Nghiên cứu một số loài Malassezia sp gây bệnh lang ben ở bệnh nhân đến khám tại Bệnh viện Da liễu Trung Ương

Nghiên cứu một số loài Malassezia sp gây bệnh lang ben ở bệnh nhân đến khám tại Bệnh viện Da liễu Trung Ương Nghiên cứu một số loài Malassezia sp gây bệnh lang ben ở bệnh nhân đến khám tại Bệnh viện Da liễu Trung Ương luận văn tốt nghiệp thạc sĩ

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ========= NGUYỄN THỊ THO NGHIÊN CỨU MỘT SỐ LOÀI MALASSEZIA SP GÂY BỆNH LANG BEN Ở BỆNH NHÂN ĐẾN KHÁM TẠI BỆNH VIỆN DA LIỄU TRUNG ƢƠNG LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC HÀ NỘI – 2018 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ========= NGUYỄN THỊ THO NGHIÊN CỨU MỘT SỐ LOÀI MALASSEZIA SP GÂY BỆNH LANG BEN Ở BỆNH NHÂN ĐẾN KHÁM TẠI BỆNH VIỆN DA LIỄU TRUNG ƢƠNG Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số : 60420107 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS PHẠM THẾ HẢI HÀ NỘI – 2018 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực luận văn tốt nghiệp, nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ dẫn tận tình Trước tiên, tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc, phịng Tổ chức cán bệnh viện Da liễu Trung ương tạo điều kiện thuận lợi cho suốt q trình học tập Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Phạm Thế Hải, người thầy hướng dẫn giúp tơi hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Trần Cẩm Vân tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình thực luận văn Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Nguyễn Hữu Sáu, kiến thức quý báu giúp đỡ tuyệt vời thầy giúp thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn cán phòng xét nghiệm Nấm, tập thể khoa Vi sinh, nấm, ký sinh trùng - Bệnh viện Da liễu Trung ương giúp đỡ, động viên khích lệ tơi nhiều suốt thời gian thực luận văn thạc sĩ Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo Bộ môn Vi sinh vật học thầy cô thuộc Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội mang đến kiến thức quý báu tạo điều kiện thuận lợi cho học tập, nghiên cứu trường Sau cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến gia đình, người thân bạn bè ln sát cánh động viên, khích lệ giúp đỡ tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quí báu đó! Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Học viên Nguyễn Thị Tho DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT BN : Bệnh nhân KHV : Kính hiển vi M caparae : Malassezia caparae M cuniculi : Malassezia cuniculi M dermatis : Malassezia dermatis M equina : Malassezia equina M furfur : Malassezia furfur M globosa : Malassezia globosa M japonica : Malassezia japonica M nana : Malassezia nana M obtusa : Malassezia obtusa M pachydermatis : Malassezia pachydermatis M restricta : Malassezia restricta M slooffiae : Malassezia slooffiae M sympodialis : Malassezia sympodialis M yamatonensis : Malassezia yamatoensis Malassezia spp : Malassezia species plus P orbiculair : Pityrosporum orbiculair P ovale : Pityrosporum ovale NaOH : Natri hydroxit TB/VT : Tế bào/Vi trƣờng KL : Khuẩn lạc ĐK : Đƣờng kính MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Lịch sử nấm Malassezia bệnh lang ben 1.2 Đặc điểm sinh học Malassezia spp 1.3 Cơ chế gây bệnh 1.4 Một số yếu tố thuận lợi 1.5 Lang ben số biểu bênh lý khác nấm Malassezia 1.5.1 Bệnh lang ben Malassezia 1.5.2 Một số bệnh lý khác nấm Malassezia 10 1.6 Đặc điểm đa dạng phân bố loài Malassezia gây bệnh lang ben 11 1.7 Các phƣơng pháp chẩn đoán Malassezia bệnh lang ben 12 1.8 Tình hình bệnh lang ben nghiên cứu nấm Malassezia gây bệnh lang ben giới Việt Nam 13 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 17 2.1.1 Tiêu chuẩn chẩn đoán 17 2.1.2 Tiêu chuẩn lựa chọn 17 2.1.3 Tiêu chuẩn loại trừ 17 2.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 17 2.3 Vật liệu nghiên cứu 18 2.3.1 Trang thiết bị, dụng cụ 18 2.3.2 Hóa chất 18 2.3.3 Môi trƣờng 18 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 2.4.1 Thiết kế nghiên cứu 19 2.4.2 Cỡ mẫu nghiên cứu 19 2.4.3 Các kỹ thuật nghiên cứu 19 2.5 Các tiêu nghiên cứu 24 2.5.1 Các tiêu đánh giá cho mục tiêu nghiên cứu 24 2.5.2 Các tiêu đánh giá cho mục tiêu nghiên cứu 25 2.6 Phƣơng pháp xử lý số liệu 25 2.7 Các biện pháp hạn chế sai số 26 2.8 Đạo đức nghiên cứu 26 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 28 3.1 Tỷ lệ bệnh lang ben bệnh nhân đến khám 28 3.1.1 Tình hình chung nhiễm bệnh lang ben 28 3.1.2 Phân bố bệnh lang ben theo mùa 29 3.1.3 Phân bố bệnh lang ben theo lứa tuổi bệnh nhân 31 3.1.4 Phân bố bệnh lang ben theo giới tính bệnh nhân 32 3.1.5 Phân bố bệnh lang ben theo nghề nghiệp bệnh nhân 33 3.2 Nghiên cứu đặc điểm sinh học tính đa dạng nấm men Malassezia spp gây bệnh lang ben phân lập đƣợc 34 3.2.1 Kết soi trực tiếp Malassezia kính hiển vi 34 3.2.2 Kết phân loại đánh giá tính đa dạng chủng Malassezia spp phân lập đƣợc từ vẩy da bệnh nhân lang ben 36 KẾT LUẬN 48 HƢỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Tình hình nhiễm bệnh lang ben bệnh nhân nghiên cứu 28 Bảng 3.2 Kết xét nghiệm soi trực tiếp từ vảy da 34 Bảng 3.3 Kết nuôi cấy từ vảy da bệnh nhân lang ben 36 Bảng 3.4 Đặc điểm lồi Malassezia mơi trƣờng SDA, mDixon 37 Bảng 3.5 Đặc điểm loài Malassezia thạch nghiêng TE CHROMagar Malassezia 37 Bảng 3.6 Đặc điểm sinh hóa lồi Malassezia 38 Bảng 3.7 Tổng hợp kết định danh chủng Malassezia theo loài 41 Bảng 3.8 Phân bố Malassezia gây bệnh lang ben theo giới 43 Bảng 3.9 Phân bố Malassezia gây bệnh lang ben theo địa dƣ 44 Bảng 3.10 Phân bố Malassezia gây bệnh lang ben theo màu sắc dát thƣơng tổn 45 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hoạt động Malassezia vi hệ da ngƣời chế gây bệnh số bệnh da Hình 1.2 Hình ảnh dát trắng (a) dát nâu (b) bệnh lang ben Hình 1.3 Hình ảnh giả sợi nấm vả tế bào nấm men Malassezia soi trực tiếp dung dịch NaOH 20% dƣới kính hiển vi vật kính 40x 13 Hình 3.1 Phân bố bệnh theo mùa năm 29 Hình 3.2 Tình hình bệnh nhân đến khám bệnh theo tháng năm 30 Hình 3.3 Phân bố bệnh lang ben theo tuổi 31 Hình 3.4 Phân bố bệnh theo giới 32 Hình 3.5 Phân bố bệnh theo nghề nghiệp 33 Hình 3.6 Kết thống kê hình thái Malassezia qua soi trực tiếp 35 Hình 3.7 Phân bố Malassezia