Thông tin tài liệu
Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến sinh trưởng sinh tổng hợp Poly (3-Hydroxybutyrate) chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 Đoàn Văn Thược*, Lưu Thị Hồi Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư phạm Hà Nội, 136 Xuân Thủy, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 16 tháng năm 2014 Chỉnh sửa ngày 08 tháng năm 2015; Chấp nhận đăng ngày 22 tháng năm 2015 Tóm tắt Trong nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố dinh dưỡng KH2PO4, MgSO4 cao nấm men đến sinh trưởng sinh tổng hợp poly(3-hydroxybutyrate) (PHB) chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 nghiên cứu Kết nghiên cứu nồng độ 0.85 g/l MgSO4, 0.55 g/l KH2PO4, 1.5 g/l cao nấm men điều kiện dinh dưỡng phù hợp cho sinh trưởng sinh tổng hợp PHB chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 Ở điều kiện khối lượng tế bào khô khoảng g/l với hàm lượng PHB khoảng 77.5% đạt sau 48 h nuôi cấy môi trường MT2 Ảnh chụp tế bào sau 48 h ni cấy kính hiển vi điện tử truyền qua cho thấy hạt PHB to đồng nhất, khoảng 1-2 hạt tế bào chiếm gần hết khoang tế bào Với khả sinh trưởng mạnh sinh tổng hợp nhiều PHB chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 có nhiều tiềm để phát triển sản xuất quy mô công nghiệp Từ khóa: polyhydroxyalkanoate, poly(hydroxybutyrate), polymer, vi khuẩn ưa mặn, Yangia sp NĐ199 Mở đầu∗ khoảng từ đến 13 hạt tế bào, hạt có kích thước khoảng từ 0.2 đến 0.5 µm [35] Sau tách chiết khỏi tế bào, PHA thể tính chất chung đặc trưng khơng độc hại, khơng tan nước, tương thích sinh học cao, có khả tự phân hủy, nhựa ưa nhiệt tái sử dụng [2] Polyhydroxyalkanoates (PHA) polyester đơn phân hydroxyankanoate PHA tích lũy tế bào nhiều vi sinh vật nguồn dự trữ carbon lượng, thường môi trường sống dư thừa nguồn carbon thiếu vài nguyên tố dinh dưỡng oxygen, nitrogen, phosphorus, sulfur, magnesium [1, 2] PHA polymer khoảng 103 đến 104 monomer, chúng tồn dạng hạt riêng biệt tế bào, có Trong nhóm PHA poly (3hydroxybutyrate) (PHB) loại polymer nghiên cứu nhiều PHB có tính chất vật lý tương tự số plastic có nguồn gốc từ dầu mỏ chúng sử dụng để sản xuất nhiều sản phẩm khác như: _ ∗ Tác giả liên hệ ĐT: 84-948071329 Email: thuocdv@hnue.edu.vn 67 68 Đ.V Thược, L.T Hồi / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 bao bì, túi đựng dùng siêu thị, khay đựng trái cây, rau quả, trứng thịt, chai lọ đựng mỹ phẩm, chai lọ đựng đồ uống PHB dùng để sản xuất dụng cụ dùng lần hộp đựng đồ ăn nhanh, dụng cụ dùng gia đình cốc, thìa, dĩa, đĩa Ngoài PHB dùng để chế tạo sản phẩm có độ bền cao linh kiện điện tử ví dụ vỏ điện thoại, vỏ máy tính, sử dụng để chế tạo vật dụng nội thất xe [6] Sau sử dụng, sản phẩm phân hủy thành H2O CO2 điều kiện hiếu khí CO2 CH4 điều kiện kị khí nhờ vi sinh vật có mặt tự nhiên [4, 7] Tuy nhiên giá thành sản xuất PHA nói chung PHB nói riêng cịn cao so với loại nhựa thơng thường có nguồn gốc từ dầu mỏ nên khả ứng dụng PHA vào sống thường ngày nhiều hạn chế Rất nhiều yếu tố ảnh hưởng đến giá PHA, ví dụ như: hiệu suất sản xuất PHA, hàm lượng PHA tích lũy tế bào, hiệu suất chuyển hóa nguồn bon thành PHA, giá nguyên liệu dùng lên men (chủ yếu nguồn bon), giá qui trình tách