Đang tải... (xem toàn văn)
Kết luận: Cao chiết phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo có hoạt tính ức chế x o , hạ axít uric máu, có tác đụng chống oxy hóa và lợi tiểu trên thực nghiệm.. Kết quà này làm cơ sờ cho các ngh[r]
(1)TÁC D NG CHỐNG OXY HÓA, HẠ ACĨD ƯRIC MÁU VÀ LỢI TIỂU CỦA CAO CHIẾT DIỆP HẠ CHÂU - RÂU MÈO TRÊN THựC NGHIỆM
ThS Đ Thị Quỳnh Nga*
H ướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Phư ng Dung* TĨM TẮT
Cho tói nay, có số cơng tr nh nghiên cứu chứng minh tác dụng hạ axít uric máu (do ức chế xanthine oxidase)
và íợi tiểu Diệp hạ châu đắng (Phylianthus amarus Schum et Thonn.), T hư tác dụng tăng thải axít uric qua
nước tiểu chống oxy hóa Râu mèo (Orthosiphon stamineus Benth.) Xanthin oxydase mộí chất oxy hóa xúc tác q tr nh tạo axít uric máu Đê tài ỉhực với mục đích t m hiểu tác dụng chống oxy hóa, ức chế xanthine oxydase cao chiết từ Diệp hạ châu Râu mèo chuột nhắt ừắng
Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Cao đặc Diệp hạ châu đẳng đo Trung tâm dược liệu miền Trung sản xuất Cao khô Râu mèo Công ty Dược phẩm BV Pharma cung cấp
Nghiên cửu in vitro:
+ Khảo sát hoạt tính ức chế xaníhin oxidase (XO) cùa cao Diệp hạ châu, cao Râu mèo cao phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo với tỷ lệ phối họp khác
+ Xác định khả nãng ức chế peroxy hóa iipid cùa mẫu nghiên cứu qua việc xác định hàm lượng malonyl diadehyd (MDA)
Nghiên cứu in vivo:
+ Tác dụng hạ axít uric máu: Các cao thử đtrợc cho uống dự phòng ngày trước gây mơ h nh gây tãng axít uric cấp chuột nhắt trắng kali oxonat (ticm phúc mô 300 mg/kg) Ở mơ h nh gây tăng axít uric mạn cách tiêm cách nhật liều kali oxonat giảm dần (từ 300 rag/kg xuống 150 mg/kg), cao thử cho uống tiên tục 14 ngày Dùng Allopurinol 300 mg làm đối chiếu đương
Tác dụng lợi tiểu: Cho chuột uống liều cao thử sau nhịn đói khơng uống nước vịng 18 trước Dùng Furosemidc 40 mg làm đối chiếu dương
Kết quả: Cao chiết phối họp Diệp hạ châu Râu mèo tỷ lệ phối hợp 4:1 có hoạt tính ức chế x o với IC50 43,83 Mg/ml Tỳ lệ phối hợp phần cao đặc Diệp hạ châu phần cao khơ Râu mèo cho hiệu q chống oxy hóa tối ưu nhất, nồng độ 50 Ịig/ml 66,79%, tương đương với hoạt tính Trolox nồng độ mM (63,49%)
Cao chiết phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo liều [100 mg DHC + 25 mg RM]/kg vừa có tác dụng lợi tiểu, vừa thể khả hạ axít uric máu cà sử dụng với mục đích dự phịng điều trị tãng axíí uric kéo dài lương tự Aliopurinoỉ
Kết luận: Cao chiết phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo có hoạt tính ức chế x o , hạ axít uric máu, có tác đụng chống oxy hóa lợi tiểu thực nghiệm Kết quà làm sờ cho nghiên cứu ứng dụng cao chiết phổi hợp điều trị tăng axít uric máu rối loạn khác chất oxy hóa gây
