Cô lập và nhận danh các hợp chất từ cao ethyl acetate của địa y roccella sinensis (nyl ) hale thu hái ở bình thuận luận văn tốt nghiệp

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HCM KHOA HÓA BỘ MƠN HĨA HỮU CƠ _ _ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài: CÔ LẬP VÀ NHẬN DANH CÁC HỢP CHẤT TỪ CAO ETHYL ACETATE CỦA ĐỊA Y ROCCELLA SINENSIS (NYL.) HALE THU HÁI Ở BÌNH THUẬN Người hướng dẫn Sinh viên thực Mã số sinh viên : ThS Hồ Xuân Đậu : Trần Minh Dũng : 35106006 Tp Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2013 LỜI CẢM ƠN - Trên thực tế khơng có thành công mà không gắn liền với hổ trợ,giúp đỡ dù hay nhiều, dù trực tiếp hay gián tiếp người khác Với lòng trân trọng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn đến:  Thầy Hồ Xuân Đậu, người mà truyền đạt cho em nhiều kiến thức chuyên môn, hướng dẫn truyền đạt nhiều kinh nghiệm nghiên cứu quý báu suốt thời gian em học tập, thực hoàn thành đề tài  Thầy Dương Thúc Huy tận tình truyền đạt kinh nghiệm quý báu, quan tâm, nhiệt tình hướng dẫn, tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình thực đề tài  Các anh chị nghiên cứu sinh tất bạn sinh viên nhóm làm đề tài khóa luận tốt nghiệp mơn Hóa Hữu động viên, giúp đỡ suốt trình thực đề tài  Gia đình động viên tạo điều kiện tốt vật chất lẫn tinh thần để em hồn thành khóa học Xin chân thành cảm ơn LỜI MỞ ĐẦU Ngay từ thời trung đại, nhiều người làm nghề y sử dụng loài địa y làm thuốc chữa bệnh như: Lobaria pulmonaria chữa bệnh phổi, Parmelia sulcata chữa bệnh sọ não[1], …Ngày địa y sử dụng làm số loại thuốc dân gian Người da đỏ Florida người Trung Quốc sử dụng số loại địa y khác làm thuốc, đặc biệt thuốc long đờm[1] Ahmadjian Nilsson[2] công bố địa y Cetraria islandica bán rộng rãi tiệm bào chế thuốc Thụy Điển dùng để điều trị bệnh đái tháo đường, bệnh phổi bệnh viêm mũi Peltigera canina sử dụng Ấn Độ dược phẩm làm giảm đau gan[1] Ngồi cơng dụng chữa bệnh, địa y cịn sử dụng làm thực phẩm, mỹ phẩm, xà phòng, nước hoa Các loại hợp chất khác dẫn suất depside chiết từ chi Evernia, Parmelia Ramalina, số có mùi hương hấp dẫn dùng xà phòng nước hoa Đặc biệt, địa y xem chất thị sinh học cho ô nhiễm môi trường Với công dụng đó, địa y nhiều nhà hóa dược nghiên cứu, nhiều hợp chất tự nhiên cô lập số xác định có hoạt tính kháng khuẩn, kháng ung thư, kháng virut, giảm đau, hạ sốt[3,4] , … Địa y thực vật bậc thấp, kết cộng sinh tảo nấm Nhờ dạng sống này, địa y sống nhiều nơi đất, đá, thân cây, điều kiện khác nghiệt khô hạn vùng nhiệt đới Ở Việt Nam, người ta dễ dàng tìm thấy có mặt địa y nơi quen thuộc với phân bố phong phú đa dạng Để góp phần vào phát triển khoa học Việt Nam, lựa chọn loại địa y Roccella sinensis (Nyl.) Hale thuộc chi Rocellaceae thu hái tỉnh Bình Thuận, Việt Nam để nghiên cứu MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU MỤC LỤC .2 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .3 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ, BẢNG BIỀU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT VỀ ĐỊA Y 1.1.1 Định nghĩa phân loại địa y 1.1.2 Vai trò hợp chất tự nhiên địa y [9] 1.1.3 Một số ứng dụng địa y 1.2 HOẠT TÍNH CỦA CÁC HỢP CHẤT TỪ ĐỊA Y 1.2.1 Hoạt tính kháng virus hợp chất địa y[5] .6 1.2.2 Hoạt tính điều tiết tăng trưởng thực vật bậc cao[5] 1.2.3 Hoạt tính kháng ung thư kháng đột biến hợp chất địa y[5] .7 1.2.4 Hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm hợp chất địa y[5] .8 1.2.5 Các loại enzyme bị ức chế hợp chất địa y[5] 1.3 NGHIÊN CỨU HÓA HỌC VỀ CÁC HỢP CHẤT CÓ TRONG ĐỊA Y 1.4 MÔ TẢ THỰC VẬT ROCCELLA SINESIS (NYL.) HALE 10 1.5 CÁC NGHIÊN CỨU HÓA HỌC TRONG CHI ROCCELLA 10 1.5.1 Các acid béo 10 1.5.2 Các hợp chất aliphatic vòng 10 1.5.3 Các carbohydrat .10 1.5.4 Các hợp chất carotenoid 11 1.5.5 Các hợp chất Chromane Chromone 11 1.5.6 Các hợp chất depside .11 1.5.7 Các hợp chất dibenzofurane 11 1.5.8 Các hợp chất chứa N 11 1.5.10 Cơng thức hóa học hợp chất 12 CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 14 2.1 HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ 14 2.1.1 Hóa chất 14 2.1.2 Thiết bị .14 2.2 KHẢO SÁT NGUYÊN LIỆU 14 2.3 ĐIỀU CHẾ CÁC LOẠI CAO 15 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 3.1 Khảo sát cấu trúc hóa học hợp chất C A 17 3.2 Khảo sát cấu trúc hóa học hợp chất RS-A4 .17 3.3 Khảo sát cấu trúc hóa học hợp chất RS-A3 .19 CHƯƠNG KẾT LUẬN 21 TÀI LIỆU THAM KHẢO .22 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT s Mũi đơn (Singlet) d Mũi đôi (Doublet) t Mũi ba (Triplet) m Mũi đa (Multiplet) brs Mũi đơn rộng m/z Mass to charge ratio Transfer NMR Cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear magnetic resonance) HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance 13 Carbon Nuclear Magnetic Resonance DEPT High-Perfo Distortionless Enhancement by Polarization Transfer J Hằng số tương tác spin-spin ppm Part per million UV Tia cực tím (Ultra violet) HR-ESI-MS Hight Resolution- Electro Spray Ionization -Mass Spectrometry ED Ether dầu EA Ethyl acetate C Chloroform Me Methanol Ac Acid Acetic C-NMR DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ, BẢNG BIỀU Hình ảnh Hình Ba dạng địa y Hình Sinh tổng hợp hợp chất từ địa y Hình Địa y Roccella sinensis 10 Hình Tương quan hợp chất RS-A3 20 Sơ đồ Sơ đồ Sơ đồ điều chế cao địa y Roccella sinensis (Nyl.) Hale 15 Sơ đồ Quy trình sắc kí cột cao etyl acetat EA3 16 Bảng biểu Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất RS-A4 C A 18 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất RS-A3 20 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT VỀ ĐỊA Y 1.1.1 Định nghĩa phân loại địa y Địa y dạng thực vật bậc thấp đặc biệt, kết cộng sinh nấm (mycobiont) thành phần quang hợp (photobiont) thường tảo (green alga) hay vi khuẩn lam (cyanobacterium) Hiện có khoảng 17000 lồi địa y tìm thấy Địa y thường chia làm ba dạng chính: dạng khảm (crustose), dạng phiến (foliose) dạng sợi (frucose) Thành phần tảo địa y sản sinh carbohydrate q trình quang hợp, cịn thành phần nấm sản sinh hợp chất tự nhiên (để chống tia UV, ngăn chặn sâu bọ loài động vật ăn cỏ, …), cung cấp nước khoáng chất Kết từ cộng sinh giúp địa y sinh trưởng sống sót điều kiện khắc nghiệt, chủ yếu vùng vĩ độ cao, vùng nhiệt