Thực hành sinh hóa

THỰC HÀNH SINH HÓA THỰC HÀNH SINH HÓA TS. ĐỖ HIẾU LIÊM TS. ĐỖ HIẾU LIÊM THỰC HÀNH SINH HÓA ĐỘNG VẬT • Bài 1: Thực nghiệm các hợp chất glucid • Bài 2: Thực nghiệm các hợp chất lipid và enzyme • Bài 3: Thực nghiệm các hợp chất amno acid và protein • Bài 4: Thực nghiệm các hợp chất vitamin và khoáng chất • Nhóm thực hành 4 tiểu nhóm • Mỗi tiểu nhóm thực hành 1 bài Sinh viên mặc áo blouse và tuân theo nội qui THỰC NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT GLUCID 1. PHẦN ĐỊNH TÍNH 1.1. Phản ứng Molisch 1.2. Phản ứng Seliwanoff 1.3. Phản ứng Benedict 1.4. Phản ứng định tính amidon - Phản ứng màu amidon với iod - Phản ứng phân giải amidon bằng acid vô cơ đậm đặc 2. PHẦN ĐỊNH LƯỢNG Định hàm lượng glucose trong máu BÀI 1 1. PHẦN ĐỊNH TÍNH 1.1. Phản ứng Molisch Polysaccharide Monosaccharide Glucose Ribose Fructose Hexose Pentose H 2 SO 4 đđ H 2 SO 4 đđ α.1, 4 α.1, 6 Glucose FructoseRibose O CHO Furfural Thuốc thử Màu đặc trưng Hydroxymethyl furfural O CHOHOH 2 C Dihydroxymethyl furfural CH 2 OH HOH 2 C O GLUCOS E H 2 SO 4 đđ α.Napthol Hydroxymethyl furfural Vòng nhẫn màu tím GLUCOSE OH α Napthol H 2 SO 4 đđ Vòng nhẫn màu tím giữa 2 lớp dung dịch Xác định sự hiện diện hợp chất glucid 1.2. Phản ứng Seliwanoff FRUCTOS E HCl đđ Resorcinol Dihydroxymethyl furfural Dung dịch màu đỏ Dung dịch màu đỏ Fructose Resorcinol + HCl đđ 1.3. Phản ứng Benedict GLUCOSE TT Benedict Nhiệt độ Kết tủa vàng cam Kết tủa vàng cam Kết tủa đỏ Kết tủa đỏ Kết tủa đen Kết tủa đen Nhiệt độ Nhiệt độ Glucose Sodium Citrate + CuSO 4 CuOCu 2 O Xác định sự hiện diện ketose Xác định tính khử 1.4. Phản ứng định tính amidon 1.4.1. Phản ứng màu amidon + iod 1.4.2. Phản ứng phân giải amidon bằng acid vô cơ đậm đặc AMIDON AMILOPECTIN AMILOSE AMILOSE Iod (Lugol) Na 2 S 2 O 3 Na 2 S 2 O 3 AMIDON H 2 SO 4 20%PhenolphtaleinNaOH Benedict Seliwanoff Làm lạnh Làm lạnh 2. ĐỊNH HÀM LƯỢNG GLUCOSE TRONG MÁU (Phương pháp Somogyi-Nelson) 1.Máu + Ba(OH) 2 + ZnSO 4 2.Ly tâm + lấy nước trong 3.DD Somogyi DD Somogyi (Cu 2 SO 4 ) 4.DD Nelson DD Nelson (Arsenomolybdate) H 2 O 1 1 Nước cất 2 2 Glucose máu 3 3 Glucose chuẩn    5.QUANG PHỔ KẾ λ = 520 nm Cách thủy 70 0 C 0.000 A 2 A 3 A 2 : Độ hấp thu của glucose máu xét nghiệm A 3 : Độ hấp thu của glucose chuẩn Công thức tính: 0.05x A 100x A x 0.05 (mg%)máu Glucose 3 2 = THỰC NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT LIPID VÀ ENZYME 1.THỰC NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT LIPID 1.1. Độ hòa tan và nhũ hóa triacylglycerol 1.2. Khảo sát sắc tố mật 1.3. Khảo sát thể ketone 2.THỰC NGHIỆM CÁC ENZYME 2.1.Khảo sát enzyme catalase trong hồng cầu 2.2.Khảo sát hoạt lực enzyme amylase trong huyết thanh BÀI 2 1.THỰC NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT LIPID 1.THỰC NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT LIPID Độ hòa tan Dầu + Alcohol Dầu + Alcohol Dầu + Acetone Dầu + Acetone Độ nhũ hóa Dầu + Xà phòng Dầu + Xà phòng Dầu + Mật Dầu + Mật Dầu + Muối kiềm Dầu + Muối kiềm 1.1.Độ hòa tan và nhũ hóa triacylglycerol 1.2. Khảo sát sắc tố mật (Bilirubine và biliverdine) Mật Mật Mật Mật HNO 3 đđ HNO 3 đđ I 2 1.3. Khảo sát thể ketone • Acetone • Acetoacetic acid • β.Hydroxy butyric acid • Acetone • Acetoacetic acid • β.Hydroxy butyric acid Ketone Ketone Ketone Ketone Sodium nitroprusside Sodium nitroprusside Sodium nitroprusside Sodium nitroprusside NaOH NaOH (NH 4 ) 2 SO 4 (NH 4 ) 2 SO 4 NH 4 OH NH 4 OH Phản ứng Gmelin Phản ứng Smith Phản ứng Legal Phản ứng Rothera [...]...2 THỰC NGHIỆM CÁC ENZYME 2 THỰC NGHIỆM CÁC ENZYME 2.1 Khảo sát enzyme catalase trong hồng cầu MÁU H2O2 MÁU H2O NaCN2 NaCN Hồng cầu 22 NaCN Catalase Hồng cầu 11 Catalase MÁU H2O2 Hồng cầu(đ) 33 Catalase 2.2 Khảo sát hoạt lực enzyme catalase trong huyết thanh NaCl 0.9% Amidon Iod NaCl 0.9% Amidon Iod Huyết thanh Huyết thanh 370C 370C 11 22 33 44 55 370C 66 77 88 99 BÀI 3 THỰC NGHIỆM CÁC... Protein tổngsố (g%) số (g%) = = X (g%) X protein Hàm lượng(g%) tổng-số trong huyết thanh (g%) X (g%) X (g%) ? Y (g%) ? Y (g%) Albumin (g%) Albumin (g%) Y (g%) Y (g%) Chỉ số khúc xạ BÀI 4 THỰC NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT VITAMIN VÀ KHÓANG CHẤT 1.Định lượng vitamin C trong huyết thanh 2.Định lượng calcium trong huyết thanh 3.Định lượng phospho vô cơ trong huyết thanh 1 ĐỊNH LƯỢNG VITAMIN C TRONG HUYẾT THANH (Phương . THỰC HÀNH SINH HÓA THỰC HÀNH SINH HÓA TS. ĐỖ HIẾU LIÊM TS. ĐỖ HIẾU LIÊM THỰC HÀNH SINH HÓA ĐỘNG VẬT • Bài 1: Thực nghiệm các hợp chất. vitamin và khoáng chất • Nhóm thực hành 4 tiểu nhóm • Mỗi tiểu nhóm thực hành 1 bài Sinh viên mặc áo blouse và tuân theo nội qui THỰC NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT GLUCID