Nghiên cứu sự phát triển và sinh tổng hợp carotenoid của rhodotorula sp trên môi trường chất mang cùi bắp

Đại học quốc gia Tp Hồ chí minh TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA LÝ THỊ MINH HIỀN NGHIÊN CỨU SỰ PHÁT TRIỂN VÀ SINH TỔNG HỢP CAROTENOID CỦA RHODOTORULA SP TRÊN MƠI TRƯỜNG CHẤT MANG CÙI BẮP Chun ngành: Cơng nghệ thực phẩm đồ uống LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng năm 2009 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH Cán hướng dẫn khoa học: PGS.TS Đống Thị Anh Đào Chữ ký: Cán chấm nhận xét 1: GS.TS Dương Thanh Liêm Chữ ký: Cán chấm nhận xét 2: TS Nguyễn Thúy Hương Chữ ký: Luận văn thạc sĩ bảo vệ HỘI ĐỒNG CHẤM LUẬN VĂN THẠC SĨ TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA, ngày 14 tháng 08 năm 2009 TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHIÃ VIỆT NAM Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc -oOo Tp HCM, ngày 03 tháng 07 năm 2009 NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: Lý Thị Minh Hiền Phái: Nữ Ngày, tháng, năm sinh: 21/08/1983 Nơi sinh: TP Hồ Chí Minh Chun ngành: Cơng Nghệ Thực Phẩm Đồ Uống MSHV: 01107430 1- TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu phát triển sinh tổng hợp carotenoid Rhodotorula sp môi trường chất mang cùi bắp 2- NHIỆM VỤ LUẬN VĂN: Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến phát triển sinh tổng hợp carotenoid nấm men Rhodotorula sp như: nguồn thức ăn, nguồn khoáng, điều kiện môi trường (ẩm độ, ánh sáng), tỷ lệ giống cấy, khảo sát sinh trưởng sinh tổng hợp carotenoid theo thời gian 3- NGÀY GIAO NHIỆM VỤ : 02/02/2009 4- NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ : 03/07/2009 5- HỌ VÀ TÊN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: PGS.TS Đống Thị Anh Đào Nội dung đề cương Luận văn thạc sĩ Hội Đồng Chuyên Ngành thông qua CÁN BỘ HƯỚNG DẪN (Họ tên chữ ký) CHỦ NHIỆM BỘ MÔN QUẢN LÝ CHUYÊN NGÀNH (Họ tên chữ ký) KHOA QL CHUYÊN NGÀNH (Họ tên chữ ký) LỜI CẢM ƠN Để kết ngày hơm nay, với lịng biết ơn sâu sắc tơi xin chân thành gởi đến:  Giáo viên hướng dẫn: PGS.TS Đống Thị Anh Đào tận tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm sống quý báu cho em suốt thời gian học, trình thực luận văn  Nghiên cứu sinh Nguyễn Thị Minh Nguyệt quan tâm, hỗ trợ giúp đỡ tơi nhiều để hồn thành tốt luận văn tốt nghiệp  Ban giam hiệu trường Đại Học Bách Khoa TP HCM, quý Thầy Cô môn Công Nghệ Thực Phẩm: giảng dạy, hướng dẫn để tơi có kiến thức ngày hơm  Q Thầy Cơ phụ trách phịng thí nghiệm môn Công Nghệ Thực Phẩm tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình thực luận văn phịng thí nghiệm  Các anh chị, bạn học viên cao học niên khóa 2007 chun ngành Cơng Nghệ Thực Phẩm Đồ Uống, bạn Tạ Đăng Khoa giúp đỡ thời gian thực luận văn Xin chân thành cảm ơn ! TP HCM, tháng 07 năm 2009 LÝ THỊ MINH HIỀN TĨM TẮT Carotenoid nhóm hợp chất thiên nhiên có đặc tính chống oxy hóa tốt đồng thời nhiều loại