Nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng gaba và amylase trong quá trình nảy mầm gạo lứt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN THỊ YẾN NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG GABA VÀ AMYLASE TRONG QUÁ TRÌNH NẢY MẦM GẠO LỨT CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Trường Giang Hà Nội - 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn thạc sỹ ‘’Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng GABA amylase trình nảy mầm gạo lứt’’ tơi thực Các số liệu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tất tham khảo kế thừa trích dẫn tham chiếu đầy đủ Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Học viên Nguyễn Thị Yến LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin bày tỏ kính trọng lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Trường Giang, người thầy hướng dẫn, động viên giúp đỡ em trình nghiên cứu viết luận văn Những nhận xét, đánh giá thầy, đặc biệt gợi ý hướng giải vấn đề suốt thời gian nghiên cứu, thực học quý giá đôi với em không trình viết luận văn mà q trình cơng tác sau Em xin bày tỏ lời biết ơn chân thành đến PGS.TS.Nguyễn Thanh Hằng, NCS Lưu Anh Văn thầy cô giáo, anh chị cán làm việc nghiên cứu phịng thí nghiệm Viện Công Nghệ Sinh Học Công Nghệ Thực Phẩm tận tình dẫn, truyền đạt ý kiến chuyên môn kinh nghiệm quý báu suốt trình thực đề tài nghiên cứu Em xin bày tỏ lời biết ơn sâu sắc đến gia đình người thân ln ủng hộ, động viên, tạo điều kiện cho em suốt thời gian học tập trường Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Học viên Nguyễn Thị Yến MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ .6 MỞ ĐẦU .8 CHƯƠNG – TỔNG QUAN 10 1.1 Tổng quan nguyên liệu .10 1.1.1 Nguyên liệu lúa 10 1.1.2 Giống lúa nếp Anh Đào 12 1.1.3 Giống lúa Tám Xoan 13 1.1.4 Giống lúa N97 13 1.1.5 Gạo lứt 14 1.1.6 Gạo lứt nảy mầm 15 1.2 Tổng quan GABA 19 1.2.1 Khái niệm GABA 19 1.2.2 Các nghiên cứu khoa học giới GABA gạo 20 1.2.3 Nghiên cứu nước yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng GABA gạo lứt 23 1.3 Tổng quan enzym amylase .23 1.3.1 Enzym α-amylase(E.C.3.2.1.1) 26 1.3.2 β-amylase (1,4-α-glucan-maltohydrolase) (EC 3.2.1.2) 28 1.3.3 Một số nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến hình thành enzym amylase trình gạo lứt nảy mầm 29 1.3.4 Ứng dụng amylase từ gạo lứt nảy mầm công nghệ thực phẩm 30 CHƯƠNG – VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Vật liệu 32 2.1.1 Nguyên liệu 32 2.1.2 Thiết bị 32 2.1.3 Hóa chất 32 2.2 Phương pháp nghiên cứu 33 2.2.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 33 2.2.2 Phương pháp phân tích 36 CHƯƠNG – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Nghiên cứu lựa chọn loại gạo lứt 41 3.1.1 Đánh giá thành phần dinh dưỡng nguyên liệu gạo lứt ban đầu 41 3.1.2 Ảnh hưởng thời gian ngâm đến thời gian hút nước bão hòa gạo lứt nhiệt độ phòng 30±2oC 42 3.1.3 Khả nảy mầm gạo lứt 44 3.1.4 Khả sinh tổng hợp α-amylase GAD trình gạo lứt nảy mầm 45 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố trình nảy mầm đến thay đổi hoạt độ α-amylase hàm lượng GABA hạt gạo lứt Anh Đào .47 3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng pH dịch ngâm đến thay đổi hoạt độ αamylase, GAD hàm lượng GABA trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm47 3.