Chọn lọc chất phụ gia tạo chế phẩm thuốc trừ sâu sinh học từ nuclear polyhedrosis virus (npv) kiểm soát sâu khoang ăn tạp (spodoptera litura fab )​

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ TP HCM ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP CHỌN LỌC CHẤT PHỤ GIA TẠO CHẾ PHẨM THUỐC TRỪ SÂU SINH HỌC TỪ NUCLEAR POLYHEDROSIS VIRUS (NPV) KIỂM SOÁT SÂU KHOANG ĂN TẠP (Spodoptera litura FAB.) Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS NGUYỄN THỊ HAI Sinh viên thực MSSV: 0851110110 : NGUYỄN THANH LÂM Lớp: 08DSH2 TP Hồ Chí Minh, 2012 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu cá nhân hướng dẫn Cô Nguyễn Thị Hai Những kết số liệu đồ án trung thực chưa công bố hình thức Tơi hồn tồn chịu trách nhiệm trước nhà trường hội đồng cam đoan Tp Hồ Chí Minh, ngày 21 tháng 07 năm 2012 Sinh viên Nguyễn Thanh Lâm i Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Để hồn thành chương trình đào tạo kỹ sư Cơng nghệ sinh học trường Đại học Kỹ thuật Công nghệ thành phố Hồ Chí Minh Con xin khắc ghi cơng ơn sâu sắc cha, mẹ người thân gia đình ln ủng hộ động viên suốt đoạn đường dài tinh thần tạo điều kiện tốt cho học tập Em xin gởi lời tri ân sâu sắc đến Cơ Nguyễn Thị Hai, Cơ dạy tận tình tạo điều kiện cho em trình học tập thực đồ án tốt nghiệp Em xin gởi lời cám ơn chân thành đến Thầy Hồng Hưng, Thầy Nguyễn Tiến Thắng, Cơ Nguyễn Hồi Hương, Cô Nguyễn Thị Sáu, Cô Đỗ Thị Tuyến, Thầy Bùi Đức Chí Thiện, Thầy Bùi Văn Thế Vinh, Thầy Phạm Minh Nhựt, Cô Trịnh Thị Lan Anh, Cô Nguyễn Thị Thu Hương nhiều thầy cô cho em học lý thú bổ ích Em xin cám ơn Thầy Huỳnh Văn Thành, Thầy Nguyễn Trung Dũng tổ thí nghiệm khoa Mơi trường Cơng nghệ sinh học tạo điều kiện cho em tiến hành thực nghiệm nội dung nghiên cứu đồ án Xin gởi lời chia đến bạn Trần Hữu Ý, Võ Thị Mai, Phạm Thị Thùy Dương, Hồ Hoàng Đăng Khoa, Nguyễn Thị Tiền, Mai Thị Huỳnh Trân, Trần Mộng Hương Duyên, Lê Thị Mận đồng hành trình học tập thực đồ án tốt nghiệp Tp Hồ Chí Minh, ngày 21 tháng 07 năm 2012 Sinh viên Nguyễn Thanh Lâm ii Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH ix MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Phạm vi đối tượng nghiên cứu 3.1 Phạm vi nghiên cứu 3.2 Đối tượng nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học đề tài 1.2 Virus đa diện nhân NPV 1.2.1 Sơ lược virus đa diện nhân NPV 1.2.2 Vai trò virus đa diện nhân NPV tự nhiên 1.2.3 Cơ chế tác động virus đa diện nhân NPV 10 1.2.4 Ưu điểm nhược điểm virus đa diện nhân NPV 11 iii Đồ án tốt nghiệp 1.3 Quy trình sản xuất chế phẩm virus đa diện nhân NPV 1.3.1 Nhân sâu hàng loạt 1.3.2 Lây nhiễm virus đa diện nhân NPV lên vật chủ tạo chế phẩm 1.4 Sơ lược sâu khoang 1.4.1 Đặc điểm sinh học, sinh thái sâu khoang (Spodoptera litura F 1.4.2 Tác hại biện pháp phòng trừ sâu khoang Việt Nam 1.5 Những nghiên cứu giới Việt Nam sử dụng chất phụ gia bảo virus NPV 1.5.1 Những nghiên