Nghiên cứu được tiến hành với mục tiêu nhằm đánh giá tác dụng bảo vệ gan của bột sấy phun từ đài hoa Bụp giấm (BSP) trên chuột nhắt trắng tổn thương tế bào gan bằng acetaminophen. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA BỘT SẤY PHUN TỪ ĐÀI HOA BỤP GIẤM (HIBISCUS SABDARIFFA L MALVACEAE) TRÊN CHUỘT NHẮT GÂY TỔN THƯƠNG TẾ BÀO GAN BẰNG ACETAMINOPHEN Lê Thị Lan Phương*, Nguyễn Phương Dung* TÓM TẮT Mở đầu: Sử dụng thuốc tân dược acetaminophen (Paracetamol) hay thuốc điều hòa rối loạn lipid máu (statin, fibrat) thời gian dài dẫn đến tình trạng suy giảm chức gan, viêm gan Do đó, việc nghiên cứu thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên với tác dụng phụ có khả chống oxy hóa, bảo vệ gan trở thành vấn đề cấp thiết Trong đó, số cơng trình giới chứng minh Bụp giấm (Hibiscus sabdariffa L Malvaceae) có tác dụng bảo vệ gan thực nghiệm Tuy nhiên, Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu tác dụng Bụp giấm Mục tiêu: Đánh giá tác dụng bảo vệ gan bột sấy phun từ đài hoa Bụp giấm (BSP) chuột nhắt trắng tổn thương tế bào gan acetaminophen Phương pháp: Đánh giá tác dụng bảo vệ gan BSP với liều 450 mg/kg (1/20 Dmax) 900 mg/kg (1/10 Dmax) mơ hình gây tổn thương gan acetaminophen 200 mg, đường uống, 14 ngày Thuốc đối chiếu silymarin, liều 50 mg/kg Định lượng AST, ALT máu sinh thiết gan chuột cuối thử nghiệm Kết quả: Liều 450 mg BSP/kg làm giảm men gan ALT 30 % (p < 0,001) làm giảm mức độ viêm, hoại tử tế bào gan Liều 900 BSP mg/kg làm giảm men gan AST 40 % (p < 0,001), ALT 52% (p < 0,001) làm giảm mức độ viêm, hoại tử tế bào gan Kết luận: BSP thể tác dụng bảo vệ gan chuột nhắt tổn thương tế bào gan acetaminophen Tác dụng phụ thuộc liều sử dụng Từ khóa: Hibiscus sabdariffa L Malvaceae, acetaminophen, silymarin ABSTRACT EVALUATING THE PROTECTIVE EFFECT OF HIBISCUS (HIBISCUS SABDARIFA L MALVACEAE) CALYCES DRY POWDER ON ACETAMINOPHEN-INDUCED HEPATOTOXICITY IN MICE Le Thi Lan Phuong, Nguyen Phuong Dung * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No – 2014: 80 - 84 Background and aimed: Using these drugs for a long time such as acetaminophen or hypolipidemic drugs (statins, fibrats) can reduce the function of liver So, it is very necessary to find new drugs from herbal medicines which can protect liver and less adverse effects than the others There are some researchs proving that Hibiscus (Hibiscus sabdariffa L Malvaceae) can protect the function of liver in vivo, however, none research carries about its effect in Viet Nam The present study was designed to evaluate the protective effect of dry powder from Hibiscus’s calyce on acetaminophen-induced hepatotoxicity in mice Method: Study the hepatoprotective effect of BSP 450 mg/kg (1/20 Dmax) and 900 mg/kg (1/10 Dmax) in ∗ Khoa Y học cổ truyền – Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS.DS Lê Thị Lan Phương ĐT: 0907748591 80 Email: lanphuongd04@yahoo.com Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học hepatotoxicity mice induced by acetaminophen (p.o., 14 days) The control group used silymarin 50 mg/kg Quantify level of AST, ALT and examine liver histopathology of mice Results: The dose of 450 mg BSP/kg (1/20 Dmax) showed significant reduction in ALT level by 30% (p < 0.001) and also reduced levels of inflammation and hepatocellular necrosis The dose of 900 mg BSP/kg (1/10 Dmax) reduced in AST level by 40% (p < 0.001), ALT level by 52% (p < 0.001) and also reduced levels of inflammation and hepatocellular necrosis Conclusion: The results indicate that BSP exhi eosin Quan sát kính hiển vi.