, GPC, SEM, FTIR III NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: 15/01/2018 IV NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 01/07/2018 V CÁN BỘ HƢỚNG DẪN: GS TS Đống Thị Anh Đào Tp HCM, ngày 01 tháng 07 năm 2018 CÁN BỘ HƢỚNG DẪN (Họ tên chữ ký) CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO (Họ tên chữ ký) TRƢỞNG KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC (Họ tên chữ ký) LỜI CẢM ƠN Để hồn thành tốt cơng trình nghiên cứu khoa học này, lời xin chân thành cảm ơn Bộ môn Công nghệ thực phẩm, Khoa Kỹ thuật hóa học, Trƣờng Đại học Bách khoa TP Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn quý thầy cô Bộ môn Công nghệ thực phẩm truyền đạt kiến thức bổ ích giải đáp thắc mắc suốt thời gian học Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn tri ân sâu sắc đến cô GS.TS Đống Thị Anh Đào giao cho tơi đề tài này, dẫn tận tình, định hƣớng rõ ràng để tìm phƣơng pháp giải vấn đề cách khoa học hiệu Tôi xin chân thành cảm ơn cô Nguyễn Thị Ngun – Quản lý phịng thí nghiệm B10 tạo điều kiện sở vật chất, trang thiết bị để tơi tiến hành thí nghiệm luận văn Bên cạnh đó, tơi xin cảm ơn anh chị, bạn học viên cao học, em sinh viên K13 gắn bó giúp đỡ tơi nhiều Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè hỗ trợ, khích lệ tinh thần bên cạnh tơi lúc khó khăn Kính chúc sức khỏe đến q thầy cơ, gia đình bạn bè Trân trọng cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, ngày 01 tháng 07 năm 2018 Học viên thực Nguyễn Thị Lệ Viên TÓM TẮT Glycosaminoglycans (GAGs) hợp chất hữu thuộc nhóm mucopolysaccharide, tham gia vào hoạt động cấu tạo mơ sụn, đƣợc thu nhận từ mô sụn động vật nhƣ sụn cá mập, sụn gà, cá nhám… Trong GAGs chứa lƣợng lớn Chondroitin sulfate (CS) có tác dụng phịng ngừa hỗ trợ điều trị bệnh khớp Do việc trích ly thu nhận CS từ nguồn phụ phẩm ngành công nghiệp giết mổ gia súc, gia cầm cần thiết nhằm thay hàng ngoại nhập Sau xử lý sụn gà dung dịch NaOH 0,05M 30oC vòng giờ, tiến hành thủy phân sụn ức gà enzyme Alcalase pH = 7,5; hàm lƣợng enzyme/cơ chất = 3,58 % w/wpro; nhiệt độ = 55oC; thời gian = 198 phút hiệu suất thu hồi GAGs cao đạt đƣợc 22,02% so với chất khơ ngun liệu Sau tiến hành q trình tinh phƣơng pháp hóa học: nồng độ CPC = 1,4% (w/wdd); nồng độ NaCl = 2,57M, nồng độ KSCN = 1,5% (w/wdd) hiệu suất thu hồi CS đạt đƣợc 22,68% (so với chất khô nguyên liệu ban đầu) Mẫu sau sấy phun, phân tích thành phần theo phƣơng pháp HPLC: hàm ẩm đạt 8,47%, protein đạt 2,2%, hàm lƣợng tro đạt 22% độ tinh mẫu đạt 97,8% Các kết phù hợp với điều kiện tiêu chuẩn USP – 39 Bên cạnh đó, mẫu sản phẩm đƣợc tiến hành xác định KLPT phƣơng pháp GPC: 157000 Da, kết chạy FTIR mẫu CS thu đƣợc có độ tƣơng đồng 97,94% so với mẫu chuẩn CS4 Từ khóa: Glycosaminoglycans,Chondroitin sulfate, sụn ức gà, thủy phân LỜI CAM ĐOAN Tác giả xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thân suốt thời gian tiến hành thí nghiệm Các kết nghiên cứu kết luận luận văn trung thực, không chép từ nguồn dƣới hình thức Việc tham khảo tài liệu liên quan đƣợc trích dẫn nguồn cụ thể rõ ràng theo u cầu trích dẫn tài liệu tham khảo Tơi xin cam đoan! Tác giả luận văn Nguyễn Thị Lệ Viên MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CHƢƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Nội dung nghiên cứu 1.5 Ứng dụng Chƣơng 2: Tổng quan 2.1 Tổng quan Chondroitin sulfate 2.1.1 Đặc điểm cấu trúc CS 2.1.2 Phân loại CS 2.1.3 Nguồn gốc 2.1.4 Ứng dụng CS 2.1.5 Thu nhận định lƣợng Chondroitin sulfate 12 2.1.6 Các nghiên cứu CS 14 2.2 Sụn ức gà 15 2.3 Chăn nuôi Việt Nam 16 2.3.1 Tình hình chăn ni 16 2.3.2 Tình hình tiêu thụ thịt gà Việt Nam 17 2.3.3 Phụ phẩm từ chế biến gà thịt 18 2.4 Tổng quan phƣơng pháp thu nhận CS thô 18 2.4.1 Ứng dụng sóng siêu âm thu nhận CS thô 18 2.4.2 Ứng dụng hệ enzyme protease để thu nhận CS thô 20 2.5 Tổng quan phƣơng pháp tinh từ dung dịch CS thô 23 2.5.1 Ứng dụng phƣơng pháp lọc màng để tinh CS 23 Chƣơng 3: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 3.1 Nguyên liệu 33 3.1.1 Sụn ức gà 33 3.1.2 3.2 Chế phẩm enzyme Alcalase 33 Hóa chất thiết bị 34 3.2.1 Hóa chất phân tích 34 3.2.2 Thiết bị 34 3.2.3 Dụng cụ 35 3.3 Sơ đồ nghiên cứu thu nhận CS 35 3.3.1 Sơ đồ nghiên cứu thu nhận CS thô 36 3.3.2 Sơ đồ nghiên cứu thu nhận CS tinh 37 3.4 Quy trình thu nhận CS 38 3.4.1 Quy trình thu nhận CS thô 38 3.4.2 Quy trình thu nhận CS tinh 42 3.4.3 Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm 44 3.4.4 Phƣơng pháp xử lí số liệu 55 3.4.5 Các phƣơng pháp phân tích cơng thức tính tốn 55 Chƣơng 4: Kết bàn luận 59 4.1 Thành phần sụn ức gà 59 4.2 Khảo sát trình xử lý sụn ức gà 60 4.2.1 Xử lí sụn ức gà dung dịch NaOH 60 4.2.2 Xử lí sụn ức gà chế phẩm enzyme 62 4.2.3 Xử lí sụn ức gà q trình nhiệt 64 4.3 Kết bàn luận phƣơng pháp thu nhận CS thô 65 4.3.1 Phƣơng pháp sử dụng sóng siêu âm 65 4.3.2 Ứng dụng thủy phân sụn ức gà enzyme Alcalase 70 4.4 Tối ƣu hóa điều kiện thủy phân chế phẩm enzyme Alcalase 77 4.5 Xác định thành phần nguyên liệu bột CS thô 82 4.6 Kết bàn luận phƣơng pháp tinh CS 83 4.6.1 Phƣơng pháp lọc màng qui mô PTN 83 4.6.2 Tinh phƣơng pháp hóa học 98 4.7 Tối ƣu hóa trình tinh 104 4.8 Đánh giá chế phẩm CS thu đƣợc sau tinh phƣơng pháp hóa học 111 4.8.1 Kết phân tích hàm lƣợng mẫu CS thu đƣợc sau tinh 111 4.8.2 Cấu trúc bề mặt Chondroitin sulfate 112 4.8.3 Kết đo KLPT GPC 112 4.8.4 Kết chạy FTIR 113 Chƣơng 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 114 5.1 Kết luận 114 5.1.1 Về mặt khoa học 114 5.1.2 Về mặt ứng dụng 114 5.2 Đề nghị 115 TÀI LIỆU THAM KHẢO 116 PHỤ LỤC A CÁC PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 121 B CÁC GIÁ TRỊ PHÂN TÍCH THỰC NGHIỆM 134 C CÁC BẢNG THỐNG KÊ 162 10 X 19.5967 C.9 Ảnh hƣởng pH đệm đến trình thủy phân sụn ức gà chế phẩm Alcalase Source Between groups Within groups Total (Corr.) pH Count 5.5 6.5 7.5 Sum of Squares 184.782 3.66934 188.452 Mean 11.3225 12.6 13.6333 14.9733 16.9167 17.77 20.2033 Df 14 20 Mean Square 30.797 0.262096 F-Ratio 117.50 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X X C.10 Ảnh hƣởng nhiệt độ đến trình thủy phân sụn ức gà chế phẩm Alcalase Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 153.268 3.891 157.159 nhiet (oC) 40 65 45 60 50 55 Count 3 3 3 Df 12 17 Mean 12.7833 14.4867 14.9733 17.4067 19.5967 21.0567 Mean Square 30.6536 0.32425 F-Ratio 94.54 