Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của cây Giác đế đài to (Goniothalamus macrocalyx Ban) và Giác đế cuống dài (Goniothalamus gracilipes Ban) họ Na (Annonaceae)

Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của cây Giác đế đài to (Goniothalamus macrocalyx Ban) và Giác đế cuống dài (Goniothalamus gracilipes Ban) họ Na (Annonaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM

KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

VIỆN HOÁ HỌC

Triệu Quý Hùng

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC

VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG UNG THƯ CỦA CÂY GIÁC ĐẾ

ĐÀI TO (GONIOTHALAMUS MACROCALYX BAN) VÀ GIÁC

ĐẾ CUỐNG DÀI (GONIOTHALAMUS GRACILIPES BAN)

HỌ NA (ANNONACEAE)

LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC

Hà Nội - 2013

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM

KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

VIỆN HOÁ HỌC

Triệu Quý Hùng

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC

VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG UNG THƯ CỦA CÂY GIÁC ĐẾ

ĐÀI TO (GONIOTHALAMUS MACROCALYX BAN) VÀ GIÁC

ĐẾ CUỐNG DÀI (GONIOTHALAMUS GRACILIPES BAN)

HỌ NA (ANNONACEAE)

Chuyên ngành: Hóa hữu cơ

Mã số: 62.44.27.01

LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1 GS.TS Nguyễn Văn Hùng

2 TS Đoàn Thị Mai Hương

Hà Nội – 2013

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi Các số liệu, kết quả nêu trong Luận án là trung thực và chưa từng có ai công bố trong các công trình nghiên cứu trước đây Toàn bộ các thông tin trích dẫn trong Luận án đã được chỉ rõ nguồn gốc xuất xứ

Nghiên cứu sinh

Triệu Quý Hùng

LỜI CẢM ƠN

Với lòng biết ơn sâu sắc, tôi xin chân thành cảm ơn Thầy hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Văn Hùng và TS Đoàn Thị Mai Hương-Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã chỉ ra hướng nghiên cứu và tận tình hướng dẫn tôi trong suốt quá trình thực hiện Luận án

Tôi xin chân thành cảm ơn các Thầy, các Cô, các nhà khoa học Viện Hóa Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã giảng dạy, hướng dẫn tôi hoàn thành các học phần và các chuyên đề trong Chương trình đào tạo

học-Nhân dịp này, tôi xin bày tỏ sự cảm ơn sâu sắc đến Ban Lãnh đạo Viện Hóa học, Hội đồng khoa học, Bộ phận đào tạo và các phòng chức năng đã tạo mọi điều kiện thuận lợi để tôi học tập và nghiên cứu

Tôi xin chân thành cảm ơn Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên Cộng hòa Pháp), TS Marc Litaudon-chủ nhiệm dự án “Nghiên cứu hóa thực vật của thảm thực vật Việt Nam” đã hỗ trợ tôi trong việc đo X-ray, phổ MS/MS, thử hoạt tính sinh học; cùng với Quỹ Nafosted (Đề tài nghiên cứu khoa học cơ bản mã số 104.01.76.09) đã cấp kinh phí cho việc thực hiện Luận án

(CNRS-Tôi xin chân thành cảm ơn TS.HDR Phạm Văn Cường và các cán bộ nghiên cứu Phòng Tổng hợp hữu cơ, Trung tâm nghiên cứu và phát triển thuốc-Viện Hóa sinh biển đã giúp đỡ, đóng góp nhiều ý kiến quý báu và hỗ trợ tôi thực hiện Luận án Tôi tôi xin bày tỏ sự cảm ơn sâu sắc đến Ban Lãnh đạo Trường Đại học Hùng Vương, Khoa Khoa học Tự nhiên-Trường Đại học Hùng Vương đã tạo mọi điều kiện về thời gian, kinh phí hỗ trợ cho tôi trong quá trình học tập

Tôi xin chân thành cảm ơn Thầy, NGND.GS.TSKH Đặng Như Tại, NGƯT Đào Văn Ích đã định hướng, xây dựng cho tôi nền móng kiến thức hóa học từ bậc Trung học phổ thông, Đại học và Cao học

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, người thân và bạn bè đã hỗ trợ, động viên tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện Luận án

Hà Nội, ngày 08 tháng 12 năm 2013

Tác giả Luận án

Triệu Quý Hùng

MỤC LỤC

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT iv

DANH MỤC CÁC BẢNG v

DANH MỤC CÁC HÌNH vi

DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC ix

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 4

1 1 Giới thiệu sơ lược về thực vật họ Na (Annonaceae) 4

1.2 Giới thiệu về thực vật chi Goniothalamus 4

1.2.1 Sơ lược về chi Goniothalamus 4

1.2.2 Đặc điểm thực vật cây Giác đế đài to 7

1.2.3 Đặc điểm thực vật cây Giác đế cuống dài 8

1.3 Các nghiên cứu về hóa học và hoạt tính sinh học chi Goniothalamus 9

1.3.1 Styryl-lactone từ chi Goniothalamus 9

1.3.2 Acetogenin từ chi Goniothalamus 20

1.3.3 Flavonoid từ chi Goniothalamus 28

1.3.4 Alkaloid từ chi Goniothalamus 30

1.3.5 Một số hợp chất khác từ chi Goniothalamus 32

CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34

2.1 Thu hái mẫu cây và xác định tên khoa học 34

2.2 Phương pháp xử lý và chiết mẫu 34

2.3 Phương pháp phân tích, phân tách các hỗn hợp và phân lập các hợp chất từ mẫu thực vật 34

2.4 Các phương pháp xác định cấu trúc hóa học của các chất phân lập được từ các mẫu thực vật nghiên cứu 35

2.5 Phương pháp thử hoạt tính gây độc tế bào và hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 36

2.5.1 Phương pháp thử hoạt tính gây độc tế bào 36

2.5.2 Phương pháp thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 37

CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM 38

3.1 Tách chiết, phân lập các chất từ cây Giác đế đài to 38

3.1.1 Vỏ cây Giác đế đài to 38

3.1.1.1 Xử lý mẫu thực vật và chiết tách 38

3.1.1.2 Dữ kiện phổ và hằng số vật lý của các hợp chất được phân lập từ vỏ cây Giác đế đài to 41

3.1.2 Quả cây Giác đế đài to 47

3.1.2.1 Xử lý mẫu thực vật và chiết tách 47

3.1.2.2 Dữ kiện phổ và hằng số vật lý của các hợp chất được phân lập từ quả cây Giác đế đài to 49

3.2 Tách chiết, phân lập các chất từ cây Giác đế cuống dài 55

3.2.1 Quả cây Giác đế cuống dài 55

3.2.1.1 Xử lý mẫu thực vật và chiết tách 55

3.2.1.2 Dữ kiện phổ và hằng số vật lý của các hợp chất được phân lập từ quả cây Giác đế cuống dài 58

3.2.2 Lá cây Giác đế cuống dài 64

3.2.2.1 Xử lý mẫu thực vật và chiết tách 64

3.2.2.2 Dữ kiện phổ và hằng số vật lý của các hợp chất được phân lập từ lá cây Giác đế cuống dài 67

3.3 Hoạt tính gây độc tế bào và hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định của các chất được phân lập 70

CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 71

4.1 Các hợp chất phân lập được từ cây Giác đế đài to 71

4.1.1 Từ vỏ cây Giác đế đài to 71

4.1.1.1 Altholactone (GM1) 72

4.1.1.2 Goniopypyrone (GM2) 73

4.1.1.3 Goniofufurone (GM3) 74

4.1.1.4 Cardiobutanolide (GM4) 75

4.1.1.5 Goniothalamin (GM5) 76

4.1.1.6 (+)-T-cadinol (GM6) 77

4.1.1.7 α-Cadinol (GM7) 79

4.1.1.8 Aristolactam BII (GM8) 79

4.1.1.9 3-Methyl-1H-benz[f]indole-4,9-dione (GM9) 81

4.1.1.10 Acid nonacosanoic (GM10) 82

4.1.2 Từ quả cây Giác đế đài to 83

4.1.2.1 8-Hydroxygoniofupyrone A (GM11) 84

4.1.2.2 4-Deoxycardiobutanolide (GM12) 90

4.1.2.3 7-Acetylaltholactone (GM13) 92

4.1.2.4 Annonacin (GM14) 93

4.1.2.5 cis+trans-Solamin (GM15) 97

4.1.2.6 Isoannonacin (GM16) 99

4.1.2.7 trans-Murisolinone (GM17) 101

4.1.2.8 β-Caryophyllene oxide (GM18) 103

4.1.2.9 2-(2’-Hydroxytetracosanoylamino)octadecane-1,3,4-triol (GM19) 105

4.1.2.10 Acid palmitic (GM20) 106

4.2 Các hợp chất phân lập được từ cây Giác đế cuống dài 106

4.2.1 Từ quả cây Giác đế cuống dài 106

4.2.1.1 Saccopetrin A (GG1) 107

4.2.1.2 Gracilipin A (GG2) 109

4.2.1.3 Methylsaccopetrin A (GG3) 115

4.2.1.4 7,3’,4’-Trimethylquercetin (GG4) 117

4.2.1.5 Rhamnazin (GG5) 117

4.2.1.6 Casticin (GG6) 118

4.2.1.7 Isokanugin (GG7) 119

4.2.1.8 Melisimplexin (GG8) 120

4.2.1.9 5-Hydroxy-3,7-dimethoxy-3’,4’-methylenedioxyflavone (GG9) 120

4.2.1.10 1-Phenylpropan-1,2-diol (GG10) 121

4.2.1.11 Acid vanillic (GG11) 122

4.2.1.12 Phenylmethanol (GG12) 122

4.2.2 Các hợp chất phân lập được từ lá cây Giác đế cuống dài 123

4.2.2.1 Gracilipin B (GG13) 124

4.2.2.2 Gracilipin C (GG14) 130

4.2.2.3 Gracilipin D (GG15) 133

4.2.2.4 Squalene (GG16) 136

4.2.2.5 Benzyl benzoate (GG17) 136

4.2.2.6 Acid benzoic (GG18) 137

4.3 Hoạt tính sinh học của các hợp chất được phân lập 138

4.3.1 Hoạt tính gây độc tế bào của các chất được phân lập 138

4.3.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định của các chất được phân lập 142

