Nghiên cứu thành phần hóa học loài dây cóc tinospora crispa thu hái tại lào

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ANIN KEOSAVANH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC LỒI DÂY CÓC (TINOSPORA CRISPA) THU HÁI TẠI LÀO LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA HỌC THÁI NGUN- 2019 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ANIN KEOSAVANH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC LỒI DÂY CĨC (TINOSPORA CRISPA) THU HÁI TẠI LÀO Ngành: Hóa hữu Mã ngành: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS PHẠM VĂN KHANG THÁI NGUYÊN- 2019 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu khác Học viên Anin KEOSAVANH Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Tơi xin chân thành bày tỏ lịng kính trọng lời cảm ơn sâu sắc tới TS Phạm Văn Khang - Người thầy tin tưởng giao đề tài, tận tình hướng dẫn, động viên tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ suốt trình học tập, nghiên cứu thực luận văn Đồng thời xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giáo học viên cao học K25 phịng thí nghiệm Hóa hữu tạo môi trường nghiên cứu khoa học thuận lợi giúp đỡ tơi hồn thành kế hoạch nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn em sinh viên nghiên cứu đề tài khoa học hợp chất thiên nhiên cộng tác với trong việc tiến hành thí nghiệm thuộc đề tài luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, Ban lãnh đạo khoa Hóa phịng Đào tạo (bộ phận sau đại học) - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận văn Thái ngun, tháng năm 2019 Học viên Anin KEOSAVANH Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN iv DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH, SƠ ĐỒ MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 Khái qt lồi Dây cóc (Tinospora crispa) 1.1.1 Đặc điểm thực vật học 1.1.2 Cơng dụng lồi Dây cóc 1.2 Tình hình nghiên cứu hoạt tính sinh học lồi Dây cóc 13 1.2.1 Hoạt tính chống viêm hoạt tính miễn dịch 13 1.2.2 Hoạt tính chống cholinesterase 13 1.2.3 Hoạt tính kháng khuẩn chống giun 14 1.2.4 Hoạt tính chống oxy hóa 15 1.2.5 Hoạt tính ức chế xơ vữa động mạch 16 1.2.6 Hoạt tính chống ký sinh trùng 16 1.2.7 Các hoạt tính gây độc tế bào 17 1.2.8 Hoạt tính bảo vệ tim mạch 18 1.2.9 Hoạt tính chống nơn 19 1.2.10 Hoạt tính ức chế Cytochromes 20 1.2.11 Ảnh hưởng chống đái tháo đường 20 1.2.12 Các thử nghiệm lâm sàng 22 1.2.13 Độc tính 22 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn 1.3 Tình hình nghiên cứu thành phần hóa học lồi Dây cóc 23 Chương 2: THỰC NGHIỆM 37 2.1 Hóa chất thiết bị phân lập 37 2.1.1 Hóa chất 37 2.1.2 Hóa chất tế bào dùng để thử hoạt tính sinh học 37 2.1.3 Thiết bị 37 2.2 Phương pháp xử lý mẫu thực vật, chiết tách xác định cấu trúc chất phân lập 38 2.2.1 Mẫu nghiên cứu xử lý mẫu thực vật 38 2.2.2 Chiết tách chất 38 2.2.3 Phương pháp định tính nhóm hợp chất 38 2.2.4 Xác định cấu trúc chất 40 2.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư 40 2.3.1 Vật liệu hóa chất 40 2.3.2 Phương pháp nuôi cấy tế bào in vitro 41 2.3.3 Phương pháp xác định tính độc tế bào ung thư (cytotoxic assay) 41 2.4 Phân lập, tinh chế hợp chất 42 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 46 3.1 Kết định tính nhóm hợp chất kết phân lập hợp chất 46 3.2 Kết xác định cấu trúc hợp chất 47 3.2.1 Phân tích cấu trúc hợp chất 47 3.2.2 Phân tích cấu trúc hợp chất 51 3.2.3 Phân tích cấu trúc hợp chất 55 3.3 Kết nghiên cứu hoạt tính độc tế bào dịng tế bào ung thư HeLa (ung thư buồng