BO Giáo DỤO Và DAO LẠO THUONG DAI HOC “ONG HOP Ha NOL
KHOa SINH HOC
>“„=
NW HAM DÙ, NGHIÊN GỬU MỘP SỐ GHẾ PHẨM
THUỐC TRU' SẦU CĨ NGUỒN GỐC THẢO MỘC
(Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Bộ) wa số B91-05~33
Trang 2Phần Phần Phần Phan hase bet ki CC ote li we 1 ĐẶP VẤN ĐỀ 2 SƠ IƯỢC GẤC 0ồi: :RÌNH HGHIÊ- CỬU LIÊN QUAN ĐẾN ĐŠ ?ÀL 2.1 Vấn đề sử dụng thuốc tak sau ` ` , + ` ` ^ + 2.2 Tinh hinh nghien cau thuoe tru sáu thực vật o 7 + « ` v « a ` 2.3 Tac dung cus tiniou tiu sau den con trung vũ động vật 7 3 ĐỔI TƯỢNG THÍ HuH1lÿ VA LHƯƠNG PHaP NGHIÊN 0U 12 3.1 ĐỐI tuợng nghiều cấu 13 3.1.1 Tu 13 3.1.2 Sau hei ven 3.1.3 Bọ gặy muối 14 3.1.4 Chuột nhấL trấn, 14
3.2 Phương phấp nghie, củu 14
3.2.1 Tách chiết cuế phẩu ngứa trương đụng mơi 14 3.2.2 thách ciiẾết theư cơoclet đối lưu 15
3.2.3 Khảo sát hiệu lục các chế phẩu trên 1ư ra +, ae
cac địi tượng;
Trang 3+
Phần 1: Đặt VẤN ĐỀ
Theo kinh nghiện, con người đã biết sử dụng nhiều loại
cây cĩ độc vềo nhiều mục đích nhu săn bắt, lầm thuốc, phịng
vậy "đặc biệt là tiều diệt mợt số lồi sâu cĩ hại Oác bộ phận
khắc nhau của tiục vật cĩ dẹc duợc sử dụng Đằng cếch trộn khổ hoặc ngâm trong nước để glun tiys tiếp lên địch thủ Hiệu quả
sử đụng được ghi nhận về được lưu truyền qua nhiều thế hệ Ơ
nhiều vùng, việc sử dụng các loại thực vật theo mục đích não
đổ đã trở thành cấc kinh nghiệu cất quý báu về bỈ quyết của
một số bộ tộc
Sự ra đời và phát triể của nền cơng nghiệp hĩa chất đã
tạo ra hang logt các độc chất Cực mạnh, cỗ khả năng tiêu diet
hàng loạt các loai sinh vật khác nhau Việc sử đụng những hĩa - ehất tổng hợp nay dưới các đụng như thuốc trừ sâu, thuốc điệt
©Ổ đã mang lại những hiệu quả nhất định, thu hút được sự
chữ Ỹ của người sử dung Sc động tiéu điệt nhanh và đồng
loạt đã rút ngắn thời gian tiêu điệt các ỗ bệnh trên quy mơ
lớn, cho phép hạn chế những tốn thất dáng kế cĩ thể xây ra Đặc tÍnh nay lam giảm đi vui treo của một số thực vật cĩ độc
Trên thực tế, việc sử dụng các hĩa chất điệt sâu đã gây ra những hậu quả khơng mong muốn Phần lớn các chất này cĩ thể gây ra những biển chứng hoặc đi căn cho con người và các
sinh vật khác theo các cơ chế khác nhau Chứng cĩ thể được
tÍch lũy trong cơ thể động, thục vật, trong nước, đất, khơng khÍ mà từ đố, chúng đi vuo cơ thể con người Chứng tác động trực tiếp thơng qua thụ quan đa, hay bộ mấy tiêu hĩa hoặc hơ hấp Ching tac động giãn tiếp tuơng qua thức ăn hoặc vật chất trung gian Bên cạnh đỡ, tính khẩu, dộc tố của nhiều loại cơn
trùng cĩ hại tăng lên lãm mất dầu tếc động của chúng Ảnh
hưởng khơng mong muốn cho cơn người và mỗi trường thúc đây
cáo nha nghiên cứu chí ý đếu nhiều hợp chất tự nhiên trong một
Trang 4Bằng kinh nghiệm va thuc nghiem cho thay kha ning diét
sâu của một số thực vật thuờng 18 đặc hiệu, phân hủy nhanh;
Ít ơ nhiễm cho mồi truờng vụ con người Mặt khác, nguồn nguyên liệu tại chỗ tưưng dối phong phú ở mọi nơi Do dố ; việc nghiên cứu tác dụng xù sảu của một số thực vật trên
eơ sở những thÍ nghiệu cĩ khoas học chắc chấn đấp ứng được
nhu cầu thực tế của nước tá