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 144

CÁC CÔNG TRÌNH LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 147

TÀI LIỆU THAM KHẢO 149

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT

 Các phương pháp sắc ký

TLC Thin Layer Chromatography: Sắc ký lớp mỏng

CC Column Chromatography: Sắc ký cột

 Các phương pháp phổ

ESI-MS Electrospray Ionization Mass Spectroscopy: Phổ khối phun mù điện tử

IR Infrared Spectroscopy: Phổ hồng ngoại

DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer: Phổ DEPT

COSY Correlation Spectroscopy: Phổ tương tác 2 chiều đồng hạt nhân 1H-1H HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation: Phổ tương tác hai chiều trực

tiếp dị hạt nhân

HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation: Phổ tương tác đa liên kết hai

chiều dị hạt nhân

NOESY: Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy: Phổ NOESY

s: singlet d: doublet t: triplet q: quartet quint: quintet

m: multiplet dd: double doublet br: broad

 Các chữ viết tắt khác

IC50 Nồng độ ức chế 50% sự tăng trưởng của tế bào thử nghiệm

ED50 Liều có hiệu quả trên 50% tế bào thử nghiệm

MIC Nồng độ ức chế tối thiểu

đnc Điểm nóng chảy

DMSO Dimethyl sulfoxide

TMS Tetramethyl silan

CTPT Công thức phân tử

MTT 3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide

OD Optical density: Mật độ quang

grad gradient

 Tên của các hợp chất được viết theo nguyên bản Tiếng Anh

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 4.1 Dữ kiện phổ 13C-, 1H-NMR (125/500 MHz, Acetone-d6) của GM11 85

Bảng 4.2 Dữ kiện phổ 13C-, 1H-NMR (125/500 MHz, CD3OD) của GM12 90

DANH MỤC CÁC HÌNH

Hình 1.1 Cành mang hoa (1) và ảnh chụp tiêu bản lá, cành mang quả (2) của cây

Giác đế đài to 7

Hình 1.2 Cành mang hoa, quả (1) và ảnh chụp tiêu bản lá, cành mang quả (2) của cây Giác đế cuống dài 8

Hình 1.3 Các khung cơ bản của styryl-lactone 9

Hình 1.4 Con đường sinh tổng hợp các khung styryl-lactone cơ bản 20

Hình 1.5 Một số dạng cấu trúc THF, THP của acetogenin 21

Hình 1.6 Một số dạng cấu trúc vòng epoxy của acetogenin 21

Hình 1.7 Một số dạng cấu trúc vòng -lactone của acetogenin 22

Hình 1.8 Quá trình hình thành mono-THF acetogenin 27

Hình 3.1 Sơ đồ ngâm chiết vỏ cây Giác đế đài to 38

Hình 3.2 Sơ đồ phân lập dịch chiết CH2Cl2 vỏ cây Giác đế đài to 39

Hình 3.3 Sơ đồ phân lập dịch chiết MeOH vỏ cây Giác đế đài to 40

Hình 3.4 Sơ đồ ngâm chiết quả cây Giác đế đài to 47

Hình 3.5 Sơ đồ phân lập các chất từ dịch chiết CH2Cl2 quả cây Giác đế đài to 48

Hình 3.6 Sơ đồ ngâm chiết quả cây Giác đế cuống dài 56

Hình 3.7 Sơ đồ phân lập dịch chiết CH2Cl2 quả cây Giác đế cuống dài 57

Hình 3.8 Sơ đồ ngâm, chiết phân bố lá cây Giác đế cuống dài 65

Hình 3.9 Sơ đồ phân lập các chất từ lá cây Giác đế cuống dài 66

Hình 4.1 Cấu trúc các hợp chất được phân lập từ vỏ cây Giác đế đài to 71

Hình 4.2 Một số tương tác chính trên phổ HMBC và COSY của chất GM1 73

Hình 4.3 Một số tương tác chính trên phổ HMBC và COSY của chất GM2 74

Hình 4.4 Một số tương tác chính trên phổ HMBC và COSY của chất GM5 77

Hình 4.5 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và NOESY của GM6 78

Hình 4.6 Các tương tác chính trong phổ HMBC của chất GM8 80

Hình 4.7 Một số tương tác chính trong phổ HMBC, COSY, NOESY của GM9 82

Hình 4.8 Cấu trúc các hợp chất được phân lập từ quả cây Giác đế đài to 83

Hình 4.9 Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS của GM11 84

Hình 4.10 Phổ 1H-NMR giãn rộng của GM11 86

Hình 4.11 Phổ 13C-NMR và DEPT của GM11 86

Hình 4.12 Phổ COSY giãn rộng của GM11 87

Hình 4.13 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và NOESY của GM11 87

Hình 4.14 Phổ HMBC của GM11 88

Hình 4.15 Phổ NOESY giãn rộng của GM11 89

Hình 4.16 Cấu trúc không gian qua nhiễu xạ tia X của hợp chất GM11 89

Hình 4.17 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và NOESY của GM12 91

Hình 4.18 Một số tương tác chính trên phổ HMBC, COSY và NOESY của GM13 92

Hình 4.19 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và phân mảnh MS/MS của GM14 94

Hình 4.20 Độ chuyển dịch hóa học đặc trưng của mono-THF-acetogenin 94

Hình 4.21 Phổ Li-(+)ESI-LQT/Obitrap MS/MS của GM14 95

Hình 4.22 Cơ chế phân mảnh tạo ion X4, B1 96

Hình 4.23 Một số ion mảnh trên phổ Li-(+)ESI-QTOF MS/MS của GM14 96

Hình 4.24 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và phân mảnh MS/MS của GM15 98

Hình 4.25 Độ chuyển dịch hóa học của proton trong vòng ketolactone 100

Hình 4.26 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và phân mảnh MS/MS của GM16 100

Hình 4.27 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC và phân mảnh MS/MS của GM17 102

Hình 4.28 Một số tương tác chính trên phổ HMBC, COSY và NOESY của GM18 104

Hình 4.29 Cấu trúc các hợp chất được phân lập từ quả cây Giác đế cuống dài 107

Hình 4.31 Phổ khối phân giải cao của GG2 109

Hình 4.32 Phổ 1H-NMR của GG2 111

Hình 4.33 Phổ 13C-NMR và DEPT của GG2 112

Hình 4.34 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC, NOESY của GG2 113

Hình 4.35 Phổ COSY của GG2 113

Hình 4.36 Phổ HMBC của GG2 114

Hình 4.37 Phổ NOESY của GG2 114

Hình 4.38 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC, NOESY của GG3 115

Hình 4.39 Các hợp chất được phân lập từ lá cây Giác đế cuống dài 123

Hình 4.40 Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS của GG13 124

Hình 4.41.Phổ 1H-NMR của GG13 126

Hình 4.42 Phổ 13C-NMR và DEPT của GG13 127

Hình 4.43 Phổ COSY của GG13 127

Hình 4.44 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC, NOESY của GG13 128 Hình 4.45 Phổ HMBC của GG13 129

Hình 4.46 Phổ NOESY giãn rộng của GG13 129

Hình 4.47 Cấu trúc nhiễu xạ tia X của hợp chất GG13 130 Hình 4.48 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC, NOESY của GG14 131 Hình 4.49 Một số tương tác chính trên phổ COSY, HMBC, NOESY của GG15 135

DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC

Phụ lục 1 Các phổ của hợp chất GM1 ……… … PL1 Phụ lục 2 Các phổ của hợp chất GM2 ……… … PL5 Phụ lục 3 Các phổ của hợp chất GM3 ……… … PL10 Phụ lục 4 Các phổ của hợp chất GM4 ……… … PL14 Phụ lục 5 Các phổ của hợp chất GM5 ……… … PL17 Phụ lục 6 Các phổ của hợp chất GM6 ……… … PL22 Phụ lục 7 Các phổ của hợp chất GM7 ……… … PL26 Phụ lục 8 Các phổ của hợp chất GM8 ……… … PL30 Phụ lục 9 Các phổ của hợp chất GM9 ……… … PL34 Phụ lục 10 Các phổ của hợp chất GM10 ……… … PL40 Phụ lục 11 Các phổ của hợp chất GM11 ……… … PL40 Phụ lục 12 Các phổ của hợp chất GM12 ……… … PL43 Phụ lục 13 Các phổ của hợp chất GM13 ……… … PL49 Phụ lục 14 Các phổ của hợp chất GM14 ……… … PL54 Phụ lục 15 Các phổ của hợp chất GM15 ……… … PL59 Phụ lục 16 Các phổ của hợp chất GM16 ……… … PL66 Phụ lục 17 Các phổ của hợp chất GM17 ……… … PL73 Phụ lục 18 Các phổ của hợp chất GM18 ……… … PL79 Phụ lục 19 Các phổ của hợp chất GM19 ……… … PL84 Phụ lục 20 Các phổ của hợp chất GM20 ……… … PL88 Phụ lục 21 Các phổ của hợp chất GG1 ……… ……… … PL88 Phụ lục 22 Các phổ của hợp chất GG2 ……… ……… … PL94 Phụ lục 23 Các phổ của hợp chất GG3 ……… ……… … PL96 Phụ lục 24 Các phổ của hợp chất GG4 ……… ……… … PL101 Phụ lục 25 Các phổ của hợp chất GG5 ……… ……… … PL104 Phụ lục 26 Các phổ của hợp chất GG6 ……… ……… … PL107 Phụ lục 27 Các phổ của hợp chất GG7 ……… ……… … PL109

Phụ lục 28 Các phổ của hợp chất GG8 ……… ……… … PL112 Phụ lục 29 Các phổ của hợp chất GG9 ……… ……… … PL114 Phụ lục 30 Các phổ của hợp chất GG10 ……… ……… …… PL117 Phụ lục 31 Các phổ của hợp chất GG11 ……… ……… …… PL119 Phụ lục 32 Các phổ của hợp chất GG12 ……… ……… …… PL121 Phụ lục 33 Các phổ của hợp chất GG13 ……… ……… …… PL123 Phụ lục 34 Các phổ của hợp chất GG14 ……… ……… …… PL125 Phụ lục 35 Các phổ của hợp chất GG15 ……… ……… …… PL131 Phụ lục 36 Các phổ của hợp chất GG16 ……… ……… ……. PL136

Phụ lục 37 Các phổ của hợp chất GG17 ……… ……… ……. PL139

Phụ lục 38 Các phổ của hợp chất GG18 ……… ……… ……. PL142

Phụ lục 39 Dữ kiện phổ nhiễu xạ tia X của GM11 và GG13 ……… PL145

ĐẶT VẤN ĐỀ

Ung thư là căn bệnh đã có từ lâu mà nhiều người trên thế giới mắc phải và có

tỉ lệ tử vong cao Theo Tổ chức Y tế thế giới (WHO) hằng năm có khoảng 7,6 triệu người chết vì bệnh ung thư, chiếm hơn 13% số người chết mỗi năm Điển hình là các nhóm bệnh ung thư phổi, ung thư dạ dày, ung thư gan, ung thư đại trực tràng, ung thư vú, ung thư cổ tử cung và ung thư tiền liệt tuyến Gần 2/3 số ca tử vong do ung thư xảy ra ở các nước có thu nhập thấp và trung bình Tình hình mắc bệnh và tử vong do ung thư có xu hướng ngày càng tăng Theo ước tính của WHO, số ca tử vong do ung thư trên toàn thế giới sẽ lên đến con số 11,8 triệu mỗi năm vào năm

2030 [1] Ở Việt Nam, theo số liệu thống kê qua ghi nhận ung thư tại Hà Nội, Thành phố Hồ Chí Minh và một số tỉnh; ước tính mỗi năm ở nước ta có khoảng 150 nghìn bệnh nhân mới mắc ung thư và 75 nghìn người chết vì ung thư; con số này có

xu hướng ngày càng gia tăng [2]

Hóa học liệu pháp trong điều trị ung thư đã xuất hiện ở thế kỷ 19 với việc sử dụng potassium arsenite để điều trị bệnh bạch cầu tủy và được sử dụng đến tận những năm 1930 [3] Đến nay, nhiều hợp chất thiên nhiên hoặc các sản phẩm được tổng hợp, bán tổng hợp từ các hợp chất tự nhiên đã được sử dụng một cách hiệu quả trong việc điều trị, phòng ngừa bệnh ung thư và các bệnh tật khác giúp con người chống lại bệnh tật, nâng cao sức khỏe cộng đồng Nhiều loại thuốc chữa trị ung thư

sử dụng các hoạt chất được phân lập từ tự nhiên như nhóm các hợp chất vinca

alkaloid vinblastine, vincristine được phân lập từ cây Dừa cạn (Catharanthus roseus, họ Trúc đào-Apocynaceae), paclitaxel (Taxol) là một diterpenoid được

phân lập từ loài Thông đỏ Taxus brevifolia (Taxaceae) hay một số hợp chất khác

podophyllotoxin, camptothecin, berbamine, beta-lapachone, acid betulinic, colchicine, curcumin, daphnoretin, ellipticine, … và dẫn xuất bán tổng hợp của chúng vinflunine, docetaxel (Taxotere), …[4],[5] Cùng với sự phát triển của công nghệ tổng hợp hóa dược tạo ra các biệt dược, các nhà khoa học vẫn đang cố gắng

tìm hiểu, khám phá tác dụng chống ung thư và các hoạt tính sinh học khác của các hợp chất có nguồn gốc từ nhiều loài thực vật khác nhau

Việt Nam nằm ở trung tâm Đông Nam Á với 3/4 diện tích là đồi núi, thuộc khu vực khí hậu nhiệt đới gió mùa có hai mùa rõ rệt thay đổi theo địa hình Lượng mưa hằng năm vào khoảng 1200-2800 mm cùng với độ ẩm tương đối cao Với những đặc thù về khí hậu thiên nhiên như vậy, Việt Nam có một hệ thực vật phong phú và đa dạng với trên 12.000 loài, trong đó có trên 3.200 loài thực vật được sử dụng làm thuốc trong Y học dân gian; mở ra tiềm năng nghiên cứu về các hợp chất

tự nhiên từ các loài thực vật của Việt Nam [6]

Chi Goniothalamus (tên Tiếng Việt là Giác đế) thuộc họ Na (Annonaceae) có

160 loài phân bố ở các vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới, đặc biệt ở Châu Á, tập trung nhiều ở Đông Nam Á [7] Nhiều loài trong số đó đã được sử dụng trong các bài

thuốc y học cổ truyền Theo tác giả Nguyễn Tiến Bân, chi Goniothalamus ở Việt

Nam có 19 loài Một số loài trong chi này được sử dụng chữa vết thương, làm thuốc trị đòn ngã tổn thương, gãy xương, làm thuốc bổ, kích thích tiêu hóa [8],[9] Cho

đến nay mới có khoảng 30 loài trong số 160 loài thuộc chi Goniothalamus được

nghiên cứu về hoá thực vật Các nghiên cứu này cho thấy styryl-lactone, alkaloid và

acetogenin là các lớp chất chính có trong các loài Goniothalamus; trong đó nhiều

styryl-lactone và acetogenin thể hiện hoạt tính sinh học phong phú như hoạt tính gây độc tế bào, chống khối u, trừ sâu, chống nấm, kháng trùng sốt rét, kháng lao và hoạt tính chống oxi hóa [10],[11] Với đặc trưng cấu trúc và hoạt tính sinh học của

các lớp chất thiên nhiên thứ cấp có trong cây, các loài thuộc chi Goniothalamus tiếp

tục được các nhà khoa học trong và ngoài nước quan tâm nghiên cứu

Trong khuôn khổ của Đề tài nghiên cứu khoa học cơ bản mã số 104.01.76.09

và dự án Hợp tác Quốc tế Pháp - Việt “Nghiên cứu hóa thực vật của thảm thực vật

Việt Nam”; một số loài Goniothalamus của Việt Nam đã được thu hái và thử hoạt tính sơ bộ Kết quả cho thấy dịch chiết EtOAc của vỏ và quả cây Goniothalamus macrocalyx Ban có khả năng ức chế lần lượt 50,2%; 43,1% dòng tế bào ung thư

biểu mô KB ở nồng độ 1 μg/mL Dịch chiết EtOAc của lá và quả cây

Goniothalamus gracilipes Ban có khả năng ức chế lần lượt 29,7%; 17,0% dòng tế

bào KB ở nồng độ 1,0 μg/mL Cho đến nay mới chỉ có 2 loài Goniothalamus của Việt Nam (G tamirensis, G vietnamensis) được nghiên cứu về thành phần hóa học

và chưa có công trình trong nước hay quốc tế nào nghiên cứu về hóa học của hai

loài G macrocalyx Ban và G gracilipes Ban Do vậy chúng tôi lựa chọn hai loài Goniothalamus này làm đối tượng nghiên cứu của Luận án với mục tiêu:

(1) Nghiên cứu thành phần hóa học cây Giác đế đài to (G macrocalyx Ban)

và cây Giác đế cuống dài (G gracilipes Ban) nhằm phát hiện các hợp chất có hoạt tính chống ung thư

(2) Khảo sát hoạt tính chống ung thư và hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định của các chất phân lập được làm cơ sở khoa học định hướng cho việc nghiên cứu ứng dụng các hợp chất này

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN

1 1 Giới thiệu sơ lược về thực vật họ Na (Annonaceae)