chiết, tinh PHA [8] Hiện nhà khoa học nỗ lực nghiên cứu nhằm giảm giá thành PHA, hướng nghiên cứu chủ yếu là: tìm chủng vi sinh vật có khả tạo hàm lượng PHA lớn từ nguồn nguyên liệu rẻ tiền, tối ưu hóa qui trình sản xuất tinh để đạt hiệu suất cao hay tạo dòng sinh vật chuyển gen có khả tạo nhiều PHA [8] Gần chúng tơi có phân lập chủng vi khuẩn ưa mặn Yangia sp NĐ19 từ rừng ngập mặn huyện Giao Thủy, tỉnh Nam Định Chủng vi khuẩn sinh trưởng tối ưu nhiệt độ 32 o C nồng độ 4.5% NaCl Trên mơi trường có nguồn carbon glucose chủng vi khuẩn tích lũy PHA với thành phần chủ yếu PHB (98-99%) với 1-2% poly(3hydroxyvalerate) (PHV) [9] Khi sử dụng nguồn carbon fructose chủng sinh trưởng phát triển mạnh tích lũy PHB chủ yếu Trong nghiên cứu thành phần môi trường dinh dưỡng cần thiết cho sinh trưởng phát triển tích lũy PHB chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 MgSO4, KH2PO4 cao nấm men nghiên cứu tối ưu Nguyên liệu phương pháp 2.1 Nguyên liệu Đối tượng Chủng vi khuẩn ưa mặn Yangia sp NĐ199 phân lập từ đất rừng ngập mặn huyện Giao Thủy, tỉnh Nam Định Các loại môi trường sử dụng Môi trường giữ giống hoạt hóa vi khuẩn Yangia sp NĐ199 mơi trường chuyên dụng dùng cho vi khuẩn ưa mặn trung bình [9] (ký hiệu MT1) có thành phần g/l: NaCl, 45; MgSO4.7H2O, 0.25; CaCl2.2H2O, 0.09; KCl, 0.5; KBr, 0.06; peptone, 5; cao nấm men, 10; glucose, Môi trường sản xuất PHB (ký hiệu MT2) có thành phần g/l: NaCl, 45; MgSO4.7H2O, 0.25; CaCl2.2H2O, 0.09; KCl, 0,5; KBr, 0.06; KH2PO4, 0.25; cao nấm men, 1; fructose, 25 Các thành phần mơi trường hịa tan 1000ml nước cất, pH môi trường điều chỉnh đến 7.0 dung dịch 5M NaOH, môi trường đặc bổ sung 2% agar (20 g/l) Đ.V Thược, L.T Hồi / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 2.2 Phương pháp Hoạt hoá chủng nghiên cứu Cấy chủng Yangia sp NĐ199 môi trường MT1 đặc nhiệt độ 32 ºC 24 h, cấy chuyển sang môi trường MT1 lỏng, nuôi máy lắc với tốc độ 180 vòng/phút nhiệt độ 32 ºC 14 h, lúc chủng vi khuẩn hoạt hóa xong (giống vi khuẩn) sẵng sàng sử dụng cho thí nghiệm Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố dinh dưỡng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Bổ sung 5% giống vi khuẩn hoạt hóa 14 h vào bình nón 250 ml chứa 50 ml mơi trường MT2 lỏng, thành phần chất dinh dưỡng môi trường thay đổi theo công thức thí nghiệm: (1) thay đổi nồng độ MgSO4 (nồng độ g/l: 0.1, 0.25, 0.4, 0.55, 0.7, 0.85, 1), (2) thay đổi nồng độ KH2PO4 (nồng độ g/l: 0.1, 0.25, 0.4, 0.55, 0.7, 0.85), (3) thay đổi nồng độ cao nấm men (nồng độ g/l: 0.25, 0.5, 1, 1.5, 2) Chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 giữ tủ nuôi cấy nhiệt độ 32 oC với tốc độ lắc 180 vịng/phút Sau 30 h dịch ni cấy thu lại để xác định khối lượng tế bào khơ (CDW) hàm lượng PHB tích lũy tế bào Dựa vào CDW hàm lượng PHB tích lũy để đánh giá ảnh hưởng chất đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 Bổ sung 4% giống vi khuẩn hoạt hóa 14 h vào bình nón 250 ml chứa 50 ml mơi trường MT2 lỏng có thành phần 0.85 g/l MgSO4, 0.55 g/l KH2PO4, 1.5 g/l cao nấm men Đặt bình nón tủ lắc 180 vòng/phút 69 nhiệt độ 32 oC Lấy mẫu thời điểm: h, 16 h, 24 h, 32 h, 40 h, 48 h, 52 h Xác định khối lượng tế bào khô (CDW) hàm lượng PHB tích lũy tế bào Mẫu