* Từ khóa: Diệp hạ châu đắng; Râu mèo; ức chế xanthine oxidase; Chẩt oxy hóa; Tác đụng chống oxy hóa
The antìoxidatìve, hyperuricem ic reductive and diuretic effect o f phyỉlanthus amarus orthosiphon stamineus extract in vitro
Summary
There have been researches proven the hypouricemic and diuretic effect of Phyllanthus amarus, the diuretic effect and uric excretion of Orthosiphon stamineus Xanthine oxidase is an oxidant lhat catalyses in uric acid producing process Our study is done with the aim of surveying antioxidative effect of coordinated extract from Phyilanthus amarus and Orthosiphon stcmincus in vitro
Methods: Aqueous extract of Phylỉanthus amarus was produced by The Central of Research and Manufacture Mien Trung Dry extract of Orthosiphon stamineuswas provided by BV Pharma Company
(2) In vitro study:
+ Surveying the xanthine oxiđase (XO) inhibitory activity of extract from Phyl, extract from Orth and coordinated extract from Phyl and Orth
+ Surveying the inhibition of lipid peroxidation through measuring malonyl diađehyde (MDA) content In vivo study:
+ Hyperuricemic reductive activity: Mice had been administered with coordinated herbal extract for days before making acute model The acute model of hyperuriccmia was created by abdominal injection with potassium oxonate in mice (dose: 300 mg/kg) In the chronic model, which was created by abdominal injection one time per two days with potassium oxonate in cutting down doses (from 300 mg/kg to 150 mg/kg), mice were administered continuously for 14 days with herbal extracts Allopurinol was used as a positive reference
+ Diuretic effect: Mice had not been served any food or water for 18 hours before administering the only dose of each herbal extracts Furosemide was used as a positive reference
Results: The in vitro study confirmed that coordinated extract in 4:1 ratio has x o inhibitory activity with IC50at 43.83 fig/ml In vitro studies showed that coordinated extract at dose of (100 mg Phyl + 25 mg Orth)/kg has diuretic effect as well as hypouricemic activity in both purpose of prevention and treatment These effects are as similar as those by furosemide and allopurinol
The in vitro study confirmed that coordinated extract in 4:1 ratio has x o inhibitory activity with IC50 at 43.83 ng/ml Coordinated extract in 1:1 ratio has opiimal inhibitory effect, at 50 |ig/ml concentration is equivalent to 66.79% of Trolox activity at a concentration mM (63.49%)
Conclusion: The coordinated extract of Phyllanthus amarus and Orthosiphon stamineus has x o inhibitory activity, antioxidative cffect invitro These results will be the basis for researches and applications in the treatment of hyperuricemia and other disorders caused by oxidants
