Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết trình bày đánh giá tác dụng hạ đường huyết của các cao chiết từ rễ và toàn thân trên mặt đất của Bìm ba răng trên mô hình chuột nhắt trắng gây tăng đường huyết bằng tiêm tĩnh mạch đuôi alloxan ở liều duy nhất 60 mg/kg.
JSLHU JOURNAL OF SCIENCE OF LAC HONG UNIVERSITY http://tapchikhoahoc.lhu.edu.vn Tạp chí Khoa học Lạc Hồng 2020, 12, 1-4 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT CỦA CÁC CAO CHIẾT DƯỢC LIỆU BÌM BA RĂNG (MERREMIA TRIDENTATA L., CONVOLVULACEAE) TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG GÂY TĂNG ĐƯỜNG HUYẾT BẰNG ALLOXAN Hypoglycemic effect of extracts from Merremia tridentata L Convolvulaceae on alloxan-induced hyperglycemia in mice Nguyễn Thị Thùy Trang1a, Nguyễn Dương Ngọc Thới*2b 1,2 Khoa dược, Trường Đại học Lạc Hồng a Email: trangthuy0097@gmail.com, bthoinguyen@lhu.edu.vn Received: 30th September 2020; Revised: 15th October 2020; Accepted: 02nd November 2020 *Corresponding Author: thoinguyen@lhu.edu.vn TĨM TẮT Bìm ba (Merremia tridentata L., Convolvulaceae) loại dược liệu quý phổ biến Việt Nam với nhiều tiềm ứng dụng điều trị chưa khai thác Trong nội dung nghiên cứu này, đánh giá tác dụng hạ đường huyết cao chiết từ rễ tồn thân mặt đất Bìm ba mơ hình chuột nhắt trắng gây tăng đường huyết tiêm tĩnh mạch đuôi alloxan liều 60 mg/kg Kết cho thấy, cao thân chiết nước liều 100 mg/kg 50 mg/kg có tác dụng hạ đường huyết tốt TỪ KHỐ: Bìm ba răng, Merremia tridentata L., đái tháo đường, alloxan ABSTRACT Merremia tridentata L., Convolvulaceae is a valuable herbal medicine popular in Viet Nam that have many untapped potential for therapeutic application In this study, we evaluate the hypoglycemic effect of extracts from root and aerial part of M tridentata in mouse model of hyperglycemia by a single intravenous injection of alloxan at the dose of 60 mg/kg The results showed water extract of M tridentata stem at doses of 100 mg/kg and 50 mg/kg have clearly hypoglycemic effect KEYWORDS: Merremia tridentata L., diabetes, alloxan muốn nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết cao chiết GIỚI THIỆU dược liệu Bìm ba răng, từ làm tiền đề phát triển sản Bìm ba (Merremia tridentata L., Convolvulaceae) thuốc dân gian ứng dụng rộng rãi y học dân gian nước để chữa số bệnh phổ biến thấp khớp, liệt nửa người, trĩ, đau nhức xương khớp, lậu, sốt rét, bệnh dời leo, viêm nhiễm da, cịn có tác dụng làm lành vết thương, hạ đường huyết [1-4] Trên giới, nghiên cứu tác động hạ đường huyết Bìm ba cịn hạn chế [1] Ở Việt Nam chưa có nghiên cứu phẩm ứng dụng điều trị đái tháo đường từ dược liệu Bìm ba ĐỐI TƯỢNG – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Nguyên liệu Rễ tồn thân mặt đất Bìm ba tươi thu hái vào tháng năm 2019 xã Ân Hảo Đơng, huyện Hồi dược lý tác dụng hạ đường huyết Bìm ba Trong Ân, tỉnh Bình Định Việc định danh lồi thực đó, nguồn dược liệu Bìm ba Việt Nam phong môn Dược liệu, Khoa Dược, Đại học Lạc Hồng (tra cứu phú, phân bố trải khắp từ Nam Trung Bộ đến Tây Nam Bộ, theo thơng tin sách Từ điển thuốc Việt Nam vậy, thật Bìm ba có tác dụng hạ đường huyết đề cập tiềm lớn khai thác sử dụng nước ta Nghiên cứu thực với mong sách Từ điển thực vật thông dụng tác giả Võ Văn Chi) [45] Dược