cứu giới 1.5.2 Tình hình nghiên cứu nước CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thời gian thực đề tài 2.2 Địa điểm thực đề tài 2.3 Dụng cụ vật liệu thí nghiệm 2.3.1 Dụng cụ thí nghiệm 2.3.2 Vật liệu thí nghiệm 2.4 Nội dung nghiên cứu 3.5 Phương pháp nghiên cứu 2.5.1 Dịch virus NPV bổ sung lượng nhỏ thuốc trừ sâu 2.5.2 Dịch NPV virus bổ sung Tween 80, rỉ đường 2.5.3 Dịch virus NPV bổ sung bột ngô, bột đậu nành iv Đồ án tốt nghiệp 2.5.4 Dịch virus NPV bổ sung chất lọc tia cực tím tác dụng động ánh sáng mặt trời 30 2.5.5 Dịch virus NPV bổ sung bột cao lanh số chất phụ gia 32 2.6 Phương pháp xử lý số liệu 33 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tìm hiểu hiệu lực virus NPV bổ sung hoạt chất hóa học 34 3.1.1 Đánh giá hiệu lực virus NPV bổ sung thuốc trừ sâu nhóm Cypermethrin (Sherpa 25EC) 34 3.1.2 Đánh giá hiệu lực virus NPV bổ sung thuốc trừ sâu nhóm Abamectin (Alibaba 1.8EC) 36 3.1.3 Đánh giá hiệu lực virus NPV bổ sung acid boric 37 3.2 Ảnh hưởng Tween 80, rỉ đường tăng cường hiệu lực diệt sâu virus NPV 40 3.2.1 Ảnh hưởng Tween 80 virus NPV 40 3.2.2 Ảnh hưởng rỉ đường virus NPV 40 3.3 Ảnh hưởng bột ngô bột đậu nành tăng cường hiệu lực diệt sâu virus NPV 41 3.3.1 Ảnh hưởng bột ngô virus NPV tăng khả diệt sâu khoang 41 3.3.2 Ảnh hưởng bột đậu tương virus NPV tăng khả diệt sâu khoang 42 3.4 Tìm hiểu khả lọc tia cực tím bảo vệ virus NPV trà xanh rỉ đường trì hiệu lực diệt sâu virus NPV 42 3.4.1 Chọn lọc tỷ lệ rỉ đường thích hợp bảo vệ virus NPV 42 3.4.2 Chọn lọc nồng độ trà xanh thích hợp bảo vệ virus NPV 44 v Đồ án tốt nghiệp 3.5 Đánh giá hiệu lực virus NPV bổ sung bột cao lanh số chất phụ gia 45 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận 47 4.2 Kiến nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHAO 49 PHỤ LỤC -1Phụ lục A: Các hình ảnh minh họa -1Phụ lục B: Bảng xử lý thống kê Statgraphics -7- vi Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BVTV : Bảo vệ thực vật FAO : Tổ chức nông lương quốc tế IPM : Quản lý dịch hại tổng hợp LE : Sâu chết bệnh NPV (Larval equipveilent) NPV : Virus đa diện nhân ký sinh sâu PIB : Hạt thể vùi đa diện vii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1: Ảnh hưởng việc bổ sung hoạt chất Cypermethin vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 34 Bảng 3.2: Ảnh hưởng việc bổ sung hoạt chất Abamectin vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 36 Bảng 3.3: Ảnh hưởng việc bổ sung acid boric vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 39 Bảng 3.4: Ảnh hưởng việc bổ sung Tween 80 vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 40 Bảng 3.5: Ảnh hưởng việc bổ sung rỉ đường vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 41 Bảng 3.6: Ảnh hưởng việc bổ sung bột ngô vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 42 Bảng 3.7: Ảnh hưởng việc bổ sung bột đậu nành vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 