Đang tải... (xem toàn văn)
TÊt c¶ c¸c chÊt mµu cã mÆt trong mÉu, mµ chóng cã Pic hÊp thô n»m trong vïng cña chÊt mµu chÝnh, nã sÏ gãp phÇn vµo chØ sè hÊp thô ®Ó tÝnh to¸n kÕt qu¶. Qui tr×nh thø nhÊt lµ ®iÓn h×nh [r]
(1)tCvn T i ª u c h u È n V i Ö t N a m
TCVN 6470 : 1998
Phô gia thùc phÈm −
ph−ơng pháp xác định cho
phÈm mµu thùc phÈm
(2)tcvn 6470 : 1998
Lời nói đầu
TCVN 6470 : 1998 hoàn toàn phù hợp với phần IV sách Hớng dẫn yêu cầu kỹ tht cho nh÷ng chó ý chung, thư nhËn biÕt, dung dịch thử tài liệu tham khảo khác JECFA (Guide to specifications, general notices, general analytical techniques, identification tests, test solutions and other reference materials − JECFA − FAO FOOD and nutrition paper − rev 2)
(3)tcvn 6470 : 1998
T I ª u c h u È n v I Ö t n a m tcvn 6470 : 1998
Phụ gia thực phẩm − Ph−ơng pháp xác định cho phẩm màu
thùc phÈm
Food additives − Methods for food colours
Tiêu chuẩn qui định ph−ơng pháp xác định cho phẩm màu thực phẩm
1 Xác định clorua theo natri clorua
1.1 ThiÕt bÞ
Thiết bị chuẩn độ điện thế, với điện cực định bạc, điện cực so sánh calomel, cầu nối la dung dch kali sunfat bóo ho
1.2 Cách tiến hành
Cân 0,5 − 1,0 g mẫu phẩm màu, hồ tan 100 ml n−ớc, axit hóa ml dung dịch axit nitric 1,5 N Đặt điện cực bạc vào dung dịch màu nối điện cực calomel với dung dịch cầu nối kali sunfat bão hồ Có thể loại bỏ cầu nối kali sunfat bão hoà cách dùng điện cực thuỷ tinh làm điện cực so sánh Điều đơn giản thiết bị cách đáng kể điện cực thuỷ tinh đủ ổn định để đ−ợc sử dụng nh− điện cực so sánh cho kiểu chuẩn độ
(4)tcvn 6470 : 1998
2 Các chất không tan clorofooc
2.1 Thiết bÞ
− tủ sấy, dải nhiệt độ: 00 −
2000
;
− bÕp ®iƯn, đun sôi đợc tetraclorua cacbon (CCl4) (điểm sôi 76,8
); − chÐn nung, cã líp läc b»ng b«ng thuỷ tinh;
bình hút chân không; máy hút chân không; bình hút ẩm
2.2 Thuốc thư
− tetraclorua cacbon, lo¹i thc thư, hay; clorofooc, loại thuốc thử;
(Các loại thuốc thử đợc gọi "dung môi" phần "cách tiến hành")
2.3 Cách tiến hành
Tiến hành thử theo cách sau: Trộn lợng mẫu cân theo yêu cầu (W1) với 100 ml dung môi cốc có
mỏ dung tích 250 ml, khuấy đều, đun đến sôi bếp điện tủ hút (fume hood) Lọc dung dịch nóng vào chén nung cân tr−ớc (W2) Chuyển cặn cốc có mỏ vào chén nung dung
môi Rửa cặn chén nung với phần 10 ml dung môi n−ớc rửa không màu Đặt chén nung vào tủ sấy sấy 1000−
1500
Để nguội chén nung bình hút ẩm Cân chén nung nguội (W3)
2.4 TÝnh toán
Tính phần trăm chất không hoà tan tetraclorua cacbon hay clorofooc (PIM) mÉu, theo c«ng thøc sau:
W3− W2
PIM (%) = x 100 W1
Tính kết phần trăm chất kh«ng tan tetraclorua cacbon (CCl4) hay clorofooc cã mẫu
phân tích
3 Các chất màu thực phÈm
3.1 NhËn biÕt
(5)tcvn 6470 : 1998
Tiến hành phép thử đơn giản để xem liệu mẫu bột chất màu đơn, khối trộn vật lý số phẩm màu Rải l−ợng bột màu nhỏ vào cốc, cốc chứa n−ớc, cốc khác chứa axit sunfuric đặc D−ới điều kiện hạt nhỏ li ti chất màu riêng rẽ nhìn thấy dễ dàng chúng hồ tan và, phép thử có độ nhậy bất ngờ
Việc xác định có mặt chất màu thực phẩm riêng biệt th−ờng khó khăn Một số l−ợng lớn muối natri sunfonic kết chúng khơng có điểm chảy điểm sơi xác Thêm vào chất màu tổng hợp th−ờng có chứa chất màu phụ chất màu đ−ợc chiết xuất từ nguồn thiên nhiên nhìn chung có chứa số màu khác Do việc nhận biết thành công cách so sánh tính chất quan sát đ−ợc với đặc tính mẫu th−ơng phẩm thật
Các kĩ thuật đ−ợc sử dụng sắc kí quang phổ, kết hợp ph−ơng pháp Ví dụ có mặt chất màu phụ ảnh h−ởng tới phổ quan sát việc xác định có mặt thành phần khơng thể thực đ−ợc Vì lý đó, nên tách chất màu sắc kí cột, sắc kí giấy hay sắc kí lớp mỏng tr−ớc định dùng ph−ơng pháp nhận biết khác
Sắc kí giấy sắc kí lớp mỏng th−ờng hữu ích việc nhận biết chất màu, mà không cần đến thiết bị đắt tiền Nh−ng phải nhớ giá trị R4 chất khẳng định lý thuyết
Trong thùc tÕ hÇu hÕt đợc dựa trình kiểm tra Có nhiều yếu tố ảnh hởng, làm cho giá trị Rf trở
nên khơng ổn định Các yếu tố bao gồm: thành phần thời hạn (tuổi) dung môi, nồng độ dung mơi bốc khơng khí, chất l−ợng giấy, máy móc dụng cụ, loại chất l−ợng chất phụ, nồng độ, giá trị pH dung dịch nhiệt độ Vì lý đó, sắc kí so sánh ln ln cần sử dụng Bằng cách cho chạy đồng thời vài chất với nồng độ nh− nhau, số yếu tố ảnh h−ởng bị loại bỏ
Sự trùng hợp khoảng di chuyển với hệ dung môi đơn phải đ−ợc coi nh− tiêu nhận biết phép thử khác phải đ−ợc tiến hành để khẳng định chắn Bảng sau cho thí dụ giá trị Rf dung dịch % chất màu n−ớc, triển khai sắc kí lớp mng silicagel G ti
10 hệ dung môi khác Thành phần hệ thống dung môi này, (tất phải đợc chuẩn bị mới) - là:
Dung m«i No
(6)tcvn 6470 : 1998
8 n - Butanol: etanol: pyridin: n−íc (2 : : : 2)
9 lso - propanol: amoniac (tû träng 0,880) (4 : 1) 10 n - Butanol: axetic axit (băng): nớc (10 : : 6)
Việc đánh giá vết màu cần làm sắc đồ ẩm dung môi, sau sấy khô Các vết màu đ−ợc xem xét d−ới tia sáng trắng tới xuyên qua, tốt nh− ánh sáng tử ngoại D−ới ánh sáng tử ngoại (UV) nhiều chất màu có đặc tính thay đổi màu Hơn điều th−ờng có vết tạp chất huỳnh quang khơng màu Nếu có thể, sử dụng hai xạ UV với chiều dài sóng hiệu xuất khác nhau; đèn phát xạ xung quanh 250 nm