Đề thi "Thăm đị, nghiện cứu uột số chế phẩm thuốc tru
sâu cĩ nguồn gốc thảo mộc" dược đặt ra nhằm mục đích;
~ Khảo nghiệm và nghiên cứu khả nững điệp sâu của một
số thực vật cĩ độc
- Nghiên cứu phương pháp va dung mơi tách chiết của một sổ chỗ phẩm
~ Khảo sất hiệu lực củu một số chế phẩm trên một sổ sấu
hại rau và bọ gậy của muỗi,
- Nghiên cứu tác động của các chế phẩm trên động vật
trước khi ứng đụng trên đồng rugng
Đề tại được tiễn hành tại phịng thí nghiệm “Sinh lý
người va động vật" khoa Sinh học, trường Đại học Tổng hợp Ha
Nội, phong thí nghiệm phản tÍch Viện bệnh cây, Trường đại học tổng hợp Justus-liebig, Giessen, Céng hịa liên bang Đức, Bộ
mơn Vi sinh va khơng xương sống khoa Sinh học Trường Đại học
Tổng hợp Hà Nội, Viện Kiểm nghiệm thuốc trừ sâu, Cục bảo vệ
Trang 5Phần 2: SỬ LƯỢC GÁO 0Ê¿5 Tulnh käšuiểu CỮU GỐ
LIỀN QUAU ĐẪN Đề CÀI
2.1 Vấn đề uủ đdụu, tlds ish guy
Việc bảo vệ thyc vat va gửi vụ gỗa liêu voi lich sử trồng trọt cua con uguvi Wa bao aod tay, nhan dan các nước tu Đơng sang Tây; từ au Baily à da tÍch lũy được nuiều kinh
nghiệm đối phố cĩ hiệu quả với đnuibu 1uui sáu bệnh phá hại
cây trồng Ngồi cách bắt sáu, giết gáu, nồng đản đã biết củ dụng những chất đọc sẵu cố trung Lự nhiớn để làm thuốc tru
sâu G0ác cây cĩ dộc la nguồa thude tru gấu tự nhiên được sử dụng gốm nhất Theo kinh Nel gin đổ truyền, từ lâu nhậu đản cấc nước Ấn ĐỘ, Fakisten đã biết dùng lá xoan Ấn Đề (Azedi~
zachta indica A duss) trọa với hạt n¿ũ cốc để chống mối mọt,
dung hạt trộn vao đất dể trừ tuyến trùng /10/, nhân dấu Ở
một số nước vùng châu Á và cláu Eui đã Liết sử dụng lá và đầu của cây xoan (Melia asedasech), vay tran Oi (Lantavecama),
cây bình bất (Annomu teticulu) dẻ trừ nđnuiều loại sau hại khác
nhau Tuy nhiên, việc gửủ dụng thực vạt dễ trừ sdu Ở ¡ức độ nhỏ và theo kinh nghiệu bắU dầu từ ahữug nău cuối cáu thể kỷ
18, thuốc trừ sáu tù thực vật wii duye san xuất và sử đụng
rộng rai Năm 1763, cHất cuiết thỏ từ cây thuốc lễ duyc sản
xuất và sử dụng ở nhiều nước Vho cuối thé ky 1o và đầu thể
-kỷ 19, cùng với sự xuất hiệu thuốc Liù gấu vê cư như đồng,
1ưu huỳnh, axit sunfuu víc lẽ niữug cuấL rất độc với người và
động vật; thude tru sau tude mge van gilt vai tro quan Luậng Va duge sul dung chi yéu Waa oud, Lge cửu how cle tru sau
Trang 6MỸ đã dùng 6500 tấn bột rễ cày Derris Fucami va Nakefima
(1971) thơng bão ring trong mam 1941, viéng Hog Ky đã sử đụng
3200 tấn rễ cây Derris để lùm thuốc trừ sầu Vềo nău 1923,
mệt sổ nước Đơng Nam à (ùialaixia, Tndonexia) va Braxin đã
trồng tới 5000 ha cây Derris để lấy rễ sử dụng trong nuớc và
xuất đi các nuốc châu áu và châu my Bower Wiliame (1984)
đã xếp những chế phẩm thuốc trù sâu cĩ nguồn gốc thực vật vao
nhĩm thuốc trừ sâu thể hệ thứ nhất /4/ 0ho đến những năm 50
cla thé ky nay, sy xuất hiện của thuốc trù sâu hữu cơ tổng
hợp cĩ hiệu lực cao và tác đụng nhanh đã làm cho vai trị của thuổc trừ sâu thảo mộc va vỏ cơ bị thu hẹp và lu mờ đầu Hang
trăm loại thuốc trù sầu hốa học tổng hợp khác nhau được sản
xuất Qua trình sử dụng thuốu hĩa học tổng hợp được chia thành)