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến thay đổi hoạt độ α-amylase, GAD hàm lượng GABA trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm 51 3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian ủ đến thay đổi hoạt độ αamylase, GAD hàm lượng GABA trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm54 3.2.4 Đánh giá thành phần nguyên liệu gạo lứt Anh Đào sau nảy mầm 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60 Kết luận 60 Kiến nghị 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 PHỤ LỤC 69 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT BR: Brown rice Gạo lứt GBR: Germinated brown rice Gạo lứt nảy mầm GRR Germinated brown rough Bột gạo lứt RR Rough rice Bột gạo WR White rice Gạo trắng CK: Chất khô Mật độ quang OD: Optical Density GAD Glutamat decacboxylase (GAD) GABA γ-aminobutiric acid AIEW Alkaline electrolyzed water Nước kiềm điện phân DW Distilled wate Nước cất EOW Electrolyzed oxidizing water Nước oxy hóa điện phân Chu trình axit tricarboxylic (Chu trình Krebs) TCA DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Thành phần dinh dưỡng gạo lứt .14 Bảng 1.2 Một số nghiên cứu gạo lứt nảy mầm 21 Bảng 3.1: Thành phần dinh dưỡng ban đầu gạo lứt số giống lúa 41 Bảng 3.2: Đánh giá thành phần dinh dưỡng gạo lứt Anh Đào sau nảy mầm 58 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Hình 1.1: Cấu tạo hạt thóc .11 Hình 1.2: Thóc nếp Anh Đào 12 Hình 1.3: Gạo lứt Anh Đào .12 Hình 1.4: Gạo lứt nảy mầm .16 Hình 1.5 Các giai đoạn trình nảy mầm 17 Hình 1.6: Cấu trúc GABA 19 Hình 1.7: Cơ chế hình thành GABA 20 Hình 1.8: Sơ đồ chuyển hóa tinh bột tác dụng enzym α-amylase 27 Hình 1.9: Sơ đồ chuyển hóa tinh bột tác dụng enzym β-amylase 28 Hình 2.1: Quy trình thí nghiệm tổng quát 34 Hình 3.3: Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả nảy mầm gạo lứt 45 Hình 3.4: Ảnh hưởng nhiệt độ đến thay đổi hoạt độ enzym α-amylase trình gạo lứt nảy mầm 46 Hình 3.5: Ảnh hưởng nhiệt độ đến thay đổi hoạt độ enzym GAD trình gạo lứt nảy mầm .47 Hình 3.6: Ảnh hưởng pH đến thay đổi hoạt độ enzym α-amylase trình gạo lứt nảy mầm .48 Hình 3.7: Ảnh hưởng pH đến thay đổi hoạt độ enzym GAD trình gạo lứt nảy mầm 49 Hình 3.8: Ảnh hưởng pH đến thay đổi hàm lượng GABA trình gạo lứt nảy mầm .50 Hình 3.9: Các hạt gạo lứt Anh Đào nảy mầm điều kiện pH khác 51 Hình 3.10: Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến thay đổi hoạt độ enzym α-amylase trình gạo lứt nảy mầm .52 Hình 3.12: Ảnh hưởng nhiệt độ đến thay đổi hàm lượng GABA trình gạo lứt nảy mầm .53 Hình 3.13: Ảnh hưởng thời gian ủ đến thay đổi hoạt độ enzym α-amylase trình gạo lứt nảy mầm .54 Hình 3.14: Ảnh hưởng thời gian ủ đến thay đổi hoạt độ enzym GAD trình gạo lứt nảy mầm 55 Hình 3.15: Ảnh hưởng thời gian ủ đến thay đổi hàm lượng GABA trình gạo lứt nảy mầm .56 Hình 3.16: Các hạt gạo lứt Anh Đào nảy mầm thời gian khác .57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Đã lựa chọn loại gạo lứt cho nghiên cứu gạo lứt Anh Đào với điều kiện: thời gian ngâm gạo lứt hút nước bão hòa sau 30oC , pH 7.0 cho ẩm đạt 36.43% ; tỷ lệ nảy mầm cao đạt 99%, hoạt độ enzym α-amylase đạt 46.82 U/g, hoạt độ GAD đạt 6.32 U/g 35oC Đã xác định thông số ảnh hưởng đến hàm lượng GABA enzym αamylase trình nảy mầm gạo lứt Anh Đào - Lựa chọn điều kiện nảy mầm cho hàm lượng GABA cao đạt 231.76 mg/100g CK ngâm đệm pH 3, nhiệt độ ủ 35oC thời gian ủ 36 - Lựa chọn điều kiện nảy mầm cho hoạt độ enzym α-amylase cao đạt 109.11 U/g ngâm đệm pH 3, nhiệt độ ủ 35oC thời gian ủ 36 Đã đánh giá chất lượng gạo lứt Anh Đào sau nảy mầm: hàm lượng tinh bột đạt 65.53 %, lipit 2.49 %, protein 9.13 %, đường khử 2.04 %, tro 1.26 % Kiến nghị Cần tiếp tục nghiên cứu thêm yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng GABA hoạt độ enzym α-amylase trình nảy mầm gạo lứt Nghiên cứu ứng dụng gạo lứt nảy mầm vào sản xuất thực phẩm giàu dinh dưỡng Nghiên cứu ứng dụng enzym α-amylase gạo mầm vào trình chế biến dịch đường sản phẩm có tính prebiotic từ gạo lứt nảy mầm Tiếp tục khảo sát thay đổi chất có hoạt tính sinh học gạo lứt Anh Đào trình nảy mầm 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Anh Anuchita Moongngarm (2011), Influence of Germination Conditions on Starch, Physicochemical Properties, and Microscopic Structure of Rice Flour, International Conference on Biology, Environment and Chemistry IPCBEE vol.1: 78-82 Ashley Han (2015), Effect of Germination and Parboiling on Milling, Physicochemical, and Textural Properties of Medium- and Long-grain Rough Rice, A thesis submitted in partial fulfillment of the requirements for the degree of Master of Science in Food Science: 1-17 Ayernor, G.S and F.C.K Ocloo (2007), Physicochemical changes and diastatic activity associated with germinating paddy rice (PSB.Re 34), Afr J Food Sci, 1: 37-41 Banchuen, J (2010), Bio-active compounds in germinated brown rice and its application, The Degree of Doctor of Philosophy in Food Technology Prince of Songkla University: 6-63 Banchuen1, J., Thammarutwasik, P., Ooraikul, B., Wuttijumnong, P and Sirivongpaisal, P (2009), Effect of Germinating Processes on Bioactive Component of Sangyod Muang Phatthalung Rice, Thai Journal of Agricultural Science 42(4): 191-199 Bau M, Villaume C, Nicolas J, Mejean L (1997) Effect of germination on chemical composition, biochemical constituents and antinutritional factors of soya bean (Glycine max) seeds J Sci Food Agric 73:1-9 Bello M, Tolaba, M.P, ang Suarez, C (2004), Factors affecting water uptake of rice grain during soaking, Food Science and Technology Volume 37, Issue 8, Pages 811-816 Bewly and Black (1994), Seed physiology of development and germination, Plenum Press, Newyork 61 Charoenthaikij, P., K Jangchud, A Jangchud and P.Tungtrakul 2007 Effect of germination conditions on physicochemical properties of germinated brown rice flour, pp 193-198 In Proceeding of the 4th International Conference on Starch Technology Queen Sirikit National convention center, Bangkok, Thailand 6-7 November 2007 10 Chiang, P.Y., A.I Yel 2002 Effect of soaking on wet milling of rice, J Creal Sci, 35(1): 85-94 11 Chrastil, J (1990), Protein-starch interactions in rice grains influence of storage on oryzenin and starch, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 38(9), 1804-1809 12 De Rham, O., Jost, T (1979), Phytate protein interaction in soybean extracts and low phytate soy protein product, Journal of food science, 44(2): 596600 13 Deshpande, S.S., Cheryan, M (1984), Effects of Phytic Acid, Divalent Cations, and Their Interactions on α‐Amylase Activity, Journal of Food Science Volume 49, Issue 2, 516-519 14 Dong-Hwa Cho, Seung-Taik Lim (2016), Germinated brown rice and its biofunctional compounds, Food Chemistry 196: 259–271 15 Evelyn P Palmiano and Bienvenido Juliano (1972), Biochemical Changes in the Rice Grain during Germination, Plant Physiol, (1972) 49, 751-756 16 Fernandez DE, Qu R, Huang AHC, Staehelin LA (1988) Immunogold localization of the L3 protein of maize lipid bodies during germination and seedling