42 Bảng 3.8: Ảnh hưởng việc bổ sung cao lanh vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 46 viii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1: Sơ đồ sản chế phẩm HaNPV phòng trừ sâu xânh 14 Hình 1.2: Sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 15 Hình 3.1: Ảnh hưởng việc bổ sung hoạt chất Cypermethrin vào chế phẩm NPV đến thời gian ủ bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 35 Hình 3.2: Ảnh hưởng việc bổ sung hoạt chất Abamectin vào chế phẩm NPV đến thời gian ủ bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 37 Hình 3.3: Ảnh hưởng việc bổ sung Acid boric vào chế phẩm NPV đến thời gian ủ bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 39 Hình 3.4: Ảnh hưởng việc bổ sung rỉ đường vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 41 Hình 3.5: Ảnh hưởng việc bổ sung trà xanh vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 43 Hình 1: NPV kính hiển vi với độ phóng đại 400 lần -1Hình 2: Chuẩn bị sâu khoang thí nghiệm -1Hình 3: Lá thầu dầu chuẩn bị sơ -2Hình 4: Lá thầu dầu cảm nhiễm NPV phương pháp nhúng -2Hình 5: Mẫu thí nghiệm bổ sung rỉ đường lọc tia cực tím ánh sáng mặt trời -3Hình 6: Mẫu thí nghiệm bổ sung bột ngô, Tween 80, rỉ đường tăng cường khả ăn sâu khoang tăng độ bám dính lên NPV -3Hình 7: Mẫu thí nghiệm NPV bổ sung Sherpa 25EC -4Hình 8: Sâu khoang chết NPV -4- ix 37 Đồ án tốt nghiệp thuringiensis Lepidoptera tương tự quan sát cho Baculoviruses (Doane and Wallis, 1964; Govindarajan et al., 1976; Morris et al.) Mặc dù hiệu thực tế acid boric Baculoviruses cơng nhận, có nghiên cứu đánh giá hiệu virus NPV trộn acid boric (Yadava, 1970) Theo Juan Cisneros cộng (2002), kết hợp acid boric với công thức Baculoviruses đề xuất hấp dẫn khơng tốn có độc tính thấp với lồi động vật có vú Từ thực tế nghiên cứu nhà khoa học giới, sinh viên bước đầu nghiên cứu bổ sung acid boric vào NPV nhằm mục đích xác định tiềm lực NPV quản lý Spodoptera litura Fab Kết thí nghiệm cho thấy việc bổ sung 1% aicd boric tỷ lệ tử vong sâu khoang ăn tạp tăng lên so với NPV đơn độc Hiệu lực chế phẩm NPV có bổ sung 1% acid boric sau ngày (thời gian theo dõi thí nghiệm) 98,33% cịn cơng thức có NPV hiệu lực đạt 91,67% (thời gian theo dõi thí nghiệm) Cũng thí nghiệm khơng có chứng cho thấy acid boric có tác dụng gây chết Spodoptera litura Kết cơng thức sử dụng acid boric với nồng độ 1% diệt 8,33% ấu trùng sâu khoang Với kết phù hợp với nghiên cứu Juan Cisneros cộng sự, 2002, thấp báo cáo Shapiro Bell (1982) ấu trùng L Dispar Cho tới thời điểm này, tác động tiềm ẩn acid boric công thức bổ sung vào virus Spodoptera litura Fab chưa biết Nhưng theo giả thuyết Ya-dava (1970) Shapiro and Bell (1982) đưa ra, acid boric ảnh hưởng đến điều kiện hoạt động ruột côn trùng, cách làm thay đổi tính tồn vẹn màng bao chất dinh dưỡng tế bào lớp biểu bì ruột Ngồi ra, độc tính acid boric