các giai đoạn:
- Giai đoạn 1945-1954: Thưi kỳ phất triển và sử dụng
thuéc tri: sfu clo hiu co: DD, 646, thiodan
- ` ` , ` `
- Giai đoạn 1960-1974: ?hới kỳ thuốc trừ sâu cacbamat va
lân hữu co: Wofatox, Methidathion, Padan
- Giai đoạn 1975 ắn nay: Thudc tru sau cacbamat va lan
him co van duge si dyng chi yéu, thém vao đĩ cố sự xuất hiện
cla pyrethroid 1& thuSs trù sâu tong hyp cĩ nguồn gỗc tự nhiên va thuốc trù sâu tác đụng chậm (thuốc điều khiển sinh trưởng;
thuổc dẫn dụ hoặc xua đuổi cơn trùng) Gác thuéc trừ sảu hốa học tổng hợp được xếp vao nhĩm thuốc trừ sầu thế hệ thứ 2, thuổo trừ sâu tác dụng chậm dược xếp vào nuốm thuốc thế hệ thứ 3 Việc sử dụng rọng rãi các loại thuốc trừ sâu hĩa học tổng hợp đã gây ra tình trạng ơ nhiễm mơi trường nghiêm trọng,
ngay càng làm tăng tÍnh kháng thuốc của sâu bệnh Theo
Georghiou (1977, 1980, 1963), Metcalf £1980), Hrdy (1931) va _nhiều tác giả khác, naw 194% mdi cd khoảng 12-14 loại chân
đốt chống thuốc, đến năm 1%» số lobi châu đốt chống thuốc đã
lên tối trên 500 Riêng sáu tư đã được ghi nhận chống 36 loại
thuổc hĩa học /5/ Trên thực tế đĩ, ở uột sổ nước phát triển,
một gổ thuốc trù sáu hốn học tổng hợp da bị thu hẹp phạm vi
Trang 7tiên của những thuốc bảo vẹ thực vật bị cẩm sử đụng, trong đố
cổ DDT, Wofatox, EDB
Xu thé cla Khoa hoc bdo vé thyc vat hién nay la tgo ra biện pháp phịng trừ tổng hyp nhằm hạn chế tối đa việc sử dụng cäc hĩa chất trừ sảu Prong đố hướng nghiên cứu sử dụng thuốc
trừ sâu thảo mộc rất được col trọng
2.2 xhiê at
Nhiều nghiên cứu đã cho thấy, thuốc trừ sâu thảo mộc cĩ
độ độc cao với cơn trùng, Ít đệc với người va động vật mau
nổng, phân hủy nhanh nến ít gây độc với những cơn trùng cĩ
Ích, khơng tồn đư lầm 6 nhiễm mỗi trường va chống được tính
khang thuốc của sâu bệnh /10/ VÌ vậy, trọng những nău gần
đây nhiều nhà khoa học trêu thế giới đã tim kiểm, phất hiện,
đệnh gia những lowi thực vật cĩ khả tăng điệt sâu và nghiên cứu phương phấp sử dụng chứng trong bao vệ thực vật Theo
Grange va cộng su, trong tai 1iẹu của 19 nước đã cơng nhận cĩ
1800 loai thực vật cĩ tích điệt sảu /4a/ kKiéng ¢ Philippin
đến tháng 5/1987 đã ghi nhậu cĩ 200 loại Trong đĩ cây xoan
in Độ 1à cây thuốc trù sáu được nghiên cứu nhiều hơn cả Đã
số 3 hội thảo quốc tế hop vào năm 1900; 1983, 1987, trong đồ cĩ thạnh viên của trén 15 nude: in Độ; Cong hịa Liên bang
Duc, Ảnh, Pháp, Mỹ bàn vẽ vấn đề nghiên cửu trồng và sử
dụng cây xoan Jn Dg lam thuốc trừ sâu Các nghiên cứu của
Gujar, Mehrotra (1984), Sehuutterer, 8axena (1983) đã nĩi đến khả năng điệt trừ của hạt xốn An Độ đối với nhiều loại cơn trùng khác nheu: Sầu khoang, sảu cuốn lá, sều cẩn gié,
cỗo loại cơn trùng trích it trén ide, sâu hại kho /13/
Theo Gunathilagery ve Sundura Babu cay xoan In Độ được phất hiện ra là lội cĩ hoụt tính sinh học chống được hờn 100
logi cơn trùng; chuột va giun tron Van đề nhân rong dién
tÍch trồng cây xoan Jn Độ tren phạm ví toan thể giới dang được các nhà khoa học rất quan tam
` R “ Pa ° a , £ sy ^
Ngoai cay xoan an DQ lu, cáo cay co tinh chất điệt sâu