trứng) A549 (tế bào ung thư phổi) 59 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60 Kết luận 60 Kiến nghị 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN 13 C-NMR : 13C-Nucler Magnetic Resonance : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C H-NMR : 1H-Nucler Magnetic Resonance : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H COSY : Corelated Spectroscopy : Phổ tương quan hai chiều H-H DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Tranfer : Phổ DEPT ESI-Ms : Electron Impact Mass Spectroscopy : Phổ khối lượng HMBC : Heternuclear multiple - Bond Corelation : Phổ tương quan hai chiều H-C HSQC : Heternuclear Spectroscopy- Quantum Coherence : Phổ tương tác C-H RP : Reversed - Phase Chromatography NP : Normal - Phase Chromatography LPS : Lipopolysaccharide Raw 264.7 : Tế bào đại thực bào thô 264,7 macrophage cell INF-γ : Interferon gamma : Một cytokine hòa tan giảm dần IL-6 : Interleukin : Một interleukin hoạt động hai cytokine tiền viêm myokine chống viêm IL-8 : Interleukin Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn : Một chemokine tạo đại thực bào loại tế bào khác tế bào biểu mô, tế bào trơn đường dẫn khí tế bào nội mô LC : Liquid chromatography : Sắc ký lỏng MS : Mass spectrometry : Phổ khối lượng TNF-α : Tumor necrosis factor anpha : Các cytokine thuộc họ yếu tố hoại tử khối u anpha HUVEC : Human umbilical vein endothelial cells : Tế bào nội mô tĩnh mạch rốn người ICAM-1 : Intercellular Adhesion Molecule : Phân tử kết dính tế bào VCAM-1 : Vascular cell adhesion protein : Protein bám dính tế bào mạch máu MCP-1 : Monocyte chemoattra ctant protein : Protein đơn chất hóa học M-CSF : Macrophage colony-stimulating factor : Yếu tố kích thích đại thực bào MCF-7 : Michigan Cancer Foundation-7 : Tổ chức Ung thư Michigan-7 MDA-MB-231 : Monroe Dunaway Anderson-Metastasis Breast cancer line 231 : Dòng tế bào ung thư vú người HeLa : Henrietta Lacks cell : Một dòng tế bào sử dụng nghiên cứu khoa học 3T3 : Các tế bào nguyên bào sợi phơi chuột Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn HL- 60 cell : Human leukemic cell : Tế bào ung thư bạch cầu người Hep G2 cell : Hepatoma G2 cell : Tế bào ung thư tế bào gan G2 Hep3B cell : Hepatoma B3cell : Tế bào ung thư tế bào gan 3B IC50 : The half maximal inhibitory concentration : Nồng độ ức chế tối đa nửa MTT : 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Caov-3 : Homo sapiens ovary adenocarcinoma cell line : Homo sapiens dòng tế bào adenocarcinoma buồng trứng DPPH : 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, hay 1,1-diphenyl-2picrylhydrazyl ICR mice : Institute of Cancer Research mice : Chuột Viện Nghiên cứu Ung thư AchE : Acetylcholinesterase T cardifolia : Tinospora cordifolia : Cây Dây thần thông PLA2 : Phospholipases A2 COX : Cyclooxygenase LOX : Lipoxygenase PGE2 : Prostaglandin E2 L monoctogens : Listeria monocytogenes : Một loại vi khuẩn gram dương, phận Firmicutes, đặt theo tên Joseph Lister P Vulgaris : Proteus Vulgaris Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn : Một loại vi khuẩn gram âm tạo hình que, khử nitrat, indole + catalase dương tính, sản xuất hydro sunfua, vi khuẩn gram âm sống đường ruột người động vật S pneumonia : Streptococcus pneumoniae, hay pneumococcus : Một loại Gram dương, tan máu alpha (trong điều kiện hiếu khí) beta-hemolytic (trong điều kiện yếm khí), thành viên kỵ khí thuộc chi Streptococcus S aureus : Staphylococcus aureus : Một loại vi khuẩn hình trịn, gram