Kỹ thuật pcr trong xác định kiểu gen human papilloma virus và mối tương quan với phết tế bào cổ tử cung bất thường

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN NGỌC LÂM KỸ THUẬT PCR TRONG XÁC ĐỊNH KIỂU GEN HUMAN PAPILLOMA VIRUS VÀ MỐI TƯƠNG QUAN VỚI PHẾT TẾ BÀO CỔ TỬ CUNG BẤT THƯỜNG LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Y HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN NGỌC LÂM KỸ THUẬT PCR TRONG XÁC ĐỊNH KIỂU GEN HUMAN PAPILLOMA VIRUS VÀ MỐI TƯƠNG QUAN VỚI PHẾT TẾ BÀO CỔ TỬ CUNG BẤT THƯỜNG Chuyên ngành: XÉT NGHIỆM Y HỌC LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN VĂN THẮNG THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – 2016 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu luận văn hoàn toàn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn NGUYỄN NGỌC LÂM iii MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA i LỜI CAM ĐOAN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT xi ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Human papilloma virus 1.1.1 Hình thái cấu trúc 1.1.2 Chức số gen đặc biệt 1.1.3 Phân loại 1.1.4 Cơ chế gây bệnh 1.1.5 Quá trình phát triển 1.1.6 Đường lây truyền, yếu tố nguy cơ, cách phòng ngừa 11 1.1.7 Các bệnh lý thường gặp 12 1.2 Phương pháp phát xác định kiểu gen HPV 12 1.2.1 Nguyên tắc PCR 12 1.2.2 Phản ứng 13 iv 1.2.3 Kết 14 1.2.4 Một số phương pháp sinh học phân tử phát HPV 14 1.3 Xét nghiệm tế bào học 18 1.3.1 Lược sử 18 1.3.2 Chỉ định 19 1.3.3 Điều kiện 19 1.3.4 Hệ thống Bethesda 2014 20 1.3.5 Một số nghiên cứu 23 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Thiết kế nghiên cứu 25 2.2 Đối tượng nghiên cứu 25 2.2.1 Dân số mục tiêu 25 2.2.2 Dân số chọn mẫu 25 2.3 Cỡ mẫu 25 2.4 Phương pháp chọn mẫu 26 2.5 Tiêu chuẩn chọn mẫu 26 2.5.1 Tiêu chuẩn lựa chọn 26 2.5.2 Tiêu chuẩn loại trừ 26 2.6 Kiểm soát sai lệch chọn lựa 26 2.7 Thu thập kiện tiêu đánh giá 27 2.7.1 Địa điểm thu thập kiện 27 v 2.7.2 Thời gian thu thập kiện 27 2.7.3 Quy trình kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 27 2.8 Liệt kê định nghĩa biến số 40 2.9 Xử lý kiện 41 2.10 Các biện pháp khống chế sai số 41 2.11 Đạo đức nghiên cứu: 43 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 44 3.1 Tỷ lệ bất thường tế bào học cổ tử cung 44 3.1.1 Tuổi phân bố bệnh nhân theo nhóm tuổi 44 3.1.2 Tỷ lệ bất thường TBH CTC nghiên cứu 45 3.1.3 Mối liên quan bất thường TBH CTC yếu tố tuổi 46 3.2 Tỷ lệ nhiễm HPV phân bố kiểu gen 48 3.2.1 Tỷ lệ nhiễm HPV tình trạng đơn, đa nhiễm 48 3.2.2 Tuổi mối liên quan với tỷ lệ nhiễm HPV 50 3.2.3 Mối liên quan tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV yếu tố tuổi 52 3.2.4 Sự phân bố kiểu gen HPV 53 3.2.5 Mối liên quan kiểu gen HPV yếu tố tuổi 55 3.2.6 Mối liên quan kiểu gen HPV tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm 56 3.3 Mối liên quan tình trạng nhiễm HPV với bất thường TBH CTC 57 vi 3.3.1 Mối liên quan bất thường CTC với tỷ lệ nhiễm HPV 57 3.3.2 Mối liên quan bất thường CTC với tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm HPV 60 3.3.3 Mối liên quan bất thường TBH CTC với phân bố kiểu gen HPV nghiên cứu 62 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 68 4.1 Tỷ lệ bất thường tế bào học cổ tử cung 68 4.1.1 Độ tuổi nghiên cứu 68 4.1.2 Tỷ lệ bất thường TBH CTC nghiên cứu 69 4.1.3 Mối liên quan bất