liệu rửa sạch, thái nhỏ, phơi khô nắng râm, sau xay thành bột mịn (cỡ bột 0,5-1,0 mm) Chiết với dung môi nước cồn 50% phương pháp hãm nhiệt Nguyễn Thị Thùy Trang, Nguyễn Dương Ngọc Thới độ 100 ºC, chiết lần, lẫn với 1000 ml dung môi Gom dịch chiết, cô cách thủy 50 ºC đến thu cao dược liệu Bìm ba Các cao chiết thu cao đặc (độ ẩm 20%) có flavonoid apigenin, luteolin, quercitrin, Khảo sát tác động hạ đường huyết cao chiết dược liệu Bìm ba Chuột bị đái tháo đường chia ngẫu nhiên thành lơ cho đường huyết khơng khác biệt có ý nghĩa: apigetrin cynarosid; hàm lượng cynarosid cao nước Lô chứng bệnh (n = 6): cho uống nước cất ngày cao cồn 50% thân Bìm ba 0,4768% Lô thuốc đối chứng (n = 6): cho uống glibenclamid liều 0,7264% Động vật thử nghiệm mg/kg ngày Các lô điều trị (n = 6): cho uống cao nước từ thân (T/N) Chuột nhắt trắng khỏe mạnh, giống đực, chủng Swiss liều 100 mg/kg, cao cồn từ thân (T/C) liều 100 mg/kg, cao albino, trọng lượng 20-25 g, 7-8 tuần tuổi, đảm bảo sinh lí nước từ rễ (R/N) liều 100 mg/kg, cao cồn từ rễ (R/C) liều 100 khỏe mạnh đủ tiêu chuẩn cho nghiên cứu, cung cấp mg/kg, cao nước từ thân liều 50 mg/kg, cao cồn từ thân liều viện Pasteur Nha Trang nuôi thức ăn viện 50 mg/kg ngày cung cấp Chuột ni ổn định tuần phịng thí nghiệm Dược lý trường Đại học Lạc Hồng trước tiến hành thử nghiệm Chọn chuột bình thường làm lô sinh lý (n = 6) cho uống nước cất ngày Ngày cho chuột uống cao/glibenclamide tính Thuốc – Hóa chất thử nghiệm ngày 0, đo đường huyết lô chuột vào ngày 0, Alloxan (98%) (A7413, Sigma Aldrich – Đức), ethanol ngày 5, ngày 10, ngày 15 96ᵒ, Glibenclamid mg (Domesco) Bộ Kit thử gồm: dung Phương pháp định lượng đường huyết dịch đệm phosphate pH 7,5, 4-aminophenazone (4 AAP), Thời điểm lấy máu đuôi chuột đo đường huyết vào buổi phenol, glucose oxidase (GOD), peroxidase (POD) (Đức), sáng sau cho chuột nhịn đói qua đêm Đường huyết dung dịch glucose chuẩn (100 mg/100 ml) (Đức) định lượng phương pháp quang phổ UV-vis với Kit 2.2 Phương pháp nghiên cứu định lượng glucose oxidase Đường huyết chuột đo Gây đái tháo đường thực nghiệm alloxan máy phân tích sinh hóa Clindiag SA-20 Đo đường huyết chuột, chọn chuột có đường Cơng thức tính nồng độ glucose huyết mẫu thử: huyết sinh lý để tiến hành đưa vào thử nghiệm Chuột cho nhịn đói qua đêm sau tiêm tĩnh mạch đuôi chuột n = 100 (mg/dL) alloxan liều 60 mg/kg (pha nước muối sinh lý, điều kiện tiêm 0,1 ml/10 g chuột) Sau 72 giờ, tiến hành đo đường huyết chuột trên, giữ lại chuột có đường huyết > 200 mg/dL để làm thí nghiệm [6-8] Đánh giá tính khả dụng mơ hình gây tăng đường huyết alloxan Chuột bị đái tháo đường chia ngẫu nhiên thành lô cho đường huyết khơng khác biệt có ý nghĩa: Lơ chứng bệnh (n = 6): cho uống nước cất ngày Lô thuốc đối chứng (n = 6): cho uống glibenclamid với liều mg/kg ngày Chọn chuột bình thường làm lô sinh lý (n = 6) cho uống nước cất ngày Ngày cho chuột uống glibenclamid tính ngày 0, đo đường huyết lô chuột vào ngày 0, ngày 5, ngày 10, ngày 15 Phân tích thống kê số liệu thực nghiệm Các số liệu trình bày dạng Số trung bình (Mean) ± SEM (Standard Error of Mean-Sai số chuẩn số trung bình) Sự khác biệt đường huyết khối lượng lơ phân tích phương pháp Mann-Whitney với phần mềm Minitab 18,0, p < 0,05 cho khác