(8) Phương tiện Phương pháp thống kê – xử lý liệu Hóa chất: Acetaminophen (efferalgan 500 mg), Silymarin 10g - Sigma Thuốc thử định lượng AST, ALT máu: Maxmat (Pháp), Mindray (Trung Quốc) Số liệu trình bày dạng trung bình ± sai số chuẩn (M ± SD) Phân tích số liệu phép kiểm t-test Anova chiều, yếu tố với phần mềm Minitab 15.0 Thiết bị dụng cụ: Máy sinh hóa tự động Biolis 24i KẾT QUẢ Súc vật thử nghiệm Chuột nhắt trắng phái đực, trưởng thành (5 – tuần tuổi), chủng Swiss abino, nặng 18 – 22 g cung cấp viện Pasteur, Tp Hồ Chí Minh Chuột ni nhiệt độ phòng với chu kỳ 12 sáng/tối, lồng – chuột, sử dụng thức ăn cám viên với thành phần bột gạo, bột bắp, carbohydrat vitamin suốt thử nghiệm Phương pháp nghiên cứu (5) Chuột nuôi ổn định 01 tuần xét nghiệm AST, ALT ban đầu trước tiến hành thử nghiệm Chuột chia làm lô (n = 10) Lô (chứng): Uống nước cất Lô (bệnh): Uống acetaminophen 200 mg/kg + nước cất Lô (chứng dương): Uống acetaminophen 200 mg/kg + silymarin 50 mg/kg Lô (thử 1): Uống acetaminophen 200 mg/kg + BSP 450 mg/kg Lô (thử 2): Uống acetaminophen 200 mg/kg + BSP 900 mg/kg Chuột thử nghiệm cho uống acetaminophen vào – sáng, silymarin, BSP nước cất vào – chiều với thể tích 0,1 ml/10g vòng 14 ngày Ngày thứ 15, gây mê, mổ chuột lấy máu tim thực xét nghiệm định lượng AST, ALT phẫu thuật lấy gan bảo quản dung dịch formalin 10% Sau xử lý phương pháp thường quy, đúc tiêu paraffin, cắt lát gan dày 82 Tác dụng BSP chuột nhắt gây tổn thương gan cấp tính acetaminophen Trước thử nghiệm: Giá trị AST, ALT chuột khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê nhóm Sau thử nghiệm: Ở lô gây độc acetaminophen, số AST ALT tăng có ý nghĩa thống kê (p < 0,001) so với lô chứng uống nước cất, đồng thời kết sinh thiết gan cho thấy có tổn thương gan, hoại tử mức độ nhẹ có biểu phản ứng viêm tế bào Nhóm uống silymarin có giá trị AST giảm (p < 0,001), ALT (p < 0,01) Nhóm uống BSP với liều 450 mg/kg có giá trị ALT giảm (p < 0,001) so với nhóm gây độc Nhóm uống BSP liều 900 mg/kg có giá trị AST giảm (p < 0,001) ALT giảm (p < 0,001) so với nhóm gây độc Sinh thiết gan cho thấy mức độ giảm tổn thương gan nhóm uống silymarin, nhóm uống BSP 450 mg/kg nhóm uống BSP 900 mg/kg Bảng Kết định lượng AST, ALT nhóm thử nghiệm (n = 10) Lô chuột Chứng (nước cất) Bệnh (aceta) Silymarin 50 mg/kg (Sily + aceta) BSP 450 mg/kg (BG1 + aceta) BSP 900 mg/kg (BG2 + aceta) AST (U/L) 111,6 ± 25,91 *** 210,4 ± 42,89 ### 113,9 ± 24,96 ALT (U/L) 52,6 ± 18,57 *** 99,5 ± 15,52 ## 67,4 ± 21,81 *** 69,2 ± 13,62 ### 48 ± 11,06 182,1 ± 25,15 126,9 ± 43,67 *### ### Ghi chú: P * < 0,05, *** < 0,001 so với nhóm chứng; P ## < 0,01, ### < 0,001 so với nhóm gây độc Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Bảng Kết vi phẫu gan nhóm thử nghiệm (mức độ tăng nhóm so với nhóm chứng uống nước cất) TB gan hoại tử Xâm nhập TB viêm đơn nhân Độc Tăng 5% loại không bào nhỏ rải rác tiểu thùy, 5% loại không bào lớn tiểu thùy quanh TMTT tiểu thùy + + + Silymarin Tăng 0,2 % loại không bào nhỏ rải rác tiểu thùy 0 0 BG1 Tăng % loại không bào nhỏ rải rác tiểu thùy 0 0 BG2 Tăng % loại không bào nhỏ rải rác tiểu thùy 0 0 Tế bào gan thối hóa mỡ Xâm nhập TB Viêm khoảng Tăng sinh tái viêm đa nhân cửa tạo TB gan Kết đọc Khoa Giải Phẫu Bệnh – Bệnh viện Chợ Rẫy TP Hồ Chí Minh TMTT: Tĩnh mạch trung tâm; TB: Tế bào; BG1: Lô điều trị bột sấy phun