growth Plant Physiol 86: 270-274 17 Galani, S el at (2011), Germination potential index of Sindh rice cultivars on biochemical basis, using amylase as an indicator, African Journal of Biotechnology, Vol 10(80), pp 18334-18338 18 Gamel TH, Mesallam AS, Damir, AA, Shekib LA, Linssen JP (2007) Characterization of amaranth seed oils J Food Lipids 14: 323-334 62 19 Gomez, K (1979), Effect of environment on protein and amylose content of rice Proceedings of the Workshop on Chemical Aspects of Rice Grain Quality, International Rice Research Institute, 59-65 20 Gujjaiah, S and Kumari, C (2013), Evaluation of changes in α-amylase, βamylase and protease during germination of cereals, International Journal of Agricultural Science and Research (IJASR), Vol 3, Issue 3, 55-62 21 Helland, M.H, Wicklund, T., Narvhus, J.A (2002), Effect of germination time on alpha-amylase production and viscosity of maize porridge, Food Research International, 35 : 315–321 22 Hyun Young Kim , (2012), Chemical and functional components in different parts of rough rice before and after germination, Food chemistry, 134: 288293 23 Jacobsen J.V., Gubler F., Kalla R and Roberts J.K (1995), “Gibberellin regulated expression of a myb gene in barley aleurone cells: evidence for Myb transactivation of a high - pI alpha - amylase gene promoter”, Plant Cell, 7(11), pp.1879-1891 24 Karladeea, D., Suriyong (2012), γ-Aminobutyric acid (GABA) content in different varieties of brown rice during germination, Science Asia, 38: 13– 17 25 Keiko, I., Yoko, M., Yoshimi, K (2005), Determination of gama aminobutyric acid in partially milled and cooked rice samples by high performace liquid chromatography with fluorescence detection, Journial of cookery science of Japan, 38(3), pp.213-235 26 Khwanchai, P., Chinprahast, N., Pichyangkura,R and Chaiwanichsiri, S (2014), Gamma-Aminobutyric Acid and Glutamic Acid Contents, and the GAD Activity in Germinated Brown Rice (Oryza sativa L.): Effect of Rice Cultivars, Food Sci Biotechnol, 23(2): 373-379 63 27 Kjeldahl J (1883) "Neue Methode zur Bestimmung des Stickstoffs in organischen Körper" (New method for the determination of nitrogen in organic substances), Zeitschrift für analytische Chemie, 22 (1): 366-383 28 Koornneef, M., Bentsink, L and Hilhorst, H (2002), Seed Dormancy and Germination, Curr Opin Plant Biol, 5: 33-36 29 Le Nguyen Duy Doan, Nguyen Cong Ha (2014), Influence of soaking and germination conditions on the γ-aminobutyric acid (GABA) content of rice varieties (IR 50404 and Jasmine 85) from Mekong Delta, Tạp chí Khoa học Phát triển, tập 12, số 1: 59-64 30 Leubner and Metzger (2003), Function and regulation of β-glucanase during seed germination, dormancy release and after ripening, Seed Sci Res, 13: 1734 31 Luu Anh Van, Nguyen Thi Yen, Ho Thi Thuy An, Nguyen Thi Thanh Hang, Nguyen Truong Giang (2018), Appropriating conditions for acquistion highcontent α-amylase of germinated brown rice variety Oryza stiva Anhdao, J Viet Env, 9(3):123-127 32 Maisont, S and Narkrugsa, W (2010), The Effect of Germination on GABA Content, Chemical Composition, Total Phenolics Content and Antioxidant Capacity of Thai Waxy Paddy Rice, Kasetsart J (Nat Sci.), 44 : 912 – 923 33 Martin, M., and Fitzgerald, M (2002), Proteins in rice grains influence cooking properties, Journal of Cereal Science, 36(3), 285-294 34 Mitchell, C R (2009), Rice starches: Production and properties In Starch: Chemistry