Duoc lieu chua saponin

B5_N3_TN5_ĐHD13C TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG BỘ MÔN DƯỢC LIỆU BÁO CÁO THỰC HÀNH BÀI DƯỢC LIỆU CHỨA GLYCOSID TIM (LÁ TRÚC ĐÀO) GVHD: Ths ĐỖ VĂN MÃI LỚP: ĐẠI HỌC DƯỢC 13C NHÓM - TIỂU NHÓM SINH VIÊN THỰC HIỆN MSSV Cần Thơ, 2020 BÀI 5: DƯỢC LIỆU CHỨA GLYCOSID TIM B5_N3_TN5_ĐHD13C (LÁ TRÚC ĐÀO) I CƠ SỞ LÝ THUYẾT Glycosid tim nhóm hợp chất có cấu tạo đặt trưng có tác dụng đặc hiệu im theo quy tắc 3R Potair Cấu tao chung glucosid tim gồm phần: - Phần đường, đường gặp glycosid tim đường hexose pentose thông thường (như glucose, rhamnon ) hay đường desoxy thường gặp glycosid tim (đường 2-desoxy, 2,6-desoxy hexose), -Phần glycosid tim có phần: • Khung hydrocarbon có câu trúc steroid (nhận androstan) • Vịng lacton hay cạnh gân vào vị trí C 17 (hướng ) khung Các phản ứng định tính glycosid tim chủ yếu thực phần đường 2-desoxy vòng lacton cạnh -Phản ứng với phần đường 2-desoxy nhân steroid tiến hành môi trường acid -Phản ứng với vòng lacton cạnh thường thực môi trường kiềm Thuốc thử cho phản ứng thường dẫn chất nitro thơm Các glycosid tan cồn, nước nóng, tan dung mơi phân cực, tính tan dạng aglycon ngược với tính tan dạng glycosid Trong định tính, chiết glycosid tim phương pháp sau: B5_N3_TN5_ĐHD13C - Chiết cồn thấp độ 25% ngâm qua đêm - Chiết cồn cao độ, thu hồi dung mơi, hồ tan cao cồn cồn thấp độ Các tạp chất ảnh hưởng tới định tính thường loại dung dịch chì acetat II NỘI DUNG THỰC HÀNH - Nguyên vật liệu thí nghiệm a Dung mơi, hóa chất thuốc thử: Cồn 25%, cồn 96% DCM Dung dịch chì acetat 30% Dung dich natri sulfat 15% H2SO4 đậm đặc Anhydrid acetic Dung dịch NaOH 10% cồn Thuốc thử Xanthydrol Thuốc thử Keller-Kiliani Thuốc thử Raymond-Marthoud Thuốc thử Kedde Thuốc thử Legal Thuốc thử Baljet b Dược liệu: Trúc đào (Folium Nerii) trúc đào (Nerium olleander L.) B5_N3_TN5_ĐHD13C Chiết suất glycosid tim từ trúc đào Bộ môn chuẩn bị sẵn dịch chiết từ 5g bột Trúc đào chiết ethanol 25% Lấy 30ml dịch chiết trúc đào vào cốc 1, thêm 10ml dung dịch chì acetat 30% khuấy kỹ chiều, để lắng 10-15 phút lọc qua giấy lọc cho vào cốc khoảng 20ml giọt chì acetat khơng tủa B5_N3_TN5_ĐHD13C Kiểm tra việc loại tạp cách nhỏ thêm vào dịch lọc cốc 2, giọt dd chì acetat, có xuất tủa phải cho thêm dung dịch chì acetat vào dịch lọc lọc lại Loại chì acetat thừa cách cho 10ml dd natri sulfat 15% vào cốc 2, khuấy kỹ để yên 3-5 phút lọc qua vào cốc khoảng 15ml Thêm 10ml Na2SO4 15% khuấy kỹ Lọc qua B5_N3_TN5_ĐHD13C Kiểm tra lại cách nhỏ giọt natri sulfat 15% vào dịch lọc cốc 3, có xuất tủa phải cho thêm dung dịch natri sulfat 15% vào dịch lọc lọc lại Thêm 10ml 15% khuấy kỹ Na2SO4 Thêm giọt Na2SO4 15%  không tủa Cho 15ml dịch lọc cốc vào bình lắng gạn, lắc với dung dịch CF lần, lần 10ml Sau để yên, lọc lấy dịch lớp vào erlen khô bọc lại màng bọc thực phẩm Để yên B5_N3_TN5_ĐHD13C Lắc với CF lần Làm khan dịch lọc Na2SO4 khan, cho muỗng Na2SO4 khan vào dịch lọc nghiên nhẹ thấy có vài hạt muối rời rạt dịch lọc cịn khơng thấy tiếp tục cho thêm từ từ muối đén B5_N3_TN5_ĐHD13C Chia dịch lọc làm khan vào ống nghiệm (đánh số 1-2-3-4-56) Đem ống nghiệm (1-2-3-4) đun cách thủy cắn khô 3 Các phản ứng định tính glycosid tim a Phản ứng Liebermann – Burchard Cho 1ml alhydrid acetic vào ống nghiệm có chứa sẵn 1ml dd glycosid tim CHCl 3, lắc Để ống nghiệm nghiên vào giá, cho nhẹ vào thành ống nghiệm khoảng 1ml acid sulfuric đậm đặc, để yên ( không lắc ống) B5_N3_TN5_ĐHD13C Mô tả: lớp thuốc thử xuất vịng ngăn cách, sát vịng có màu hồng tím, phía vịng có màu xanh tới chàm Nhận xét: phản ứng dương tính Kết luận: Dịch chiết có khung steroid b Phản ứng Baljet B5_N3_TN5_ĐHD13C Cho 1ml thuốc thử Baljet ( 10 giọt Baljet + 10 giọt Baljet 2) vào ống nghiệm có chứa glycoside tim, lắc ống 1’ làm ống chứng chứa thuốc thử Baljet Mô tả: dd ống xuất màu đỏ cam đậm so với ống chứng 1’ Nhận xét: phản ứng dương tính Kết luận: dịch chiết có vịng lacton c Phản ứng Legal B5_N3_TN5_ĐHD13C Cho vào ống có chứa cắn glycoside tim ống chứng 2’ lần lượt: giọt cồn 96% để hòa tan cắn, thêm vào giọt dd NaOH 10% cồn, thêm tiếp giọt dd natri nitroprussiat 0,5% Mô tả: dd ống xuất màu cam đậm ống chứng 2’ Nhận xét: Phản ứng dương tính Kết luận: Dịch chiết có vịng lacton d Phản ứng Keller – Kiliani B5_N3_TN5_ĐHD13C Cho vào ống nghiệm có chứa cắn glycosid timm 1ml thuốc thử Keller, khuấy kỹ cho tan Thêm nhẹ nhàng 1ml thuốc thử Kiliani dọc theo thành ống nghiệm, để yên ( không lắc ống) Mô tả: mặt ngăn cách lớp thuốc thử xuất vòng màu đỏ nâu có màu xanh khuếch tán dần lên lớp Nhận xét: phản ứng dương tính Kết luận: dịch chiết có nhóm đường B5_N3_TN5_ĐHD13C KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH DỊCH CHIẾT TRÚC ĐÀO Tổng hợp kết phản ứng định tính glycosid tim: TÊN PHẢN ỨNG Liebermann – Burchard Baljet Legal Keller – Kiliani NHẬN XÉT dương tính dương tính dương tính dương tính KẾT LUẬN Có khung steroid Có vịng lacton Có nhóm đường KẾT LUẬN: Dịch chiết trúc đào có chứa glycosid tim