Họ Na (danh pháp khoa học Annonaceae) là một họ thực vật có hoa bao gồm các loại cây thân gỗ, cây bụi hay dây leo Đây là họ lớn nhất của bộ Mộc lan (Magnoliales) với 130 chi và 2.300 loài, được phân bố chủ yếu ở vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới [8],[11]

Hầu hết các dạng sống chủ yếu được thấy ở các loài trong họ Na, chỉ trừ các cây thân cỏ và các dạng sống phụ sinh hay ký sinh Đối với các loài cây mọc đứng thường gặp ở dạng cây bụi hoặc cây gỗ nhỏ Trong khi đó nhiều loài khác thuộc chi

Polyathia và hàng loạt các chi khác lại gặp những cây gỗ to lớn [8]

Hình thái chung của các cây họ Na có những đặc điểm sau [8]: Lá của tất cả các loài họ Na đều không có lá kèm, mọc cách, đơn, nguyên, mép lá nguyên với gân lông chim Hoa của các loài họ Na thường là hoa lưỡng tính Hoa mọc đơn độc hoặc họp thành các dạng cụm hoa khác nhau, ở nách lá hoặc ngoài nách lá, ở đỉnh cành hoặc hoa mọc trên thân già không lá Đặc điểm này thường được dùng để phân biệt các chi trong họ Na Nhị trong họ Na có hai kiểu chính: “kiểu Uvarioid” với trung đới khá dầy và dài vượt quá bao phấn để tạo thành mào trung đới,“kiểu Miliusoid”

có trung đới mỏng và hẹp, làm cho bao phấn lồi lên so với trung đới Phần lớn các loài họ Na có bộ nhụy gồm các lá noãn rời Mỗi lá noãn được chia thành bầu, vòi nhụy và núm nhụy

1.2 Giới thiệu về thực vật chi Goniothalamus

1.2.1 Sơ lược về chi Goniothalamus

1.2.1.1 Đặc điểm hình thái của chi Goniothalamus

Các loài Goniothalamus ở dạng cây bụi hoặc gỗ nhỏ, ở các bộ phận non không

có lông hình sao Hoa lưỡng tính, thường mọc ở nách lá xanh hoặc nách lá đã rụng,

hiếm khi hoa mọc trên thân già hoặc vừa ở đỉnh hoặc vừa ở nách; ở gốc cuống hoa thường có một số lá bắc nhỏ Lá đài (3), cánh hoa (6) đều xếp van; 3 cánh hoa vòng ngoài thường phẳng; các cánh hoa vòng trong rất nhỏ và dày hơn cánh hoa ngoài, ở gốc thót lại thành móng hẹp, còn đỉnh thì dính nhau tạo thành mũ, chụp lên trên nhị

và nhụy nhị nhiều, dạng uvarioid; mào trung đới có khi rất nhọn đầu hoặc thường thì cụt, bao phấn hướng ngoài, thường có vách ngăn ngang Lá noãn nhiều, vòi thường rõ, với núm nhụy nguyên hoặc hơi xẻ thành hai thùy Noãn 1-2 hoặc 3-10 Phân quả ngồi hoặc có cuống ngắn [8]

Chi Goniothalamus có 160 loài, phân bố ở châu Á đến Niu Ghinê, tập trung

nhiều ở Đông Nam Á (Thái Lan, Đông Dương, Malaixia, Inđônêxia, Philipin) Ở Việt Nam chi này có 19 loài [7],[8]

1.2.1.2 Một số loài Goniothalamus ở Việt Nam

Theo tác giả Nguyễn Tiến Bân, chi Goniothalamus ở Việt Nam có 19 loài [8]:

Goniothalamus albiflorus Ban (Giác đế hoa trắng): Cho đến nay mới gặp loài

này ở Trung Bộ Việt Nam: Thừa Thiên-Huế, Kon Tum

Goniothalamus chinensis Merr & Chun (Giác đế trung hoa): Cây này có ở

Lào Cai (Sapa), Hà Giang, Quảng Ninh và còn có cả ở Trung Quốc (Quảng Tây, Quảng Đông, Hải Nam)

Goniothalamus chartaceus P T Li (Chân kiềng hay giác đế giấy): Hiện mới

thấy loài này ở miền Bắc Việt Nam: Quảng Ninh, Lạng Sơn

Goniothalamus donnaiensis Fin & Gagnep (Giác đế nhung, còn gọi là giác

đế đồng nai): Mới chỉ thấy loài này ở Trung và Nam Bộ Việt Nam: Khánh Hoà, Kon Tum, Đắc Lắc, Đắc Nông, Lâm Đồng, Ninh Thuận, Đồng Nai

Goniothalamus elegans Ast (Giác đế thanh lịch): Loài này mới gặp ở Trung

Bộ Việt Nam: Quảng Bình

Goniothalamus expansus Craib (Giác đế xoè): Loài này được tìm thấy ở Gia

Lai và còn gặp ở Thái Lan

Goniothalamus gabriacianus (Baill.) Ast (Giác đế sài gòn): Loài này có ở

Quảng Trị, Đà Nẵng, Quảng Nam, Khánh Hòa, Ninh Thuận, Kon Tum, Gia Lai,

Đắc Lắc, Tây Ninh, Bình Dương, Bà Rịa-Vũng Tàu, Kiên Giang, ngoài ra còn có ở Trung Quốc, Lào, Campuchia

Goniothalamus gracilipes Ban (Giác đế cuống dài): Loài này gặp ở Trung Bộ

Việt Nam (Đắc Lắc), gần đây còn tìm thấy ở Thái Nguyên

Goniothalamus macrocalyx Ban (Màu cau trắng, còn gọi là giác đế đài to, tai nghé, bồ câu đất): Loài này có ở Bắc Cạn, Hà Nội, Hòa Bình, Thanh Hóa, gần đây

còn tìm thấy ở Hà Giang

Goniothalamus multiovulatus Ast (Giác đế nhiều noãn): Cho đến nay chỉ mới

gặp loài này ở Trung Bộ Việt Nam: Thừa Thiên-Huế, Đà Nẵng

Goniothalamus ninhianus Ban (Giác đế lâm đồng): Có ở Lâm Đồng

Goniothalamus takhtajanii Ban (Giác đế tam đảo): Loài này chỉ mới gặp ở

miền Bắc Việt Nam: Vĩnh Phúc (Tam Đảo)

Goniothalamus tamirensis Pierre ex Fin & Gagnep (Giác đế miên, còn gọi là

giác đế Tamir): Loài này có ở Nghệ An, Quảng Trị, Thừa Thiên-Huế, Đà Nẵng, Khánh Hòa, Đắc Lắc, Đắc Nông và còn có ở Lào, Campuchia

Goniothalamus tenuifolius King (Giác đế lá mỏng): Loài này có ở Kon Tum,

ngoài ra còn gặp ở Malaixia

Goniothalamus touranensis Ast (Giác đế đà nẵng): Cho đến nay chỉ thấy loài

này ở vùng Trung Bộ Việt Nam: Đà Nẵng, Quảng Nam, Khánh Hòa, Đắc Lắc, Lâm Đồng

Goniothalamus undulatus Ridl (Giác đế lượn sóng): Có ở Đắc Lắc, ngoài ra

còn có ở Mianma, Thái Lan

Goniothalamus vietnamensis Ban (Bổ béo đen): Loài này mới gặp ở miền Bắc

Việt Nam: Cao Bằng, Quảng Ninh, Phú Thọ, Hà Nội (Ba Vì, Minh Quang)

Goniothalamus wightii Hook.f & Thoms (Giác đế ấn độ): Loài này có ở Đà

Nẵng, Khánh Hòa, Ninh Thuận, Gia Lai, Đồng Nai, ngoài ra còn có ở Ấn Độ, Lào, Campuchia

Goniothalamus yunnanensis W T Wang (Giác đế vân nam): Loài này có ở

Lào Cai, Sơn La, Lạng Sơn, Hòa Bình và còn có ở Trung Quốc (Vân Nam)

Theo tác giả Võ Văn Chi, một loài thuộc chi Goniothalamus của Việt Nam được sử dụng làm thuốc trong Y học dân gian như lá của cây Giác đế giấy (G chartaceus P T Li) được dùng nấu nước rửa vết thương; thân cây Giác đế nhung (G donnaiensis Fin & Gagnep.) được dùng làm thuốc trị đòn ngã tổn thương và gãy xương; rễ cây Giác đế sài gòn (G gabriacianus (Baill.) Ast.) dùng làm thuốc giải độc, trừ ban trái, đậu sởi; rễ cây Bổ béo đen (G vietnamensis Ban) được dùng

sắc nước uống làm thuốc bổ, kích thích tiêu hóa [9]

1.2.2 Đặc điểm thực vật cây Giác đế đài to

Cây Giác đế đài to (G macrocalyx Ban) ở dạng cây gỗ nhỏ, cao 10-15 m, cành

non, cuống lá và cuống hoa đều có lông màu gỉ sắt Lá dai, thường láng ở mặt trên, thuôn hoặc thuôn hình trứng ngược, cả 2 mặt (trừ ở gân chính mặt dưới) đều nhẵn; chóp lá thành mũi ngắn, gốc lá tù; gân bên mờ nhưng hơi nổi ở 2 mặt Hoa mọc ở nách lá đã rụng (có khi ở trên cành già); cuống hoa mập, ở gốc mang 4-6 lá bắc

không đều nhau có lông ở cả 2 mặt (Hình 1.1.)