Nên tiến hành phép thử axit, kiềm thuốc thử thích hợp khác, để đảm bảo kết Tất phép thử đ−ợc tiến hành với pipet mao quản vết màu
Các yêu cầu sau phải đạt đ−ợc xác định chất màu: − khoảng di chuyển ngang vài dung môi; − vết ngang d−ới ánh sáng th−ờng ánh sáng tử ngoại; − thay đổi màu t−ơng đ−ơng với thuốc thử
Việc kiểm tra ph−ơng pháp quang phổ ph−ơng pháp tốt để xác định chất màu Các vùng tử ngoại, hồng ngoại ánh sáng nhìn thấy đ−ợc đ−ợc áp dụng
Vùng nhìn thấy đ−ợc quang phổ nhìn thấy đ−ợc thơng th−ờng phép kiểm tra b−ớc việc thử nhận biết chất màu ch−a biết Có nhiều chất màu cho độ hấp thụ đặc tr−ng vùng nhìn thấy đ−ợc, chất màu khác khơng Phổ vùng tử ngoại đ−ợc sử dụng, nên thu nhận kết này, đ−ợc
Phổ hấp thụ hồng ngoại th−ờng cách tốt để xác định hợp chất khác nhau, nh−ng có số khó khăn q trình sử dụng ph−ơng pháp
Trong việc áp dụng phép đo quang phổ nhìn thấy đợc tử ngoại, phổ cần phải thu nhận đợc vài dung môi, hay dung môi riêng lẻ, phải dới điều kiện kh¸c
(7)tcvn 6470 : 1998
10 0,52
(0,00-057
0,63
(0,11-0.70) 0,39-0,67
1,00 0,68 0,69
(0,46-0,82) 0,82-0,71
0,67 (0,46) 0,50 0,75
0,11-0,75 (0,83)
0,66 0,55
0,00-0,63
0,00
9
0,11 0,34 (0,46) 0,10 (0,41) 0,66
(0,57-0,43)
0,36 0,36
(0,32-0,17)
0,64 (0,29) 0,34
(0,10-0,22)
0,14 0,21
0,00-0,31
0,64 0,36 0,07 0,37
(0,00-0,34)
0,00
8
0,90 0,88 0,90 0,89 0,90 0,91 0,92 0,90 0,93 0,92 0,88 0,93 0,75
(0,89-0,92) 0,89-0,84
0,00
7
0,60 0,65 0,40
(0,64-0,66) 0,64-0,66
(0,58) 0,64 0,64
(0,62-0,50-0,67) 0,68 (0,65) 0,65 (0,48) 0,52 0,62 0,54 (0,68) 0,56 0,46
(0,56-0,71)
0,66
(0,71-0,73)
0,00
6
1,00 1,00 1,00
0,00-0,95
1,00 1,00 0,76 (1,00) 1,00 1,00 1,00 0,95 (0,35) 1,00 1,00 40,94 0,00
5
0,95 0,00
(0,00-0,32)
1,00 0,00
0,00-0,71
0,73 0,13 (0,38) 1,00 1,00 0,74
0,26-1,00 0,00-0,38
0,97 0,29 (0,43) 0,92 0,00
4
0,03 0,16 0,04 (0,16)
0,00-0,90 (0,41)
0,12
0,23-0,15
0,04 0,42 (0,13)
0,17-0,03
0,08 0,21 0,65 (0,21) 0,14 0,52
(0,05-0,36
1,00)
0,09-0,18 (0,52)
0,00
3
0,88
0,00-0,42
1,00
(0,00-1,00) 0,00-0,10
0,37 0,64
(1,00-0,35)
0,00
(0,00-0,42)
1,00
(0,00-1,00) 0,46-1,00
0,77
0,00-1,00
1,00 0,49 (0,24) 0,00
(0,05-0,90
1,00) 0,00
2
0,75 0,81 0,75 (0,83) 0,91
(0,86-0,74-0,81)
0,80 0,80 (0,75) 0,88 (0,78) 0,82 (0,74) 0,77 0,80 0,88 (0,82) 0,81 0,61
(0,67-0,75- 0,81-0,84) 0,50-0,76 (0,78) 0,00
Dung m«i sè (xem mơc 3-1.)
1
0,66 (0,85) 0,65 (0,77) 0,62
(0,48-0,76)
0,85
(0,68-0,79)
0,68 0,71
(0,67-0,88)
0,83 (0,62) 0,75 (0,68) 0,66 0,63
0,83-0,88
0,77 0,44
(0,52-0,68
0,74) 0,56 (0,70) 0,00
f
số phẩm màu đ
ợc phép không đ
ỵc phÐp tan n
−
(8)tcvn 6470 : 1998
10 0,53
(0,64) 0,59 0,64 (0,71
0,75-0,79) (0,00-0,70) 0,00-0,73 0,00-0,75 0,00-0,73 0,00-0,43 0,00-0,45
9
0,30
(0,49-0,00-0,23)
0,00-0,10 0,37-0,45 0,70-0,76 0,94-0,87 (0,00-0,83) 0,34 (0,26-0,53) 0,00-0,38 0,00-0,32 0,05 0,09
8
0,88 0,84 (0,92) 0,89 (0,62) 0,11 (0,90) 0,93 0,87 0,88 0,85 0,85
7
0,61 (0,68) 0,69 (0,72) 0,67
0,00-0,68 (0,11-0,28 0,53-1,00) 0,59-0,64 0,53 (0,37) 0,36-0,51
0,62
0,34-0,43
0,62 0,38 (0,61) 0,38 (0,61)
6 0,00-1,00 0,95 0,00-1,00 0,00 (0,00-0,53) 1,00
0,00-1,00 0,00-1,00
1,00 1,00
5
0,10 0,15
0,00-0,37 0,00-0,80 0,00-0,77 0,00-1,00 0,00-1,00
1,00 1,00
4
0,45 (0,68) 0,55 0,62
(0,51-1,00) 0,79-1,00 0,69-0,27 0,15-0,00
0,00
(0,00-0,23)
0,00
(0,00-0,16)
0,00 0,00
3
0,05 0,05 0,00
(0,00-0,46)
0,00
(0,00-0,34)
1,00
(0,00-1,00) 0,00-0,82 0,00-1,00
1,00
(0,00-1,00)
1,00
2
0,78 0,68 0,80 (0,72)
0,56-0,81
0,90
0,79-0,86 0,00-0,75
0,74 0,75 0,75
Dung m«i sè (xem mơc 3-1.)
1
0,64 (0,73)
0,34-0,60
0,73
(0,67-0,91)
0,91 (0,80)
0,78-0,71
0,66
0,00-0,69 0,00-0,63
0,66 (0,47) 0,62
EEC Seral N
0
E131 E151 E152
C N
0
42090 42051 42640 42535 20285 28440 27755
Tên phẩm màu
phẩm màu " "; số ngoặc vết phơ cđa c
−
ờng độ thấp
O y: kẻ vạch c¸c vÕt
J.ASSOC Public Anal, 11, 137-138 t¸
i b¶n theo chÊt sinh tõ ung th
−
m«i tr
−
êng Ph
ơng pháp phân tích tuyển
30
tài liệu môi tr
ờng chung môi tr
ờng công nghiệp (ấn phẩm IARC số 40) chi nhánh quốc tÕ vỊ nghiªn cøu ung th
−
(9)tcvn 6470 : 1998
Phổ hấp thụ đ−ợc dựng thành đồ thị cho thấy độ hấp thụ b−ớc sóng Việc kiểm tra đ−ờng cong kết bao gồm nhiều vùng b−ớc sóng có độ hấp thụ cực đại Tồn đ−ờng cong cần đ−ợc xem xét cận thẩn để xác định dạng riêng biệt đ−ờng cong từ "các gờ" hay điểm uốn nét đặc tr−ng hữu ích phổ hấp thụ Những nét đặc tr−ng th−ờng phân biệt đ−ợc hai nhiều chất màu có độ hấp thụ tối đa b−ớc sóng Nhiều chất màu xác định việc quan sát phạm vi mà độ hấp thụ cực đại nét đặc tr−ng khác đ−ờng cong hấp thụ bị thay đổi điều kiện pH khác có thay đổi khác dung mơi
Phỉ hång ngo¹i thu nhận đợc vài cách; cách thông dụng là:
phổ dung dịch chất thử dung môi thích hợp; phổ cđa chÊt hun phï chÊt láng thÝch hỵp
− kĩ thuật tạo viên kali bromua (một l−ợng nhỏ chất màu, th−ờng từ - mg đ−ợc trộn đều, kĩ với kali bromua khô, tinh khiết, hỗn hợp đ−ợc chuyển thành viên nh− hạt lựu thích hợp đ−ợc ép thành dạng cứng cách dùng áp suất nén từ 700 đến 1400 kg/cm2