dương, thành viên Firmicutes thành viên thơng thường microbiota thể, thường tìm thấy đường hơ hấp da S flexneri : Shigella flexneri : Một lồi vi khuẩn gram âm chi Shigella gây tiêu chảy người C diphtheria : Corynebacterium diphtheriae : Vi khuẩn gây bệnh bạch hầu E coli : Escherichia coli : Một loại vi khuẩn kỵ khí Gram âm, dạng que, hình que thường tìm thấy ruột sinh vật máu nóng (nội nhũ) B cereus : Bacillus cereus : Một loại vi khuẩn Gram dương, hình que, hiếu khí, kỵ khí, vận động, beta-hemolytic thường tìm thấy đất thực phẩm S typhi : Salmonella enterica serotype typhi Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Ví trí Số liệu đo 13C NMR (ppm) Số liệu tham khảo 13 C -NMR (ppm) β-Sitosterol [2] 22 45.85 45.85 1.16 -1.18 (m) 23 23.08 23.32 1.76-1.83 (m) 24 12.06 12.28 1.87 (m) 25 29.17 29.46 1.87 (m); 1.89 (m) 26 19.83 20.15 0.79 (t, 6.5) 27 19.05 19.66 1.98 (m) 28 18.79 19.07 0.86 (d, 8.4) 29 11.87 12.08 0.63 (d, J = 6.6 Hz, 3H) H NMR (ppm), J (Hz) Hợp chất thu dạng tinh thể màu trắng Phổ 1H-NMR thấy xuất tín hiệu nhóm β-OH (δH 3.47, m, H-3) Trên phổ cộng hưởng proton xác nhận có mặt liên đơi δH 5.29 (br d, 3.5) Tín hiệu cộng hưởng nhóm methyl bậc ba δH 0.77 (s), 0.95 (s); nhóm methyl bậc hai δH 0.63 (d, J = 6.6 Hz), 0.74 (d, J = 6.5 Hz), δH 0.86 (3H, d, J = 8.4 Hz) nhóm methyl bậc δH 0.79 (t, J = 6.5 Hz) Hình 3.17 Phổ 1H-NMR chất 56 Phổ 13C-NMR xuất 29 tín hiệu carbon, đặc biệt, tín hiệu hai cặp olefin xác nhận C-5 (δC 140.76)/C-6 (δC 121.72) Qua phổ DEPT-135, HSQC, HMBC xác nhận quy kết Bảng 3.2 phù hợp Dựa vào phân tích kết hợp so sánh số liệu phổ 13 C-NMR với số liệu công bố β-Sitosterol [2] thấy hoàn toàn phù hợp Như vậy, khẳng định β-Sitosterol Hình 3.18 Phổ 13C-NMR chất Hình 3.19 Phổ DEPT - 135 chất 57 Hình 3.20 Phổ HSQC chất Hình 3.21 Phổ HMBC chất 58 Hình 3.22 Cấu trúc hóa học chất 3.3 Kết nghiên cứu hoạt tính độc tế bào dịng tế bào ung thư HeLa (ung thư buồng trứng) A549 (tế bào ung thư phổi) Ung thư cổ tử cung ung thư gan loại khối u ác tính thường gặp giới Để làm giảm tỉ lệ tử vong, chuẩn đoán sớm phát triển phác đồ điều trị tiên tiến, bao gồm loại thuốc, gen liệu pháp miễn dịch biện pháp phòng ngừa ung thư buồng trứng quan trọng Vì tìm kiếm dược chất chống khối u nghiên cứu giá trị y học hợp chất trở thành vấn đề lớn có ý nghĩa quan trọng Vì vậy, chúng tơi tiến hành thử hoạt tính ức chế tế bào dịng tế bào ung thư HeLa (ung thư buồng trứng) tế bào ung thư phổi (A549) hợp chất phân lập từ lồi Dây cóc Bảng 3.3 Tác động gây độc tế bào ung thư % ức chế tế bào Nồng độ Ellipticine (µg/ml) Hela A549 Hela A549 Hela A549 100 13.33 42.44 28.84 42.40 99.14 95.24 20 5.86 29.85 18.56 15.53 76.05 72.36 4.02 16.79 4.69 7.91 51.67 49.74 0.8 -1.46 4.22 0.09 1.11 23.23 19.36 IC50 >100 >100 >100 >100 0.41±0.02 0.50±0.04 Qua kết bảng nhận thấy chất thử nghiệm dòng tế bào thể hoạt tính yếu 59 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Luận văn tốt nghiệp: “Nghiên cứu thành phần hóa học lồi Dây cóc (Tinospora crispa) thu hái Lào” thực nhiệm vụ nghiên cứu phân lập hợp chất từ lồi Dây cóc Luận văn hoàn thành nhiệm vụ nghiên cứu đạt kết sau: 1- Đã xây dựng quy trình chiết tách hợp chất từ phần chiết cao etylacetat 2- Đã phân tích sắc kí lớp mỏng dịch chiết ethyl acetate để xác định điều kiện sắc ký cột phù hợp, từ phân lập hợp chất từ dịch chiết ethyl acetate 3- Sử dụng phương pháp phổ đại 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT HSQC xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ loài Dây cóc 4- Xác định hoạt tính ức chế tế bào ung thư HeLa A549 hợp chất phân lập Kết cho thấy chất thể hoạt tính ức chế tế bào ung thư yếu Kiến nghị Sau trình thực luận văn, để hoàn thiện hướng nghiên cứu ứng dụng lồi thực vật làm thuốc chữa bệnh chúng tơi xin có vài kiến nghị sau: - Trong phân đoạn chưa tiến hành sắc ký cần tiếp tục triển khai - Sàng lọc thêm hoạt tính sinh học khác hoạt tính kháng viêm, kháng vi sinh vật, 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO Abood, W N., Fahmi, Abdulla, M A., and Ismail, S (2014), “Immunomodulatory effect of an isolated fraction from Tinospora crispa on intracellular expression of INF-gamma, IL-6 and IL-8”, BMC Complement Altern Med, 14, pp 205 Ahmad, F B., and Ismail, G (2003), “Medicinal plants used by Kadazandusun communities around crocker range, ASEAN Review of Biodiversity and Environmental Conservation (ARBEC)”, 1, pp 1-10 Ahmad, S., Ali, M., Ansari, S H., & Ahmed, F (2011), “Phytoconstituents from the rhizomes of Curcuma aromatica Salisb”, Journal of Saudi Chemical Society, pp 287-290 Ahmad W, Jantan I and Bukhari SNA (2016), “Tinospora crispa (L.) Hook f & Thomson: A Review of Its Ethnobotanical, Phytochemical, and Pharmacological Aspects”, Front Pharmacol, 7, pp 59 Al-alusi, N., Kadir, F., Ismail, S., and Abdullah, M (2010), “In vitro interaction of combined plants: Tinospora crispa and Swietenia mahagoni against methicillinresistant Staphylococcus aureus (MRSA)”, Afr J Microbiol Res, 4, pp 2309-2312 Almeida, R N., Navarro, D S., and Barbosa-Filho, J M (2001), “Plants with central analgesic activity”, Phytomedicine, 8, pp 310-322 Amom, Z., Azman, K F., Ismail, N A., Shah, Z M., and Arshad, M S M (2011), “An aqueous extract of Tinospora crispa possesses antioxidative properties and reduces atherosclerosis in hypercholesterolemic-induced rabbits”, J Food Biochem, 35, pp 1083-1098 Amom, Z., Md Akim, A., Nik Hassan, M K., Ibrahim, N., Moklas, M., Aris, M., et al (2008), “Biological properties of Tinospora crispa (akar patawali) and its antiproliferative activities on selected human cancer cell lines”, Malays J Nutr, 14, pp 173-187 61 Bertani, S., Bourdy, G., Landau, I., Robinson, J C., Esterre, P., and Deharo, E (2005), “Evaluation of French Guiana traditional antimalarial remedies”, J Ethnopharmacol, 98, pp 45-54 10 Bisset, N G., and Nwaiwu, J (1983), “Quaternary alkaloids of Tinospora Species”, PlantaMed, 48, pp 275-279 11 Cavin, A., Hostettmann, K., Dyatmyko, W., and Potterat, O (1998), “Antioxidant and lipophilic constituents of Tinospora crispa”, Planta Med, 64, pp 393-396 12 Chavalittumrong, P., Attawish, A., Chuthaputti, A., and Chuntapet, P (1997), “Toxicological study of crude extract of Tinospora crispa Mier ex Hook F & Thoms”, Thai J Pharm Sci, 21, pp 199-210 13 Chittur, M A I., and Gunjan, M (2012), “Antimicrobial activity of Tinospora crispa root extracts”, Int J Res Ayurveda Pharm, 3, pp 417-419 14 Choudhary, M I., Ismail, M.,Ali,Z., Shaari, K., and Lajis, N H (2010a), “Alkaloidal constituents of Tinospora crispa” Nat Prod Commun, 5, pp 1747-1750 15 Choudhary, M I., Ismail, M., Shaari, K., Abbaskhan, A., Sattar, S A., and Lajis, N H (2010b), “cis-Clerodane-type furanoditerpenoids from Tinospora crispa”, J Nat Prod, 73, pp 541-547 16 Chuakul, W., Saralamp, P., and Boonpleng, A (2002), “Medicinal plants used in the Kutchum district, Yasothon Province, Thailand”, Thai J Phytopharm, 9, pp 22-49 17 Chung, S Y (2011), “Studies on the