* Key words: Phyllanthus amarus Schum et Thonn; Orthosiphon stamineus Benth; Xanthine oxidase inhibitory activity; Oxidant; Antioxidative effect
I ĐẶT VẤN ĐÊ
Gốc tự sản phẩm tr nh oxy hóa chất thể Tuổi cao thêm vào thói quen lạm dụng độc chất (thuốc lá, cà phê, phẩm ), dinh dưỡng sai lầm làm cho lượng gốc tự thể tăng lên nhiều
Khi có tăng nhiều gốc tự gây t nh trạng viêm nhiễm quan, bệnh lý tim mạch, bệnh thần kinh, đục thuỷ tinh thể, thối hóa hồng điểm mắt, tăng nguy bệnh ung thư sớm xuất hiện tượng lão hoá
Một gốc tự thường gặp Xanthin oxydase gốc tự chịu trách nhiệm khâu tr nh tạo axít uric máu Mà tăng axít uric máu dạng rối loạn chuyển hóa thường gặp, chiếm tỉ lệ từ 2,6 47,2% dân số khác có xu hướng ngày gia tăng Trong đó, 90% tăng axít uric máu đơn khơng có triệu chứng lâm sàng Trước đây, nói tới tăng axít uric máu thường người ta nghĩ tới bệnh Gout, nhiên có nhiều công tr nh nghiên cứu bệnh lý quan trọng khác như: tăng huyết áp, bệnh mạch máu não, bệnh lý chuyển hóa, bệnh thận, tiền sản giật
Diệp hạ châu Râu mèo hai thuốc nam chứng minh có tác đụng chống oxy hố cao có khả ức chế Xanthin oxydase độc lập Đề tài dược thực với mục đích t m hiểu tác dụng chống oxy hóa, ức chế xanthine oxydase cao chiết từ Diệp hạ châu Râu mèo để làm sở cho nghiên cửu chế phẩm
II ĐỎI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u
2.1 Đối tượng nghiên cứu
(3)Cao khô Râu mèo chiết xuất từ Râu mèo (Orthosiphon aristatus (Bỉume.) Miq.)> họ Hoa môi (Lamiaceae), công ty dược phẩm BV Pharma cung cấp
2.2 Đồng vật nghiên cứu
Chuột nhắt trắng đực chủng Swiss albino, khỏe mạnh, tuần tuổi, trọng lượng 20 ± g, cung cấp Viện Pasteur TP HCM để ổn định tuần trước thử nghiệm
2.3 Thuốc thử nghiệm
Thuốc đối chiếu: AUopurinol 300 mg (công ty Domesco, Việt Nam, số đăng ký VNB416605, số lô 010111, hạn sử đụng 170114) Viên nén Furosemide 40mg (công ty Mekophar, Việt Nam, hạn đùng 200614)
Hoá chất: xanthine (Sigma, USA); xanthine oxiđase (Sigma); oxonat kali (Sigma Aldrich, USA); kit định lirợng axit uric (uric axit liquicolor, Human Itd.Co., Đức); nước cất, NaCl 0,9%, EDTA; đệm phosphat 50 mM, pH = 7,5; đệm EDTA phosphat 50 mM, pH = 7,5
2.4 Phương pháp nghiên cứu
2.4.1 Phương pháp nghiên cứu in vitro xác định hoạt tính ức chế xanthine oxidase
Xanthin oxidase (XO) có tác dụng xúc tác phản ứng oxy hóa xanthin thành uric axít, đồng thời h nh thành gốc tự Ta sử đụng phương pháp trắc quang để khảo sát khả ức chế enzym x o mẫu thừ thông qua mật độ quang sản phẩm axít uric h nh thành Axft uric có bước sóng hấp thu cực đại 290nm Chất có khả ức chế x o cao ức chế h nh thành uric axít, mật độ quang đo giảm