tế bào có chứa nhiều PHB giữ lại để chụp ảnh kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương Phương pháp xác định khối lượng tế bào khô (CDW) dịch nuôi cấy xác định hàm lượng PHB tích lũy tế bào chủng Yangia sp NĐ199 CDW xác định theo bước: chuẩn bị eppendorf ml đánh số thứ tự, sấy khô đến khối lượng không đổi sau cân để xác định khối lượng ban đầu (MO) eppendorf, hút lần lần ml dịch nuôi cấy cho vào eppendorf trên, li tâm 10000 vòng phút, giữ lại sinh khối tế bào, rửa sinh khối nước cất Sấy khô eppendorf chứa sinh khối đến khối lượng không đổi sau cân eppendorf để xác định khối lượng eppendorf tế bào (M) Tính khối lượng tế bào khơ (CDW) theo công thức: CDW (g/l) = (M – MO) x 250 Hàm lượng PHB tích lũy tế bào xác định theo phương pháp Law Slepecky (1961) [10], phương pháp đặc hiệu sử dụng để xác định hàm lượng PHB tích lũy tế bào vi sinh vật Theo phương pháp này, khoảng 10 mg sinh khối tế bào khơ có tích lũy PHB thủy phân 10 ml dung dịch 98% H2SO4 1.5 h nhiệt độ 100oC để thu axit crotonic, hỗn hợp sau để nguội nhiệt độ phịng Pha lỗng dịch thủy phân dung dịch 98% H2SO4 đo OD bước sóng 235 nm PHB tinh khiết sử dụng để xây dựng đồ thị chuẩn, dựa vào đồ thị chuẩn để xác định hàm lượng PHB mẫu thí nghiệm 70 Đ.V Thược, L.T Hồi / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 Kết thảo luận 3.1 Ảnh hưởng nồng độ MgSO4 đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Thơng thường PHB tích lũy tế bào vi khuẩn môi trường sống dư thừa nguồn carbon thiếu ngun tố dinh dưỡng ví dụ N, P, Mg, O, S…[1, 2] Trong nghiên ảnh hưởng nồng độ MgSO4 tới sinh trưởng khả tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 nghiên cứu Kết thể hình Các nồng độ MgSO4 khác có ảnh hưởng khơng q lớn tới sinh trưởng phát triển tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Khi nồng độ MgSO4.7H2O tăng từ 0.1 g/l đến g/l sinh khối tế bào tăng đạt giá trị cực đại (4.2 g/l) nồng độ g/l MgSO4.7H2O Đồng thời với sinh trưởng phát triển, hàm lượng PHB tích lũy tế bào tăng tăng nồng độ MgSO4.7H2O đạt giá trị cực đại (62%) nồng độ độ 0.85 g/l MgSO4.7H2O, sau hàm lượng PHB giảm cịn 56% nồng độ g/l MgSO4.7H2O Như vậy, nhận thấy khối lượng PHB thu cao (2.48 g/l) nồng độ 0.85 g/l MgSO4.7H2O Hình Ảnh hưởng nồng độ MgSO4 đến sinh khối tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Hình Ảnh hưởng nồng độ KH2PO4 đến sinh trưởng khả tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 3.2 Ảnh hưởng nồng độ KH2PO4 đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng Yangia sp Đ199 Theo nghiên cứu trước nồng độ photphorus ảnh hưởng tương đối lớn tới khả tích lũy PHB chủng vi khuẩn [3], chúng tơi tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng KH2PO4 tới sinh trưởng phát triển tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Kết thí nghiệm cho thấy, nồng độ KH2PO4 khác có ảnh hưởng lớn tới sinh trưởng phát triển tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Khi nồng độ KH2PO4 tăng sinh khối tế bào tăng đạt giá trị cao (4.8 g/l) nồng độ 0.55 g/l KH2PO4 Đồng thời với sinh trưởng phát triển, hàm lượng PHB tích lũy tế bào tăng tăng nồng độ KH2PO4 đạt giá trị cực đại (74%) nồng độ độ 0.55 g/l KH2PO4 Sau sinh trưởng khả tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 giảm dần tăng nồng độ KH2PO4, sinh khối tế bào hàm lượng PHB tích lũy cịn 4.5 g/l 69% nồng độ 0.85 g/l KH2PO4 (Hình 2) Hàm lượng PHB (3.6 g/l) Đ.V Thược, L.T Hồi / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 sinh khối tế bào khô đạt giá trị cực đại nồng độ 0.55 g/l KH2PO4 (Hình 2) Hình Ảnh hưởng hàm lượng cao nấm men đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 3.3 Ảnh hưởng hàm lượng cao nấm men đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Hàm lượng cao nấm men có ảnh hưởng tới sinh trưởng vi khuẩn nói chung chủng Yangia sp NĐ199 nói riêng Thông thường, cao nấm men nguồn nitơ tốt cho sinh trưởng vi khuẩn Tuy nhiên, chủng Yangia sp NĐ199 hàm lượng cao nấm men cịn ảnh hưởng tới khả tích lũy PHB tế bào Chính chúng tơi tiến hành thí nghiệm nhằm tìm nồng độ cao nấm men thích hợp sinh khối cao đồng thời tế bào tích lũy hàm lượng PHB cao Hình cho thấy vi khuẩn sinh trưởng nồng độ cao nấm men thấp g/l, sinh trưởng nên khối lượng PHB thu nhỏ Khi hàm lượng cao nấm men mơi trường tăng sinh khối tế bào tăng (Hình 3) Tuy nhiên, tăng hàm lượng cao nấm men lên g/l hàm lượng PHB tích lũy giảm sinh khối tế bào khô giảm Do PHB tích lũy điều kiện dư thừa nguồn carbon thiếu tới mức giới hạn nguyên tố dinh dưỡng [1] Mà tăng hàm lượng cao nấm men nghĩa tăng hàm lượng chất dinh dưỡng tích lũy PHB bị ức chế Khi 71 hàm lượng cao nấm men 1.5 g/l nhận thấy dung dịch lên men đục có màu trắng bạc Phân tích hàm lượng PHB nhận thấy chủng tích lũy PHB cao nhất, đạt 77,8% đồng thời sinh khối tế bào thu tương đối cao (4.8 g/l) Kết nghiên cứu tương tự nghiên cứu Quillaguamán đồng tác giả chủng vi khuẩn ưa mặn trung bình Halomonas boliviensis LC1 [11] Khi tăng nồng độ cao nấm men chất dinh dưỡng khác sinh khối tế bào hàm lượng PHB tích lũy tế bào tăng, nhiên tăng cao lượng PHB tích lũy giảm áp suất thẩm thấu tăng điều kiện cân dinh dưỡng (điều kiện thuận lợi để vi sinh vật tích lũy PHA) khơng cịn 3.4 Nghiên cứu lựa chọn thời gian ni cấy phù hợp Trong q trình làm thí nghiệm nhận thấy thời điểm khác tốc độ sinh trưởng khả tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 khác Việc tìm thời điểm chủng có khả sinh trưởng tốt tích lũy PHB cao có ý nghĩa lớn q trình làm thí nghiệm thực tế Do chúng tơi tiến hành thí nghiệm nghiên cứu động thái sinh trưởng tích lũy PHB tế bào chủng Yangia sp NĐ199 Kết thể hình Hình Sự sinh trưởng tích lũy PHB chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 theo thời gian nuôi cấy 72 Đ.V Thược, L.T Hồi / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 Kết cho thấy, theo thời gian nuôi cấy sinh khối tế bào tăng dần hàm hượng PHB tích lũy tăng dần Tại thời điểm h, sinh khối tế bào đạt 0.025 g/l tế bào chưa tích lũy PHB Tại thời điểm 16 h, sinh khối tế bào chưa cao chủng bắt đầu tích lũy PHB, hàm lượng PHB đạt gần 44% thời điểm Trong khoảng thời gian từ 32 h đến 48 h sinh khối tế bào tăng nhiên tích lũy PHB nhiên tích lũy PHB tăng chậm (Hình 4) Hàm lượng PHB đạt cực đại sau 48 h nuôi cấy (77.5%), thời điểm sinh khối tế bào đạt giá trị cao (5 g/l) Tiếp tục nuôi cấy thu sinh khối tế bào, nhận thấy 52 h sinh khối tế bào bắt đầu giảm đặc biệt hàm lượng PHB tích lũy tế