Hình 1.1 Cành mang hoa (1) và ảnh chụp tiêu bản lá, cành mang quả (2) của

cây Giác đế đài to

Loài Giác đế đài to có cánh hoa ngoài khi tươi màu vàng nhạt, dày, hình mác,

có 1 gân ở giữa, cả hai mặt đều có lông tơ màu gỉ sắt; cánh hoa trong hình trứng hơi nhọn đầu, dính nhau ở đỉnh tạo thành mũ, mặt ngoài có lông Nhị nhiều, chỉ nhị rõ,

bao phấn có vách ngang; mào trung đới hình đĩa hơi lồi, có lông Lá noãn nhiều, bầu có lông dài; vòi ngắn; núm nhụy hình phễu, dài bằng bầu, ở đỉnh hơi xẻ 2 môi Noãn 2 Đế hoa gần phẳng Phân quả có lông màu nâu đen, thuôn hoặc hình trụ cong, có mỏ nhọn ở đỉnh, vỏ quả mỏng Hạt màu nâu, nhẵn và hơi láng [8]

1.2.3 Đặc điểm thực vật cây Giác đế cuống dài

Cây Giác đế cuống dài (G gracilipes Ban) ở dạng cây bụi nhỏ, cao 3-4 m,

cành và cuống lá khi rất non có lông màu nâu, về sau nhẵn Lá mỏng, hình trái xoan hoặc hình thuôn Cả hai mặt (trừ gân chính ở mặt dưới) đều không có lông, chóp lá hơi có mũi ngắn, gốc là hình nêm hoặc tù, gân cấp II rất mờ ở cả hai mặt Hoa mọc đơn độc ở nách lá ; cuống hoa mảnh, ở gốc mang 3-5 lá bắc Lá bắc có khi dạng lá lớn cỡ 12-20 x 6-10 mm Lá đài rời từ gốc, hình trứng rộng, hơi tù đầu Cả hai mặt

đều gần như nhẵn, bền theo quả và nằm sát đế quả (Hình 1.2.)

Hình 1.2 Cành mang hoa, quả (1) và ảnh chụp tiêu bản lá, cành mang quả (2)

của cây Giác đế cuống dài

Loài Giác đế cuống dài có cánh hoa ngoài dày, hình trứng thuôn nhọn đầu, cả hai mặt đều có lông (mặt ngoài rậm hơn) màu vàng nâu, dính nhau bởi mép và có đỉnh hình 3 cạnh rõ ; cánh hoa trong hình thoi, dính nhau ở đỉnh tạo thành mũ nhọn đầu, mặt ngoài có lông màu vàng nâu Nhị nhiều hình cái đinh, có chỉ nhị ngắn ; bao

phấn có vách ngang, mào trung đới hình đĩa lồi, có lông ngắn, rất rộng hơn bao phấn Lá noãn không nhiều, hơi dài hơn nhị, bầu hoàn toàn nhẵn, vòi nhỏ và ngắn, núm nhụy hình trụ, ở đỉnh nguyên và hơi loe rộng Noãn một Phân quả hình trứng,

có mũi nhọn, nhẵn, khi chín màu đỏ, ở trên cuống rất dài 3-4 cm, vỏ quả mỏng Hạt màu xám vàng nhẵn [8]

1.3 Các nghiên cứu về hóa học và hoạt tính sinh học chi Goniothalamus

Cho đến nay mới có khoảng 30 loài trong số 160 loài thuộc chi

Goniothalamus được nghiên cứu về hoá thực vật Các nghiên cứu này cho thấy

styryl-lactone, acetogenin và alkaloid là ba lớp chất chính có trong các loài

Goniothalamus, ngoài ra còn gặp một số nhóm chất khác như flavonoid, terpenoid, [7]

1.3.1 Styryl-lactone từ chi Goniothalamus

Các styryl-lactone được phân lập từ chi Goniothalamus thường có bộ khung

cơ bản C13 gồm mạch styryl gắn với vòng lactone được chia thành 6 nhóm cấu trúc

cơ bản đặc trưng bao gồm: styryl-pyrone (I), furano-pyrone (II), furano-furone (III), pyrano-pyrone (IV), butenolide (V) và heptolide (VI) (Hình 1.3.) Nhiều

styryl-lactone thể hiện hoạt tính sinh học phong phú như hoạt tính gây độc tế bào, chống khối u, trừ sâu, kháng vi sinh vật kiểm định, kháng trùng sốt rét, kháng lao và hoạt tính chống oxi hóa; trong đó hoạt tính gây độc tế bào đã được nghiên cứu một cách tỉ mỉ và đưa ra cơ chế hoạt động của styryl-lactone [7],[10]

Hình 1.3 Các khung cơ bản của styryl-lactone

1.3.1.1 Styryl-pyrone từ chi Goniothalamus

Năm 1972, nhóm tác giả K Jewers và cộng sự thuộc Viện các hợp chất nhiệt

đới của Anh đã phân lập được (R)-goniothalamin (1) từ vỏ cây Goniothalamus

andersonii Đây là hợp chất styryl-lactone đầu tiên được phân lập từ chi Goniothalamus (Annonaceae) [12]

Hợp chất này cũng được phân lập từ nhiều loài thuộc chi Goniothalamus, như

G andersonii, G fulvus, G giganteus, G.macrophyllus, G malayanus, G scortechinii, G sesquipedalis, G tamirensis, G tapis và G uvaroides, trong đó có loài G tamirensis của Việt Nam [13]

Năm 1998, kết quả thử hoạt tính sinh học ban đầu cho thấy (R)-goniothalamin

(1) có hoạt tính in vitro đối với nhiều dòng tế bào ung thư như dòng tế bào ung thư

máu P388, u bướu WEHI1640 và ung thư dạ dày ở người HGC-27 với giá trị ED50

lần lượt 0,75; 1,70; 0,70 g/mL [14] Thử nghiệm tiếp theo cho thấy

(R)-Goniothalamin (1) có hoạt tính đối với các dòng tế bào ung thư cổ tử cung Hela,

ung thư vú MCF7, ung thư buồng trứng Caov-3 Đặc biệt là (R)-goniothlamin lại không độc đối với tế bào lành tính, kết quả thử hoạt tính chống ung thư in vivo cho

thấy hợp chất này có hoạt tính chống ung thư vú trên chuột thực nghiệm Dawley [15]

Sparague-Năm 2003, nhóm tác giả Malaysia S.H Inayat-Hussain và cộng sự đã nghiên

cứu về hoạt tính gây độc tế bào ung thư máu HL-60 của (R)-goniothalamin (1) Từ

mô hình về chương trình cái chết định sẵn của tế bào ung thư máu HL-60 cho thấy

styryl-lactone (R)-goniothalamin (1) từ chi Goniothalamus hoạt hóa hệ thống

enzym caspases qua sự mất màng ty thể dẫn đến phóng thích sắc tố tế bào ty thể c,

làm cho nhiễm sắc thể bị co rút không thể phân chia và làm tế bào ngừng phát triển [16] Năm 2011, nhóm tác giả M Al-Qubaisi đã đánh giá một cách chi tiết hoạt tính

gây độc tế bào của (R)-goniothalamin đối với dòng tế bào ung thư ở người gồm tế

bào ung thư gan HepG2, tế bào gan bình thường Chang Kết quả cho thấy

(R)-goniothalamin (1) có khả năng giảm sự phát triển của tế bào HepG2 một cách chọn

lọc sau 72 giờ với giá trị IC50 = 4,63 M, trong khi đó giá trị IC50 đối với dòng tế

bào Chang là 35,01 M Nghiên cứu đã chỉ ra hoạt tính gây độc tế bào của

(R)-goniothalamin (1) có sự liên quan đến ức chế quá trình tổng hợp ADN [17], [18]

Ngoài hoạt tính gây độc tế bào, (R)-goniothalamin (1) còn thể hiện hoạt tính

chống nấm Năm 2008, nhóm các nhà nghiên cứu của Brazil đã thử nghiệm và cho

thấy (R)-goniothalamin (1) thể hiện mức độ hoạt tính khác nhau đối với nhiều

chủng nấm, trong đó hoạt tính mạnh hơn cả là đối với hai chủng nấm

Paracoccidioides braziliensis và Paracoccidioides braziliensis với giá trị MIC lần

lượt 9,0; 6,8 g/mL [19] Gần đây, năm 2013 nhóm các nhà khoa học Malaysia

R.P.T Kim và cộng sự đánh giá hoạt tính chống oxi hóa của (R)-goniothalamin (1)

cho thấy chất này có hoạt tính chống oxi hóa (IC50 = 2,04 M), tuy nhiên kém hoạt động hơn chất đối chứng (acid ascobic IC50 = 0,075 M) [20]

Đã có nhiều dẫn xuất của (R)-goniothalamin (1) được phân lập từ các loài

khác nhau thuộc chi Goniothalamus, do đó hợp chất này được coi là tiền chất trong

quá trình sinh tổng hợp hợp chất styryl-lactone khác (2-5) Các styryl-pyrone

thường gặp ở các dạng khác nhau với mức độ oxi hóa mạch liên kết với vòng

phenyl và mức độ bão hòa của vòng pyrone như 7,8-olefin styryl-pyrone

((R)-goniothalamin (1)); epoxy styryl-pyrone (((R)-goniothalamin oxide (2)); dihydroxy styryl-pyrone (goniotriol (3), goniodiol (4)); styryl-pyrone bão hòa

