Nghiên cứu quy trình thu nhận chế phẩm quercetin từ một số loài cây thuốc và đánh giá hoạt tính sinh học trên thực nghiệm

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Lê Huy Hồng NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH THU NHẬN CHẾ PHẨM QUERCETIN TỪ MỘT SỐ LOÀI CÂY THUỐC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội-2020 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Lê Huy Hồng NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH THU NHẬN CHẾ PHẨM QUERCETIN TỪ MỘT SỐ LOÀI CÂY THUỐC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Hóa sinh học Mã số: 9420101.16 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS Nguyễn Quang Huy PGS.TS Hồ Bá Do Hà Nội - 2020 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các kết thu đƣợc luận án hoàn toàn trung thực, đƣợc đồng tác giả cho phép sử dụng chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Tác giả luận án Lê Huy Hồng i LỜI CẢM ƠN Cơng trình nghiên cứu đƣợc thực hoàn thành Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN; Viện Công nghệ mới, Viện KH-CN quân Học viện Quân y Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Quang Huy, PGS.TS Hồ Bá Do ngƣời Thày hƣớng dẫn tận tình, chu đáo tạo điều kiện tốt cho thời gian thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học, Quý Thầy Cô Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành luận án Tơi xin trân trọng cảm ơn Thủ trƣởng Viện Công nghệ mới, Viện KH-CN quân sự; Thủ trƣởng Đồn 871, Bộ Quốc phịng; Ban Chủ nhiệm Bộ môn Quý Thầy Cô Học viện Quân y, Bộ Quốc phòng giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho thời gian làm luận án Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn gia đình đồng nghiệp giúp đỡ, cổ vũ, động viên tơi hồn thành luận án Tơi xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2020 Tác giả luận án Lê Huy Hoàng ii MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ MỞ ĐẦU Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 ĐẶC TÍNH HĨA LÝ VÀ SINH HỌC CỦA QUERCETIN 1.1.1 Đặc tính hóa lý quercetin 4 1.1.2 Đặc tính sinh học quercetin 1.2 ỨNG DỤNG TRỊ LIỆU CỦA QUERCETIN 1.2.1 Yếu tố ảnh hƣởng đến hoạt tính sinh học in vivo quercetin 1.2.2 Hoạt tính chống oxy hóa (anti-oxidant) quercetin 1.2.3 Hoạt tính tiền chất oxy hóa (pro-oxidant) quercetin 1.2.4 Cơ chế tác dụng in vivo quercetin 1.2.5 Định hƣớng ứng dụng trị liệu quercetin 1.3 CHẾ PHẨM CHIẾT XUẤT THU NHẬN TỪ CÂY THUỐC 1.3.1 Hợp chất có hoạt tính chống oxy hóa từ thuốc 1.3.2 Xu hƣớng thu nhận chế phẩm chiết xuất từ thuốc 1.3.3 Nguyên tắc thu nhận chế phẩm chiết xuất từ thuốc 1.3.4 Chiết xuất quercetin từ thuốc 10 10 11 13 14 17 23 24 25 26 29 1.4 XÁC ĐỊNH HỢP CHẤT ĐÍCH VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA CỦA CHẾ PHẨM CHIẾT XUẤT 1.4.1 Xác định hợp chất đích chế phẩm chiết xuất 1.4.2 Đánh giá đặc tính chống oxy hóa chế phẩm chiết xuất 40 2.1.1 Cây thuốc 2.1.2 Chủng vi sinh vật dòng tế bào ung thƣ 41 43 46 46 46 47 2.1.3 Động vật thí nghiệm 47 2.1.4 Hóa chất nghiên cứu 2.1.5 Dụng cụ, thiết bị đƣợc sử dụng nghiên cứu 47 48 49 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1 Nhóm phƣơng pháp tách chiết thu nhận hoạt chất 49 2.2.2 Nhóm phƣơng pháp định tính, định lƣợng hợp chất thứ cấp 55 iii 2.2.3 Nhóm phƣơng pháp đánh giá hoạt tính in vitro 60 2.2.4 Nhóm phƣơng pháp đánh giá hoạt tính in vivo 63 2.2.5 Sơ đồ diễn giải cách tiếp cận giải mục tiêu nghiên cứu 2.2.6 Xử lý số liệu 2.2.7 Địa điểm nghiên cứu luận án 69 72 72 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG QUERCETIN TRONG 10 LOÀI C Y THUỐC 73 73 3.1.1 Xác định nhóm hợp chất thứ cấp đặc trƣng thuốc 73 3.1.2 Thiết lập phƣơng pháp phân tích quercetin b ng HPLC 74 3.1.3 Khảo sát, lựa chọn điều kiện chiết xuất phù hợp để thu dịch chiết từ 10 loài thuốc cho phân tích HPLC 79 3.1.4 Hàm lƣợng quercetin dịch chiết thủy phân từ 10 loài thuốc xác định b ng phƣơng pháp HPLC 81 3.2 THIẾT LẬP ĐIỀU KIỆN THU NHẬN CAO CHIẾT CHỨA QUERCETIN TỪ 10 CÂY THUỐC 84 3.2.1 Hiệu thu phân rutin ổn định quercetin theo dung môi thời gian chiết xuất 85 3.2.2 Hiệu thu hồi quercetin từ nụ hoa hịe chuẩn theo thời gian, dung mơi kỹ thuật chiết xuất 3.2.3 Đánh giá hiệu suất thu nhận cao chiết quercetin 10 loài thuốc 3.2.4 Đánh giá hoạt tính chống oxy hóa in vitro cao chiết quercetin từ 10 loài thuốc 3.3 XÂY DỰNG QUY TRÌNH THU NHẬN CHẾ PHẨM QUERCETIN TỪ NỤ HOA HỊE VÀ LÁ SEN 3.3.1 Quy trình thu nhận chế phẩm quercetin dạng bán tinh khiết từ nụ hoa hòe, sen 3.3.2 Quy trình thu nhận chế phẩm quercetin tinh khiết từ rutin tách từ nụ hoa hòe 3.3.3 Áp dụng hai quy trình nụ hoa hịe sen để thu nhận chế phẩm quercetin cho nghiên cứu hoạt tính sinh học 88 90 92 94 95 96 97 3.4 ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CHẾ PHẨM QUERCETIN THU NHẬN TỪ NỤ HOA HO VÀ LÁ SEN TRÊN THỰC NGHIỆM 103 3.4.1 Đánh giá hoạt tính in vitro chế phẩm quercetin từ nụ hoa ho sen 103 iv 3.4.2 Đánh giá tác động chế phẩm quercetin từ nụ hoa ho lên hành vi, hoá sinh máu gan chuột nhắt trắng trạng thái bình 106 thƣờng 3.4.3 Đánh giá tác động chế phẩm quercetin từ nụ hoa ho lên ch số hoá sinh máu AST, ALT gan MDA, GSH chuột nhắt 113 trắng điều kiện bị sốc nhiệt 3.4.4 Đánh giá tác động chế phẩm quercetin từ nụ hoa ho ch số hoá sinh máu AST, ALT gan MDA, GSH chuột nhắt 114 trắng điều kiện sử dụng paracetamol 3.4.5 Đánh giá tác động chế phẩm quercetin từ nụ hoa ho trọng lƣợng hành vi chuột nhắt trắng mức liều lựa chọn 119 Chƣơng BÀN LUẬN 122 4.1 XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG QUERCETIN TRONG 10 LỒI CÂY THUỐC 122 4.2 XÂY DỰNG QUY TRÌNH THU NHẬN CHẾ PHẨM QUERCETIN TỪ NỤ HOA HÒE VÀ LÁ SEN 4.3 ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CHẾ PHẨM QUERCETIN THU NHẬN TỪ NỤ HOA HÒE VÀ LÁ SEN TRÊN THỰC NGHIỆM KẾT LUẬN KIẾN NGHỊ DANH MỤC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC v 126 129 140 141 142 143 DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ADME Absorption, Distribution, Metabolism, Excretion ALT Alanine transaminase AST Aspartate transaminase APAP Acetaminophen ATCC American Type Culture Collection Bilirubin TP Bilirubin toàn phần Bilirubin TT Bilirubin trực tiếp CYP P450 Cytochrom P450- Enzym Cyp P450 DAD Diode Array Detector DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl DMSO Dimethyl sulfoxit GSH Glutathione HCT116 Human Colorectal Cancer cell line HPLC High Performance Liquid Chromatography H1 Chế phẩm chiết xuất chứa quercetin bán tinh khiết từ nụ hoa hòe H2 Chế phẩm chiết xuất chứa quercetin tinh khiết từ rutin LOD Limit of Detection – Giới hạn phát LOQ Limit of Quantification – Giới hạn định lƣợng MDA Malondialdehyd ROS Reactive Oxygen Species RSD Relative Standard Deviation S Mẫu chiết xuất chứa quercetin, dạng bán tinh khiêt từ sen SKBM Sắc ký mỏng QC Mẫu quercetin chuẩn dùng cho nghiên cứu hóa lý QUE Mẫu quercetin chuẩn dùng cho nghiên cứu dƣợc lý WHO World Health Organization- Tổ chức Y tế giới vi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Định danh đặc tính hóa lý quercetin Bảng 1.2 Hàm lƣợng quercetin số thực vật phổ biến để làm thuốc thực phẩm 35 Bảng 2.1 Danh mục dụng cụ, thiết bị sử dụng nghiên cứu 48 Bảng 3.1 Kết định tính nhóm chất thứ cấp dịch chiết MeOH 72% 73 Bảng 3.2 Sự phù hợp điều kiện sắc ký đƣợc đánh giá theo hƣớng dẫn ICH Bảng 3.3 Định tính quercetin (Q) dịch chiết thu nhận b ng kĩ thuật đun hồi lƣu (theo dung môi thời gian) Bảng 3.4 Định tính quercetin (Q) dịch chiết thu nhận b ng kĩ thuật siêu âm (theo dung môi thời gian) Bảng 3.5 Các thông số sắc ký đ nh quercetin xác định b ng HPLC từ dịch chiết thủy phân nguyên liệu thuốc Bảng 3.6 Hàm lƣợng quercetin mẫu thuốc xác định b ng HPLC từ dịch chiết thủy phân Bảng 3.7 Hiệu suất thu nhận quercetin từ thuốc theo hai hệ dung môi khác 79 80 80 82 82 90 Bảng 3.8 Mức độ lặp lại (RSD) hàm lƣợng quercetin 91 Bảng 3.9 Một số đặc điểm vật lý chế phẩm quercetin thu nhận đƣợc 98 Bảng 3.10 Giải phổ hồng ngoại (IR) mẫu điều chế quercetin chuẩn 100 Bảng 3.11 Các chế phẩm quercetin đƣợc thu nhận từ nụ hoa hòe sen 102 Bảng 3.12 Hoạt tính kháng khuẩn mẫu dung mơi 103 Bảng 3.13 Hoạt tính chống oxy hóa mẫu nghiên cứu 103 Bảng 3.14 Hoạt tính kháng tế bào ung thƣ HCT116 105 Bảng 3.15 Kết quan sát số dấu hiệu bất thƣờng chuột 107 Bảng 3.16 Ch số huyết học máu chuột lô sử dụng chế phẩm quercetin theo mức liều khác ngày Bảng 3.17 Ch số hóa sinh máu liên quan đến chức gan, lô chuột sau ngày sử dụng chế phẩm quercetin vii 108 110 Bảng 3.18 Ch số hóa sinh máu liên quan đến chức thận, lô chuột sau ngày sử dụng chế phẩm quercetin Bảng 3.19 Hàm lƣợng MDA GSH gan chuột theo liều sử dụng chế phẩm quercetin điều kiện bình thƣờng Bảng 3.20 Xác định quercetin gan, máu chuột thí nghiệm thức ăn Bảng 3.21 Hoạt độ enzym ALT, AST máu chuột bị sốc nhiệt theo hai mơ hình 110 111 112 113 Bảng 3.22 Hoạt độ enzym ALT, AST máu hàm lƣợng MDA, GSH gan chuột bị sốc nhiệt cấp tính, trƣớc sau sử dụng chế 114 phẩm quercetin Bảng 3.23 Mức liều paracetamol tối đa sử dụng theo đƣờng uống, lần/24h (trong ngày) Bảng 3.24 Hoạt độ enzym AST máu chuột sử dụng paracetamol phối hợp với chế phẩm quercetin Bảng 