carotenoid tiền vitamin A, loại vitamin thiếu thể người Trước đây, carotenoid chủ yếu ly trích từ thực vật Hiện có nhiều nghiên cứu giúp thu nhận hợp chất từ vi sinh vật Trong nấm men Rhodotorula loại nấm men đỏ nghiên cứu nhiều việc thu nhận carotenoid β-carotene Mục tiêu nghiên cứu khảo sát sinh trưởng sinh tổng hợp carotenoid Rhodotorula sp môi trường bán rắn với chất mang cùi bắp Từ mục tiêu trước tiên chúng tơi khảo sát số phương pháp phá vỡ màng tế bào nấm men Rhodotorula để thu nhận carotenoid, sau khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến phát triển tạo thành carotenoid loại nấm men Sau khảo sát phát triển Rhodotorula theo thời gian mơi trường có thơng số tối ưu tìm Chúng tơi tiến hành thí nghiệm thu kết sau:  Chế phẩm enzyme Trichoderma dùng để phá màng tế bào nấm men hỗ trợ cho q trình ly trích thu carotenoid Phương pháp ứng dụng phá vỡ màng tế bào tốt số phương pháp vật lý mà khảo sát  Hàm lượng khoáng phù hợp cho phát triển sinh tổng hợp carotenoid nấm men sau: hàm lượng N: 100.000µg/100g chất mang, hàm lượng C: 20.000µg/100g chất mang, hàm lượng P: 500µg/100g chất mang, hàm lượng S: 400µg/100g chất mang  Điều kiện ẩm độ phù hợp cho phát triển sinh tổng hợp carotenoid Rhodotorula 80%  Ánh sáng mặt trời điều kiện đơn giản thuận lợi cho nấm men sống tổng hợp carotenoid  Mật dộ giống cấy phù hợp khảo sát 104 tế bào/g chất mang  Qua trình khảo sát phát triển sinh tổng hợp carotenoid nấm men Rhodotorula 10 ngày ni cấy có nhận xét sau:  Các giai đoạn phát triển sinh khối nấm men có ảnh hưởng đến sinh tổng hợp carotenoid  Thời điểm sinh khối phát triển số lượng từ – ngày sau nuôi cấy, thời điểm đồng thời ứng thời điểm hàm lượng carotenoid thu cao ABSTRACT Carotenoids is a group of color compounds functioning as an anti-oxidation Most of them are provitamin A, which is known as a very important compound for our health, such as: α-carotene, β-carotene,… In nature, the traditional resources of carotenoids are plants, especially some kinds of orange or red fruits and dark green leaves and vegetables, such as: carrot, tomato, green broccoli, tagete, yellow maize,… Another resource of carotenoids can be released from microorganisms One of these is red yeast Rhodotorula which attracts more and more attention of researchers Our research is about how to develop Rhodotorula on solid state matrix and extract carotenoid from this process Using Trichoderma enzymes is a good way to break the yeast’s membrane for extracting carotenoid from Rhodotorula For nutritious environment, Rhodotorula can use NaNO3 as nitrogen resource, and saccharose as carbon resource for growing Suitable concentrations of N, C, S, P resources in growing environment for the yeast are: - 100,000µg N /100g matrix - 70,000µg C/100g matrix - 500µg P /100g matrix - 400µg S /100g matrix After testing the beginning concentration of the yeast to ferment, 10 CFU/g matrix