Đề cương Miên dịch học

+Hoạt hoá bổ thể theo con đường cổ điển. +Có thụ thể giành cho phần Fc trên bề mặt tế bào đại thực bào, B/c trung tính. +Có khả năng vượt qua nhau thai để vào máu thai nhi. Nhờ đó kháng [r]

ĐỀ CƯƠNG MIỄN DỊCH CÂU 1: Miễn dịch gì? trình bày hiểu biết miễn dịch tiếp thu chủ động ? CÂU 2: Miễn dịch ?Trình bày hiểu biết MD tiếp thu bị động ?

CÂU 3: Thế MD tiếp thu ? So sánh MD tiếp thu chủ động nhân tạo MD tiếp thu bị động nhân tạo

CÂU 4: Thế MD ko đặc hiệu, MD đặc hiệu,MD dịch thể MD qua trung gian tế bào ?

CÂU 5: MD ko đặc hiệu thể gồm yếu tố bảo vệ nào? Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào vật lý

CÂU 6: Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào vật lý. CÂU 7: Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào hóa học? CÂU 8: Trình bày vtro bảo vệ thể hàng rào TB?

CÂU 9: Miễn dịch đặc hiệu khác so với Miễn dịch ko đặc hiệu?

CÂU 10: Kháng nguyên gì, trình bày hai đặc tính kháng nguyên? CÂU 11: Kháng ngun gì? Các đặc tính phụ kháng nguyên?

CÂU 12: Các loại kháng nguyên vi khuẩn ?

CÂU 13: Kháng nguyên gì? Trình bày hiểu biết kháng nguyên phù hợp tổ chức chủ yếu?

CÂU 14: Trình bày hiểu biết tuyến ức?

CÂU 15: Trình bày hiểu biết tủy xương, bursal fabricius? CÂU 16: Trình bày hiểu biết quan limpho ngoại vi? CÂU 17: Trình bày hiểu biết tế bàolympho T?

CÂU 18: Trình bày hiểu biết tế bào lympho B CÂU 19: Tế bào trình diện kháng nguyên?

CÂU 20: Quá trình đáp ứng miễn dịch đặc hiệu có giai đoạn ? Trình bày giai đoạn 2(giai đoạn nhận diện kháng nguyên)

CÂU 21: Trình giai đoạn trình đáp ứng miễn dịch đặc hiệu (Giai đoạn: giai đoạn cảm ứng)

CÂU 22: Kháng thể dịch thể đặc hiệu?

CÂU 23: Đặc tính chức kháng thể dịch thể đặc hiệu? CÂU 24: Các lớp kháng thể dịch thể?

CÂU 25: Quy luật hình thành kháng thể dịch thể đặc hiệu?

CÂU 26: Các yếu tố ảnh hưởng đến hình thành kháng thể đặc hiệu: CÂU 27: Phản ứng ngưng kết:

CÂU 28: Phản ứng kết tủa (Precipitation test)

CÂU 29: Phản ứng kết hợp bổ thể (Phản ứng cố định bổ thể, phản ứng tiêu thụ bổ thể) CÂU 30: Phản ứng trung hoà (Neutralization test)

CÂU 31+32: Phản ứng miễn dịch huỳnh quang (Immuno - fluorescent - test) IF: CÂU 33: Phản ứng miễn dịch gắn enzim (Enzim linked Immuno Sorbent Assay): CÂU 34: Dung nạp miễn dịch:

CÂU 35: Tự miễn dịch (autoimmunity)

CÂU 36: Suy giảm miễn dịch (immuno deficisucy) CÂU 37: Quá mẫn

CÂU 38: Hiểu biết phản ứng Sandwich Elisa (Sandwich Elisa trực tiếp, Sandwich Elisa gián tiếp). CÂU 39:Hiểu biết phản ứng Elisa cạnh tranh (để phát kháng nguyên để phát kháng thể).

CÂU 1: Miễn dịch gì? trình bày hiểu biết miễn dịch tiếp thu chủ động ? 1/ Miễn dịch :

-Là trạng thái đặc biệt thể không mắc phải tác động có hại yếu tố gây bệnh : VSV, chất độc chúng tiết chất lạ khác.Trong thể lồi khác loài bị tác động điều kiện sống lây bệnh tương tự

- Có thể nói miễn dịch khả tự vệ thể, khả nhận loại trừ vật lạ khỏi thể - Gồm miễn dịch tự nhiên ( MD k đặc hiệu) miễn dịch thu ( MD đặc hiệu)

- Khả MD thể liên quan tới : Cơ hoạt động thể, đặc tính mầm bệnh, điều kiện ngoại cảnh Vì tính MD thể mức độ khác :

+ Cơ thể có mức độ MD cao : mầm bệnh xâm nhập không gây bệnh, mầm bệnh bị loại trừ

+ Cơ thể có mức độ MD thấp : Mầm bệnh gây bệnh biểu bệnh lý mức định

+ Cơ thể khơng có MD :mầm bệnh gây đc bệnh với triệu chứng, bệnh tích điển hình, thể bị đầu độc, phá hủy dẫn đến tử vong

2/ MD tiếp thu chủ động :

- Là loại MD hệ thống MD thể sinh sau tiếp xúc với VSV gây bệnh sau tiêm vacxin - Có loại :

* MD tiếp thu chủ động tự nhiên : Là loại MD thể có sau tình cờ tiếp xúc với mầm bệnh, bị bệnh qua khỏi VD : Gà bị mắc Newcastle qua khỏi có MD

Ngồi q trình sống thể nhiều lần bị nhiễm lượng nhỏ tác nhân gây bệnh ( bạch cầu, ho gà ) nên tạo MD với bệnh dù khơng có triệu trứng mắc bệnh

* MD tiếp thu chủ động nhân tạo :Là loại MD thể có đc người chủ động đưa vacxin vào thể để thể chủ động tạo MD

Đây hình thức tập dượt cho thể để thể có sức chống đỡ lại yếu tố gây bệnh chúng xâm nhập

ƯD : dùng vacxin phòng bệnh cho người, gia súc.Đây biện pháp nhất, chủ động để khống chế, toán bệnh truyền nhiễm

CÂU : Miễn dịch ?Trình bày hiểu biết MD tiếp thu bị động ? 1/ Miễn dịch :

-Là trạng thái đặc biệt thể khơng mắc phải tác động có hại yếu tố gây bệnh : VSV, chất độc chúng tiết chất lạ khác.Trong thể lồi khác loài bị tác động điều kiện sống lây bệnh tương tự

- Có thể nói miễn dịch khả tự vệ thể, khả nhận loại trừ vật lạ khỏi thể - Gồm miễn dịch tự nhiên ( MD k đặc hiệu) miễn dịch thu ( MD đặc hiệu)

- Khả MD thể liên quan tới : Cơ hoạt động thể, đặc tính mầm bệnh, điều kiện ngoại cảnh Vì tính MD thể mức độ khác :

+ Cơ thể có mức độ MD cao : mầm bệnh xâm nhập không gây bệnh, mầm bệnh bị loại trừ

+ Cơ thể có mức độ MD thấp : Mầm bệnh gây bệnh biểu bệnh lý mức định

+ Cơ thể khơng có MD :mầm bệnh gây đc bệnh với triệu chứng, bệnh tích điển hình, thể bị đầu độc, phá hủy dẫn đến tử vong

2/ MD tiếp thu bị động :

-Trạng thái MD mà thể có đc khơng phải thể tạo mà đc cung cấp từ bên vào - Gồm loại :

* MD tiếp thu bị động tự nhiên : loại MD thể có đc kháng thể đặc hiệu từ mẹ truyền sang cho cách tự nhiên VD : Gia súc non trẻ sơ sinh nhận đc kháng thể đặc hiệu từ mẹ qua thai bú sữa đầu.Gia cầm non nhận đc kháng thể đặc hiệu từ mẹ qua lòng đỏ trứng

+ MD giúp cho thể non đề kháng đc với tác nhân gây bệnh có thời gian tồn ngắn + Lớp kháng thể đặc hiệu từ mẹ truyền cho thuộc lớp IgG

+ ứng dụng :Cho gia súc non or trẻ sơ sinh bú sữa đầu ( trẻ < tháng bị sởi).Gia cầm MD kéo dài đến 21 ngày tuổi, lợn khoảng 60 ngày

*MD tiếp thu bị động nhân tạo : Là loại MD thể có đc sau người chủ động đưa vào thể lượng kháng thể đặc hiệu.Kháng thể đặc hiệu có sẵn máu đv mắc bệnh qua khỏi vật đc tiêm vacxin.Người ta lấy máu thể đv chắt lấy huyết thanh.Trong huyết có kháng thể nên gọi kháng huyết

+Dùng kháng huyết để tạo MD phịng bệnh chữa bệnh +MD xuất sau tiêm kháng huyết vào thể +Thời gian MD tồn ngắn 3-4 ngày ko tuần

+ Đây hình thức chi viện tạm thời giúp thể chống lại xâm nhập ạt mầm bệnh

CÂU : Thế MD tiếp thu ? So sánh MD tiếp thu chủ động nhân tạo MD tiếp thu bị động nhân tạo 1/ MD tiếp thu :

- Là MD thu đc trình sống sau khi:tiếp xúc với vsv gây bệnh qua khỏi, sau tiêm vacxin, sau tiêm huyết MD

MD tiếp thu chủ động nhân tạo MD tiếp thu bị động nhân tạo Cơ thể huy động quan MD sx kháng thể đặc hiệu tạo

MD Cơ thể ko sx kháng thể đặc hiệu MD có đc đưa kháng thể đặc hiệu từ vào Trạng thái MD xuất muộn sau tiêm vacxin

5-14 ngày MD xuất sau tiêm kháng huyết

3 MD trì vài tháng, vài năm MD ngắn ko tuần

4 Liều lượng vacxin 1-5ml Liều lượng huyết nhiều từ 25-250ml

5 Chủ yếu để phòng bệnh Chủ yếu để chữa bệnh

6 Sau tiêm vacxin có phản ứng Sau tiêm huyết có tượng chống, q mẫn

CÂU : Thế MD ko đặc hiệu, MD đặc hiệu,MD dịch thể MD qua trung gian tế bào ? 1/MD ko đặc hiệu:

-Là khả bảo vệ tự nhiên thể chống lại tác động có hại tác nhân gây hại -VD: vai trò bảo vệ thể da, niêm mạc, dịch tiết tuyến, tế bào thực bào

2/MD đặc hiệu:

-Là khả MD thể chống lại loại mầm bệnh định -Khả MD kháng thể đặc hiệu định

3/MD dịch thể:

-Trong MD vai trò chủ yếu tế bào LymphoB bị kích thích (kháng nguyên, IL 2,3,4,5,6)

-Lympho B biệt hóa > thành tương bào (plasma) sản xuất kháng thể dịch thể đặc hiệu (γglobulin MD IgG) -Chính γGlobulin MD đảm nhận chức MD

-Các kháng thể tồn máu, dịch tiết 4/MD qua trung gian tế bào:

-Vai trò chủ yếu Lympho T đảm nhiệm

-Gọi trung gian thông tin kháng nguyên muốn tiếp xúc với tế bào Lympho T phải có truyền tải gián tiếp qua nhiều tế bào hoạt chất hóa học trung gian đến tế bào nhận cuối tế bào Lympho T để trở thành kháng thể tế bào CÂU 5: MD ko đặc hiệu thể gồm yếu tố bảo vệ nào? Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào vật lý 1/ MD ko đặc hiệu gồm:

-Hàng rào vật lý: da, niêm mạc

-Hàng rào hoá học: bổ thể, interferon, protein liên kết, properdin, opsonin, betalyzin -Hàng rào tế bào: tiểu thực bào, đại thực bào

-Hàng rào thể chất

-Phản ứng viêm ko đặc hiệu 2/ Hàng rào vật lý:

-Da niêm mạc ngăn cản thể với môi trường xung quanh, yếu tố gây bệnh muốn vào thể phải qua a,Vai trị da:

-Da lành ngăn cản hầu hết VSV gây bệnh xâm nhập thể

-Da gồm nhiều lớp tế bào, lớp sừng hóa tường ngăn cản mặt học vững Lớp tế bào thượng bì ln đổi mới, lớp tế bào chết bong thường xuyên, kéo theo VSV khu trú, giảm bớt số lượng VSV da -Dưới lớp thượng bì hệ thống mô liên kết với phân bố dày đặc mạch máu thần kinh, VSV xuyên qua lớp thượng bì bị tế bào thực bào tiêu diệt

-Da lành lặn, gương phản ánh sức khỏe thể, có khả bảo vệ cao b,Niêm mạc:

-Có diện tích gấp 200 lần diện tích da, nơi thường xuyên tiếp xúc với nhiều vật lạ có điều kiện thuận lợi để VSV khu trú vì: có độ ẩm cao, ko có ánh sáng, nhiều nếp gấp, nhiệt độ thích hợp

-Niêm mạc có lớp tế bào có tác dụng ngăn cản vi khuẩn xâm nhập vì: +Tính đàn hồi cao da

+Được bao phủ lớp chất nhầy tuyến niêm mạc tiết tạo màng bảo vệ làm cho vsv chất lạ ko trực tiếp bám vào đc TB ko xâm nhập vào đc bên

-Niêm mạc miệng mắt, đường tiết niệu đc rửa dịch loãng: nước bọt, nc mắt, nước tiểu

-Niêm mạc đường hơ hấp: có vi rung mao ln chuyển động hướng cản vsv chất lạ ko cho chúng xâm nhập vào sâu phế nang Niêm mạc đường hô hấp nhạy cảm, phản xạ ho, hắt đẩy vsv khỏi thể

CÂU 6: Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào vật lý: câu 5. CÂU 7: Trình bày vai trị bảo vệ thể hàng rào hóa học? 1.Bổ thể:

a.Lịch sử phát hiện:

-Cuối TK18 Jules Bordet thấy huyết vật khỏi bệnh ko có khả làm ngưng kết vk mà làm vk tan Hiện tượng do:

+yếu tố nhứ nhất: bền với nhiệt độ chịu đc 5600C/30’, xh vật mắc bệnh, gây ngưng kết vk, ko làm tan chúng, chất

+Yếu tố thứ hai: có sẵn huyết ko bền với nhiệt, có t/d làm tan vk chúng bị kháng thể ngưng kết Chất gọi alexin hay bổ thể

-Hoạt tính bổ thể thay đổi lồi cao chuột lang, trung bình người, chó thấp thỏ, chuột nhắt -Bổ thể yếu tố hệ thống miễn dịch dịch thể tự nhiên ko đặc hiệu, chất protein

-Bổ thể hệ thống gồm nhiều thành phần từ C1 – C9, riêng C1 gồm : bán đvi: C1q, C1r, C1s

-Bổ thể đc hoạt hóa theo đường khác nhau, đường cổ điển phát sớm nhất, đến 1953 Pillemer tìm đường cạnh đường lectin gắn manoxe đc phát gần

b.Ký hiệu quy ước quốc tế:

-Bổ thể ký hiệu chung C’, chất “đường cổ điển đc gọi thành phần ký hiệu là: C1, C2 C9 -Các chất “con đường thứ hai” (con đường cạnh) gọi yếu tố gồm B,D ,P,lectin MASP -Các chất điều hồ hoạt hố bổ thể cách kìm hãm phản ứng có kí hiệu là: INH, INA

-Nhiều thành phần bổ thể tiền enzim,khi bị phân cắt thành mảnh mảnh nhỏ hồ vào dịch thể kí hiệu a, cịn mảnh lớn có hoạt tính enzim bám vào bề mặt kháng nguyên kí hiệu b (vd: C3a, C3b, C5a,C5b)

c.Nơi sx thành phần bổ thể:

-khi nuôi cấy invitro, đại thực bào có k/năg sx hầu hết thành phần bổ thể

-Gan quan sx hầu hết thành phần bổ thể trừ C1 biểu mơ đường tiêu hóa tiết niệu sx

-Đến tất thành phần yếu tố bổ thể đc tìm hiểu đầy đủ cấu trúc,nồng độ bình thường máu d.Bổ thể hoạt hóa theo hai đường:

-con đg cổ điển :

+Tác nhân kích thích chủ yếu phức hợp kháng nguyên – kháng thể +Kháng thể thuộc lớp IgG, IgM

+Các kháng thể có phần Fc có receptor với bổ thể

-Ngoài virut, vk gram (-), protein C polisacarit kích thích hoạt hố bổ thể Lúc thành phần C3 bị tách thành C3a, C3b

- Con đường cạnh:

+Q trình hoạt hố xảy trc có hoạt hóa bổ thể theo đg cũ, tức hoạt hóa ko cần có kết hợp KN KT +Tác nhân kích thích số KN bề mặt vk, virut, nấm, kí sinh trùng, độc tố vk, bụi

+Sự hoạt hoá bổ thể theo đg cạnh tạo yếu tố khuếch hoạt hóa C3 thành C3a C3b đủ để phủ vỏ TB vk e.Vai trò sinh học bổ thể:

-Gây phản ứng viêm:

+C3a, C4b, C5a trọng lượng phân tử 10000 dalt gọi anaphylatoxi, chúng bám vào bề mặt TB mastocyte, bạch cầu kiềm giải phóng amin hoạt mạch: histamin, serotonine làm giãn mạch

+C3b làm tăng tính thấm thành mạch

+C5a t/d hấp dẫn, tập trung bạch cầu đa nhân trung tính ổ viêm +C1q có thụ thể tiểu cầu xúc tiến q trình đơng máu

- Tham gia dung giải vsv, gây độc TB vsv: phức hợp KN + KT + bổ thể

+Các vsv đc phủ bổ thể thông qua kháng thể đặc hiệu chống vk có thành phần C3b bổ thể làm vk bị dung giải +Bổ thể gây dung giải hồng cầu thông qua phức hợp hồng cầu – kháng thể - bổ thể

-Tham gia q trình chống nhiễm khuẩn nhờ q trình bám dính miễn dịch

-Bổ thể đc hoạt hóa, yếu tố gây nhiễm (vsv) đc bao phủ C3b qua receptor bề mặt đại thực bào nhận biết, tăng khả năg thực bào với vsv Đây trình opsonin hóa

-Xử lý phức hợp miễn dịch:

+Phức hợp miễn dịch hình thành KN kết hợp KT tạo mạng lưới ko gian ba chiều có phân tử lượng lớn

+Hoạt hóa bổ thể theo đg cổ điển ngăn cản phức hợp miễn dịch lớn kích thước Con đg cạnh giúp phức hợp miễn dịch dễ hịa tan, khó lắng đọng Nếu thiếu bổ thể bẩm sinh phức hợp miễn dịch tồn lâu máu gây tổn thươg: bệnh Lupus ban đỏ biểu da, khớp, thận

+Bổ thể cịn giúp bạch cầu tốn TB chết sinh lý thể cách gắn C3b lên TB này, chế thải bỏ rác

-Bổ thể gắn lên TB limpho B (thành phần C3d) TB limpho T (thành phần C3dh) t/d điều hòa miễn dịch

+Bổ thể huyết tươi loài động vật huyết chuột lang có hàm lượng bổ thể nhiều +Bổ thể ko bền với nhiệt, bất hoạt 5600C/30’

+Bảo quản bổ thể cách đông khô giữ nhiệt độ -150C đến -200C 2.Interferon (IFN)

-Là loại protein yếu tố miễn dịch tự nhiên ko đặc hiệu

-Do nhiều loại TB tiết bị kích thích nguồn thơng tin ngoại lai (virut, vk, độc tố ) -Tác dụng:

+Chống virut bên trog TB

3.Protein liên kết:

- bề mặt TB, huyết bình thường có phân tử protein có khả năg liên kết tự nhiên với chất bề mặt yếu tố gây bệnh: LPS, Lectin, lipit

- liên kết với yếu tố gêy bệnh, kìm hãm, ngăn chặn tác động gây hại VD: protein phản ứng C có t/d hạn chế phát triển phế cầu khuẩn

4.Properdin

-Là loại protein hoà tan huyết tương hầu hết loài động vật -Có phân tử lượng lớn, bị bất hoạt 5600C/30’

-Tác dụng diệt khuẩn ko đặc hiệu Khả diệt khuẩn properdin có đc liên kết với bổ thể ion Mg2+ tạo thành hệ thống

kháng khuẩn ko đặc hiệu gọi hệ properdin Nếu tồn properdin ko có k/năg kháng khuẩn 5.Opsonin:

- Là yếu tố miễn dịch dịch thể ko đặc hiệu, vai trò lớn hoạt động thực bào, có huyết tương loài đv, đb hàm lượng tăng cao huyết tương thể có miễn dịch

- Có t/d hỗ trợ TB thực bào cách vô hiệu hoá k/năg chống lại thực bào số vk có giáp mơ -Hoạt động Opsonin tăng cường kết hợp với bổ thể hệ thống properdin

6.Betalyzin:

- protein có huyết tương lồi đv chịu nhiệt, có k/năg ức chế số loài vk gram (+) CÂU 8: Trình bày vtro bảo vệ thể hàng rào TB?

a.Tiểu thực bào:

-Là bạch cầu đa nhân trung tính -Thực bào phân tử nhỏ, vk TB -Chiếm 60 – 70% tổng số bạch cầu máu ngoại vi

-Kích thước 12 – 14 μm, bào tương chứa nhiều enzim để tiêu chất -Có đời sống ngắn 4-5 ngày, dễ lách qua thành mạch đến ổ viêm

- Sau thực bào, bạch cầu trung tính chết trở thành đối tượng đại thực bào b.Đại thực bào:

-Có nguồn gốc từ nguyên đại thực bào tủy xương Hệ thống TB đơn nhân làm nvu thực bào gồm : monocyte lưu hành máu đại thực bào nằm trog mô

-Tùy theo quan trú ngụ mà có tên gọi khác nhau: +Bạch cầu đơn nhân lớn máu

+Kuffer gan +Langerhans da

+Đại thực bào phế nang phổi +Microglia não

+Đại thực bào phúc mạc bụng

-Các đại thực bào lưu động TB bạch cầu đơn nhân lớn máu, chúng di chuyển khắp nơi thể lùng bắt vsv ăn TB thể bị thối hóa chất lạ

-Đại thực bào chiếm – 8% tổng số bạch cầu máu ngoại vi

-Kích thước TB lớn 15 – 20 μm Bào tương chứa nhiều bọc Lysosom bên chứa nhiều enzim thủy phân -Đại thực bào mạnh vsv nội bào

c.Quá trình thực bào: giai đoạn -Giai đoạn gắn:

+Trong trình di chuyển yếu tố lạ, chúng gặp va chạm với TB thực bào, dính vào màng TB nhờ : protein liên kết, receptor như:

 Receptor TB thực bào với phân tử đường có mặt vsv như: mannose, fructose, axit sialic  Receptor với thành phần Fc IgG

 Receptor với bổ thể ( C3b, C4b )

+Sự gắn kết vsv với receptor TB thực bào khơi dậy loạt phản ứng hóa học chuyển thơng tin vào bên TB, làm TB đc hoạt hóa: thị chân giả, hình thành phagosome, tăng cường hoạt động enzim

- giai đoạn nuốt :

+Nơi tiếp xúc với vsv màng TB lõm xuống

+Nguyên sinh chất tạo chân giả bao vây vsv tạo hốc thực bào phagosome - Giai đoạn tiêu:

+Các hạt lysosome tiến đến sát phagosome xảy tượng hòa màng hai tiểu thể: màng lysosome nhập vào màng phagosome tạo thể phagolysosome

+Trong phagolysosome vsv bị tiêu diệt hai chế:

 Cơ chế nhờ enzim: vsv bị tiêu diệt nhờ enzim tiêu hóa protein, lysosome, lactoferin, cuối enzim thủy phân tiêu hủy hoàn toàn VSV

 Cơ chế cần oxi: chế oxi đc sd mạnh tạo anion superoxyt (O1/2) NO, NO2, NO- tạo hệ thống sinh halogen hình thành cloramin tiêu diệt VSV

+Thực bào tượng đề kháng tự nhiên chống nhiễm trùng thể Khi vsv xâm nhập vào tổ chức, nơi tiếp xúc có tượng viêm tác động chất hóa học trung gian ổ viêm, tế bào đa nhân trung tính tăng sinh, kéo đến nơi vsv thâm nhập, xuyên mạch vào ổ viêm, len lỏi vào tổ chức bắt, nuốt tiêu hủy VSV

+tùy theo chất vật lạ: tùy mức độ hoạt động TB thực bào dẫn tới ba tình sau:  Tiêu tan vsv thực bào hoàn chỉnh

 Chất lạ tồn ko bị tiêu tan TB thực bào

 Nhân lên: số vk độc lực cao (vk lao, virut) nhân lên TB thực bào TB thực bào chết Đây thực bào ko hoàn chỉnh

+hoạt động thực bào đại thực bào thường chậm chạp triệt để so với tiểu thực bào đại thực bào thực bào đc mảnh TB, TB thối hóa, xác tiểu cầu, bụi chất lạ khác

CÂU 9: Miễn dịch đặc hiệu khác so với Miễn dịch ko đặc hiệu?

*MD đặc hiệu: khả MD thể chống lại loại mầm bệnh định Khả ngăng MD kháng thể đặc hiệu định

*MD ko đặc hiệu: Là khả bảo vệ tự nhiên thể chống lại tác động có hại tác nhân gây bệnh nào. *MD đặc hiệu khác MD ko đặc hiệu điểm sau:

1 Tính đặc hiệu: kháng thể, dù dịch thể hay TB đặc hiệu với epitop KN định, tính chất cấu trúc ko gian chiều bổ thể cứu cho KN kháng thể tương ứng

2 Tính đa dạng: số lượng epitop KN có tự nhiên vơ lớn, có khoảng 109 epitop KN khác mà thể

đủ kháng thể đặc hiệu cho epitop→tính đa dạng mặt cấu trúc phần cảm thụ KN

3 Ký ức MD:khi KN vào lần đc trình diện cho TB MD→dòng TB tương ứng phân triển, số TB giữ lại hình ảnh số cấu trúc KN để dùng cho lần đáp ứng sau gặp lại KN

4 Sự điều hồ: hệ thống MD tự điều hồ thơng qua thơng tin yếu tố hố học hồ tan(cytokin) TB tiết ra, tạo nên mạng lưới phức tạp mà rối loạn sinh tình trạng bệnh lý

5 Khả phân biệt “cái lạ” “cái mình”: hệ thống MD có khả nhận thành phần KN cấu trúc thân để dung thứ, cịn “cái lạ” hoàn toàn bị loại bỏ

CÂU 10: Kháng nguyên gì, trình bày hai đặc tính kháng nguyên? 1.ĐN kháng nguyên:

-KN chất lạ Khi KN có mặt thể động vật có khả gây đáp ứng MD sau chúng kết hợp đặc hiệu với sản phẩm đáp ứng này(kháng thể dịch thể đặc hiệu kháng thể dịch thể TB)

-Một cách khái quát: KN chất đc hệ thống MD thể nhận biết cách đặc hiệu 2.Hai đặc tính kháng nguyên: tính sinh MD tính đặc hiệu.

a.Tính sinh miễn dịch: Là k/năg KN kích thích thể tạo đáp ứng miễn dịch, đáp ứng TB hay dịch thể, dương tính âm tính Đáp ứng miễn dịch mạnh hay yếu phụ thuộc:

- Tính KN: tính KN chất mạnh hay yếu phụ thuộc:

+Tính lạ KN: Những chất lạ với thể có tính KN mạnh, kháng thể sinh nhiều Những chất xa nguồn gốc tổ tiên có tính KN mạnh (VD: dùng albumin thỏ tiêm cho gà)

Những chất ko phải KN thể ko phải chất lạ

+Cấu trúc KN: Những KN có phân tử lượng lớn, cấu trúc phức tạp, tính KN cao Đặc biệt KN chất protein có chứa axit amin mạch vịng: tyroxin, triptophan có tính KN cao

Ngoại lệ: dextran (phừn tử lượng 80000 dalton) ko có tính KN ngược lại insulin (phân tử lượng 6000),glucagon (phân tử lượng 3800) có tính KN mạnh

Những chất chất lipit axit nucleic tính sinh miễn dịch yếu ko có đc gắn với phân tử protein mang trở thành KN

Cấu trúc lập thể k/năg tích điện phân tử KN ảnh hưởng tới tính sinh miễn dịch Do trình chuyển hóa cấu trúc lập thể thay đổi lộ nhóm định KN trước bị che lấp, tích điện có vai trị chọn lọc TB có thẩm quyền miễn dịch tương ứng để TB nhận diện

+ Phương thức xâm nhập KN:

Khi đưa KT vào thể đường đưa thích hợp, liều lượng khả đáp ứng miễn dịch mạnh Những KN mạnh đưa lần vào thể có đáp ứng miễn dịch mạnh KN yếu phải nhiều lần - Khả đáp ứng miễn dịch thể:

Cùng KN đưa vào thể khác có k/năg đáp ứng miễn dịch khác nhau, phụ thuộc tính di truyền hay địa thể

Tính sinh miễn dịch KN tính KN + k/năg đáp ứng miễn dịch thể b,Tính đặc hiệu:

-Tính đặc hiệu KN: đặc tính mà KN đc nhận biết đáp ứng miễn dịch gây Tính đặc hiệu KN chặt chẽ

+nếu thay đổi nhỏ cấu trúc hóa học KN mất tính đặc hiệu +KN thay đổi ko thể kết hợp với KT kích thích sinh trc

+Đối với KN poliosid cần thay đổi chức đường liên kết hai chức đường (1 – hay – 6) thay α hay βthay đổi tính đặc hiệu

-Phản ứng chéo: xảy KN có nguồn gốc khác có phản ứng với KT Nguyên nhân: +Có cấu trúc giống

+Có cấu trúc tương tự: KN loài vk khác or serotyp lồi có cấu trúc KN có phản ứng với KT có huyết Hoặc chí cấu trúc KN loài vk tương tự cấu trúc thể đv

-Nhóm định KN (epitop):

+Phần cấu trúc KN nhận biết hệ thống miễn dịch gọi nhóm định KN +Là vị trí để KN kết hợp với KT

+Trên KN cụ thể có nhiều epitop cấu trúc đc nhắc nhắc lại nhiều lần

>như tính đặc hiệu KN ko phải tồn cấu trúc phân tử KN mà nhóm định KN -Tổng số epitop phân tử KN hóa trị KN Biểu thị khả KN kết hợp với nhiều phân tử KT VD: phân tử albumin huyết gắn đc phân tử KT

CÂU 11:Kháng ngun gì? Các đặc tính phụ kháng ngun? 1 Định nghĩa:

- Kháng nguyên chất lạ.Khi KN có mặt thể động vật có khả gây đáp ứng miễn dịch sau chúng kết hợp đặc hiệu với sản phẩm đáp ứng (Kháng thể đặc hiệu)

- Một cách khái quát: kháng nguyên chất hệ thống miễn dịch thể nhận biết cách đặc hiệu 2.Đặc tính phụ kháng nguyên:

a,Tính gây dị ứng:

- Một số kháng nguyên dễ gây sản xuất lớp kháng thể:IgE, đáp ứng miễn dịch chuyển thẳng từ sản xuất lớp IgM sang IgE, gây dị ứng tức khắc (IgE lớp kháng thể tế bào, bám tế bào bạch cầu kiềm, tế bào Mast Sự kết hợp KN - KT ◊ giải phóng amin hoạt mạch: Histamin, Serotonin gây dị ứng)

-Kháng nguyên dễ gây dị ứng: Phấn hoa, nọc độc số sâu bọ có cánh, số chất súc vật -Tính gây dị ứng phụ thuộc vào địa thể

b,Tính gây dung nạp:

-Một số kháng nguyên dễ tạo tính trạng dung nạp miễn dịch kháng nguyên khác -Tính gây dung nạp phụ thuộc vào địa

c,Tính tá chất:

-Một tá chất kết hợp với kháng nguyên làm tăng cường độ đáp ứng miễn dịch thể với kháng nguyên -Một số kháng ngun thân có tính kích thích

d,Tính gây phân bào:

-Một số kháng nguyên gây đáp ứng miễn dịch đặc hiệu làm tăng γglobulin huyết cách kích thích phân bào tế bào lympho B

-VD: LPS: Lipopolysaccarid vi khuẩn gram (-)

LPS hay đc dùng thực nghiệm với mục đích phân bào Câu 12 : Các loại kháng nguyên vi khuẩn ?

1,Kháng nguyên thân (Kháng nguyên: O)

-Là kháng nguyên nằm lớp màng tế bào, thành phần chủ yếu polysacarit -chịu đc nhiệt độ, 100 độ sau bị phá huỷ

-bền với cồn etylic, tiếp xúc với cồn 50 độ không bị phá huỷ

-dễ bị phá huỷ formol: Formol 5phần nghìn dễ dàng phá huỷ kháng nguyên

-Kháng nguyên O khu trú bề mặt vi khuẩn liên hệ trực tiếp với hệ thống miễn dịch thể vi khuẩn có giáp mơ, giáp mơ che lấp kháng nguyên O

-Khi vào thể kháng nguyên O kích thích thể sinh kháng thể O, kết hợp kháng nguyên kháng thể đặc hiệu tạo phức hợp hạt mịn lắng xuống, tượng ngưng kết, thân vi khuẩn ngưng kết với

-Kháng ngun O có tính độc, yếu tố gây bệnh VK 2,Kháng nguyên lông (KN: H - Hauch)

-Kháng nguyên H có lơng vi khuẩn, vi khuẩn có lơng có kháng ngun H -Kháng ngun H có chất protein

-KN có đặc tính:

+Kém chịu nhiệt, nhiệt độ 70 độC/1 kháng nguyên bị phá huỷ +Ko bền với cồn, bị cồn etylic 50 độ phá huỷ

+Kháng formol phần nghìn

-Khi vào thể, kháng nguyên H kích thích sinh kháng thể H Sự kết hợp kháng nguyên với kháng thể xảy tượng ngưng kết: Các vi khuẩn ngưng kết lại với lơng dính lơng qua cầu nối kháng thể H, cụm Sự ngưng kết không bền, dễ tan lắc

-Người ta chế riêng kháng nguyên O, kháng nguyên H cách: Muốn có kháng nguyên O cho vi khuẩn tiếp xúc với cồn 50 độ Muốn có kháng nguyên H cho vi khuẩn tiếp xúc với formol 5phần nghìn

3,Kháng nguyên giáp mô (KN K hay Kháng nguyên Vi )

-Kháng ngun có giáp mơ vi khuẩn, vi khuẩn có giáp mơ có kháng nguyên K Kháng nguyên bên kháng nguyên O

-Không chịu nhiệt, vừa yếu tố gây MD vừa yếu tố gây bệnh 4,Kháng nguyên pili (Fimbriae) (kháng nguyên bám dính)

-là kháng nguyên có pili vi khuẩn, vi khuẩn có pili có kháng nguyên -VD: Vi khuẩn đường ruột: E.coli, Salmonella

-Kháng nguyên có chất protein (Kháng nguyên yếu tố gây bệnh quan trọng vi khuẩn đường ruột)

-ở vi khuẩn đường ruột phát đc 30 loại kháng nguyên pili, có loại kháng nguyên quan trọng: K88 hay F4; K99 hay F5; 986P hay F6 F41

-Các kháng nguyên giúp cho vi khuẩn bám dính vào tế bào niêm mạc ruột từ có hội xâm nhập vào bên để gây bệnh

-Theo Carter (1995), kháng nguyên bám dính vi khuẩn E.coli loài gia súc sau: +Vi khuẩn E.coli lợn có: F4, F5, F6, F41

+Vi khuẩn E.coli trâu, bò: F5, F41 +Vi khuẩn E.coli câu: F5, F41

5,Kháng nguyên độc tố vi khuẩn (kháng nguyên ngoại bào)

-Kháng nguyên ngoại độc tố vi khuẩn, độc tố độc có tính kháng ngun mạnh

-Dưới tác động số yếu tố: formol, nhiệt độ độc tố tính độc, khơng cịn khả gây bệnh giữ đc tính kháng nguyên, đc dùng để chế vacxin gọi giải độc tố VD: giải độc tố uốn ván

6,Kháng nguyên Forman:

-Là kháng nguyên hai loài động vật, hai loài vi khuẩn xa họ hàng lại có phản ứng huyết chéo -Hiện tượng Forman phát hiện, nên kháng nguyên gọi kháng nguyên Forman VD: Kháng nguyên giáp mô vi khuẩn Pneumococcus kháng nguyên thành tế bào vi khuẩn Shigella

CÂU 13:Kháng nguyên gì? Trình bày hiểu biết kháng nguyên phù hợp tổ chức chủ yếu? 1,Khái niệm kháng nguyên:

-Kháng nguyên chất lạ.Khi KN có mặt thể động vật có khả gây đáp ứng miễn dịch sau chúng kết hợp đặc hiệu với sản phẩm đáp ứng (Kháng thể đặc hiệu)

-Một cách khái quát: kháng nguyên chất hệ thống miễn dịch thể nhận biết cách đặc hiệu 2,Kháng nguyên phù hợp tổ chức chủ yếu:

-các KN có bề mặt tế bào tổ chức thể có tính sinh MD, có khả kích thích đáp ứng MD ghép vào thể khác gây phản ứng loại thải mảnh ghép gọi KN ghép hay phân tử MHC

-MHC có chất protein

-MHC ngồi tính chất kháng ngun cịn có vai trị quan trọng đáp ứng miễn dịch: Làm nhiệm vụ trình diện kháng nguyên cho tế bào miễn dịch - tế bào lympho T

-Đây phân tử có mặt hầu hết tế bào làm nhiệm vụ trình diện kháng nguyên phân biệt thân lạ (khơng phải thân) Đó phân tử bề mặt tế bào, peptit có từ -24 axit amin Chính phân tử MHC gây lên phản ứng loại thải mảnh ghép

-Thí nghiệm Goler vào năm 1936 ghép khối u cho chuột cho thấy: mảnh ghép đc dung nạp có hồ hợp mơ bị loại thải ko có hồ hợp Hiện tượng loại thải hay dung nạp mảnh ghép có nguồn gốc gen học, dung nạp đồng gen, loại thải khác gen loài

-Như ghép tổ chức, thể cho thể nhận có gen di truyền hoàn toàn phù hợp (trong trương hợp hai thể sinh đôi trứng thể dịng chủng) mảnh ghép phát triển bình thường thể nhận Cịn hai thể có gen khác mảnh ghộp vật lạ với thể nhận, sinh đáp ứng miễn dịch để loại bỏ mảnh ghép, phản ứng loại bỏ mảnh ghép Điều dẫn đến phát hệ thống chủ yếu hồ hợp mơ đc gọi H2 chuột hệ thống thứ yếu khác H1, H3, H4, H5

-Khái niệm phức hợp chủ yếu hồ hợp mơ đc xác nhận tất lồi vật có tên khác người có tên hệ thống HLA (Human Leucocyte Antigen) Ký hiệu HLA kháng nguyên lần đc phát tế bào bạch cầu Hiện người ta thống đặt tên chung để kháng nguyên hoà hợp tổ chức phân tử MHC

Các MHC đc chia làm hai lớp: a,MHC Lớp I:

-Chuỗi α: chuỗi polypeptit gồm khoảng 345 a.a , protein xuyên màng TB gồm phần α1, α2, α3.Có cầu nối đisunfua α2 α3 giúp phân đoạn giữ vai trị trì hình thái ổn định Cuối chuỗi α có phần xuyên màng gồm 26 a.a, phần nằm nguyên sinh chất 30-35 a.a

- Chuỗi β gồm 99 a.a hoàn toàn bên ngồi TB, liên kết với chuỗi α, có tính lớn với α1, α2, α3 tạo phân tử MHC có cấu trúc bậc với khơng gian chiều máng sâu mà mặt gọi β, bờ vòng xoắn α Chuỗi α3 thay đổi, cấu trúc đặc trưng cho tơi cá thế, đc xác nhận CD8

-MHC lớp I có bề mặt tế bào có nhân thể, đc biểu lộ rõ tế bào dòng lympho T B, bạch cầu đa nhân, tế bào phần lớn quan, tổ chức, khơng có tế bào khơng nhân hồng cầu

-Vai trị chủ yếu MHC lớp I giới thiệu kháng nguyên có TB cho TB lympho Tc – TCD8 cuối cùng, TB thể có chứa KN trở thành TB đích để TB lympho TCD8 tiêu diệt

-TB lympho TCD8 tiếp xúc TB đích có KN: thơng qua phân tử CD8 nhận biết MHC lớp I, TCD8 tương tác TB trình diện KN Khi TCR nhận KN lạ , đồng thời CD8 tương tác với α3 để nhận biết “tơi”, sau phân tử bám dính TCD8 TB trình diện KN hồn thiện qúa trình tương tác TCD8 nhận thông tin KN trở thành KT tế bào tìm diệt tất TB đích có MHC lớp I KN giới thiệu

b,MHC Lớp II:

-Chuỗi nặng α gồm lĩnh vực TB α1, α2, phần xuyên màng, phần kết thúc có tận nhóm chức cacboxyl nằm nguyên sinh chất

-Chuỗi nhẹ β: gồm lĩnh vực β1, β2 nằm TB, phần xuyên màng, phần nằm nguyên sinh chất β2 cấu trúc đặc trưng cho tôi, đc xác nhận cụm biệt hóa ThCD4

-MHC lớp II thấy TB có khả trình diện KN:các tế bào lympho B, đại thực bào tế bào monocyte Tb lympho T có MHC lớp II đc hoạt hóa

-vai trị MHC lớp có mặt MHC lớp làm cho tế bào trình diện kháng nguyên có khả trình diện kháng ngun cho tế bào lympho hỗ trợ TCD4

-Một kháng nguyên bên (vi khuẩn, virus, protein ngoại lai)

-kháng nguyên không phụ thuộc tuyến ức:đc đại thực bào tế bào mono thực bào xử lý thành siêu kháng nguyên hốc thực bào (phagolysosom) chỗ tế bào lympho B MHC lớp có khả gắn với siêu kháng nguyên có -24 axit amin từ bên tế bào sau đưa kháng nguyên biểu lộ bề mặt tế bào trình diện kháng ngun Lúc đó, tế bào TCD4 thơng qua TCR mà tương tác với tế bào trình diện TCD4 đc hoạt hố tiết lymphokin cảm ứng tế bào lympho B để tiết kháng thể

CÂU 14: Trình bày hiểu biết tuyến ức? -Nguồn gốc từ túi mang nội bì phát triển thành

-Tuyến ức nằm ngang sau xương ức, gồm hai thuỳ lớn nối với eo

-Tuyến ức quan lympho xuất sớm thời kỳ bào thai Trọng lượng tuyến thay đổi với tuổi, phát triển tối đa tuổi thành thục, sau thối triển dần khơng hồn tồn

Ví dụ: ng, tuyến ức trẻ sơ sinh có trọng lượng 10 - 15g Tuổi dậy 30 - 50g, người già <15g

-ở gia cầm tuyến ức tạo thành chuỗi dọc hai bên cổ

-Tuyến ức quan lympho biểu mô, đc tạo nên tế bào dạng lympho tế bào biểu mô -Về phương diện mô học

+Tuyến ức gồm hai thuỳ, thuỳ chia thành tiểu thuỳ vách Mỗi tiểu thuỳ chia làm vùng: vùng vỏ vùng tuỷ

+Vùng vỏ: chiếm phần lớn khối lượng tuyến, gồm tế bào lympho chưa chín, chiếm 90% tổng số tế bào lympho tuyến TB biểu mô tuyến ức Các TB từ tủy xương di tản đến

+Vùng tuỷ: số tế bào lympho chiếm 10% tổng số tế bào lympho tuyến ức Đây tế bào lympho chín, chuẩn bị rời bỏ tuyến ức

+ở vùng tuỷ tế bào biểu mô đứng riêng rẽ hay tụ thành đám hình củ hành gọi tiểu thể Hassal chưa rõ ý nghĩa

-Về mặt sinh lý học:

+Chức tạo lympho: TB tuyến ức đc hình thành từ lớp biểu mơ tuyến ức từ TB nguồn từ tủy xương xuống Các TB ảnh hưởng yếu tố nội tiết tuyến trở thành TB lympho phụ thuộc tuyến ức hay lympho T

+Chức nội tiết: Tiết hormone thymosin α1, thymosin β4, Thymulin tham gia kích thích tạo lympho biệt hóa lympho T +Chức MD: Tuyến ức quan miễn dịch thể, nơi diễn trình phân triển, biệt hóa, chọn lọc tế bào lympho T nhờ yếu tố hồ tan tế bào biểu mơ tuyến tiết ra: Thymulin, thymosin α1, thymosin β4,

-Hoạt động tuyến ức theo hai phương thức:

+Hoạt động tuyến ức: Tại tuyến ức có chuyển tế bào lympho chưa biệt hóa thành tế bào lympho có receptor T với kháng nguyên (TCR: T cell receptor) Quá trình diễn vùng vỏ Các tế bào có dấu ấn màng tế bào lympho T chín: CD2, CD4, CD8,TCR (CD: Cluster of diffirenciation - cụm biệt hóa) Sau có chọn lọc kép dương tính or âm tính:

* Chọn lọc dương tính: cho phép tế bào lympho phát triển có đặc tính: Ko nhận biết thành phần thân (tất cấu trúc thể) kháng nguyên .Nhận biết phân tử MHC thân

* Chọn lọc âm tính:Những tế bào lympho khơng đạt đc đặc tính tức nhận thành phần thân, không nhận MHC thân, nhận Những TB bị huỷ theo chế chết theo chương trình Apoptosis (nhân tế bào cô đọng, vỡ thành mảnh nhỏ, tế bào bị chia thành nhiều mảnh, đại thực bào tiêu tuyến) Chỉ cịn 5%

tế bào lympho T chín rời khỏi tuyến ức

+Hoạt động xa: TB tuyến ức tiết yếu tố dịch thể thymosin, thymopoietin theo máu dịch thể đến quan lympho ngoại vi, vựng phụ thuộc tuyến ức, chúng tác động đến TB lympho T cư trú để hồn tất q trình biệt hóa

CÂU 15:Trình bày hiểu biết tủy xương, bursal fabricius? a.Tủy xương (Bone marrow):

-Hệ thống huyết quản bao gồm động mạch vào, mạng lưới mao mạch xoang tĩnh mạch -Nhiệm vụ tủy xươg tạo tế bào gốc tiền thân tế bào máu:

+Dòng hồng cầu, dòng bạch cầu, tiểu cầu +Nguyên bào lympho

+Nguyên đại thực bào

-Tỷ lệ tế bào lympho tủy xương đạt tới 20%

-Một điều cần ý: đv có vú người người ta chứng minh đc tế bào lympho B đc biệt hóa tủy xương b.Bursal Fabricius:

-túi Fabricius có lồi chim, nằm phía ổ nhớp

-túi Fabricius quan lympho biểu mô đc tạo nên tế bào dạng lympho tế bào tiểu mô

-Ở gà -3 tuần tuổi, kích thước túi to bằg hạt lạc Hoạt động túi mạnh vào lúc 3tháng tuổi, tháng tứ bắt đầu teo, tới tháng 11 – 12 hẳn

-Bursa Fabricius có cuống thơng với trùc tràng giống ruột thừa liên hệ với manh tràng

-Niêm mạc túi ngăn túi làm nhiều nếp cách tổ chức liên kết tạo nên nang chứa lympho, nang lympho có vùng:

+vùng tủy bao gồm tế bào lympho, có mật độ TB thưa +Vùng vỏ có TB lympho lớn trung bình

-túi Fabricius nơi diễn q trình biệt hóa tb lympho B -tại nguyên bào lympho đc biệt hóa thành tb lympho B chín -Trên bề mặt nguyên bào lympho dần xhiện dấu ấn màng: +Dấu ấn phân biệt CD 19, CD 20 MHC lớp II

+Receptor lympho B

+( Mlg: membrane immuno globulin)

-Lympho B chín đc tạo → vào máu, đến cư trú vùng không phụ thuộc tuyến ức quan lympho ngoại vi -ở đv có vú người khơng có túi fabricius

-Trước người ta cho chức túi quan tương đương đảm nhận như: +Amidan

+Mô lympho ruột ( mảng payer)

-Hiện người ta chứng minh đc rằg nơi biệt hóa TB lympho B tủy xương

VD: người bị suy giảm miễn dịch dòng lympho B Nếu ghép tủy xương  miễn dịch dịch thể đc phục hồi CÂU 16: Trình bày hiểu biết quan limpho ngoại vi?

1.Cơ quan lympho ngoại vi: (cơ quan thứ phát, tác động)

-Là nơi tiếp nhận, cư trú chủ yếu TB lympho B, lympho T, đại thực bào -Nơi tiếp nhận thông tin kháng nguyên TB trình diện KN đem đến

-Nơi TB lympho biệt hóa sx kháng thể đặc hiệu tương ứng -Các quan lympho ngoại vi bao gồm:

+ Hạch lympho + Lách

+ Mô lympho niêm mạc 1.1.Hạch lympho:

-Hạch lympho quan lympho, nằm rải rác đườg mạch bạch huyết

-Hạch tập trung thành đám hạch chỗ giao mạch bạch huyết cổ, nách, bẹn hay ngõ vào quan: hạch rốn, thận, màng teo ruột

-Hạch có hình đậu trịn

-Đường kính – 25mm, đc bao bọc vá liên kết Bên hạch chứa TB lympho -Mặt hạch nhận dịch bạch huyết tới dịch rời hạch vùng rốn hạch Trong đó:

+Mạch bạch huyết tới: Dẫn lưu dịch bạch huyết hìh thành khoảng gian bào thể ngồi lịng mạch đến hạch +Mạch bạch huyết rời hạch: Dẫn dịch bạch huết rời khái hạch đem theo kq đáp ứng miễn dịch vào tuần hoàn chung toàn thể

-Hạch lympho to lên rõ rệt bị nhiễm khuẩn, bị KN kích thích, bị u ác tính a.Hạch lympho chia thành nhiều thùy:

Mỗi thùy chia làm vùng liên tiếp: vùng vỏ nông, vỏ sâu vùng tủy Mỗi vùng có chứa năg khác • Vùng vỏ nông:

-là nơi tập trung TB lympho B, TB phân bố dầy, nằm sát tạo nang lympho, gọi nang ngun phát (tiền khởi – trước có kích thích KN)

-đây vùng khơng phụ thuộc tuyến ức, KN đc thu gom , xử lý trình diện cho lympho B

-sau có kích thích KN (sau – ngày) nang lympho nguyên phát phát triển rộng xuất trung tâm mầm -Ở TB lympho tách biệt thời kỳ phân bào – TB tiền thân TB tiết kháng thể (tương bào plasmocyte) nang gọi nang thứ phát

• vùng vỏ sâu:

+Lympho T

+Đại thực bào TB tua nằm xem kẽ -vùng gọi vùng phụ thuộc tuyến ức

-các KN gây đáp ứng miễn dịch TB đc thu gom

-Các TB lympho T sau nhận thơng tin KN, chúng biệt hóa thành lympho T mẫn cảm -Người ta thấy sau KN xâm nhập, 24h sau có chuyển dịch TB lympho T T mẫn cảm

-Quá trình phân triển TB đc thấy trog suốt tuần đầu • Vùng tủy:

-gồm TB lympho T, B, tương bào, đại thực bào…

-các TB thườg đứng với thành hàng gọi dây nang dây nang phân cách với xoang bạch huyết vùng tủy

-các KN gây đáp ứng miễn dịch thể phụ thuộc tuyến ức đc thu gom

-Vùng xảy tương tác TB lympho T TB lympho B tương bào dc hình thành Kháng thể dịch thể đc sx -Như mặt sinh lý, hạch lympho có c/năg sau:

+là nơi cư trú TB lympho T, lympho B chin +Nhận KN tâ mạch bạch huyết đưa đến

+là nơi sx KT đặc hiệu: Kháng thể tế bào kháng thể dịch thể -Kháng thể đặc hiệu theo dịch bạch huyết rời hạch vào máu khắp thể

1.2.Lách: Là quan nằm tuần hồn máu, khơng có mạch bạch huyết đến quan

a.Giải phẫu mô học: đv có vú, lách quan có hình lưỡi liềm, màu sẫm, lồi chim thường có hình cầu gọi tối b.Về cấu tạo mô học:

-lách gồm có hai loại mơ:

+Tủy đỏ chiếm 4/5 khối lượng lách, gồm nhiều xoag tĩnh mạch chứa hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, lympho bào -Chức tủy đỏ nơi lọc máu đvới hồng cầu bị hủy hoại tổn thương già, mảnh TB chết -Tủy trắng tổ chức lympho, đc ctạo TB lympho nhiều tiểu động mạch xen kẽ,

-Ở tủy trắng TB lympho đc chia làm hai vùng:

+Vùng phụ thuộc tuyến ức gồm TB lympho T xếp dọc theo mặt ngồi tiểu động mạch

+vùng khơng phụ thuộc tuyến ức gồm TB lympho với nang lympho tiền phát ( chưa có KN kích thích )

-Khu vực trung gian tủy đỏ tủy trắng khu vực trao đổi, TB lympho từ tuần hịan máu đưa tới, rời khỏi tĩnh mạch để xâm nhập vào tổ chức lympho

• chức sinh lý nách: -Thanh lọc máu

-Là điểm cư trú TB lympho T B

-Là nơi tiếp xúc KN với TB có thẩm quyền miễn dịch để sx kháng thể 2.Mô lympho niêm mạc

-là mơ lympho ko có vỏ liên kết bao bọc -nằm rải rác niêm mạc:

+Đường tiêu hóa +hơ hấp

+sinh dục +Tiết niệu…

-Mô lympho niêm mạc đc phân biệt thành hai loại: +Mô lympho niêm mạc tập trung

+Mô lympho niêm mạc phân tán 2.1.Mô lympho niêm mạc tập trung

(OMALT: Organised Mucosa Associated Lymphoid Tissue) -Tế bào lympho tập trung tạo thành nang niêm mạc

-Mỗi nang có trung tâm mầm sáng gồm lympho B có SlgA, APC (Antigen Presenting Cell), xung quanh có lympho TCD4 đại thực bào

-Mô lympho có ruột, phế quản mũi, miệng, sinh dục………

-ở số TB biểu mơ thay đổi hình thái khơng có lơng nhung, vận chuyển KN qua Những TB TB M: Membranous -mơ lympho đứng riêng lẻ tập trung thành đám lớn:

+Hạch amidan +Mảng Peyer…

2.2.Mô lympho niêm mạc phân tán -DMALT: Diffuse Mucosa Associated…)

-Tế bào nằm rải rác niêm mạc gồm TB lympho B, Th tương bào tiết lgA

-Đây nơi tiết lgA mạnh nhiều Các phân tử lgA tiết vào màng nhày niêm mạc có vai trò bảo vệ, chống lại vsv TB niêm mạc

-Mô lympho niêm mạc có vai trị lớn việc bảo vệ thể với chế tạo miễn dịch cục đb vai trò lớp kháng thể lgA tiết

Câu 17 trình bày hiểu biết tế bàolympho T? 1.Tế bào lympho T

-Những nguyên bào lympho phát triển, biệt hóa tuyến ức chịu kiểm sốt đc gọi tế bào phụ thuộc tuyến ức hay TB lympho T ( từ chữ thymus)

-TB lympho T chiếm đa số tổng số TB lympho quan lympho, chiếm 70% tổng số TB lympho máu ngoại vi Dựa vào dấu ấn bề mặt người ta chia lympho T thành quần thể:

+Tiểu quần thể lympho T có dấu ấn bề mặt CD4 có c/năg hỗ trợ miễn dịch cho TB lympho B gọi Th hay TCD4 +Tiểu quần thể lympho T có dấu ấn bề mặt CD8 có chức năg ức chế gây độc TB gọi TB lympho TCD8 Tc = Cytotoxin gây độc TB

Ts = Suppressor ức chế -Trong máu ngọai vi người có 450 – 1250 TCD4/mm3 250 – 800 TCD8 /mm3 Tỷ lệ: TCD4 / TCD8 = 1.4 – 2.3 Ng nhiễm HIV: TCD4 / TCD8 = 0.5 – • Nguồn gốc:

-TB lympho T có nguồn gốc từ tủy xương (nguyên bào lympho) di tản xuống tuyến ức • Nơi biệt hóa:

-Tế bào lympho T biệt hóa chịu kiểm sốt tuyến ức • Nơi cư trú:

-Tế bào lympho T cư trú vùng phụ thuộc tuyến ức quan lympho ngoại vi: +Lách

+Hạch lympho

+Mô lympho niêm mạc

1.1.Các dấu ấn màng tế bào lympho T

-Trên bề mặt TB lympho T có phân tử xhiện theo thời kỳ phát triển, biệt hóa đc gọi dấu ấn phân biệt CD KN bề mặt

-Chúng có chức việc nhận diện Kn trình diện KN -Dấu ấn phân biệt (CD: cluster of differenciation)

+Có chất glucoprotein

+Đây KN bề mặt TB lympho, đc xđ nhờ kháng thể đơn dòng +Đây KN bề mặt TB lym pho, đc xđ nhờ kháng thể đơn dịng -Hiện người ta tìm thấy 166 loại KN

-Có số KN bề mặt xh giai đoạn định

-Trong trình phân triển biệt hóa người ta gọi chug : dấu ấn phân biệt : CD Các dấu ấn phân biệt lympho T:

-CD2: có TB lympho T (chín chưa chín) có trọng lượng phân tử 50KD, phân tử bám dính giúp cho TB lympho T dính với đại thực bào trình trình diện KN

-CD3: có TB lympho T chín, gồm chuỗi protein liên kết với TCR

Vai trị tiếp xúc với siêu KN nằm MHC  truyền thông tin KN vào TB lympho

-CD4: có mặt TB lympho T hỗ trợ (Th) dấu ấn đặc trưng cho quần thể TB Ở người CD4 gồm chuỗi α β nối với thông qua dây nối đồng hóa trị Dấu ấn CD yếu tố để TCD nhận biết TCD4 nhận biết MHC lớp II kết hợp với Dấu ấn CD4 receptor phù hợp với Receptor virut HIV: (Human Immuno Deficiency visus) nguyên nhân gây nên bệnh AIDS (Acquired Immuno Deficiency Syndrome)

-CD8: có mặt TB lympho T gây độc: (Tc) Đây dấu ấn đặc trưng cho quần thể TB Dấu ấn CD8 yếu tố để lympho Tc nhận biết kết hợp với MHC lớp I

1.2.Receptor lympho T với KN

(TCR: T cell receptor) Chúng phân tử protein có tác dụng nhận biết siêu KN truyền thông tin KN vào bên TB -Có hai loại: TCR1 TCR2

+TCR 1: chiếm 5% lympho T Nhận biết KN mà không cần kết hợp KN với MHC +TCR 2: chiếm 95% trog lympho T.Nhận biết KN siêu KN + MHC TB APC

TCR2 xếp vào họ Globulin gồm chuỗi α β nối với thông qua dây liên kết đồng hóa trị Mỗi chuỗi gồm có vùng thay đổi, vùng định, vùng xuyên màng vùng nằm nguyên sinh chất TB

1.3.Quá trình huấn luyện TB lympho T tuyến ức: Các nguyên bào lympho từ tủy xương di tản đến tuyến ức phải trải qua hai chọn lọc:

•chọn lọc dương tính:

-Những TB lympho có mang cấu trúc màng dấu ấn CD4+ có k/năg nhận phân tử MHC lớp II TB APC -Các TB TCD8+ có khả nhận biết MHC lớp I có TB tổ chức thể

Được tồn

•Chọn lọc âm tính :

-là q trình loại bỏ tiếp TB TCD4+ TCD8+ khả nhận biết KN thân

-cuối 5% TB lympho T tồn tại, TB chín khơng có k/năng nhận biết peptit (KN) thân nhận biết đc MHC TB thể

-Đây chọn lọc kép Sau trình TB lympho T chín có dấu ấn CD4+ CD8+ đến vùng thuộc tuyến ức trưởng thành

1.4.Chức TB lympho T: -Chức nhận biết KN:

+Do TB lympho Th Tc đảm nhận

+Đa số KN hai TB nhận biết chúng đc trình diện khuôn khổ: Siêu KN + MHC TB APC +Chỉ phần nhỏ KN gây đáp ứng miễn dịch dịch thể không phụ thuộc tuyến ức đc lympho B nhận diện -Chức hỗ trợ miễn dịch:

+Do TB lympho Th có CD4 đảm nhận, nhận biết thơng tin KN khuôn khổ MHC lớp II

+Sau nhận đc thơng tin KN, TCD4 hoạt hóa tiết yếu tố MD hịa tan : CYTOKIN để kích thích TB khác tham gia đáp ứng MD

+Cytokin cũn gọi interleukin chất tác động TB bạch cầu, viết tắt IL +Các loại IL: IL – 2, IL – 4, IL – 5, IL – cảm ứng TB lympho B

IL – 2: hoạt hóa TB Natural Kille thành TB diệt TB ung thư -Chức ngoại trừ KN:

+Do nhóm TB lympho Tc: nhóm lympho T gây độc TB, đối tượng TB mang KN nội sinh: TB nhiễm virut, TB ung thư KN kết hợp với phân tử MHC lớp I đc TCD8 nhận biết  TCD8 thành KT TB li giải TB KN lạ

-Chức điều hòa miễn dịch: nhóm TB lympho T ức chế đảm nhận Lympho Ts có vai trị: +Giữ đáp ứng miễn dịch đặc hiệu diễn mức cần thiết, tránh phản ứng có hại

+Kìm hãm TB lympho Th chống lại KN peptit thân, nhờ thể bình thường khơng có đáp ứng MD tự nhiên

-Tiết lymphokin:

+Do TB Th Tc đảm nhận, chúng tiết IL4,5,6 làm cho TB lympho tác động quan trọng đến phản ứng viêm Câu 18 trình bày hiểu biết tế bào lympho B

*)Tế bào lympho B 1.Khái niệm:

-là quần thể TB lympho, hoạt động phụ thuộc vào Bursal Fabricius (gia cầm), tủy xương (động vật có vú người) -các tbào lympho B chiếm – 15% tổng số lympho tuần hồn xđ thơng qua Slg

-dưới kính hiển vi điện tử, TB lympho B có bề mặt xù xì globulin bề mặt, viết tắt Slg (Suface Immuno globulin) 2.Quá trình biệt hóa:

Q trình biệt hóa lympho B từ TB gốc thành tương bào chia làm 2gđ: a.Giai đoạn biệt hóa ban đầu:

-Từ TB gốc biệt hóa thành lympho B chín qua bước sau:

+Từ TB gốc  tiền B: Trên bề mặt TB lympho xhiện dấu ấn CD19, CD20, MHC lớp II Dấu ấn CD10 xhiện tạm thời +Từ tiền B  B chín: Từ TB tiền lympho B sang TB lympho B chín xhiện dấu ấn CD19, CD20 biểu Slg màng với nồng độ thấp TB lympho B chín rời tới Fabricius chuyển vào tuần hoàn máu đc phân bố vùng không phụ thuộc tuyến ức quan lympho ngoại vi.Trong q trình biệt hóa giai đoạn B chín, ngồi dấu ấn CD 19, CD20, MHC lớp II Cũng xuất globulin miễn dịch màng: Slg (suface Immuno globulin) với Slg M, SlgD số nhỏ có Slg G, Slg A

Mỗi TB lympho có : 0.5 – 1.5*105 phân tử Slg, có vai trò Receptor lympho B với KN

Sau lympho B chín vào tuần hồn máu đến cư trú vùng không phụ thuộc tuyến ức quan lympho ngoại vi Ở giai đoạn khơng có kích thích KN hỗ trợ lympho T

b.Giai đoạn hoạt hóa: Phải có sự: -Kích thích KN

-Sự hỗ trợ lympho T, lymphokin:IL1, IL2, IL4, IL5, IL6 Lúc lympho B chín  tương bào tiết KT dịch thể đặc hiệu

ĐẶc trưng giai đoạn này: lympho B chín dần Slg tổng hợp nhanh lg để tiết 3.Các dấu ấn màng lympho B

-Trên bề mặt TB lympho B có dấu ấn màng -Các dấu ấn thay đổi q trình biệt hóa

-Việc nhận biết dấu ấn màng cho phép xđ TB lympho B giai đoạn •Dấu ấn phân biệt

+CD19, CD20 có TB lympho B chưa chín chín +Các receptor lympho B:

-Receptor với bổ thể: gọi CR1, CR2 ( complement Receptor) ( CR1 gọi CD35, CR2 gọi CD21)

4.Chức lympho B

-Chức chủ yếu TB lympho B chuyển thành tương bào tiết kháng thể dịch thể đặc hiệu lgM đáp ứng tiên phát lgG đáp ứng thứ phát

-LymphoB nhận biết trực tiếp kháng nguyên có chất protein, carbonhydrat số hapten -Là TB trình diện KN cho TB lympho T hỗ trợ

CÂU 19: Tế bào trình diện kháng nguyên?

*)Tế bào trình diện KN: APC (Antigen Presenting Cell)

-là TB có k/năg giới thiệu KN cho TB miễn dịch: lympho T, B -KN giới thiệu khuôn khổ siêu KN + MHC TB APC •TB trình diện KN cho Th có CD4

APC loại có hai đặc tính cần thiết là:

+Có khả xử lý KN thực bào ( KN, ngoại bào) +Trên bề mặt TB có biểu lộ phân tử MHC lớp II

Các APC loại gồm có: đại thực bào, TB lympho B, TB nội mạc mạch quản Dưới tdụng IFN làm tăng biểu lộ phần tử MHC lớp II  tăng đáp ứng miễn dịch •TB trình diện KN cho Tc có CD8:

-Các TB APC loại TB có biểu lộ MHC lớp I

-MHC lớp I có TB có nhân thể, có TB gan , khơng có TB ko nhân (hồng cầu)

CÂU 20: Quá trình đáp ứng miễn dịch đặc hiệu có giai đoạn ? Trình bày giai đoạn 2(giai đoạn nhận diện kháng nguyên)

1.Quá trình đáp ứng miễn dịch gồm giai đoạn: giai đoạn giai đoạn phát sinh, giai đoạn giai đoạn nhân diện kháng nguyên giai đoạn giai đoạn cảm ứng

2.Giai đoạn2: Giai đoạn nhận diện KN a.Với KN phụ thuộc tuyến ức:

-Khi KN xâm nhập vào thể Nó đc TB đại thực bào bao vây bắt nuốt giáng hòa thành protein nhỏ có chứa nhóm quy định KN giới thiệu lên bề mặt để TB có thẩm quyền miễn dịch nhận biết

-Những TB có k/năg giới thiệu KN với TB có thẩm quyền miễn dịch đc gọi TB trình diện KN (APC – Antigen Presenting Cell) Có hai loại TB APC:

*)TB trình diện KN có MHC lớp II: đc thấy nhiều TB lympho B, TB Monocyte, đại thực bào, tế bào Langerhans da, TB tua hạch tuyến ức, TB nội mạc mạch máu TB biểu mô ruột non

+Đối với KN phụ thuộc tuyến ức (vsv, protein…) từ xâm nhập vào, chúng có phân tử lượng lớn khơng thể trình diện cho TB có thẩm quyền miễn dịch đc, mà phải thông qua TB APC

+Tại APC KN giáng hóa thành peptit có khoảng 10 a.a Epitop, chúng kết hợp với phân tử MHC lớp II TB trình diện KN đc đưa lên bề mặt TB để giới thiệu với TB có thẩm quyền miễn dịch Các tbào lympho T txúc với APC, nhờ có TRC, lympho T gắn chặt vào phần siêu KN, đồng thời phân tử CD4 nhận MHC lớp II thể, phân tử bám dính bề mặt TB lympho T TB APC hoàn thiện mối tương tác CD2, LFA1 (lymphocyte Functio n Associated) APC

+Tín hiệu KN chuyển vào hoạt hóa TB T TB APC, KN đc nhận diện *)Tế bào trình diện KN phân tử MHC lớp I

-Đó phần lớn TB có nhân gồm TB lympho B, T, bạch cầu đa nhân, tiểu cầu, TB phần lớn quan MHC lớp I có TB gan khơng có TB khơng nhân (hồng cầu động vật có vú)

-Đối với KN nội sinh sản phẩm thối hóa TB thể hay sp vsv sống bên TB chủ (virus) -Chúng phân giải nhờ men proteaza, lipase, catalase…bên TB thành epitop có cấu trúc từ a.a Sau mảnh peptit đưa đến mạng lưới nội nguyên sinh TB, để kết hợp với phân tử MHC lớp I, nhờ máy golgi di chuyển bề mặt TB để đc trình diện

-Các tbào lympho T có dấu ấn CD8 có TCR tương ứng với KN tiến tới nhận biết KN trình bày phân tử MHC lớp I CD8 nhận MHC lớp I thể, phân tử bám dính hồn thành mối tương tác Khi TCD8 hoạt hóa trở thành Tc (T độc)

b.Với KN không phụ thuộc vào tuyến ức:

Được lympho B nhận diện, sau hoạt hóa trực tiếp TB lympho B

+TB lympho B: TB có hai phân tử MHC lớp II receptor với KN IG màng (Slg M Slg D) mà ngày gọi BCR ( B cell receptor)

Khi KN ( protein ) xâm nhập, B k/năg nuốt KN có cấu trúc lớn nhờ có BCR mà có k/năg tiếp nhận KN nhỏ hòa tan đặc hiệu với BCR

Sau phức hợp KN + BCR đc thu vào bên nội bào KN xử lý đại thực bào TB tua Lúc này, lympho B APC để trình diện KN cho TB lympho T qua MHC lớp II

CÂU 21: Trình giai đoạn trình đáp ứng miễn dịch đặc hiệu (Giai đoạn: giai đoạn cảm ứng) Là giai đoạn cảm ứng gồm q trình hoạt hóa tương tác ghi nhớ:

1.Cytokin:

2.Sự tương tác phân triển biệt hóa:

2.1.Sự tương tác phân triển biệt hóa đáp ứng miễn dịch qua trung gian TB: a.Sự tương tác điều hịa APC có MHC lớp II với TB lympho TCD4:

-Siêu KN + MHC lớp II TB APC  đc lympho Th có dấu ấn CD4 giúp Th tiếp cận TB APC có MHC lớp II -Siêu KN đc nhận biết nhờ TCR Th

Thông tin KN truyền vào TB lympho Th nhờ CD3 để hoạt hóa TB lympho Th Sự tiếp xúc hai TB : APC Th cịn có hỗ trợ số phân tử bám dính như: CD2, LFA1 ( Lymphocyte Function Associated ) Th

LFA3, ICAM ( Intercellular Adheson Molescule) APC

Phân tử bám dính có vai trị giúp TB kề sát tạo đk thuận lợi cho q trình tương tác Sau nhận đc thơng tin KN, TB hoạt hóa:

-TB APC tiết IL –

IL – tăng cảm ứng với receptor IL – Th Th tăng tổng hợp IL giải phúng IL

IL – tác động trở lại với receptor Th TB khác tạo vòng phản hồi khuyếch đại  phản ứng ngày mạnh -Lympho TCD4 hoạt hóa tăng tiết IFN gama chất quay trở lại kích thích TB APC tăng tiết IL – tạo nhiều phân tử MHC lớp II

Như tạo vòng phản hồi khuếch đại phản ứng ngày mạnh

Nhưng nhờ có điều hịa miễn dịch Ts mà khuếch đại bi hạn chế giảm dần sx IL -2, IL – 2R Chỉ đưa KN vào tiếp chu kì sx IL -2 hoạt động lại

Lympho Th có dấu ấn CD4 sau đc hoạt hóa, tiết lymphokin Lympho Th đc biệt hóa theo hai nhóm: Th1 Th2

-Lympho Th1 tiết lymphokin: IL – 2, IL -3, IFN α, INFβ, IL -12  kiểm sốt q trình viêm, hoạt hóa DTB, phản ứng q mẫn chậm hình hành u hạt, nhóm gọi kháng thể TB

-Lympho Th2 tiết ra: IL -9, IL – 4, IL – 5, IL – 6, IL – 13, INF – α

Th2 truyền thơng tin KN cho lympho B, hoạt hóa B để biệt hóa thành tương bào sx kháng thể, dịch thể  kiểm sốt q trình sx kháng thể dịch thể