liều 450 mg/kg; BG2: Lô điều trị bột sấy phun liều 900 mg/kg Hình Giá trị men gan AST nhóm thử nghiệm P *** < 0,001: so với nhóm chứng; ### < 0,001 so với Hình Giá trị men gan ALT nhóm thử nghiệm P * < 0,05, *** < 0,001: so với nhóm chứng; ## < 0,01, nhóm gây độc ### KẾT LUẬN Bột sấy phun đài hoa Bụp giấm thể tác dụng bảo vệ gan chuột nhắt gây tổn thương tế bào gan acetaminophen 200 mg/kg 14 ngày Liều 450 mg/kg bột sấy phun làm giảm men gan ALT 30% (p < 0,001) làm giảm mức độ viêm, hoại tử tế bào gan Liều 900 mg/kg bột sấy phun làm giảm men gan AST 40 % (p < 0,001), ALT 52% (p < 0,001) làm giảm mức độ viêm, hoại tử tế bào gan Nghiên cứu công bố năm 2009 tác giả Liang-Chih Liu cộng cho thấy tác dụng làm giảm số tế bào chết gan dịch chiết nước đài hoa Bụp giấm liều 200 mg/kg, 400 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền < 0,001: so với nhóm gây độc mg/kg 600 mg/kg chuột nhắt đực BALB/c gây độc cấp tính acetaminophen 1000 mg/kg(3) Như vậy, kết nghiên cứu thể tương đồng tác dụng bảo vệ gan đài hoa Bụp giấm chuột nhắt tổn thương tế bào gan acetaminophen, nhiên, có khác biệt hai nghiên cứu phương pháp chiết xuất, liều lượng, mơ hình gây độc giống chuột thử nghiệm TÀI LIỆU THAM KHẢO Hainida E et al (2008) Effects of defatted dried roselle (Hibiscus sabdariffa L.) seed powder on lipid profiles of hypercholesterolemia rats Journal of the Science of Food and Agriculture, 88, pp 1043-1050 Lê Thị Lan Phương, Nguyễn Phương Dung (2013) Đánh giá tác dụng điều hòa lipid máu bột sấy phun từ đài hoa Bụp giấm 83 Nghiên cứu Y học 84 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 (Hibiscus sabdariffa L Malvaceae) chuột nhắt Tạp chí Y Học TP HCM, 17 (1), tr 369 – 374 Liu LC et al (2009) Aqueous extract of Hibiscus sabdariffa L decelerates acetaminophen-induced acute damage by reducing cell death and oxidave stress in mouse experimental models JSci Food Agric, 90, pp 329-337 Mady C et al (2009) Le bissap (Hibiscus sabdariffa L.): composition et principales utilisations Fruits, vol.64, pp 179-193 Nguyễn Lê Việt Hùng, Nguyễn Phương Dung, Trần Công Luận (2013) Đánh giá tác dụng hạ men gan cao chiết nước Tiểu sài hồ thang mơ hình gây tổn thương gan paracetamol Tạp chí Y Học TP Hồ Chí Minh, 17(1), tr 374-379 Trần Thị Thu Hằng (2009) Dược lực học Nhà xuất Phương Đơng, tr 569-583 Tón MJ, Alvarez M, Culebras JM, et al (2009) "An overview of animal models for investigating the pathogenesis and therapeutic strategies in acute hepatic failure" World J Gastroenterol, 15(25), pp 3086-3098 Wahabi HA et al (2010) The effectiveness of Hibiscus sabdariffa in the treatment of hypertension: Asystematic review Phytomedicine, 17, pp 83-86 Ngày nhận báo: Ngày phản biện nhận xét báo: 28/09/2013 08/10/2013, 14/10/2013 Ngày báo đăng: 02/01/2014 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền ... Giá trị men gan ALT nhóm thử nghiệm P * < 0,05, *** < 0,001: so với nhóm chứng; ## < 0,01, nhóm gây độc ### KẾT LUẬN Bột sấy phun đài hoa Bụp giấm thể tác dụng bảo vệ gan chuột nhắt gây tổn thương. .. nhóm gây độc mg/kg 600 mg/kg chuột nhắt đực BALB/c gây độc cấp tính acetaminophen 1000 mg/kg(3) Như vậy, kết nghiên cứu thể tương đồng tác dụng bảo vệ gan đài hoa Bụp giấm chuột nhắt tổn thương tế. .. (2013) Đánh giá tác dụng điều hòa lipid máu bột sấy phun từ đài hoa Bụp giấm 83 Nghiên cứu Y học 84 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 (Hibiscus sabdariffa L Malvaceae) chuột nhắt Tạp