Quy tr nh thử hoạt tính ức chế xanthine oxidasetheo bảng sau:
Mầu trắng tiến hành tương tự thay enzym mẫu thử đệm.Mẫu chứng có dịch enzym khơng có mẫu thử mà thay đệm Đo mật độ quang bước sóng 290 nm liên tục phút 30 phút tính từ lúc cho xanthine vào cuvet
Khả chống oxy hóa tính dựa phần trăm ức chế (%I) xác định theo công thức: 1% = (1 A c/A s)X 100
(4)Mỗi nồng độ tiến hành lần, ứng với nồng độ ta tính giá trị phần trăm ức chế (%I) Lấy trung b nh giá trị %I từ ta xác định giá trị phần trăm ức chế ứng với nồng ổộ khảo sát Mỗi mẫu thử pha thành bốn nồng độ khác nhau: 100;50;25;1(tyiM Nếu hoạt tính mẫu thử ức chể 50% 10 jiM th thử tiếp nồng độ nhỏ 5;2;l;0,5;0,2jiM để t m giá trị IC50 Giá trị IC50
ng/ml (nồng độ có khả ức chế 50%) mẫu tính dựa đồ thị hồi quy tương quan nồng độ (Cpư) khả ức chế (1%)
Khả ức chế p roxy h a lipid (1), (4)
VẠr> V K o f i o t t f Y iVí> V iẤ n a f A v t i Ị*ịẨ o l i r t i r l 1 *Y *ơn t Ị í l ỉ ấ n P ỊỊ1 Ị n ụ o t ; â / > V Q r' h ò t y i í i ? / w \ / Í T l /1UV u ỉi ỉi i EU1U l i o ii g UV v iỉ v p v i v A j i l v u i i p i u v u u iu u u iig iiiw il v u u \jUU Vi w AUSf* v ỉiỉỉiỉ ỉ ỉu l iỉ iU v/iig iV ỉỉy/ 1) ỉ u
sản phẩm tr nh peroxy hóa lipid màng tế bào MDA có khả phản ứng với axít thiobarbituric để tạo thành phức hợp trimethin có đỉnh hấp thu cực đại X 5=532 nm
0,1 mỉ mẫu thử nồng độ thử nghiệm cho phản ứng với 0,5 ml địch đồng thể não đệm phosphate 50 mM vừa đủ mỉ hỗn họp phản ứng 370C 15 phút dừng phản ứng ml axít tricloacetic 10% Sau ly tâm lấy dịch cho phản ứng với ml axít thiobarbituric 0,8% 15 phút nhiệt độ 1000C làm lạnh tiến hành đo quang bước sóng X = 532 nm
Trolox (Calbiochem Ltd Co.), đồng phân vitamin E dùng làm chất đối chiếu Cơng thức tính phần trăm (%) hoạt tínli chống oxy hóa (HTCO):
(ODc - ODj.) X|QQ HTCO (%) =: ODc
ODC: Mật độ quang mẫu đối chứng (DMSO) ODT: Mật độ quang mẫu thử
Các số ỉiệu kết thử nghiệm biểu thị trị số trung b nh lần đo khác
Cách tính IC50: Vẽ đồ thị biểu diễn tỷ lệ % khả dập tắt gốc tự chất cần thử nghiệm phần mềm Excel Từ đồ thị, nội suy giá trị nồng độ dập tắt gốc tự đo IC50bằng cách tính phương tr nh hồi quy tuyến tính có dạng y = ax + b y = 50 để suy IC50
2.4.2 Phương phápnghiêncứu tác dụng hạ axít uric thực nghiệm Nghiên cứu tác dụng hạ axít uric dự phịng mơ hình tăng axít uric cấp
Chuột nhắt trắng chia ngẫu nhiên thành lô, lô Cho chuột uống nước cất thuốc nghiên cứu với thể tích 0,1 ml/10g chuột
Lô chứng trắng (lô BT): uống nước cất Lô chứng bệnh lý (lô MH): uống nước cất
Lô đối chiếu( L ô A): uống Allopurinol 10 mg/kg thể trọng
Lô DHC: uống cao chiét Diệp hạ châu 200 mg/kg thể ữọng Lô RM: uống cao chiết Râu mèo 200 mg/kg thể trọng
