Nghiên cứu diễn biến lâm sàng và đáp ứng miễn dịch của lợn rừng nuôi được tiêm vacxin tai xanh vô hoạt nhũ kép chủng prrs hua 01

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ HƯƠNG NGHIÊN CỨU DIỄN BIẾN LÂM SÀNG VÀ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA LỢN RỪNG NUÔI ĐƯỢC TIÊM VACXIN TAI XANH VÔ HOẠT NHŨ KÉP CHỦNG PRRS HUA 01 Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.64.01.01 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Hữu Nam NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực, tơi nghiên cứu, có giúp đỡ tập thể đồng nghiệp chưa công bố nghiên cứu khoa học khác Tôi xin cam đoan thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Mọi giúp đỡ cảm ơn Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Hương i LỜI CẢM ƠN Cho đến tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Nhân dịp xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành, sâu sắc tới thầy, cô giáo Trước tiên, xin trân trọng cảm ơn PGS.TS Nguyễn Hữu Nam tận tình hướng dẫn, giúp đỡ trình nghiên cứu hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô môn bệnh lý, Khoa Thú y, cám ơn cán phịng Thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ sinh học Thú y, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tôi dành biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè, người ln động viên, khích lệ, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Hương ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract xi Phần Mở đầu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Tình hình nghiên cứu hội chứng rối loạn sinh sản hơ hấp lợn 2.2.1 Tình hình nghiên cứu Hội chứng rối loạn hơ hấp sinh sản lợn giới 2.1.2 Tình hình nghiên cứu Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn Việt Nam 2.2 Hiểu biết PRRS 10 2.2.1 Virus PRRS 10 2.3 Đặc điểm bệnh lý PRRS 16 2.3.1 Loài vật mắc bệnh, lứa tuổi mắc bệnh 16 2.3.2 Chất chứa mầm bệnh trình truyền lây 16 2.3.3 Cơ chế sinh bệnh 17 2.3.4 Triệu chứng bệnh tích 18 2.3.5 Chẩn đoán phòng trị bệnh 19 2.4 Vacxin vacxin phòng PRRS 21 2.4.1 Khái niệm vacxin 21 2.4.2 Đặc tính vacxin 21 2.4.3 Thành phần vacxin 21 iii 2.4.4 Phân loại vacxin 22 2.4.5 Yêu cầu vacxin 24 2.4.6 Vacxin phòng PRRS 24 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 26 3.1 Vật liệu nghiên cứu 26 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 26 3.3 Nội dung nghiên cứu 26 3.4 Nguyên liệu, dụng cụ, hóa chất 26 3.4.1 Vacxin 26 3.4.2 Động vật thí nghiệm: 26 3.4.3 Trang thiết bị, dụng cụ, hóa chất 26 3.5 Phương pháp nghiên cứu 27 3.5.1 Lựa chọn lợn thí nghiệm 27 3.5.2 Bố trí thí nghiệm 27 3.5.3 Phương pháp tách lấy huyết 28 3.5.4 Phương pháp ELISA 28 3.5.5 Phương pháp quan sát, mô tả 29 3.5.6 Phương pháp đo tiêu huyết học 29 3.5.7 Phương pháp tiến hành phản ứng RT-PCR 29 3.5.8 Phương pháp điện di kiểm tra sản phẩm PCR 30 3.5.9 Phương pháp thu thập số liệu, xử lý số liệu 31 Phần Kết thảo luận 32 4.1 Kết theo dõi tiêu lâm sàng lợn trước sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt nh ũ kép