is chosen to be the result for this project Like other solid state fermentations, moisture is an important factor for growing and producing carotenoid of Rhodotorula And by experiments, moisture at 80% is the most appropriated for the Rhodotorula Besides, the effect of the light on the carotenoid production is not important So the simplest way is using the nature light for the yeast development Finally, we have tested the effects of the fermentation time on the carotenoid production to find out the best moment for harvesting the culture The results showed that the suitable times for harvesting is from the 5th to the 8th day of fermentation MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Carotenoid 1.1.1 Giới thiệu carotenoid - 1.1.2 Tính chất hóa lý carotenoid - 1.1.3 Chức carotenoid 1.1.4 Sự sinh tổng hợp carotenoid tự nhiên - 1.2 Nấm men - 13 1.2.1 Sơ lược nấm men 13 1.2.1.1 Hình thái cấu trúc tế bào nấm men - 13 1.2.1.2 Hình thức sinh sản nấm men - 14 1.2.1.3 Dinh dưỡng nấm men - 15 1.2.2 Đặc điểm nấm men Rhodotorula - 17 1.3 Lên men bán rắn - 21 1.3.1 Giới thiệu - 21 1.3.2 Đặc điểm trình lên men bán rắn 22 1.3.3 So sánh lên men bán rắn lên men môi trường lỏng - 23 1.3.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình lên men bán rắn - 24 1.3.5 Các yếu tố sinh hóa ảnh hưởng đến trình lên men bán rắn 25 1.3.6 Mơ hình lên men bán rắn 26 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 27 2.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm - 27 2.2 Nguyên vật liệu – hóa chất – thiết bị - 27 2.2.1 Nguyên vật liệu 27 2.2.2 Giống vi sinh vật môi trường 27 2.2.2.1 Nguồn giống - 27 2.2.2.2 Môi trường giữ giống nấm men - 28 2.2.2.3 Môi trường hoạt hóa nấm men 29 2.2.3 Hóa chất – Dụng cụ – Thiết bị 29 2.2.3.1 Các hóa chất cung cấp dinh dưỡng cho nấm men 29 2.2.3.2 Các hóa chất dùng trích ly carotenoid 30 2.2.3.3 Dụng cụ thiết bị 30 2.2.4 Quy trình ni cấy trích carotenoid - 30 2.2.4.1.Sơ đồ quy trình 30 2.2.4.2 Thuyết minh quy trình 32 2.3 Các thí nghiệm - 33 2.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát số phương pháp phá vỡ màng tế bào nấm men - 33 2.3.1.1 Mục đích - 33 2.3.1.2 Các nghiệm thức thí nghiệm - 34 2.3.1.3 Thành phần môi trường nuôi cấy - 34 2.3.1.4 Cách tiến hành - 34 2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng yếu tố khoáng đến phát triển sinh tổng hợp carotenoid - 36 2.3.2.1 Mục đích - 36 2.3.2.2 Các thí nghiệm khảo sát sơ 36 2.3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố khoáng đến phát triển sinh tổng hợp carotenoid Rhodotorula 40 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng, ẩm độ đến phát triển sinh tổng hợp carotenoid Rhodotorula 41 2.3.3.1 Mục đích - 41 2.3.3.2 Bố trí thí nghiệm 42 2.3.3.3 Thành phần môi trường nuôi cấy - 42 2.3.3.4 Cách tiến hành - 42 Table of Means for Col_1 by Col_2 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_2 