Constituents ofthe Dry Stem of Tinospora crispa (Lour.) Merr”, Masters dissertation, China Medical University2011 18 Denis, G., Gerard, Y., Sahpaz, S., Laporte, R., Viget, N., Ajana, F., et al (2007), “Malarial prophylaxis with medicinal plants: toxic hepatitis due to Tinospora crispa”, Therapie, 62, pp 271-272 62 19 Dweck, A.C., and Cavin, J P (2006), “Andawali (Tinospora crispa): a Review”, Pers CareMag, 7, pp 33-39 20 Froemming, G (2011), “Anti-proliperative and antioxidant effects of Tinospora crispa (Batawali)”, Biomed Res, 22, pp 57-62 21 Fukuda, N., Yonemitsu, M., and Kimura, T (1983), “Studies on the constituents of the stems of Tinospora tuberculata Beumee I N-transand N-cis-feruloyl tyramine, and a new phenolic glucoside, tinotuberide”, Chem Pharm Bull, 31, pp 156-161 22 Fukuda, N., Yonemitsu, M., and Kimura, T (1986), “Studies on the constituents of the stems of Tinospora tuberculata Beumee, III: new diterpenoids, borapetoside B and borapetol B”, Chem Pharm Bull, 34, pp 2868-2872 23 Fukuda, N., Yonemitsu, M., Kimura, T., Hachiyama, S., Miyahara, K., and Kawasaki, T (1985), “Studies on the constituents of the stems of Tinospora tuberculata Beumee II New diterpenoids, borapetoside A and borapetol A”, Chem Pharm Bull, 33, pp 4438-4444 24 Gimlette, J D., and Burkill, I H (1930), “The Medical Book of Malayan Medicine”, Singapore: Botanic Gardens 25 Hipol, R L B., Cariaga, M F N M., and Hipol, R M (2012), “Antiinflammatory activities of the aqueous extract of the stem of Tinospora crispa (Family Menispermaceae)”, J Nat Stud, 11, pp 88-95 26 Hout, S., Chea, A., Bun, S S., Elias, R., Gasquet, M., Timon-David, P., et al (2006), “Screening of selected indigenous plants of Cambodia for antiplasmodial activity”, J.Ethnopharmacol 107, pp 12-18 27 Ibahim, M., I'zzah, W N W., Narimah, A., Asyikin, N Z., Shafinas, S.-N S., and Froemming, G (2011), “Anti-proliperative and antioxidant effects of Tinospora crispa (Batawali)”, Biomed Res India, 22, pp 57- 62 63 28 Imphanban, K., Kongkathip, N., Dhumma-Upakorn, P., Mesripong, R., and Kongkathip, B (2009), “Synthesis of N-formylnornuciferine with cardiotonic activity”, Nat Sci, 43, pp 738-744 29 Islam, F., Jahan, F I., Seraj, S., Malek, I., Sadat, A., Bhuiyan, M S A., et al (2011), “Variations in diseases and medicinal plant selection among folk medicinal practitioners: a case study in Jessore district, Bangladesh”, Am Eurasian J Sustain Agri, 5, pp 282-291 30 Jagetia, G C., Nayak, V., and Vidyasagar, M S (1998), “Evaluation of the antineoplastic activity of guduchi (Tinospora cordifolia) in cultured HeLa cells”, CancerLett, 127, pp 71-82 31 Kadir, F A., Othman, F., Abdulla, M A., Hussan, F., and Hassandarvish, P (2011), “Effect of Tinospora crispa on thioacetamide-induced liver cirrhosis in rats”, Indian J Pharmacol, 43, pp 64-68 32 Kadir, M F., Bin Sayeed, M S., Setu, N I., Mostafa, A., and Mia, M M (2014), “Ethnopharmacological survey of medicinal plants used by traditional health practitioners in Thanchi, Bandarban Hill Tracts, Bangladesh”, J Ethnopharmacol, 155, pp 495-508 33 Kamarazaman, I S., Amorn, Z., and Ali, R M (2012b), “Protective effects of Tinospora crispa extracts on H2O2 induced oxidative stress and TNFa-induced inflammation on human umbilical vein endothelial cells (HUVECs)”, J Med Plants Res, 6, pp 3013-3021 34 Koay, Y C., and Amir, F (2013), “A review of the secondary metabolites and biological activities of Tinospora crispa (Menispermaceae)”, Trop