Lympho Th hoạt hóa theo trạng thái Th1 hay Th2 phụ thuộc vào nhiều yếu tố, chưa rõ VD:

-Đưa KN vào đường da liều nhỏ dễ gây hoạt hóa lympho Th theo Th1  đáp ứng miễn dịch TB

-Đưa KN hòa tan theo đường máu với liều lượng lớn  dễ gây hoạt hóa Th theo Th2  đáp ứng miễn dịch thể b.Sự tương tác điều hòa APC MHC lớp I với TB lympho TCD8

-siêu KN + MHC lớp I TB APC ( TB APC lúc TB đích) -lúc siêu KN lympho T có dấu ấn CD8 nhận thông tin KN: +Dấu ấn CD8 giúp T nhận đc dịng TB đích có mang NHC lớp I +Siêu KN nhận biết nhờ receptor T (TCR)

-Sự tiếp xúc TB đích với TCD8 gắn chặt củng cố nhờ phân tử bám dính: + CD2, LFA1 TCD8

+ LFA3, ICAM TB đích

- TCD8 họat hóa phân triển thành : +Nhóm TB T có ký ức miễn dịch

+Lympho T ức chế ( Ts – suppressor T cell) có khả ức chế nhóm Tc nhóm TB lympho B có tác dụng điều hịa giúp q trình hoạt hóa hai loại TB không vượt mức

+ TCD8 trở thành nhóm TB T độc ( Tc) sau hoạt hóa tín hiệu KN có kích thích số cytokine nhóm Th1 tiết

• Lympho TCD8 hoạt hóa với chức năng:

- TB gây độc với TB đích, chúng ly giải TB qua bước sau:

+ Giai đoạn tiếp xúc trực tiếp Tc với TB đích ( CD8 – MHC lớp I, siêu KN – TCR, phân tử bám dính ) + giai đoạn phá hủy:

Xảy khoảng 10p sau có bám dính

Lympho Tc gây độc tiết chất độc : perforin, enzyme serinesterase

Các chất hợp với màng TB đích xâm nhập vào nguyên sinh chất tế bào bị phá hủy

Ngồi TB đích cịn chết theo chế hủy diệt tự nhiên gọi Apoptosis Sau bị tác động, AND tB đích bị thối hóa, ngun sinh chất bị đặc cuối chúng bị thực bào

2.2.Đáp ứng miễn dịch thể, hoạt hóa Lympho bào B

Vai trò chủ chốt đáp ứng miễn dịch dịch thể la TB lympho B a Với KN không phụ thuộc tuyến ức

- Khi Kn vào thể đc TB APC bắt nuốt tiêu biến thành siêu KN  Lympho B nhận diện trực tiếp nhờ globulin miễn dịch bề mặt: Slg ( với vai trò BCR: B cell receptor )

+ KN tạo cầu nối receptor bề mặt với kéo theo bố trí lại lg màng

Khởi phát tín hiệu kích thích vào bên TB lympho B  B họat hóa  tương bào tiết kháng thể dịch thể đặc hiệu Trong trường hợp KN tương bào sx

+ Lớp lg M ( không chuyển sang lớp lg G) kéo dài + Khơng có TB B “ nhớ “

Lympho B chín  lympho b hoạt hóa  tương bào  lgM b,Trường hợp KN phụ thuộc tuyến ức:

-Tế bào trình diện KN cho lympho T APC lympho B có trường hợp đặc biệt APC trình diện KN cho TCR BCR

-Khi APC trình diện Kn cho TCD4, chúng biệt hóa thành Th1 Th2, lympho B cịng hoạt hóa nhờ Th2 tiết cytokine IL – 2.4.5.6

-Trong thời kỳ đầu, TB B chuyển từ giai đoạn ngỉ G0 sang giai đoạn hóa G1 tác động IL – 4, IL – TCD4 APC tiết ra,

-Dưới tác động IL – IL – kích thích phân triển clon tế bào B hoạt hóa - Thời kỳ cuối cùng, tác động IL – B phân triển thành TB nhớ miễn dịch tương bào sx kháng thể

-Tùy thuộc vào lượng cytokine khác mà B có hướng tổng hợp globulin miễn dịch khác -IgG IgM IL – 4.5.6; IgA IL – 5: IgE IL –

CÂU 22: Kháng thể dịch thể đặc hiệu? 1.Khái niệm:

-Kháng thể dịch thể đặc hiệu globulin miễn dịch, ký hiệu Ig: (Immuno globulin) xuất dịch tiết thể bị kháng nguyên kích thích sinh có khả kết hợp đặc hiệu với kháng nguyên kích thích sinh chúng 2 Cấu trúc kháng thể dịch thể đặc hiệu:

-Kháng thể dịch thể đặc hiệu có nhiều lớp khác nhau: IgG, IgM, IgA, IgE, IgD lớp có số đặc điểm cấu trúc gần giống là:

+Mỗi phân tử Ig có chuỗi nặng ký hiệu chữ H (Heavy) chuỗi nhẹ ký hiệu L (light) +Riêng IgM có 10 chuỗi nhẹ 10 chuỗi nặng

+Trong phần tử Ig, chuỗi H L bào có đơi giống hồn tồn +Sự biệt phần tử Ig chuỗi nặng

•Lớp IgG có chuỗi nặng gamma g •Lớp IgM có chuỗi nặng Muy m •Lớp IgA có chuỗi nặng Alpha a •Lớp IgD có chuỗi nặng Delta d •Lớp IgE có chuỗi nặng Epilon x *Cấu trúc lớp phân tử IgG:

-Gồm chuỗi peptit, liên kết với cầu nối disunfit - S - S - Trong có chuỗi nặng H chuỗi nhẹ L + Chuỗi nhẹ L: (Light chain)

•Có trọng lợng phân tử thấp 23.000 Dalton có 214 axit amin •Cấu tạo phân tử IgG

•Có loại chuỗi nhẹ chung cho tất lớp Ig là: chuỗi nhẹ Kappa (K) chuỗi nhẹ Lamda (ë)

•Chuỗi nhẹ chia làm vùng:

•- Vùng thay đổi VL (Variable Light): có đầu tận NH2 từ axit amin đến axit amin 107 Tuỳ theo trêng hợp trình tù xếp axit amin khác

•Trong vùng có số đoạn trình tù xếp axit amin dễ thay đổi: gọi vùng siêu biến (Hypervariable region) •Ví dụ: chuỗi nhẹ lamđa có vùng siêu biến đoạn axit amin: 24 - 34; 50 - 56; 89 - 97

•- Vùng định C: (Constant region)

•Có đầu tận - COOH, từ a.a 108 đến 214 trình tự xếp a.a vùng thay đổi vùng gọi vùng định

+ Chuỗi nặng H: (Heavy chain)

•Có trọng lợng phân tử 50.000 Dalton, chuỗi nặng có khoảng 440 - 446 a.a đc chia làm vùng

•- Vùng thay đổi: VH (Variabl heavy) Có khoảng 116 a.a, có đoạn dễ thay đổi (vùng siêu biến) như: Từ a.a 31 ◊ 37, 51 ◊ 68, 86 ◊ 91

•- Vùng định: CH (Constant Heary) Có khoảng 330 a.a đợc chia làm vùng, vùng có 110 a.a ký hiệu CH1, CH2, CH3

•Vùng giáp ranh đoạn CH1 CH2 gọi vùng lề, có đặc điểm mềm mại giúp cho cánh phần tử Ig mở khép vào từ - 1800, nhờ dễ dàng kết hợp với kháng ngun

•Vùng lề cịng nơi dễ bị tác động enzym tiều protein

•Vùng thay đổi chuỗi nặng chuỗi nhẹ nằm kề nhau, tham gia vào việc hình thành vị trí kết hợp với kháng nguyên (Paratop)

•Vùng lề phần tử Ig ngồi đặc tính mềm mại, cịn vị trí dễ bị tác động enzym tiêu protein Nếu dùng enzym papain pepsin, phân tử IgG phân cắt thành mảnh khác

•- Với enzym papain

•Phân tử IgG đợc phân cắt thành mảnh

•2 mảnh giống mảnh gồm toàn chuỗi nhẹ phần chuỗi nặng có tận - NH2 gồm đoạn VH, CH1 Mảnh có trọng lợng phân từ 50.000 dalton vị trí kết hợp với kháng nguyên, ký hiệu Fab (Antigen binding fragment) •+ Một mảnh gồm đoạn CH2, CH3, chuỗi nặng Mảnh có trọng lợng phân tử 60.000 dalton, dễ kết tinh nên có ký hiệu Fc (Crystallizable fregment)

• Mảnh khơng có hoạt tính kháng thể có số tính chất sinh học sau: •- Có tính kháng ngun đa Ig vào thể khác lồi

•-Có khả gắn với số tế bào (lớp phân tử IgE, IgG phần Fc có -khả gắn lên bề mặt tế bào bạch cầu kiềm, tế bào Mast Fc IgG, IgM gắn với ĐTB, )

•- Với Enzym pepsin

•Phần tử IgG đc phân cắt thành mảnh:Mảnh lớn gần giống mảnh Fab Trọng lợng phân tử khoảng 100.000 dalton, có vị trí kết hợp với kháng ngun, nên hoạt tính giống Có vị trí kết hợp với bổ thể ◊ hoạt hóa bổ thể Kháng thể hồn tồn Điều có ý nghĩa lớn trường hợp cần sử dụng tính kết hợp đặc hiệu với kháng nguyên loại bỏ phản ứng phụ không cần thiết mảnh Fc gây

•VD: Dùng KHT điều trị

•Mảnh nhỏ cịn lại Fc có trọng lợng phân tử khoảng 50.000 dalton CÂU 23: Đặc tính chức kháng thể dịch thể đặc hiệu? *)Đặc tính:

-Có chất glucoprotein, trọng lợng phân tử lớn: 16.000 - 1.000.000 dalton -Dễ bị tác động nhiệt độ, axit, kiềm, phá huỷ

-Có khả nhận biết kháng nguyên kết hợp đặc hiệu với kháng ngun kích thích sinh chúng Vị trí kháng thể kết hợp với kháng nguyên gọi paratop Tổng số paratop hóa trị kháng thể Thường kháng thể có hóa trị

-Kháng thể có tính kháng ngun cao đưa vào thể khác lồi kháng thể sinh trường hợp gọi kháng kháng thể

-Để bảo quản kháng thể thời gian dài Giữ nhiệt độ < 00C

*)Chức kháng thể dịch thể:

-Phân tử Ig có khả nhận biết kháng nguyên kết hợp đặc hiệu với  kết hợp dẫn đến kết quả: Kháng nguyên khả gây bệnh Đây chức chủ yếu kháng thể

-Ngoài Ig cịn số chức khác thơng qua vai trị mảnh Fc làm cho kháng nguyên bị loại trừ cách mạnh mẽ có hiệu

-Hoạt hóa bổ thể: Sự kết hợp kháng nguyên - kháng thể hình thành phức hợp kháng nguyên - kháng thể - bổ thể  khả hoạt hoá bổ thể (có IgM, IgG)  tế bào vi khuẩn bị giải -Tương tác với tế bào khác

-Trên bề mặt tế bào bạch cầu kiềm, Mast có thụ thể với phần Fc IgE, IgG Khi có kết hợp kháng nguyên với phần tử kháng thể  tế bào đc hoạt hố

phóng thích bọc chứa chất hoạt mạnh Histamin, Steronin  tăng tính thấm mao mạch, co trơn  kháng thể máu, bạch cầu dễ vượt qua thành mạch tới nơi có yếu tố kháng nguyên xâm nhập

+Trên bề mặt đại thực bào, bạch cầu trung tính có thụ thể với Fc phân tử IgM, IgG Nếu kháng nguyên vi khuẩn đơn bào đc phủ kháng thể: IgM, IgG dễ bị đại thực bào bạch cầu trung tính bắt nuốt

CÂU 24: Các lớp kháng thể dịch thể?

Các lớp kháng thể dịch thể: Kháng thể dịch thể có lớp: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE *)Lớp IgG

-Lớp IgG chiếm số lợng lớn tổng số Ig người chiếm đến 80% Phần lớn kháng thể lưu động thuộc lớp

-IgG có trọng lượng phần tử 150.000, số lắng 7S khác biệt tính kháng nguyên mảnh Fc, lớp IgG đc chia làm dới lớp: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4

-Cấu trúc: Gồm chuỗi nặng gamma chuỗi nhẹ lamda hặc Kappa -Đặc tính sinh học

+Hoạt hoá bổ thể theo đường cổ điển

+Có thụ thể giành cho phần Fc bề mặt tế bào đại thực bào, B/c trung tính

+Phân tử IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 có thụ thể giành ch Fc bề mặt bạch cầu kiềm, Mast

+Có khả vượt qua thai để vào máu thai nhi Nhờ kháng thể từ mẹ sang thể con, giúp cho đứa trẻ sinh có đc miễn dịch phịng, chống bệnh đc tuần tuổi

-Là lớp kháng thể chủ yếu đáp ứng miễn dịch thứ phát

-Kháng thể IgG sản sinh sau lớp IgM nên gọi lớp kháng thể muộn *)Lớp IgM

-Chiếm - 10% tổng số Ig huyết

+IgM đơn vị tạo thành, hình cánh (gồm 10 chuỗi nặng Muy 10 chuỗi nhẹ lamda hặc kappa) đơn vị nối với chuỗi J (TLPT: 20.000 gồm upload.123doc.net - 125 a.a, có - gốc cacbuahydro Chuỗi J có tính kháng ngun, phân tử IgM bị che lấp, IgM bị biến đổi định kháng nguyên đc hở ra)

+IgM có khả kết hợp thuận lợi với kháng ngun có 10 mảnh Fab chìa phía +IgM có khả hoạt hố bổ thể mạnh

+IgM lớp kháng thể xuất sau có kích thích kháng nguyên Sau IgG thay Thời gian tồn IgM thường ngắn - ngày Nhưng có trường hợp tồn lâu

VD Kháng nguyên lại gluxit, lại kháng nguyên không phụ thuộc tuyến ức

*)Lớp IgA: Có loại: IgA huyết IgA tiết niêm mạc (kháng thể cục bộ) -IgA huyết thanh:

+Chiếm khảng 15 - 20% tổng số Ig huyết Có trọng lượng phân tử: 160.000 dalt, số lắng 7S

+Trong huyết IgA thường tồn dạng monome (hơn 80%), số tồn dạng polyme - monome nối với chuỗi J Các polyme thường tăng cao bệnh nhiễm trùng

-IgA tiết:

+Có nước bọt, nước mắt, nước mũi, sữa, dịch tiết phổi, dịch tiết ruột, +Về cấu tạo:

 IgA tiết loại dimer gồm monome nối với chuỗi J mảnh tiết SP (Secretry piese (mảnh)

 Chuỗi J tế bào plasma sản xuất có khảng 137 a.a, mảnh tiết chất glucoprotein, trọng lượng phân tử 70.000 dalt tế bào biểu mô niêm mạc tiết Mảnh tiết chức nối monomer IgA với giúp IgA tiết chống lại đc tác động enzym đường tiêu hoá

 IgA tiết kháng thể chỗ, ngăn cản xâm nhập kháng nguyên (vi khuẩn, virus, ) thể, IgA chịu đợc độ pH thấp dày trẻ em bỳ đợc hởng lợng lớn IgA tiết từ sữa mẹ

*)Lớp IgE:

-Lớp IgE chiếm tỷ lệ thấp: 0,01% tổng số Ig huyết thanh, trọng lượng phân tử: 190.000 dalton số lắng 8S Dễ biến tính nhiệt

VD: 560C/30' bị biến tính cấu trúc

-IgE gồm chuỗi nặng Epsilon, chuỗi nhẹ lamda Kappa

-IgE lớp kháng thể tế bào, bề mặt tế bào bạch cầu kiềm, Mast có thụ thể giành cho phần Fc lớp kháng thể Đây lớp kháng thể dễ gây dị ứng

*)Lớp IgD

-Lớp IgD chiếm tỷ lệ thấp: 0,1 - 0,2% tổng số Ig huyết -Trọng lượng phân tử: 170.000 - 200.000 dalton, số lắng - 8S -Về cấu trúc

+Phân tử IgD cho chuỗi nặng delta chuỗi nhẹ Lamda kappa tạo thành

+IgD có chất glucoprotein, lớp kháng thể dễ bị tác động enzym tiêu protein

-Cho đến chức sinh học lớp IgD chưa xác định rõ Người ta thường thấy tăng bệnh nhiễm khuẩn mạn tính khơng đặc hiệu cho loại

-Đối với bào thai:

+Bào thai có khả tổng hợp kháng thể sớm, vào khoảng tuần thứ 10 tổng hợp IgM, tuần thứ 12 tổng hợp IgG

+Bào thai khơng có khả tổng hợp IgA, IgE, IgD

+IgG kháng thể qua đợc thai, thai nhi đc hưởng IgG mẹ Trong

4 - tháng đầu thời kỳ thai, IgG qua thai sau tuần 20 trở IgG qua nhiều CÂU 25: Quy luật hình thành kháng thể dịch thể đặc hiệu?