Lô 4DHC:ỈRM (1): uống cao chiểt phối hợp DHG (100 mg/kg) Râu mèo (25 mg/kg) Lô 4DHC:1RM(2): uổng cao chiết phổi hợp DHC (200 mg/kg) Râu mèo (50 mg/kg) Lô 4DHC:1RM(4): uống cao chiết phối hợp DHC (400 mg/kg) Râu mèo (100 mg/kg)
(5)Nghiên cửu tác dụng hạ axít uric mơ hình tăng axít uric kéo dài 14 ngày
Chuột chia thành lô (mỗi lô con) Cho chuột uống nước cất thuốc nghiên cứu với thể tích 0,2 ml/10g chuột, tối đa 0,5 ml cho mỗichuột
Lô chứng trắng (lô BT): uống nước cất Lô chứng bệnh lý (lô MH): uống nước cất
Lô A (đối chiếu): uống Allopurinol 10 mg/kg thể trọng Lô DHC: uổng cao chiết Diệp hạ châu 200 mg/kg thể trọng Lô RM: uổng cao Râu mèo 200 mg/kg thể trọng
Lô 4DHC:1RM(1): uống cao chiết phối họp DHC (100 mg/kg) Râu mèo (25 mg/kg)
Lô A cho uống AUopurinol 10 mg/kg vào ngày thứ liên tục ngày sau
Các lơ cịn lại uống nước cất thuốc thử nghiệm vào định ngày liên tục 14 ngày
Lô BT tiêm phúc mô nước cất 0,lmỉ/10g chuột, cịn tất lơ cịn lại tiêm phúc mô kali oxonat cách ngày, liều 300 mg/kg (ngày 1), giảm dần xuống 250 mg/kg (ngày 3), 200 mg/kg (ngày 5) tr liều 150 mg/kg (ngày ,9 , 11, Ỉ3)
Lấy máu chuột thịi điểm ngày 14 để định lượng axít uric huyết Nghiên cứu tác dụng lợi tiểu(6)
Trước làm thử ngiệm, không cho chuột ăn uống nước vịng 18 Sau đó, chuột nhắt trắng chia ngẫu nhiên thành lô, lô Cho chuột uống nước cất thuốc nghiên cứu với íhể tích 0,2 ml/10g chuột
Lơ BT: uống nước cất
Lô DHC: uống cao đặc Diệp hạ châu 200 mg/kg thể trọng Lô RM: uống cao khô Râu mèo liều 200 mg/kg thể trọng
Lô 4ĐHC:1RM: uống cao chiết phối hợp DHC (100 mg/kg) Râu mèo (25 mg/kg) Lô F: uống Furosemid 40 mg/kg liều 10 mg/kg thể trọng
Sau uống nước cất thuốc nghiên cứu, chuột không ăn uống g thêm Hứng đo lượng nước tiểu chuột sau giờ, 24
2.4.3 Phương pháp xử lý số liệu thổng kê thực nghiệm
Dùng phần mềm Stata 10.0 để tính giá trị thống kê mô tả: số trung b nh, độ lệch chuẩn,
ứn g dụng phép kiểm tstudent độc lập để so sánh số trung b nh lô khác còng thời điểm, ứ n g dụng phép kiểm Anova ỉ yếu tố để đánh giá khác biệt trị số axít uric lô thử nghiệm thời điểm
r a KÉT QUẢ
3.1 Tác dụng ức chế Xanthỉn oxidase tỷ lệ phối hợp Diệp hạ châu - Râu mèo khác Bảng Kết thử hoạt tính ức chế xanthin oxidase
STT Tên mẫu Phần trăm ức Ghế (fig/ml)IC5*
100 (|ig/ml) 50 (Ịig/mỉ) 25 (ịig/ml) ÌOOig/mỉ)
ỉ 4DHC:ỈRM 71,0 + 1,5 52,2 ± 3,5 43,23 ±0,45 16,7 ±2,7 43,83
2 3DHC:1RM 61,2 ±2,9 41,6 ± 1,4 21,84 ±0,78 8,76 ± 0,59 71,36
(6)(1) (2) (3) (4) (5) (6) (7)
4 DHC 69,05 ± 0,80 48,6 ±1,9 33,9 + 2,6 19,7 ±1,9 84,46
5 RM 57,2 ±2,2 30,7 ±1,3 5,9 ± 2,2 2,31 ±0,81 87,65
6 1DHC:2RM 43,80 ± 0,97 35,04 + 0,81 19,0 + 3,0 9,4 ±1,9 >100
7 1DHC:3RM 40,97 ± ỉ,8 20,95 ± 0,82 6,6 ±1,6 >100