chủng HUA 01 32 4.1.1 Kết xét nghiệm kháng thể PRRSV lợn trước tiêm vacxin PRRS vô hoạt nhũ kép chủng HUA 01 32 4.1.2 Thân nhiệt lợn trước sau tiêm vacin PRRS vô hoạt 33 4.1.3 Tần số hô hấp lợn trước sau tiêm Vacxin 36 4.1.4 Tần số tim mạch lợn trước sau tiêm vacxin vô hoạt PRRS 38 4.1.5 Triệu chứng lâm sàng lợn trước sau tiêm vacxin 41 4.2 Một số tiêu huyết học lợn tiêm vacxin tai xanh vô hoạt nhũ kép chủng PRRS HUA 01 42 iv 4.2.1 Kết khảo sát tiêu hồng cầu lợn tiêm vacxin vô hoạt PRRS 43 4.2.2 Kết khảo sát tiêu bạch cầu tiêm vacxin vô hoạt PRRS 44 4.3 Kết xét nghiệm kháng thể lợn sau tiêm Vacxin vô hoạt nhũ kép chủng PRRS HUA 01 46 Phần Kết luận đề nghị 49 5.1 Kết luận 49 5.2 Đề nghị 49 Tài liệu tham khảo 51 Phụ lục 61 v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt cs Cộng DPI Day Post Inoculated ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay H.E Hematoxylin & Eosin IPMA Immuno – Peroxidase Monolayer Assay NXB Nhà xuất OIE Organisatio n of International Epidemiology (Tổ chức Dịch tễ học Thế giới) PBS Phosphate Buffer Saline PCR Polymerase Chain Reaction PRRS Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome PRRSV Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus RNA Ribonucleic Acid RT – PCR Reverse Transcriptase – Polymerase Chain Reaction vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Một số vi khuẩn kế phát thường gặp thể lợn mắc PRRS 11 Bảng 2.1 Protein cấu trúc PRRSV 14 Bảng 2.2 Sức đề kháng PRRSV 15 Bảng 3.1 Đặc tính lợn thí nghiệm 27 Bảng 3.3 Thành phần phản ứng PCR 30 Bảng 3.4 Nhiệt độ thời gian giai đoạn chu kỳ nhiệt 30 Bảng 4.1 Kết xét nghiệm kháng thể kháng PRRSV phương pháp ELISA 32 Bảng 4.2 Kết xét nghiệm có mặt virus PRRS số virus khác phương pháp RT – PCR 33 Bảng 4.3 Thân nhiệt lợn trước sau tiêm vacxin 34 Bảng 4.4 Tần số hô hấp lợn trước sau tiêm vacxin (lần/phút) 37 Bảng 4.5 Biến động tần số nhịp tim lợn trước sau tiêm vacxin (lần/phút) 39 Bảng 4.6 Triệu chứng lâm sàng lợn sau tiêm vacxin 41 Bảng 4.7 Kết khảo sát số tiêu hệ hồng cầu lợn tiêm vacxin PRRS vô hoạt 43 Bảng 4.8 Kết khảo sát tiêu bạch cầu lợn tiêm vacxin vô hoạt nhũ kép chủng PRRS HUA 01 45 Bảng 4.9 Kết xét nghiệm kháng thể sau tiêm vacxin vô hoạt kháng PRRS phương pháp ELISA 46 vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1: Bản đồ tình hình dịch bệnh PRRS độc lực cao châu Á từ năm 2006 đến năm 2010 Hình 2.2: Tình hình dịch bệnh PRRS Việt Nam năm 2007 Hình 2.3 Hình thái virus PRRS 13 Hình 2.4 Cấu trúc gen PRRSV 13 Hình 2.5 Virus PRRS xâm nhập phá hủy tế bào đại thực bào 17 Hình 4.1 Biến động nhiệt độ lợn trước sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt nhũ kép chủng HUA 01 thử nghiệm 35 Hình 4.2 Biến động tần số hơ hấp lợn trước sau tiêm vacxin PRRS Vô hoạt chủng HUA 01 thử nghiệm (lần/phút) 38 Hình 4.3 Biểu thị tần số nhịp tim lợn trước sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt 40 Hình 4.4 Biểu thị hàm lượng kháng thể lợn sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt 47 