-Khi kháng nguyên xâm nhập vào thể, kháng thể chưa sinh mà phải sau thời gian tiềm tàng (thời gian dài hay ngắn phụ thuộc nhiều vào kháng nguyên, vào lần kháng nguyên xâm nhập lần đầu hay lần2, lần 3, ) Sau kháng thể đc sinh ra, lượng kháng thể tăng dần đạt mức cao sau - tuần, lượng kháng thể giảm dần biến sau vài tháng vài năm

-Kháng nguyên vào thể lần đầu, đáp ứng miễn dịch gọi đáp ứng miễn dịch sơ cấp hay miễn dịch tiên phát -Kháng nguyên vào thể lần hai, đáp ứng miễn dịch gọi đáp ứng miễn dịch thứ cấp hay miễn dịch thứ phát

-Khi kháng nguyên vào lần thời gian tiềm tàng ngắn hơn, lượng kháng thể sản xuất nhiều hơn, thời gian xuất kháng thể sớm

-Sự khác biệt đáp ứng miễn dịch sơ cấp thứ cấp vai trò tế bào nhớ miễn dịch lympho T "nhớ", lympho B "nhớ"

-Ở miễn dịch thứ phát tế bào "nhớ" miễn dịch phát triển nhanh mạnh tạo lớp tế bào sản xuất kháng thể đặc hiệu kháng thể xuất sớm hơn, cường độ đáp ứng miễn dịch dài hơn, mạnh

-Đây sở khoa học cho việc tiêm phòng vacxin nhắc lại, tạo miễn dịch cao cho thể

-Kháng thể dịch thể đặc hiệu thường tồn thể thời gian bị đào thải, phịng bệnh cho người gia súc, gia cầm sử dụng vacxin cần tiêm nhắc lại để tạo miễn dịch cao cho thể

-So sánh miễn dịch sơ cấp thứ cấp:

-Thời gian tiềm tàng: - 14 ngày

-Kháng thể ban đầu chủ yếu: IgM, sản xuất IgG -Lượng kháng thể thấp

-ái tính kháng thể trung bình

-Thời gian tiềm tàng: 24

-Chủ yếu IgG, IgM không sản xuất -Lượng kháng thể cao

-ái tính kháng thể cao

CÂU 26: Các yếu tố ảnh hưởng đến hình thành kháng thể đặc hiệu:

Sự hình thành kháng thể đặc hiệu thể bị ảnh hưởng nhiều yếu tố đặc biệt như: Kháng nguyên, thể trạng thể, điều kiện ngoại cảnh,

*)Ảnh hưởng kháng nguyên: -ảnh hưởng chất kháng nguyên:

+Kháng nguyên có chất protein, có tính kháng ngun cao, kích thích thể sản sinh nhiều kháng thể so với kháng nguyên khác: Gluxit, lipit

+ảnh hưởng đường xâm nhập kháng nguyên vào thể

+Kháng nguyên vào thể nhiều đường, đưa kháng nguyên vào thể đường đưa thích hợp nhất, lượng kháng thể sinh nhiều

VD: - Virus thích ứng tế bào thượng bì  đưa vacxin cách chủng da

-Virus newcasthe thuộc nhóm Lentogen: Lasota, F, B1, V4 nhân lên tốt tế bào niêm mạc đường hơ hấp, tiêu hố  Nên đưa vacxin loại qua niêm mạc đường hơ hấp, tiêu hố,

-Trong sử dụng vacxin, thường hay đưa vacxin vào thể cách tiêm da vì: kháng nguyên qua da  vào mạch bạch huyết  tổ chức hạch lympho (nơi tiếp nhận kháng nguyên sản xuất kháng thể)

-Đưa kháng nguyên vào thể qua đường tiêu hố sử dụng vì: Độ PH dày thấp, enzym đường tiêu hoá tác động  Kháng nguyên bị phân giải hay thay đổi đơn vị cấu trúc kháng nguyên  lượng kháng thể sinh

-Theo số tác giả đưa kháng nguyên vào thể đường tiêu hố, hơ hấp liều lượng kháng ngun gấp 10 - 100 lần liều kháng nguyên đưa vào dới da

-Liều lượng kháng nguyên

+Liều lượng kháng nguyên đưa vào thể nhiều, lượng kháng thể sinh nhiều Nhưng lượng kháng nguyên có giới hạn định vì: Nếu lượng kháng nguyên nhiều gây độc cho thể, gây tê liệt miễn dịch, dung nạp miễn dịch, kháng thể không đc sản xuất

*)Ảnh hưởng lần đưa kháng nguyên:

-Đưa kháng nguyên vào thể, sau thời gian đưa kháng nguyên nhắc lại vài lần -kháng thể lần sau xuất sớm hơn, lượng kháng thể nhiều so với lần trước Có tượng vài trò tế bào nhớ miễn dịch

-Hiện tợng đc ứng dụng việc tiêm nhắc lại vacxin, tạo miễn dịch cao cho thể *)Ảnh hưởng việc dùng nhiều loại kháng nguyên:

-Cùng lúc đưa nhiều loại kháng nguyên vào thể với liều thích hợp, loại kháng thể đc tạo ngang hay nhiều đa kháng nguyên vào riêng loại Ramon gọi tượng công lực kháng nguyên

-Nhưng đưa nhiều loại kháng nguyên vào thể với liều không thích hợp  kết ngược lại

-Hiện tượng công lực kháng nguyên đc ứng dụng vào việc chế tạo vacxin đa giá phòng bệnh cho người gia súc -VD: +ở người vacxin: PTD phòng bệnh (Ho gà, uốn ván, bạch hầu tiêm bắp hầu)

(Ho gà: vi khuẩn Bordetella pertussis Uốn ván: vi khuẩn Clostridium tetani

Bạch hầu: vi khuẩn Corynebacterium diphtheriae) +Gia súc: vacxin tụ dấu

+Gia cầm: Vacxin Newcasthe + Gumboro + Bronchitis Infectious + Reovirus -Newcasthe + đậu gà *)Ảnh hưởng chất bổ trợ:

-Chất bổ trợ chất cho thêm vào vacxin, làm hiệu lực vacxin cao -Chất bổ trợ đc chia làm loại chính:

+Bổ trợ chất vơ cơ: Alumin hydroxid, Alumin photphat, Canxiphotphat, than hoạt tính +Bổ trợ chất hữu cơ: dầu động vật, dầu thực vật, dầu khoáng (dầu khoáng parafin) +Bổ trợ sinh vật

+Xác vi khuẩn lao

+Xác vi khuẩn Salmonella typhimurium -VD: Vacxin viêm gan vịt vơ hoạt có bổ trợ -Tác dụng bổ trợ:

+Chất bổ trợ gây phản ứng viêm nhẹ  có tác dụng kích thích miễn dịch

+Bổ trợ vơ cơ, bổ trợ dầu có tác dụng hấp phụ kháng nguyên, làm kháng ngun khó đồng hố thể kháng ngun tồn lâu, kích thích thể lâu  lượng kháng thể sinh nhiều

+Bổ trợ sinh vật có tác dụng kích thích tế bào miễn dịch

+LPS tác động mạnh lên tế bào đại thực bào lympho B Tác dụng LPS làm hoạt hoá đại thực bào thực bào thực bào hồn chỉnh

+Với lympho B, LPS làm tăng biệt hoá phần bào lympho B  tăng tương bào, tăng tiết kháng thể dịch thể *)Ảnh hưởng thể điều kiện ngoại cảnh:

-Cơ thể trưởng thành hệ thống quan, tế bào miễn dịch hoàn thiện  cho đáp ứng miễn dịch mạnh  lượng kháng thể sinh nhiều

-Khi già quan miễn dịch suy giảm  đáp ứng miễn dịch giảm, đặc biệt giảm miễn dịch tế bào  lượng kháng thể giảm -Cơ thể khoẻ mạnh sản sinh kháng thể nhiều thể ốm, bệnh tật

-Chế độ dinh dưỡng tốt cho lượng kháng thể nhiều so với thể suy dinh dưỡng

-ở thể suy dinh dưỡng, hoạt động quan lympho giảm, rối loạn đáp ứng miễn dịch: Miễn dịch tế bào giảm, thực bào giảm, miễn dịch dịch thể giảm,

-VD: +Thiếu protein  lượng kháng thể giảm

+Nhiều kẽm (Zn)  giảm yếu tố dịch thể tuyến ức  giảm miễn dịch tế bào, CÂU 27: Phản ứng ngưng kết:

-Là phản ứng liên kết tiểu thể có kích thước nhỏ tính Micromet thành cấu trúc lớn quan sát đc mắt thường -Ở kháng nguyên cấu phần nằm bề mặt tiểu thể

*Các loại phản ứng ngưng kết:

1.Phản ứng ngưng kết nhanh phiến kính:

-Đây phản ứng có tính chất định tính Thường sử dụng kháng ngun biết đc nhuộm màu để phát kháng thể tương ứng huyết Thường dùng để chẩn đoán bệnh truyền nhiễm

-Ví dụ: +Bệnh thương hàn gà Typhus avium +CRD (Chromic Respiratory Disease) -Cách làm:

+Dùng phiến kính, bên thí nghiệm, bên đối chứng

+Bên thí nghiệm nhỏ giọt huyết cần chẩn đốn, sau nhỏ giọt kháng ngun biết  trộn đều, sau - phút đọc kết

+Nếu huyết có kháng thể tương ứng  kháng nguyên + kháng thể tạo thành đám ngưng kết

2.Phản ứng ngưng kết chậm ống nghiệm:

-Phản ứng vừa có tính chất định tính, vừa định lượng kháng thể -Cách làm:

+Dùng loạt ống nghiệm, cho vào ống thứ lượng huyết thanh, pha loãng huyết theo số (1/2; 1/4; 1/8 ) theo số 10 Sau cho vào ống nghiệm lượng kháng nguyên (lượng kháng nguyên tương đơng với lượng kháng thể) Trộn để nhiệt độ thích hợp (tủ ấm 370C) sau 30 phút vài giờ, đọc kết tính đc hiệu giá ngưng kết

+Hiệu giá ngưng kết: Là độ pha loãng cao huyết mà cịn khả gây tợng ngưng kết -Phản ứng thường đc sử dụng để chẩn đoán bệnh sảy thai truyền nhiễm

3.Phản ứng ngưng kết hồng cầu thụ động:

-Trong phản ứng ngưng kết dùng kháng nguyên hoà tan để phát kháng thể tương ứng Phải cần đến tế bào màng làm giá đỡ mang phân tử kháng nguyên hoà tan

-Thường dùng hồng cầu làm tế bào mang -Nguyên lý:

+Kháng ngun hồ tan trở thành kháng ngun hữu hình cách gắn kháng nguyên hoà tan vào hồng cầu, hồng cầu làm giá đỡ cho kháng nguyên Phản ứng ngưng kết dễ dàng xảy

+Có nhiều phương pháp gắn kháng nguyên hoà tan lên bề mặt hồng cầu: Dùng số hoá chất axit tanic, benzidin, muối crôm, glutaldehyt để xử lý hồng cầu Các chất có nhóm chức gắn với hồng cầu, nhóm gắn với kháng nguyên +Khi kháng nguyên gặp kháng thể tương ứng, phản ứng ngưng kết xảy ra, ta quan sát rõ

-Ngoài sử dụng hồng cầu làm giá đỡ, sử dụng hạt chất dẻo như: hạt latex, bentonít Các hạt có tác dụng hấp phụ kháng ngun hồ tan vào

-Ưu nhược điểm phản ứng ngưng kết

+Ưu điểm: Phản ứng đơn giản, dễ làm, độ nhạy cao, tốn kém, đc sử dụng rộng rãi +Nhược điểm: Hay cho phản ứng dương tính giả, khó đạt trình độ xác cao CÂU 28: Phản ứng kết tủa (Precipitation test)

*)Nguyên lý:

-Kháng nguyên hoà tan gặp kháng thể tương ứng tương quan thoả đáng (lượng kháng nguyên kháng thể thích hợp) tượng kết tủa xảy

-Sự kết hợp kháng nguyên với kháng thể tạo thành tập hợp: kháng nguyên- kháng thể- kháng nguyên- kháng thể-… -Hình thành cấu trúc mạng lưới chiều khơng gian, quan sát đc mắt thường biểu chất tủa màu đục

-Trong phản ứng kết tủa thừa kháng thể thừa kháng nguyên kết hợp kháng nguyên - kháng thể xảy tượng tủa không xuất

+Là phản ứng có tính chất định tính Dùng ống nghiệm nhỏ, cho vào lượng kháng ngun hồ tan Dùng pipet hút kháng huyết tương ứng, cho đầu pipet sát đáy ống nghiệm thả từ từ kháng huyết với lượng tương đơng với kháng nguyên Kháng huyết đội kháng nguyên lên Sau thời gian 15 - 20 phút vùng tiếp xúc xuất đĩa tủa mỏng

+Phản ứng đc ứng dụng chẩn đoán bệnh nhiệt thán Phản ứng kết tủa Ascoli -Phương pháp Heidelberger Kendall:

+Phương pháp vừa có tính chất định tính, vừa có tính chất định lượng

+Phương pháp đc dùng để tìm tỷ lệ thích hợp kháng ngun, kháng thể cho phản ứng

+Dùng loạt ống nghiệm, cho vào ống lượng kháng huyết Sau cho kháng ngun vào với lượng từ đến nhiều

+Kết ống đầu ống cuối khơng có tủa thừa kháng thể thừa kháng nguyên Những ống tủa xuất hiện, tăng dần đến cực đại, giảm dần

+Lập bảng biểu diễn thấy vùng: vùng thừa kháng thể, vùng cân kháng nguyên, kháng thể vùng thừa kháng nguyên *)Phản ứng kết tủa môi trường đặc (gel):

-Dùng thạch Agar để tạo môi trường đặc: phần đặc chiếm 1- 2% khối lượng, 98- 99% chất láng Thạch có cấu trúc dạng sợi nên tạo đc cấu trúc lưới không gian chứa đc nhiều chất láng

-Nguyên tắc: Trong môi trường gel, kháng nguyên kháng thể cách khoảng, chúng khuếch tán phía nhau, gặp Nếu kháng nguyên, kháng thể tương ứng kết hợp tạo phức hợp kháng nguyên - kháng thể Tại vùng có lượng kháng nguyên, kháng thể thích hợp đường tủa xuất Có thể quan sát đc muốn rõ nhuộm

-Phản ứng kết tủa thạch ống nghiệm (kỹ thuật Oudin) +Phản ứng kết tủa khuếch tán thạch đơn:

•Dùng ống nghiệm có đường kính nhỏ, cho vào lượng kháng thể trộn lẫn với thạch Trên mặt thạch cho lượng dung dịch kháng nguyên Kháng nguyên từ môi trường lỏng khuếch tán vào thạch, xuống sâu lượng kháng nguyên loãng nơi tỷ lệ kháng nguyên kháng thể tương ứng xuất đường tủa dễ quan sát không bị tan lắc, thuận lợi di chuyển chụp ảnh

•Độ nhạy phản ứng tăng gấp - lần so với thực phản ứng môi trường lỏng +Phản ứng kết tủa khuếch tán thạch kép:

•Dùng ống nghiệm có đường kính nhỏ, cho kháng thể vào trước, cho vào bên kháng thể lượng thạch Sau cho lên mặt thạch lượng dung dịch kháng ngun

•Kháng ngun bên từ mơi trường lỏng khuếch tán vào thạch, kháng thể bên khuếch tán lên vào thạch nơi tỷ lệ kháng nguyên, kháng thể tương ứng xuất đường kết tủa

•Trong ống nghiệm dùng nhiều cặp kháng nguyên, kháng thể khác để chẩn đoán xuất nhiều đường kết tủa riêng rẽ độ nông sâu khác + Phản ứng kết tủa thạch phiến kính đĩa petri (kỹ thuật Ouchterlony)

•Thực chất phản ứng kết tủa khuếch tán thạch kép, dễ làm, hay sử dụng (Phản ứng AGP: Agar gel precipitation) •Trên phiến kính hộp petri, đổ lớp thạch mỏng - 2mm Khi thạch đông lại, đục lỗ trịn: đường kính lỗ - 5mm, khoảng cách từ lỗ trung tâm với lỗ xung quanh; - 6mm: Lỗ 1: Kháng nguyên biết, Lỗ 2: Kháng thể tương ứng, Lỗ 3, 4, 5, 6: Kháng thể chưa biết

•Kháng nguyên kháng thể cách khoảng thạch, chúng khuếch tán phía, xa lỗ, nồng độ lỗng nơi kháng nguyên, kháng thể tương ứng xuất đường tủa

•Có thể dùng hỗn hợp kháng thể để phát nhiều kháng nguyên dung dịch Lúc xuất nhiều đường tủa, đường tủa cặp đặc hiệu kháng nguyên - kháng thể

-Có thể thấy nhiều loại kết quả:

+Phản ứng giống hệt nhau: Khi kháng nguyên y hệt nhau, đường kết tủa nối liền

+Phản ứng không giống hệt: Khi kháng nguyên khác nhau, kết hợp riêng rẽ với kháng thể, hai đường tủa cắt chéo +Phản ứng giống phần: Khi kháng nguyên có chung Epitop Epitop riêng khác cho đường kết tủa chung liền với đường tủa phụ xuất gắn với đường tủa trước kháng nguyên thứ hai

*)Phản ứng kết tủa khuếch tán điện

-Là kết hợp phản ứng kết tủa với di chuyển điện trường

-Đây cải tiến có ý nghĩa: Dùng điện trường để đẩy nhanh tốc độ phản ứng kháng nguyên - kháng thể

Kháng thể γ globulin điện trường di chuyển cực âm Nếu kháng nguyên chất bị hút cực dương, chúng di chuyển gặp nhanh (1 - thay 24 - 48 giờ)

-Phản ứng xảy nhạy (nhờ điện trường 90% kháng nguyên, kháng thể ngược chiều để gặp nhau, thay khuếch tán tứ phía có 25% gặp

-Miễn dịch điện di:

+Dùng điện trường để di chuyển hỗn hợp kháng nguyên thành dải kháng nguyên Sau cho kháng thể vào rãnh song song với hàng kháng nguyên Chúng khuếch tán, gặp nhau, đường tủa nằm cách xa nhau, thay nằm tập trung vào vùng chật hẹp phản ứng khuếch tán kép (Ouchterlony) Vì dễ quan sát nhận định

+Miễn dịch điện di cho phép phát kháng ngun có 30 loại protein thay - điện di thường, - 10 kỹ thuật Ouchterlony

-Là phản ứng huyết học, có thành phần tham gia: kháng nguyên, kháng thể bổ thể

-Kháng thể phản ứng thuộc lớp IgM, IgG có khả hoạt hoá bổ thể Khi kháng nguyên kết hợp với kháng thể tạo thành phức hợp kháng nguyên - kháng thể, có mặt bổ thể  bổ thể đc hoạt hoá gắn vào tạo thành: kháng nguyên - kháng thể - bổ thể

-Phản ứng đc dùng để phát kháng thể có khả hoạt hố bổ thể định lượng bổ thể có huyết -Phản ứng đc thực nhờ hai hệ thống: dung khuẩn, dung huyết tham gia bổ thể

+Hiện tượng dung khuẩn (Bacteriolysin)

•Thí nghiệm Faifơ (Pfaifer): Năm 1894 ông dùng vacxin phẩy khuẩn tả (vibrio cholerae) tiêm cho chuột lang để gây miễn dịch Đồng thời dùng chuột lang khác làm đối chứng không tiêm vacxin Sau - tuần ông dùng phẩy khuẩn tả cường độc tiêm vào phúc mạc cho loại chuột lang với liều gây chết Sau 15 phút, 30 phút, giờ, ông rút nước phúc mạc kiểm tra vi khuẩn kính hiển vi ni cấy vào mơi trường lỏng để quan sát tính chất mọc thấy:

″ chuột lang đc gây miễn dịch, nước phúc mạc sau 15 phút vi khuẩn mọc nhiều, sau thời gian vi khuẩn giảm dần, đến sau khơng cịn vi khuẩn

Kiểm tra kính hiển vi: nước phúc mạc lấy sau 15 phút, vi khuẩn khơng cịn di động, vi khuẩn biến hình, phình dài Nước lấy sau vi khuẩn tan Chuột lang sống.”