đới, diện khắp nơi đá, đất, cây, thân cây, kim loại, thủy tinh [6] Địa y dạng khảm Địa y dạng phiến Địa y dạng sợi Hình 1: Ba dạng địa y 1.1.2 Vai trị hợp chất tự nhiên địa y [9] − Bảo vệ trồng bậc thấp bậc cao − Các hợp chất thơm hấp thụ tia UV, bảo vệ địa y chống lại xạ có hại − Các carboxylic acid từ địa y tác chất tạo phức mạnh giúp cho địa y lấy khoáng chất từ vật chủ nơi địa y bám vào (substrate) − Giúp xua đuổi thú ăn thịt côn trùng 1.1.3 Một số ứng dụng địa y Địa y sử dụng làm thực phẩm, làm phẩm nhuộm, nguyên liệu thô sản xuất nước hoa y học cổ truyền 1.2 HOẠT TÍNH CỦA CÁC HỢP CHẤT TỪ ĐỊA Y Địa y sản sinh lượng lớn hợp chất hữu cơ, đa số có hoạt tính sinh học nhiều loại chúng đặc hiệu địa y hoá học hợp chất tự nhiên Tuy vậy, khảo sát hoá học địa y bị hạn chế nguồn cung có hạn, địa y phát triển chậm Những nghiên cứu gần cho thấy việc ni cấy địa y phịng thí nghiệm khơng dễ dàng, khoảng 10% địa y nuôi cấy thành công, nhiên chúng lại chứa hợp chất hữu khác hẳn với hợp chất có loại địa y tự nhiên [5] Lê Hoàng Duy [6] nghiên cứu nuôi cấy thành công 10 % khoảng 50 loài địa y lấy từ Việt Nam Tuy đạt thành công mặt cô lập hợp chất hợp chất cô lập từ địa y nuôi cấy khác so với hợp chất địa y tự nhiên Khoảng gần 1000 hợp chất địa y cô lập Nghiên cứu hoạt tính sinh học khả dược học hợp chất tự nhiên từ địa y thống kê đầy đủ Boustie (2007) [9], Huneck (1999) [10], Muller (2001) [11] kháng khuẩn, kháng virus, chống oxy hóa, kháng ung thư, kháng viêm, kháng enzyme … 1.2.1 Hoạt tính kháng virus hợp chất địa y[5] Hợp chất Virus enzyme virus Depsidone: virensic acid dẫn xuất Hệ enzyme đặc hiệu đính thể nguyên thực khuẩn vào nhiễm sắc thể virus HIV Butyrolactone acid: protolichesterinic acid Sao chép ngược HIV (+)-Usnic acid depside khác Virus Epstein-Barr (EBV) Emodin, 7-Cloroemodin, 7-Chloro1-O-methylemodin, 5,7Dichloroemodin, Hypericin HIV, cytomegalovirus virus khác 1.2.2 Hoạt tính điều tiết tăng trưởng thực vật bậc cao[5] Địa y hợp chất địa y Hoạt tính Barbatic acid, 4-Odemethylbarbatic acid, diffractaic acid, evernic acid, lecanoric acid, βorcinolcarboxylic acid, orsellinic acid Ức chế tăng trưởng rau diếp Ergochrome AA (secalonic acid A) Gây độc cho thực vật Evernic acid Giảm nồng độ chất diệp lục rau bina Lecanoric acid Nguyên nhân gây bất thường cho gốc Allium cepa Các hợp chất phenol đơn vịng Hoạt tính ức chế độc chất thực vật Các quinone từ Pyxine sp Ức chế nguyên phân rễ Allium cepa Usnic acid Ức chế mầm phát triển Lepidium sativum 1.2.3 Hoạt tính kháng ung thư kháng đột biến hợp chất địa y[5] Hợp chất Hoạt tính loại tế bào (-)-Usnic acid Kháng ung thư phổi Lewis, ung thư bạch cầu P388, ức chế phân bào, có hoạt tính chống lại tế bào sừng hóa HaCaT Protolichesterinic acid Có hoạt tính chống lại tế bào ung thư bạch cầu K-562 khối u rắn Ehrlich Pannarin, 1-Chloropannarin, Sphaerophorin Gây độc cho q trình tái tạo lympho bào Naphthazarin Có hoạt tính chống lại dịng tế bào sừng hóa Scabrosin ester dẫn xuất, Euplectin Gây độc chống lại tế bào murine P815 mastocytoma dòng tế bào khác Hydrocarpone, Salazinic acid, Stitic acid Có hoạt tính với nhân