viii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Họ tên học viên: Nguyễn Thị Hương Tên đề tài: “Nghiên cứu tiêu lâm sàng đáp ứng miễn dịch lợn rừng nuôi tiêm vacxin tai xanh vô hoạt nhũ kép chủng PRRS HUA 01” Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.64.01.01 Tên sở đào tạo: Học viện Nơng nghiệp Việt Nam NỘI DUNG I Mục đích đối tượng nghiên cứu Đánh giá hiệu vacxin PRRS vô hoạt nhũ kép chế từ chủng virus Hua 01 Lợn rừng tuần tuổi không chứa kháng thể kháng PRRSV tiêm vacxin vô hoạt nhũ kép chế từ chủng virus PRRS HUA 01 Theo dõi triệu chứng lâm sàng, tiêu huyết học, hàm lượng kháng thể lợn trước sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt nhũ kép chủng HUA 01 II Các phương pháp nghiên cứu sử dụng - Phương pháp tách lấy huyết ; - Phương pháp ELISA ; - Phương pháp quan sát, mô tả ; - Phương pháp đo tiêu huyết học ; - Phương pháp RT – PCR ; - Phương pháp thu thập số liệu, xử lư số liệu III Kết thu kết luận đề tài Hoàn thành đề tài chúng tơi có số kết luận sau: Thân nhiệt lợn tiêm vacxin có tăng nhẹ khơng đáng kể Tần số hô hấp tần số tim lợn sau tiêm vacxin biến đổi theo chiều hướng tăng dần nhiêt độ thể lợn tăng Đến thân nhiệt lợn giảm tần số hô hấp tần số tim dần trở lại bình thường Cụ thể, tần số hơ hấp tăng từ 22 lần/phút – 32 lần/phút Tần số tim tăng từ 89 nhịp/phút – 113 nhịp/phút Số lượng hồng cầu tăng từ 5,82 lên đến 6,78 triệu/µl Hàm lượng Hb tăng103,80 (g/l) lên 125,12 (g/l) Có tăng số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu: bạch cầu đa nhân trung tính tế bào lympho tăng cao so với lợn đối chứng bạch cầu toan, kiềm bạch cầu đơn nhân lớn có thay đổi khơng nhiều ix Qua bảng 4.6 ta thấy có 05 lợn lơ thí nghiệm có biểu sốt nhẹ, chiếm 100% thí nghiệm, 02 lợn giảm ăn Sau tiêm vacxin lợn thường có biểu tăng nhiệt độ thể, lợn lơ thí nghiệm có biểu sốt nhẹ Khi thân nhiệt tăng, thể vật tìm cách để ổn định lại trạng thái sinh lý bình thường Lơ đối chứng khơng có lợn có biểu sốt Lợn lơ đối chứng khơng có biểu gì, ăn uống bình thường 4.2 MỘT SỐ CHỈ TIÊU HUYẾT HỌC CỦA LỢN ĐƯỢC TIÊM VACXIN TAI XANH VÔ HOẠT NHŨ KÉP CHỦNG PRRS HUA 01 Trong thể, máu cung cấp chất dinh dưỡng, dưỡng khí cho tổ chức tế bào, đưa chất thải đến khí quan tiết, mối liên hệ bên tổ chức khí quan Máu hệ bạch huyết dịch thể khác thể môi trường nội môi quan trọng hệ thống sống Một hệ thống sống tồn phát triển tiêu sinh lý, sinh hóa nội mơi ln ổn định cân Trong đời sống hàng ngày trình thực nhờ hàng loạt hoạt động điều hòa tinh vi phức tạp thể, qua thể ln thích nghi với tác động biến đổi ngoại cảnh Khi cân sinh lý, sinh hóa nội mơi bị phá vỡ tồn hệ thống sống thể mô bào, phản ứng sinh hóa bị rối loạn thể rơi vào trạng thái bệnh lý Máu cịn có chức bảo vệ thể như: Thực bào, hình thành kháng thể, điều tiết nước, giữ áp lực thể keo…Như vậy, máu dung môi sống tổ chức tế bào thể, tạo hoàn cảnh ổn định cho tế bào hoạt động Trong trạng thái sinh lý bình thường, máu thể động vật có tiêu ổn định, tiêu thay đổi phạm vi định Lúc thể bị bệnh tính chất, thành phần máu có thay đổi