J Pharm Res, 12, pp 641-649 35 Kongkathip, N., Dhumma-Upakorn, P., Kongkathip, B., Chawananoraset, K., Sangchomkaeo, P., and Hatthakitpanichakul, S (2002), “Study on cardiac contractility of cycloeucalenol and cycloeucalenone isolated from Tinospora crispa”, J Ethnopharmacol, 83, pp 95-99 64 36 Kongsaktrakoon, B., Temsiririrkkul, R., Suvitayavat, W., Nakornchai, S., and Wongkrajang, Y (1984), “The antipyretic effect of Tinospora crispa Mier ex Hook f & Thoms”, Mahidol Univ J Pharm Sci, 21, pp 1-6 37 Lam, S H., Ruan, C T., Hsieh, P H., Su, M J., and Lee, S S (2012), “Hypoglycemic diterpenoids from Tinospora crispa”, J Nat Prod, 75, pp 153-159 38 Langrand, J., Regnault, H., Cachet, X., Bouzidi, C., Villa, A F., Serfaty, L., et al (2014), “Toxic hepatitis induced by a herbal medicine: Tinospora crispa”, Phytomedicine, 21, pp 1120-1123 39 Li, S., Long, C., Liu, F., Lee, S., Guo, Q., Li, R., et al (2006), “Herbs for medicinal baths among the traditionalYao communities of China”, J Ethnopharmacol, 108, pp 59-67 40 Lin, Y H (2009), “Studies on the Chemical Constituents of Tinospora crispa and Synthesis ofthe Analogous of Penta-o-Galloyl-d- Glucopyranose”, Masters dissertation, China Medical University2009 41 Lokman, F E., Gu, H F., Wan Mohamud, W N., Yusoff, M M., Chia, K L., and Ostenson, C G (2013), “Antidiabetic effect of oral borapetol B compound, isolated from the plant Tinospora crispa, by stimulating insulin release”, Evid Based Complement Alternat Med 42 Longuefosse, J L., and Nossin, E (1996), “Medical ethnobotany survey in Martinique”, J Ethnopharmacol, 53, pp 117-142 43 Martin, T S., Ohtani, K., Kasai, R., and Yamasaki, K (1996), “Furanoid diterpene glucosides from Tinospora rumphii”, Phytochemistry, 42, pp 153-158 44 Md, H A., and Mohammad, S (2011), “Antimicrobial, cytotoxicity and antioxidant activityof Tinospora crispa”, J Pharm Biomed Sci, 13, pp 1-4 45 Merawin, L T., Arifah, A K., Sani, R A., Somchit, M N., Zuraini, A., Ganabadi, S., et al (2010), “Screening of microfilaricidal effects 65 of plant extracts against Dirofilaria immitis”, Res Vet Sci, 88, pp 142-147 46 Mohamad, S., Zin, N M., Wahab, H A., Ibrahim, P., Sulaiman, S F., Zahariluddin, A S., et al (2011), “Antituberculosis potential of some ethnobotanicallyselectedMalaysianplants”, J Ethnopharmacol, 133, pp 1021-1026 47 Mokkhasmit, M., Ngarmwathana, W., Sawasdimongkol, K., and Permphiphat, U (1971), “Pharmacological evaluation of Thai medicinal Plants”, J Med Assoc Thai, 54, pp 490-503 48 Na, B., Sadikun, A., Choon, T., Ying, T., and Asmawi, M (2005), “Aporphine alkaloids isolated from the cardiovascular active fraction of Tinospora crispa”, Malays J Sci, 24 pp 161-165 49 Najib Nik a Rahman, N., Furuta, T., Takane, K., and Ali Mohd, M (1999), “Antimalarial activity of extracts of Malaysian medicinal plants”, J Ethnopharmacol, 64, pp 249-254 50 Naomichi, F., Michiko, Y., and Takeatsu, K (1983), “Studies on the constituents of the stems of Tinospora tuberculata Beumee IN-trans and Ncis-Feruloyl tyramine and a new phenolic glucoside, Tinotuberide”, Chem Pharm Bull, 31, pp 156-161 51 Niljan, J., Jaihan, U., Srichairatanakool, S., Uthaipibull, C., and Somsak, V (2014), “Antimalarial activity of stem extract of Tinospora crispa against plasmodium berghei infection in mice”, J Health Res, 28, pp 199-204 52 Noipha, K., and Ninla-Aesong, P (2011), “The Activation of GLUT1, AMPK alpha and PPAR gamma by Tinospora crispa in L6 Myotubes”, Spatula