3.25 Hoạt độ enzym ALT máu chuột sử dụng paracetamol phối hợp với chế phẩm quercetin Bảng 3.26 Hàm lƣợng MDA GSH gan chuột sử dụng paracetamol phối hợp với chế phẩm quercetin Bảng 3.27 Trọng lƣợng chuột sử dụng sản phẩm điều kiện bình thƣờng Bảng 3.28 Trọng lƣợng chuột dùng parcetamol phối hợp chế phẩm quercetin cách thức hỗ trợ dùng sau viii 115 116 116 118 120 120 PHỤ LỤC 05 SỐ LIỆU THU THẬP VÀ KẾT QUẢ KIỂM ĐỊNH THỐNG KÊ Hàm lƣợng GSH gan chuột lô nghiên cứu Lô chuột 10 11 Ký hiệu Đặc điểm 0.00 1.10 1.20 1.25 2.10 2.20 2.25 3.10 3.20 3.25 4.0 12 1.4 13 2.4 14 3.4 15 4.1 16 4.2 17 4.3 18 19 20 1.6 21 2.6 22 3.6 Đối chứng Sử dụng đơn lẻ: mẫu H1, 10 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H1, 20 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H1, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H2, 10 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H2, 20 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H2, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu QUE, 10 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu QUE, 20 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu QUE, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu Paracetamol, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng phối hợp trƣớc 3h: mẫu H1 mức liều 20 mg/kg dùng trƣớc 3h, sau dùng paracetamol mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp trƣớc 3h: mẫu H2 mức liều 20 mg/kg dùng trƣớc 3h, sau dùng paracetamol mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp trƣớc 3h: mẫu QUE mức liều 20 mg/kg , dùng trƣớc 3h, sau dùng paracetamol mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp sau 3h: mẫu H1 mức liều 20 mg/kg , dùng sau dùng paracetamol đƣợc 3h mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp sau 3h: mẫu H2 mức liều 20 mg/kg , dùng sau dùng paracetamol đƣợc 3h mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp sau 3h: mẫu QUE mức liều 20 mg/kg , dùng sau dùng paracetamol đƣợc 3h mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sốc nhiệt mạn tính, lần/ngày, liên tục ngày Sốc nhiệt cấp tính lần Sử dụng mẫu H1 mức liều 20 mg/kg , liên tục ngày sau sốc nhiệt cấp tính lần Sử dụng mẫu H2 mức liều 20 mg/kg , liên tục ngày sau sốc nhiệt cấp tính lần Sử dụng mẫu QUE mức liều 20 mg/kg , liên tục ngày sau sốc nhiệt cấp tính lần Giá trị hàm lƣợng GSH (nM/g mô) gan thể chuột lô nghiên cứu Số chuột 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 Lô 972.00 Lô 1.10 879.00 Lô 1.20 956.00 Lô 1.25 768.00 Lô 2.10 945.00 Lô 2.20 1023.00 Lô 2.25 679.00 Lô 3.10 964.00 Lô 3.20 1035.00 Lô 3.25 591.00 Lô 4.0 309.00 Lô 4.1 562.00 Lô 4.2 596.00 948.00 1127.00 1058.00 1037.00 1265.00 1026.00 986.00 1207.00 988.00 801.00 604.00 563.00 1041.00 898.00 903.00 987.00 989.00 961.00 499.00 704.00 746.00 789.00 985.00 931.00 985.00 1087.00 1659.00 634.00 501.00 499.00 434.00 437.00 326.00 307.00 626.00 610.00 611.00 621.00 463.00 915.00 923.00 1034.00 734.00 1045.00 859.00 534.00 1124.00 1034.00 593.00 374.00 506.00 647.00 849.00 870.00 820.00 982.00 799.00 898.00 987.00 1045.00 1216.00 1209.00 1136.00 1157.00 589.00 705.00 689.00 732.00 896.00 997.00 987.00 1023.00 784.00 897.00 884.00 1035.00 802.00 908.00 486.00 604.00 1203.00 1087.00 1153.00 1167.00 1027.00 1587.00 1087.00 1635.00 689.00 475.00 721.00 759.00 385.00 349.00 421.00 338.00 462.00 531.00 501.00 605.00 502.00 701.00 611.00 634.00 988.00 1027.00 989.00 599.00 999.00 1129.00 526.00 975.00 976.00 602.00 409.00 321.00 623.00 1137.00 1118.00 1082.00 970.00 843.00 1012.00 867.00 980.00 1120.00 1056.00 987.00 1020.00 1134.00 883.00 979.00 903.00 987.00 897.00 1028.00 1108.00 899.00 989.00 999.00 1058.00 899.00 1023.00 896.00 920.00 1276.00 1007.00 987.00 996.00 948.00 1109.00 1134.00 981.00 1310.00 1221.00 1267.00 995.00 986.00 1125.00 987.00 1026.00 1145.00 1048.00 1036.00 1204.00 1025.00 1429.00 1034.00 769.00 612.00 627.00 780.00 598.00 675.00 897.00 670.00 704.00 1098.00 703.00 697.00 746.00 805.00 763.00 964.00 698.00 1038.00 1054.00 1297.00 896.00 1026.00 1036.00 998.00 987.00 896.00 1075.00 834.00 978.00 805.00 901.00 988.00 879.00 907.00 1369.00 1089.00 1358.00 1697.00 1570.00 1329.00 1123.00 807.00 984.00 901.00 807.00 897.00 792.00 810.00 1015.00 1019.00 1039.00 763.00 854.00 929.00 487.00 672.00 492.00 723.00 578.00 670.00 573.00 499.00 483.00 846.00 913.00 905.00 497.00 706.00 1085.00 1069.00 986.00 897.00 897.00 799.00 768.00 1129.00 986.00 924.00 897.00 893.00 903.00 769.00 968.00 1008.00 1045.00 1187.00 1059.00 1004.00 1128.00 1023.00 1017.00 987.00 1008.00 998.00 987.00 1005.00 986.00 970.00 1024.00 986.00 1035.00 989.00 579.00 602.00 648.00 701.00 681.00 594.00 504.00 561.00 734.00 497.00 711.00 495.00 539.00 603.00 502.00 579.00 802.00 469.00 302.00 399.00 393.00 379.00 468.00 398.00 645.00 427.00 396.00 524.00 470.00 309.00 368.00 575.00 313.00 379.00 639.00 605.00 564.00 387.00 502.00 603.00 703.00 438.00 526.00 545.00 519.00 399.00 601.00 402.00 701.00 321.00 607.00 703.00 567.00 603.00 513.00 704.00 601.00 657.00 634.00 601.00 576.00 603.00 675.00 643.00 602.00 698.00 645.00 687.00 1021.00 976.00 993.00 1019.00 1023.00 943.00 896.00 998.00 987.00 1023.00 1013.00 1030.00 1247.00 1376.00 1143.00 613.00 769.00 673.00 1037.00 675.00 1004.00 997.00 1023.00 978.00 987.00 1129.00 1302.00 1584.00 1601.00 1029.00 651.00 694.00 599.00 671.00 673.00 1178.00 1034.00 1138.00 980.00 789.00 1326.00 1218.00 998.00 1351.00 985.00 584.00 576.00 591.00 623.00 702.00 342.00 309.00 568.00 454.00 372.00 407.00 598.00 418.00 502.00 645.00 612.00 674.00 503.00 657.00 645.00 Số chuột Giá trị hàm lƣợng GSH (nM/g mô) gan thể chuột lô nghiên cứu Lô 4.3 602.00 Lô 1.4 671.00 Lô 2.4 704.00 Lô 3.4 595.00 Lô 6.0 936.00 Lô 1.6 1029.00 Lô 2.6 674.00 Lô 3.6 1026.00 764.00 523.00 685.00 723.00 693.00 922.00 782.00 703.00 671.00 437.00 756.00 598.00 735.00 630.00 783.00 699.00 679.00 534.00 736.00 532.00 741.00 783.00 864.00 803.00 548.00 618.00 675.00 757.00 675.00 603.00 901.00 671.00 344.00 657.00 702.00 589.00 765.00 612.00 702.00 723.00 446.00 457.00 598.00 698.00 678.00 703.00 645.00 705.00 660.00 691.00 723.00 710.00 597.00 679.00 723.00 1127.00 657.00 656.00 598.00 645.00 513.00 728.00 925.00 718.00 10 701.00 546.00 785.00 598.00 721.00 693.00 718.00 802.00 11 12 13 761.00 637.00 478.00 675.00 594.00 709.00 902.00 934.00 605.00 507.00 356.00 509.00 637.00 598.00 789.00 689.00 589.00 754.00 702.00 499.00 721.00 679.00 504.00 638.00 675.00 717.00 897.00 809.00 689.00 906.00 802.00 798.00 475.00 673.00 679.00 529.00 697.00 601.00 793.00 1035.00 26 659.00 659.00 704.00 635.00 607.00 503.00 425.00 701.00 681.00 694.00 502.00 601.00 478.00 604.00 702.00 499.00 705.00 623.00 536.00 583.00 498.00 602.00 598.00 678.00 701.00 698.00 589.00 499.00 489.00 670.00 748.00 753.00 689.00 645.00 786.00 546.00 708.00 687.00 576.00 723.00 506.00 698.00 702.00 598.00 988.00 934.00 759.00 587.00 698.00 598.00 958.00 673.00 799.00 973.00 687.00 765.00 1017.00 1032.00 998.00 1058.00 713.00 689.00 1007.00 869.00 734.00 693.00 699.00 902.00 681.00 734.00 752.00 804.00 736.00 716.00 908.00 641.00 803.00 901.00 897.00 704.00 729.00 758.00 674.00 900.00 807.00 723.00 891.00 672.00 27 724.00 789.00 752.00 701.00 674.00 794.00 902.00 694.00 28 612.00 671.00 697.00 704.00 768.00 612.00 708.00 783.00 29 578.00 599.00 747.00 645.00 698.00 647.00 862.00 603.00 30 31 32 301.00 674.00 699.00 530.00 499.00 681.00 823.00 799.00 402.00 698.00 605.00 698.00 598.00 656.00 749.00 606.00 552.00 490.00 936.00 674.00 796.00 879.00 695.00 606.00 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Kiểm định thống kê: Oneway ANOVA ONEWAY GSH BY Hoang /STATISTICS DESCRIPTIVES HOMOGENEITY /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=T3 ALPHA(0.05) (SPSS 20) Descriptives GSH Lô N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 00 32 988.7188 88.65054 15.67135 956.7568 1020.6807 1.10 32 992.8750 100.86649 17.83084 956.5088 1029.2412 1.20 32 1113.7500 126.11285 22.29381 1068.2815 1159.2185 1.25 32 729.9063 125.27527 22.14575 684.7397 775.0728 1.40 32 603.4688 83.07361 14.68548 573.5175 633.4200 1.60 32 770.0313 147.86469 26.13903 716.7203 823.3422 2.10 32 978.6875 89.08330 15.74785 946.5695 1010.8055 2.20 32 1087.4688 257.77497 45.56861 994.5310 1180.4065 2.25 32 667.6875 142.52480 25.19506 616.3018 719.0732 2.40 32 670.2188 81.73590 14.44900 640.7498 699.6877 2.60 32 786.0313 87.57650 15.48149 754.4566 817.6059 3.10 32 985.0000 126.32064 22.33054 939.4566 1030.5434 3.20 32 1105.7188 195.10299 34.48966 1035.3766 1176.0609 3.25 32 608.5000 86.33543 15.26209 577.3728 639.6272 3.40 32 647.3125 81.34809 14.38045 617.9834 676.6416 3.60 32 790.2500 125.52805 22.19043 744.9923 835.5077 4.00 32 407.5313 83.15822 14.70044 377.5495 437.5130 4.10 32 520.7188 108.75875 19.22601 481.5070 559.9305 4.20 32 619.1250 60.51539 10.69771 597.3069 640.9431 4.30 32 589.4063 127.23533 22.49224 543.5330 635.2795 6.00 32 705.7500 137.64705 24.33279 656.1229 755.3771 Total 672 779.4360 237.24503 9.15193 761.4662 797.4059 Test of Homogeneity of Variances GSH Levene Statistic df1 df2 Sig 6.713 20 651 000 ANOVA GSH Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 27573452.467 20 1378672.623 88.044 000 Within Groups 10193918.781 651 15658.861 Total 37767371.249 671 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: GSH Dunnett T3 (I) Lô (J) Lô Mean Difference Std Error Sig (I-J) Upper Bound -4.15625 23.73879 1.000 -96.1650 87.8525 1.20 -125.03125 * 27.25079 005 -231.1986 -18.8639 258.81250 * 27.12979 000 153.1385 364.4865 385.25000 * 21.47684 000 302.0622 468.4378 218.68750 * 30.47688 000 99.2830 338.0920 2.10 10.03125 22.21680 1.000 -76.0036 96.0661 2.20 -98.75000 48.18806 992 -291.4719 93.9719 2.25 321.03125 * 29.67124 000 204.9442 437.1183 318.50000 * 21.31584 000 235.9256 401.0744 202.68750 * 22.02879 000 117.3801 287.9949 3.10 3.71875 27.28084 1.000 -102.5712 110.0087 3.20 -117.00000 37.88308 413 -267.0489 33.0489 3.25 380.21875 * 21.87516 000 295.5038 464.9337 341.40625 * 21.26943 000 259.0082 423.8043 198.46875 * 27.16628 000 92.6460 304.2915 581.18750 * 21.48707 000 497.9607 664.4143 468.00000 * 24.80385 000 371.7407 564.2593 369.59375 * 18.97452 000 295.6002 443.5873 399.31250 * 27.41336 000 292.4818 506.1432 282.96875 * 28.94263 000 169.8762 396.0613 -581.18750 * 21.48707 000 -664.4143 -497.9607 1.40 -195.93750 * 20.77898 000 -276.4043 -115.4707 1.60 -362.50000* 29.98919 000 -480.2863 -244.7137 2.40 -262.68750 * 20.61253 000 -342.5110 -182.8640 3.40 -239.78125 * 20.56453 000 -319.4197 -160.1428 4.10 -113.18750* 24.20212 004 -207.2503 -19.1247 4.20 -211.59375 * 18.18086 000 -282.3508 -140.8367 -181.87500 * 26.87013 000 -286.8145 -76.9355 -282.96875 * 28.94263 000 -396.0613 -169.8762 1.60 -64.28125 35.71181 1.000 -202.6129 74.0504 2.60 -80.28125 28.84027 665 -193.0234 32.4609 3.60 -84.50000 32.93175 840 -212.0854 43.0854 1.40 1.60 2.40 2.60 3.40 3.60 4.00 4.10 4.20 4.30 6.00 0.00 4.00 Lower Bound 1.10 1.25 0.00 95% Confidence Interval 4.30 0.00 6.00 * The mean difference is significant at the 0.05 level PHỤ LỤC 06 SỐ LIỆU THU THẬP VÀ KẾT QUẢ KIỂM ĐỊNH THỐNG KÊ Hàm lƣợng MDA gan chuột lô nghiên cứu Lô chuột 10 11 Ký hiệu Đặc điểm 0.00 1.10 1.20 1.25 2.10 2.20 2.25 3.10 3.20 3.25 4.0 12 1.4 13 2.4 14 3.4 15 4.1 16 4.2 17 4.3 18 19 20 1.6 21 2.6 22 3.6 Đối chứng Sử dụng đơn lẻ: mẫu H1, 10 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H1, 20 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H1, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H2, 10 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H2, 20 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu H2, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu QUE, 10 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu QUE, 20 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu QUE, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng đơn lẻ: mẫu Paracetamol, 250 mg/kg, liên tục ngày Sử dụng phối hợp trƣớc 3h: mẫu H1 mức liều 20 mg/kg dùng trƣớc 3h, sau dùng paracetamol mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp trƣớc 3h: mẫu H2 mức liều 20 mg/kg) dùng trƣớc 3h, sau dùng paracetamol mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp trƣớc 3h: mẫu QUE mức liều 20 mg/kg , dùng trƣớc 3h, sau dùng paracetamol mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp sau 3h: mẫu H1 mức liều 20 mg/kg , dùng sau dùng paracetamol đƣợc 3h mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp sau 3h: mẫu H2 mức liều 20 mg/kg , dùng sau dùng paracetamol đƣợc 3h mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sử dụng phối hợp sau 3h: mẫu QUE mức liều 20 mg/kg , dùng sau dùng paracetamol đƣợc 3h mức liều 250 mg/kg , liên tục ngày Sốc nhiệt mạn tính, lần/ngày, liên tục ngày Sốc nhiệt cấp tính lần Sử dụng mẫu H1 mức liều 20 mg/kg , liên tục ngày sau sốc nhiệt cấp tính lần Sử dụng mẫu H2 mức liều 20 mg/kg , liên tục ngày sau sốc nhiệt cấp tính lần Sử dụng mẫu QUE mức liều 20 mg/kg , liên tục ngày sau sốc nhiệt cấp tính lần Giá trị hàm lƣợng MDA (nM/g mô) gan thể chuột lô nghiên cứu Số chuột 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 Lô 6.34 Lô 1.10 7.66 Lô 1.20 4.45 Lô 1.25 10.24 Lô 2.10 7.65 Lô 2.20 6.59 Lô 2.25 7.56 Lô 3.10 6.79 Lô 3.20 5.85 Lô 3.25 8.76 Lô 4.0 10.23 Lô 4.1 6.34 Lô 4.2 7.13 7.96 6.78 5.32 7.63 6.98 5.98 4.21 4.75 3.84 9.68 10.45 11.32 8.29 6.87 7.54 4.67 5.26 5.26 9.77 8.36 7.89 5.99 7.23 6.87 2.82 6.32 6.85 7.98 9.45 10.34 8.86 11.74 12.02 7.07 6.78 7.63 8.77 6.70 9.50 6.80 8.02 3.70 9.76 6.03 7.05 8.34 7.56 4.95 9.34 8.97 5.32 5.26 8.12 7.32 6.64 6.94 8.98 6.98 7.35 8.79 5.45 3.56 4.34 4.96 7.98 8.96 7.99 10.32 5.98 6.85 6.93 6.87 5.36 7.74 7.98 7.32 6.87 6.89 8.99 8.34 5.98 6.32 8.23 6.73 5.37 5.36 5.26 5.37 10.56 10.78 8.59 10.45 10.23 8.97 8.37 10.34 6.89 4.51 6.80 6.07 5.26 7.05 9.95 7.86 7.45 6.78 4.02 11.29 8.92 5.61 11.14 5.56 3.02 9.50 10.02 7.89 8.53 7.39 6.59 4.72 9.01 7.34 5.05 11.59 7.12 6.70 10.07 11.31 7.02 6.59 6.74 4.99 7.57 7.40 6.72 7.66 8.76 9.23 6.87 5.23 3.68 4.00 5.21 3.32 4.03 10.25 9.78 8.54 9.86 10.02 8.75 6.78 6.89 8.23 9.02 4.97 7.21 6.02 8.29 7.29 10.87 9.45 10.09 10.98 9.54 5.08 7.26 6.54 5.91 7.23 5.34 5.06 5.68 5.95 6.01 11.27 10.34 9.67 8.76 9.59 11.68 9.97 10.45 9.87 11.34 8.31 5.64 7.02 7.78 7.21 9.76 6.06 5.05 7.23 9.81 6.48 7.12 4.78 8.04 7.12 6.26 5.76 4.78 5.26 7.68 8.15 5.65 4.94 6.72 5.73 4.67 6.74 7.12 6.62 6.21 7.34 6.54 7.12 5.76 7.34 6.85 8.12 8.14 7.23 6.64 6.72 6.56 5.19 4.56 5.01 3.21 3.54 6.02 4.01 3.26 3.19 3.95 4.12 3.25 4.76 4.34 5.36 5.17 7.23 8.79 9.76 8.27 10.34 11.07 8.97 7.92 10.07 9.56 7.87 10.54 8.99 9.69 7.97 10.04 8.97 9.21 5.69 7.26 7.32 5.05 7.15 8.09 8.02 9.05 7.47 7.81 6.97 7.03 8.00 6.71 4.97 5.37 6.01 5.29 6.93 5.92 8.18 7.45 8.17 5.31 5.19 5.02 7.29 6.57 5.18 5.23 9.76 9.89 8.32 9.57 7.34 9.23 10.56 9.23 9.58 8.92 10.01 9.34 8.97 9.32 9.70 8.36 5.94 6.87 8.19 6.21 7.56 8.76 6.79 5.99 7.63 6.70 5.81 6.54 6.78 8.03 5.98 6.72 6.72 2.93 5.63 6.43 4.39 5.68 5.31 5.70 4.99 3.19 6.72 5.34 4.97 6.02 5.19 6.23 10.05 11.01 9.35 8.71 8.17 10.86 9.32 8.59 8.75 9.47 10.23 9.67 7.43 9.78 11.02 8.34 9.12 8.05 10.06 8.23 11.78 11.06 8.97 8.32 11.25 12.01 8.67 12.19 8.23 9.05 7.76 8.32 8.34 6.21 6.04 5.63 7.21 6.32 4.51 6.19 5.07 6.21 7.29 8.23 4.56 7.41 8.54 6.51 8.21 9.12 5.43 9.01 6.21 4.36 6.87 8.96 8.81 9.32 7.43 6.71 7.34 6.34 8.12 5.73 Giá trị hàm lƣợng MDA (nM/g mô) gan thể chuột lô nghiên cứu Số chuột Lô 4.3 8.16 Lô 1.4 8.27 Lô 2.4 8.92 Lô 3.4 8.68 Lô 6.0 10.98 Lô 1.6 5.43 Lô 2.6 7.34 Lô 3.6 6.72 7.15 8.05 8.77 7.65 8.32 7.56 8.26 6.89 5.29 6.34 9.32 9.43 12.01 6.72 7.85 5.16 8.55 5.87 7.97 6.98 11.87 8.65 8.02 6.02 5.22 7.32 8.07 7.93 9.78 8.12 7.12 7.21 5.08 5.98 6.45 6.58 11.32 6.03 5.78 5.96 5.72 6.03 7.18 7.23 9.35 5.46 8.01 7.02 9.61 9.07 9.96 10.12 8.54 7.32 5.98 7.68 5.76 5.75 7.89 7.34 11.35 7.31 6.36 6.79 10 6.78 7.09 10.25 6.98 10.03 5.87 6.73 5.63 11 12 13 5.40 9.02 10.13 8.95 11.23 5.96 8.40 5.67 9.05 8.32 7.34 8.27 7.23 5.62 9.05 8.18 8.84 9.75 7.91 9.86 10.89 9.54 12.32 6.03 7.54 8.92 9.12 5.34 6.54 5.87 7.13 5.89 6.17 5.99 9.61 10.01 10.54 9.32 7.19 8.23 26 5.19 9.02 7.18 6.75 9.55 7.36 5.12 6.57 5.31 6.72 7.89 7.27 5.51 6.17 8.10 7.24 5.53 6.24 5.88 6.06 7.65 6.94 7.68 8.32 9.24 7.96 9.37 10.48 9.05 11.25 9.34 8.65 9.37 8.79 7.98 9.36 6.43 9.65 10.23 8.98 9.87 10.65 8.23 9.36 12.01 9.21 8.05 9.34 10.01 9.98 10.86 9.72 8.59 10.83 9.70 7.20 6.75 6.98 10.23 5.45 6.75 7.46 7.82 6.98 5.97 8.76 6.15 8.23 5.29 6.34 9.16 5.68 6.36 6.23 8.21 5.84 6.47 7.13 6.57 5.03 6.04 5.17 7.47 6.09 8.23 7.42 8.10 5.42 27 7.12 8.06 9.10 10.32 9.54 7.23 8.12 6.12 28 9.42 5.67 11.21 8.74 11.64 6.14 8.07 7.32 29 5.72 6.54 8.31 7.68 10.34 6.05 5.78 5.16 30 31 32 7.53 6.43 8.92 9.67 10.65 8.06 6.23 7.23 6.29 5.39 8.09 7.25 8.26 9.41 6.32 10.01 12.13 10.69 7.93 9.32 7.09 6.18 8.18 7.39 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Kiểm định thống kê: Oneway ANOVA ONEWAY MDA BY Hoang /STATISTICS DESCRIPTIVES HOMOGENEITY /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=T3 ALPHA(0.05) (SPSS 20) Descriptives MDA Lô N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Minimum Upper Bound 0.00 32 6.5506 1.07228 18955 6.1640 6.9372 4.67 1.10 32 7.2044 92585 16367 6.8706 7.5382 5.23 1.20 32 4.2869 75207 13295 4.0157 4.5580 3.19 1.25 32 9.4541 1.07669 19033 9.0659 9.8423 7.23 1.40 32 6.8916 1.06094 18755 6.5091 7.2741 5.51 1.60 32 7.2287 1.25003 22098 6.7781 7.6794 5.43 2.10 32 7.4606 1.03206 18244 7.0885 7.8327 5.05 2.20 32 6.2422 1.16078 20520 5.8237 6.6607 4.67 2.25 32 9.2116 1.17853 20834 8.7867 9.6365 6.87 2.40 32 8.9534 1.06411 18811 8.5698 9.3371 6.45 2.60 32 6.9834 1.11033 19628 6.5831 7.3838 5.29 3.10 32 6.7781 84728 14978 6.4726 7.0836 5.08 3.20 32 5.3547 1.08432 19168 4.9637 5.7456 2.82 3.25 32 9.5688 97606 17255 9.2168 9.9207 7.43 3.40 32 8.6772 1.27953 22619 8.2159 9.1385 6.32 3.60 32 6.6231 98154 17351 6.2692 6.9770 5.03 4.00 32 9.9200 1.38761 24530 9.4197 10.4203 7.76 4.10 32 6.6422 1.12163 19828 6.2378 7.0466 4.51 4.20 32 7.4525 1.58074 27944 6.8826 8.0224 4.36 4.30 32 6.9291 1.44969 25627 6.4064 7.4517 5.08 6.00 32 10.3550 1.17207 20719 9.9324 10.7776 8.05 Total 672 7.5604 1.89579 07313 7.4168 7.7040 2.82 Test of Homogeneity of Variances MDA Levene Statistic 2.737 df1 df2 20 Sig 651 000 ANOVA MDA Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 1568.647 20 78.432 842.929 651 1.295 2411.576 671 Post Hoc Tests Multiple Comparisons F Sig 60.574 000 Dependent Variable: MDA Dunnett T3 (I) Lô (J) Lô Mean Difference Std Error Sig 95% Confidence Interval (I-J) -.65375 25044 809 -1.6247 3172 1.20 2.26375 * 23153 000 1.3617 3.1658 -2.90344 * 26862 000 -3.9437 -1.8632 1.40 -.34094 26666 1.000 -1.3736 6917 1.60 -.67813 29114 955 -1.8069 4507 2.10 -.91000 26309 166 -1.9289 1089 2.20 30844 27935 1.000 -.7737 1.3906 2.25 -2.66094 * 28166 000 -3.7522 -1.5697 -2.40281 * 26705 000 -3.4370 -1.3687 2.60 -.43281 27287 1.000 -1.4896 6239 3.10 -.22750 24159 1.000 -1.1657 7107 3.20 1.19594 * 26958 008 1520 2.2399 -3.01813 * 25633 000 -4.0112 -2.0250 -2.12656 * 29512 000 -3.2712 -.9819 3.60 -.07250 25698 1.000 -1.0681 9231 4.00 * 31000 000 -4.5739 -2.1649 4.10 -.09156 27431 1.000 -1.1539 9708 4.20 -.90188 33766 759 -2.2189 4152 4.30 -.37844 31876 1.000 -1.6184 8615 6.00 -3.80437 * 28082 000 -4.8923 -2.7164 0.00 3.36938* 31000 000 2.1649 4.5739 1.40 3.02844* 30878 000 1.8283 4.2285 2.40 96656 30912 370 -.2348 2.1679 3.40 1.24281 33367 079 -.0498 2.5354 4.10 3.27781* 31541 000 2.0535 4.5021 4.20 2.46750 * 37183 000 1.0263 3.9087 4.30 2.99094 * 35475 000 1.6170 4.3648 0.00 3.80437* 28082 000 2.7164 4.8923 1.60 3.12625 * 30292 000 1.9529 4.2996 2.60 3.37156* 28540 000 2.2662 4.4770 3.60 3.73187* 27025 000 2.6836 4.7801 2.40 3.25 3.40 4.00 6.00 Upper Bound 1.10 1.25 0.00 Lower Bound -3.36938 * The mean difference is significant at the 0.05 level PHỤ LỤC 07: Kết kiểm định thống kê hành vi bơi y-maze 7.1 Hành vi bơi Oneway Descriptives HanhviBOI N Mean Std Std Error 95% Confidence Interval for Deviation Mean Lower Bound Upper Bound Đối chứng 32 (8 x4) 2174.3750 22.90313 8.09748 2155.2275 2193.5225 (H1) 32 (8 x4) 2172.2500 32.66606 11.54920 2144.9405 2199.5595 (H2) 32 (8 x4) 2171.0000 22.43085 7.93050 2152.2473 2189.7527 (QUE) 32 (8 x4) 2174.2500 30.14133 10.65657 2149.0512 2199.4488 (Paracetamol) 32 (8 x4) 1032.7500 324.85766 114.85453 761.1622 1304.3378 15 (Para-H1) 32 (8 x4) 1832.8750 203.48706 71.94354 1662.7556 2002.9944 25 (Para- H2) 32 (8 x4) 1504.7500 240.23367 84.93543 1303.9096 1705.5904 45 (Para- QUE) 32 (8 x4) 1573.8750 313.15603 110.71737 1312.0700 1835.6800 32 x 1829.5156 442.93770 55.36721 1718.8731 1940.1582 Total Test of Homogeneity of Variances HanhviBOI Levene Statistic df1 df2 5.003 Sig 56 000 ANOVA HanhviBOI Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 10220158.359 1460022.623 2140051.625 56 38215.208 12360209.984 63 F Sig 38.205 000 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: HanhviBOI (I) Mau (J) Mau Mean Difference Std Error Sig (I-J) 95% Confidence Interval Lower Bound Dunnett T3 2.12500 14.10507 1.000 -51.4925 3.37500 11.33411 1.000 -38.8516 12500 13.38401 1.000 -50.3612 * 115.13962 000 634.3167 1141.62500 341.50000 * 72.39780 034 24.1123 669.62500 * 85.32055 002 294.7168 600.50000 * 111.01309 017 111.4959 -2.12500 14.10507 1.000 -55.7425 1.25000 14.00988 1.000 -52.1238 -2.00000 15.71453 1.000 -60.6077 * 115.43373 000 632.6084 339.37500 * 72.86465 035 22.5538 667.50000 * 85.71704 002 293.1099 598.37500 * 111.31811 017 109.7999 -3.37500 11.33411 1.000 -45.6016 -1.25000 14.00988 1.000 -54.6238 -3.25000 13.28365 1.000 -53.4506 * 115.12800 000 630.9247 338.12500 * 72.37932 036 20.7127 666.25000 * 85.30486 002 291.3200 597.12500 * 111.00104 017 108.1033 -.12500 13.38401 1.000 -50.6112 2.00000 15.71453 1.000 -56.6077 3.25000 13.28365 1.000 -46.9506 * 115.34784 000 634.4895 341.37500 * 72.72850 034 24.3993 669.50000 * 85.60134 002 294.9654 600.37500 * 111.22904 017 111.6777 -1141.62500 * 115.13962 000 -1648.9333 -1139.50000 * 115.43373 000 -1646.3916 -1138.25000 * 115.12800 000 -1645.5753 -1141.50000 * 115.34784 000 -1648.5105 * 135.52651 002 -1321.9631 15 25 45 15 25 45 15 25 45 15 25 45 15 1139.50000 1138.25000 1141.50000 -800.12500 Multiple Comparisons Dependent Variable: HanhviBOI (I) Mau (J) Mau Mean Difference Std Error Sig 95% Confidence (I-J) Interval Lower Bound Dunnett T3 15 25 -472.00000 142.84813 114 -1012.1552 45 -541.12500 159.53025 092 -1135.5691 -341.50000 72.39780 034 -658.8877 -339.37500 * 72.86465 035 -656.1962 -338.12500 * 72.37932 036 -655.5373 -341.37500 * 72.72850 034 -658.3507 800.12500 * 135.52651 002 278.2869 25 328.12500 111.30993 200 -88.5002 45 259.00000 132.03867 731 -247.1793 -669.62500 85.32055 002 -1044.5332 -667.50000 * 85.71704 002 -1041.8901 -666.25000 * 85.30486 002 -1041.1800 -669.50000 * 85.60134 002 -1044.0346 472.00000 * 142.84813 014 -68.1552 15 -328.12500 111.30993 200 -744.7502 45 -69.12500 139.54341 1.000 -595.0737 -600.50000 111.01309 017 -1089.5041 -598.37500 * 111.31811 017 -1086.9501 -597.12500 * 111.00104 017 -1086.1467 -600.37500 * 111.22904 017 -1089.0723 541.12500* 159.53025 042 -53.3191 15 -259.00000 132.03867 731 -765.1793 25 69.12500 139.54341 1.000 -456.8237 25 45 * The mean difference is significant at the 0.05 level 7.2 Y-maze ONEWAY testYmaze BY Mau /STATISTICS DESCRIPTIVES HOMOGENEITY /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=LSD ALPHA(0.05) Oneway Descriptives testYmaze N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 12 21.7500 4.49495 1.29758 18.8940 24.6060 12 24.4167 7.42794 2.14426 19.6972 29.1362 11 24.6364 7.57988 2.28542 19.5441 29.7286 11 21.6364 2.80260 84501 19.7536 23.5192 12 20.6667 5.01513 1.44774 17.4802 23.8531 15 13 24.9231 4.76902 1.32269 22.0412 27.8050 25 12 22.6667 6.30055 1.81881 18.6635 26.6698 45 13 23.6154 7.84791 2.17662 18.8729 28.3578 Total 96 23.0625 5.99967 61234 21.8469 24.2781 Test of Homogeneity of Variances testYmaze Levene Statistic 1.941 df1 df2 Sig 88 072 ANOVA testYmaze Sum of Squares Between Groups df Mean Square 212.034 30.291 Within Groups 3207.591 88 36.450 Total Post Hoc Tests 3419.625 95 F Sig .831 564 Multiple Comparisons Dependent Variable: testYmaze LSD (I) Mau (J) Mau Mean Difference Std Error Sig (I-J) 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -2.66667 2.46475 282 -7.5648 2.2315 -2.88636 2.52014 255 -7.8946 2.1219 11364 2.52014 964 -4.8946 5.1219 1.08333 2.46475 661 -3.8148 5.9815 15 -3.17308 2.41688 193 -7.9761 1.6300 25 -.91667 2.46475 711 -5.8148 3.9815 45 -1.86538 2.41688 442 -6.6684 2.9377 2.66667 2.46475 282 -2.2315 7.5648 -.21970 2.52014 931 -5.2280 4.7886 2.78030 2.52014 273 -2.2280 7.7886 3.75000 2.46475 132 -1.1482 8.6482 15 -.50641 2.41688 835 -5.3095 4.2966 25 1.75000 2.46475 480 -3.1482 6.6482 45 80128 2.41688 741 -4.0018 5.6043 2.88636 2.52014 255 -2.1219 7.8946 21970 2.52014 931 -4.7886 5.2280 3.00000 2.57435 247 -2.1160 8.1160 3.96970 2.52014 119 -1.0386 8.9780 15 -.28671 2.47335 908 -5.2020 4.6286 25 1.96970 2.52014 437 -3.0386 6.9780 45 1.02098 2.47335 681 -3.8943 5.9362 -.11364 2.52014 964 -5.1219 4.8946 -2.78030 2.52014 273 -7.7886 2.2280 -3.00000 2.57435 247 -8.1160 2.1160 96970 2.52014 701 -4.0386 5.9780 15 -3.28671 2.47335 187 -8.2020 1.6286 25 -1.03030 2.52014 684 -6.0386 3.9780 45 -1.97902 2.47335 426 -6.8943 2.9362 -1.08333 2.46475 661 -5.9815 3.8148 -3.75000 2.46475 132 -8.6482 1.1482 -3.96970 2.52014 119 -8.9780 1.0386 -.96970 2.52014 701 -5.9780 4.0386 15 -4.25641 2.41688 082 -9.0595 5466 Multiple Comparisons Dependent Variable: testYmaze LSD (I) Mau (J) Mau Mean Difference Std Error Sig (I-J) 15 25 45 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound 25 -2.00000 2.46475 419 -6.8982 2.8982 45 -2.94872 2.41688 226 -7.7518 1.8543 3.17308 2.41688 193 -1.6300 7.9761 50641 2.41688 835 -4.2966 5.3095 28671 2.47335 908 -4.6286 5.2020 3.28671 2.47335 187 -1.6286 8.2020 4.25641 2.41688 082 -.5466 9.0595 25 2.25641 2.41688 353 -2.5466 7.0595 45 1.30769 2.36805 582 -3.3983 6.0137 91667 2.46475 711 -3.9815 5.8148 -1.75000 2.46475 480 -6.6482 3.1482 -1.96970 2.52014 437 -6.9780 3.0386 1.03030 2.52014 684 -3.9780 6.0386 2.00000 2.46475 419 -2.8982 6.8982 15 -2.25641 2.41688 353 -7.0595 2.5466 45 -.94872 2.41688 696 -5.7518 3.8543 1.86538 2.41688 442 -2.9377 6.6684 -.80128 2.41688 741 -5.6043 4.0018 -1.02098 2.47335 681 -5.9362 3.8943 1.97902 2.47335 426 -2.9362 6.8943 2.94872 2.41688 226 -1.8543 7.7518 15 -1.30769 2.36805 582 -6.0137 3.3983 25 94872 2.41688 696 -3.8543 5.7518 ...ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Lê Huy Hồng NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH THU NHẬN CHẾ PHẨM QUERCETIN TỪ MỘT SỐ LOÀI CÂY THU? ??C VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRÊN THỰC NGHIỆM... quy trình thu nhận chế phẩm quercetin từ số loài thu? ??c đánh giá hoạt tính sinh học thực nghiệm? ?? với mục tiêu: Xác định đƣợc hàm lƣợng quercetin số loài thu? ??c Xây dựng đƣợc quy trình thu nhận quercetin. .. sen để thu nhận chế phẩm quercetin cho nghiên cứu hoạt tính sinh học 88 90 92 94 95 96 97 3.4 ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CHẾ PHẨM QUERCETIN THU NHẬN TỪ NỤ HOA HO VÀ LÁ SEN TRÊN THỰC NGHIỆM