bào giảm mạnh Có thể lúc chất dinh dưỡng môi trường cạn kiệt nên PHB – nguồn carbon tích lũy tế bào bị phân hủy để cung cấp dinh dưỡng trì sinh trưởng vi khuẩn Như kết nghiên cứu thời điểm thuận lợi để dừng thí nghiệm thu sinh khối tế bào PHB 40-48 h sau ni cấy Hình Ảnh kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) tế bào chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 có chứa hạt PHB màu trắng Đ.V Thược, L.T Hồi / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 So sánh hàm lượng PHB tích lũy tế bào chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 với chủng vi khuẩn Alcaligenes eutrophus (nay gọi Cupriavidus necator) - dùng để sản xuất PHB quy mô công nghiệp nhận thấy: hàm lượng PHB mà chủng Yangia sp NĐ199 tích lũy (khoảng 77.5% khối lượng tế bào khơ) tương đương với chủng C.necator nghiên cứu Linko đồng tác giả (1993) [12] (khoảng 69% khối lượng tế bào khô) sử dụng nguồn carbon fructose sau 48 h nuôi cấy Sinh khối tế bào chủng Yangia sp NĐ199 thời điểm 48 h nuôi cấy giữ lại để tiến hành chụp ảnh hiển vi điện tử viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương Hình cho thấy hạt PHB màu trắng chiếm toàn khoang tế bào chất, tế bào chứa khoảng 1-2 hạt PHB kích thước hạt tương đối lớn dao động từ 0.3 đến 1.3µm (Hình 5C) Hạt PHB tích lũy tế bào chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 lớn nhiều so với kích thước hạt PHB mơ tả trước (khoảng 3-15 hạt/tế bào kích thước hạt khoảng 0.2 đến 0.5µm) [5] Kết hình 5B cho thấy lớp thành màng bao quanh tế bào chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 mỏng (chỉ khoảng 19nm) tế bào tích lũy nhiều PHB Khả tích lũy lượng PHB lớn, hạt PHB to đồng thời thành tế bào mỏng lợi lớn chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 đặc biệt trình tách chiết tinh sau Việc tinh dễ dàng thành tế bào mỏng nên dễ dàng bị phá vỡ, hiệu suất thu hồi PHB cao hạt PHB to nên dễ thu hồi lọc dễ lắng ly tâm Kết luận Chúng nghiên cứu tìm mơi trường thích hợp cho sinh trưởng phát triển sinh tổng hợp PHB chủng vi khuẩn 73 Yangia sp NĐ199 Lượng sinh khối hàm lượng PHB tích lũy đạt g/l 77.5% sau 48 h nuôi cấy môi trường MT2 có sử dụng: 0.85g/l MgSO4, 0.55g/l KH2PO4, 1.5 g/l cao nấm men Với khả tích lũy hàm lượng PHB cao, hạt PHB to đồng đồng thời thành màng tế bào mỏng nên chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 có nhiều tiềm để phát triển sản xuất quy mô công nghiệp Các nghiên cứu nồi lên men tiến hành Tài liệu tham khảo [1] A.J Anderson, E.D Dawes, Occurrence, metabolism, metabolic role, and industrial uses of bacterial polyhydroxyalkanoates Microbiology Review 54 (1990) 450-472 [2] S.P Valappil, A.R Boccaccini, C Bucke, I Roy, Polyhydroxyalkanoates in Gram-positive bacteria: insights from the genera Bacillus and Streptomyces Antonie van Leeuwenhoek 91 (2007) 1-17 [3] S.Y Lee, Bacterial polyhydroxyalkanoates Biotechnology and Bioengeneering 49 (1996a) 1-14 [4] S.Y Lee, Plastic bacteria? Progress and prospects for polyhydroxyalkanoate production in bacteria Trends Biotechnology 14 (1996b) 431-438 [5] K Sudesh, H Abe, Y Doi, Synthesis, structure and properties of polyhydroxyalkanoates: biological polyesters Progress in Polymer Science 25 (2000) 1503-1555 [6] S Philip, T Keshavarz, I Roy, Polyhydroxyalkanoates: biodegradable polymers with a range of applications Journal of Chemical Technology and Biotechnology 82 (2007) 233-247 [7] G Du, J Chen, J Yu, S Lun, Continuous production of poly-3-hydroxybutyrate by Ralstonia eutropha in a two-stage culture system Journal of Biotechnology 88 (2001) 5965 [8] J Choi, S.Y Lee, Factors affecting the economics of polyhydroxyalkanoate production by bacterial fermentation Applied Microbiology and Biotechnology 51 (1999)13-21 74 Đ.V Thược, L.T Hồi / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 31, Số (2015) 67-74 [9] D Van-Thuoc, T Huu-Phong, N Thi-Binh, N Thi-Tho, D Minh-Lam, J Quillaguamán, Polyester production by halophilic and halotolerant bacterial strains obtained from mangrove soil samples located in Northern Vietnam MicrobiologyOpen (2012) 395-406 [10] J.H Law, R.A Slepecky, Assay of poly-bhydroxybutyric acid Journal of Bacteriology 82 (1961) 33-36 [11] J Quillaguamán, M Munoz, B Mattiasson, R Hatti-Kaul, Optimizing conditions for poly(betahydroxybutyrate) production by Halomonas boliviensis LC1 in batch culture with sucrose as carbon source Applied Microbiology and Biotechnology 74 (2007) 981-986 [12] S Linko, V Hanna, J Seppälä, Production of poly-β-hydroxybutyrate by Alcaligenes eutrophus on different carbon sources Applied Microbiology and Biotechnology 39 (1993) 11-15 Effect of Medium Composition on Cell Growth and poly(3hydroxybutyrate) Production by Yangia sp ND199 Đoàn Văn Thược, Lưu Thị Hồi Faculty of Biology, Hanoi National University of Education, 136 Xuan Thuy, Hanoi, Vietnam Abstract: In this study the effect of different nutrient concentrations in the culture medium such as KH2PO4, MgSO4 and yeast extract on cell growth and PHB synthesis was study Our results demonstrated that high CDW of g/l and PHB content of 77.5% were obtained after 48 h of cultivation when 0.85 g/l MgSO4, 0.55 g/l KH2PO4, and 1.5 g/l yeast extract were supplied in the culture medium Transmission electron microscopy pictures of bacterial cells after 48 h cultivation shown that there were about 1-2 PHB granules per cell with diameter of 0.3 to 1.3 µm The PHB granules fulfilled the cytoplasm of all bacterial cells Yangia sp ND199 with the capacity of fast growth and synthesis of high PHB content is an attractive option for further study Keywords: halophilic bacteria, polyhydroxyalkanoate, poly(hydroxybutyrate), polymer, Yangia sp NĐ199 ... Hình Ảnh hưởng nồng độ MgSO4 đến sinh khối tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 Hình Ảnh hưởng nồng độ KH2PO4 đến sinh trưởng khả tích lũy PHB chủng Yangia sp NĐ199 3. 2 Ảnh hưởng nồng độ KH2PO4 đến. .. Dựa vào CDW hàm lượng PHB tích lũy để đánh giá ảnh hưởng chất đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng vi khuẩn Yangia sp NĐ199 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng vi khuẩn. .. độ 32 ºC 14 h, lúc chủng vi khuẩn hoạt hóa xong (giống vi khuẩn) sẵng sàng sử dụng cho thí nghiệm Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố dinh dưỡng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng tích lũy PHB chủng Yangia
Ngày đăng: 18/03/2021, 10:28
Xem thêm:
