Tác dụng chống oxy hóa trên thực nghiệm của cao chiết thạch hộc nuôi cấy mô (dendrobium nobile lindl orchidaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LÂM CẨM TIÊN TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA CAO CHIẾT THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ (Dendrobium nobile Lindl Orchidaceae) LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC CỔ TRUYỀN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LÂM CẨM TIÊN TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA CAO CHIẾT THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ (Dendrobium nobile Lindl Orchidaceae) Chuyên nghành: Y HỌC CỔ TRUYỀN Mã số: 60 72 02 01 LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC CỔ TRUYỀN NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS TRẦN CÔNG LUẬN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2016 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Lâm Cẩm Tiên i MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Trang DANH MỤC HÌNH VẼ DANH MỤC BẢNG CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Gốc tự chất chống oxy hóa theo YHHĐ 1.2 Gốc tự chống oxy hóa theo quan niệm YHCT .16 1.3 Dược liệu nghiên cứu 19 1.4 Các cơng trình nghiên cứu Thạch hộc .23 1.5 Một số phương pháp xác định tác dụng chống oxy hóa 26 1.6 Một số mơ hình thực nghiệm nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa in vivo 28 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Đối tượng nghiên cứu .32 2.2 Phương pháp nghiên cứu 34 2.3 Thử nghiệm độc tính cấp đường uống 46 2.4 Khảo sát hoạt tính chống oxy hố in vitro thử nghiệm malonyl dialdehyd (MDA test) 47 2.5 Khảo sát hoạt tính chống oxy hố in vivo mơ hình suy giảm miễn dịch cyclophophamid (CY) 49 CHƢƠNG KẾT QUẢ 52 CHƢƠNG BÀN LUẬN 80 CHƢƠNG KẾT LUẬN 88 CHƢƠNG KIẾN NGHỊ 89 ii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ACE Acetylcholine esterase APH 1-acetyl-2-phenylhydrazin CY Cyclophosphamid DĐVN IV Dược Điển Việt Nam IV GSH Glutathion GSH –Px Enzym glutathion peroxydase IC50 The half maximal inhibitory concentration MDA Malonyl dialdehyd MeOH Methanol TBA Acid thiobarbituric TCA Acid tricloacetic YHCT Y học cổ truyền YHHĐ Y học đại iii DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 3-1 Phản ứng hóa học định tính alkaloid ngun liệu 55 Hình 3-2.Phản ứng hóa học định tính saponin nguyên liệu 55 Hình 3-3 Sắc ký lớp mỏng định tính hợp chất saponin nguyên liệu 56 Hình 3-4 Sắc ký lớp mỏng định tính hợp chất alkaloid ngun liệu 57 Hình 3-5 Phản ứng hóa học định tính alkaloid cao 61 Hình 3-6 Phản ứng hóa học định tính saponin cao 62 Hình 3-7 Sắc ký lớp mỏng định tính alkaloid cao 63 Hình 3-8 Sắc ký lớp mỏng định tính saponin cao 64 Hình 3-9 Hoạt tính chống oxy hóa in vitro thuốc đối chiếu thử nghiệm MDA 67 Hình 3-10 Hoạt tính chống oxy hóa in vitro cao Thạch hộc nuôi cấy mô thử nghiệm MDA 68 Hình 3-11 Hoạt tính chống oxy hóa in vitro cao Thạch hộc tự nhiên thử nghiệm MDA .69 Hình 3-12 Hàm lượng MDA gan lô cho uống cao Thạch hộc nuôi cấy mô .72 Hình 3-13 Hàm lượng MDA gan lơ cho uống cao Thạch hộc tự nhiên 74 Hình 3-14 Hàm lượng GSH gan lô cho uống cao Thạch hộc ni cấy mơ 76 Hình 3-15 Hàm lượng GSH gan lô cho uống cao Thạch