gây căng thẳng sinh lý côn trùng (Juan Cisneros cộng sự, 2002) Bảng 3.3: Ảnh hưởng việc bổ sung acid boric vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 38 Đồ án tốt nghiệp STT Công thức CT1: NPV (5,8 x 10 PIB/ml) CT2: Sherpa 25EC (30ml/16L nước) CT3: NPV + Acid Boric (5,8 x 10 + 1% A.Boric) CT4: Acid Boric 1% CT5: Đối chứng (nước cất) Tuy nhiên việc bổ sung acid boric không làm rút ngắn thời gian chết bệnh NPV so với công thức không bổ sung acid boric Hiệu lực CHẾPHẨM NPV BỔ SUNG ACIDBORIC Hình 3.3: Ảnh hưởng việc bổ sung Acid boric vào chế phẩm NPV đến thời gian ủ Kết xử lý thống kê cho thấy hiệu lực diệt sâu công thức NPV đơn độc NPV bổ sung acid boric khơng có khác biệt mức nghĩa 95% Kết chưa 39 Đồ án tốt nghiệp cho thấy rõ tìm acid boric Nên ngược lại kết luận Juan Cisneros cộng (2002), báo cáo trước nhiều nhà khoa học Nguyên nhân sử dụng nồng độ NPV cao 5,8x10 PIB/ml, nên làm tỷ lệ chết bệnh sâu khoang công thức NPV đơn độc tương đương với công thức NPV bổ sung acid boric 3.2 Ảnh hưởng Tween 80, rỉ đường tăng cường hiệu lực diệt sâu khoang virus NPV 3.2.1 Tìm hiểu ảnh hưởng Tween 80 virus NPV đến khả diệt sâu khoang Khi phun NPV tự nhiên, hiệu lực diệt sâu khoang chúng bị giảm ảnh hưởng nhiều yếu, song yếu tố rửa trôi khả bám dính lên đặc biệt cần quan tâm Nên sinh viên bước đầu tiến hành thí nghiệm đánh giá hiệu lực NPV bổ sung Tween 80 tăng khả bám dính Qua kết nghiên cứu bảng 4.4 ảnh hưởng việc bổ sung Tween 80 vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết sâu khoang có khác biệt cơng thức NPV NPV có bổ sung Tween 80 Nếu sử dụng NPV tỷ lệ chết Spodoptera litura đạt 91,25% bổ sung thêm 1% Tween 80 tỷ lệ chết đạt 95% Bảng 3.4: Ảnh hưởng việc bổ sung Tween 80 vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) STT Công thức CT1: NPV (5,8 x 10 PIB/ml) CT2: NPV + Tween 80 (5,8 x 10 + 1% Tween 80) CT5: Đối chứng (nước cất) 3.2.2 Tìm hiểu ảnh hưởng rỉ đường virus NPV đến khả diệt sâu khoang 40 Đồ án tốt nghiệp Qua kết nghiên cứu bảng 4.5 ảnh hưởng việc bổ sung rỉ đường vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết sâu khoang có khác biệt cơng thức NPV NPV có bổ sung rỉ đường Nếu sử dụng NPV tỷ lệ chết Spodoptera litura đạt 88,42% bổ sung thêm 3% rỉ đường tỷ lệ chết đạt 97,43% Bảng 3.5: Ảnh hưởng việc bổ sung rỉ đường vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) STT Công thức CT1: NPV (5,8 x 10 PIB/ml) CT2: NPV + rỉ đường (5,8 x 10 + 3% rỉ đường) CT5: Đối chứng (nước cất) 3.3 Ảnh hưởng bột ngô, bột đậu nành tăng cường hiệu lực diệt sâu khoang virus NPV 3.3.1 Tìm hiểu ảnh hưởng bột ngô virus NPV đến khả diệt sâu khoang Kết nghiên cứu tác giả điều khẳng định sâu khoang mẫn cảm với NPV, sâu tuổi nhỏ mẫn cảm với NPV sâu tuổi lớn, nồng độ, liệu lượng NPV tăng tỷ lệ sâu chết tăng lên (Senthil Kumar, N Sathiah and R J Rabindra, 2005, B S Ravishankar and M G Venkatesha, 2010, C