8 3DHC:2RM 32,8 ±1,5 15,3 ±2,0 2,9 ± 2,3 >100
9 2ĐHC:5RM 32,0 + 2,2 24,2 ±2,5 18,9 ±1,6 5,2 ±2,3 >100
10 1DHC:4RM 30,38 + 0,39 18,7 ±2,1 9,8 ±1,9 3,6 ±2,9 >100
11 1DHC:1RM 30,09 ±0,61 17,1 ±2,7 6,1 ±3,5 >100
Allopurinol 0,063
Thuốc đối chiếu Allopurinoi có khả ức chế x o nồng độ thấp cho kết IC50 = 0,063 Mg/ml Cả công thức phối hợp thể tác dụng ức chế x o , thứ tự khả ức chế giảm dần là: 4DHC1RM > 3DHC:1RM > 2DHC:1RM > 1DHC:2RM > 1DHC:3RM > 2DHC:5RM > 1DHC:4RM >
1DHC:1RM
3.2 Khả ức chế peroxy hóa ỉipỉd
Bảng Kết thử test MDA tỷ lệ phối hợp cao chiết Diệp hạ châu Râu mèo
Nồng độ (|ig/m ) H T CO (%)
1DHC1RM 2DHC:1RM 3DHC1RM 4DHC:1RM 5DHC:IRM
2000 91,30 86,72 86,26 84,96 75,88
1000 91,30 80,38 79,01 76,64 76,18
500 90,46 73,82 67,63 65,80 62,82
250 89,16 53,59 57,71 63,36 54,96
100 82,37 30,76 53,82 56,34 45,50
50 66,79 20,38 48,24 46,49 40,23
10 32,52 5,73 24,35 27,02 16,56
Bảng Kết thử mẫu đối chiểu
Trolox/MDA
Nồng độ (mM) OD HTCO%
0,1 0,529 4,86
0,5 0,445 19,96
1 0,376 32,37
5 0,203 63,49
(7)Cả tỷ lệ phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo nghiên cứu thể hoạt tính ức chế peroxy hóa lipid tăng theo nồng độ khảo sát Trong đó, nh n sơ cho thấy tỷ lệ phối hợp phần cao đặc Diệp hạ châu phần cao khô Râu mèo cho hiệu ức chế tối ưu Tỷ lệ phối họp đạt hoạt tính chống oxy hố nồng độ 50|ig/ml 66,79% tương đương với hoạt tính Troĩox nồng độ 5mM (63,49%)
3.3 Kếỉ nghiên cứu ỉác dụng hạ axít uric dự phịng mơ hình tăng axít uric c p Bảng Hàm lượng axít uric máu lô thừ nghiệm mô h nh tăng axít uric cấp
Lơ N Liều đừng Nồng độ axít uric(rag/di) Tỷ lệ giảm so với lơđối chứng bệnh
Đối chứng trắng 1,29 ±0,23
Đối chứng bệnh 1,83 + 0,12 #
Alopurinoỉ 10 mg/kg 0,95 ±0,22** 48%
Râu mèo 200 mg/kg 1,02 ±0,14*» 44%
Diệp hạ châu 200 mg/kg 0,93 ±0,08** 49%
Lô 4DHC: 1RM(4) (400 mg DHC + 100 mg RM)/kg 0,86 ±0,1** 53%
LÔ4DHC:1RM(2) (200 mg DHC + 50 mg RM)/kg 0,88 ±0,1** 52%
Lô 4DHC:1RM(1) (100 mg DHC + 25 mg RM)/kg 0,75 ±0,28** 59%
#p < 0,001: So với ỉô chứng trắng; **p < 0,001: So với lô chứng bệnh lý
Lô chuột uống cao chiết độc vị Diệp hạ chấu liều 200 mg/kg, lô uống cao chiết độc vị Râu mèo liều 200 mg/kg, lô uống cao chiết phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo theo tỷ lệ 4:1 có tác dụng hạ axít uric máu chuột thử nghiệm đạt ý nghĩa thống kê (p < 0,001) tương tự lô uống AHopurinoI
3.4 Kết nghiên cứu tác dụng hạ axít urỉc mơ hình tăng axít urỉc kéo dài Bảng Hàm lượng axít uric sau ngày 14 ngày (Đơn vị: mg/dl)
Lơ N Nồng độ axít urlc (mg/dl)
sau ngày sau 14 ngày
Đối chứng trắng 1,29 ±0,23 1,46 ±0,44
Đối chứng bệnh 2,54 ±0,82## 2,4 ỉ ±0,63#
Aỉopurinol (ỈOmg/kg) 1,63 ±0,34* 1,25 ±0,23**
Diệp hạ châu (200mg/kg) 1,47 ±0,35** 1,48 ±0,24**