gây bệnh lang ben theo nhóm tuổi 42 Hình 3.8 Phân bố Malassezia gây bệnh lang ben theo vị trí thƣơng tổn 46 Hình 3.9 Phân bố lồi Malassezia theo hình thái kính hiển vi 47 Luận văn thạc sỹ Khoa học Nguyễn Thị Tho ĐẶT VẤN ĐỀ Malassezia spp nấm men thuộc vi hệ da ngƣời động vật máu nóng Cho đến nay, phát đƣợc 14 loài thuộc vi nấm bao gồm: M globosa, M furfur, M dermatis, M sympodialis, M restricta, M obtusa, M slooffiae, M pachydermatis, M equina, M japonica, M cuniculi, M yamatoensis, M nana M caprae Các biểu bệnh lý Malassezia bao gồm: lang ben, viêm da dầu, viêm da địa, viêm nang lông, gàu da đầu… bệnh lang ben thƣờng gặp Bệnh gây ảnh hƣởng tới gần 1% dân số giới nói chung có báo cáo cho thấy số nƣớc có khí hậu nhiệt đới tỷ lệ bệnh lên tới 50% dân số [23] Tại Việt Nam, bệnh lang ben đƣợc miêu tả từ lâu có số nghiên cứu đề cập Theo tác giả Trần Lan Anh, bệnh lang ben chiếm 3,1% số ngƣời đƣợc khám, điều tra tỷ lệ mắc bệnh da xã Vĩnh Phúc, Thanh Trì, Hà Nội [9] Theo Phạm Văn Hiển cộng năm 1995, nghiên cứu đặc điểm bệnh ngồi da cơng ty Thƣợng Đình, Hà Nội tỷ lệ bệnh 3,5% [6] Tại Bệnh viện Da liễu Trung ƣơng, theo Nguyễn Thị Tuyết Mai cộng năm 1998, tỷ lệ bệnh 1,76% tổng số bệnh nhân đến phòng khám [2] Các phƣơng pháp định danh nấm nói chung Malassezia nói riêng chƣa phổ biến Việt Nam Sở dĩ nhƣ Malassezia khó ni cấy chúng không mọc môi trƣờng cấy nấm thông thƣờng mà cần điều kiện đặc biệt Tuy nhiên, việc xác định xác lồi nấm gây bệnh quan trọng, để bác sỹ lựa chọn phác đồ điều trị phù hợp với bệnh nhân Về mặt đại thể, loài vi nấm Malassezia có đặc điểm khuẩn lạc tƣơng đối giống nhau, nhƣng số đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa có khác biệt chủng Do đó, tìm hiểu đặc tính sinh học phân loại vi nấm Malassezia, từ đƣa phƣơng pháp định danh vi nấm xác cần thiết, phục vụ cho nghiên cứu Có Khoa Sinh học Khóa 2015-2017 Luận văn thạc sỹ Khoa học Nguyễn Thị Tho thể thấy, có số cơng trình nghiên cứu bệnh lang ben Việt Nam, phần lớn nghiên cứu cịn mang tính đơn lẻ địa phƣơng Vì tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu số loài Malassezia sp gây bệnh lang ben bệnh nhân đến khám Bệnh viện Da liễu Trung ƣơng” với mục tiêu: Xác định tỷ lệ bệnh lang ben bệnh nhân đến khám Bệnh viện Da liễu Trung ương từ 03/2017 đến tháng 02/2018 Tìm hiểu tính đa dạng lồi nấm men Malassezia gây bệnh lang ben Bệnh viện Da liễu Trung ương từ 03/2017 đến tháng 02/2018 Khoa Sinh học Khóa 2015-2017 ... nghiên cứu bệnh lang ben Việt Nam, phần lớn nghiên cứu cịn mang tính đơn lẻ địa phƣơng Vì tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Nghiên cứu số loài Malassezia sp gây bệnh lang ben bệnh nhân đến khám Bệnh viện. .. ========= NGUYỄN THỊ THO NGHIÊN CỨU MỘT SỐ LOÀI MALASSEZIA SP GÂY BỆNH LANG BEN Ở BỆNH NHÂN ĐẾN KHÁM TẠI BỆNH VIỆN DA LIỄU TRUNG ƢƠNG Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số : 60420107 LUẬN VĂN THẠC... viện Da liễu Trung ƣơng” với mục tiêu: Xác định tỷ lệ bệnh lang ben bệnh nhân đến khám Bệnh viện Da liễu Trung ương từ 03/2017 đến tháng 02/2018 Tìm hiểu tính đa dạng lồi nấm men Malassezia gây bệnh