biệt có ý nghĩa thống kê Biểu đồ vẽ phần mềm Microsoft Excel 2016 Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết cao chiết dược liệu Bìm ba chuột nhắt trắng KẾT QUẢ 3.1 Đánh giá tính khả dụng mơ hình gây tăng đường huyết alloxan (*) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với đường huyết ngày lô (*) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với đường huyết ngày lô (#) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với lơ alloxan ngày (#) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với lơ alloxan ngày (**) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với đường huyết trước tiêm Hình Tác động hạ đường huyết cao rễ Bìm ba Hình Kết đánh giá tính khả dụng mơ hình gây tăng đường huyết alloxan Tiêm tĩnh mạch alloxan liều 60 mg/kg làm tăng nghĩa thống kê so với ngày lô chứng bệnh Tỉ lệ giảm đường huyết ngày thứ 15 lơ chuột uống cao R/N R/C Bìm ba liều 100 mg/kg rõ rệt số đường huyết sau 72 thí nghiệm với tỉ lệ thành 23,83% 18,90% so với ngày điều trị công 60%, đường huyết tăng cao tương đối ổn định 3.3 Tác dụng hạ đường huyết cao thân Bìm ba 15 ngày khác biệt có ý nghĩa thống kê vào tất ngày sau tiêm so với lô sinh lý Đường huyết lô chứng bệnh ngày cuối thử nghiệm tăng cao gấp 2,13 lần khác biệt có ý nghĩa so với lơ sinh lý Đường huyết lô chứng bệnh qua ngày điều trị không khác biệt có ý nghĩa thống kê Sau 15 ngày điều trị với glibenclamid mg/kg, đường huyết chuột thực nghiệm giảm có ý nghĩa thống kê Đường huyết ngày lô thử nghiệm không khác biệt có ý nghĩa thống kê Sau 15 ngày điều trị với cao T/N T/C Bìm ba liều 100 mg/kg, đường huyết chuột thực nghiệm giảm có ý nghĩa thống kê vào ngày 15 (p tương ứng 0,001; 0,005) so với ngày đầu điều trị; tỉ lệ giảm đường vào ngày 10 (p = 0,008) ngày 15 (p = 0,001) so với ngày đầu điều trị Tỉ lệ giảm đường huyết 47,65% vào cuối đợt điều trị Đường huyết chuột điều trị với glibenclamid giảm có ý nghĩa thống kê vào ngày 10 (p = 0,008) ngày 15 (p = 0,039) so với lô alloxan Như vậy, liều 60 mg/kg tiêm tĩnh mạch đuôi, alloxan bắt đầu gây tình trạng tăng đường huyết sau 72 tiêm tương đối ổn định vòng 15 ngày Glibenclamid liều mg/kg có tác động giảm đường huyết gia tăng đường huyết gây alloxan Kết phù hợp với nghiên cứu trước [2], cho thấy tính lặp lại thí nghiệm khả ứng dụng alloxan gây tăng đường huyết thực nghiệm chuột 3.2 Tác dụng hạ đường huyết cao rễ Bìm ba Đường huyết ngày lơ thử nghiệm khơng khác biệt có ý nghĩa thống kê Sau 15 ngày điều trị với cao R/N R/C Bìm ba liều 100mg/kg, đường huyết chuột thực nghiệm có giảm so với ngày đầu điều trị, khơng khác biệt có ý (*) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với đường huyết ngày lô (#) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với lơ alloxan ngày Hình Tác động hạ đường huyết cao thân Bìm ba huyết vào ngày thứ 15 lô chuột uống cao T/N T/C liều 100 mg/kg 48,71% 37,65% so với ngày Điều trị với cao T/N liều 50 mg/kg, đường huyết chuột thực nghiệm giảm có ý nghĩa thống kê vào ngày 15 (p = 0,002, tỉ lệ giảm 40,04%) so với ngày đầu điều trị; cao T/C liều 50 mg/kg, đường huyết chuột Nguyễn Thị Thùy Trang, Nguyễn Dương Ngọc Thới thực nghiệm giảm ý nghĩa thống kê vào ngày 15 (p Khoa học Lạc Hồng (Journal of science of Lac Hong = 0,066, tỉ lệ giảm 20,27%) so với ngày đầu điều trị University) góp ý cho báo Kết thực nghiệm cho thấy cao T/N T/C liều 100 mg/kg, cao T/N liều 50 mg/kg làm giảm đường huyết chuột TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Karuppusamy Arunachalam, Thangaraj ĐTĐ so với ngày Parimelazhagan, Antidiabetic activity of aqueous root 3.4 Thể trọng chuột trình thử nghiệm extract of Merremia tridentata (L.) Hall f in streptozotocin–induced–diabetic rats, Asian Pacific journal of tropical medicine, 2012, 5(3), pp 175-179 [2] P Ambika , S N Nair, Wound Healing Activity of Plants from the Convolvulaceae Family, Adv Wound Care (New Rochelle), 2019, 8(1), pp 28-37 [3] S Mohamed, Analgesic activity of Merremia tridentata (L.) Hall F., AARJMD, 2013, 1(14), pp 307-313 [4] Võ Văn Chi, Từ điển thuốc Việt Nam, Tập 1, Nhà Hình % chênh lệch trọng lượng chuột bị ĐTĐ sau 15 ngày thử nghiệm so với ngày Trọng lượng chuột lơ thử nghiệm có tăng lên xuất Y học, 2018, pp 163-164 [5] Võ Văn Chi, Từ điển thực vật thông dụng, Tập 1, Nhà xuất Khoa học Kỹ Thuật Hà Nội, 2004 khơng có khác biệt mặt thống kê so với ngày [6] Lê Thị Ngọc Anh, Huỳnh Ngọc Trinh, Khảo sát tác Ngoài ra, trọng lượng chuột lô khác động hạ glucose huyết độc tính cấp dứa thơm khơng có khác biệt mặt thống kê Điều chứng tỏ (Pandanus amaryllifolius Roxb.) Tạp chí Dược học, việc sử dụng cao chiết từ Bìm ba khơng gây ảnh hưởng 2015, 55(471), 50-53 đến trọng lượng chuột thí nghiệm KẾT LUẬN Cao thân Bìm ba chiết nước cồn 50% liều [7] Dra LA, Sellami S, Rais H, Aziz F, Aghraz A, Bekkouche K, Markouk M, Larhsini M., Antidiabetic potential of Caralluma europaea against alloxan- 100 mg/kg có tác dụng hạ đường huyết rõ rệt (đường huyết induced diabetes in mice, Saudi J Biol Sci., 2019, 26(6), giảm 48,71% 37,65% so với ngày đầu điều trị) Liều 50 1171-1178 mg/kg cao thân chiết nước cho tác dụng hạ đường [8] Ighodaro OM, Adeosun AM, Akinloye OA, Alloxan- huyết (đường huyết giảm 40,04% so với ngày đầu điều trị) induced diabetes, a common model for evaluating the Cao rễ chiết nước cồn làm giảm đường huyết glycemic-control potential of therapeutic compounds khơng có ý nghĩa thống kê Cao thân chiết nước liều and plants extracts in experimental studies, Medicina 100 mg/kg có tác dụng hạ đường huyết tốt (Kaunus), 2017, 53(6), 365 – 374 Kết thu từ nghiên cứu góp phần tạo tiền đề cho nghiên cứu sâu dược liệu Bìm ba răng, từ có sở ứng dụng Bìm ba việc phát triển sản phẩm sử dụng điều trị đái tháo đường LỜI CẢM ƠN Xin cảm ơn Trường Đại Học Lạc Hồng tạo điều kiện, cung cấp kinh phí hỗ trợ phịng thí nghiệm để thực nghiên cứu Cảm ơn Ban biên tập phản biện Tạp chí ... mềm Microsoft Excel 2016 Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết cao chiết dược liệu Bìm ba chuột nhắt trắng KẾT QUẢ 3.1 Đánh giá tính khả dụng mơ hình gây tăng đường huyết alloxan (*) p < 0,05 khác... Kết phù hợp với nghiên cứu trước [2], cho thấy tính lặp lại thí nghiệm khả ứng dụng alloxan gây tăng đường huyết thực nghiệm chuột 3.2 Tác dụng hạ đường huyết cao rễ Bìm ba Đường huyết ngày lô... so với đường huyết trước tiêm Hình Tác động hạ đường huyết cao rễ Bìm ba Hình Kết đánh giá tính khả dụng mơ hình gây tăng đường huyết alloxan Tiêm tĩnh mạch alloxan liều 60 mg/kg làm tăng nghĩa