Râu mèo (200mg/kg) 1,44 ±0,13 ** ỉ,50 ±0,19**
4DHC:1RM
(ỈOOmg DHC + 25mg RM)/kg 1,35 + 0,25** 1,41 ±0,38** ##p <0,01: so với lô chứng trắng
(8)Lô chứng tiêm kaỉi oxonat có lượng axít uric tăng 96,8% (ngày 7) 65% (ngày 14), đạt ý nghĩa thống kê so vói lơ b nh thường Cao đặc Diệp hạ châu (liều 200 mg/kg), cao khô Râu mèo (liều 200 mg/kg) cao chiết phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo (liều 100 mg DHC + 25 mg RM/kg) cho uống ngày hay kéo đài đến 14 ngày làm giảm hàm lượng axít uric máu đạt ý nghĩa thống kê tương tự Allopurinol
3.5 Tác đụng lợi tiểu
Bảng Lượng nước tiểu chuột sau giờ, 24 uống thuốc nghiên cứu
Sau glờ (mỉ) Sau (ml) Sau 24 (mỉ)
LÔNC 0,075+0,075 0,21 ±0,75 0,33 + 0,12
LÔ DHC 0,13 ±0,15 0,46 ±0,17 0,68 ±0,19
LÔRM 0,25 ±0,18 0,58 ±0,11 0,75 ±0,18
Lô Diệp hạ châu Râu mèo 0,21 ±0,19 0,53+0,1 0,75 ±0,18
Lô F 0,35 ±0,2 0,81 ±0,13 0,98 + 0,14
Cả lô chuột uống cao đặc Diệp hạ châu 200mg/kg, lô uống cao khô Râu mèo 200 mg/kg lô uổng cao chiết phối hợp 100 mg/kg Diệp hạ châu 25 mg/kg Râu mèo thể tác dụng lợi tiểu thứ sau 24 uổng thuốc đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng (uống nước cất) (p < 0,05)
IV BÀN LUẬN
4.1 Khả ức chế xanthỉn oxidase
Diệp hạ châu ức chế x o nhiều Râu mèo kết hợp Diệp hạ châu Râu mèo theo tỷ lệ 4:1 th khả ức chế x o lại lớn gấp đôi so với độc vị Diệp hạ châu Mặc dù khả nằng ức chế x o cao chiết phối hợp Diệp hạ châu + Râu mèo tỷ lệ 4:1 nhỏ hon nhiều so với Alỉopurinol tác dụng hạ axít uric máu cao chiết phối hợp Diêp hạ châu + Râu mèo lại không khác biệt so với AUopurinoỉ Điều chứng tỏ khả ức chế x o , cao chiết phối hợp Diệp hạ châu + Râu mèo cịn có tác đụng tăng thải axít uric làm tiêu uric axít
4.2 Khả ức chế peroxy hóa lipid
Kết thử nghiệm cho thấy tỷ ệ phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo thử nghiệm thể khả ức chế tạo MDA rõ đặc biệt tỷ lệ phối hợp phần cao đặc Diệp hạ châu phần cao khơ Râu mèo
4.3 Tác dụng hạ axít uric máu cao chiết Diệp hạ châu - Râu mèo
Kết thử nghiệm cho thấy việc kết họp Diệp hạ châu Râu mèo có giá trị điều trị tăng axít uric máu v lý sau:
Chỉ cần sử đụng 1/8 đến 1/2 liều so với điều trị thứ Diệp hạ châu Râu mèo riêng lẻ Hiện tượng tăng axftu r i c máu rối ỉoạn chuyển hóa có liên quan đến rối loạn khác tăng
huyết áp, đái tháo đường, rối loạn chuyển hóa lipiđ máu, thừa cân béo p h Do đó, ỉợi ích ỉà Diệp hạ châu lẫn Râu mèo có tác dụng làm hạ huyết áp, hạ đường máu, ổn định t nh trạng rối loạn lipid máu, nên phối hợp làm tăng thêm hiệu điều trị
Hai dược liệu có tác dụng điều trị sỏi đường tiết niệu bệnh lý thường gặp ngày gia tăng dân số, đặc biệt người bị tăng axít uric máu
4.4 Tác dụng lọi tiểu cao chiết Diệp hạ châu"Râu mèo