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -1 1.81683E9 3.64845E11 -5.45087E11 5.4872E11 2 3.27319E9 3.64845E11 -5.4363E11 5.50177E11 6.37307E8 3.64845E11 -5.46266E11 5.47541E11 7.75871E8 3.64845E11 -5.46128E11 5.47679E11 9.43898E8 3.64845E11 -5.4596E11 5.47848E11 4.12293E9 3.64845E11 -5.42781E11 5.51027E11 2.35886E9 3.64845E11 -5.44545E11 5.49262E11 7.22044E9 3.64845E11 -5.39683E11 5.54124E11 6.94081E11 3.64845E11 1.47177E11 1.24098E12 10 3.24448E11 3.64845E11 -2.22456E11 8.71351E11 11 2.58597E11 3.64845E11 -2.88306E11 8.05501E11 12 1.54658E12 3.64845E11 9.99677E11 2.09348E12 13 2.10757E11 3.64845E11 -3.36147E11 7.57661E11 14 1.14236E12 3.64845E11 5.95451E11 1.68926E12 15 3.24129E10 3.64845E11 -5.14491E11 5.79316E11 16 2.6909E11 3.64845E11 -2.77814E11 8.15993E11 -Total 32 2.81217E11 Bảng 2.12 Multiple Range Tests for Lượng tế bào by khoáng Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count Mean Homogeneous Groups -3 6.37307E8 X 7.75871E8 X 9.43898E8 X 1.81683E9 X 2.35886E9 X 2 3.27319E9 X 4.12293E9 X 7.22044E9 X 15 3.24129E10 X 13 2.10757E11 XX 11 2.58597E11 XX 16 2.6909E11 XX 10 3.24448E11 XX 6.94081E11 XXX 14 1.14236E12 XX 12 1.54658E12 X Bảng 2.13 Analysis of Variance for Lượng tế bào - Type III Sums of Squares Analysis of Variance for Col_1 - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Col_2 2.4833E24 2.4833E24 8.99 0.0058 B:Col_3 5.49288E23 5.49288E23 1.99 0.1699 C:Col_4 1.68476E23 1.68476E23 0.61 0.4416 D:Col_5 8.72019E21 8.72019E21 0.03 0.8603 RESIDUAL 7.45663E24 27 2.76172E23 -TOTAL (CORRECTED) 1.06664E25 31 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 2.14 Table of Least Squares Means for Lượng tế bào Table of Least Squares Means for Col_1 with 95.0 Percent Confidence Intervals -Stnd Lower Upper Level Count Mean Error Limit Limit -GRAND MEAN 32 2.81217E11 Col_2 16 2.64367E9 1.3138E11 -2.66927E11 2.72214E11 16 5.5979E11 1.3138E11 2.9022E11 8.2936E11 Col_3 16 1.50201E11 1.3138E11 -1.1937E11 4.19771E11 16 4.12233E11 1.3138E11 1.42663E11 6.81803E11 Col_4 16 3.53776E11 1.3138E11 8.42061E10 6.23346E11 16 2.08658E11 1.3138E11 -6.09126E10 4.78228E11 Col_5 16 2.97725E11 1.3138E11 2.81545E10 5.67295E11 16 2.64709E11 1.3138E11 -4.861E9 5.34279E11 Bảng 2.15 Multiple Range Tests for lượng tế bào by N Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count LS Mean Homogeneous Groups -1 16 2.64367E9 X 16 5.5979E11 X -Contrast Difference +/- Limits -1 - *-5.57147E11 3.8123E11 -* denotes a statistically significant difference 2.2 Kết xử lý ảnh hưởng yếu tố khoáng đến hàm lượng carotenoid Ghi ý nghĩa ký hiệu: Từ bảng 2.16 đến 2.17: Col_1: Lượng carotenoid sau nuôi cấy Col_2: Thứ tự 16 nghiệm thức thí nghiệm Từ bảng 2.18 đến 2.20: Col_1: Lượng carotenoid sau nuôi cấy đo Col_2: Các nghiệm thức hàm lượng N khác Col_3: Các nghiệm thức hàm lượng C khác Col_4: Các nghiệm thức hàm lượng S khác Col_5: Các nghiệm thức hàm lượng P khác Ký