Luận văn thạc sĩ Khoa học môi trường, Môi trường, vi sinh vật, Đất, Rừng ngập mặn, Thừa Thiên Huế

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - - Vũ Thị Hồng Hà NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG CHUYỂN HÓA N VÀ P TRONG ĐẤT GÓP PHẦN VÀO VIỆC PHỤC HỒI RỪNG NGẬP MẶN TẠI THỪA THIÊN HUẾ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – Năm 2014 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - - Vũ Thị Hồng Hà NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT CÓ KHẢ NĂNG CHUYỂN HÓA N VÀ P TRONG ĐẤT GÓP PHẦN VÀO VIỆC PHỤC HỒI RỪNG NGẬP MẶN TẠI THỪA THIÊN HUẾ Chuyên ngành: Khoa học Môi Trường Mã số: 60440301 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGÔ THỊ TƢỜNG CHÂU Hà Nội – Năm 2014 LỜI CAM ĐOAN Tôi tên Vũ Thị Hồng Hà, học viên cao học chuyên ngành Khoa học mơi trường, khóa 2011 – 2013, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên – Đại học Quốc gia Hà Nội Tơi xin cam đoan: - Cơng trình nghiên cứu tơi thực hướng dẫn khoa học TS Ngô Thị Tường Châu - Các số liệu luận văn hoàn toàn trung thực chưa công bố nghiên cứu khác hay phương tiện truyền thông Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm kết nghiên cứu luận văn tốt nghiệp Hà Nội, tháng năm 2014 Học viên Vũ Thị Hồng Hà LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, lời em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới cô giáo hướng dẫn: Tiến sĩ Ngơ Thị Tường Châu tận tình hướng dẫn em suốt trình nghiên cứu thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô giáo môn Khoa Học Đất, thầy cô giáo trường Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc Gia Hà Nội, trang bị cho em kiến thức kinh nghiệm quý giá trình học tập trường nhiệt tình giúp đỡ em thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo trường Đại học Khoa học Huế cung cấp tài liệu tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành luận văn Mặc dù có nhiều cố gắng, thời gian có hạn, trình độ, kỹ thân cịn nhiều hạn chế nên em không tránh khỏi hạn chế, thiếu sót Rất mong đóng góp, bảo, bổ sung thêm thầy cô bạn Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng năm 2014 Học viên Vũ Thị Hồng Hà MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Tổng quan rừng ngập mặn 1.1 1.2 Khái niệm Tình hình rừng ngập mặn giới Việt Nam 1.3 Rừng ngập mặn Thừa Thiên Huế nói chung Rú Chá nói riêng 2.1 2.2 Vi sinh vật chuyển hóa N P đất Vi sinh vật chuyển hóa N Vi sinh vật chuyển hóa Phosphate 15 Nhu cầu dinh dƣỡng N, P RNM nhóm vi sinh vật liên quan 22 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 Đối tƣợng nghiên cứu 25 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 Phương pháp thu thập tài liệu 26 Phương pháp lấy mẫu đất 26 Phương pháp phân tích đất 26 Phương pháp phân lập vi khuẩn cố định N 32 Phương pháp tuyển chọn chủng vi khuẩn có khả cố định N 33 2.6 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy đến khả sinh trưởng, phát triển cố định N chủng vi khuẩn 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 tuyển chọn 34 2.7 Phương pháp phân lập vi khuẩn hòa tan phosphate 36 2.8 Phương pháp tuyển chọn chủng vi sinh vật chuyển hóa P 36 2.9 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển khả hòa tan phosphate chủng nấm mốc 37 2.10 Bố trí thí nghiệm thăm dị khả cải thiện nguồn N P đất trồng ngập mặn chủng vi sinh vật tuyển chọn 38 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 40 Một số tính chất đất vùng RNM Thừa Thiên Huế 40 1.1 Chỉ số pHKCl 40 1.2 Chất hữu 40 1.3 1.4 Thành phần giới 41 Hàm lượng N tổng số dễ tiêu 41 1.5 Hàm lượng P tổng số dễ tiêu 42 Phân lập tuyển chọn chủng vi khuẩn cố định N từ đất vùng RNM Thừa Thiên Huế 42 2.1 2.2 Tìm hiểu phân bố vi khuẩn cố định N vùng rễ ngập mặn 42 Phân lập chủng vi khuẩn có khả cố định N 43 2.3 Tuyển chọn chủng vi khuẩn có hoạt lực cố định N cao 44 2.4 Ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển cố định N chủng N27 47 Phân lập tuyển chọn chủng nấm mốc hòa tan phosphate khó tan từ vùng RNM Thừa Thiên Huế 54 3.1 Tìm hiểu phân bố nấm mốc hòa tan phosphate vùng rễ ngập mặn 54 3.2 Phân lập chủng nấm mốc có khả hòa tan P 56 3.3 3.4 Tuyển chọn chủng nấm mốc có hoạt lực hịa tan phosphate cao 56 Ảnh hưởng số điều kiện ni cấy đến sinh trưởng, phát triển hịa tan phosphate chủng M133 58 Tạo chế phẩm vi sinh vật từ chủng vi khuẩn cố định N hòa tan phosphate 68 Thăm dò khả chuyển hóa N P đất chủng vi sinh vật 69 5.1 Thăm dò khả chuyển hóa N chủng vi khuẩn cố định N 69 5.2 Thăm dị khả chuyển hóa P chủng nấm mốc hòa tan phosphate 71 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO 78 DANH MỤC BẢNG Bảng Thang đánh giá hàm lượng chất hữu đất 27 Bảng Thang đánh giá hàm lượng P tổng số đất 30 Bảng Thang đánh giá hàm lượng P dễ tiêu đất theo thang lân dễ tiêu Bray 32 Bảng4 Kết phân tích mẫu đất vùng RNM Thừa Thiên Huế 40 Bảng Số lượng vi khuẩn cố định N vùng rễ ngập mặn TT Huế 42 Bảng Kết sơ tuyển chủng vi khuẩn cố định N 45 Bảng Hàm lượng N-NH4+ tổng hợp chủng vi khuẩn sơ tuyển 46 Bảng Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến khả sinh trưởng, phát triển cố định N chủng N27 47 Bảng Ảnh hưởng pH môi trường đến sinh trưởng, phát triển cố định N chủng N27 49 Bảng 10 Ảnh hưởng nguồn N đến sinh trưởng, phát triển cố định N chủng N27 51 Bảng 11 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến khả sinh trưởng cố định N chủng N27 53 Bảng 12 Số lượng nấm mốc hòa tan phosphate mẫu đất phân lập 55 Bảng 13 Năng lực sinh trưởng phát triển chủng nấm mốc môi trường thạch đĩa chứa Ca3(PO4)2 57 Bảng 14 Hàm lượng PO43- hòa tan chủng nấm mốc sơ tuyển 57 Bảng 15 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến khả sinh trưởng phát triển hòa tan phosphate chủng nấm mốc M133 59 Bảng 16 Ảnh hưởng pH môi trường đến khả sinh trưởng phát triển hòa tan phosphate M133 61 Bảng 17 Ảnh hưởng nguồn carbon đến khả sinh trưởng phát triển hòa tan phosphate M133 63 Bảng 18 Ảnh hưởng nguồn N đến khả sinh trưởng phát triển hòa tan phosphate chủng M133 65 Bảng 19 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến khả sinh trưởng phát triển hòa tan phosphate chủng nấm mốc M133 67 Bảng 20: Sự thay đổi hàm lượng N đất bón chế phẩm vi khuẩn cố định N (lơ thí nghiệm với Đước) 69 Bảng 21: Sự thay đổi hàm lượng N đất bón chế phẩm vi khuẩn cố định N (lơ thí nghiệm với Bần) 70 Bảng 22: Ảnh hưởng chế phẩm chủng N27 đến sinh trưởng phát triển Đước 70 Bảng 23: Sự thay đổi hàm lượng P đất bón chế phẩm nấm mốc hịa tan phosphate (lơ thí nghiệm với Đước) 71 Bảng 24 Sự thay đổi hàm lượng P đất sau bón chế phẩm nấm mốc hịa tan phosphate (lơ thí nghiệm với Bần) 72 Bảng 25: Ảnh hưởng chế phẩm nấm mốc hòa tan phosphate đến sinh trưởng phát triển Đước 73 DANH MỤC HÌNH Hình Rừng ngập mặn Rú Chá (ảnh vệ tinh) Hình Vịng tuần hồn N tự nhiên Hình Chu trình chuyển hóa phosphate đất 16 Hình Sơ đồ xác định thành phần giới đất USDA 28 Hình Phân lập vi khuẩn mơi trường Ashby thạch đĩa 44 Hình Hình thái khuẩn lạc chủng N27 mơi trường Ashby thạch đĩa 47 Hình Mật độ tế bào chủng N27 thời gian ni cấy khác 48 Hình Hàm lượng N-NH4+ cố định chủng N27 thời gian nuôi cấy khác 48 Hình Mật độ tế bào chủng N27 pH mơi trường khác 50 Hình 10 Hàm lượng N-NH4+ cố định chủng N27 pH môi trường khác 50 Hình 11 Mật độ tế bào chủng N27 với nguồn N khác 52 Hình 12 Hàm lượng N-NH4+ cố định chủng N27 nguồn N khác 52 Hình 13 Mật độ tế bào chủng N27 nồng độ NaCl 53 Hình 14 Hàm lượng N-NH4+ cố định chủng N27 nồng độ NaCl khác 53 Hình 15 Phân lập nấm mốc môi trường Czapek thạch đĩa 56 Hình 16 Hình thái khuẩn lạc chủng M133 môi trường Czapek thạch đĩa 58 Hình 17 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển chủng M133 60 Hình 18 Ảnh hưởng thời gian ni cấy đến khả hịa tan phosphate chủng M133 60 Hình 19 Ảnh hưởng pH môi trường đến sinh trưởng phát triển chủng M133 62 Hình 20 Ảnh hưởng pH mơi trường đến khả hòa tan phosphate chủng M133 62 Hình 21 Ảnh hưởng nguồn C đến sinh trưởng phát triển chủng M133 64 Hình 22 Ảnh hưởng nguồn C đến khả hòa tan phosphate chủng M133 64 Hình 23 Ảnh hưởng nguồn N đến sinh trưởng phát triển chủng M133 66 Hình 24 Ảnh hưởng nguồn N đến khả hòa tan P chủng M133 66 Hình 25 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến sinh trưởng phát triển chủng M133 68 Hình 26 Ảnh hưởng nồng độ NaCl đến khả hòa tan phosphate chủng M133 68 Hình 27 Cây Đước sau tháng bón chế phẩm chứa chủng N27 (A) đối chứng (B) 71 Hình 28 Cây Đước sau tháng bón chế phẩm chứa chủng M133 (A) đối chứng (B) 74 Hình 29 Cây Đước sau tháng thí nghiệm (từ trái qua phải lần lượt: mẫu đối chứng, mẫu bón chủng M133 mẫu bón chủng N27) 74 Tạo chế phẩm vi sinh vật từ chủng vi khuẩn cố định N hòa tan phosphate Tiến hành nhân giống chủng vi khuẩn cố định N (kí hiệu chủng N27) nấm mốc hịa tan phosphate (kí hiệu chủng M133) điều kiện ni cấy thích hợp cho sinh trưởng, phát triển hoạt lực cố định N (hoặc hòa tan phosphate khó tan) xác định, cụ thể là: 68  Chủng N27 môi trường Ashby dịch thể: pH 6,5; NaCl: 6‰; nguồn N: NaNO3; thời gian ngày  Chủng M133 môi trường Czapek dịch thể: pH 6,0; NaCl: 10‰; nguồn C: tinh bột; nguồn N: cao thịt; thời gian: 60 Kết sinh khối vi khuẩn nấm mốc sau trình nhân giống thu nhận sử dụng để chuẩn bị chế phẩm dạng dịch huyền phù với mật độ 109 tế bào vi khuẩn (hoặc bào tử nấm)/ml cho thí nghiệm thăm dị khả chuyển hóa N P đất Thăm dò khả chuyển hóa N P đất chủng vi sinh vật 5.1 Thăm dò khả chuyển hóa N chủng vi khuẩn cố định N 5.1.1 Hàm lượng N đất Tiến hành bón chế phẩm vi khuẩn cố định N vào mẫu đất trồng ngập mặn (chủng N27) theo phương pháp nêu Sau khoảng thời gian định, tiến hành phân tích hàm lượng N tổng số dễ tiêu đất để thăm dị hiệu chuyển hóa N chế phẩm nghiên cứu Kết trình bày bảng 20, 21 Kết bảng 20 cho thấy: mẫu đất có bón chủng N27, hàm lượng N tăng đáng kể so với mẫu đất đối chứng Tại thời điểm tháng sau bón chế phẩm, hàm lượng N tổng số dễ tiêu đất mẫu có bón chủng N27 tăng so với mẫu đối chứng 104,65% 103,77% Tại thời điểm tháng sau bổ sung vi sinh vật cố định N, hàm lượng N tổng số dễ tiêu đất mẫu thí nghiệm tăng so với mẫu đối chứng 101,2% 102,17% Mẫu đất có thay đổi hàm lượng N tổng số mẫu đất ban đầu thí nghiệm khoảng thời gian 69 dài với bầu đất nhỏ nên chúng tơi có bổ sung vào đất lượng chất dinh dưỡng để đảm bảo trồng khơng bị chết Đối với lơ thí nghiệm với Bần, thu mẫu đất để phân tích sau tháng thử nghiệm điều kiện thời tiết mưa bão khiến bầu đất bị hỏng chết Tuy nhiên, kết đánh giá sau tháng bón chế phẩm tốt Qua bảng 21, thấy hàm lượng N tổng số dễ tiêu mẫu đất thí nghiệm tăng đáng kể, chứng tỏ hiệu suất cố định N chủng N27 cao Hàm lượng N tổng số mẫu đất có bón chủng N27 cao so với đối chứng (từ 0,07% lên 0,13%) tương ứng tăng 190% so với đối chứng Đồng thời, hàm lượng N dễ tiêu mẫu đất thí nghiệm tăng (24,3 mg NNH4+/100 g đất) so với đối chứng 5.1.2 Sự sinh trưởng phát triển ngập mặn thí nghiệm Kết thí nghiệm kiểm chứng hiệu bón chế phẩm vi khuẩn N27 cho loài ngập mặn (cây Đước Bần) trình bày bảng 22 Qua bảng 22 cho thấy việc bón chế phẩm chứa chủng N27 có ảnh hưởng rõ đến khả sinh trưởng, phát triển Đước Ở mẫu đất có bón chủng N27, chiều cao số tăng so với đối chứng Nguyên nhân tăng số chiều cao lơ thí nghiệm bón sinh khối chủng N27 vào đất, chúng hoạt động góp phần cố định N tạo nguồn dinh dưỡng cho phát triển 70 Cây phát triển nhanh chiều cao số lượng lá, sau tháng đạt trung bình 18,45 cm/cây, sau tháng đạt trung bình 58,2 cm/cây tương ứng tăng 110,48% 163,03% so với đối chứng (đạt trung bình 16,7cm/cây sau tháng 35,7cm/cây sau tháng) Số tăng, trung bình sau tháng 17,64 lá/cây, sau tháng 23,55 lá/cây tương ứng tăng 178,18% 205,68% so với số trung bình đối chứng (9,9 lá/cây sau tháng 11,45 lá/cây sau tháng) Hình 27 Cây Đước sau tháng bón chế phẩm chứa chủng N27 (A) đối chứng (B) Như vậy, kết bước đầu cho thấy chủng N27 có khả cải thiện hàm lượng N tổng số dễ tiêu đất thúc đẩy sinh trưởng, phát triển ngập mặn nói chung Đước, Bần nói riêng 5.2 Thăm dị khả chuyển hóa P chủng nấm mốc hòa tan phosphate 5.2.1 Hàm lượng P đất Kết thay đổi hàm lượng P đất sau bón chế phẩm nấm mốc hịa tan phosphate (chủng M133) vào đất trình bày bảng 23 24 71 Qua bảng 23 ta thấy, sau tháng bón chế phẩm, hàm lượng P dễ tiêu mẫu đất thí nghiệm tăng 0,4 mg P2O5/100g đất, tương ứng với tăng 140,65% so với đối chứng Do thời gian trồng dài nên sau lấy mẫu đợt tháng bổ sung thêm chất dinh dưỡng vào đất với lượng tất bầu đất đối chứng thí nghiệm để đảm bảo cho tiếp tục sinh trưởng Sau tháng bón chế phẩm, hàm lượng P tổng số mẫu đất có bổ sung nấm mốc M133 giảm so với mẫu đối chứng nấm mốc chuyển hóa phosphate dạng khó tan sang dễ tan, thực vật (cây Đước) hút thu để sinh trưởng phát triển sau thời gian dài hàm lượng P tổng số đất mẫu thí nghiệm giảm đáng kể (từ 5,44% xuống 4,22%) nhiên hàm lượng P dễ tan mẫu thí nghiệm cao hẳn mẫu đối chứng với mức chênh lệch 0,96 mg P2O5/100g đất tương ứng với tăng 113,04% Như trình bày phần 2, lơ thí nghiệm với Bần thu mẫu sau tháng bổ sung nấm mốc hòa tan phosphate Tuy nhiên kết khả quan, hàm lượng P dễ tiêu đất tăng đáng kể Điều chứng tỏ khả chuyển hóa P chủng nấm mốc tuyển chọn tốt Qua bảng 24 ta thấy, chủng M133 có khả chuyển hóa P từ dạng khó tan sang dễ tan với hiệu suất cao Sau tháng bổ sung chủng M133, lượng P tổng số đất giảm từ 1,16% mẫu đối chứng xuống 0,91% mẫu thí nghiệm, hàm lượng P dễ tiêu tăng 1,18 mg P2O5/100g đất điều chứng tỏ chủng M133 hòa tan lượng lớn P cải thiện hàm lượng P dễ tiêu đất hiệu quả, hàm lượng P dễ tiêu tăng vọt, Bần sử dụng lượng P chủng M133 hòa tan để sinh trưởng phát triển khiến cho lượng P tổng số giảm 72 5.2.2 Sự sinh trưởng phát triển ngập mặn thí nghiệm Từ kết bảng 25 cho thấy, việc bổ sung chế phẩm chứa chủng nấm mốc hòa tan phosphate M133 có ảnh hưởng rõ đến khả sinh trưởng phát triển Đước Ở mẫu thí nghiệm, chiều cao số tăng so với đối chứng Nguyên nhân tăng số chiều cao mẫu thí nghiệm bón sinh khối nấm mốc vào đất chúng hoạt động góp phần hịa tan phosphate khó tan tạo nguồn dinh dưỡng cho phát triển Đối với lơ thí nghiệm bón sinh khối M133, hoạt động trao đổi chất chúng tiết acid hòa tan muối phosphate khó tan thành dạng dễ tan giúp cho hấp thụ dễ dàng Đồng thời hấp thu P hỗ trợ cho hấp thu chuyển hóa đạm tốt hơn, sở để tăng số chiều cao Chiều cao trung bình mẫu thí nghiệm sau tháng đạt 21,04 cm/cây, sau tháng đạt 43,57cm/cây tương ứng tăng 125,99% 122,04% so với đối chứng (chỉ đạt trung bình 16,70 cm/cây sau tháng 35,7cm/cây sau tháng) Số mẫu thí nghiệm tăng lên đến 13,59 lá/cây sau tháng 15,79 lá/cây sau tháng tương ứng tăng 137,27% 137,9% so với đối chứng (chỉ đạt trung bình 9,90 lá/cây sau tháng 11,45 lá/cây sau tháng) Như vậy, kết bước đầu cho thấy chủng M133 có khả cải thiện hàm lượng P dễ tiêu dễ tiêu đất thúc đẩy sinh trưởng, phát triển ngập mặn nói chung Đước, Bần nói riêng 73 74 CHƢƠNG IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu đạt được, rút số kết luận sau: Số lượng vi khuẩn cố định N tự mẫu đất dao động khoảng 1,53 x 106 - 6,60 x 106 CFU/g đất khô RNM Rú Chá 14,32 x 106 18,90 x 106 CFU/g đất khô RNM Cảnh Dương Từ 14 mẫu đất vùng RNM Rú Chá, RNM Cảnh Dương phân lập 40 chủng vi khuẩn có khả cố định N Trong tuyển chọn chủng vi khuẩn cố định N mạnh N27: đường kính khuẩn lạc đạt 14 mm sau ngày nuôi cấy hàm lượng N-NH4+ tổng hợp đạt 3,44 mg/l Số lượng nấm mốc hòa tan phosphate vơ khó tan mẫu đất dao động khoảng 346,6 x 103 - 684,2 x 103 CFU/g đất khô Từ mẫu đất vùng RNM Rú Chá, phân lập 73 chủng nấm mốc có khả hịa tan phosphate vơ khó tan Trong tuyển chọn chủng nấm mốc hịa tan phosphate vơ khó tan mạnh M133: đường kính khuẩn lạc đạt 5,3 cm sau ngày nuôi cấy hàm lượng phosphate hòa tan đạt 2,07 mg/ml Điều kiện thích hợp cho nhân giống tạo sinh khối chủng vi sinh vật là: - Chủng N27 nuôi môi trường Ashby dịch thể: thời gian nuôi cấy 120 giờ, pH môi trường 6,5; nguồn N NaNO3 nồng độ NaCl 6‰ - Chủng M133 nuôi môi trường Czapek dịch thể: thời gian nuôi cấy 60 giờ, pH môi trường 6,0; nguồn carbon tinh bột, nguồn N cao thịt nồng độ NaCl 10‰ Khi bổ sung chế phẩm vi sinh chứa chủng N27 cho thực vật ngập mặn, hàm lượng N đất sinh trưởng phát triển thực vật ngập mặn tăng nhiều so với mẫu đối chứng Cụ thể: - Hàm lượng N tổng số đất tăng so với mẫu đối chứng từ 0,2905% đến 0,294% 0,1505% đến 0,1575% mẫu thí nghiệm với Đước sau tháng ; từ 0,07% đến 0,133% mẫu thí nghiệm với Bần sau tháng ; hàm lượng N dễ tiêu tăng 0,56 mg N-NH4+/100 g đất mẫu thí nghiệm với 75 Đước sau tháng ; tăng 13,328 mg N-NH4+/100 g đất mẫu thí nghiệm với Bần sau tháng - Đối với mẫu thí nghiệm với Đước, tiêu chiều cao cơng thức thí nghiệm sau tháng tăng trung bình đạt 18,45 cm/cây, sau tháng đạt 58,2 cm/cây tương ứng tăng 110,48% 163,03% so với mẫu đối chứng Chỉ tiêu số lá/cây tăng trung bình đạt 17,64 lá/cây, sau tháng 23,55 lá/cây tương ứng tăng 178,18% 205,68% so với mẫu đối chứng Khi bổ sung chế phẩm vi sinh chứa chủng M133 cho thực vật ngập mặn, hàm lượng P dễ tiêu đất sinh trưởng phát triển thực vật ngập mặn tăng nhiều so với mẫu đối chứng Cụ thể: - Hàm lượng P tổng số đất giảm mẫu thí nghiệm với Đước sau tháng mẫu thí nghiệm với Bần sau tháng, hàm lượng P dễ tiêu tăng 0,96 mg P2O5/100g đất mẫu thí nghiệm với Đước sau tháng tăng 1,182 mg P2O5/100g đất mẫu thí nghiệm với Bần sau tháng - Đối với mẫu thí nghiệm với Đước, tiêu chiều cao công thức thí nghiệm sau tháng tăng trung bình đạt 21,04 cm/cây, sau tháng đạt 43,57cm/cây tương ứng tăng 125,99% 122,04% so với mẫu đối chứng Chỉ tiêu số lá/cây tăng trung bình đạt 13,59 lá/cây sau tháng 15,79 lá/cây sau tháng tương ứng tăng 137,27% 137,9% so với mẫu đối chứng 76 KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu định danh chủng N27 M133 Tích cực nghiên cứu, phân lập thêm chủng vi sinh vật có khả chuyển hóa N P RNM Phân lập tuyển chọn thêm chủng có hoạt tính chuyển hóa N, P cao từ đất RNM Tiến hành thử nghiệm hiệu chuyển hóa N, P chủng vi sinh vật tuyển chọn nhiều loài ngập mặn Đưa vào sản xuất chế phẩm sinh học từ nguồn vi sinh vật tuyển chọn nhằm thu hiệu kinh tế phát triển, phục hồi vùng RNM Thừa Thiên Huế toàn lãnh thổ Việt Nam 77 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Kiều Hữu Ảnh, Ngô Tự Thành (1985), Vi sinh vật học nguồn nước NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Kim Anh, Phạm Thị Ngọc Anh, Lê Thị Thúy Hoa, Nguyễn Thị Quỳnh Như, Đậu Thị Tỉnh (2008), “Phân lập tuyển chọn số chủng vi khuẩn Azotobacter có hoạt tính nitrogenaza sinh tổng hợp IAA (indol axetic acid) từ đất thơn Bình Kỳ - Hịa Quý – Ngũ Hành Sơn – TP Đà Nẵng”, Tuyển tập báo cáo “Hội nghị sinh viên nghiên cứu khoa học” lần thứ 6, Đại học Đà Nẵng Nguyễn Thị Phương Chi, Phạm Thanh Hà, Hà Thị Hồng Hạnh (1997), “Khả chuyển hóa hợp chất phosphate khó tan chủng Aspergillus awamori NAKAZAWA MN1”, Tạp chí sinh học 19(2), tr 68-73 Chi cục Kiểm lâm tỉnh Thừa Thiên Huế (2010), “Báo cáo tổng kết nghiên cứu rừng ngập mặn Rú Chá, Hương Phong, Thừa Thiên Huế”, Dự án quản lí tổng hợp hoạt động đầm phá - Dự án IMOLA II, tr 8-11 Đoàn Văn Cung, Phạm Văn Quyến, Trần Thúc Sơn, Nguyễn Văn Sức, Trần Thị Tâm (1998), Sổ tay phân tích đất, nước, phân bón trồng, Nhà xuất Nơng nghiệp Hà Nội, Hà Nội Đường Hồng Dật, Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đường (1979), Giáo trình vi sinh vật học trồng trọt, NXB ĐH & THCN, Hà Nội Phạm Thị Thanh Hà, Nguyễn Thị Phương Chi (1999), “Ảnh hưởng nguồn nitrogen lên khả phân giải phosphore hai chủng nấm sợi MN1 ĐT1”, Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Thị Hoa, Lê Xuân Thuyên, Đinh Văn Hiệp (2006), “Trao đổi chất rừng ngập mặn Cà Mau môi trường nước ven bờ”, Kết khảo sát mùa mưa mùa khô năm 2006, Phân viện Địa lý thuộc Viện khoa học Công nghệ Việt Nam 78 Phạm Quỳnh Hương (2007), “Driving forces behind nutrients dunamics in Khe Ốc - A tidal creek in Cần Giờ mangrove biosphere reserve, HCM city”, Luận văn thạc sĩ khoa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiênĐại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh 10 Phạm Thị Ngọc Lan, Trương Văn Lung (1999), “Bước đầu nghiên cứu vi khuẩn Azotobacter đất vùng gò đồi tỉnh Thừa Thiên Huế”, Hội nghị Cơng nghệ Sinh học tồn quốc, Hà Nội 11 Phạm Thị Ngọc Lan, Nguyễn Công Minh (2005), “Ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy đến hoạt động phân giải protein vi khuẩn phân lập từ ao nuôi tôm phá Tam Giang – Cầu Hai, tỉnh Thừa Thiên Huế”, Những vấn đề nghiên cứu khoa học sống, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, tr 957 – 960 12 Phạm Thị Ngọc Lan, Trần Thị Thanh Nhàn (2008), “Điều kiện nuôi cấy tối ưu cho sinh trưởng phát triển số chủng nấm mốc hòa tan phosphate vơ cơ”, Tạp chí khoa học - Đại học Huế, số 48, tr 103-108 13 Phạm Thị Ngọc Lan, Hoàng Xuân Thế, Huỳnh Kim Hoàng (2002), “Khả phân giải phosphore khó tan nhóm vi sinh vật phân lập từ đất trồng lúa”, Kỉ yếu hội nghị khoa học lần thứ I, Đại học Huế, tr 60 – 64 14 Trần Thị Thanh Nhàn (2008), “Nghiên cứu số chủng nấm mốc hịa tan phosphate vơ phân lập từ đất trồng hoa màu”, Luận văn thạc sĩ, Đại học Khoa học Huế 15 Đỗ Kim Nhung, Vũ Thành Công (2011), “Khảo sát khả sinh tổng hợp IAA cố định đạm vi khuẩn Gluconacetobacter sp Azospirillum sp phân lập từ mía”, Tạp chí khoa học 2011,18a, Đại học Cần Thơ, tr 161 – 167 16 Đỗ Hoành Quân (2011), “Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu đặc tính tăng trưởng, cố định đạm vi khuẩn Azotobacter – thử nghiệm trồng”, Luận văn Thạc sĩ Sinh học, Trường đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh 79 17 Lê Ngọc Trân (2011), “Nghiên cứu thay đổi hàm lượng carbon, nitrogen, phosphorus q trình phân hủy Đước đơi (Rhizophora apiculata Bl.) phần rừng bị gãy đổ tác động bão Durian huyện Cần Giờ, Thành phố Hồ Chí Minh”, Luận văn Thạc sĩ, Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh 18 Nguyễn Văn Uyển (1973), Sinh lý trao đổi chất thực vật, dịch, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 19 Trần Cẩm Vân, Bùi Thị Ngọc Dung, Đào Thị Lương (1994), “Khả phân hủy phosphore vô số chủng loại vi khuẩn phân lập từ đất”, Thông báo khoa học trường Đại học, tr 44 – 48 20 Vũ Văn Vụ, Vũ Thanh Tâm, Hồng Minh Tấn (1999), Sinh lí học thực vật, NXB Giáo dục, Hà Nội Tài liệu tiếng Anh 21 American Public Health Association (2005), Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater 22 Cleveland CC (1999), “Global patterns of terrestrial biological nitrogen (N2) fixation”, Glob Biogeochem, Cycles 13, pp 623 – 645 23 Dhara P Chaudhari, Sachdev, Hemangi G Kasture, Vijay M Dhavale, Dilip D Chopade, Balu A Chopade (2009), “Isolation and characterization of indole acetic acid (IAA) producing Klebsiella pneumonia strains from rhizosphere of wheat (Triticum aestivum) and their effect on plant growth”, Indian J of Exp Biol., 47, pp 993 – 1000 24 Dinesh K Maheshwari (2014), “Bacterial Diversity in Sustainable Agriculture”, Sustainable Development and Biodiversity, Vol 1, Springer International Publishing Switzerland, pp 287 – 291 25 Dittmar T., Lara RJ (2000), “Driving forces behind nutrient and organic matter dynamics in a mangrove tidal creek in north Brazil”, Estuarine, Coastal and Shelf Science, 52, pp 249 – 259 26 FAO (2007), The world’s mangrove (1980 – 2005), FAO forestry, pp 153 80 27 Feller I C (1995), “Effects of nutrient enrichment on growth and herbivory of dwarf red mangrove (Rhizophora mangle)”, Ecological Monographs, 65 (4), pp 477 – 505 28 Feller I C., Mckee K I., Wigham D F and O’Neil J.P (2006), “Nitrogen vs phosphorus limitation across an ecotonal gradient in a mangrove forest”, Biogeochemistry, pp 1-31 29 Feller I C., Whigham D.F., O’Neil J.P and McKee K L (1999), “Effects of nutrient enrichment on within – stand cycling in a mangrove forest”, Ecology, 80 (7), pp 2193 – 2250 30 Gaind S., Gaur A C (1991), “Thermotolerant phosphate solubilizing microorganism and after interaction with mung bean”, Plant and Soil, 133(1), pp 141-149 31 Gül Fidan Saribay (2003), “Growth and nitrogen fixation dynamics of Azotobacter chroococcum in nitrogen – free an OMW containing medium”, Thesis submitted to the graduate school of Natural and Applied Sciences of the Midde East Technical University, pp – 11 32 Ilmer P and Schinner F (1992), “Solubilization of inorganic phosphate by microorganisms isolated from forest soil”, Soil Biology Biochemistry, 24 (4), pp 389-395 33 Jane Rogers (1996), “Nutrient dynamics and productivity in mangrove ecosystem”, Litterature Review – Submitted in partial fulfilment of assessment for the Degree of Bachelor of Science(Hons.) 1997/1998 34 Liu J., Peng M., Li Y (2012), “Phylogenetic diversity of nitrogen-fixing bacteria an the nif gene from mangrove rhizophere soil”, Can J Microbiol, 58 (4), pp 531 – 539 35 Lovelock C E., Ball M C., Brendan Choat, Bettina J E., Holbrook N M and Feller I C (2006), “Linking physiological progresses with mangrove forest structure: phosphore deficiency limits canopy development, hydraulic conductivity and photosynthetic carbon gain in dwarf Rhizophora mangle”, Plant, Cell and Environment, 29, pp 793 – 801 81 36 Lovelock C.E., Feller I.C., Ball M C., Bettina M J E and Mei Ling Ewe (2006), “Diffrences in plant funtion in phosphorus and nitrogen limited mangrove ecosystems”, New Phytologist, 172, pp 514 – 522 37 Maddox J J., Soilea J M (1991), “Effects of phosphate fertilization, lime amendments and inoculation with VA - mycorrhizal fungi on soy abeans in acid soil”, Plant and Soil, 134(1), pp 89-93 38 Mann D, Steinke TD (1993), “Biological nitrogen fixation (acetylene reduction) associated with blue-green algal (cyanobacterial) communities in the Beachwood Mangrove Nature Reserve11”, Seasonal variation in acetylene reduction activity S Afr J Bot., 59 39 Ruth Reef, Ilka C Feller and Catherine E Lovelock (2010), “Nutrition of mangroves”, Tree Physiology, 30, pp 1148 – 1160 40 Tylka G.L., Hussey R S., Roncadori R W (1991), “Interactions of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi, phosphorus, and Heterodera glycines on soybean”, Journal of Nematology, 23 (1), pp 122-133 41 Usha DK., Kanimozhi K (2011), “Isolation and characterization of saline tolerant Azospirillum strains from paddy field of Thanjavur district”, Advances in Applied Science Reseach, 2(3), pp 239 – 245 42 Yoav Bashan and Gina Holguin (1996), Azospirillum-plant relationships: environmental and physiological advances, 1990-1996, pp 112 43 Yoav Bashan and Gina Holguin (2002), “Plant growth-promoting bacteria: a potential tool for arid mangrove reforestation”, Trees (2002), 16, Springer-Verlag, pp 159-166 Tài liệu internet 44 Hồng Cơng Tín, Mai Văn Phơ, Thành phần lồi đặc điểm phân bố thực vật ngập mặn Thừa Thiên Huế 82 ... ĐẤT GÓP PHẦN VÀO VI? ??C PHỤC HỒI RỪNG NGẬP MẶN TẠI THỪA THIÊN HUẾ Chuyên ngành: Khoa học Môi Trường Mã số: 60440301 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGÔ THỊ TƢỜNG CHÂU Hà Nội... phosphate vơ đất rừng ngập mặn Thừa Thiên Huế - Tạo nguồn vi sinh vật cố định N hòa tan P với hoạt lực cao sẵn có nhằm góp phần cải thiện hiệu vi? ??c phục hồi rừng ngập mặn Thừa Thiên Huế  Nội dung... giới Vi? ??t Nam 1.3 Rừng ngập mặn Thừa Thiên Huế nói chung Rú Chá nói riêng 2.1 2.2 Vi sinh vật chuyển hóa N P đất Vi sinh vật chuyển hóa N Vi sinh vật chuyển hóa