DD, 1, pp 245-249 53 Noor, H., and Ashcroft, S J (1998), “Pharmacological characterisation of the antihyperglycaemic properties of Tinospora crispa extract”, J Ethnopharmacol, 62, pp 7-13 66 54 Noor, H., Hammonds, P., Sutton, R., and Ashcroft, S J (1989), “The hypoglycaemic and insulinotropic activity of Tinospora crispa: studies with human and rat islets and HIT-T15 B cells”, Diabetologia, 32, pp 354- 359 55 Pachaly, P., Adnan, A Z., and Will, G (1992), “NMR-assignments of Nacylaporphine alkaloids from Tinospora crispa”, Planta Med, 58, pp 184-187 56 Pathak, A K., Jain, D C., and Sharma, R P (1995), “Chemistry and biological activities of the genera Tinospora Pharm”, Biol, 33, pp 277-287 57 Pilkis, S J and Granner, D K (1992), “Molecular physiology of the regulation of hepatic gluconeogenesis and glycolysis”, Annu Rev Physiol, 54, pp 885-909 58 Praman, S., Mulvany, M J.,Allenbach,Y., Marston,A., Hostettmann, K., Sirirugsa, P., et al (2011), “Effects of ann-butanol extractfromthe stem of Tinospora crispa on blood pressure and heart rate in anesthetized rats”, J Ethnopharmacol, 133, pp 675-686 59 Praman, S., Mulvany, M J., Williams, D E., Andersen, R J., and Jansakul, C (2012), “Hypotensive and cardio-chronotropic constituents of Tinospora crispa and mechanisms of action on the cardiovascular system in anesthetized rats”, J Ethnopharmacol, 140, pp 166-178 60 Praman, S., Mulvany, M J., Williams, D E., Andersen, R J., and Jansakul, C (2013), “Crude extract and purified components isolated from the stems of Tinospora crispa exhibit positive inotropic effects on the isolated left atrium of rats”, J Ethnopharmacol, 149, pp 123-132 61 Quisumbing, E (1951), “Medicinal Plants of the Philippines”, Quezon City: Katha Publishing Co., Inc 62 Rahmatullah, M., Azam, M N K., Rahman, M M., Seraj, S., Mahal, M J., Mou, S M., et al (2011), “A survey of medicinal plants used by Garo and non- Garo traditional medicinal practitioners in two villages of Tangail district, Bangladesh”, Am Eurasian J Sustain Agric, 5, pp 350357 67 63 Rahmatullah, M., Noman, A., Hossan, M S., Rashid, M., Rahman, T., Chowdhury, M H., et al (2009), “A survey of medicinal plants in two areas of Dinajpur district, Bangladesh including plants which can be used as functional foods”, Am Eurasian J Sustain Agric, 3, pp 862-876 64 Roosita, K., Kusharto, C M., Sekiyama, M., Fachrurozi, Y., and Ohtsuka, R (2008), “Medicinal plants used by the villagers of a Sundanese community in West Java, Indonesia”, J Ethnopharmacol, 115, pp 72-81 65 Ruan, C.-T., Lam, S.-H., Chi, T.-C., Lee, S.-S., and Su, M.-J (2012), “Borapetoside C from Tinospora crispa improves insulin sensitivity in diabetic mice”, Phytomedicine, 19, pp 719-724 66 Ruan, C.-T., Lam, S.-H., Lee, S.-S., and Su, M.-J (2013), “Hypoglycemic action of borapetoside A from the plant Tinospora crispa in mice”, Phytomedicine, 20, pp 667-675 67 Rungruang, T., and Boonmars, T (2009), “In vivo antiparasitic activity of the Thai traditional medicine plant-Tinospora crispa-against plasmodium Yoelii”, Southeast Asian J Trop Med Pub Health, 40, pp 898 68 Sangsuwan, C., Udompanthurak, S., Vannasaeng, S., and Thamlikitkul, V (2004), “Randomized controlled trial of Tinospora crispa for additional therapy in patients with type diabetes mellitus”, J Med Assoc Thai 87, pp 543-546 69 Sinchaikul, S., Chen, S T., and Sookkheo, B (2007), “Tumor cell selective antiproliferative effect of the extract from Tinospora crispa (borapet)”, Bull