+ - ee + ‹ a ss 4
khac củng được nghiéu cuu, danh gia higu luc voi nhieu loai
Trang 8lực điệt sâu của 24 lồi thực vật: Tinospora rumphii, Vitex-
negundo (hồng kích), Blunea baisamifera (đại bì) va da
&hỉ nhận cây Tinospora rumphii cĩ hiệu lực trừ nhiều loại sâu
hại chÝnh trên lúa Ăn Độ dã tiến hành thử hiệu lực trừ sâu
của cây hồng kÍch đối với sâu cuốn lá nhỏ, đục thân lua bướm
2 chẩm, sâu khoang Theo Morallo-Rejesus (1985), đã phát hiện
eố,82 loại thục vật cĩ khả năng điệt sâu tơ Trong đĩ cĩ cây
Blumies Balsimefera, Caesalpinis pulcherrina (kim phugng),
Coleur amboinicus co déc té cao tru sdu to Việt Nam, qua
bước đầu điều tra, Nguyễn Duy Trang đã tìm ra 26 lồi cây cĩ độo trừ sâu: xoan taa thuốc 1a, thuée lào, na, củ đậu; kim
phượng; thầu đầu, thần mất /8/ Ngay từ năm 1980, Cục trồng trật, va bảo vệ thực vật đã bắt đầu nghiên cứu cách nhân trồng
ya: eh dyng mot sd loai cay cĩ độc vao mục đỉch trù sau, đặc biệt la cây ruốc cá (Derris), ou dau va da sản xuất ra chế phẩm rotenon từ cay ruốc cá trù sảu hại rau như sâu xanh, sâu
tơ; eau ba ba va một 8ố loui sâu hại cây cơng nghiệp khác
oa Nguồn thuốc thảo mộc trù sâu hại rất vơ tận Thuốc thảo
gộo đang được nghiên cứu rộng rai trên thể giới và cĩ nhiều triển vọng hile heh cho cơng tác bảo vệ thực vật Trong tương le‡z chắc ring thuốc thảo mgc sé dong vai tro quan trọng trong
bệ khổng các biện pháp phịng trù tổng hợp sâu bệnh và địch
¿.3 tốc dộng sủa thuốc trù sâu đến sơn izùng và động vật + - ` £ ` `
sa, “'huổc trù sâu cĩ thể gây hại cho cơn tring bằng nhiều sen lam chết cơn trùng ngay ở giai đoạn ấu trùng ( gâu non),
đo chế quá trình sinh trưởng, phá vỡ chu trùng biển thái, lam
mất kha năng sinh sản của cơn trùng Nhựng muốn cĩ tác đụng
để, đầu tiên thuốc trừ gầu phải xâm nhập được vào cơ thể cơn
trừng Theo các tài liệu /2,3/, tức dụng của thuốc trừ sâu theo các con đường xâm nhập vào cv thể cơn trùng cĩ thể như
gau:
- Thuốc trừ sâu tác dụng tiếp xúc: gây độc cho cơn trùng
Trang 9~ Thuốc trù sâu tác dụng xơng hơi: gây độc cho cơn trùng
qua đường hơ hấp
- Thuốc trừ sâu vị độc: gây độc cho cơn trùng theo đường
tiêu hốa
- Vào trong cơ thể cơn trùng; cơ chế gây độc của các loại
thuổc rất đa dgng Theo Chu Nghiéu (1960), các thuốc tiếp xúc ‘va xơng hơi ảnh hưởng đến bộ máy hơ hấp cửa cơn trùng, bít kín `
1ỗ thở, xâm nhập vào hệ thống khí quản, vi khÍ quản, ăn mịn
vệch khÍ quản, vào trong cốc mơ hịa tan chất bếo lãm:oơn trùng
chẩt /7/ Co chế tác dụng của các loại thuốc trừ sâu chỉnh
cũng đã được biết đển Thuốc trừ sâu clo hữu cơ va pyrethroid
gậy độc với tế bào thần kinh thơng qua việc lam thay đổi tính
thẩm thấu của ion Na”, KỶ ở màng các sợi trục, phá hủy chức năng của tế bào thần kinh Rotenon gây ức chể trao đổi chất
và năng lượng Thuốc điều hịa sinh trưởng ức chế quá trình lột xấc của cơn trùng bằng cách ngăn củn quá trình sinh sống
kitin làm cho qua trình lột xác khơng xảy ra và ấu trùng bị tử vong /1⁄ Một cơ chế điển hÌnh cho sự nhiễm độc thuốc
trù sâu ở cả cơn trùng va người la sự mất hoạt tÍnh của enzim