hiệu từ 1-2: thứ tự nghiệm thức từ mức thấp đến cao Bảng 2.16 Table of Means for hàm lượng carotenoid by khoáng Table of Means for Col_1 by Col_2 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_2 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -1 36.0011 5.93867 27.4474 44.5548 34.5275 5.93867 25.9739 43.0812 3 33.6607 5.93867 25.1071 42.2144 25.3972 5.93867 16.8436 33.9509 39.006 5.93867 30.4523 47.5597 32.0283 5.93867 23.4746 40.5819 39.5694 5.93867 31.0158 48.1231 31.4648 5.93867 22.9112 40.0185 42.9644 5.93867 34.4107 51.518 10 35.9 5.93867 27.3463 44.4536 11 37.6336 5.93867 29.0799 46.1872 12 42.5743 5.93867 34.0207 51.128 13 46.2004 5.93867 37.6468 54.7541 14 44.2935 5.93867 35.7398 52.8471 15 44.3368 5.93867 35.7832 52.8905 16 46.4894 5.93867 37.9357 55.043 -Total 48 38.253 10 Bảng 2.17 Multiple Range Tests for hàm lượng carotenoid by khoáng Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count Mean Homogeneous Groups -4 25.3972 X 31.4648 XX 32.0283 XX 3 33.6607 XX 34.5275 XX 10 35.9 XX 36.0011 XX 11 37.6336 XX 39.006 XX 39.5694 XX 12 42.5743 X 42.9644 X 14 44.2935 X 15 44.3368 X 13 46.2004 X 16 46.4894 X Bảng 2.18 Analysis of Variance for carotenoid - Type III Sums of Squares Analysis of Variance for Col_1 - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Col_2 885.902 885.902 10.15 0.0027 B:Col_3 133.641 133.641 1.53 0.2227 C:Col_4 226.155 226.155 2.59 0.1148 D:Col_5 17.9885 17.9885 0.21 0.6521 RESIDUAL 3753.21 43 87.2839 -TOTAL (CORRECTED) 5016.89 47 -All F-ratios are based on the residual mean square error 11 Bảng 2.19 Table of Least Squares Means for carotenoid Table of Least Squares Means for Col_1 with 95.0 Percent Confidence Intervals -Stnd Lower Upper Level Count Mean Error Limit Limit -GRAND MEAN 48 38.253 Col_2 24 33.9569 1.90705 30.111 37.8028 24 42.549 1.90705 38.7031 46.395 Col_3 24 39.9216 1.90705 36.0756 43.7675 24 36.5844 1.90705 32.7384 40.4303 Col_4 24 36.0824 1.90705 32.2364 39.9283 24 40.4236 1.90705 36.5776 44.2695 Col_5 24 38.8651 1.90705 35.0192 42.7111 24 37.6408 1.90705 33.7949 41.4867 Bảng 2.20 Multiple Range Tests for carotenoid by N Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count LS Mean Homogeneous Groups -1 24 33.9569 X 24 42.549 X -Contrast Difference +/- Limits -1 - *-8.59216 5.43897 -* denotes a statistically significant difference 12 PHỤ LỤC 3: XỬ LÝ SỐ LIỆU THÍ NGHIỆM Kết xử lý số liệu ảnh hưởng điều kiện ẩm độ, ánh sáng đến số lượng tế bào sau nuôi cấy Ghi ý nghĩa ký hiệu: Từ bảng 3.1 đến 3.2: Col_1: Lượng tế bào sau nuôi cấy Col_2: Thứ tự 15 nghiệm thức thí nghiệm Từ bảng 3.3 đến 3.5: Col_1: Lượng tế bào sau nuôi cấy đo Col_2: Các nghiệm thức ẩm độ khác Col_3: Các nghiệm thức ánh sáng khác Ký hiệu từ 1-5 Col_3: thứ tự nghiệm thức ẩm độ từ mức thấp đến cao Ký hiệu từ 1-3 Col_3: thứ tự nghiệm thức ánh sáng mặt trời, ánh sáng dèn neon, bóng tối Bảng 3.1 Table of Means for số