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X C.11 Ảnh hƣởng hàm lƣợng enzyme/cơ chất đến trình thủy phân sụn ức gà Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 120.264 2.7388 123.003 Df 10 14 Nồng độ enyme/cơ Count Mean chất (w/wpro) Mean Square F-Ratio 30.0659 109.78 0.27388 Homogeneous Groups 166 P-Value 0.0000 3 3 12.9067 15.22 18.1333 18.62 21.0533 X X X X X C.12 Ảnh hƣởng thời gian trình thủy phân sụn ức gà đến hiệu suất thu hồi GAGs Source Sum of Squares Between groups 670.251 Within groups 3.5448 Total (Corr.) 673.796 thoi gian (giờ) Count Mean 5.16333 8.38 15.5833 18.6233 19.3533 19.4733 3 20.5733 Df 14 20 Mean Square 111.709 0.2532 F-Ratio 441.19 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X X C.13 Độ phân riêng CS qua màng Source Between groups Within groups Total (Corr.) Các loại màng PS20 PS10 NF SWHR Sum of Squares 1066.12 26.3186 1092.44 Count 3 3 Df 11 Mean 70.37 79.28 89.4253 94.9043 Mean Square 355.374 3.28982 F-Ratio 108.02 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X C.14 Độ phân riêng Protein qua màng Source Between groups Within groups Total (Corr.) Loại màng PS20 PS10 Sum of Squares 6401.64 3.9982 6405.64 Count 3 Df 11 Mean Square F-Ratio 2133.88 4269.68 0.499775 Mean 32.21 55.6 Homogeneous Groups X X 167 P-Value 0.0000 NF SWHR 3 X 76.58 93.93 X C.15 Thơng lƣợng dịng qua màng Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 96.6174 0.4802 97.0976 Loại màng SWHR NF PS10 PS20 Count 3 3 Df 11 Mean Square F-Ratio 32.2058 536.54 0.060025 P-Value 0.0000 Mean Homogeneous Groups 7.15333 X 8.97667 X X 9.38 X 14.7633 C.16 Độ phân riêng CS theo áp suất PS10 Source Sum of Squares Between groups 159.566 Within groups 35.195 Total (Corr.) 194.761 Áp suất (Psi) Count Mean 500 73.2367 400 77.69 300 79.28 100 81.5133 200 82.4633 PS20 source Between groups Within groups Total (Corr.) Áp suất (psi) 500 400 300 200 100 NF Sum of Squares 56.883 41.9366 98.8196 Count 3 3 Mean 65.5963 67.506 68.779 69.7337 71.325 Df Mean Square F-Ratio 39.8915 11.33 10 3.5195 14 Homogeneous Groups X X XX X X P-Value 0.0010 Df 10 14 P-Value 0.0534 Mean Square F-Ratio 14.2207 3.39 4.19366 Homogeneous Groups X XX XXX XX X 168 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Áp suất (psi) 100 200 500 300 400 SWHR Source Between groups Within groups Total (Corr.) Áp suất (psi) 500 300 400 200 100 Sum of Squares 20.2867 7.15348 27.4401 Count 3 3 Mean 86.8217 87.4003 87.545 89.4253 89.7147 Df 10 14 Mean 96.1773 96.1773 96.1773 96.8137 97.4503 F-Ratio 7.09 P-Value 0.0057 F-Ratio 0.21 P-Value 0.9267 Homogeneous Groups X X X X X Sum of Squares 3.88902 46.1876 50.0766 Count 3 3 Mean Square 5.07167 0.715348 Df 10 14 Mean Square 0.972254 4.61876 Homogeneous Groups X X X X X C.17 Độ phân riêng Protein qua màng theo áp suất PS10 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Áp suất (psi) 500 400 300 200 100 PS20 Source Between groups Within groups Sum of Squares 180.782 22.5925 203.375 Count 3 3 Mean 51.7467 54.9133 56.43 58.1367 62.2133 Df 10 14 Mean Square F-Ratio 45.1955 20.00 2.25925 P-Value 0.0001 Homogeneous Groups X X XX X X Sum of Squares Df 251.097 16.7714 10 Mean Square 62.7743 1.67714 