)
Dựng đồ thị phổ thu đ−ợc theo cách thông th−ờng Những nét đặc tr−ng bật đ−ờng cong kết b−ớc sóng đỉnh (Pic) hấp thụ dạng đ−ờng cong gần kề Pic
Việc thảo luận chi tiết để giải thích phổ hồng ngoại ngồi phạm vi tiêu chuẩn Tuy nhiên, cần phải thận trọng để đảm bảo chắn Pic hấp thụ chất tạp nhiễm vơ khơng đ−ợc coi chất màu
Cấu trúc tinh thể trạng thái vật lí khác mẫu thử ảnh h−ởng đến phổ thu đ−ợc từ huyền phù hay viên kali bromua Cần đảm bảo chắn chất ch−a biết đ−ợc xử lý xác theo cách thức nh− chất chuẩn hay mẫu biết Các chất màu tan n−ớc, th−ờng đ−ợc xử lý cách hồ tan chúng n−ớc, thêm axit axetic, cho bốc (cơ) đến gần khơ, sau sấy khơ khoảng 1000
(10)tcvn 6470 : 1998
Trong vài tr−ờng hợp, quy trình sắc kí, qui trình quang phổ, kết hợp hai quy trình khơng cho kết Trong tr−ờng hợp nh− vậy, vấn đề th−ờng đ−ợc giải cách giảm bớt chất màu cách khác giảm hợp chất xác định sản phẩm tạo Kỹ thuật đặc biệt đ−ợc áp dụng cho chất màu azot Các hợp chất amin tạo từ phân giảm xác định kĩ thuật sắc kí đo quang phổ
Nhiều kĩ thuật khác đ−ợc áp dụng để nhận biết chất màu Việc mô tả chúng không đ−ợc đề cập, nh−ng ví dụ đ−ợc trích dẫn Nhiều sắc tố có cấu trúc tinh thể định đ−ợc nhận biết hình nhiễu xạ X quang, hay quang học tinh thể Một vài chất màu đ−ợc chuyển thành dạng dẫn xuất tinh thể đ−ợc nhận biết theo cách t−ơng tự
3.2 Xác định hàm l−ợng tổng số (tổng hàm l−ợng)
Có hai ph−ơng pháp th−ờng dùng để xác định tổng hàm l−ợng chất màu:
Quang phæ so sánh
Sự phân giảm clorua titan
Khi sử dụng ph−ơng pháp đo quang phổ cần nhớ nhiều nhà sản xuất quang phổ kế không đảm bảo độ xác lớn ± %
Tất chất màu có mặt mẫu, mà chúng có Pic hấp thụ nằm vùng chất màu chính, góp phần vào số hấp thụ để tính tốn kết Các chất màu phụ nhiều màu sắc khác khơng đ−ợc tính đến kĩ thuật Trong điều kiện lí t−ởng, quang phổ kế đ−ợc sử dụng để tiến hành phép so sánh mẫu thử chất chuẩn có hàm l−ợng chất màu biết Việc sử dụng số hấp thụ nói chung đ−ợc chấp nhận thay cho thân chất chuẩn, chừng mực đ−ợc coi nh− thích hợp, nh−ng tr−ờng hợp số chất màu, đ−ợc ghi nhận không thay đ−ợc
Trong ph−ơng pháp titan clorua, giả định đồng phân chất phụ có giá trị đ−ơng l−ợng titan clorua nh− chất màu
3.3 Xác định hàm l−ợng tổng số ph−ơng pháp quang phổ
Có hai qui trình thực nghiệm đ−ợc mô tả, chúng khác chi tiết hai sử dụng số phổ hấp thụ đ−ợc trích dẫn đặc tính chất màu để tính tốn kết