TÀI LIỆU TRẮC NGHIỆM, BÀI GIẢNG PPT CÁC MÔN CHUYÊN NGÀNH Y DƯỢC HAY NHẤT CÓ TẠI “TÀI LIỆU NGÀNH Y DƯỢC HAY NHẤT” ;https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. TÀI LIỆU LUẬN VĂN – BÁO CÁO – TIỂU LUẬN (NGÀNH Y DƯỢC). DÀNH CHO SINH VIÊN CÁC TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC VÀ CÁC TRƯỜNG KHÁC, GIÚP SINH VIÊN HỆ THỐNG, ÔN TẬP VÀ HỌC TỐT KHI HỌC TÀI LIỆU LUẬN VĂN – BÁO CÁO – TIỂU LUẬN (NGÀNH Y DƯỢC)
TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BỘ MÔN DƯỢC LIỆU TIỂU LUẬN DƯỢC LIỆU Chủ đề: Tổng quan Bách (Stemona tuberosa Lour.) Sinh viên thực : Mã SV : Lớp : HÀ NỘI, MỤC LỤC Nội dung Trang A - Đặt vấn đề B - Tổng quan tài liệu I.Đặc điểm thực vật 1.Phân lồi phân bố 2.Mơ tả 3.Thu hái chế biến II.Đặc điểm dược liệu 1.Rễ củ bách 2.Vi phẫu 3.Đặc điểm bơt dược liệu 4.Thành phần hóa học 5.Chiết xuất phân lập alkaloid III.Kiểm nghiệm dược liệu 8, 1.Định tính tuberostemonin neotuberostemonin 2.Định tính tuberostemonin LG 3.Định lượng alkaloid có rễ bách phương pháp chuẩn nội IV Tác dụng công dụng 10, 11 C - Kết luận 11, 12 Tài liệu tham khảo 12 A – ĐẶT vấn đề Alkaloids nhóm hoạt chất có hoạt tính sinh học mạnh, thường hay gặp thực vật, đơi cịn thấy động vật Chúng thường có đặc điểm : có chứa nitơ, thường nitơ dị vòng, sinh tổng hợp từ acid - amin, có cấu trúc phức tạp, đa số có tính kiềm, phản ứng với nhóm thuốc thử đặc trưng gọi thuốc thử chung alkaloid Để phân loại alkaloid người ta có nhiều cách khác phân loại theo cấu trúc hóa học hay sử dụng Theo cách phân loại alkaloid chia thành nhiều loại như: alkaloid có chứa nhân tropan, purin, isoquinolin Bách xếp vào nhóm dược liệu chứa cấu trúc khác Trong tiểu luận này, em xin trình bày kiến thức dược liệu Bách B – TỔNG QUAN TÀI LIỆU I.Đặc điểm thực vật 1.Phân loài phân bố Dược điển Trung Quốc quy định dược liệu Bách Bộ rễ loài Stemona tuberosa Lour., Stemona japonica (Bl.) Miq Stemona sessilifolia Miq , khác Stemona tuberosa Lour với hai lồi cịn lại định có mặt hay khơng bó sợi nằm rải rác vỏ thân mơ dày lớp bần.(1) Cây bách mọc hoang nhiều vùng rừng núi nước ta: Hịa Bình, Phú Thọ, Bắc Giang, Thanh Hóa Cây cịn mọc hoang phần trung tâm Trung Quốc, Ấn Độ, Đài Loan,Thái Lan 2.Mơ tả Bách thuộc lồi dây leo, dài – 8m Thân nhỏ, nhẵn Lá thường mọc đối, có vừa mọc đối vừa mọc cách, có cuống, hình tim Trên mặt lá, ngồi gân có – gân phụ chạy dọc từ cuống đến đầu lá, có gân ngang nhỏ rõ Hoa tự mọc kẽ gồm -2 hoa, màu vàng đỏ Bao hoa gồm phiến, hai phiến dài 4cm, rộng 5cm; hai phiến rộng Có nhị, tua ngắn Quả nang, có hạt Rễ củ màu vàng nhạt, mọc thành chùm 20 – 30 củ, có tới 100 củ, dài 10 - 25cm, đường kính 2,5 – 2cm.(2) Lá hoa Stemona tuberosa Lour Lá hoa S sessilifolia Miq Hoa S japonica (Bl.) Miq 3.Thu hái chế biến : Rễ Bách Bộ thu hoạch quanh năm, đặc biệt vào mùa thu, rửa sau phơi khơ ánh nắng mặt trời hay đem sấy khô 50 – 600C.(3) II.Đặc điểm dược liệu: Rễ củ ( Radix Stemonae ) Củ thường cong queo, bổ đôi hay để nguyên, dài 5cm trở lên, rộng 0.5cm đầu phình to, đầu thn nhỏ Mặt ngồi màu vàng nâu, có nhiều nếp nhăn Mặt cắt ngang mô mềm vỏ dày, trụ cứng Vị đắng, ngọt.(4) Dược liệu sau phơi hay sấy khô Radix stemonae 2.Vi phẫu: Lớp bần dày, tế bào đặn Mô mềm vỏ gồm tế bào màng mỏng gần tròn, xếp lộn xộn tạo khoảng gian bào nhỏ Nội bì cấu tạo hàng tế bào hình chữ nhật nhỏ có màng tương đối dày xếp đặn Trụ bì gồm hàng tế bào đặn xếp sát cạnh tế bào nội bì Libe – gỗ cấu tạo cấp một, phân hóa hướng tâm: Các bó libe xếp xen kẽ với bó gỗ liên tục, nằm sát trụ bì nên chúng khơng tạo thành tia ruột Các bó gỗ cấu tạo mạch to, nhỏ xếp tuần tự; nhỏ phía ngồi, to phía trong, tạo thành hình tam giác đầu nhọn quay phía ngồi nằm sát trụ bì, phía mạch gỗ to xếp gần thành vịng trịn Mơ mềm ruột gồm tế bào to nhỏ không đều, màng mỏng xếp lộn xộn.(2) Vi phẫu rễ bách 3.Đặc điểm bột dược liệu: Màu vàng nhạt, vị đắng ngọt, soi kính hiển vi thấy: Mảnh bần màu nâu, tế bào hình nhiều cạnh, thành dày Mảnh mơ mềm gồm tế bào hình gần tròn chữ nhật, thành mỏng Tinh thể calci oxalat hình cầu gai hình phiến nhỏ Tế bào mơ mềm chứa hạt tinh bột hình trái xoan Sợi dài có thành dày Mảnh mạch mạng, mạch điểm(2) 4.Thành phần hóa học: Rễ bách có alkaloid có tên stemonin ( C22H33NO4 ; tinh thể hình kim, khơng màu, đắng, tan cồn, ether, aceton, toluen, benzen, chloroform, m.p.1600 ), độc Trong loài Stemona sessilifolia phân lập alkaloid : tuberostemonin oxotuberostemonin Trong lồi S japonica có protostemonin, stemonamin, isostemonamin Lồi S tuberosa nghiên cứu kỹ lưỡng nhất, qua thấy rễ lồi có chứa nhiều alkaloid như: tuberostemonin, isotuberostemonin, stemonidin, sinostemonin, stemonin, stemotinin, isostemonin, neotuberostemonin,bisdehydroneotuberostemonin nhiều hợp chất hóa học quan trọng khác như: tuberostemoniol, stemoninoamid, stemonal Ngồi rễ bách cịn có glucid (2.3%), lipid( 0.83%), protein( 9%), acid hữu (citric, formic, malc, succinic, ) (3) Công thức số chất cho hình vẽ đây: 5.Chiết xuất phân lập alkaloid từ rễ bách cho mục đích kiểm nghiệm HPLC thử tác dụng chữa ho alkaloid Mẫu rễ bách khô ( ~1kg) chẻ thành đoạn nhỏ chiết với ethanol 95% lần, lần lít dung mơi phương pháp chiết hồi lưu trog 2h Dịch chiết lần gộp lại làm khô áp suất thấp Cắn thu ta đem acid hóa 600ml dung dịch HCl 4% , sau đem ly tâm vận tốc 4000 vòng/ phút 30 phút 50C đem lọc Dịch lọc điều chỉnh pH tới dung dịch NH4OH 35% sau chiết với Chloroform Dịch lọc thu đem làm thí nghiệm với HPLC thử hoạt tính sinh học.(1) III.Kiểm nghiệm sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography - HPLC) với detector mảng diod (Diode Array Detector – DAD) detector tán xạ bay ( Evaporative Light Scattering Detector - ELSD ).(5) Pha tĩnh cột C18 ( Kích thước 4,6 x 150mm, 5µm) kèm với cột bảo vệ sử dụng 280C Hệ pha động khác sử dụng tùy alkaloid khác Đối với neotuberostemonin(1) tuberostemonin(2) người ta sử dụng kỹ thuật HPLC với detector ELSD Pha động bao gồm: Dung môi A: CH3COOH 0,02% ; 30 mmol CH3COONH4 0,05% triethylamin Dung môi B: Menthol Chạy chương trình dung mơi: – phút đầu : 20%B Phút thứ tới phút thứ : 20%B tăng dần tới 80%B 10 phút : 80%B phút cuối : giảm xuống 20%B 2.Đối với tuberostemonin H(3) tuberostemonin J(4): Pha động dung môi A methanol (40 : 60) _Tốc độ bơm pha động cho q trình phân tích chất (1),(3),(4) 0,8 ml/phút _Detector ELSD sử dụng để phân tích chất (2) chất (4) với hệ thống cột điều nhiệt giữ mức nhiệt độ 98 0C 350C, vận tốc dịng khí nitơ phun sương cho việc phân tích 2,0 0,3 SLPM (standard liters per minutes) _Áp suất khí phun sương bars Với chất (3), detector DAD sử dụng bước sóng 210nm _Đối với q trình phân tích chất, hệ thống bơm tự động tiêm mẫu 40C 3.Xây dựng đường chuẩn Nồng độ hoạt chất khoảng từ 2,0 đến 50,0 µg/ml (1), 1,5 – 30,0 µg/ml chất (2), 5,3 – 71,0 µg/ml chất (3) từ 5,1 – 102,3 µg/ml chất (4) Chất chuẩn nội sử dụng Yohimbin Các kết rút từ pic sắc ký thu lần lấy ngày nồng độ nhỏ nhất, trung bình lớn IV Tác dụng công dụng.(2) Dịch chiết rễ bách bộ, alkaloid toàn phần tuberostemoninLG biểu khơng độc liều thí nghiệm (165g rễ, 750mh alkaloid toàn phần, 1875mg tuberostemonin LG/1kg thể trọng chuột nhắt trắng) Dịch chiết rễ bách bộ, alkaloid tồn phần tuberostemonin LG có tác dụng giảm ho, long đờm rõ rệt Dịch chiết rễ bách 2/1 làm giảm hoạt động giun đũa lợn, dung dịch tuberostemonin LG 0.15% làm liệt hoàn toàn chết giun đũa lợn sau Tberostemonin LG có tác dụng ức chế số vi khuẩn : Bacillus subtilis, Bacillus pumilus, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Klebsiella Bách dùng làm thuốc trị ho, ngày uống – 20g dạng thuốc sắc nấu thành cao Thường dùng phối hợp với số vị thuốc khác Trị giun đũa: Ngày uống – 10g dạng thuốc sắc, uống ngày liền vào buổi sáng lúc đói, sau uống thuốc tẩy Trị giun kim: Bách tươi 40g (hoặc 20g bách khơ) đun với 200ml nước, đặc cịn 30ml nước thụt giữ 20 phút Điều trị liền 10 – 12 ngày Ngồi ra, bách cịn dùng để trừ chấy, rận, bọ chó cho súc vật * Một nghiên cứu tác dụng trị ho neotuberostemonin:(1) Qua nghiên cứu mẫu dược liệu Stemona tuberosa có thành phần neotuberostemonin thực Chung et al cộng sự(2003), thuộc môn Sinh học trường đại học Hồng Kông, Trung Quốc Sau tiêm vào màng bụng chuột thí nghiệm, họ thấy rằng: neotuberostemonin alkaloid có cấu trúc stenin khác thành phần trị ho rễ bách Tiếp tục nghiên cứu thêm,kết thu bất ngờ hơn, tác dụng điều trị ho neotuberostemonin tương đương với tác dụng codein tác động lên receptor opioid Trong nghiên cứu tác dụng trị ho neotuberostemonin khẳng định qua đường dùng thuốc đường tiêu hóa.Thêm nữa, mẫu Stemona tuberosa khác chứa hoạt chất khác neotuberostemonin có tác dụng giảm ho mức độ khác Kết chứng tỏ điểu rằng, ngồi neotuberostemonin có tác dụng giảm ho, rễ bách cịn có alkaloid khác có tác dụng Điều cung cấp kiến thức khoa học khả sử dụng Stemona tuberosa y học cổ truyền đại Một số chế phẩm điều trị ho có nguồn gốc từ Bách Bộ C – KẾT LUẬN Bách vị thuốc sử dung lâu đời y học cổ truyền Việt Nam Trung Quốc Ngày nay, nhờ tiến khoa học kỹ thuật, đặc biệt kỹ thuật HPLC cho phép hiểu rõ sâu sắc tác dụng điều trị bệnh thành phần dược liệu định đến tác dụng dược lý Qua nảy sinh vấn đề nan giải cần phải quan tâm nhiều tới ảnh hưởng cấu trúc khơng gian hóa học tác dụng điều trị bệnh chất tầm quan trọng vấn đề việc kiểm sốt chất lượng dược liệu, địi hỏi cần có nhiều nghiên cứu chuyên sâu tương lai vấn đề góp phần làm sâu sắc thêm hiểu biết dược liệu làm thuốc nói riêng nâng cao khả chăm sóc sức khỏe cho cộng đồng nói chung Tài liệu tham khảo 1.Thông tin địa www.elsevier.com/locate/jethpharm 2.Dược liệu II, Bộ môn Dược liệu, Trường Đại học Dược Hà Nội 3.Thông tin địa www.botanicum.com/singles/baibu.htm GS.TS Đỗ Tất Lợi, “Những thuốc vị thuốc Việt Nam”, NXB Y học, 2004 5.Xin Zhou, Pak Ho Henry, Na li, Yang Ye, Li Zhang, Zhong Zou, Ge Lin, “ Oral Absorption and Antitussive Activity of Tuberostemonine Alkaloids from the Roots of Stemona tuberosa “, www.thieme.de/fz/plantamedica / www.thiemeconnect.com/ejournals ... tiểu luận n? ?y, em xin trình b? ?y kiến thức dược liệu Bách B – TỔNG QUAN TÀI LIỆU I.Đặc điểm thực vật 1.Phân loài phân bố Dược điển Trung Quốc quy định dược liệu Bách Bộ rễ loài Stemona tuberosa... lồi cịn lại định có mặt hay khơng bó sợi nằm rải rác vỏ thân mô d? ?y lớp bần.(1) C? ?y bách mọc hoang nhiều vùng rừng núi nước ta: Hòa Bình, Phú Thọ, Bắc Giang, Thanh Hóa C? ?y cịn mọc hoang phần trung... rễ bách cịn có alkaloid khác có tác dụng Điều cung cấp kiến thức khoa học khả sử dụng Stemona tuberosa y học cổ truyền đại Một số chế phẩm điều trị ho có nguồn gốc từ Bách Bộ C – KẾT LUẬN Bách