7,8-(garvensintriol (5)) Goniothalamin oxide (2) được phân lập từ loài G macrophyllus

của Malaysia vào năm 1987 Kết quả thử nghiệm hoạt tính sinh học cho thấy hợp

chất này có khả năng gây sảy thai ở chuột [21] Từ loài G giganteus các nhà khoa

học Ấn Độ lần lượt phân lập được goniotriol (3) (1989), goniodiol (4) (1991) Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào cho thấy goniotriol (3), goniodiol (4) đều có hoạt

tính đối với các dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại

tràng HT-29; trong đó hợp chất 4 có hoạt tính mạnh hơn (3) ở cả 3 dòng tế và hoạt

tính đối với dòng tế bào A-549 là mạnh hơn cả (ED50 = 0,12 g/mL) [14],[22],[23]

Styryl-pyrone bão hòa đầu tiên được phân lập là garvensintriol (5) từ vỏ cây G

arvensis vào năm 1998 [24]

Năm 2003, từ vỏ và lá của cây G amuyon của Trung Quốc, nhóm tác giả Y.H

Lan và cộng sự đã phân lập được 8-chlorogoniodiol (6) [25] Đây là dẫn xuất

halogeno styryl-lactone hiếm gặp trong chi Goniothalamus Hợp chất này cũng được phân lập từ cây G scortechinii của Thái Lan vào năm 2012 cùng với một số

styryl-pyrone khác như goniothalamin (1), goniothalamin oxide (2), goniodiol (4)

Các styryl-pyrone này đã được thử hoạt tính kháng lao, chống sốt rét và hoạt tính

gây độc tế bào Kết quả cho thấy goniothalamin (1) và goniothalamin oxide (2) có hoạt tính chống sốt rét và hoạt tính gây độc tế bào mạnh, trong đó (1) có hoạt tính mạnh hơn (2) Dẫn xuất chloro của chất 4 là 8-chlorogoniodiol (6) có hoạt tính mạnh hơn chất 4 đối với cả 3 các dòng tế bào ung thư biểu mô KB, ung thư vú BC,

ung thư phổi NCI-H187 [25],[26],[27]

Từ các loài G amuyon, G.giganteus, G grifithii, G sesquipedalis, G uvaroides một số dẫn xuất acetyl hóa, alkyl hóa của các styryl-pyrone trên được

phân lập: 5-acetoxygoniothalamin (7), 5-acetoxyisogoniothalamin oxide (8), acetylgoniotriol (9), etharvendiol (10), 7-acetylgoniodiol (11), 8-acetylgoniodiol (12), goniodiol diacetate (13), 8-methoxygoniodiol (14) [10],[24],[25]

8-Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào cho thấy các dẫn xuất acetyl của goniodiol và goniotriol đều có hoạt tính đối với dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư đại tràng HT-29, ung thư máu P-388 với giá trị ED50 < 10 g/mL Cả ba

dẫn xuất acetyl của goniodiol (11, 12, 13) thể hiện hoạt tính mạnh hơn goniodiol (4)

đối với dòng tế bào P-388, nhưng kém hoạt động hơn đối với hai dòng tế bào

A-549, HT-29; trong khi đó 8-acetylgoniotriol (9) lại có hoạt tính mạnh hơn goniotriol (3) đối với các dòng tế bào A-549, HT-29 Đối với các dòng tế bào thử nghiệm, dẫn

xuất monoacetyl của goniodiol có hoạt tính mạnh hơn dẫn xuất monoacetyl của goniotriol [14] Một kết quả thử hoạt tính khác đối với dòng tế bào ung thư dạ dày NUGC, ung thư mũi hầu HONE-1 các dẫn xuất của goniodiol cho thấy dẫn xuất

chloro 8-chlorogoniodiol (6) có hoạt tính chọn lọc đối với dòng tế bào HONE-1

(IC50 = 4,87 g/mL), dẫn xuất monoacetyl goniodiol là (11) và (12) có hoạt tính

mạnh đối với hai dòng tế bào thử nghiệm, mạnh hơn cả chất đối chứng actinomycin

D đối với dòng tế bào NUGC Tuy nhiên dẫn xuất methoxy 8-methoxygoniodiol

(14) lại có hoạt tính rất yếu đối với các dòng tế bào NUGC và HONE-1 [25]

Một dẫn xuất styryl-pyrone khác là howiinol A (15) được các nhà khoa học

Trung Quốc R Chen và cộng sự chiết tách ra lần đầu tiên vào năm 1998 từ vỏ cây

G howii Merr (Annonaceae) [28] Về mặt cấu trúc, howiinol A (15) chính là dẫn

xuất cinnamoyl của goniotriol (3) Kết quả thử hoạt tính sinh học cho thấy howiinol

A (15) có hoạt tính chống ung thư in vitro đối với nhiều dòng tế bào ung thư ở

người như ung thư máu L1210, HL-60, ung thư biểu mô KB, ung thư buồng trứng A2780, ung thư gan Bel 7402, ung thư ruột kết HCT-18 và dòng tế bào phổi lành

tính Đặc biệt howiinol A (15) lại không có độc tính cao đối với dòng tế bào phổi

lành tính Hợp chất này còn được thử nghiệm in vivo cho thấy có khả năng làm

giảm sự phát triển của khối u ung thư gan H22, ung thư phổi Lewis và ung thư mô

liên kết S-180 ở chuột nhắt trắng Nghiên cứu cũng đã chỉ ra howiinol A (15) ức chế

ADN trên dòng tế bào ung thư máu L1210 và đồng thời ức chế enzym topoisomerase II, làm ngăn cản quá trình chuyển pha G1 sang pha S trong một chu

kỳ tế bào [29],[30]

1.3.1.2 Furano-pyrone từ chi Goniothalamus

Altholactone (16) là furano-pyrone đầu tiên được nhóm tác giả A.E El-Zayat

phân lập từ vỏ cây G.giganteus vào năm 1985 Tiếp theo đó từ một số loài

Goniothalamus đã phân lập được altholactone (16) và diasteromer isoaltholactone

(17) [10]

Altholactone (16) đã được các nhà khoa học thuộc Viện Nghiên cứu Ung thư

Quốc gia Hoa Kỳ nghiên cứu (1989) cho thấy hợp chất này được coi là một trong số các styryl-lactone có hoạt tính cao nhất với giá trị IC50 nằm trong khoảng từ 0,1 đến

10 M đối với nhiều dòng tế bào ung thư khác nhau ở người như ung thư máu, ung

thư phổi, ung thư vú, ung thư ruột kết, u sắc tố [31] Isoaltholactone (17) cũng thể

hiện hoạt tính mạnh, chọn lọc đối với dòng tế bào u bạch cầu 9PS, tế bào ung thư đại tràng HT-29 với giá trị IC50 < 1M [14] Năm 2009, altholactone (16) được tách

ra từ loài G laoticus và kết quả thử hoạt tính sinh học cho thấy hợp chất này còn có

hoạt tính chống sốt rét, chống lao [27] Gần đây, năm 2011, nhóm nghiên cứu của

F.A Momani và cộng sự đã cho thấy altholactone (16) còn có hoạt tính mạnh đối

với các vi khuẩn Gram (-) (E Coli, S typhi) và vi khuẩn Gram (+) (S aureus, E faecalis) mở ra con đường sử dụng chất này trong y học và trong nông nghiệp để

khử trùng, diệt khuẩn [32]

Năm 2000, nhóm các nhà khoa học Tây Ban Nha E Peris và cộng sự đã phân

lập được dẫn xuất acetyl của altholactone 7-acetylaltholactone (18) từ vỏ cây G

arvensis [33]

Hợp chất này tiếp tục được phân lập từ loài G laoticus (2009), G undulatus

(2011) Kết quả thử hoạt tính sinh học cho thấy 7-acetylaltholactone (18) cũng có

hoạt tính đối với nhiều dòng tế bào ung thư và hoạt tính chống sốt rét nhưng không

thể hiện hoạt tính chống lao Đặc biệt 7-acetylaltholactone (18) còn có hoạt tính mạnh hơn altholactone (16) đối với dòng tế bào ung thư phổi COR-L23, tế bào phổi

nguyên bào sợi ở người MRC-5 [27],[34]

Từ các loài G giganteus, G arvensis, các furano-pyrone goniofupyrone (19),

goniotharvensin (20), etharvensin (21), arvensin (22) được phân lập và xác định cấu trúc [10] Hợp chất (19) được thử hoạt tính gây độc tế bào nhưng thể hiện hoạt tính

yếu đối với các dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại tràng HT-28 [14]

Năm 2005 nhóm tác giả Y.H Lan và cộng sự đã phân lập được một

furano-pyrone goniofufurano-pyrone A (23) mới với vòng furano-pyrone và furan tiếp giáp với nhau ở vị

trí C-4,6 trong khi đó ở các furano-pyrone đều có dạng vòng pyrone và furan tiếp giáp ở vị trí C-5,6 [35] Tuy nhiên kết quả thử hoạt tính đối với các dòng tế bào ung thư gan (HepG2, Hep3B), ung thư vú (MCF-7, MDA-MB-231) cho thấy hợp chất này không thể hiện hoạt tính đối với các dòng tế bào trên [35]