M.) Từ thực tế nghiên cứu trước sinh viên bước đầu nghiên cứu bổ sung bột ngơ vào chế phẩm NPV để kích thích sâu khoang ăn tăng lượng PIB vào thể sâu, tăng tỷ lệ sâu chết rút ngắn thời gian ủ bệnh Qua kết nghiên cứu bảng 4.6 ảnh hưởng việc bổ sung bột ngô vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết sâu khoang có khác biệt cơng thức NPV NPV có bổ sung bột ngơ Nếu sử dụng NPV tỷ lệ chết Spodoptera litura đạt 89,87% cịn bổ sung thêm 3% bột ngơ tỷ lệ chết đạt 97,43% 41 Đồ án tốt nghiệp Bảng 3.6: Ảnh hưởng việc bổ sung bột ngô vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) STT Công thức CT1: NPV (5,8 x 10 PIB/ml) CT2: NPV + Bột ngô (5,8 x 10 + 3% bột ngô) CT5: Đối chứng (nước cất) 3.2.2 Tìm hiểu ảnh hưởng bột đậu nành virus NPV đến khả diệt sâu khoang Qua kết nghiên cứu bảng 4.7 ảnh hưởng việc bổ sung bột đậu nành vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết sâu khoang có khác biệt cơng thức NPV NPV có bổ sung bột ngơ Nếu sử dụng NPV tỷ lệ chết Spodoptera litura đạt 91,25% bổ sung thêm 3% bột đậu nành tỷ lệ chết đạt 98,75% Bảng 3.7: Ảnh hưởng việc bổ sung bột đậu nành vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) STT Công thức CT1: NPV (5,8 x 10 PIB/ml) CT2: NPV + đậu nành (5,8 x 10 + 3% đậu nành) CT5: Đối chứng (nước cất) 3.4 Tìm hiểu khả lọc tia cực tím bảo vệ virus NPV trà xanh rỉ đường trì hiệu lực diệt sâu virus NPV 3.4.1 Khảo sát tỷ lệ rỉ đường thích hợp phối trộn với virus NPV Theo kết nghiên cứu Ngô Trung Sơn cộng (1991) Ninh Thuận cho thấy sau phun ruộng ngày, NPV bị hiệu lực hoàn toàn ánh sáng mặt trời [6] Nguyên nhân tia cực tím ánh sáng mặt trời tiêu 42 Đồ án tốt nghiệp diệt NPV (Maiorov, V.I cộng sự, 1984) [27] Theo nhiều nhà khoa học, tự nhiên có nhiều chất có khả lọc tia cực tím ánh sáng mặt trời, chúng có khả bảo vệ NPV phun ngồi tự nhiên Tiếp theo cơng trình nghiên cứu Ngơ Trung Sơn (1991) Nguyễn Hồng Nam (2011), sinh viên tiếp tục tiến hành thí nghiệm bổ sung rỉ đường vào chế phẩm NPV Kết thí nghiệm sơ đồ hình 4.1 cho thấy: tất khoảng thời gian để tự nhiên, tỷ lệ sâu khoang chết NPV công thức bổ sung rỉ đường cao công thức không rỉ đường CHẾ PHẨM NPV BỔ SUNG RỈ ĐƯỜNG LỌC TIA CỰC TÍM 90 80 Hiệu lực 70 60 50 40 30 20 10 Hình 3.4: Ảnh hưởng việc bổ sung rỉ đường vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) Tuy nhiên, ảnh hưởng tỷ lệ rỉ đường khác đến hiệu lực NPV khác Trong thí nghiệm sinh viên sử dụng tỷ lệ rỉ đường 3%, 5%, 7%, 43 Đồ án tốt nghiệp qua kết thí nghiệm cho thấy tỷ lệ 5% cho kết tốt qua móc thời gian ngày, ngày, ngày đạt hiệu lực 81,40%, 72,89%, 63,16% Kế tiếp tỷ lệ 7% đạt hiệu lực 76,23%, 64,39%, 51,63% Hiệu lực thấp tỷ lệ 3% kết đạt 69,47%, 54,21%, 42,11% Kết sử dụng tỷ lệ 3% phù hợp với kết nghiên cứu Ngô Trung Sơn (1991) tỷ lệ 5% 7% hiệu lực cao nghiên cứu tác giả cộng Kết phù hợp với nghiên cứu trước Ignffo, C.M et al (1971) Rabindra, R.J (1988) rỉ đường có tác dụng lọc tia cực tím, trì hiệu lực trừ sâu NPV [30] Cịn ngun nhân tỷ lệ 5% cho kết tơt 3% 7%, cần có nguyên cứu sâu ảnh hưởng tỷ lệ rỉ đường đến khả ăn sâu khoang, hay tỷ lệ sống sót NPV 3.4.1 Khảo sát tỷ lệ trà xanh thích hợp phối trộn với virus NPV Tiếp theo cơng trình nghiên cứu Nguyễn Hồng Nam (2011), sinh viên tiếp tục tiến hành thí nghiệm bổ sung trà xanh vào chế phẩm NPV Kết thí nghiệm hình 4.2 cho thấy: tất khoảng thời gian để tự nhiên, tỷ lệ sâu khoang chết NPV công thức bổ sung trà xanh cao công thức không trà xanh Tuy nhiên, ảnh hưởng nồng độ trà xanh khác đến hiệu lực NPV khác Tăng nồng độ trà xanh cố định nồng độ virus nhất, tỷ lệ tử vong Spodoptera litura tỷ lệ thuận với nồng độ tăng Trong thí nghiệm sinh viên sử dụng nồng độ trà xanh 2%, 4%, 6%, qua kết thí nghiệm cho thấy nồng độ 6% cho kết tốt qua móc thời gian ngày, ngày, ngày đạt hiệu lực 86,40%, 86,40%, 84,21% Kế tiếp nộng độ 4% đạt hiệu lực 84,82%, 82,98%, 78,95% Hiệu lực thấp nộng độ 2% kết đạt 79,65%, 77,98%, 73,68% Kết sử dụng nồng độ 2% phù hợp với kết nghiên cứu Nguyễn Hồng Nam (2011) cịn nồng độ 4% 6% hiệu lực cao 44 Đồ án tốt nghiệp CHẾ PHẨM NPV BỔ SUNG TRÀ XANH LỌC TIA CỰC TÍM 120 100 a 80 Hiệu lực b 60 40 c 20 Hình 3.5: Ảnh hưởng việc bổ sung trà xanh vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) 3.5 Đánh giá hiệu lực virus NPV bổ sung bột cao lanh số chất phụ gia Đối với sâu khoang ăn tạp (Spodoptera litura) sâu xanh da láng (S exigua) ăn rau đậu kháng thuốc nhanh nên chế phẩm từ vi rút NPV (Nucleopolyhedrovirus) phân lập (SpltNPV cho sâu ăn tạp) bước đầu sản xuất để chuyển giao cho nông dân sử dụng chỗ khó sản xuất chế phẩm dạng khơ (Đỗ Bích Vân, 2010) [17] Cịn theo Nguyễn Văn Huỳnh (2012) nhược điểm để chế phẩm chưa sử rộng rãi thị trường thời gian bảo quản ngắn [17] Nhược điểm thời gian bảo quản ngắn chế phẩm NPV dạng lỏng nhà khoa học giới khắc phục đường nghiên cứu tạo chế phẩm dạng bột để 45 Đồ án tốt nghiệp kéo dài thời bảo quản Năm 2002, Juan Cisneros cộng nghiên cứu tạo chế phẩm NPV dạng bột với chất mang bột ngô thử nghiệm cánh đồng ngô Mexico kiểm sốt Spodoptera frugiperda [31] Các thí nghiệm ngồi đồng với tỷ lệ sử dụng thích hợp xác định 24Kg/ha (J Cisneros and T.Williams,2002) Hạt có chứa 25x10 12 PIB/ Kg hạt tương đương 1,5x10 12 PIB/ha tỷ lệ ứng dụng tiêu chuẩn xác định nguyên cứu trước (Martı´nez et al., 2000) [31] Cũng từ thực tế nghiên cứu nhà khoa học, nên sinh viên bước đầu nghiên cứu bổ sung bột cao lanh yếu tố hút ẩm bảo vệ NPV, nhằm kéo dài thời gian tồn chúng Trong thí nghiệm sinh viên tiến hành với công thức (i) NPV đơn độc, (ii) NPV bổ sung cao lanh, (iii) NPV bổ sung cao lanh chất phụ gia Qua kết nghiên cứu bảng 4.8 cho thấy công thức bổ sung cao lanh khơng có tiềm lực tăng tỷ chết bệnh NPV so với cơng thức NPV Nhưng cơng thức có bổ sung thêm chất phụ gia hiệu lực diệt sâu tăng lên đáng