tế bào gan chuột Psoromic acid, Chrysophanol, Emodin dẫn xuất Có hoạt tính chống lại tế bào ung thư bạch cầu 1.2.4 Hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm hợp chất địa y[5] Hợp chất Vi khuẩn Usnic acid dẫn xuất Vi khuẩn gram (+), Bacteroides spp., Clostridium perfringens, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus spp., Enterococcus spp., Mycobacterium aurum Protolichesterinic acid Helicobacter pylori Methyl orsellinate, Ethyl orsellinate, Methyl β-orsellinate, Methyl haematommate Epidermophyton floccosum, Microsporum canis, M gypseum, Trichophyton rubrum, T mentagrophytes, Verticillium achliae, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Candida albicans Alectosarmentin Staphylococcus aureus, Mycobacterium smegmatitis 1.2.5 Các loại enzyme bị ức chế hợp chất địa y[5] Hợp chất địa y Enzyme bị ức chế Atranorin Trypsin, Pankreaselastase, Phosphorylase Baeomycesis acid 5-Lipoxygenase Bis-(2,4-dihydroxy-6-npropylphenyl)methane, Divarinol, cao chiết từ Cetraria juniperina, Hypogymnia physodes Letharia vulpina Tyrosinase Chrysophanol Glutathione reductase Confluentic acid, 2β-OMethylperlatolic acid Monoaminoxidase B 4-O-Methylcryptochlorophaeic acid Prostataglandinsynthetase (+)-Protolichesterinic acid 5-Lipoxygenase (Sao chép ngược HIV) Vulpinic acid Phosphorylase Norsolorinic acid Monoamino oxidase  Biện luận cấu trúc phổ RS-A4 Phổ H-NMR cho thấy có tín hiệu nhóm metyl gắn vịng thơm [δ H 2.58 (3H, s), δ H 2.62 (3H, s)], proton vòng thơm [δ H 6.29 (1H, d) J=2.5Hz, δ H 6.38 (1H,br), δ H 6.74 (1H, br), δ H 6.77 (1H, d) J=2.5Hz], tín hiệu nhóm hydroxy kiềm nối [δ H 11.11 (1H,s)].Giá trị cùa proton [δ H 6.74 (1H, s), δ H 6.77 (1H, s)] dịch vùng trường thấp chứng tỏ thuộc nhân thơm B Ta khẳng định RS-A4 đơn vị orcinol Từ liệu phổ tài liệu tham khảo[29], ta xác định RS-A4 lecanoric acid Hợp chất RS-A4 Hợp chất C A δ H, J(Hz) δ H, J(Hz) 6.29 (d, J=2.5Hz) 6.24 (d, J=2.5Hz) 6.38 (br) 6.29 (d, J=2Hz) 2.29 (s) 2.91 (s) 2-OH 11.11 (s) 11.59 (s) Vị trí 9.10 (s) 4-OH 1’ 2’ 3’ 6.77 (d, J=2.5Hz) 4’ 5’ 6.74 (br) 6’ 7’ 8’ 2.62 (s) Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất RS-A4 C A 3.3 Khảo sát cấu trúc hóa học hợp chất RS-A3 8' CH CH O HO O 5' ' 3' OH OH Hợp chấy RS-A3 cô lập từ phân đoạn EA3.2 (0.55g) Trạng thái: chất bột màu trắng Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz, acetone-d ) phụ lục 2, 2a 13 C-NMR (125 MHz, acetone-d ) phụ lục trình bày bảng Phổ HSQC trình bày phụ lục Phổ HMBC trình bày phụ lục  Biện luận cấu trúc phổ RS-A3 Phổ 1H-NMR cho thấy có nhóm metyl gắn vòng thơm [δ H 2.59 (3H,s), δ H 2.29 (3H,s)], proton vòng thơm [δ H 6.63 (1H,br), δ H 6.57 (2H,br), δ H 6.37 (1H,m), J=2.5Hz, δ H 6.29 (1H,d), J=2.5Hz], tín hiệu nhóm hydroxyl kiềm nối [δ H 11.30 (1H,s)] Phổ 13C-NMR khẳng định hợp chất RS-A3 có 15 carbon: nhóm metyl gắn vịng thơm (δ 24.4, δ 21.4),1 nhóm carboxyl (δ 174.4), 12 carbon vòng thơm (δ 101.9, δ 107.4, δ 112.9, δ 114.8, δ 114.5, δ 117.8, δ 141.3, δ 144.7, δ 152.0, δ154.5, δ 159.1, δ 164.2) Dựa vào phổ HSQC cho thấy proton H-8 (ở δ H 2.29) tương quan nối với carbon δ 