1.3.1.3 Furano-furone từ chi Goniothalamus

Từ vỏ cây G giganteus nhóm tác giả X.P Fang và cộng sự đã phân lập được

hai hợp chất furano-furone goniofufurone (24) (1990) và 8-epi-goniofufurone (25)

(1991) [37],[38]

Đây là một cặp đồng phân epimer ở C-8 Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào đối với các dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại tràng

HT-29 cho thấy goniofufurone (24) có hoạt tính đối với dòng tế bào A-549 (ED50 =

4,76 g/mL), còn 8-epi-goniofufurone (25) không có hoạt tính đối với 3 dòng tế bào

trên [37],[38]

Năm 2011, nhóm tác giả M.M Jiang và cộng sự đã phân lập từ loài G

cheliensis hai epimer của 8-epi-goniofufurone (25) là (+)-cheliensis A (26) (epimer

C-4) và (+)-cheliensis B (27) (epimer C-5) [39]

1.3.1.4 Pyrano-pyrone từ chi Goniothalamus

Hợp chất pyrano-pyrone đầu tiên là goniopypyrone (28) được X.P Fang và

cộng sự phân lập vào năm 1990 từ vỏ cây G giganteus của Thái Lan Cũng từ loài

G giganteus nhóm tác giả này phân lập được 5-deoxygoniopypyrone (29) vào năm

1991 [36],[37],[38] Từ loài G leiocarpus, nhóm tác giả Q Mu và cộng sự phân lập

được epimer của 5-deoxygoniopypyrone (29) ở C-8 là leiocarpin A (30) [10]

O

HO

O O

4 5 6 8

2 4

6 8

14 12

2 4

6 8

14 12

7

10

H

H

Kết quả thử hoạt tính sinh học cho thấy goniopypyrone (28) có hoạt tính mạnh

đối với cả 3 dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại tràng HT-29 với giá trị ED50 < 0,7 g/mL, trong khi đó 5-deoxygoniopypyrone (29) lại

thể hiện hoạt tính yếu đối với 3 dòng tế bào trên [37]

Năm 2010 TS Nguyễn Mạnh Cường và cộng sự đã phân lập được một

pyrano-pyrone mới (+)-7-epi-5-deoxygoniopypyrone (31) từ lá cây G tamirensis

của Việt Nam [40] Kết quả thử hoạt tính chống loãng xương cho thấy

(+)-7-epi-5-deoxygoniopypyrone (31) có khả năng kích thích sự phát triển của tế bào xương ở

nồng độ 2,67 M [40]

Từ một số loài của chi Goniothalamus, các dẫn xuất acetyl của pyrano-pyrone

cũng được phân lập và xác định cấu trúc Năm 2003, nhóm tác giả S Wang và cộng

sự đã phân lập từ cây G cheliensis của Trung Quốc hợp chất

7-acetyl-5-deoxygoniopypyrone (32) [41] Năm 2013, nhóm nghiên cứu của GS Nguyễn Văn

Hùng đã phân lập từ lá cây G tamirensis hợp chất 7-epi-5-deoxygoniopypyrone

acetate (33) cùng với 2 pyrano-pyrone khác 5-deoxygoniopypyrone (29) và

(+)-7-epi-5-deoxygoniopypyrone (31) [13]

1.3.1.5 Butenolide từ chi Goniothalamus

Hai hợp chất butenolide goniobutenolide A (34) và goniobutenolide B (35)

được nhóm các tác giả X.P Fang và cộng sự phân lập từ loài G giganteus vào năm

1991 Hai butenolide trên cũng được nhóm nghiên cứu của S.G Cao và cộng sự

phân lập từ loài G borneensis vào năm 1998 [10]

Kết quả thử hoạt tính sinh học cho thấy goniobutenolide A (34) và goniobutenolide B (35) đều có hoạt tính trung bình đối với các dòng tế bào ung thư

phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại tràng HT-29; trong đó goniobutenolide

B (35) có tính chọn lọc đối với dòng tế bào A-549 (ED50 = 0,91 g/mL) [14]

Năm 2003, nhóm tác giả A Hisham và cộng sự đã phân lập từ vỏ cây G

cardiopetalus của Ấn Độ hợp chất cardiobutanolide (36) [42] Tuy nhiên đến nay

chưa có tài liệu công bố về hoạt tính sinh học của hợp chất này

1.3.1.6 Heptolide từ chi Goniothalamus

Các hợp chất gonioheptolide-A (37) và gonioheptolide-B (38) được nhóm tác

giả X.P Fang và cộng sự phân lập từ vỏ cây G giganteus vào năm 1993 Năm

1997, nhóm tác giả A Bermejo và cộng sự phân lập được almuheptolide-A (39) và

almuheptolide-B (40) từ vỏ cây G arvensis [10] Đến nay vẫn chưa có tài liệu công

bố về hoạt tính sinh học của nhóm chất styryl-lactone này

1.3.1.7 Một số styryl-lactone khác từ chi Goniothalamus

Bên cạnh nhóm các nhóm chất styryl-lactone trên, trong một số loài

Goniothalamus còn phân lập được các styryl-lactone dưới dạng dimer hóa

Năm 2002, từ rễ cây G cheliensis nhóm các nhà khoa học Trung Quốc S

Wang và cộng sự đã phân lập được dimer styryl-lactone goniolactone A (41) [43]

Goniolactone A (41) được tạo thành do sự kết hợp của hai phân tử goniodiol (4) và altholactone (16) qua liên kết ether giữa C-8 và C-7’ Năm 2005, nhóm các

nhà khoa học của Đài Loan Y.H Lan và cộng sự đã phân lập được dimer

styryl-lactone digoniodiol (42) từ lá và vỏ cây G amuyon [25] Về cấu trúc, digoniodiol

(42) chính là dimer tạo thành từ hai phân tử goniodiol (4) liên kết với nhau qua vị trí C-8 và C-8’ bằng cầu nối ether Cấu trúc của (42) được khẳng định bằng dữ liệu đo nhiễu xạ tia X Kết quả thử hoạt tính sinh học cho thấy digoniodiol (42) có hoạt tính

trung bình đối với các dòng tế bào ung thư gan HepG2, Hep3B, ung thư vú

MDA-MB-231 và thể hiện hoạt tính mạnh hơn goniodiol (4) đối với các dòng tế bào

HepG2 và MDA-MB-231 [25]

Gần đây, năm 2012 tác giả J.X Zhu và cộng sự đã phân lập được 1 dimer

sryryl-lactone goniodilactone (43) từ lá của loài G cheliensis của Trung Quốc [44]

Goniodilactone (43) và goniolactone A (41) là một cặp đồng phân diasteromer, khác nhau ở cấu hình C-7, C-8, C-7’ và C-8’ Goniodilactone (43) được tạo thành từ phân tử isoaltholactone (17) và một diasteromer của goniodiol (4) Kết quả thử hoạt

tính gây độc tế bào in vitro đối với các dòng tế bào ung thư ở người như ung thư

tiền liệt tuyến DU 145, PC-3, ung thư vú MCF-7, ung thư phổi A-549, ung thư biểu

mô KB cho thấy goniodilactone (43) có hoạt tính đáng kể với giá trị IC50 nằm trong

khoảng 1,29-4,56 g/mL, hợp chất này có hoạt tính mạnh hơn isoaltholactone (17)

là thành phần cấu tạo nên phân tử (43) đối với tất cả các dòng tế bào trên [44]

1.3.1.8 Sinh tổng hợp styryl-lactone

Theo các tác giả X.P Fang (1993) và T.K.M Shing (1995), con đường sinh tổng hợp các styryl-lactone được đề nghị là bắt nguồn từ quá trình sinh tổng hợp acid shikimic, qua phenylalanine rồi tạo thành acid cinnamic (đơn vị cấu trúc C6-

hydroxyl hóa, vòng hóa khác nhau tạo thành các styryl-lactone với cấu trúc và lập thể phong phú, đa dạng [10], [45]

Hình 1.4 Con đường sinh tổng hợp các khung styryl-lactone cơ bản

1.3.2 Acetogenin từ chi Goniothalamus

Acetogenin là nhóm các hợp chất tự nhiên với cấu trúc hóa học độc đáo, chỉ

được tìm thấy trong một số loài thuộc họ Na, trong đó có chi Goniothalamus Về mặt hóa học, các acetogenin được coi là các dẫn xuất của acid béo với bộ khung cacbon C 35 hoặc C 37 được tạo thành do sự kết hợp của mạch acid béo C 32 hoặc C 34 với đơn vị propan-2-ol hình thành vòng -lactone ở đầu mạch Bên cạnh đó trong

phân tử acetogenin còn có thể có thêm một số nhóm chức có oxi như hydroxyl, ketone, epoxide, tetrahydrofuran (THF), tetrahydropyran (THP) cùng với liên kết đôi, liên kết ba ở trong mạch [46]

Các acetogenin có nhiều hoạt tính sinh học đa dạng như hoạt tính chống ung thư, ức chế miễn dịch, trừ sâu, diệt sinh vật đơn bào, ức chế sự phát triển của côn trùng, diệt giun sán, diệt vi khuẩn, vi nấm, vi-rút, chống sốt rét Gần đây các nghiên

cứu chỉ ra cho thấy các acetogenin còn có khả năng ức chế chọn lọc sự phát triển của tế bào ung thư Cơ chế hoạt động chính của các acetogenin là sự ức chế một cách có hiệu quả NADH là enzym thiết yếu của phức hợp I trong hệ thống chuyển electron điều khiển quá trình phosphoryl hóa-oxi hóa của ty thể [11],[46],[50] Các dạng cấu trúc đặc trưng của acetogenin như sau [46]:

- Các nhóm THF, THP với nhóm thế α-hydroxyl; trong đó có các dạng

mono-THF (I, II), bis-mono-THF liền kề (III, IV), bis-mono-THF không liền kề (V, VI), tri-mono-THF (VII), THP (VIII), mono-THF-THP liền kề (IX) (Hình 1.5.)