thường TBH CTC yếu tố tuổi 69 4.2 Tỷ lệ nhiễm HPV phân bố kiểu gen 70 4.2.1 Tỷ lệ nhiễm HPV tình trạng đơn đa nhiễm 70 4.2.2 Mối liên quan tỷ lệ nhiễm HPV yếu tố tuổi 72 4.2.3 Mối liên quan tỷ lệ đơn nhiễm, đa nhiễm HPV yếu tố tuổi 74 4.2.4 Sự phân bố kiểu gen HPV 75 4.2.5 Mối liên quan kiểu gen HPV yếu tố tuổi 79 4.2.6 Mối liên quan kiểu gen HPV tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm 79 4.3 Mối liên quan tình trạng nhiễm HPV với bất thường TBH CTC 80 4.3.1 Mối liên quan bất thường CTC với tỷ lệ nhiễm HPV 80 vii 4.3.2 Mối liên quan bất thường CTC với tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm HPV 81 4.3.3 Mối liên quan bất thường CTC với phân bố kiểu gen HPV nghiên cứu 83 Tính ứng dụng nghiên cứu 87 Hạn chế nghiên cứu 88 KẾT LUẬN 89 KIẾN NGHỊ 90 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC viii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1: Thành phần hóa chất phân bố đĩa tách chiết TANBead DNA Auto Kit 29 Bảng 2.2: Chương trình tách chiết tự động Virus-W4-Auto 30 Bảng 2.3: Phân tích mẫu chứng mẫu xét nghiệm Multiplex PCR 34 Bảng 2.4: Các kích thước sản phẩm PCR Multiplex kiểu gen HPV 36 Bảng 2.5: Phân tích mẫu chứng mẫu xét nghiệm Realtime PCR 39 Bảng 3.1: Phân bố bệnh nhân theo nhóm tuổi 45 Bảng 3.2: Phân bố bệnh nhân theo bất thường TBH CTC 45 Bảng 3.3: Mối liên quan cặp bất thường TBH CTC với nhóm tuổi 47 Bảng 3.4: Phân bố tình trạng nhiễm HPV 49 Bảng 3.5: Phân bố tình trạng đơn, đa nhiễm HPV 49 Bảng 3.6: Phân bố kiểu gen HPV theo nhóm tuổi 55 Bảng 3.7: Phân bố kiểu gen HPV theo tình trạng đơn nhiễm, đa nhiễm 56 Bảng 3.8: Phân bố bất thường TBH CTC theo tình trạng nhiễm HPV 57 Bảng 3.9: Mối liên quan loại bất thường TBH CTC với nhiễm HPV 58 Bảng 3.10: Mối liên quan bất thường TBH CTC nhiễm HPV có hiệu chỉnh 59 Bảng 3.11: Phân bố bất thường TBH CTC theo tình trạng đơn đa nhiễm HPV 60 ix Bảng 3.12: Mối liên quan loại bất thường TBH CTC với tình trạng đơn đa nhiễm HPV 61 Bảng 3.13: Mối liên quan bất thường TBH CTC với tình trạng đơn nhiễm phối hợp kiểu gen 63 Bảng 3.14: Mối liên quan HPV 16 với loại bất thường TBH CTC 65 Bảng 3.15: Mối liên quan HPV 52 với loại bất thường TBH CTC 66 Bảng 3.16: Mối liên quan HPV 56 với loại bất thường TBH CTC 66 Bảng 3.17: Mối liên quan HPV 58 với loại bất thường TBH CTC 67 Bảng 4.1: Sự phân bố kiểu gen HPV theo số tác giả 76 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 92 Phạm Việt Thanh (2011), "Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm Human Papilloma Virus phụ nữ có phết tế bào cổ tử cung bất thường yếu tố liên quan", Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 15 (1), 158 Lê Trung Thọ, Trần Văn Hợp (2009), "Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm HPV cộng đồng phụ nữ Hà Nội, tìm hiểu số yếu tố liên quan", Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, 13 (1), 185 TIẾNG ANH 10 Bachtiary B., Obermair A., Dreier B., et al (2002), "Impact of multiple HPV infection on response to treatment and survival in patients receiving radical radiotherapy for cervical cancer", International journal of cancer, 102 (3), 237-43 11 Bao Y P., Li N., Smith J S., et al (2008), "Human papillomavirus type distribution in women from Asia: a meta-analysis", International journal of gynecological cancer, 18 (1), 71-9 12 Bello B D., Spinillo A., Alberizzi P., et al (2009), "Cervical infections by multiple human papillomavirus (HPV) genotypes: Prevalence and impact on the risk of precancerous epithelial lesions", Journal of medical virology, 81 (4), 703-12 13 Burd E M (2003), "Human papillomavirus and cervical cancer", Clinical microbiology reviews, 16 (1), 1-17 14 Castle P E., Stoler M H., Wright T C., Jr., et al (2011), "Performance of carcinogenic human papillomavirus (HPV) testing and HPV16 or HPV18 genotyping for cervical cancer screening of women aged 25 years and older: a subanalysis of the ATHENA study", The Lancet Oncology, 12 (9), 880-90 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 93 15 Clifford G., Franceschi S., Diaz M., et al (2006), "Chapter 3: HPV typedistribution in women with and without cervical neoplastic diseases", Vaccine, 24 Suppl 3, 26-34 16 Cutts F T., Franceschi S., Goldie S., et al (2007), "Human papillomavirus and HPV vaccines: a review", Bulletin of the World Health Organization, 85 (9), 719-726 17 Chan P K., Ho W C., Chan M C., et al (2014), "Meta-analysis on prevalence and attribution of human papillomavirus types 52 and 58 in cervical neoplasia worldwide", PLoS One, (9), e107573 18 Chan P K., Lam C W., Cheung T H., et al (2002), "Association of human papillomavirus type 58 variant with the risk of cervical cancer", Journal of the national cancer institute, 94 (16), 1249-53 19 Chan P K., Li W H., Chan M Y., et al (1999), "High prevalence of human papillomavirus type 58 in Chinese women with cervical cancer and precancerous lesions", Journal of medical virology, 59 (2), 2328 20 Chansaenroj J., Junyangdikul P., Chinchai T., et al (2014), "Large scale study of HPV genotypes in cervical cancer and different cytological cervical specimens in Thailand", Journal of medical virology, 86 (4), 601-7 21 de Villiers E M., Fauquet C., Broker T R., et al (2004), "Classification of papillomaviruses", Virology, 324 (1), 17-27 22 Doorbar J., Quint W., Banks L., et al (2012), "The biology and life-cycle of human papillomaviruses", Vaccine, 30 Suppl 5, F55-70 23 Ferlay J., Soerjomataram I., Dikshit R., et al (2015), "Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 94 GLOBOCAN 2012", International journal of cancer, 136 (5), 359386 24 Franceschi S., Herrero R., Clifford G M., et al (2006), "Variations in the age-specific curves of human papillomavirus prevalence in women worldwide", International journal of cancer, 119 (11), 2677-84 25 Gargiulo F., De Francesco M A., Schreiber C., et al (2007), "Prevalence and distribution of single and multiple HPV infections in cytologically abnormal cervical samples from Italian women", Virus research, 125 (2), 176-82 26 Grozdanov P., Zlatkov V., Ganchev G., et al (2014), "HPV prevalence and type distribution in women with normal or abnormal Pap smear in Bulgaria", Journal of medical virology, 86 (11), 1905-10 27 Guan P., Howell-Jones R., Li N., et al (2012), "Human papillomavirus types in 115,789 HPV-positive women: a meta-analysis from cervical infection to cancer", International journal of cancer, 131 (10), 234959 28 Hausen Harald zur (2002), "Papillomaviruses and cancer: from basic studies to clinical application", Nature reviews cancer, (5), 342350 29 Hebner C M., Laimins L A (2006), "Human papillomaviruses: basic mechanisms of pathogenesis and oncogenicity", Reviews in medical virology, 16 (2), 83-97 30 Herrero R., Castle P E., Schiffman M., et al (2005), "Epidemiologic profile of type-specific human papillomavirus infection and cervical neoplasia in Guanacaste, Costa Rica", Journal of infectious diseases, 191 (11), 1796-807 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 95 31 Ho C M., Chien T Y., Huang S H., et al (2006), "Integrated human papillomavirus types 52 and 58 are infrequently found in cervical cancer, and high viral loads predict risk of cervical cancer", Gynecologic oncology, 102 (1), 54-60 32 Hoang H T., Ishizaki A., Nguyen C H., et al (2013), "Infection with high-risk HPV types among female sex workers in northern Vietnam", Journal of medical virology, 85 (2), 288-94 33 Kim M J., Kim J J., Kim S (2013), "Type-specific prevalence of highrisk human papillomavirus by cervical cytology and age: Data from the health check-ups of 7,014 Korean women", Obstetrics & gynecology science, 56 (2), 110-20 34 Khunamornpong S., Settakorn J., Sukpan K., et al (2016), "High performance of combined HPV testing and genotyping for HPV16/18/52/58 in triaging women with minor cervical cytological abnormalities in northern Thailand", Journal of medical virology, 88 (1), 135-43 35 Li Z., Liu F., Cheng S., et al (2016), "Prevalence of HPV infection among 28,457 Chinese women in Yunnan Province, southwest China", Scientific reports, 6, 21039 36 Lin H., Ma Y Y., Moh J S., et al (2006), "High prevalence of genital human papillomavirus type 52 and 58 infection in women attending gynecologic practitioners in South Taiwan", Gynecologic oncology, 101 (1), 40-5 37 Massad L S., Einstein M H., Huh W K., et al (2013), "2012 updated consensus guidelines for the management of abnormal cervical cancer Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 96 screening tests and cancer precursors", Journal of lower genital tract disease, 17 (5 Suppl 1), S1-S27 38 Mitra A., MacIntyre D A., Lee Y S., et al (2015), "Cervical intraepithelial neoplasia disease progression is associated with increased vaginal microbiome diversity", Scientific reports, 5, 16865 39 Natphopsuk S., Settheetham-Ishida W., Pientong C., et al (2013), "Human papillomavirus genotypes and cervical cancer in northeast Thailand", Asian Pacific journal of cancer prevention : APJCP, 14 (11), 6961-4 40 Nayar R., Wilbur D C (2015), "The Pap test and Bethesda 2014", Cancer Cytopathology, 123 (5), 271-281 41 Nielsen A., Kjaer S K., Munk C., et al (2008), "Type-specific HPV infection and multiple HPV types: prevalence and risk factor profile in nearly 12,000 younger and older Danish women", Sexually transmitted diseases, 35 (3), 276-82 42 Nishiwaki M., Yamamoto T., Tone S., et al (2008), "Genotyping of human papillomaviruses by a novel one-step typing method with multiplex PCR and clinical applications", Journal of clinical microbiology, 46 (4), 1161-8 43 Oh H Y., Kim B S., Seo S S., et al (2015), "The association of uterine cervical microbiota with an increased risk for cervical intraepithelial neoplasia in Korea", Clinical microbiology and infection, 21 (7), 674 e1-9 44 Otero-Motta A P., Ordonez J L., Gonzalez-Celador R., et al (2011), "Prevalence of human papillomavirus genotypes in cytologic Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 97 abnormalities from unvaccinated women living in north-western Spain", APMIS, 119 (3), 204-15 45 Paavonen J., Naud P., Salmeron J., et al (2009), "Efficacy of human papillomavirus (HPV)-16/18 AS04-adjuvanted vaccine against cervical infection and precancer caused by oncogenic HPV types (PATRICIA): final analysis of a double-blind, randomised study in young women", Lancet, 374 (9686), 301-14 46 Pham T H Anh., Nguyen T H., Herrero R., et al (2003), "Human papillomavirus infection among women in South and North Vietnam", International journal of cancer, 104 (2), 213-20 47 Rowe L R., Aldeen W., Bentz J S (2004), "Prevalence and typing of HPV DNA by hybrid capture II in women with ASCUS, ASC-H, LSIL, and AGC on ThinPrep Pap tests", Diagnostic Cytopathology, 30 (6), 426-32 48 Salimovic Besic I., Tomic-Cica A., Smailji A., et al (2013), "Comparison of the detection of HPV-16, 18, 31, 33, and 45 by type-specific DNAand E6/E7 mRNA-based assays of HPV DNA positive women with abnormal Pap smears", Journal of virological methods, 194 (1-2), 222-8 49 Saslow D., Solomon D., Lawson H W., et al (2012), "American Cancer Society, American Society for Colposcopy and Cervical Pathology, and American Society for Clinical Pathology screening guidelines for the prevention and early detection of cervical cancer", CA: A Cancer Journal for Clinicians, 62 (3), 147-72 50 So K A., Kim M J., Lee K H., et al (2016), "The Impact of High-Risk HPV Genotypes Other Than HPV 16/18 on the Natural Course of Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 98 Abnormal Cervical Cytology; A Korean HPV Cohort Study", Cancer research and treatment 51 Spinillo A., Dal Bello B., Gardella B., et al (2009), "Multiple human papillomavirus infection and high grade cervical intraepithelial neoplasia among women with cytological diagnosis of atypical squamous cells of undetermined significance or low grade squamous intraepithelial lesions", Gynecologic oncology, 113 (1), 115-9 52 Stubenrauch F., Laimins L A (1999), "Human papillomavirus life cycle: active and latent phases", Seminars in Cancer Biology, (6), 379386 53 Suba Eric J., Raab Stephen S (2012), "Lessons learned from successful Papanicolaou cytology cervical cancer prevention in the Socialist Republic of Vietnam", Diagnostic Cytopathology, 40 (4), 355-366 54 Trottier H., Mahmud S., Costa M C., et al (2006), "Human papillomavirus infections with multiple types and risk of cervical neoplasia", Cancer epidemiology, biomarkers & prevention, 15 (7), 1274-80 55 Vainshtein J., McHugh J B., Spector M E., et al (2015), "Human papillomavirus-related oropharyngeal cancer: HPV and p16 status in the recurrent versus parent tumor", Head Neck, 37 (1), 8-11 56 Yugawa T., Kiyono T (2009), "Molecular mechanisms of cervical carcinogenesis by high-risk human papillomaviruses: novel functions of E6 and E7 oncoproteins", Reviews in medical virology, 19 (2), 97-113 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 99 PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: DANH SÁCH ĐỐI TƯỢNG THAM GIA NGHIÊN CỨU Mã số 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 Họ tên N T H A T T M V T T H D T H N T Y L K H V T M L D T N P T M N T T N L T K H N N L M T H N T B N L C L N L T A N T T N T T C N T X D H T K O T T T T T T N T L N H P T H L N Y B V T C L N B L T V T T P N H U T T H T T N M N T M D T N N T N P L Năm sinh 1994 1963 1973 1963 1982 1976 1960 1972 1989 1959 1951 1990 1990 1964 1972 1984 1962 1970 1960 1984 1964 1977 1958 1968 1982 1968 1963 1968 1976 1979 1978 1966 1972 1982 1982 PARA 1001 2002 2011 3003 2012 3012 1001 2002 1001 2022 6006 0000 0010 2002 1001 1001 2021 2012 3013 2002 2012 2002 1021 3013 1001 4004 2002 2002 1001 2012 3013 2002 3013 2002 2002 Kết Tế bào học ASCUS ASCUS LSIL ASCUS LSIL ASCUS HSIL LSIL LSIL LSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS LSIL LSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS LSIL LSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS HSIL ASCUS ASCUS LSIL HSIL Xét nghiệm khác Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Ngày tiến hành nghiên cứu 21/08/2015 21/08/2015 25/08/2015 27/08/2015 27/08/2015 01/09/2015 09/09/2015 14/09/2015 18/09/2015 23/09/2015 25/09/2015 25/09/2015 25/09/2015 25/09/2015 30/09/2015 30/09/2015 30/09/2015 05/10/2015 05/10/2015 05/10/2015 05/10/2015 07/10/2015 07/10/2015 07/10/2015 15/10/2015 15/10/2015 15/10/2015 15/10/2015 19/10/2015 20/10/2015 21/10/2015 21/10/2015 21/10/2015 27/10/2015 27/10/2015 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 100 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 H T T M L H Y P L T T D T H N N T H T N T T N T B T T H N T L N T L H N T T N T N V T M T N T L 1980 1978 1985 1985 1972 1964 1962 1964 1964 1978 1972 1981 1979 1973 2002 2012 2002 2002 1001 2011 3003 3012 3003 2012 0000 1001 2012 2002 ASCUS HSIL LSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS LSIL ASCUS ASCUS ASCUS HSIL ASCUS 50 P T T H 1987 2022 LSIL 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 N T N V N T D V T L A N T B H T T L M T M B T M T L T T C N T T P V T Y P N T B N N T H N T N T T T A N T M T D T M H P T T B T K L D T K D V T T A T B L D T K P H T H P T M T P T T N 1988 1979 1963 1981 1964 1963 1992 1958 1953 1968 1978 1960 1962 1974 1967 1960 1976 1975 1967 1982 1965 1985 1962 1976 1985 2002 1001 4014 2012 2012 2002 0000 3023 4014 3023 2012 2002 2002 2002 2012 2002 2002 1011 2022 2012 3003 2002 2002 2002 1011 ASCUS LSIL ASCUS LSIL HSIL ASCUS ASCUS LSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS HSIL ASCUS HSIL LSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS LSIL 27/10/2015 27/10/2015 29/10/2015 29/10/2015 29/10/2015 29/10/2015 18/11/2015 23/11/2015 23/11/2015 30/11/2015 14/12/2015 18/12/2015 19/12/2015 20/12/2015 GPB: Loạn sản nặng (CIN III) Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 24/12/2015 25/12/2015 15/01/2016 15/01/2016 20/01/2016 27/01/2016 27/01/2016 29/01/2016 15/02/2016 04/03/2016 09/03/2016 11/03/2016 11/03/2016 16/03/2016 17/03/2016 23/03/2016 23/03/2016 23/03/2016 26/03/2016 26/03/2016 26/03/2016 30/03/2016 30/03/2016 30/03/2016 02/04/2016 02/04/2016 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 101 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 H T H H N B T N T K C V T T Y N T T H H T V N T D L T N M N T K L T T K L N T N Y L T N L N T H H T H B T M A V T H V T P T T K N 1982 1990 1979 1969 1967 1974 1968 1979 1990 1979 1964 1990 1973 1968 1956 1969 1969 1985 2012 0010 2002 2002 2002 1001 2002 20 1001 2012 2012 1011 2012 3003 2012 2002 3003 2002 ASCUS ASCUS LSIL HSIL ASCUS LSIL HSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS LSIL ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS ASCUS LSIL 94 H T T D 1969 1011 LSIL (2015) 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 L N Y B T T L N T B H H T T D V T H N T H P T H T T P N T N D P T T D D T K H L T T T 1982 1964 1981 1969 1988 1977 1973 1961 1987 1978 1966 1965 2002 2002 2012 1011 2012 1001 3003 4014 0010 1001 3013 3003 ASCUS ASCUS(2015) LSIL (2015) ASCUS LSIL LSIL LSIL ASCUS LSIL ASCUS HSIL ASCUS GPB: Loạn sản vừa (CIN II) HPV 52 năm 2014 GPB: Loạn sản vừa (CIN II) PAP LIQUID 2016: ASCUS ASC-H (5/2016) LSIL (kiểm tra lại: 02/2016) GPB: Loạn sản vừa (CIN II) Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn 02/04/2016 02/04/2016 07/04/2016 07/04/2016 07/04/2016 12/04/2016 12/04/2016 12/04/2016 12/04/2016 17/04/2016 17/04/2016 17/04/2016 20/04/2016 20/04/2016 22/04/2016 22/04/2016 22/04/2016 27/04/2016 03/05/2016 03/05/2016 04/05/2016 04/05/2016 04/05/2016 05/05/2016 06/05/2016 06/05/2016 06/05/2016 07/05/2016 07/05/2016 07/05/2016 07/05/2016 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 102 PHỤ LỤC 2: PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN “Ứng dụng kỹ thuật PCR xác định kiểu gen Human Papilloma Virus mối tương quan với phết tế bào cổ tử cung bất thường” PHIẾU THƠNG TIN Tơi tên: Sinh năm: Nơi cư ngụ: (Tỉnh/ Thành phố) Nghề nghiệp: Trình độ học vấn: Bạn có tiêm ngừa ung thư cổ tử cung hay không?  Có  Khơng Kết soi cổ tử cung (nếu có): _ PHIẾU ĐỒNG Ý Tôi tên: Sinh năm: Tôi đọc hiểu bảng thông tin dành cho người tham gia nghiên cứu mục đích nghiên cứu hiểu rằng:  Tôi tham gia nghiên cứu tự nguyện tơi  Tơi từ chối trả lời câu hỏi muốn  Tôi hiểu tất thông tin giữ riêng tư bí mật Tơi đồng ý tham gia vào nghiên cứu  Có  Khơng Ngày……tháng……năm…… Ký tên Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 103 PHỤ LỤC 3: BỆNH ÁN MINH HỌA BỆNH ÁN 1: Mã số nghiên cứu NC08 Họ tên: Đặng Thị N Sinh năm: 1972 PARA: 2002 Ngày thực phết tế bào CTC: 10/09/2015 Kết phết tế bào: LSIL Kết HPV DNA: HPV 6; 52 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 104 BỆNH ÁN 2: Mã số nghiên cứu NC31 Họ tên: Trần Thị H T Sinh năm: 1978 PARA: 3013 Ngày thực phết tế bào CTC: 10/10/2015 Kết phết tế bào: HSIL Kết HPV DNA: HPV 16 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 105 BỆNH ÁN 3: Mã số nghiên cứu NC55 Họ tên: Trương Thị L Sinh năm: 1964 PARA: 2012 Ngày thực phết tế bào CTC: 20/01/2016 Kết phết tế bào: HSIL Kết HPV DNA: HPV 16; 39; 58 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại Học Y Dược TP HCM 106 BỆNH ÁN 2: Mã số nghiên cứu NC92 Họ tên: Võ Thị P Sinh năm: 1969 PARA: 3003 Ngày thực phết tế bào CTC: 19/04/2016 Kết phết tế bào: ASCUS Kết HPV DNA: Âm tính Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... cứu ? ?Kỹ thuật PCR xác định kiểu gen Human Papilloma Virus mối tương quan với phết cổ tử cung bất thường? ?? tiến hành nhằm xác định tỷ lệ nhiễm HPV, phân bố kiểu gen mối liên quan với bất thường. .. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN NGỌC LÂM KỸ THUẬT PCR TRONG XÁC ĐỊNH KIỂU GEN HUMAN PAPILLOMA VIRUS VÀ MỐI TƯƠNG QUAN VỚI PHẾT TẾ BÀO CỔ TỬ CUNG BẤT THƯỜNG... tế bào học cổ tử cung kỹ thuật Multiplex PCR Xác định mối liên quan tình trạng nhiễm HPV với bất thường tế bào học cổ tử cung CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Human papilloma virus