″ chuột lang không đc gây miễn dịch có tượng khác: Nước phúc mạc lấy sau số lượng vi khuẩn nhiều lên, kiểm tra kính hiển vi, vi khuẩn khơng bị biến dạng, số lượng nhiều lên Chuột lang chết.”

Qua thí nghiệm nhận thấy huyết chuột lang đc gây miễn dịch có kháng thể đặc hiệu chống lại vi khuẩn tả, kết hợp kháng thể đặc hiệu với kháng nguyên làm vô hiệu hố vi khuẩn, đồng thời cịn làm chúng bị dung giải

•Thí nghiệm Borde: Để làm rõ hơn, Borde làm thí nghiệm sau: Cho vi khuẩn tả kết hợp với HTMT tả cịn tơi  có tượng tan vi khuẩn tả Cho vi khuẩn tả kết hợp với HTMT đc đun 560C/30'  vi khuẩn tả không bị tan

Cho vi khuẩn tả kết hợp với HTMT tả đun 560C/30' cộng thêm huyết tươi chuột lang  vi khuẩn tả bị tan

Cho vi khuẩn tả trộn với huyết tươi chuột lang  vi khuẩn khơng bị tan

Như thí nghiệm cho thấy huyết miễn dịch phải có loại kháng thể tham gia làm tan xoắn khuẩn: Một loại chịu nhiệt, bị tác dụng đun 560C/30', khơng có tính đặc hiệu là kháng thể không đặc hiệu gọi bổ thể Một

loại chịu đc nhiệt độ 560C/30' có huyết miễn dịch kháng thể đặc hiệu, có khả hoạt hoá bổ thể làm tan vi

khuẩn

Như vậy, tượng tan vi khuẩn phải có thành phần tham gia: kháng nguyên, kháng thể, bổ thể Hiện tượng tan vi khuẩn gọi tượng dung khuẩn, khơng nhìn thấy đc mắt thường

+Hiện tượng dung huyết (Haemolysis)

•Hồng cầu loài kháng nguyên loài khác Vì người ta lấy hồng cầu Cừu tiêm vào da cho thỏ, thỏ sản sinh kháng thể chống lại hồng cầu Cừu  gọi kháng thể kháng hồng cầu Cừu

•Tuần tự làm thí nghiệm Borde:

•-Hồng cầu Cừu + kháng thể kháng hồng cầu Cừu  tan hồng cầu Huyễn dịch có màu đỏ •-Hồng cầu Cừu + kháng thể kháng hồng cầu Cừu đun 560C/30' không tan hồng cầu,

hồng cầu lắng xuống đáy, nước phía

•-Hồng cầu Cừu + kháng thể kháng hồng cầu Cừu đun 560C/30' + huyết chuột lang  Tan hồng cầu

•-Hồng cầu Cừu + huyết chuột lang  không tan hồng cầu

•Như vậy, tượng cho thấy, để làm tan hồng cầu huyết kháng hồng cầu phải có loại kháng thể: •Một loại kháng thể không đặc hiệu, bị tác dụng đun nóng 560C/30’  bổ thể

•Một loại kháng thể đặc hiệu có huyết miễn dịch, chịu đc nhiệt 560C/30' Kháng thể có khả làm tan hồng

cầu có tham gia bổ thể

Như tượng dung khuẩn hay tượng dung huyết muốn xảy ra, thành phần kháng nguyên, kháng thể đặc hiệu cịn có tham gia bổ thể  phản ứng tiêu thụ bổ thể

*)Cách tiến hành phản ứng kết hợp bổ thể

-Phản ứng kết hợp bổ thể phải dùng hai hệ thống: Hệ thống dung khuẩn hệ thống dung huyết Bởi dung khuẩn mắt thường khơng quan sát đc phải dùng hệ thống dung huyết để đánh giá kết qua quan sát mắt thường -Chuẩn bị:

+Kháng nguyên: Là kháng nguyên biết VD: Vi khuẩn Brucella

+Kháng thể: Là kháng thể nghi Lấy máu vật nghi mắc bệnh chắt huyết thanh, đun 560C/30'  diệt bổ thể

+Hồng cầu Cừu

+Huyết kháng hồng cầu Cừu đun 560C/30'

+Bổ thể: Huyết chuột lang đc chuẩn độ theo hệ thống dung huyết -Cách làm:

+Cho vào ống nghiệm hệ thống dung khuẩn gồm có: kháng nguyên, kháng thể nghi cho tiếp vào lượng bổ thể đc chuẩn độ Để 370C 20 - 30 phút

+Cho tiếp vào ống nghiệm hệ thống dung huyết gồm có hồng cầu Cừu huyết kháng hồng cầu Cừu Để 370C 20 -

+Hồng cầu không tan lắng xuống đáy thành cục tròn đỏ, nước bên Đó do: kháng nguyên + kháng thể tương ứng + bổ thể

+Bổ thể đc sử dụng khơng cịn cho hệ thống dung huyết Phản ứng dương tính chứng tỏ huyết vật nghi có kháng thể tương ứng với kháng nguyên Con vật mắc bệnh

-Phản ứng âm tính:

+Hồng cầu bị tan, huyễn dịch có màu đỏ

+Đó khơng có kháng thể tương ứng với kháng nguyên, bổ thể không dùng cho hệ thống dung khuẩn mà tham gia vào hệ thống dung huyết  hồng cầu tan

+Phản ứng âm tính, vật khơng mắc bệnh

CÂU 30: Phản ứng trung hoà (Neutralization test)

-Một số kháng thể gặp kháng ngun kích thích sinh chúng như: virus, độc tố vi khuẩn làm cho chúng không khả gây bệnh

-Phản ứng kết hợp kháng nguyên với kháng thể gọi phản ứng trung hoà

-Phản ứng trung hoà hay sử dụng phản ứng trung hoà độc tố phản ứng trung hoà virus *)Phản ứng trung hoà độc tố vi khuẩn:

-Một số vi khuẩn: +Vi khuẩn uốn ván: Clostridium tetani +Vi khuẩn bạch hầu: Corynebacterium diphtheriae

-Có khả sản sinh ngoại độc tố gây bệnh nhờ độc tố -Độc tố có chất protein, có tính kháng ngun cao

-Độc tố độc, tác dụng số yếu tố nhiệt độ, formol, độc tố độc tính trở thành giải độc tố, tính kháng nguyên cao dùng làm vacxin

-Khi tiêm giải độc tố vào thể, thể sản sinh kháng thể đặc hiệu với độc tố, gọi kháng độc tố -Khi kháng độc tố gặp độc tố, phản ứng trung hồ xảy  độc tố khơng cịn độc

-Phản ứng trung hồ độc tố thực thể động vật ống nghiệm Nếu thực phản ứng trung hoà ống nghiệm ta thấy phức hợp kháng nguyên - kháng thể biểu cụm lơng lơ lửng  người ta gọi phản ứng lên

*)Phản ứng trung hoà virus:

-Virus vào thể kích thích sinh kháng thể dịch thể đặc hiệu, kết hợp virus với kháng thể dịch thể đặc hiệu làm cho virus khơng cịn khả gây bệnh Phản ứng gọi phản ứng trung hồ virus

-Ngun lý: Trên đối tượng ni cấy virus: phôi gà, động vật cảm thụ, môi trường tế bào, virus nhân lên gây bệnh tích cho đối tượng Còn hỗn hợp virus với kháng thể dịch thể đặc hiệu tương ứng, virus bị trung hồ, khơng nhân lên đc khơng gây bệnh tích

-Để thực phản ứng trung hồ cần phải có: +Huyết miễn dịch chuẩn

+Bệnh phẩm chứa virus

+Huyết thường làm đối chiếu

-Để làm phản ứng trung hồ có phương pháp +Phương pháp thứ nhất:

•Huyết khơng pha lỗng (cố định), virus pha lỗng

•Theo phương pháp virus đc pha loãng theo số 10: 10-1 10-7 , hỗn hợp với lượng tương đương huyết miễn

dịch nồng độ Để nhiệt độ phòng 30' đến giờ, đem gây nhiễm cho đối tượng nuôi cấy virus (phơi gà động vật thí nghiệm mơi trường tế bào)

•Mỗi nồng độ gây nhiễm cho - đối tượng ni cấy

•Bằng phương pháp người ta chuẩn độ đc hiệu giá virus hỗn hợp huyết + Phương pháp thứ hai

•Virus cố định, huyết pha lỗng

•Theo phương pháp này, huyết đc pha lỗng theo số (1/2; 1/4; 1/18 ), hỗn hợp với lượng virus định (thường dùng lượng virus tương đơng với liều 100 đến 1000 liều EID50, LD50)

•Theo phương pháp trước làm phản ứng phải xác định đc liều gây nhiễm liều gây chết 50% đối tượng nuôi cấy virus (EID50 LD50)

•Phương pháp ta xác định đc hiệu giá huyết trung hoà

-Phản ứng trung hồ phải có phản ứng đối chiếu kèm theo huyết miễn dịch đc thay huyết bình thường

-Kết phản ứng trung hồ biểu diễn số trung hoà

+Chỉ số trung hoà: Chỉ số trung hoà biểu diễn liều tối đa virus bị trung hoà huyết so với đối chiếu •IN = cologIN: Index Neutralization (chỉ số trung hồ)

•SS: Serum special (huyết chuẩn) •SN: Seum normal (huyết bình thường) •IN từ 11 - 50: phản ứng nghi ngờ

•Tính hiệu giá virus LD50 huyết thí nghiệm LD50 = 1,23

•Tính hiệu giá virus LD50 huyết bình thường (đối chứng) LD50 = 4,77

•Chỉ số trung hoà = hiệu số virus LD50 huyết đối chiếu huyết thí nghiệm: 4,77 - 1,23 = 3,54 •Sau tìm bảng đối log ta có số trung hồ: 3467

*)Các phản ứng huyết học phải dùng kỹ thuật đánh dấu để phát

-Trong nhiều trường hợp để phát kết hợp kháng nguyên - kháng thể, ngời ta phải dùng chất đánh dấu như: chất phát huỳnh quang, enzim, chất đồng vị phóng xạ gắn vào kháng nguyên kháng thể, độ nhạy phản ứng đc tăng lên nhiều lần

-Những chất dùng để đánh dấu phải đạt tiêu chuẩn: -Không đc làm biến tính kháng ngun, kháng thể -Khơng dễ bị bong sau gắn

CÂU 31+32: Phản ứng miễn dịch huỳnh quang (Immuno - fluorescent - test) IF:

-Dùng chất đánh dấu chất phát huỳnh quang (khi hấp thụ ánh sáng có bước sóng định phát ánh sáng có bước sóng dài hơn)

-Nguyên lý:

+Khi dùng kháng thể kháng kháng thể đc nhuộm chất phát huỳnh quang, cho kết hợp với kháng nguyên cần chẩn đốn Nếu có phức hợp kháng ngun - kháng thể soi kính hiển vi huỳnh quang phát sáng

+Dùng chất phát huỳnh quang:

•Fluorescent Isothiocyanat: cho màu xanh lục •Rodamin: màu đỏ gạch

•Lixamin - Rodamin B (RB200): đỏ vàng da cam -Có phương pháp: trực tiếp gián tiếp *)Phản ứng miễn dịch huỳnh quang trực tiếp:

-Trong phản ứng thường dùng kháng thể đặc hiệu nhuộm chất phát huỳnh quang để phát kháng nguyên chưa biết -Cách làm:

+Lấy bệnh phẩm cần chẩn đoán, làm thành tiêu (phiết bệnh phẩm lên phiến kính, cố định) để kháng nguyên gắn chặt lên phiến kính

+Nhỏ giọt kháng nguyên đặc hiệu gắn chất phát huỳnh quang lên tiêu

+Để thời gian 30 phút, rửa nước, để khô, quan sát kính hiển vi huỳnh quang (ánh sáng tia tử ngoại) Đọc kết •Phản ứng dương tính: Có tượng phát sáng có kết hợp kháng nguyên - kháng thể gắn chất phát huỳnh quang •Phản ứng âm tính: Khơng có phát sáng, khơng có kết hợp kháng nguyên - kháng thể

*)Phản ứng miễn dịch huỳnh quang gián tiếp:

-Dùng kháng kháng thể đc nhuộm chất phát huỳnh quang để phát kháng nguyên cần chẩn đoán -Phương pháp gọi kỹ thuật lớp với thành phần tham gia

+Kháng nguyên cần chẩn đoán (kháng nguyên ?) +Kháng thể đặc hiệu

+Kháng kháng thể gắn chất phát huỳnh quang Trong kháng thể đặc hiệu có chức năng:

•Là kháng thể đặc hiệu với kháng ngun cần chẩn đốn

•Là kháng nguyên kháng kháng thể đánh dấu (kháng kháng thể kháng thể kháng globulin loài) -Cách làm:

+Lấy bệnh phẩm cần chuẩn đoán làm tiêu để kháng nguyên gắn chặt lên phiến kính +Nhỏ giọt kháng thể đặc hiệu lên phiến kính Để tác động 15', rửa nước +Nhỏ tiếp - giọt kháng kháng thể gắn chất phát huỳnh quang

+Để tác động thời gian, rửa nước, để khơ, quan sát kính hiển vi huỳnh quang Đọc kết

-Phản ứng dương tính: Có tượng phát sáng, tức có tượng kết hợp kháng nguyên + kháng thể + kháng kháng thể  gia súc mắc bệnh

-Phản ứng âm tính: Khơng có tượng phát sáng, tức khơng có tượng kết hợp kháng nguyên + kháng thể + kháng kháng thể Bởi kháng ngun kháng thể khơng tương ứng, khơng có kết hợp kháng ngun - kháng thể, kháng thể bị rửa trôi -Phương pháp gián tiếp hay đc sử dụng vì:

+Chỉ cần lần gắn kháng kháng thể với chất huỳnh quang ta sử dụng để chẩn đốn nhiều kháng ngun khác nhau, với điều kiện kháng thể đặc hiệu chúng phải đc chế loài vật

+Độ nhạy phản ứng cao hơn, phân tử kháng nguyên bị nhiều kháng kháng thể bám vào  độ phát quang tăng lên, dễ phát

CÂU 33: Phản ứng miễn dịch gắn enzim (Enzim linked Immuno Sorbent Assay):

-Dùng chất đánh dấu enzim có hoạt tính cao, phát chất đặc hiệu với enzim, thường cho màu

-Nguyên lý: Dùng kháng thể kháng kháng thể gắn enzim, cho kết hợp trực tiếp gián tiếp với kháng nguyên, sau cho chất đặc hiệu với enzim vào, chất kết hợp với enzim gắn tạo nên màu Khi so màu quang phổ ký định lượng đc mức độ phản ứng

*)Phản ứng ELISA trực tiếp: Dùng để phát kháng nguyên.