tương ứng đặc hiệu mà dựa vào để chẩn đốn bệnh Máu gương phản chiếu tình trạng sức khỏe gia súc nghiên cứu biến đổi máu, tiêu chí quan trọng khơng thể thiếu q trình chẩn đốn bệnh Chúng tơi tiến hành khảo sát biến động số lượng bạch cầu hồng cầu lợn trước sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt nhũ kép chủng HUA 01 Trong số nhiều tiêu sinh lý máu tiến hành kiểm tra số tiêu quan trọng, bao gồm: số lượng hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu, hàm lượng huyết sắc tố, tỷ khối huyết cầu, thể tích trung bình hồng cầu, lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu, nồng độ huyết sắc tố trung bình hồng cầu… 42 Để kiểm tra tiêu huyết học tiến hành lấy máu vào ngày thứ sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt chủng HUA 01 vị trí vịnh tĩnh mạch cổ từ – ml máu cho vào ống chống đông lắc nhẹ, sau áp dụng kỹ thuật sử dụng máy đếm hồng cầu tự động để xác định tiêu huyết học 4.2.1 Kết khảo sát tiêu hồng cầu lợn tiêm vacxin vô hoạt PRRS Hồng cầu có chức vận chuyển O2 tới tổ chức mang khí CO2 từ tổ chức phổi – chức huyết sắc tố đảm nhận Ở gia súc hồng cầu tế bào biệt hóa tới mức độ cao, khơng cịn nhân, bào quan có hình dáng đặc biệt hình đĩa trịn lõm hai mặt Cấu tạo đặc biệt giúp cho phân tử huyết sắc tố dù chỗ hồng cầu có khoảng cách gần màng hồng cầu tiếp xúc dễ dàng với O2 Trong trạng thái sinh lý bình thường, số lượng hồng cầu đơn vị thể tích máu tích số triệu /mm3 số Tetra/L máu phải luôn ổn định Bất kỳ thay đổi số lượng hồng cầu dẫn đến biến đổi toàn thân đe dọa trực tiếp đến tính mạng bệnh Số lượng hồng cầu loài khác khác nhau, loài số lượng hồng cầu thay đổi theo giống, tuổi, giới tính, chế độ dinh dưỡng… Khi gia súc bị bệnh có chất lạ vào thể số lượng hồng cầu tăng giảm Bảng 4.7 Kết khảo sát số tiêu hệ hồng cầu lợn tiêm vacxin PRRS vô hoạt STT Lợn tiêm vacxin vô hoạt PRRS (n = 15) Chỉ tiêu X  mx Số lượng hồng cầu (triệu/µl) Đối chứng (n = 15) P X  mx 6,78 ± 0,25 5,82 ± 0,15 < 0,05 Hàm lượng Hb (g/dl) 125,12 ± 2,20 103,80 ± 2,13 > 0,05 Tỷ khối huyết cầu (%) 33,76 ± 0,60 31,78 ± 0,54 < 0,05 Thể tích bình qn hồng cầu (fl) MCV 59,68 ± 1,06 57,49 ± 1,18 > 0,05 Nồng độ huyết sắc tố bình quân (%) MCH 18,72± 0,45 18,01 ± 0,37 > 0,05 Qua Bảng 4.7 cho thấy: Hàm lượng Hb (g/dl) số gam hemoglobin (Hb) có lít máu Hàm lượng Hb lợn tiêm vacxin vô hoạt PRRS cao lợn đối chứng 1,2 lần Thể tích bình qn hồng cầu (fl) MCV phụ thuộc nhiều tình trạng 43 hệ tạo máu đặc biệt áp xuất thẩm thấu huyết tương Khi nghiên cứu tiêu chúng tơi thấy, thể tích bình qn hồng cầu MCV lợn không tiêm vacxin vô hoạt PRRS 57,49 ± 1,18 (fl) lợn tiêm vacxin tăng lên 59,68 ± 1,06 (fl) Số lượng hồng cầu lợn tiêm phòng vacxin tăng từ 5,82 ± 0,15 (triệu/µl) lên đến 6,78 ± 0,25 (triệu/µl) Nồng độ huyết sắc tố tế bào hồng cầu số picrogam Hb tế bào có tế bào hồng cầu Chỉ tiêu phản ánh rõ khả vận chuyển khí O2 CO2 tế bào hồng cầu Ngoài cịn thơng tin quan trọng nhận định dạng thiếu máu Nếu nồng độ huyết sắc tố bình qn MCH khơng thay đổi mà lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu giảm thường thiếu máu nhược sắc Nghiên cứu lượng huyết sắc tố bình quân lợn thí nghiệm lợn đối chứng thấy, tiêu lợn đối chứng 18,01 ± 0,37 pg, tiêm vacxin vô hoạt PRRS tiêu tăng nhẹ lên 18,72 ± 0,45 pg 4.2.2 Kết khảo sát tiêu bạch cầu tiêm vacxin vô hoạt PRRS Bạch cầu tế bào hồn chỉnh, nghĩa có nhân Phụ thuộc vào trạng thái sinh lý, bệnh lý thể, phản ánh khả bảo vệ thể hoạt động thực bào tham gia q trình đáp ứng miễn dịch Mỗi lồi có số lượng bạch cầu định lại dễ bị thay đổi dao động phụ thuộc vào trạng thái sinh lý, bệnh lý thể, phản ánh khả bảo vệ thể hoạt động thực bào tham gia trình đáp ứng miễn dịch bảo vệ thể Trong trạng thái sinh lý bình thường số lượng bạch cầu nhiều so với số lượng hồng cầu song tiêu phải ổn định Công thức bạch cầu tỷ lệ phần trăm theo số lượng loại bạch cầu có máu Trong trạng thái sinh lý bình thường, cơng thức bạch cầu loại gia súc ổn định Tuy nhiên, số trường hợp bệnh lý số lượng loại bạch cầu bị thay đổi làm cho cơng thức bạch cầu bị thay đổi theo Do vậy, việc chẩn đoán, việc phân loại bạch cầu tiêu quan trọng Bạch cầu đa nhân trung tính (neutrophils) loại tế bào chiếm số lượng nhiều loại bạch cầu Tế bào có kích thước tế bào khoảng từ1015 µm Nhân có nhiều dạng, từ dạng hình củ ấu đến dạng phân thùy hình gậy 44 Bên bào tương có hạt bắt màu thuốc nhuộm toan tính eosin thuốc nhuộm kiềm tính (xanhmethylen) nên chúng gọi bạch cầu đa nhân trung tính Đây loại bạch cầu có vai trị quan trọng thực bào bảo vệ thể nên chúng thường tăng trường hợp thể bị viêm nhiễm nghiêm trọng Đặc biệt trường hợp nhiễm khuẩn cấp tính như: viêm phổi, lao tiến triển Trái lại, số lượng bạch cầu đa nhân trung tính thường giảm trường hợp thể bị nhiễm vius nhiễm độc thủy ngân (Nguyễn Quang Mai, 2004) Kết khảo sát tiêu bạch cầu lợn tiêm vacxin vô hoạt PRRS chúng tơi trình bày Bảng 4.8 Bảng 4.8 Kết khảo sát tiêu bạch cầu lợn tiêm vacxin vô hoạt nhũ kép chủng PRRS HUA 01 Chỉ tiêu Lợn tiêm vacxin vô hoạt PRRS (n = 15) X  mx Số lượng Bạch cầu (nghìn/µl) Cơng thức bạch cầu Bạch cầu đa nhân trung tính (%) Bạch cầu toan (%) Bạch cầu kiềm (%) Bạch cầu đơn nhân lớn (%) Tế bào Lympho (%) Đối chứng (n = 15) X  mx P 8,74 ± 0,12 6,82 ± 0,43 < 0,05 58,12 ±1,21 5,26 ± 0,13 0,55 ± 0,21 6,25 ± 0,58 29,82 ± 1,24 54,61 ± 1,03 4,43 ± 0,19 0,48 ± 0,28 5,86 ± 0,57 34,62 ± 1,22 > 0,05 < 0,05 < 0,05 > 0,05 < 0,05 Qua Bảng 4.8 thấy: Số lượng bạch cầu lợn đối chứng trung bình 6,82 ± 0,43 nghìn/µl, lợn tiêm vacxin vơ hoạt PRRS tăng tới 8,74 ± 0,12nghìn/µl, cao 1,92 nghìn/µm Số lượng bạch cầu cho thấy có khác biệt mặt thống kê lợn đối chứng lợn thí nghiệm Điều giải thích lượng vacxin đưa vào thể vật làm vật đáp trả lại kích thích sinh lượng bạch cầu định với chế miễn dịch thể bảo vệ thể khỏi tác động lạ từ môi trường Công thức bạch cầu có biến động đáng kể đặc biệt bạch cầu đa nhân trung tính tế bào Lympho Bạch cầu đa nhân trung tính tăng từ 54,61 ± 1,03 % lợn đối chứng lên đến 58,12 ±1,21% lợn thí nghiệm tiêm vacxin PRRS vơ hoạt nhũ kép Tế bào Lympho