and technology, 3rd ed., Academic Press, Burlington, MA, 569578 35 Moongngarm, A and Saetung, N (2010), Comparison of chemical compositions and bioactive compounds of germinated rough rice and brown rice, Food chemical, 122(3): 782-788 36 Moongngarm, A and Khomphiphatkul, E (2011), Germination Time Dependence of Bioactive Compounds and Antioxidant Activity in 64 Germinated Rough Rice (Oryza sativa L.), American Journal of Applied Sciences, (1): 15-25 37 Ogiwara, H and Terashima, K (2010), α-Amylase Activity and Soluble Sugar Supply from Endosperm in Relation to Varietal Differences in Seedling Establishment under Low-Temperature Conditions in Rice (Oryza sativa L.), Plant Prod Sci., 13(4): 321―330 38 Ohtsubo, S., Asano, S and Matsumoto, I (2000), Enzymatic Production of γAminobutyric Acid Using Rice (Oryza sativa) Germ, Food Sci Technol Res., (3), 208-21l 39 Pham Quang Trung and Nguyen Cong Ha (2016), Changes of Chemical Properties and Functional Compounds during The Germination of Various Brown Rice in Mekong Delta, Viet Nam, J Agric Food Tech., 6(2)1-6 40 Reddy L V., Ching T M, Metzger R J (1983), Alpha-amylase Acitivity in Wheat Kernels Matured and Germinated Under Different Temperature Conditions, Cereal Chem, 61(3):228-231 41 Reihaneh Ahmadzadeh Ghavidel, (2011), Evaluation of Changes in Phytase, α-Amylase and Protease Activities of Some Legume Seeds during Germination, 2011 International Conference on Bioscience, Biochemistry and Bioinformatics IPCBEE vol.5 42 Rukhliadeva, A.P.,Phylatova T.G, Cherednychenko V.S (1979) The reference book for workers of laboratories of distilleries Moscow, Food Industry, 232p 43 Saikusa, T., Horino,T., and Mori, Y (2004), Accmulation of gamma aminobutyric acid in the rice germ during water soaking, Biosci Biotech Biochem, 58(12), pp.2291 44 Soxhlet F (1879) "Die gewichtsanalytische Bestimmung des Milchfettes" Dingler's Polytechnisches Journal (in German) 232: 461–465 45 Tortayeva1, D., Hettiarachchy, N., Horax, R., Eswaranandam, S., Jha, A (2014), Effects of Germination on Nutrient Composition of Long Grain Rice 65 and its Protein Physico-Chemical and Functional Properties, J Food Nutr , 1: 1-9 46 Veluppillai, S el at (2009), Biochemical Changes Associated with Germinating Rice Grains and Germination Improvement, Rice Science 16(3): 240 – 242 47 Watcharaparpaiboon, W., P.Laohakunjit, O Kerdchoechuen and S Photchanachai (2007), Effects of pH, temperature and soaking time on qualities of germinated brown rice, J.Agric.Sci (Suppl.).29(6), pp.169-172 48 Xu, Y., Shi, G X., Ding, C X., & Xu, X Y (2011), Polyamine metabolism and physiological responses of Potamogeton crispus leaves under lead stress, Russian Journal of Plant Physiology, 58(3), 460–466 49 Yang, C., and Chang, W (1999), Effects of protein and lipid binding to starch on the physicochemical and pasting properties of rice flour, Food Science and Agricultural Chemistry., 1(4), 277-285 50 Zhang, H., Yao, H., Chen, F., and Wang, X 2006.Purification and characterization of glutamate decarboxylase from rice germ Food Chemistry, 101: 1670–1676 51 Zhimin X., Na H., and Samuel G J., (2001), Antioxidant activity of tocopherols, tocotrienols, and γ-oryzanol components from rice bran against cholesterol oxidation accelerated by 2,20-azobis (2-methylpropionnamidine) dihydrochloride, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 49, 20772081 66 Tài liệu tiếng việt: 52 Bùi Trang