lượng tế bào by điều kiện nuôi cấy (ánh sáng ẩm độ) Table of Means for Col_1 by Col_2 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_2 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -1 3.58388E10 2.32083E10 2.32347E9 6.93541E10 7.34356E8 2.32083E10 -3.2781E10 3.42497E10 3 6.282E8 2.32083E10 -3.28871E10 3.41435E10 2.60528E9 2.32083E10 -3.091E10 3.61206E10 1.26066E10 2.32083E10 -2.09088E10 4.61219E10 6.39869E10 2.32083E10 3.04716E10 9.75022E10 1.49517E9 2.32083E10 -3.20202E10 3.50105E10 3.10523E9 2.32083E10 -3.04101E10 3.66206E10 4.23813E7 2.32083E10 -3.34729E10 3.35577E10 10 6.23029E7 2.32083E10 -3.3453E10 3.35776E10 11 5.28568E10 2.32083E10 1.93414E10 8.63721E10 12 3.1619E9 2.32083E10 -3.03534E10 3.66772E10 13 1.47721E9 2.32083E10 -3.20381E10 3.49925E10 14 1.12354E9 2.32083E10 -3.23918E10 3.46389E10 15 3.21601E7 2.32083E10 -3.34832E10 3.35475E10 -Total 45 1.19838E10 13 Bảng 3.2 Multiple Range Tests for hàm lượng carotenoid by điều kiện nuôi cấy (ánh sáng ẩm độ) Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count Mean Homogeneous Groups -15 3.21601E7 X 4.23813E7 X 10 6.23029E7 X 3 6.282E8 X 7.34356E8 X 14 1.12354E9 X 13 1.47721E9 X 1.49517E9 X 2.60528E9 X 3.10523E9 X 12 3.1619E9 X 1.26066E10 X 3.58388E10 X 11 5.28568E10 X 6.39869E10 X Bảng 3.3 Analysis of Variance for lượng tế bào TN điều kiện nuôi cấy - Type III Sums of Squares Analysis of Variance for Col_1 - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Col_2 1.70812E22 4.2703E21 3.25 0.0218 B:Col_3 8.0945E19 4.04725E19 0.03 0.9697 RESIDUAL 4.99454E22 38 1.31435E21 -TOTAL (CORRECTED) 6.71076E22 44 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 3.4 Table of Least Squares Means for lượng tế bào 14 Table of Least Squares Means for Col_1 with 95.0 Percent Confidence Intervals -Stnd Lower Upper Level Count Mean Error Limit Limit -GRAND MEAN 45 1.19838E10 Col_2 1.25707E9 1.20847E10 -2.32071E10 2.57213E10 1.79714E9 1.20847E10 -2.2667E10 2.62613E10 1.73688E9 1.20847E10 -2.27273E10 2.62011E10 5.08941E10 1.20847E10 2.643E10 7.53583E10 4.23368E9 1.20847E10 -2.02305E10 2.86979E10 Col_3 15 1.04826E10 9.36075E9 -8.46724E9 2.94325E10 15 1.37384E10 9.36075E9 -5.21148E9 3.26883E10 15 1.17303E10 9.36075E9 -7.21956E9 3.06802E10 Bảng 3.5 Multiple Range Tests for lượng tế bào by ẩm độ Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count LS Mean Homogeneous Groups -1 1.25707E9 X 1.73688E9 X 1.79714E9 X 4.23368E9 X 5.08941E10 X -Contrast Difference +/- Limits -1 - -5.40072E8 3.45976E10 - -4.79813E8 3.45976E10 - *-4.96371E10 3.45976E10 - -2.97661E9 3.45976E10 - 6.02594E7 3.45976E10 - *-4.9097E10 3.45976E10 - -2.43654E9 3.45976E10 - *-4.91573E10 3.45976E10 - -2.4968E9 3.45976E10 - *4.66605E10 3.45976E10 -* denotes a statistically significant difference Kết xử lý số liệu ảnh hưởng điều kiện ẩm độ, ánh sáng đến lượng carotenoid sau nuôi cấy Ghi ý nghĩa ký hiệu: Từ bảng 3.6 đến 3.7: Col_1: Lượng carotenoid sau nuôi cấy 15 Col_2: Thứ tự 15 nghiệm thức thí nghiệm Từ bảng 3.8 đến 3.10: Col_1: Lượng carotenoid sau nuôi cấy đo Col_2: Các nghiệm thức ẩm độ khác Col_3: Các nghiệm thức ánh sáng khác Ký hiệu từ 1-5 Col_3: thứ tự nghiệm thức ẩm độ từ mức thấp đến cao Ký hiệu từ 1-3 Col_3: thứ tự nghiệm thức ánh sáng mặt trời, ánh sáng dèn neon, bóng tối Bảng 3.6 Table of Means for Lượng carotenoid by điều kiện nuôi cấy (ẩm độ, ánh sáng) with 95.0 percent LSD intervals Table of Means for Col_1 by Col_2 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_2 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -1 10.9477 26.5558 -27.4017 49.2971 8.58132 26.5558 -29.7681 46.9307 3 35.6688 26.5558 -2.68058 74.0182 79.4206 26.5558 41.0711 117.77 93.6144 26.5558 55.265 131.964 18.1421 26.5558 -20.2073 56.4915 20.294 26.5558 -18.0554 58.6434 26.3218 26.5558 -12.0276 64.6712 66.0935 26.5558 27.7441 104.443 10 93.1377 26.5558 54.7883 131.487 11 22.0947 26.5558 -16.2547 60.4441 12 16.0141 26.5558 -22.3353 54.3635 13 16.6715 26.5558 -21.6779 55.0209 14 62.6263 26.5558 24.2769 100.976 15 35.2354 26.5558 -3.11398 73.5848 -Total 45 40.3243 16 Baûng 3.7 Multiple Range Tests for Lượng carotenoid by điều kiện nuôi cấy (ẩm độ, ánh sáng) Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count Mean Homogeneous Groups -2 8.58132 X 10.9477 X 12 16.0141 X 13 16.6715 XX 18.1421 XXX 20.294 XXX 11 22.0947 XXX 26.3218 XXX 15 35.2354 XXX 3 35.6688 XXX 14 62.6263 XXX 66.0935 XXX 79.4206 XXX 10 93.1377 XX 93.6144 X Bảng 3.8 Analysis of Variance for lượng carotenoid - Type III Sums of Squares Analysis of Variance for Col_1 - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Col_2 30251.4 7562.86 4.14 0.0070 B:Col_3 2164.47 1082.24 0.59 0.5583 RESIDUAL 69480.8 38 1828.44 -TOTAL (CORRECTED) 101897.0 44 -All F-ratios are based on the residual mean square error 17 Bảng 3.9 Table of Least Squares Means for lượng carotenoid Table of Least Squares Means for Col_1 with 95.0 Percent Confidence Intervals -Stnd Lower Upper Level Count Mean Error Limit Limit -GRAND MEAN 45 40.3243 Col_2 17.0615 14.2534 -11.7931 45.9161 14.9631 14.2534 -13.8915 43.8178 26.2207 14.2534 -2.63392 55.0753 69.3801 14.2534 40.5255 98.2347 73.9958 14.2534 45.1412 102.85 Col_3 15 45.6466 11.0407 23.2959 67.9972 15 44.7978 11.0407 22.4471 67.1485 15 30.5284 11.0407 8.17771 52.8791 Bảng 3.10 Multiple Range Tests for lượng carotenoid by ẩm độ Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count LS Mean Homogeneous Groups -2 14.9631 X 17.0615 X 26.2207 X 69.3801 X 73.9958 X -Contrast Difference +/- Limits -1 - 2.09838 40.8066 - -9.15919 40.8066 - *-52.3186 40.8066 - *-56.9343 40.8066 - -11.2576 40.8066 - *-54.417 40.8066 - *-59.0327 40.8066 - *-43.1594 40.8066 - *-47.7751 40.8066 - -4.61571 40.8066 -* denotes a statistically significant difference 18 PHỤ LỤC 4: XỬ LÝ SỐ LIỆU THÍ NGHIỆM Ghi ý