Health Sci Tech, 7, pp 75-84 70 Singh, S., S.C Pandey, S Srivastava, V.S Gupta, B Patro and A.C Ghosh (2003), “Chemistry And Medicinal Properties Of Tinospora cordifolia”, Indian Journal of Pharmacology, 35, pp 83-91 71 Srithi, K., Balslev, H., Wangpakapattanawong, P., Srisanga, P., and Trisonthi, C (2009), “Medicinal plant knowledge and its erosion among the Mien (Yao) in northern Thailand”, J Ethnopharmacol, 123, pp 335-342 68 72 Sriyapai, C., Dhumma-Upakorn, R., Sangwatanaroj, S., Kongkathip, N., and Krittiyanunt, S (2009), “Hypoglycemic effect of Tinospora crispa dry powder in outpatients with metabolic syndrome at King Chulalongkorn Memorial Hospital”, J Health Res, 23, pp 125-133 73 Subehan, U T., Iwata, H., Kadota, S., and Tezuka, Y (2006), “Mechanismbased inhibition of CYP3A4 and CYP2D6 by Indonesian medicinal plants », J Ethnopharmacol, 105, pp 449-455 74 Sulaiman, M., Zakaria, Z., and Lihan, R (2008), “Antinociceptive and antiinflamatory activities of Tinospora crispa in various animal models”, Int J Top Med, 3, pp 66-69 75 Sumimoto Chemicals Co Ltd (1982), “Berberine alkaloid production by tissue culture”, Jpn Kokai Tokkyo Koho, 57, pp 144, 992 76 UmiKalsom,Y., and Noor, H (1995), “Flavone O-glycosides from Tinospora crispa”, Fitoterapia, 66, pp 280 77 Usia, T., Iwata, H., Hiratsuka, A., Watabe, T., Kadota, S., and Tezuka, Y (2006a), “CYP3A4 and CYP2D6 inhibitory activities of Indonesian medicinal plants”, Phytomedicine, 13, pp 67-73 78 Usia, T., Iwata, H., Kadota, S., and Tezuka, Y (2006b), “ Mechanism-based inhibition of CYP3A4 and CYP2D6 by Indonesian medicinal plants”, J Ethnopharmacol, 105, pp 449-455 79 Yokozawa, T., Tanaka, T., and Kimura, T (2001), “Examination of the nitric oxide production-suppressingcomponent in Tinospora tuberculata”, Biol Pharm Bull, 24, pp 1153-1156 80 Yokozawa, T., Wang, T S., Chen, C P., and Hattori, M (2000), “Inhibition Of nitric oxide release by an aqueous extract of Tinospora Tuberculata”, Phytother Res,14, pp 51-53 81 Yusoff, M., Hamid, H., and Houghton, P (2014), “Anticholinesterase inhibitory activity of quaternary alkaloids from Tinosporacrispa”, Molecules,19, pp 1201-1211 69 82 Zakaria, Z A., Mat Jais, A M., Henie, E F P., Zaiton, H., Somchit, M N., Sulaiman, M R., et al (2006), “The in vitro antibacterial activity of Tinospora crispa extracts”, J Biol.Sci, 6, pp 398-401 83 Zaridah, M Z., Idid, S.Z., Omar,A W., and Khozirah, S (2001), ”In vitro antifilarial effects of three plant species against adult worms of subperiodic Brugia malayi”, J Ethnopharmacol, 78, pp 79-84 84 Zulkhairi, A., Hasnah, B., Sakinah, I., Nur Amalina, I., Zamree, M., and Mohd Shahidan, A (2009), “Nutritional composition, antioxidant ability and flavonoid content of Tinospora crispa stem”, Adv Nat Appl Sci, 3, pp 88-94 70 ... http://lrc.tnu.edu.vn Tất thành phần hóa học gắn liền với phận lồi Dây cóc trình bày bảng 1.2 sau Bảng 1.2 Nhóm hóa học, phần thành phần thực vật thành phần hóa học phân lập từ lồi Dây cóc Nhóm hóa chất No Phần Tài... Hình ảnh lồi Dây cóc (A) Tồn phần lồi Dây cóc (B) Lá lồi Dây cóc (C) Dây lồi Dây cóc (D) Hoa lồi Dây cóc (E) Lồi Dây cóc khơ (F) Màu cùi lồi Dây cóc 1.1.1.3 Phân bố - Trên giới: Lồi Dây cóc loại...ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ANIN KEOSAVANH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC LỒI DÂY CĨC (TINOSPORA CRISPA) THU HÁI TẠI LÀO Ngành: Hóa hữu Mã ngành: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC