Nghiên cứu về listeria monocytogenes trong các sản phẩm thuỷ sản

LỜI CẢM ƠN Chân thành cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Kỹ Thuật Công Nghệ Thành phố Hồ Chí Minh, Ban Chủ nhiệm Khoa Cơng nghệ sinh học Môi trường quý Thầy, Cô truyền đạt kiến thức dạy dỗ tơi suốt khóa học Chân thành cảm ơn thầy Phạm Minh Nhựt trường Đại học Kỹ thuật cơng nghệ Thành phố Hồ Chí Minh, tận tình hướng dẫn tơi suốt q trình thực hoàn thành tốt đề tài Chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Công ty Cổ phần Con heo vàng, khu công nghiệp Long Hậu, tỉnh Long An, cô Nguyễn Thị Quốc Hương, cô, chú, bác cơng nhân cơng ty tận tình dạy thực tế đóng góp nhiều ý kiến xác đáng suốt q trình tơi thực tập cơng ty, trang bị đủ kiến thức sản xuất thực tế trường làm việc Cảm ơn gia đình nhũng người thân giúp đở, động viên mặt vật chất tinh thần suốt q trình học tập hồn thành đề tài tốt nghiệp Chân thành cảm ơn tất bạn bè lớp 07CSH trường Đại học Kỹ khuật công nghệ Thành phố Hồ Chí Minh giúp đở, động viên tơi học tập sống Xin chân thành cảm ơn ! TP Hồ Chí Minh Ngày 15 tháng 07 năm 2010 Võ Thành Hưng DANH SÁCH CÁC BẢNG BIỂU Trang Bảng 2.1: Phân biệt kháng nguyên O, H, Vi Bảng 2.2: Đặc điểm sinh hóa – Phân biệt lồi loài Campylobacter 11 Bảng 2.3: Khả gây bệnh Campylobacter .13 Bảng 2.4: Đặc điểm số loài Listeria monocytogenes 26 Bảng 2.5: Bộ gen loài L monocytogenes .28 Bàng 2.6: Chức gen hoạt động tạo độc tố L monocytogenes 29 Bảng 2.7: So sánh tỷ lệ tử vong gây L monocytogenes tác nhân khác 38 Bảng 2.8: Tỷ lệ phát có mặt L monocytogenes thịt gia súc nghiên cứu số quốc gia giới .39 Bảng 2.9: Giới hạn phát cho phép L monocytogenes sản phẩm thủy hải sản .40 Bảng 2.10: Tính chất sinh hóa L monocytogenes 46 DANH SÁCH CÁC ẢNH Trang Hình 2.1: Salmonela vi khuẩn chuyên chở bệnh thương hàn Hình 2.2: Các kháng nguyên bề mặt Salmonella Hình 2.3: Viêm dày – ruột Hình 2.4: Phẩy khuẩn Campylobacter 10 Hình 2.5: Escherichia Coli 14 Hình 2.6: L monocytogenes .24 Hình 2.7: Tế bào vi khuẩn L monocytogenes Gram (+) .24 Hình 2.8: Lơng roi L monocytogenes 25 Hình 2.9: Cấu tạo tế bào L monocytogenes .27 Hình 2.10: Vị trí tổ hợp gen qui định độc tố L monocytogenes 28 Hình 2.11: Quá trình xâm nhiễm tác hại L monocytogenes 32 Hình 2.12: Quá trình xâm nhiễm lây lan L monocytogenes 33 Hình 2.13: Cách xâm nhiễm nội bào L monocytogenes 34 Hình 2.14: Cơ chế phản ứng ELISA 48 DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT VP: Voges – Proskauer c-AMP: Cycle adenosine – monophosphate c-GMP: Cycle guaosine – monophosphate STEC: Shiga toxin – produsing E Coli VTEC: Verotoxigenic E Coli EHEC: Enterohaemorrhagic E Coli EPEC: Enteropathogenic E Coli ETEC: Enterotoxingenic E Coli EAEC: Enteroaggegative E Coli EIEC: Enteroinvasave E Coli Prfa: Positiv regulatory factor A P: Prolih E: Glutamic acid S: Serine T: Threonine ELISA: Enzyme Linked Immunosorbent PCR: Polymerase Chain Reaction MỤC LỤC Trang Chương I: Giới thiệu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Nội dung nghiên cứu .3 Chương II: Tổng quan 2.1 Tổng quan số vi sinh vật nhiễm thực phẩm 2.1.1 Salmonella SP .5 2.1.1.1 Phân loại 2.1.1.2 Đặc điểm 2.1.1.3 Cấu trúc kháng nguyên 2.1.1.4 Yếu tố độc lực 2.1.1.5 Khả gây bệnh 2.1.2 Campylobacter SP 10 2.1.2.1 Phân loại 10 2.1.2.2 Đặc điểm 10 2.1.2.3 Cấu trúc kháng nguyên 11 2.1.2.4 Yếu tố độc lực 12 2.1.2.5 Khả gây bệnh 12 2.1.3 Escherichia Coli 14 2.1.3.1 Phân loại 14 2.1.3.2 Đặc điểm 14 2.1.3.3 Cấu trúc kháng nguyên 15 2.1.3.4 Yếu tố độc lực 16 2.1.3.5 Khả gây bệnh 19 2.2 Giới thiệu Listeria monocytogenes 22 2.2.1 Lịch sử phát 22 2.2.2 Phân loại 23 2.2.3 Đặc điểm 24 2.2.3.1 Đặc điểm chung .24 2.2.3.2 Đặc điểm sinh hóa 25 2.2.4 Cấu trúc .27 2.2.4.1 Cấu trúc tế bào 27 2.2.4.2 Cấu trúc phân tử .27 2.2.5 Yếu tố độc lực 28 2.2.5.1 Listeriolysin O 29 2.2.5.2 Vai trò yếu tố độc lực trình xâm nhiễm L monocytogenes 31 2.2.6 Con đường xâm nhiễm .32 2.2.7 Khã gây bệnh .35 2.2.7.1 Trên người .35 2.2.7.2 Trên động vật 35 2.2.8 Phân bố 36 2.2.9 Tình hình nhiễm Listeria monocytogenes sản phẩm hủy sản giới Việt Nam .37 2.2.9.1 Tình hình giới 37 2.2.9.2 Tình hình Việt Nam 39 2.3 Các phương pháp phát Listeria monocytogenes 40 2.3.1 Phương pháp truyền thống 40 2.3.1.1 Nguyên lý phương pháp 40 2.3.1.2 Phạm vi áp dụng 40 2.3.1.3 Dụng cụ, môi trường thuốc thử 40 2.3.1.4 Chuẩn bị môi trường mẫu thử 43 2.3.1.5 Phương pháp tiến hành 43 2.3.2 Các phương pháp đại 47 2.3.2.1 Phương pháp ELISA 47 2.3.2.2 Phương pháp PCR 48 2.3.2.3 Phương pháp lai phân tử 56 Chương III: Kết luận kiến nghị .57 3.1 Kết luận 58 3.2 Kiến nghị 58 Tài liệu tham khảo 59 Phụ lục 60 ... có mặt L monocytogenes thịt gia súc nghiên cứu số quốc gia giới .39 Bảng 2.9: Giới hạn phát cho phép L monocytogenes sản phẩm thủy hải sản .40 Bảng 2.10: Tính chất sinh hóa L monocytogenes. .. Tình hình nhiễm Listeria monocytogenes sản phẩm hủy sản giới Việt Nam .37 2.2.9.1 Tình hình giới 37 2.2.9.2 Tình hình Việt Nam 39 2.3 Các phương pháp phát Listeria monocytogenes. .. độc tố L monocytogenes 28 Hình 2.11: Quá trình xâm nhiễm tác hại L monocytogenes 32 Hình 2.12: Quá trình xâm nhiễm lây lan L monocytogenes 33 Hình 2.13: Cách xâm nhiễm nội bào L monocytogenes