nghĩa ký hiệu: Col_1: Giá trị hàm lượng carotenoid đo Col_2: Ký hiệu nghiệm thức mật độ giống cấy Ký hiệu từ 1-7: thứ tự nghiệm thức từ H1 – H6 Bảng 4.1 ANOVA Table for Lượng carotenoid by mật độ giống cấy ANOVA Table for Col_1 by Col_2 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 549.348 109.87 5.51 0.0073 Within groups 239.459 12 19.9549 Total (Corr.) 788.807 17 Bảng 4.2 Table of Means for Lượng carotenoid by mật độ giống cấy Table of Means for Col_1 by Col_2 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_2 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -1 27.0008 2.57908 23.0273 30.9743 24.8122 2.57908 20.8387 28.7856 3 27.8459 2.57908 23.8725 31.8194 36.2322 2.57908 32.2588 40.2057 38.6809 2.57908 34.7075 42.6544 37.164 2.57908 33.1906 41.1375 -Total 18 31.956 19 Bảng 4.3 Multiple Range Tests for carotenoid by mật độ giống cấy Multiple Range Tests for Col_1 by Col_2 -Method: 95.0 percent LSD Col_2 Count Mean Homogeneous Groups -2 24.8122 X 27.0008 X 3 27.8459 X 36.2322 X 37.164 X 38.6809 X -Contrast Difference +/- Limits -1 - 2.18867 7.94695 - -0.84513 7.94695 - *-9.23142 7.94695 - *-11.6801 7.94695 - *-10.1632 7.94695 - -3.0338 7.94695 - *-11.4201 7.94695 - *-13.8688 7.94695 - *-12.3519 7.94695 - *-8.38629 7.94695 - *-10.835 7.94695 - *-9.3181 7.94695 - -2.44871 7.94695 - -0.93181 7.94695 - 1.5169 7.94695 -* denotes a statistically significant difference 20 PHỤ LỤC 5: CƯỜNG ĐỘ SÁNG TRONG NGÀY Bảng 5.1 Cường độ sáng ngày Giờ đo Cường độ sáng (Lx) 2200 6500 9000 10 10500 11 18000 12 22000 13 26000 14 20000 15 9150 16 8000 17 6200 21 LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ tên: Lý Thị Minh Hiền Ngày, tháng, năm sinh: 21/08/1983 Địa liên lạc: 180/21 Xô Viết Nghệ Tĩnh P.21 Q Bình Thạnh Nơi sinh: TP Hồ Chí Minh TP.Hồ Chí Minh Q TRÌNH ĐÀO TẠO 2001-2005: Học đại học hệ Chính quy khoa Cơng Nghệ Thực Phẩm Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM Chuyên ngành: Chế biến bảo quản nông sản thực phẩm 2002-2006: Học đại học hệ Tại chức Trường Đại học Khoa Học xã Hội Nhân Văn TP.HCM Chuyên ngành: Ngữ văn Anh 2007-đến nay: Học cao học Trường Đại học Bách Khoa Tp.HCM Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm đồ uống Q TRÌNH CƠNG TÁC 2006-2009: Là Giảng viên khoa Công Nghệ Sinh Học Trường Đại học Mở TP.HCM ... ưu cho sinh trưởng sinh tổng hợp carotenoid Rhodotorula sp. CBS10104 (MN12) môi trường cùi bắp - Khảo sát tỷ lệ giống cấy phù hợp môi trường nghiên cứu - Khảo sát sinh trưởng sinh tổng hợp carotenoid. .. rãi tự nhiên sinh tổng hợp số hợp chất carotenoid β-carotene, torulene torulahordin Trong đó, β-carotene hợp chất carotenoid tổng hợp Hình 1.8 Các hợp chất carotenoid chủ yếu tổng hợp Rhodotorula. .. men để thu nhận carotenoid - Nghiên cứu thành phần khoáng C, N, S, P tối ưu cho sinh trưởng sinh tổng hợp carotenoid Rhodotorula sp. CBS10104 (MN12) môi trường cùi bắp - Nghiên cứu điều kiện ánh