oholinesteraza (chE), nĩ đặc trưng cho tác dụng của thuốc trừ
sậu cacbamat va 14m hitu cv Cholinesteraza la enzim co trong
nhiều mơ cỦa cơ thể cơn trùng, nĩ lồm nhiệm vụ xúc tác cho phản: Ứng thủy phân Acetylcholin trong quá trình đẫn truyền xung động thầu kinh Œơ chế của sự thủy phân này đã được làm oe Trung tam anion Trung tâm este en mg a - + > Acetyl cholines- HạC —N —CH— GH- O0 0= teraza ⁄⁄\ : CH, CH, 2 Acetylcholin
Men chE co 2 trung tân: trung tâm enion và trung tâm este Trung tâm anion tÍch điệu âm, tĩc dụng hoạt hốa với phần tÍch điện đương của phau tỬ seetylcholin Trung tam este
thực hiện sự thủy phân acetyleholin thành cholin và axit
Trang 10bình thường, trong 1 giây 1 phân tử chE thủy phân được hàng
loạt các phân tử exetylciulin /14/ Khi cố mặt hợp chết lâu
hữu cơ (PHƠ) khả năng xúc tác của nố cho phẩn Ứng thủy phân
acetylcholin bị giảm xuống do cĩ sự tạo thanh phức hợp PHƠ-chE
Tùy theo nồng độ của PHO ma men bị ức chế hoặc mất hoạt tính
hồn toan, lúc đĩ khơng cĩ sự thủy phân acetylcholin va
acetylcholin bi a lại trong xinap, xung động thần kinh khơng
được dẫn truyền, hoạt động của hệ thần kinh bị phá hủy RO 0 RO 0 HehE + ~P° v P _ chEH ——> a XL Z SS a RO OR! RO oR! RO ~ Z -0 R'OH + P “ong
Sơ đồ tác đụng cửa chE với PHƠ
Nguồn chất độc cổ thong các lồi thực vật rất đa dạng
Gỗ thể kể đến nicotin trong thudc la, rotenon trong cac loai
Derris, pyrethrin trong cic tru sau, azadirachtin trong xoan in ,b› riein trong hạt thầu đầu /6/ Nhưng hiện nay những chất độc thực vật chủ yếu được biết đến trong phịng trừ sâu
hại vẫn la Nicotin, Roteron, Fyrethrin va Azadirachtin
- Nicotin cĩ cơng thức hĩa học Sofa cĩ 2 dang đồng
phân nieotin và nico tin ‹
OU N Ory ‘ Ề
bity ch,
Trang 11Nieotin cĩ nhiều trong cáy thuốc lá, thuốc lào, 1h chất
độc thần kinh mạnh, cĩ Lắc dụng tiếp xúc, xơng hơi và vị độc
/12,2/, nĩ xâm nhập vào cờ tuể cơn trừng qua khÍ quản va da,
khuếch tấn trong cơ thể và nhiễm vào huyết địch sau khi vao
eo thé, nicotin gay té ligt Welsh va Gordon cho rung tac động của nicotin vào cơ thể cơn trùng cũng giống như tác dụng của thuốc clo Hữu cơ và pyvetlrin /12/ Người ta đùng nieotin
để trừ sâu họ Chrysonlidac, rép aphids ve mgt gố loại sâu hại
khác
~ Pyrethcin la chất rất độc với cơn trùng Pyrethrin la
thuốc trừ sâu tiếp xúc, cũng cĩ tác dụng vị độc, xơng hơi
Pyrethria cũng cĩ tác dụng độc thần kinh mạnh, ding dé trừ
các loai sâu miệng nhoi, trích hút, sâu hại kho tầng
_ = Rơtenơn cĩ nhiều trong cảy nhiệt đới họ đậu, ở nước
ta nhiều lồi cây cĩ chứa trơtenên như ruốc cá (Derris), củ
đậu, than mát
Rơteuơn cĩ cơng thức cấu tạo Ơ 23 Ha 20 + Rơtenơn nguyên chat la chất kết tỉnh cĩ nhiệt độ nong chảy 16370, bị phân giải đưới tác dụng của ảnh sáng mặt trưi thanh dehydrorétenén,
chất nay khơng co tác đụng trừ sâu kơtenơn cĩ tác dung tiếp
xức và vị độc Khi vào cơ thể cơn trùng nĩ ức chế hoạt tính men Glutemin dehydrogenaza trong qué trinh truyén điện tủ
trong hệ thống Plavindiphotphopiridin nucleotit, ức chế hút Go,
của tế bào và gay doc cho cv thể cơn trùng, Trong co thể cơn trùng, rơtenơn 1ồm hơ Hấp của cơn trùng giảm xuống; nhip tim
đập chậm: Theo Lê Truong (1907), rétenin chf co hiéu lye cao vối rệp muội, sầu cấu lá, sâu tơ, nhện Sâu khoang cĩ sức đề
kháng với rơtenơn củo /11/
Trang 12Gần đây, với sự nghiên cứu khá rộng rãi, người ta đã biết
đến hoạt độc của Azadirachtin trong hạt xoan Ấn Độ, nĩ là một
chất gây ngán và ức chế sự phát triển củu cơn trùng Theo Gu-
jar, Mehrotra (1984), sâu khoang ở độ tuổi trước khi hĩa
nhộng đã phát triển thành đạng trung gian giữa sâu va nhộng
khi bị xử lý bằng chế phẩu từ cây xoan Ấn Độ
_- Việc nghiên củu cơ chế tác động của tang loạt các chế
phẩm thuốc trù sâu bằng thục vật dang được tiến hành trong
nhiều phịng thí nghiệm ?riển vọng ứng dụng và những lỹ giải
số khoa học về táo động điệt sâu của nhiều chế phan thye vat
Trang 13thần 3: ĐƠI tƯỢNG PHÍ NGHIỆM VÀ PHƯƠNG
EHÁY NGHIÊN cUU
3.1 Đối tượng thf nehign
Các chế phẩm tách chiết tù thực vật được thổ nghiệm
trên tằm, một số lồi sâu hại zau và bg gay
3.124 Dm (Bombyx mori)
là đổi tượng bước dầu thău đồ khả năng trừ sâu của cáo chế phẩm vì chúng khá mẫn cảm với các hĩa chất TỀm được
cung cấp bởi trại giống vai lĨnh Ha sơn Bình Tầm thí nghiệm
ở độ tuổi 2, khổe mạnh và dồng đều về kích thứơc, cĩ ngoại
hình và sinh lý bình thường Tầm được phân thành lơ nuơi
trong các bơ cán lớn cĩ nấp lưới bảo vệ, cho ăn mỗi ngay 2 lần vao 8h va 16h Thúc ăn của tần là lá đâu non được thai nhỏ Khối lượng thức ăa tính theo đầu con ở cốc lơ đều nhau,
chế độ nuơi đưỡng cho các lơ tằm thí nghiệm và đối ching
giồng nhau ThÍ nghiệm khơng tiến hauh vào giai đoạn tầm ngủ 3.1.2 Sâu hei aay
Sau xanh (Pieris rapae), sau to (Plluttella maculipen-
nig) (ảnh 1 và ảnh 2), sủu khoang (Erodenia l1itura) là những đối tượng chÍnh để khảo sát hiệu lục trừ sâu cỦa các chế
phẩm
— 8ầu xanh được lấy tù cánh đồng z¿u Thanh Trì
Trang 143.1.3 Bo egy muSi (Culex quinqucfacistus)
Bọ gậy thí nghiện khốc mạnh được lấy ở các độ tuổi 2, 3, 4 do Độ mơn động vật khơng xương sống Trường đại học Tổng hợp
Ha Nội cung cấp Bo gay mang về được phan thanh lơ, nuơi trong
các bơ can thủy tỉnh cĩ chúa những tuể tích nước như nhau
Thức ăn của bọ gậy do Việu sốt cết ky sinh trùng và cơn trùng sửn xuất Bọ gậy được cho ăn Z lằn/† nguy; lượng thức ăn ở
các lơ 1à đều nhau
3.1.4 Qhuột nhất trắu (Ú busculus Le)
Chuột nhất trắng ư - 10g được mua tù Viện vệ sinh địch tễ
học, được phần thành lơ ma t cách ngẫu nhiên; trọng lượng cáo 16 thi nghiém bing nhau Sau 9 vghy nối thí nghiệm Chuột được
uống 1ml dung địch nghiên cứu Ởở các nồng độ khác nhau Iơ đối
chứng được uống 1ml nước cất Cuối đợt thÍ nghiện chuŠ+ được giải phẫu, xem tỉm, phổi, gan, lách, thận, bộ mấy ti€: hỗa
3.2 Phương pháp nghieu_cứu
Quá trình tiến hành thí nghiệm duợc tốm tắt ở sơ đồ 1,
troủg đố chúng tơi cĩ củ dụng các phương pháp sau:
3.2.1 Tách - £ + Ạ - ^ ,
-Shket chs phen thực vật ngân troil,- cào
Nguyên liệu là các mẫu thực vật duợc-thu thập trên địa
tần Hà Nội và các tỉnh miều Bắc Việt Nam (bảng 1) Các loại
hạt được lấy vao thời kỳ quả chín giá, lá được lấy vao thời kỳ lá bánh tẻ
Mẫu thực vật thu về để nơi khơ ráo, kín ánh sáng Sau đổ đưa vao tử sấy ở nhiệt độ đuới 4020 co đến khi trọng
lượng khơ Ổn định lẫu khĩ được bổo quản trong các túi giấy
đầy, để nơi khơ tránh tác dụn, của ánh sáng Trước khi thí
n¿ hiệm lấy ra nghiều trea dối xay ca phẽ thành dang bot
nghiỀn khơ Từ bột nay được tách chiết theo 2 phương phap
đã tạo chế phẩm
Trang 15sâu ‘cao, bột nghiền được ngầm trong 4 loại dung mơi: nude,
obn, | axêtơn, mêtanơn theo tỈ lệ 16 bột nghiền /10m1 dung mơi
đựng: trong các 19 thủy tỉnh tối mau Bật nghiền của mỗi mẫu
thực vật được ngâm trong dung mơi 3 ngày; sau đĩ lẩy ra đưa
lẩn phốu lạc, lọc lại phần bã Mỗi địch chiết thu được qua
phổu lọc là một cơng thức thí nghiệm
-3.2,2, ếch chiết theo sơolst đối lưu: Bột nghiền của mỗi mẫu
thực vật được sơclet theo phương, phấp của Schmutterer (1982) /13/ Muc đích của phương phap nay 1a dung dung mơi tách chiết kết hợp voi tac dung của nhiệt độ để tách độc chất ra khổi mễu
thật vật tạo đạng chế phẩm tính thơ gọn nhẹ, để bão quản, vận
omyén và cĩ thê giữ được lâu Quá trình tách chiết được minh
họa ở sơ đồ 2 và tiến hồnh như sau: Cân 1 lượng bột nghiền
(20:- 120g) cho vao túi vải nhỏ, buộc kín đầu túi Đặt túi vào
tình 2 ĐỔ khoảng 20 - 5001 dung mơi vào Đình 1 Dun cho dung
moi gơi nhẹ để chuyển sang đụng hơi, hơi này theo ổng 4 đi lên gặp lạnh ngung ty thanh đựng 1éng và rơi xuống bằnh 2, đụng mơi đâng cao đền lên ở bình 2 và Ống 5 Bột nghiền thục vật
đựng ở bÌnh 2 được ngắm trong dung moi và các chất hịa tan
trong đụng mơi được tach ra Khí lượng dung mơi lên quá điểm
A cla 6 ong 5 thi toan bệ dung mơi và chất chiết từ thục vật
rút từ bình 2 qua ống 5 và trở lại bình 1 Dung mơi ở bình 1
vẫn tiếp tục hĩa hơi va lặp lại chu trình trên
“MỖI mẫu thực vật được sơclet liên tục trong 48h Sau đĩ
thio bình 1 ma, đổ dung moi cĩ chứa chất chiết thực vật vao
bắt ga, dun cho dung moi bay hoi, thu duge chất chiết ở đạng
tinh, thé Cơn lượng chất chiết nay cho ghX vao lọ tối mau đậy
kÍím, để nơi kl3, tránh tấc đụng của anh sáng Trước khi thí
nghiêm tẩy ra, hịa với nước thanh các dung dich cĩ nồng độ
aa3 nhau ,
` ` l -6
_.Đơn vị nồng độ được dùng la ppm = 10
Pha dung dich cd ndn, dé 1000 ppm: Gan 1g chất chiết trên cân phân tích, cho vao binh định mức 1000 m1 Rốt 5 ml
Trang 16Úc, khuẩy đều thu được 1 lÍt dung dịch cố nồng độ 1000 ppm -(đụng địch mg) Ti dung dich nay pha lỗng với nuốc theo các
tỶ lệ xác định thu được các dung địch nghiên cứu cĩ nồng độ nhề hơn VÍ dụ: 10 ml dung dich 1000 ppm + 10 mÌ nước — 20
mj, dung địch 500 ppm
e ? 7 4 ? , + a
3.2.3 Phuong phap khao sat hiệu lục của cac cue phẩm
ĐỂ nghiên cứu khả năng điệt sâu của các chế phẩm, chúng tơi bổ trí 2 đợt thí nghiệu:
Đợt thứ nhất: Thăm do độ độc của các chế phẩm từ tất cả
gảo mẫu thực vật da được thu về ThÍ nghiệm được tiển hành
trên tẦm, sâu xanh, s&u khoang, bo gay
Đợt thứ hai: Khảo sốt hiệu lục trù sâu của các chế phẩm
'eổ độ độc cao duge tim ra qua đợt thí nghiệm thứ nhất Hiệu lực được khảo sất ở tùng nồng độ, dung mơi tách chiết thơng