21.4, proton H-8’ (ở δ H 2.59 ) tương quan nối với carbon δ 24.4 Nhân thơm A, proton δ H 6.29 tương quan nối với carbon δ 101.9 proton δ H 6.37 tương quan nối với carbon δ 112.9 Nhân thơm B, proton δ H 6.57 tương quan nối với carbon δ 114.6 proton δ H 6.63 tương ứng với carbon δ 117.8 Trên nhân thơm A, phổ HMBC cho thấy proton nhóm metyl (δ H 2.59) cho tương quan với carbon C-6 (δ 144.7), C-1 (δ 107.4) C-5 (δ 112.9) Proton nhóm hydroxy (δ H 11.30) cho tương quan với carbon C-2 (δ 164.2) C-3 (δ 101.9) Phổ HSQC giúp ta khẳng định proton δ H 6.29 gắn vào C-3 (δ 101.9) proton δ H 6.37 gắn vào C-4 (δ 112.9).Từ đó,ta khẳng định cấu trúc nhân thơm A Trên nhân thơm B, phổ HMBC cho thấy proton nhóm metyl (δ H 2.29) vị trí C-6’cho tương quan với carbon C-6’(δ 141.1), C-5’ C-1’ trùng (δ 114.8, δ 114.5) Phổ HSQC giúp ta khẳng định proton δ H 6.63 vị trí C-5’(δ 114.8) proton δ H 6.57 vị trí C-1’(δ 114.5) Từ đó, ta khẳng định cấu trúc gần đối xứng nhân thơm B Hợp chất RS-A3 (Aceton) Vị trí δ H , J (Hz) 117.7 164.2 6.29 (d, 2.5 Hz) 159.1 6.37 (m, 2.5 Hz) 112.9 144.7 174.4 2.59 (s) 2-OH 11.30 (s) 1’ 6.57 (br) 24.4 114.7 154.5 6.63 (br) 107.4 4’ 5’ 152.0 6.57 (br) 114.5 6’ 8’ 1, 5, 1, 2, 2’ 3’ 101.9 HMBC ( H → 13C) δC 141.1 2.29 (s) 21.4 1’, 5’, 6’ Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất RS-A3 Dựa vào liệu phổ tài liệu tham khảo[30] ta xác định RS-A3 lecanorin 8' CH CH O HO O 5' ' 3' OH OH Hình Tương quan hợp chất RS-A3 CHƯƠNG KẾT LUẬN Từ mẫu địa y Roccella sinensis (Nyl.) Hale, họ Rocellaceae, thu hái thân chín tầng chùa Hang, huyện Liên Hương, tỉnh Bình Thuận, Việt Nam Sau làm sạch, phơi khơ, xay nhuyễn thu 1.7 kg mẫu Tiến hành điều chế cao metanol thơ (400 g) Tiến hành sắc kí cột silica gel cao metanol thô, giải ly đơn vị dung môi với độ phân cực tăng dần: hexan, etyl acetate metanol thu loại cao như: cao H, cao EA cao Me Tiến hành sắc kí cột cao EA thu phân đoạn ký hiệu từ EA1 đến EA4 Chọn khảo sát phân đoạn EA3 (30 g) thu hợp chất ký hiệu C A, RS-A3 RS-A4 Sử dụng phương pháp phổ nghiệm đại so sánh với tài liệu tham khảo, xác định cấu trúc ba hợp chất hữu cô lập địa y Roccella sinensis (Nyl.) Hale hình Cả chất chất cũ cô lập nhận danh CH3 O HO O CH 8' OH Metyl orsellinate 8' 8' CH O CH3 HO CH3 O O OH Lecanorin 5' 1' 3' CH O OH HO O OH 5' 1' 3' 7' OH OH H Lecanoric acid HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO CỦA ĐỀ TÀI Vì điều kiện thời gian vật chất không cho phép, nên phạm vi đề tài này, khảo sát cao etyl acetat EA3 Trong thời gian tới, có điều kiện tiến hành khảo sát hợp chất lại cao etyl acetat EA2 EA3, cao aceton cao metanol Đồng thời tiến hành thử nghiệm số hoạt tính sinh học loại cao hợp chất cô lập TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] E J W Barrington, Arthur J.Willis, The biology of lichens: Contemporary biology, 2nd edition, Edward Arnold, London (1974) [2] Ahmadjian V.; Nilsson S, Swedish Lichens.Yb Am Swed Hist Fdn (1963) [3] B C Behera, Neerja Verma, Anjari Sonone, Urmila Markhija, “Antioxidant and antibacterial properties of some cultured lichens”, Bioresource Technology, 99, 776-784 (2008) [4] Muhammad I Choudhary, Azizuddin Saima Jalil, Atta-ur-Rahman, “Bioactive phenolic compounds from a medicinal lichen, Usnea longissima”, Phytochemistry, 66, 2346-2350 (2005) [5] Yit Heng Choi, Generic potential of lichen-forming fungi in polyketide biosynthesis, A thesis for Doctor of Philosophy, RMIT University, 10-15, 2008 [6] Le Hoang Duy, Chemical study of common lichens in the south of Vienam, A thesis for Doctor of Philosophy, Kobe Pharmaceutical University, 2-8, 2012 [7] E J W Barrington, Arthur J.Willis, The biology of lichens: Contemporary biology, 2nd edition, Edward Arnold, London, 1974 [8] Siegfried Huneck, Isao Yoshimura, Identification of lichen substances, Springer, Berlin, 155-311, 1997 [9] Culberson C., Improved conditions and new data from the identification of lichen products by a standardized thin-layer chromatographic method, Journal of Chromatography, 72, 113-125, 1972 [10] Boustie J, Grube M, Lichens - a promising source of bioactive secondary metabolites, Plant Genetic Resources 3, 273-287, 2007 [11] Siegfried Huneck, New results on the chemistry of lichen substances, Springer, Berlin, 2001 [12] Muller K., Pharmaceutically relevant metabolites from lichens, Applied Microbiology and Biotechnology, 56, 9-16, 2001 [13] Huneck S., Follmann G Uber die Inhaltsstoffe von, Roccella mollis (Hampe) Zahlbr Und die Strucktur sowie absolute Konfiguration der Roccellasarue Z Nafurforsch 22b: 666-670, 1967 [14] Huneck S., Schmidt J., Porzel A Chemie der Roccellsaure Z Naturforsch 49b: 561-568,1994c [15] Culberson C F., Chemical and botanical guide to lichen products Univ North Carolina Press, Chapel Hill, 1969 [16] Anker R M., Cook A H., A new synthesis of olivetol J Chem Soc:311- 313,1945 [17] Alberhart D J., Overton K H., Huneck S., Studies on lichen sunstance Part LXII Aromatic constituents of the lichen Roccella fuciformis DC A recised structure for lepraric acid J Chem Soc:704-707, 1969 [18] Hucneck S., Follmann G Mitteilungen ober Flechterninhaltssoffe LXXIV Zur Phytochemie und Chemotaxonomie der Lecanoraceengattung Haematomma J Hattorl Bot Lab 35:319-324,1972 [19] Hucneck S., 6-hydroxymethyleugenitin, ein neues Chromon aus Roccella fuciformis Phytochemistry 11:489-1490, 1972a [20] Devlin J P., Falshaw C P., Olllis WD,Wheeler R Phytomechical examination of the lichen, Lecanora rupicola(L) zahlbr J Chem 29:1069-1077, 1971 [21] Huneck S., Jakupovic J., Follmann G., The final structures of the lichen chromones galapagin, lobodirin,mollin, and roccellin Z Naturforsch 47b:449-451, 1992a [22] Huneck S.,Elix J A., Naidu R., Follmann G., 3-O-Demethylschizopeltic acid, a new dibenzofuran from the lichen Roccella hypomecha Aust J Chem 46:407-410, 1993a [23] Czeczuga B., Carotenoids In: Galun M (ed) CRC Handbook of lichenology, Vol III CRC Press, Boca Raton, Floria, pp 25-34, 1988 [24] Ferguson G., Mackey I R., the structure of portentol:X-ray analysis of a heavy atom derivative Chem Common: 665-666, 1970 [25] Aberhart DJ ,Overton K H., Huneck S., Portentol: an unsual polypropionate feom the lichen Roccella portentosa J Chem Soc (C): 