hộc tự nhiên 78 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 2-1 Thử nghiệm hoạt tính chống oxy hóa in vivo 49 Bảng 3-1 Kết định tính phân tích sơ thành phần hóa thực vật nguyên liệu Thạch hộc nuôi cấy mô Thạch hộc tự nhiên 52 Bảng 3-2 Độ ẩm nguyên liệu Thạch hộc nuôi cấy mô 53 Bảng 3-3 Độ ẩm nguyên liệu Thạch hộc tự nhiên .53 Bảng 3-4 Độ tro toàn phần nguyên liệu Thạch hộc nuôi cấy mô 53 Bảng 3-5 Độ tro toàn phần nguyên liệu Thạch hộc tự nhiên 54 Bảng 3-6 Độ tro không tan acid hydrochloric nguyên liệu Thạch hộc nuôi cấy mô .54 Bảng 3-7 Độ tro không tan acid hydrochloric nguyên liệu Thạch hộc tự nhiên 54 Bảng 3-8 Định lượng alkaloid nguyên liệu Thạch hộc tự nhiên 58 Bảng 3-9 Định lượng alkaloid nguyên liệu Thạch hộc nuôi cấy mô 58 Bảng 3-10 Định lượng saponin nguyên liệu Thạch hộc tự nhiên 58 Bảng 3-11 Định lượng saponin nguyên liệu Thạch hộc nuôi cấy mô 59 Bảng 3-12 Hiệu suất cao Thạch hộc nuôi cấy mô cao Thạch hộc tự nhiên 59 Bảng 3-13 Độ tan nước cao Thạch hộc 60 Bảng 3-14 Độ ẩm cao Thạch hộc nuôi cấy mô 60 Bảng 3-15 Độ ẩm cao Thạch hộc tự nhiên 60 Bảng 3-16 Độ tro toàn phần cao Thạch hộc nuôi cấy mô 60 Bảng 3-17 Độ tro toàn phần cao Thạch hộc tự nhiên 61 Bảng 3-18 Định lượng hợp chất alkaloid cao Thạch hộc tự nhiên 64 Bảng 3-19 Định lượng hợp chất alkaloid cao Thạch hộc nuôi cấy mô .65 v Bảng 3-20 Định lượng hợp chất saponin cao Thạch hộc tự nhiên 65 Bảng 3-21 Định lượng hợp chất saponin cao Thạch hộc nuôi cấy mô .66 Bảng 3-22 Kết thuốc đối chiếu Trolox 66 Bảng 3-23 Kết thử test MDA mẫu Thạch hộc nuôi cấy mô 67 Bảng 3-24 Kết thử test MDA mẫu Thạch hộc tự nhiên 68 Bảng 3-25 Kết khảo sát hàm lượng MDA gan lô cho uống cao Thạch hộc nuôi cấy mô 71 Bảng 3-26 Kết khảo sát hàm lượng MDA gan lô cho uống cao Thạch hộc tự nhiên .73 Bảng 3-27 Kết khảo sát hàm lượng GSH gan lô cho uống cao Thạch hộc nuôi cấy mô 75 Bảng 3-28 Kết khảo sát hàm lượng GSH gan lô cho uống cao Thạch hộc tự nhiên 77 ĐẶT VẤN ĐỀ Ở thể bình thường, oxy qua chuyển hóa thể tạo gốc tự để thực chức sinh lý, chúng tồn với nồng độ vô thấp, dễ dàng bị loại bỏ không độc hại cho thể Tuy nhiên ngày y học ngày phát triển, tuổi thọ ngày gia tăng, bên cạnh gia tăng kinh tế, cơng nghiệp phát triển, lối sống thay đổi vấn đề ô nhiễm môi trường, cân sinh thái ngày trở nên trầm trọng, hậu gốc tự tạo ngày nhiều Ở tuổi trẻ hay niên, thể mạnh, trấn áp chúng, tới tuổi cao, sức yếu, gốc tự lấn át, gây thiệt hại gấp nhiều lần người trẻ, gốc tự sinh ngày nhiều liên tục công vào thành phần tế bào (màng tế bào, protein, acid nucleic, cấu trúc ADN,…) cịn gọi “stress oxy hóa”, nguyên nhân gây nên lão hóa mà cịn đồng phạm gây bệnh thường gặp bệnh tim mạch, ung thư, Alzheimer, bệnh Parkinson, xơ gan, viêm khớp dạng thấp, xơ vữa động mạch,…[27], [30], [52] Các chất có tác dụng chống oxy hóa bảo vệ quan (não, tim, mạch máu, gan, thận) khỏi tác động xấu stress oxy hóa Trong việc điều trị bệnh ung thư, hầu hết thuốc, hóa chất tia xạ gây tổn thương quan cách tạo gốc oxy tự ảnh hưởng đến hệ thống enzym chống oxy hóa nội sinh thể, thuốc cyclophosphamid Do trình chuyển hóa gan, cyclophosphamid hình thành tác nhân gây độc tế bào, gián tiếp làm gia tăng q trình peroxy hóa lipid tế bào gan [10], [23] Từ thực tế mà nay, giới có xu hướng sử dụng thuốc nguồn gốc thảo dược chúng tác dụng phụ, có hiệu điều trị, giảm chi phí điều trị cần thiết Đã từ lâu, Thạch hộc dược liệu quý, Trung Quốc sử dụng thuốc giảm đau, hạ sốt, kích thích dày, để cải thiện cảm giác ngon miệng, kích thích tiết nước bọt, điều trị bệnh khác nhau, viêm dày, đái tháo đường, lão hóa da, bệnh tim mạch, mà phần lớn cho liên quan chặt chẽ với trao đổi chất, chống lại rối loạn việc tạo gốc tự [31], [37], [39] Một số nghiên cứu nước chứng minh Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindl.) có tác dụng kháng viêm, chống tế bào ung thư, chống đột biến gen điều hòa miễn dịch,…gần cho thấy tác dụng chống oxy hóa in vitro [36], [40], [44], [49], [53], [54] Hiện Thạch hộc thực vật quý hiếm,được đưa vào sách đỏ, cần bảo tồn [2], [8], nên xu hướng áp dụng công nghệ sinh học thực vật để tạo nguồn dược liệu với lượng lớn chất lượng cao Vì để góp phần làm rõ tác dụng dược lý Thạch hộc nuôi cấy mô so với Thạch hộc trồng tự nhiên, tiếp tục khảo sát tác dụng chống oxy hóa theo hướng tăng cường bảo vệ gan Thạch hộc nuôi cấy mô in vitro, in vivo thực nghiệm Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Đỗ Huy Bích (1995), Thuốc từ cỏ động vật, NXB Y học, tr 485-486 Bộ Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Khoa học Công nghệ (2007), Sách Đỏ Việt Nam, NXB Khoa học tự nhiên công nghệ, tr 57-60 Bộ môn Dược liệu, Trường Đại học Y Dược TP.HCM (2008), Phương pháp nghiên cứu dược liệu, NXB Y học, tr 26-50 Bộ Y Tế (2006), Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ Dược thảo, NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, tr 279 - 293 Bộ Y Tế (2008), Y lý y học cổ truyền, NXB Y học, tr 148-149 Bộ Y Tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, NXB Y học, tr 894-895 Hoàng Bảo Châu (1997), Nội Khoa Học Cổ Truyền, NXB Y học, tr 551-573 Đại học Quốc gia Hà Nội Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, Trung tâm Nghiên cứu Tài nguyên Môi trường, Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật (2001), Danh mục lồi thực vật Việt Nam, NXB Nơng nghiệp Hà Nội, tr 60-65 Đỗ Trung Đàm (1996), Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc, NXB Y học Hà Nội, tr 50-57 10 Trần Thị Thu Hằng (2004), Dược lực học, NXB Mũi Cà Mau, tr 777-796 11 Bành Văn Khừu, Đặng Quốc Khánh (2002) Những học thuyết y học cổ truyền, NXB Y Học, tr 236-237 12 Hạnh Lâm, Nguyễn Văn Minh (2000), Dược tính nam, tập 2, NXB Hải Phòng, tr 823-824 13 Vũ Ngọc Lan, Nguyễn Thị Lý Anh (2013), "Nhân giống in vitro loài lan địa Dendrobium nobile LIindl", Tạp chí Khoa học Phát triển, tập 11 (7), tr 917-925 14 Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 638 -640 15 Trần Thu Nga, Nguyễn Phương Dung (2012), "Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa cao chiết Hồng liên giải độc chuột nhắt tổn thương gan cyclophosphamid", Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, tập 16 (1), tr 157-161 16 Nguyễn Thiên Quyến (1998), Chẩn đoán phân biệt chứng hậu đông y, NXB Mũi Cà Mau, tr 92-96 17 Trương Thụ Sinh, Vương Chí Lan (1992), Trung dược lâm sàng, NXB Y học, tr 484-489 18 Hồng Duy Tân, Hồng Anh Tuấn (2009), Đơng Dược Học, NXB Y học, tr 494-495 