Việt (2000), Sinh lý thực vật đại cương, Phần II - Phát triển Nxb Đại học Quốc gia Tp HCM, Tp HCM 53 Cung Thị Tố Quỳnh, Nguyễn Hoàng Dũng, Lại Quốc Đạt (2013), Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất gạo mầm (gạo gaba) từ gạo lứt Việt Nam, VietNam Journal of Science and Technology, Vol 51, No 54 Dương Thị Phượng Liên, Hà Thanh Tồn (2010), Cơng nghệ sau thu hoạch ngũ cốc 55 Lê Ngọc Tú (2002), Hóa sinh công nghiệp, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật 56 Lê Thanh Mai (chủ biên) (2006) Các phương pháp phân tích ngành cơng nghệ lên men NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 57 Nguyễn Đức Lượng cộng (2004), Công nghệ enzym, Nhà xuất đại học quốc gia 58 Nguyễn Hoàng Khang, Nguyễn Diệu Hiền, Lê Nguyễn Đoan Duy Nguyễn Công Hà (2016), Ảnh hưởng loại hóa chất ngâm điều kiện nảy mầm đến hình thành gaba giống lúa IR50404 qui mơ xưởng thực nghiệm, Tạp chí Khoa hoc Trường Đại học Cần Thơ, Số chuyên đề: Nông nghiệp (1): 59-65 59 Phạm Minh Tâm (1992) Thí nghiệm hóa sinh, Nxb Trường Đại học Bách Khoa Tp Hồ Chí Minh 60 Quản Lê Hà (1998), Nghiên cứu số đặc tính ứng dụng hệ enzym thủy phân tinh bột protein sản xuất đồ uống, Luận án Tiến sĩ kỹ thuật, chuyên ngành: Công nghệ sản phẩm lên men nước uống khơng có rượu, Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội 61 Trần Huỳnh Như An, (2016), Ảnh hưởng điều kiện ngâm nảy mầm đến hoạt tính α-amylase hai giống lúa IR50404 Một bụi đỏ, Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, Số chuyên đề: Nông nghiệp (1): 105-112 67 62 Võ Thanh Quang (2013), Các yếu tố ảnh hưởng đến quy trình sản xuất gạo mầm từ giống lúa Jasmine 85, Luận văn tốt nghiệp, Trường đại học Cần Thơ, Khoa Nông nghiệp & Sinh học ứng dụng 63 Võ Văn Chi (2007), Sách tra cứu tên cỏ Việt Nam, Nxb Giáo Dục, Hà Nội 64 Triệu Ngọc Hân, Nguyễn Thị Hồng Hạnh, Lê Nguyễn Đoan Duy Nguyễn Công Hà (2016), Sự biến đổi acid glutamic hoạt tính glutamate decacboxylase q trình ngâm nảy mầm gạo lứt nguyên phôi, Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, Số chuyên đề: Nông nghiệp (1): 66-74 68 PHỤ LỤC Phụ lục số 01 Thời gian hút nước bão hòa gạo lứt nhiệt độ phòng Loại gạo lứt Thời gian (giờ) 10 Tám Xoan Anh Đào N97 12.27±0.43 24.47±0.32 26.91±0.32 28.32±0.44 29.43±0.35 30.05±0.45 31.52±0.37 32.46±0.5 32.66±0.42 33.02±0.65 33.15±0.54 11.6±0.67 27.98±0.26 31.22±0.36 33.25±0.84 35.46±0.55 35.93±0.38 36.43±0.61 36.47±0.41 36.61±0.72 36.82±0.65 37.47±0.37 12.87±0.31 25.71±0.25 27.86±0.55 31.28±0.42 33.43±0.38 34.21±0.64 34.62±0.50 34.77±0.44 34.86±0.35 35.02±0.35 35.23±0.46 Phụ lục số 02 Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến khả nảy mầm loại gạo lứt Tỷ lệ nảy mầm (%) Nhiệt độ(oC) Tám Xoan Anh Đào N97 25 77±0.5 87±0.5 79±0.4 30 82±0.6 95±0.4 83±0.5 35 89±0.6 99±0.7 90±0.5 37 85±0.4 96±0.4 87±0.7 69 Phụ lục số 03 Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến thay đổi hoạt độ enzym α-amylase loại gạo lứt Nhiệt độ(oC) Hoạt độ α-amylase (UI/g) Tám Xoan Anh Đào N97 25 22.13±0.52 36.98±0.65 24.18±0.76 30 24.54±0.54 40.21±0.58 31.72±0.52 35 36.39±0.65 46.82±0.62 40.22±0.57 37 32.87±0.72 44.27±0.54 39.12±0.44 Phụ lục số 04 Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến thay đổi hoạt độ enzym GAD loại gạo lứt Nhiệt độ(oC) Hoạt độ GAD (UI/g) Tám Xoan Anh Đào N97 25 2.73±0.69 3.98±0.44 4.42±0.53 30 3.19±0.56 4.43±0.52 5.21±0.43 35 5.43±0.68 6.32±0.51 6.12±0.62 37 5.12±0.43 5.57±0.71 5.78±0.77 Phụ lục số 05 