-Cho kháng nguyên cần chẩn đoán vào (kháng nguyên đc chiết xuất dạng hoà tan) để độ giờ, rửa nước (loại bỏ thành phần thừa)

-Cho kháng thể đặc hiệu gắn enzim vào Để thời gian, rửa nước -Cho chất đặc hiệu với enzim vào, để thời gian (20 - 30') Đọc kết

+Nếu có màu tức có kháng nguyên tương ứng với kháng thể đặc hiêu, phản ứng dương tính So màu quang phổ kế để định lượng mức độ phản ứng

+Nếu khơng có màu: Phản ứng âm tính

*)Phản ứng ELISA gián tiếp: Dùng để phát kháng thể

-Cho kháng nguyên biết hấp phụ lên nhựa, để thời gian (qua đêm), rửa nước để loại kháng nguyên thừa -Cho huyết cần chẩn đoán vào, để độ Rửa nước loại bỏ thành phần thừa

-Cho kháng kháng thể tương ứng gắn enzim vào, để thời gian (30'), rửa nước -Cho chất đặc hiệu với enzim vào, để thời gian độ 20', đọc kết

+Phản ứng dương tính: Có màu xuất So màu quang phổ kế để định lượng mức độ phản ứng +Phản ứng âm tính: Khơng có màu xuất

-Trong phản ứng ELISA enzim có hoạt tính cao hay sử dụng peroxydase, chất với enzim 3,3' diaminobenzidin, dới tác dụng enzim tạo màu nâu

-Phản ứng ELISA có độ nhậy cao CÂU 34: Dung nạp miễn dịch: *)Những phát hiện:

-Như biết, bổ máy kiểm soát miễn dịch thể có khả nhận biết khơng phải (lạ) Theo quy luật sinh học, thể không sản sinh kháng thể hay lympho mẫn cảm chống lại thành phần nó, ngồi thành phần kháng nguyên lạ lọt vào thể, thể có phản ứng chống lại

-Năm 1945, lần Suen phát thấy lạ miễn dịch: hai bê sinh đôi nhau, máu bê có chứa hồng cầu bê mà không thấy xảy tượng tan máu

-Năm 1951, Medaon nghiên cứu loạt cặp bê sinh đôi khác trứng thấy: nhiều cặp bê sinh, bê chịu đựng tốt mảnh ghép lấy từ bê

-Năm 1953, Medaon làm thí nghiệm sau: Tiêm liều nhỏ hỗn dịch tế bào lách thận chuột dòng to cho chuột nhắt chửa dòng A vào thời hạn tuần trước ngày sinh qua đường tử cung Khi chuột sinh - tuần sau lấy da từ chuột to ghép sang cho chuột dịng A: khơng thấy có phản ứng loại bỏ mảnh ghép

-Ở lô đối chứng không đc tiêm mảnh ghép bị thải bỏ -Hiện tượng đc gọi dung nạp miễn dịch

*)Khái niệm:

-Dung nạp miễn dịch tượng thể khơng có đáp ứng miễn dịch với loại kháng nguyên lạ cá thể khác lồi có đáp ứng miễn dịch

-Phân loại: Dung nạp miễn dịch có:

+Đặc hiệu: Là tình trạng thể không đáp ứng miễn dịch với loại kháng ngun bình thường có đáp ứng +Khơng đặc hiệu: Cơ thể đáp ứng miễn dịch với loại kháng nguyên

+Tuyệt đối: Là trạng thái dung nạp bền vững, lâu dài có suốt đời

+Tương đối: Là trạng thái dung nạp miễn dịch tồn thời gian ngắn

-Cơ chế: Dưới ánh sáng thuyết chọn lọc, người ta giải thích tượng dung nạp miễn dịch sau:

+Trong thời kỳ bào thai, máy miễn dịch thể có khả nhận biết thành phần (tất có bào thai phần mình, nên kháng nguyên lạ xâm nhập thời kỳ thể chấp nhận thành phần Hết thời kỳ bào thai, khả khơng

+Cụ thể nữa, theo quy luật sinh học: thể sinh vật có nhiều Clon tế bào, dòng tế bào giữ mật mã di truyền tổng hợp nên loại kháng thể đặc hiệu tương ứng với loại kháng nguyên có tự nhiên (ước lượng thể có 1012 tế bào lymphoit, 106 tế bào có tế bào đột biến tạo dịng Clon có 106 dòng Clon khác tổng hợp 106 loại kháng thể khác Con số đáp ứng đc số lượng kháng nguyên tự nhiên)

+Trong thời kỳ bào thai, dịng tế bào có thẩm quyền miễn dịch sinh kháng thể chống lại thành phần thể bị tiêu diệt ức chế Cũng vậy, dịng tế bào có thẩm quyền miễn dịch sinh kháng thể chống lại kháng nguyên lạ rơi vào thời kỳ bào thai bị ức chế tiêu diệt Khi vật trưởng thành không sinh kháng thể chống lại kháng nguyên lạ Thực chất dung nạp miễn dịch huỷ hoại ức chế tế bào có thẩm quyền miễn dịch chuyên biệt phá huỷ mảnh ghép hay chung tế bào có thẩm quyền miễn dịch gây đáp ứng miễn dịch với kháng nguyên

Dung nạp miễn dịch làm cho thể hoàn toàn khả chống lại kháng nguyên Đối với vi sinh vật, lúc thể trở thành mảnh đất màu mỡ bỏ ngỏ khơng phịng thủ

CÂU 35: Tự miễn dịch (autoimmunity)

-Bệnh tự miễn dịch bệnh lý cấu trúc chức phận miễn dịch, thể không nhận thành phần thân mình, ảnh hưởng tế bào có thẩm quyền miễn dịch tự kháng thể, thể chống lại thành phần bình thường gây nên tổn thương thực thể rối loạn thức ăn

chức Nếu tổn thương lớn, phản ứng tự miễn dịch chuyển thành bệnh tự miễn dịch Bệnh tự miễn dịch xảy nguyên nhân sau:

+Do cấu tạo thể có tổ chức vị trí biệt lập, khơng tiếp xúc với hệ thống miễn dịch Nếu vi nguyên nhân dẫn đến tiếp xúc chúng đc coi kháng nguyên lạ thể có đáp ứng miễn dịch chống lại; trường hợp hay xảy với tổ chức tuyến giáp, tinh trùng, viêm mắt giao cảm

VD: Bệnh viêm mắt giao cảm, bị chấn thương mảnh thuỷ tinh thể rơi vào máu kích thích hình thành kháng thể kháng thể chống lại thuỷ tinh thể, mống mắt lại gây mù Bệnh vô sinh xuất kháng thể kháng tinh trùng

+Cơ thể có khả chống lại tổ chức tổ chức bệnh lý Do tác động trình nhiễm trùng, nhiễm độc, chấn thương số tế bào tổ chức bị tổn thương thay đổi cấu trúc, trở thành lạ với thể

VD: Bệnh viêm gan virus: virus biến đổi cấu trúc tế bào gan thể chống lại viêm gan mãn tính

+Cơ thể có khả chống lại tổ chức vi khuẩn, virus lọt vào có kháng nguyên chung với kháng nguyên thành phần quen thuộc thể

VD: Trong bệnh thấp tim: chất hexozamin có polyoxit liên cầu khuẩn β có thành phần gluco protein van tim, nên kháng thể kháng liên cầu khuẩn kháng van tim gây tổn thương van tim Trường hợp viêm cầu thận, khớp xảy tương tự

+Do có thiếu sót bổ máy kiểm sốt miễn dịch: Khi cịn giai đoạn bào thai, dòng tế bào chống lại kháng nguyên thân bị thủ tiêu ức chế chọn lọc, tạo thành dòng bị cấm Do nguyên nhân đó, hệ thống kìm hãm dịng bị cấm suy yếu Các dịng tế bào bị cấm đc giải toả, hoạt động mạnh mẽ sinh kháng thể chống lại tổ chức

CÂU 36: Suy giảm miễn dịch (immuno deficisucy)

*)Khái niệm:Suy giảm miễn dịch tình trạng thể sống hệ thống miễn dịch hoạt động yếu, không đáp ứng đc với u cầu sống bình thường, dẫn đến khơng chống lại đc với vi sinh vật gây bệnh mà hậu thể bị nhiễm trùng nặng đến tử vong

*)Phân loại: Suy giảm miễn dịch đc chia làm hai loại: -Suy giảm miễn dịch bẩm sinh:

+Suy giảm miễn dịch bẩm sinh hay tiên phát bất thường mang tính di truyền, tạo khuyết tật hệ thống miễn dịch, là:

+Suy giảm miễn dịch từ tế bào gốc chung cho hai dòng tế bào lympho B T Trường hợp đc gọi suy giảm miễn dịch nặng phối hợp (SCID - Severed Combined Immuno Deficiency)

+Suy giảm miễn dịch bẩm sinh dịng T Có trường hợp: Suy giảm nặng dòng T suy giảm tuyến ức làm dịng lympho T khơng trưởng thành biệt hóa đc, kết khơng có miễn dịch qua trung gian tế bào Hiện tượng gọi hội chứng George Trường hợp thứ hai rối loạn hoạt hoá tế bào lympho T trưởng thành

+Suy giảm miễn dịch bẩm sinh dịng B: Có thể tổn thương tuỷ xơng, túi Fabricius mà khơng có biệt hố dịng B có sai lạc q trình hoạt hóa lympho B trưởng thành gây rối loạn tổng hợp kháng thể dịch thể

+Suy giảm miễn dịch bẩm sinh dòng tế bào thực bào sản xuất bổ thể gây giảm tế bào thực bào thiếu hụt bổ thể -Suy giảm miễn dịch mắc phải

+Suy giảm miễn dịch mắc phải trạng thái bệnh lý hay gặp, tượng

thứ phát sau nhiều bệnh Nhất bệnh gây suy dinh dưỡng, nhiễm độc, ảnh hưởng số thuốc gây ức chế miễn dịch nhiễm virus

+VD: người nhiễm virus HIV - bệnh nan y thời đại gia cầm bệnh Gumboro - suy giảm miễn dịch dịch thể thứ phát nhiễm virus Gumboro

+Suy giảm miễn dịch thứ phát suy dinh dưỡng: Người ta thấy rõ rằng: thể bị suy dinh dưỡng xuất trạng thái suy giảm miễn dịch không đặc hiệu lẫn đặc hiệu mà chế bệnh sinh thiếu nguyên liệu sinh tổng hợp chất +Suy giảm miễn dịch thứ phát nhiễm trùng:

•Trong tất trường hợp nhiễm khuẩn (virus, vi khuẩn, nấm hay ký sinh trùng) Nếu kộo dài đến gây suy dinh dưỡng dẫn đến suy giảm miễn dịch

•Nhiễm vi rút dẫn đến rối loạn đáp ứng miễn dịch làm suy giảm miễn dịch dẫn đến bội nhiễm khác

•Nhiễm khuẩn mạnh, đặc biệt nhiễm vi khuẩn nội tế bào hủi gây suy giảm miễn dịch tế bào

•Ở người, bệnh kỷ AIDS nhiễm loại Retrovirus HIV-I HIV-II, chúng có tính đặc biệt với phân tử CD4 Receptor với số chemokin có tế bào có thẩm quyền miễn dịch mà chủ yếu tế bào lympho Th đại thực bào VIRUS làm giải tế bào TCD4 bất hoạt chúng, số lượng tế bào TCD4 giảm trầm trọng người nhiễm HIV (bình thường tỷ lệ TCD4/TCD 2/1, nhiễm HIV 0,5/1) Từ giảm sút Th dẫn đến suy giảm miễn dịch trầm trọng •Ở gia cầm: Virut Gumboro làm tổn thương nặng nề túi Fabricius rối loạn biệt hoá lympho B dẫn đến suy giảm miễn dịch dịch thể trầm trọng

-Suy giảm miễn dịch thứ phát số bệnh khác:

+Các bệnh ác tính ung thư, bệnh máu ác tính bệnh thận suy thận, thận nhiễm mỡ dẫn đến suy giảm miễn dịch

+Ngoài thể già, có thay đổi hoạt động miễn dịch, người ta thấy có suy giảm miễn dịch rõ rệt, ngời già thường thấy tăng khả nhiểm khuẩn, hay bị ung thư, mắc bệnh tự mẫn suy giảm miễn dịch

-Quá mẫn: phản ứng mức thể miễn dịch KN chúng xâm nhập vào lần sau

-Sự tương tác KN KT, KN lympho T mẫn cảm dẫn đến tổn thương rối loạn hoạt động cho thể từ mức độ nhẹ đến nặng tử vong

*)Phân loại: Có hai loại mẫn: mẫn nhanh mẫn muộn

1.Quá mẫn nhanh hay mẫn tức khắc: phản ứng sảy tức khắc khơng muộn 6h kể từ có tương tác gia KN KT đặc hiệu Quá mẫn tức khắc lại bao gồm phản vệ dị ứng:

-Phản vệ (Anaphylaxia):

+Phản vệ phản ứng miễn dịch bệnh lý hoàn toàn trái ngược với miễn dịch bảo vệ, xuất tất lồi động vật có vú, phản vệ gây tổn thương nặng nề cho thể Phản vệ chia làm:

•Phản vệ tồn thân: xuất KN vào thể đường tĩnh mạch với tốc độ nhanh, thể thường bị truỵ mạch, tăng hơ hấp, khó thở, tăng tính thấm thành mạch, co trơn, rối loạn tuần hoàn, tiêu hố, tiết, co giật chết Những biểu chất amin hoạt mạch Histamin, serotamin thoát từ TB Mast, bạch cầu kiềm

•Phản vệ cục bộ: hay xảy da, xuất đưa KN vào thể qua da niêm mạc, KN KT kết hợp bề mặt tế bào tổ chức, hình thành phản ứng viêm cục bổ chất hoạt mạch đc tiết ạt cục

+Cơ chế phản vệ: có hai lớp KT gây phản ứng IgE IgG Các KT xuất hiện, dù nồng độ thấp bám mạnh lên tế bào Mast tế bào bạch cầu kiềm KN kết hợp với KT bề mặt tế bào gây tín hiệu làm thay đổi hoạt động màng tế bào làm tế bào giải phóng bọng chứa chất hố học trung gian amin hoạt mạch Các chất trực tiếp tác động lên tế bào quan phủ tạng gây tổn thương nghiêm trọng

-Dị ứng bệnh dị ứng

+Dị ứng danh từ để trạng thái phản ứng khác thường thể với KN lạ, phản ứng miễn dịch bệnh lý sảy tượng phản vệ toàn thân hay cục KT IgE kết hợp với KN gây nên

+KN gây nên dị ứng gọi dị ứng nguyên (allurgen) KT IgE gây dị ứng đc gọi KT dị ứng (reagin) người, dị ứng bệnh phổ biến thể có đáp ứng miễn dịch tạo IgE trội có dị nguyên xâm nhập Những thể cần tiếp xúc với lượng dị nguyên nhỏ tạo lượng IgE đủ gây biểu phản vệ

+Các dị nguyên xâm nhập vào thể nhiều đường khác nhau, chủ yếu qua da hơ hấp

•Dị ứng toàn thân: biểu giống phản vệ toàn thân, thường xảy người, nguy hiểm, điển hình dị ứng penicilin, đặc biệt benzympenicilin Một biểu tai biến dùng huyết điều trị nhiều lần Một số thể sinh IgE gây dị ứng

•Dị ứng cục bộ: hay gặp trường hợp : hen mề đay, eczema, viêm mũi dị ứng

•Phịng chống dị ứng: Điều trị tai biến dị ứng có tính chất cấp cứu chết nhanh -Thuốc: dùng thuốc đối lập với tác dụng amin hoạt mạch Epiuephrin,

isoproterenol - dùng thuốc kháng Histamin

-Giải mẫn: tiêm dị nguyên thời gian dài với liều tăng dần Làm thể sinh IgG nhiều hơn, ngăn cản kết hợp dị nguyên IgE bám tế bào Mast

2.Quá mẫn muộn

-Xảy lympho bào T mẫn cảm với KN xảy thể có đáp ứng tế bào gọi muộn phản ứng xảy chậm, sau đưa KN vào thể từ - 8h cường độ cao sau 24 - 48h hàng tuần Quá mẫn muộn thường khu trú cục dạng phản ứng viêm đặc trưng với thâm nhiễm đại thực bào lympho bào

-Quá mẫn muộn với VSV hay dị ứng nhiễm trùng: +Điển hình mẫn muộn với vi khuẩn lao

+Thí nghiệm Koch: tiêm vi khuẩn lao vào chuột lang mẫn cảm, kết hợp vi khuẩn lao với lympho T mẫn cảm khu trú đc vi khuẩn lại gây phản ứng viêm nơi tiêm tạo u hạt

+Cơ thể mẫn muộn kết hợp KN với lympho T mẫn cảm, T tiết lymphokin có tác dụng tập trung đại thực bào bạch cầu hạt đến để thực bào vi khuẩn Tại đại thực bào bạch cầu tiết enzym làm tổn thương tổ chức, lymphokin gây huỷ hoại tế bào

+Hiện tượng đc ứng dụng chẩn đốn để phát số bệnh có miễn dịch tế bào bệnh lao

-Quá mẫn tiếp xúc: Một số hóa chất, số kim loại nặng, tiếp xúc, xâm nhập qua da vào thể chúng kết hợp với protein thể tạo dị nguyên, kích thích thể sinh miễn dịch tế bào Nếu tiếp xúc lần sau gây tổn thương cục bổ: mụn, sưng cứng

CÂU 38: Hiểu biết phản ứng Sandwich Elisa (Sandwich Elisa trực tiếp, Sandwich Elisa gián tiếp). Phản ứng Sandwich ELISA dùng để xác định kháng nguyên

Phản ứng Sandwich gồm có dạng: *) Sandwich ELISA trực tiếp: -Các bước tiến hành:

+Gắn kháng thể chuẩn lên giá thể, ủ thời gian, rửa nc +Cho kháng nguyên nghi vào, để thời gian, rửa nc

+Cho kháng thể có gắn enzyme vào để thời gian, rửa nc Sau cho chất vào để thời gian +Cho chất dừng phản ứng vào

-Đọc kết quang phổ kế

+Âm tính: ko xuất màu *) Sandwich ELISA gián tiếp: -Các bước tiến hành:

+Gắn kháng thể chuẩn lên giá thể, ủ thời gian, rửa nc +Cho kháng nguyên chuẩn vào, để thời gian, rửa nc

+Cho kháng thể có gắn enzyme vào để thời gian, rửa nc Sau cho chất vào để thời gian +Cho chất dừng phản ứng vào

-Đọc kết quang phổ kế

+Phản ứng dương tính có xuất màu So màu quang phổ kế định lượng mức độ phản ứng +Âm tính: ko xuất màu

CÂU 39:Hiểu biết phản ứng Elisa cạnh tranh (để phát kháng nguyên để phát kháng thể). Phản ứng Elisa cạnh tranh gồm loại: để phát kháng nguyên để phát kháng thể

1.Elisa cạnh tranh phát kháng thể: -Các bước tiến hành:

+Gắn kháng thể biết lên giá thể, ủ thời gian, rửa nc c nhằm loại bỏ kháng nguyên thừa

+Cho kháng thể nghi vào, để thời gian, rửa nc

+Cho kháng thể chuẩn đặc hiệu với kháng nguyên gắn enzyme, để thời gian, rửa nc +Cho chất đặc hiệu với enzyme, cho chất dừng phản ứng vào

-Đọc kết quả:

+Phản ứng dương tính: Phức hợp ko xuất màu kháng thể nghi phù hợp với kháng nguyên biết nên cạnh tranh kết hợp kháng thể chuẩn có gắn enzyme

+Phản ứng âm tính: phức hợp xuất màu đặc trưng kháng thể nghi ko phù hợp với kháng nguyên chuẩn nên bị rửa trơi Kháng thể biết có gắn enzyme trực tiếp kết hợp với kháng nguyên biết cho chất phù hợp vào tạo màu

2 Elisa cạnh tranh phát kháng nguyên: -Các bước tiến hành:

+Gắn kháng thể biết lên giá thể, ủ thời gian, rửa nc

+Cho kháng thể nghi vào, để thời gian, rửa nc nhằm loại bỏ kháng nguyên thừa +Cho kháng nguyên biết có gắn enzyme vào, để thời gian, rửa nc

+Cho chất đặc hiệu với enzyme, để thời gian Cho chất dừng phản ứng vào -Đọc kết quang phổ kế:

+Phản ứng dương tính: Phức hợp ko xuất màu kháng nguyên nghi phù hợp với kháng thể biết nên cạnh tranh kết hợp kháng nguyên chuẩn có gắn enzyme

+Phản ứng âm tính: phức hợp xuất màu đặc trưng kháng nguyên nghi ko phù hợp với kháng thể nên bị rửa trơi Kháng ngun biết có gắn enzyme trực tiếp kết hợp với kháng thể gắn kit Khi cho chất phù hợp vào tạo màu