1612-1623, 1970 [26] Marcuccio S M , Elix J A., A structual revision of picroroccellin Tetrahedron Lett: 1445-1448, 1983 [27] Bohman-Lindgren G., Chemical studies of lichens XXXIII , Roccanin, a new cyclic tetrapeptit from Roccella canarlensist Tetrahedron 28:4625-4630,1972 [28] Huneck S., Jackupovic J., Follmann G., 9-methylpannarate from the lichen Roccella capesis Z Nature forsch 46b:969-970,1991b [29] Thiago I B Lopes, Roberta G Coelho, Nídia C Yoshida, Neli K Honda, Radical-scavenging activity of orsellinates, Chem Pharm Bull., 56, 11, 1551–1554 (2008) [30] Irma S Rojas, Blas Lotina-Hennsen, Rachel Mata, Effect of lichen metabolites on thylakoid electron transport and photophosphorylation in isolated spinach chloroplasts, J Nat Prod , 63, 1396–1399 (2000) PHỤ LỤC CH3 O HO O CH 8' OH Phụ lục 1: Phổ 1H-NMR hợp chất C A RS-A3-ACETONE-1H 2.291 2.592 6.628 6.626 6.580 6.579 6.576 6.379 6.378 6.376 6.374 6.373 6.294 6.289 11.300 1300 1200 1100 8' 8' CH3 HO 1000 900 CH3 O O 5' 1' 3' 800 OH 700 OH 600 500 400 1', 5' 300 200 3' 100 11.5 11.0 10.5 10.0 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 f1 (ppm) 6.0 5.5 5.0 4.5 Phụ lục 2: Phổ 1H-NMR hợp chất RS-A3 4.0 3.5 3.0 3.31 3.44 1.00 1.93 1.17 1.00 0.90 2.5 -100 1300 6.294 6.289 6.379 6.378 6.376 6.374 6.373 6.580 6.579 6.576 6.628 6.626 RS-A3-ACETONE-1H 1200 1100 1000 8' CH3 HO CH3 O O 900 5' 1' 3' 800 OH 700 OH 600 500 400 1', 5' 300 3' 200 100 6.90 6.85 6.80 6.75 6.70 6.65 6.60 1.00 1.17 1.93 1.00 6.55 6.50 6.45 f1 (ppm) 6.40 6.35 6.30 Phụ lục 2a: Phổ 1H-NMR hợp chất RS-A3 -100 6.25 6.20 6.15 6.10 24.390 21.397 124.080 117.778 114.776 114.473 112.861 107.446 101.931 144.659 141.131 174.378 164.179 159.111 154.497 151.996 RS-A3-ACETONE-13C 1600 1500 1400 1' 1300 8' 5' CH3 O 3' HO O CH3 1200 5' 1' 3' 1100 1000 OH 8' OH 900 800 700 600 500 400 2' 4' 300 6' 200 100 -100 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 f1 (ppm) 80 70 60 Phụ lục 3: Phổ 13C-NMR hợp chất RS-A3 50 40 30 20 RS-A3-ACETONE-HSQC 1', 5' 3' 60 70 80 90 100 3' 120 130 140 8' CH3 HO 9.0 8.8 8.6 CH3 O 8.4 O 5' 1' 3' 150 160 OH 170 OH 8.2 8.0 180 7.8 7.6 7.4 7.2 7.0 6.8 f2 (ppm) 6.6 6.4 6.2 Phụ lục 4: Phổ HSQC hợp chất RS-A3 6.0 5.8 5.6 5.4 5.2 5.0 f1 (ppm) 110 1', 5' 8' RS-A3-ACETONE-HMBC 1',5' 2-OH 3' 80 90 100 110 8' CH3 O 6' HO 120 CH O 5' ' 3' 130 OH 140 OH 1' 150 160 170 13 12 11 10 f2 (ppm) Phụ lục 5: Phổ HMBC hợp chất RS-A3 f1 (ppm) 1',5' 8' CH3 O CH3 O HO O OH 5' 1' 7' OH 3' OH H Phụ lục 6: Phổ 1H-NMR hợp chất RS-A4 ... Tuy đạt thành công mặt cô lập hợp chất hợp chất cô lập từ địa y nuôi c? ?y khác so với hợp chất địa y tự nhiên Khoảng gần 1000 hợp chất địa y cô lập Nghiên cứu hoạt tính sinh học khả dược học hợp. .. tổng hợp hợp chất từ địa y [5] 1.4 MÔ TẢ THỰC VẬT ROCCELLA SINESIS (NYL. ) HALE Tên khoa học: Roccella sinensis (Nyl. ) Hale Họ: Rocellaceae Mô tả thực vật: loại địa y dạng sợi thường mọc thân cao, ... liệu tham khảo, xác định cấu trúc ba hợp chất hữu cô lập địa y Roccella sinensis (Nyl. ) Hale hình Cả chất chất cũ cô lập nhận danh CH3 O HO O CH 8' OH Metyl orsellinate 8' 8' CH O CH3 HO CH3