Ảnh hưởng pH dịch ngâm đến thay đổi hoạt độ α-amylase trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm pH Kiểm chứng Hoạt độ αamylase (UI/g) 34.91±0 43 74.16±0.5 82.93±0.5 79.72±0.7 70 77.87±0 75.09±0 42 67 Phụ lục số 06 Ảnh hưởng pH dịch ngâm đến thay đổi hoạt độ GAD trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm pH Kiểm chứng Hoạt độ GAD (UI/g) 3.32±0.58 7,92±0.53 10,64±0.66 5,78±0.47 4,96±0.55 4,33±0.76 Phụ lục số 07 Ảnh hưởng pH dịch ngâm đến thay đổi hàm lượng GABA trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm pH Gạo lứt GABA (mg/100g 3.32±0.58 149.93±0.51 157.72±0.58 139.91±0.63 135.78±0.63 131.74±0.77 CK) Phụ lục số 08 Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến thay đổi hoạt độ α-amylase trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm Nhiệt độ 25 30 35 37 Hoạt độ αamylase (UI/g) 60.9±0.52 82.93±0.63 89.82±0.54 59.87±0.42 Phụ lục số 09 Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến thay đổi hoạt độ GAD trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm Nhiệt độ Hoạt độ GAD (UI/g) 25 30 35 37 8.09±0.62 10, 64±0.68 11.93±0.57 11.9±0.78 71 Phụ lục số 10 Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến thay đổi hàm lượng GABA trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm Nhiệt độ 25 30 35 37 GABA (mg/100g chất khô) 149.92±0.59 157.00±0.5 177.12±0.61 138.40±0.54 Phụ lục số 11 Ảnh hưởng thời gian ủ đến thay đổi hoạt độ α-amylase trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm Thời gian 20 (giờ) Hoạt độ α-amylase 78.07±0.53 (UI/g) 24 28 89.82±0.67 97.10±0.54 36 48 109.11±0.54 67.611±0.70 Phụ lục số 12 Ảnh hưởng thời gian ủ đến thay đổi hoạt độ GAD trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm Thời gian 20 24 28 36 48 Hoạt độ GAD (UI/g) 9.14±0.52 11.93±0.58 13.47±0.74 17.22±0.61 15.18±0.43 Phụ lục số 13 Ảnh hưởng thời gian ủ đến thay đổi hàm lượng GABA trình gạo lứt Anh Đào nảy mầm Thời gian 20 24 28 36 48 GABA (mg/100g 194.37±0.43 205.06±0.51 218.31±0.56 231.76±0.77 143.21±0.58 chất khô) 72 Phụ lục 14 Đường chuẩn glucose Nồng độ đường 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 khử (mg/ml) 0.559±0.04 0.668±0.02 0.771±0.02 0.883±0.03 0.973±0.04 OD OD540nm OD 540 1.2 y = 2.086x + 0.457 R² = 0.998 0.8 0.6 OD 540 0.4 Linear (OD 540) 0.2 0 0.1 0.2 0.3 Nồng độ đường khử (g/l) Phụ lục 15 Đường chuẩn Tyrosine Nồng độ 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 Tyrosine (µmol/ml) OD540nm 0.018±0.01 0.035±0.01 0.065±0.02 0.084±0.03 0.116±0.02 73 OD OD 750 y = 0.245x - 0.0099 R² = 0.9903 0.14 0.12 0.1 0.08 0.06 OD 750 0.04 Linear (OD 750) 0.02 0 0.2 0.4 0.6 Nồng độ Tyrosine (μmol/ml) Phụ lục 16 Đường chuẩn GABA Nồng độ 0.04 0.08 0.12 0.16 0.2 GABA (mg/ml) OD 0.049±0.01 0.106±0.01 0.171±0.02 0.239±0.01 0.305±0.02 74 ... lượng GABA amylase gạo lứt, nhiên thông tin yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng GABA amylase cịn hạn chế Chính việc nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng GABA amylase trình nảy mầm gạo lứt có... tài: ? ?Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng GABA amylase q trình nảy mầm gạo lứt? ?? Mục đích nghiên cứu đề tài là: - Nghiên cứu điều kiện nảy mầm gạo lứt thích hợp để hàm lượng GABA enzym amylase. .. thấy, gạo lứt nảy mầm cho hàm lượng GABA cao nhiều so với gạo lứt chưa nảy mầm Tùy giống gạo lứt khác mà có hàm lượng GABA khác điều kiện nảy mầm khác Chính việc nghiên cứu 22 yếu tố ảnh hưởng đến