169 F-Ratio 37.43 P-Value 0.0000 Total (Corr.) Áp suất (psi) 500 300 400 200 100 NF Source Between groups Within groups Total (Corr.) Áp suất (psi) 500 400 300 200 100 RO Source Between groups Within groups Total (Corr.) Áp suất (psi) 200 400 500 300 100 267.868 Count 3 3 14 Mean 31.0867 33.47 33.6733 39.3 42.0733 Sum of Squares 103.808 9.11507 112.923 Count 3 3 Mean 70.0033 73.47 74.8067 76.5767 77.4867 Sum of Squares 1.10289 0.6708 1.77369 Count 3 3 Mean 92.4933 92.55 92.7 92.9433 93.2267 Homogeneous Groups X X X X X Df 10 14 Mean Square 25.9521 0.911507 F-Ratio 28.47 P-Value 0.0000 F-Ratio 4.11 P-Value 0.0318 Homogeneous Groups X X X X X Df 10 14 Mean Square 0.275723 0.06708 Homogeneous Groups X X X XX X C.18 Thơng lƣợng dịng qua màng theo áp suất PS10 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Áp suất (psi) Sum of Squares 24.9905 1.9508 26.9413 Count Df 10 14 Mean Mean Square 6.24763 0.19508 F-Ratio 32.03 Homogeneous Groups 170 P-Value 0.0000 200 100 300 400 500 3 3 10.0233 10.04 10.7867 11.82 13.4467 X X X X X PS20 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 62.9418 2.63653 65.5783 Áp suất (psi) 100 200 300 400 500 NF Count 3 3 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 25.7084 0.900133 26.6085 Áp suất (psi) 100 200 300 400 500 RO Count 3 3 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 9.84233 0.5336 10.3759 Áp suất (psi) 200 100 300 400 500 Count 3 3 Df 10 14 Mean 14.99 15.28 16.9767 18.7067 20.38 Df 10 14 Mean 6.75333 7.63333 8.97667 9.81667 10.2233 Df 10 14 Mean 6.79 6.91333 7.15333 8.57667 8.6 Mean Square 15.7354 0.263653 F-Ratio 59.68 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X Mean Square 6.42709 0.0900133 F-Ratio 71.40 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X Mean Square 2.46058 0.05336 F-Ratio 46.11 Homogeneous Groups X X X X X 171 P-Value 0.0000 C.19 Độ phân riêng CS qua màng theo thời gian lọc PS10 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 269.164 36.1436 305.308 thoi gian (phút) 30 60 120 180 240 300 360 420 600 480 PS20 Count 3 3 3 3 3 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 468.218 121.557 589.776 thoi gian (phút) 120 60 180 30 240 300 360 420 480 600 NF Count 3 3 3 3 3 Source Between Sum Squares 104.864 Df 20 29 Mean Square F-Ratio 29.9071 16.55 1.80718 Mean 79.28 82.7833 82.97 83.3233 83.5433 84.1867 87.84 88.07 88.4167 88.6467 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Df 20 29 Mean Square 52.0243 6.07787 Mean 65.5963 67.1877 67.506 70.37 71.6433 73.5527 75.144 75.7807 76.0987 77.0537 of Df Mean Square 11.6515 F-Ratio 8.56 Homogeneous Groups X XX XXX XXX XXX XXX XX XX X X F-Ratio P-Value 32.57 0.0000 172 P-Value 0.0000 groups Within groups 7.15377 Total (Corr.) 112.018 thoi gian (phút) 120 60 30 180 240 300 480 600 420 360 SWHR Source Between groups Within groups Total (Corr.) thoi gian (phút) 30 60 120 180 300 600 240 420 360 480 20 0.357688 29 Count 3 3 3 3 3 Sum of Squares 31.1157 55.9006 87.0163 Count 3 3 3 3 3 Mean 86.0983 86.9663 89.4253 89.8593 90.7267 91.1607 91.1607 91.3053 91.3053 91.884 Df 20 29 Homogeneous Groups X X X XX XX XX XX XX XX X Mean Square 3.4573 2.79503 Mean 94.9043 95.5407 96.1773 96.8137 97.4503 97.4503 97.4503 97.4503 98.0867 98.087 F-Ratio 1.24 P-Value 0.3282 Homogeneous Groups X XX XX XX XX XX XX XX X X C.20 Độ phân riêng Protein qua màng theo thời gian lọc PS10 Source Between groups Within groups Total (Corr.) thoi gian (phút) Sum of Squares 311.403 40.8392 352.242 Df 20 29 Coun Mean t Mean Square 34.6003 2.04196 F-Ratio 16.94 Homogeneous Groups 173 P-Value 0.0000 600 480 420 360 180 300 240 120 60 30 3 3 3 3 3 X X XX XXX XX X XX XX XX X 46.4733 46.5967 46.9433 48.3033 49.26 49.93 50.4133 52.5433 54.38 56.43 PS20 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 282.632 22.2611 304.893 Df 20 29 Mean Square 31.4036 1.11305 F-Ratio 28.21 P-Value 0.0000 thoi gian (phút) Count Mean Homogeneous Groups 600 480 420 360 300 180 240 120 60 30 3 3 3 3 3 X X X XX XX XX X 24.2833 24.2867 24.65 25.73 26.7667 28.47 28.8 30.91 31.1133 33.47 X X X NF Source Between groups Within groups Total (Corr.) thoi gian (phút) 420 600 360 300 480 240 180 120 Sum of Squares 274.543 68.4845 343.028 Count 3 3 3 3 Df 20 29 Mean 65.6967 66.1033 66.9167 67.3533 67.9767 68.7633 70.0267 71.8967 Mean Square 30.5048 3.42422 F-Ratio 8.91 Homogeneous Groups X X XX XX XX XXX XX XX 174 P-Value 0.0000 60 30 3 X X 73.6833 74.8067 SWHR ANOVA Table for HL CS by thoi gian Source Sum of Squares Df Between groups 148.004 Within groups 13.6125 20 Total (Corr.) 161.617 29 Mean Square 16.4449 0.680627 thoi gian (phút) 600 120 360 240 420 300 480 30 180 60 Homogeneous Groups X XX XX XX XXX XXX XX X X X Count 3 3 3 3 3 Mean 90.7733 91.07 91.2433 91.3433 91.71 91.83 92.4 92.9433 96.96 97.0567 F-Ratio 24.16 P-Value 0.0000 C.21 Thơng lƣợng dịng qua màng theo thời gian lọc PS10 Source Between groups Within groups Total (Corr.) thoi gian (phút) 600 480 420 360 300 240 180 120 30 60 PS20 Source Sum of Squares 91.7729 0.890533 92.6635 Count 3 3 3 3 3 Df 20 29 Mean 4.29 5.25 5.72 6.43333 6.71667 7.56333 8.59667 8.75 9.38 9.66667 Sum of Squares Df Mean Square 10.197 0.0445267 F-Ratio 229.01 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Mean Square 175 F-Ratio P-Value Between groups 357.407 Within groups 1.147 Total (Corr.) 358.554 thoi gian (phút) 600 480 420 360 300 240 180 120 30 60 NF Source Between groups Within groups Total (Corr.) thoi gian (phút) 600 480 420 360 300 240 180 120 30 60 SWHR Source Between groups Within groups Total (Corr.) thoi gian (phút) 600 480 Count 3 3 3 3 3 20 29 Mean 4.54 5.51667 6.12 6.70667 7.69667 8.07667 9.47 10.6933 14.7633 14.91 Sum of Squares 181.889 1.18433 183.073 Count 3 3 3 3 3 Mean 3.1 3.79667 4.46333 4.99667 5.42667 5.45 6.17667 9.68667 9.81667 10.0033 Sum of Squares 112.044 0.468333 112.512 Count 3 39.7119 0.05735 692.45 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Df 20 29 Mean Square 20.2099 0.0592167 F-Ratio 341.29 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Df 20 29 Mean 2.73 3.36 Mean Square 12.4493 0.0234167 F-Ratio 531.64 Homogeneous Groups X X 176 P-Value 0.0000 420 360 300 240 180 120 60 30 3 3 3 3 X 3.73667 4.10667 4.12333 4.83 5.42 6.18667 8.49 8.57667 X X X X X X X C.21 Ảnh hƣởng pH dung dịch đến hàm lƣợng CS tinh pH Count