Hình 1.5 Một số dạng cấu trúc THF, THP của acetogenin

Về mặt lập thể, các vòng THF có thể ở dạng cis hoặc trans và các nhóm OH bên cạnh vòng THF có thể ở dạng erythro hoặc threo

- Dạng vòng epoxy có thể đơn vòng hoặc đa vòng (XI, XII, XIII) (Hình 1.6.):

Hình 1.6 Một số dạng cấu trúc vòng epoxy của acetogenin

- Các dạng cấu trúc -lactone với hai nhóm chính là -lactone-α,β-không no

(XIV-XVIII) và ketolactone (XIX, XX) (Hình 1.7.):

R=H, OH

O O

R

1 4

R=H, OH

HO

O O

1

HO

O O

CH2OH

1

O O

R

1 4

(XX)

Hình 1.7 Một số dạng cấu trúc vòng -lactone của acetogenin

Các acetogenin được phân lập chủ yếu từ các loài thuộc chi Annona của họ Na (Annonaceae) Đến nay mới chỉ có 6 loài thuộc chi Goniothalamus (G amuyon, G donnaiensis, G gardneri, G gigianteus, G sesquipedalis, G vietnamensis Ban) phân lập được acetogenin thuộc 4 nhóm cấu trúc cơ bản: mono-THF(THP), bis- THF, tri-THF và linear-acetogenin [46]

1.3.2.1 Mono-THF và mono-THP acetogenin

Mono-THF acetogenin đầu tiên được phân lập từ chi Goniothalamus là

annonacin (44) và goniothalamicin (45) Hai acetogenin này được nhóm các nhà

khoa học Mỹ là A Alkofahi và cộng sự phân lập từ vỏ cây G giganteus vào năm

1987 [47]

Annonacin (44) cũng được phân lập từ nhiều loài thuộc chi khác của họ Na

Kết quả thử hoạt tính sinh học cho thấy annonacin (44) có hoạt tính in vitro đối với

dòng tế bào ung thư bạch cầu 9PS, ung thư biểu mô mũi hầu 9KB, ung thư phổi

A-549 và ung thư đại tràng HT-29 với các giá trị ED50 lần lượt là 105; 103; 103; 3,0

g/mL Goniothalamicin (45) cũng có hoạt tính đối với dòng tế bào 9PS và 9KB nhưng kém hoạt động hơn annonacin (44) [47],[48]

Năm 1997, nhóm tác giả F Alali và cộng sự đã phân lập từ vỏ loài G

giganteus của Thái Lan annomontacin (46) và annomontacinone (47) [49]

Hai hợp chất này chỉ khác nhau về cấu trúc vòng -lactone đầu mạch, (46) ở dạng -lactone-α,β-không no và (47) ở dạng ketolactone tương ứng Kết quả thử

hoạt tính gây độc tế bào cho thấy cả hai hợp chất này đều có hoạt tính đối với các dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại tràng HT-29 (giá trị ED50 từ 2,3.1083,21 g/mL); trong đó hoạt tính của annomontacin (46) mạnh hơn annomontacinone (47) [49] Điều này phù hợp với nhiều acetogenin khác, dạng

-lactone-α,β-không no thường có hoạt tính mạnh hơn dạng ketolactone tương ứng

đối với nhiều dòng tế bào ung thư ở người Đặc biệt annomontacin (46) có hoạt tính

rất mạnh đối với các dòng tế bào MCF-7, A-549; mạnh hơn cả đối chứng adriamycin 2,4.106 lần đối với dòng tế bào ung thư vú MCF-7 [49]

Cũng từ loài G giganteus trên, năm 1998, nhóm tác giả F Alali và cộng sự đã

phân lập được 2 hợp chất THP-acetogenin pyranicin (48) và pyragonicin (49) [50]

Cả hai hợp chất THP-acetogenin (48) và (49) đều có hoạt tính đối với các

dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại tràng HT-29, ung thư thận A-498, ung thư tiền liệt tuyến PC-3 và ung thư tuyến tụy PACA-2 với giá trị ED50 1,3.1032,8 g/mL; trong đó hoạt tính của pyragonicin (49) kém hơn pyranicin (48) [50]

Ở Việt Nam đến nay mới chỉ có 2 loài thuộc chi Goniothalamus họ Na được nghiên cứu về thành phần hóa học; trong đó từ rễ của loài G vietnamesis (Bổ béo

đen) nhóm tác giả Nguyễn Mạnh Cường và cộng sự đã phân lập được 6 acetogenin mới (2003, 2006) [51],[52] Các acetogenin mới này ở dạng 3 cặp đồng phân

govietnin A, B (50), govietnin C và epi-govietnin C (51), cis-govietnin C và epi-cis-govietnin C (52) đều có khung cacbon C35 với cấu trúc mono-THF, trong đó

34-cặp đồng phân 51 và 52 có cấu trúc dạng -hydroxy--lactone-α,β-không no Kết

quả thử hoạt tính gây độc tế bào cho thấy hỗn hợp 50 và (51, 52) có hoạt tính in

vitro đối với dòng tế bào ung thư phổi A-549 của người với giá trị ED50 lần lượt là 0,91 và 1,01 g/mL [51],[52]

O OH

32

trans threo

15 19

OH

23 24

35

trans threo threo

15 20

35

cis threo threo

15 20

(52)

OH

7

OH

1.3.2.2 Bis-THF acetogenin

Từ vỏ cây G giganteus của Thái Lan, nhóm các tác giả J.L McLaughlin và

cộng sự (1997) đã phân lập được (2,4-cis và 2,4-trans)-gigantecinone (53) và gigantecin (54) là các bis-THF-aetogenin với hai vòng THF không kề nhau đều có

hoạt tính đối với các dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư vú MCF-7, ung thư đại tràng HT-29, ung thư thận A-498, ung thư tiền liệt tuyến PC-3 và ung thư tuyến tụy PACA-2 với giá trị ED50 nằm trong khoảng 1,08.1031,0 g/mL, trong đó chất

54 có hoạt tính mạnh hơn 53 [53]

1.3.2.3 Tri-THF acetogenin

Đây là loại acetogenin ít gặp trong tự nhiên Đến nay mới chỉ có một

tri-THF-acetogenin được phân lập từ họ Na là goniocin (55) Hợp chất này được nhóm tác

giả Z.-M Gu và cộng sự phân lập từ loài G giganteus vào năm 1994 [54]

Tri-THF-acetogenin này có cấu hình tương đối của vòng THF và nhóm OH kề bên là

trans-threo-trans-threo-trans-threo

1.3.2.4 Linear-acetogenin

Năm 1997, từ rễ của cây G gardneri của Trung Quốc, nhóm tác giả Z Jiang

và cộng sự đã phân lập được hai linear-acetogenin gardnerilin A (56) và gardnerilin

B (57) [55] Hai chất này đều thuộc nhóm C35 linear-acetogenin có các cặp

vicinal-OH

O O

OH

1 2 4

16 19 20 32

threo threo

O O

OH

1 2 4

35

(57)

10 17

Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào cho thấy gardnerilin A (56) có hoạt tính

đối với các dòng tế bào ung thư ở người như ung thư biểu mô KB, ung thư đại tràng HTC-8, ung thư gan Bel-7402 với giá trị IC50 tương ứng >10, >10 và 3,6g/mL;

trong khi đó gardnerilin B (57) có giá trị IC50 đối với các dòng tế bào KB, HTC-8, Bel-7402 lần lượt là 5,5; 4,2; 8,5g/mL [55] Điều này cho thấy việc tăng thêm

nhóm OH trong hợp chất (56) đã làm giảm đáng kể hoạt tính gây độc tế bào của

chất này Như vậy, mức độ phân cực của mạch dài trong phân tử acetogenin có vai trò quan trọng đối với hoạt tính sinh học của nhóm chất này

Năm 1999, từ cây G gardneri của Sri Lanka, nhóm tác giả P.G Waterman và

cộng sự đã phân lập được một linear-acetogenin mới là goniothalamusin (58) có

khung cacbon C25 với nhóm cấu trúc -hydroxymethyl--lactone bão hòa có cấu

hình trans, một liên kết ba trong mạch dài và nhóm vinyl cuối mạch [56] Đây là

acetogenin với khung cacbon bất thường so với các acetogenin hầu hết đều có khung cacbon C35 hoặc C37