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 19 Nguyễn Quang Thường (1999), "Stress oxy hóa", Tạp chí Dược học, ( 9), tr 21 - 22 20 Nguyễn Thị Tình, Bùi Đình Lãm, Nguyễn Văn Bảo, Phạm Thị Thủy, Ngơ Xn Bình (2015), "Nghiên cứu nhân giống Lan Thạch Hộc (Dendrobium nobile Lindl.) ống nghiệm từ phơi", Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn, tập 11, tr 44 - 52 21 Lê Minh Triết, Dương Thị Công Minh, Nguyễn Thị Thu Hương, Trần Công Luận (2008), "Tác dụng Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata Burm F Nees, Acanthaceae) thực nghiệm gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid", Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, tập 12 (4), tr.142-147 22 Trường ĐH Y Hà Nội (2007), Bài Giảng YHCT, tập 2, NXB Y học, tr 10-11, 43-44, 51-53, 70-71, 75-78, 87-89, 91-92, 138 23 Trường ĐH Y Dược TPHCM (1997), Bài giảng dược lý học tập 2, NXB Y học, tr 563-591 24 Trường ĐH Y Dược TPHCM (2001), Nội Khoa Y Học Cổ Truyền, NXB Y học, tr 179-198 25 Viện Dược Liệu (2013), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập II, NXB Khoa Học Và Kỹ Thuật, tr 803-807 26 Viện Dược Liệu (2011), Công Trình Nghiên Cứu Khoa Học Viện Dược Liệu 2006 - 2011, NXB Khoa học Kỹ Thuật, tr 164-169 TÀI LIỆU TIẾNG ANH 27 Ames B N., Shigenaga M K., Hagen T M (1993), "Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging", Proc Natl Acad Sci USA, vol 90, pp 79157922 28 Antolovich Michael, Paul D Prenzler, Emilios Patsalides, Suzanne McDonalda, Kevin Robards (2002), "Methods for testing antioxidant activity", Analyyst, vol 127, pp 183-198 29 Barry Halliwel (1996), "Oxidative Stress, Nutrition and Health Experimental Strategies for Optimization of Nutritional Antioxidant Intake in Humans", Free Radic Res, pp 57-74 30 Benoit I Giasson, Harry Ischiropoulos, Virginia M.-Y Lee, John Q Trojanowski (2002), "The relationship between oxidative/nitrative stress and pathological inclusions in Alzheimer’s and Parkinson’s diseases ", Free Radical Biology and Medicine, vol 32 (12), pp 1264–1275 31 China’s Pharmarcopoiea, Part One (1977), The People’s Health Sciences Publication C, Beijing (Peking), China, pp 145 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 32 F Fraschini, G Dermatini, D Esposti (2002), "Pharmacology of silymarin", Clin Drug Invest, vol 22 (1), pp 51-65 33 George Francis, Zohar Kerem, Harinder P S Makkar, and Klaus Becker (2008), "The biological action of saponins in animal systems: a review", British Journal of Nutrition, vol 88 (6), pp 587- 605 34 GrottoI Denise, Lucas Santa MariaI, Juliana ValentiniI, Clóvis PanizI, Gabriela SchmittI, Solange Cristina GarciaI, Valdeci Juarez PomblumII, João Batista T RochaIII, Marcelo Farina (2009), "Importance of the lipid peroxidation biomarkers and methodological aspects for malondialdehyde quantification", Quím Nova vol 32 (1), pp 169-174 35 Hyekyung Yang, Phil-Jun Lee, Eun Ju Jeong, Hong Pyo Kim, Young Choong Kim (2012), "Selective Apoptosis in Hepatic Stellate Cells Mediates the Antifibrotic Effect of Phenanthrenes from Dendrobium nobile", Phytotherapy Research, vol 26, pp 974-980 36 Ji Sang Hwanga, Seon A Leea, Seong Su Honga, Xiang Hua Hana, Chul Leea, Shin Jung Kangb, Dongho Leec, Youngsoo Kima, Jin Tae Honga, Mi Kyeong Leea, Bang Yeon Hwang (2010), "Phenanthrenes from Dendrobium nobile and their inhibition of the LPS-induced production of nitric oxide in macrophage RAW 264.7 cells", Bioorganic and Medicinal Chemistry, vol 20 (12), pp 3785-3787 37 Jiangsu Medical College (1977), A Dictionary ofChinese Materia Medica, Shanghai Scientific Technology Press, Shanghai, China, pp 586 38 M Kidd Parris (1997), "Glutathione: Systemic protectant against oxidative and free radical damage", Altern Med Rev, vol (3), pp 155-176 39 Kong JM, Goh NK, Chia LS, Chia TF (2003), "Recent advances in traditional plant drugs and orchids", Acta Pharmacol Sin, vol 24, pp 7-21 40 Lee You Hui, Jong Dae Park, Nam In Beak, Shin Il Kim, Byung Zun Ahn (1995), "In Vitro and In Vivo Antitumoral Phenanthrenes from the Aerial Parts of Dendrobium nobile", Planta Medica, vol 61 (2), pp 178-180 41 Lettéron P, Labbe G, Degott C, Berson A, Fromenty B, Delaforge M, Larrey D, Pessayre D (1990), "Mechanism for the protective effects of silymarin against carbon tetrachloride-induced lipid peroxidation and hepatotoxicity in mice", Biochem Pharmacol, vol 39, pp 2027-2034 42 Makoto Sato, Kei Shiozawa, Toru Uesugi, Riki Hiromatsu, Meiko Fukuda, Keisuke Kitaura, Takanori Minami and Satoshi Matsumoto (2009), "Collaborative word on evaluation of ovarian toxicity Effects of 2- or - week repeated to dose studies and fertility study of cyclophosphamide in female rats", The Jounal of Toxicologycal Sciences, vol 34 (1), pp 83-89 43 Maurya O.P., Mohanty L., Bhaduri G., Chandra A (2006), "Role of antioxidant enzyme superoxide dismutase and catalase in the development of cataract, study of Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM serum levels in patients with senile and diabetic cataract", J Indian Med Assoc, vol 104 (7), pp 394-396 44 Miyazawa Mitsuo, Hideo Shimamura, Sei-ichi Nakamura, Hiromu Kameoka (1997), "Antimutagenic Activity of Gigantol from Dendrobium nobile", J Agric Food Chemistry, vol 45, pp 2849-2853 45 Miyazawa Mitsuo, Hideo Shimamura, Sei-ichi Nakamura, Wataru Sugiura, Hiroshi Kosaka, Hiromu Kameoka (1999), "Moscatilin from Dendrobium nobile, a Naturally Occurring Bibenzyl Compound with Potential Antimutagenic Activity", Journal of Agricultural Food Chemistry, vol 47, pp 2163-2167 46 Nonaka Y., Ishibashi H., Nakai M., Shibata H., Kiso Y., Abe S (2005), "Soothing effect of Ganoderma lucidum antlered form on cyclophosphamideinduced adverse reaction", Gan To Kagaku Ryoho, vol 32 (11), pp 1586-1588 47 Rajbir Kaur, Saroj Arora (2015), "Alkaloids - important therapeutic secondary metabolites of plant origin ", Journal of Critical Reviews, vol (3), pp 1-8 48 Sheeja K., Kuttan G (2006), "Ameliorating effects of Andrographis paniculata extract against cyclophosphamid - induced toxicity in mice", Asian Pac J Cancer Prev, vol (4), pp 609-614 49 Song Jae In, Yu Jin Kang, Hae-Young Yong, Young Choong Kim, Aree Moon (2012), "Denbinobin, a phenanthrene from Dendrobium nobile, inhibits invasion and induces apoptosis in SNU-484 human gastric cancer cells", Oncology Reports, vol 27, pp 813-818 50 Valenzuela A., Lagos C., Schmidt K (1985), "Silymarin protection against hepatic lipid peroxidation induced by acute ethanol intoxication in the rat", Biochem Pharmacology, vol 34 (12), pp 2209-2212 51 Valenzuela A., Aspillaga M., Vial S (1989), "Selectivity of silymarin on the increase of the glutathione content in different tissues of the rat", Planta Med, vol 55, pp 420-422 52 Valko M., Leibfritz D., Moncol J., Cronin MT., Mazur M., Telser J (2007), "Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease.", The International Journal of Biochemistry and Cell Biology, vol 39 (1), pp 44-84 53 Ye Qinghua, Guowei Qin, Weimin Zhao (2002), "Immunomodulatory sesquiterpene glycosides from Dendrobium nobile", Phytochemistry 67, vol 61, pp 885-890 54 Yoon Mi-Young, Ji-Hwan Hwang, Jae-Hee Park, Mi-Ra Lee, Hyun-Jung Kim, Eunju Park, Hae-Ryong Park (2011), "Neuroprotective Effects of SG-168 Against Oxidative Stress-Induced Apoptosis in PC12 Cells", Journal of Medicinal Food, vol 14, pp 120-127 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 55 Zhang Xue, Jie-Kun Xu, Jue Wang, Nai-Li Wang, Hiroshi Kurihara, Sumumu Kitanaka, Xin-Sheng Yao (2007), "Bioactive Bibenzyl Derivatives and Fluorenones from Dendrobium nobile", J Nat Prod., vol 70, pp 24-28 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM PHỤ LỤC MDA/GAN: CY(-) LÔ CHỨNG SINH LÝ STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 10 11 TB SEM 0.104 0.097 0.114 0.175 0.165 0.097 0.110 0.072 0.074 0.071 0.084 0.106 0.011 1.263 1.175 1.388 2.155 2.029 1.175 1.338 0.861 0.886 0.848 1.011 1.284 0.133 34.469 32.068 37.899 58.820 55.390 32.068 36.527 23.494 24.180 23.151 27.609 35.061 3.638 LÔ THỬ: THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ 2,5 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 10 TB SEM 0.177 0.105 0.099 0.108 0.122 0.123 0.118 0.145 0.148 0.11 0.126 0.008 2.180 1.275 1.200 1.313 1.489 1.501 1.438 1.778 1.815 1.338 1.533 0.096 59.506 34.812 32.754 35.841 40.642 40.985 39.271 48.531 49.560 36.527 41.843 2.628 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM LÔ THỬ: THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ 1,43 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 0.150 0.160 0.101 0.171 0.109 0.132 1.840 1.966 1.225 2.104 1.325 1.614 50.246 53.676 33.440 57.448 36.184 44.072 0.148 TB SEM 0.136 1.815 1.665 1.694 0.107 49.560 45.444 46.259 2.922 0.138 0.009 LÔ THUỐC ĐỐI CHIẾU: SILYMARIN 0,1 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 10 11 TB SEM 0.082 0.109 0.070 0.093 0.081 0.084 0.108 0.114 0.092 0.129 0.094 0.096 0.005 0.986 1.325 0.835 1.124 0.974 1.011 1.313 1.388 1.112 1.577 1.137 1.162 0.066 26.924 36.184 22.808 30.696 26.581 27.609 35.841 37.899 30.353 43.043 31.039 31.725 1.790 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM MDA/GAN: CY(+) LÔ CHỨNG BỆNH LÝ STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 10 TB SEM 0.202 0.241 0.204 0.141 0.194 0.199 0.170 0.173 0.165 0.159 0.185 0.009 2.494 2.984 2.519 1.727 2.393 2.456 2.092 2.129 2.029 1.954 2.278 0.114 68.080 81.456 68.766 47.159 65.337 67.052 57.105 58.134 55.390 53.333 62.181 3.119 LÔ THỬ: THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ 1,25 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 10 TB SEM 0.109 0.109 0.171 0.139 0.171 0.117 0.148 0.161 0.123 0.114 0.136 0.008 1.325 1.325 2.104 1.702 2.104 1.426 1.815 1.979 1.501 1.388 1.667 0.100 36.184 36.184 57.448 46.473 57.448 38.928 49.560 54.018 40.985 37.899 45.513 2.729 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM LÔ THỬ: THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ 2,5 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 10 TB SEM 0.199 0.153 0.184 0.168 0.076 0.158 0.177 0.081 0.136 0.166 0.150 0.013 2.456 1.878 2.268 2.067 0.911 1.941 2.180 0.974 1.665 2.041 1.838 0.164 67.052 51.275 61.907 56.419 24.866 52.990 59.506 26.581 45.444 55.733 50.177 4.482 LÔ THỬ: THẠCH HỘC TỰ NHIÊN 0,715 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 0.208 0.177 0.161 0.224 0.102 0.105 2.569 2.180 1.979 2.770 1.237 1.275 70.138 59.506 54.018 75.626 33.783 34.812 0.105 TB SEM 0.109 0.098 1.275 1.325 1.187 1.755 0.209 34.812 36.184 32.411 47.921 5.718 0.143 0.017 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM LÔ THỬ: THẠCH HỘC TỰ NHIÊN 1,43 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 0.207 0.104 0.150 0.150 0.103 0.102 2.557 1.263 1.840 1.840 1.250 1.237 69.795 34.469 50.246 50.246 34.126 33.783 0.145 10 0.103 0.103 0.093 TB SEM 0.126 0.011 1.778 1.250 1.250 1.124 1.539 0.144 48.531 34.126 34.126 30.696 42.014 3.929 LÔ THUỐC ĐỐI CHIẾU: SILYMARIN 0,1 G/KG STT OD Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng MDA (nM/g protid) 10 11 TB SEM 0.089 0.106 0.094 0.109 0.169 0.095 0.106 0.147 0.118 0.080 0.086 0.109 0.008 1.074 1.288 1.137 1.325 2.079 1.149 1.288 1.803 1.438 0.961 1.036 1.325 0.103 29.324 35.155 31.039 36.184 56.762 31.382 35.155 49.217 39.271 26.238 28.295 36.184 2.801 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM GSH/GAN: CY(-) LÔ CHỨNG SINH LÝ STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) 10 TB SEM 1.433 1.382 1.011 1.068 0.979 1.396 1.681 1.346 1.774 1.486 1.356 0.085 334.023 322.163 235.884 249.140 228.442 325.419 391.698 313.791 413.326 346.349 316.023 19.758 9119.093 8795.293 6439.808 6801.702 6236.639 8884.179 10693.649 8566.728 11284.108 9455.591 8627.679 539.418 LÔ THỬ: THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ 2,5 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) 10 TB SEM 1.620 1.845 2.004 1.118 1.103 0.981 0.970 0.912 1.144 1.025 1.272 0.126 377.512 429.837 466.814 260.767 257.279 228.907 226.349 212.860 266.814 239.140 296.628 29.216 10306.359 11734.888 12744.382 7119.153 7023.917 6249.337 6179.498 5811.255 7284.227 6528.694 8098.171 797.613 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM LÔ THỬ: THẠCH HỘC TỰ NHIÊN 1,43 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) 1.036 0.761 0.561 1.292 0.961 1.029 241.698 177.744 131.233 301.233 224.256 240.070 6598.533 4852.554 3582.750 8223.882 6122.357 6554.090 0.906 5773.161 TB SEM 1.027 0.947 0.076 211.465 239.605 220.913 17.731 6541.392 6031.090 484.076 LÔ THUỐC ĐỐI CHIẾU: SILYMARIN 0,1 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) 10 TB SEM 2.143 1.547 1.667 1.546 1.265 1.597 1.364 1.318 1.532 1.255 1.523 0.083 499.140 360.535 388.442 360.302 294.953 372.163 317.977 307.279 357.047 292.628 355.047 19.263 13626.895 9842.881 10604.763 9836.532 8052.458 10160.332 8681.011 8388.956 9747.646 7988.968 9693.044 525.897 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM GSH/GAN: CY(+) LÔ CHỨNG SINH LÝ STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) TB SEM 1.043 0.951 0.712 0.679 0.608 0.788 0.889 1.086 1.092 0.872 0.061 243.326 221.930 166.349 158.674 142.163 184.023 207.512 253.326 254.721 203.558 14.230 6642.976 6058.867 4541.452 4331.934 3881.154 5023.977 5665.228 6915.984 6954.078 5557.294 388.485 LÔ THỬ: THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ 1,25 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) TB SEM 0.929 0.974 1.184 0.884 1.378 1.616 1.142 0.902 1.126 0.092 216.814 227.279 276.116 206.349 321.233 376.581 266.349 210.535 262.657 21.483 5919.188 6204.894 7538.188 5633.483 8769.897 10280.963 7271.529 5747.765 7170.738 586.503 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM LÔ THỬ: THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ 2,5 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) TB SEM 1.040 1.458 1.021 1.988 0.915 1.041 1.053 0.928 1.181 0.130 242.628 339.837 238.209 463.093 213.558 242.860 245.651 216.581 275.302 30.197 6623.929 9277.818 6503.298 12642.797 5830.302 6630.278 6706.467 5912.839 7515.966 824.415 LÔ THỬ: THẠCH HỘC TỰ NHIÊN 0,715 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) 0.748 0.783 0.727 0.939 0.943 1.081 174.721 182.860 169.837 219.140 220.070 252.163 4770.016 4992.232 4636.687 5982.679 6008.075 6884.239 1.076 6852.494 TB SEM 1.080 0.935 251.000 251.930 218.209 215.548 11.047 0.924 0.048 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn 6877.890 5957.283 5884.622 301.588 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM LÔ THỬ: THẠCH HỘC TỰ NHIÊN 1,43 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) 0.919 1.426 1.182 0.986 0.910 1.035 214.488 332.395 275.651 230.070 212.395 241.465 5855.698 9074.650 7525.490 6281.082 5798.557 6592.184 1.147 7303.274 TB SEM 1.077 1.026 267.512 251.233 239.372 251.620 12.355 1.079 0.053 6858.843 6535.043 6869.425 337.289 LÔ THUỐC ĐỐI CHIẾU: SILYMARIN 0,1 G/KG STT OD Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) Hàm lượng GSH (nM/g protid) TB SEM 1.246 1.442 1.666 1.084 1.460 1.316 1.505 1.152 1.067 1.326 0.069 290.535 336.116 388.209 252.860 340.302 306.814 350.767 268.674 248.907 309.243 16.016 7931.827 9176.234 10598.414 6903.286 9290.516 8376.258 9576.222 7335.019 6795.353 8442.570 437.238 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn ... tính chống oxy hóa in vitro cao chiết Thạch hộc nuôi cấy mô cao chiết Thạch hộc tự nhiên thử nghiệm MDA chuột nhắt trắng So sánh hoạt tính chống oxy hóa in vivo cao chiết Thạch hộc nuôi cấy mô cao. .. Thạch hộc ni cấy mô MỤC TIÊU CỤ THỂ So sánh thành phần hóa học cao chiết Thạch hộc ni cấy mơ cao chiết Thạch hộc tự nhiên Khảo sát độc tính cấp cao chiết Thạch hộc ni cấy mô cao chiết Thạch hộc. .. THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LÂM CẨM TIÊN TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA CAO CHIẾT THẠCH HỘC NUÔI CẤY MÔ (Dendrobium nobile Lindl Orchidaceae) Chuyên nghành: Y HỌC CỔ TRUYỀN Mã