Average Standard deviation 3 5.29667 0.265581 15.74 0.697209 22.8167 0.93179 13.9533 0.531162 5.65667 0.178979 Total 15 12.6927 6.84632 Source Between groups Within groups Total (Corr.) pH Coeff of variation Minimum Maximum 5.01412% 4.42953% 4.08381% 3.80671% 3.16403% 53.9392% Sum of Squares 652.731 3.47807 656.209 Count 3 3 Df 10 14 4.99 14.98 21.8 13.34 5.45 4.99 5.45 16.35 23.63 14.26 5.76 23.63 Mean Square 163.183 0.347807 F-Ratio 469.18 Mean 5.29667 5.65667 13.9533 15.74 22.8167 Range Stnd skewness 0.46 -1.22474 1.37 -0.652896 1.83 -0.6613 0.92 -1.22474 0.31 -1.22474 18.64 0.407549 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X C.22 Ảnh hƣởng nồng độ CPC dung dịch đến hàm lƣợng CS tinh Nồng độ 0.5 1.5 2.5 Total Count Average Standard deviation 14.4633 0.352184 17.3267 0.704367 23.18 0.883346 20.0167 0.915005 10.6967 0.352184 15 17.1367 4.51301 Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness 2.43501% 14.26 14.87 0.61 1.22474 4.06522% 16.92 18.14 1.22 1.22474 3.81081% 22.67 24.2 1.53 1.22474 4.57121% 19.1 20.93 1.83 -0.0115917 3.29246% 10.29 10.9 0.61 -1.22474 26.3354% 10.29 24.2 13.91 -0.123378 177 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Nồng độ (%) 2.5 0.5 1.5 Sum of Squares 280.418 4.72347 285.142 Count 3 3 Df 10 14 Mean Square 70.1045 0.472347 Mean 10.6967 14.4633 17.3267 20.0167 23.18 F-Ratio 148.42 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X C.23 Ảnh hƣởng nồng độ NaCl dung dịch đến hàm lƣợng CS tinh Nồng độ (%) Count Average Standard deviation 7.33333 0.092376 1.5 13.6033 0.455009 17.9367 0.704367 2.5 22.6133 0.704367 3 21.5967 0.352184 3.5 19.1567 0.352184 Total 18 17.04 5.38151 Source Between groups Within groups Total (Corr.) Nồng độ (%) 1.5 3.5 2.5 Sum of Squares 489.419 2.9118 492.331 Count 3 3 3 Df 12 17 Coeff of variation 1.25967% 3.34484% 3.92697% 3.11483% 1.63073% 1.83844% 31.5816% Minimum Maximum Range 7.28 13.15 17.53 21.8 21.19 18.75 7.28 0.16 0.91 1.22 1.22 0.61 0.61 15.74 Mean Square 97.8838 0.24265 7.44 14.06 18.75 23.02 21.8 19.36 23.02 F-Ratio 403.39 P-Value 0.0000 Mean Homogeneous Groups 7.33333 X 13.6033 X X 17.9367 X 19.1567 X 21.5967 X 22.6133 C.24 Ảnh hƣởng nồng độ KSCN dung dịch đến hàm lƣợng CS tinh Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 473.29 2.66373 475.954 Df 10 14 Mean Square 118.322 0.266373 178 F-Ratio 444.20 P-Value 0.0000 Stnd skewness 1.22474 0.0233095 1.22474 -1.22474 -1.22474 -1.22474 -1.47992 Nồng độ (%) 0.5 1.5 2.5 Count 3 3 Mean 7.33333 13.6033 17.9367 21.5967 22.6133 Homogeneous Groups X X X X X 179 180 ... dung dịch Chondroitin Sulfate thô; phƣơng pháp lọc màng hóa học để tinh ˗ Phân tích số thành phần hóa học sụn ức gà ˗ Khảo sát phƣơng pháp xử lý nguyên liệu sụn: hóa học (NaOH), sinh học (enzyme... 2.1.5.1 Các phương pháp thu nhận Chondroitin sulfate thô Chế phẩm CS thơ từ sụn đƣợc thu nhận phƣơng pháp hóa học, vật lý phƣơng pháp hóa sinh - Theo phƣơng pháp hố học: mơ sụn đƣợc xử lý nƣớc nóng,... phƣơng pháp: hóa học, hóa sinh vật lý - Khảo sát trình thu nhận CS thơ phƣơng pháp vật lý hóa sinh Sau tiến hành tối ƣu hóa điều kện thu nhận CS thô tốt - Khảo sát trình tinh thu nhận CS phƣơng pháp