(9)sau 24 uống thuốc đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng (uống nước cất) (p < 0,05) Tuy nhiên, lượng nước tiểu lơ chuột có ý nghĩa thống kê so với lơ chuột uống Furosemide 10mg/kg thể trọng (p < 0,05)
V KÉT LUẬN
Tỷ ỉệ phối hợp phần cao đặc Diệp hạ châu phần Râu mèo thể khả ức chế xanthin oxidase in vitro mạnh
Cao chiểt Diệp hạ châu Rấu mèo với liều uống (100 mg DHC + 25 mg Râu mèo)/kg, có tác dụng hạ axít uric mơ h nh tăng axít uric cấp tăng axít uric kéo dài phối hợp Diệp hạ châu với Râu mèo tạo nên hiệu hạ axít uric tốt so với dùng riêng rẽ loại dược liệu
Cao chiết Diệp hạ châu Râu mèo với ỉiều uống (100 mg DHC + 25 mg Râu mèo)/kg tbể tác dụng lợi tiểu bắt đầu thứ sau uống thuốc
Cao chiết phối hợp Diệp hạ châu Râu mèo íhể hoạt tính chổng oxy hóa in vitro TÀ I LIỆU THAM KHẢO
1 Bộ Y Tế Viện Dược Liệu (2006), Phư ng pháp nghiên cứu tác dụng dược lý củathuốc từ dược thảo Nhà xuất
bản Khoa học Kỹ íhuật, tr 279 293
2 Lê Thị Minh Dung (2011), Nghiên cứu tác dụng hạ axít uric máu cao chiết từ đại bi, luận vãn Cao học Dược, Đại học Y Dược Tp HCM
3 Mai Thanh Thi Nguyen, Suresh Awaie, Yasuhiro Tezuka, Liying Shi (2005), “Hypouricemic Effects of Acacetin and 4,5ODicaffeoyIquinic Axít Methyl Ester on Serum Axit uric Levels in Potassium Oxonat Pretreated Rats”, Biologycal and pharmac utical Bull tin, p2231 2234
4 Michael Antolovich, Paul D Prenzler, Emilios Patsalides, Suzanne McDonald and Kevin Robards (2002), “Methods for testing antioxidant activity”, Analyst, vol 127, pp 183198
5 Nguyễn Thùy Dương cộng (2011), “Nghiên cứu tác dụng hạ axít uric huyết Hy thiêm mơ h nh gây tăng cấp axít uric bàng kali oxonat”, Tạp chí Dược liệu, tập 16, (số + 2), tr 79 82
6 Phạm Thị Hóa, Bùi Mỹ Linh (2012), Khảo sát tác dụng h a học, độc tính cấp tác dụng ợi tiểu dứa Caỉda (Pandanus kaida Kurz) thực nghiệm, đề tài cấp sở, Đại học y dược Tp HCM
NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT TỪ N VÓI
ThS Trần Thu H iền*
Hư&ng dẫn: PGS TS Đặng M inh Nhật TỎ M T T
Cây vối có tên khoa học Cỉ istocaiyx op rcuỉatus, thuộc họ Sim, Myrtaceae Trong nụ vổi chứa nhiều thành phần hóa học có hoạt tính sinh học xác định thuộc nhóm Aavonoiđ [4] Các hợp chất có hoạt tính chống oxy hóa, ức chế enzyra, k m hãm tr nh phát triển cửa tể bào ung thư, Mặc dù nụ vối có nhiều cơng đụng sống y nước ta, nghiên cứu nghiên cửu sơ thành phần hóa học từ nụ vối hạn chế Để đa dạng hom nghiên cứu thành phần hóa học loại vùng miền khác nhạu nên thực đề tài “Nghiên cửu chiết tách xác định thành phần h a học sổ dịch chiết từ nụ vối"
Mục tiêu
Nghiên cứu quy trình chiểt hợp chẩt h a học từ nụ vối
Xác đinh thành phần h a học c a dịch chiấ từ nụ vối