tăng xấp xỉ 5%, lợn đối chứng 34,62 ± 1,22% 45 Bạch cầu kiềm bạch cầu đơn nhân lớn có thay đổi nhẹ, khơng đáng kể tăng từ 0,48 lên 0,55% bạch cầu kiềm tăng từ 5,86% lên 6,25% bạch cầu đơn nhân lớn 4.3 KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM KHÁNG THỂ CỦA LỢN SAU KHI TIÊM VACXIN VÔ HOẠT NHŨ KÉP CHỦNG PRRS HUA 01 Sau tiêm vacxin vô hoạt PRRS cho lợn thí nghiệm chúng tơi tiến hành lấy máu để chắt lấy huyết xét nghiệm hàm lượng kháng thể có thể lợn thí nghiệm vào ngày 3, ngày 7, ngày 14, ngày 21, ngày 28 ngày 35 sau tiêm vacxin Kết biểu diễn bảng sau: Bảng 4.9 Kết xét nghiệm kháng thể sau tiêm vacxin vô hoạt kháng PRRS phương pháp ELISA Lợn TN1 TN2 TN3 TN4 TN5 TBTN ĐC1 ĐC2 ĐC3 ĐC4 ĐC5 TBĐC Sau ngày Sau ngày Sau 14 ngày Sau 21 ngày S/P KQ S/P KQ S/P KQ S/P 0,25 0,41 0,42 0,41 0,34 + + + -/+ 0,49 0,64 0,51 0,42 0,55 + + + + + 0,94 1,01 0,61 0,55 0,58 + + + + + 1,05 1,29 1,20 1,14 1,08 - 0.52 0,25 0,29 0,14 0,27 0,16 - 0.74 0,27 0,18 0,28 0,27 0,18 - 1,15 0,23 0,26 0,23 0,28 0,29 0.37 0,13 0,26 0,14 0,27 0,17 0.19 0.22 0.24 KQ Sau 28 ngày Sau 35 ngày S/P KQ S/P KQ + + + + + 1,08 1,18 1,02 1,04 1,09 + + + + + 0,69 0,87 0,84 0,77 0,88 + + + + + - 1,08 0,23 0,27 0,25 0,23 0,18 - 0.81 0,26 0,26 0,28 0,19 0,26 - 0.26 0.23 0.13 Ghi chú: + Dương tính; - Âm tính; -/+ Nghi ngờ Nhận xét: Qua bảng số liệu ta thấy, đối chứng có tỷ số S/P < 0,4 chứng tỏ lợn đối chứng khơng có kháng thể thể Mặt khác, thí nghiệm có số S/P cao đối chứng > 0,4 Từ chứng tỏ vacxin vơ hoạt PRRS tiêm vào lợn thí nghiệm sinh kháng thể giúp thể chống lại PRRSV PRRSV có hội xâm nhập ngày sau tiêm vacxin có khác hàm lượng kháng thể lợn thí nghiệm lợn đối chứng không đáng kể Từ ngày thứ đến ngày thứ 35 sau tiêm vacxin có thay đổi 46 lợn thí nghiệm lợn đối chứng Cụ thể hàm lượng kháng thể lợn thí nghiệm tăng lên so với hàm lượng kháng thể lợn đối chứng Trong số lợn tiêm vacxin TN2 có tỷ số S/P cao nhất, sau 21 ngày 1,29; chứng tỏ lợn TN2 sinh lượng kháng thể nhiều so với khác khả mắc bệnh PRRS thấp Từ chứng tỏ vacxin vô hoạt nhũ kép PRRS chủng HUA 01, tiêm vào lợn thí nghiệm sinh kháng thể giúp thể chống lại mầm bệnh xâm nhập Điều khẳng định vacxin có tác dụng kích thích sinh kháng thể tính đến thời điểm 35 ngày sau tiêm Vezina cs (1996), Yoon cs (1995), nghiên cứu trình đáp ứng miễn dịch lợn thể lợn nhiễm PRRSV Các tác giả khẳng định kháng thể IgM xuất vào ngày thứ ngày thứ 14 IgG xuất sau nhiễm PRRSV Kháng thể trung hoà xuất vào 4- tuần sau nhiễm PRRSV Kết phù hợp với kết nghiên cứu tác giả Kết hàm lượng kháng thể lợn sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt nhũ kép thể đồ thị 4.4 S/P 1.4 1.2 0.8 TBTN 0.6 TBĐC 0.4 0.2 14 21 28 35 Hình 4.4 Biểu thị hàm lượng kháng thể lợn sau tiêm vacxin PRRS vô hoạt Dựa vào hình 4.4 ta thấy: Sau ngày lợn lơ thí nghiệm sinh kháng thể Hàm lượng kháng thể lợn lơ thí nghiệm tăng lên theo ngày đợt thí nghiệm đạt giá 47 trị dương tính (tức ≥ 0,4) Lợn lô đối chứng, hàm lượng kháng thể không thay đổi suốt q trình theo dõi, ln mức bảo hộ (tức