kể kết đạt 100% tỷ lệ sâu chết bệnh NPV, so với cơng thức NPV NPV bổ sung cao lanh đạt 91,40% 93,16% Bảng 3.8: Ảnh hưởng việc bổ sung cao lanh vào chế phẩm NPV đến tỷ lệ chết bệnh sâu khoang (Spodoptera litura Fab.) STT Công thức CT1: NPV (5,8 x 10 PIB/ml) CT2: NPV + Cao lanh (5,8 x 10 PIB/ml + 10% cao lanh) CT3: NPV + Cao lanh + Phụ gia (5,8 x 10 PIB/ml + 10% + 3% bột ngô + 5% rỉ đường + 1% acid boric) CT4: Đối chứng (nước cất) 46 Đồ án tốt nghiệp 4.1 Kết luận Bổ sung hoạt chất hóa học vào chế phẩm NPV tăng tỷ lệ chết bệnh sâu khoang Spodoptera litura mà rút ngắn thời gian ủ bệnh Nếu sử dụng chế phẩm NPV đơn độc hiệu lực đạt 91,40%, có bổ sung 100 ppm Cypermethrin hiệu lực đạt 96,58% Thời gian chết ký chủ rút ngắn thay ngày cơng thức NPV cơng thức có bổ sung lượng nhỏ hoạt chất Cypermethrin ngày Hiệu lực chế phẩm NPV cao chế phẩm Alibaba 1.8EC ngang với chế phẩm Sherpa 25EC Bổ sung acid boric vào chế phẩm NPV không làm rút ngắn thời gian ủ bệnh ký chủ Rỉ đường Tween 80 có khả làm tăng hiệu lực diệt sâu chế phẩm NPV, nhiên rỉ đường cho kết tốt Tween 80 Bột ngô bột đậu nành có khả làm tăng hiệu lực diệt sâu khoang chế phẩm NPV Nếu chế phẩm NPV có bổ sung 3% bột ngơ 3% bột đậu nành hiệu lực đạt lần lược 97,44 98,69% so với công thức NPV đơn độc 89,87 90,99% Chế phẩm NPV dễ bị hiệu lực tia cực tím ánh sáng mặt trời Nếu phơi nắng ngày hiệu lực 52,46% phơi nắng ngày hiệu lực cịn lại 26,32% so với chế phẩm khơng phơi nắng 90% Trộn thêm chất phụ gia: rỉ đường, trà xanh, có khả hạn chế ảnh hưởng xấu tia cực tím NPV Tuy nhiên, ảnh hưởng tỷ lệ rỉ đường nồng độ trà xanh khác đến khả bảo vệ NPV khác Sử dụng tỷ lệ rỉ đường 5% nồng độ trà xanh 6% cho kết tốt 47 Đồ án tốt nghiệp Cao lanh có khả hút ẩm tốt, nên sử dụng chất mang bảo vệ NPV chế phẩm NPV dạng bột Tuy nhiên cao lanh khơng có tiềm lực tỷ lệ chết sâu khoang, không làm giảm hiệu lực chế phẩm NPV 4.2 Kiến nghị Khảo sát tỷ lệ thích hợp hoạt chất Cypermethrin, acid boric, bột ngô, bột đậu tương, phối trộn với NPV, để chế phẩm đạt hiệu lực diệt sâu tốt Tiến hành đánh giá hiệu lực chế phẩm NPV có bổ sung chất phụ gia tốt lựa chọn quy mô chậu đồng Khảo sát ảnh hưởng chất phụ gia đến khả sống sót NPV thời gian bảo quản Hoàn thiện quy trình sản xuất chế phẩm NPV có bổ sung chất phụ gia tốt lựa chọn 48 ... phụ gia tạo chế phẩm thuốc trừ sâu sinh học từ Nuclear polyhedrosis virus (NPV) quản lý sâu khoang ăn tạp (Spodoptera litura Fab.)” nhằm chọn lọc chất phụ gia thích hợp kết hợp với NPV làm tăng... chất phụ gia vào dịch virus để lọc tia cực tím ánh sáng mặt trời, tăng sức ăn sâu, tăng lượng NPV vào thể sâu khả bám dính vào Xuất phát từ thực tế trên, sinh viên tiến hành: ? ?Chọn lọc chất phụ. .. thử nghiệm hiệu lực diệt trừ sâu khoang NPV có phối trộn chất phụ gia Từ tìm chất phụ gia có tiềm cao để phối trộn với NPV tạo chế phẩm hồn thiện có hiệu lực diệt trừ sâu tốt Phạm vi đối tượng