qua tỉ lệ chết của sâu và hoạt độ của men esteraza
lượng chế phẩm được đùng ở mỗi cơng thức thí nghiệm là nhự nhau, phun lên lễ đâu, để ráo nuốc, sau đồ thái nhổ, cho
tỀm šn Lugng 14 đâu ở các 16 la như nhau Ở các lơ đổi
ching, 14 dau được phun bằng nuớc 1ã hoặc các dung mơi tếch
-ghiẾt tương Ứng Điều kiện nhiệt độ, ảnh sống độ ẩm ở các
lộ thí nghiệm và đổi chứng trong thời gian thí nghiệm giống
¿nbau Đếm số tầm chết sau 24h, 48h, 72h
Cac chể phẩm sau khi đã được thử nghiệm trên tầm và các
chế phẩm tổch chiết ving soclet tiép tục được thủ trên sâu -zenh, sâu tơ, sâu khoang
Hai ngày sau khi phun 1ơ và làm quen với điều kiện nuơi
đưỡng, chế phẩm được phun trực tiếp vào rau cho sâu ăn
tage ché phan duge phun ở mỗi cơng thức thí nghi em 1à như
nhau Ở lơ đổi chứng, rau được phun nước 1ã hoặc các dung
mơi tếch chiết tương ứng Điều kiện vi khí hậu ở cốc lơ thí
nghiệm và đổi ching là nhu nhau Đến sổ sâu chết sau 24h, 46h,
Trang 17Chế phẩm sơclet của hụt than mét được đùng để thủ trên bọ gậy Ơ các lơ thí n„hiệu, nước nuưi bọ gậy cĩ các nồng độ chế phẩm 18 100, 5O, 25, 1U ppm Ơ 10 dối chứng bọ gậy được nuơi trong nuốc lã Cho by say ăn bình thường, lượng tuức ăn
ở các lơ là bằng nhau Đếm số bọ gậy chết sau 24h, 4h thí nghiệm
Những chế phẩm cĩ tác động điệt sảu cao nhất được nghiên
edu anh hưởng của chúng t¿en chuột nhất trắng Chuột dược
uống cấc Liều khác nhau, đượu lẩy mau nghién cứu để đếm số
x ` ` “ aa TT! f , A
lugng hong cau va phau thugi de xem xet cac nội quan
Hiệu lực của chế phẩm dược tỉnh theo: a) Theo gid tri w : x(%) = —— x 160 a : 8ố c6 thể chết b : tổng số cĩ thể trong 16 x(%) : phần trăm sổ cĩ thể chết b) Thao Schneider Qxø2114 : be-k Q%) = = x 100 jou - k Q : hiệu lục tính bằng #
k : sổ sâu hại chết trong lơ đối chứng
b : sổ sâu hại chết trong lơ thí nghiệm
3.2.4
Điện đi esterazs tron, địch nghiều cơ thể sầu thÍ nghiệu và đổi chứng theo phương phấp cia Snithies (1955) cùng hệ đệm
do Menken mồ tả (1982):
Hồ nat uyên liệu:
- Dung dich dien cuc pH = 6,1
Trang 18- Dung địch nhuộm esteraza
- Dụng địch rửa, cố định gel
- Giấy điện di FN ,-
Qá i * † ƯŠ hà }
- Đức gel: Cén 22,2og tỉnh bột cho vào bình thủy tỉnh đựng 185ml dung địch đệm đúc gel đã pha lỗng vỗi nước theo tỉ lệ 1:1 Đặt bình lên mấy khuẩy tù, cẩm mấy và bật nút
nhiệt độ Tỉnh bột vừa đuợc khuấy đều vừa được lam chin Sau
đồ nhấc bình ra; dùng máy hút chân khơng hút hết bọt khÍ oố
trọng bột, đổ bột vuo khuơn kích thước 13x18 cm Để cho bột nguội đống gel va cấm mẫu
- Chẩn bị địch nghiền và điện di: Sâu được nghiền trong
eéi thủy tỉnh để trên đá Gel được đặt ra khay, dùng dao cắt
tạo rãnh để chấn mẫu điện di Giấy điện đi EN, được cất thành
miệng nhỏ kích thước 0,5x0,5 cm, chấu vao địch nghiền của sâu
và đặt vao ranh trên gel, ghỉ sổ thú tự các mẫu điện đi, 2 đầu ngoai cùng trên ranh điện di đặt giấy chấm trong Broan Gigerol 0,2% dé dénh d4u Marker Đặt gel vào máy chạy ở điện thể 190V điện đi trong 5h Sau dé 14y gel ra, c&t lam 2 lat
va nhuộm ping dung địch nhuộm esteraza, để trong tủ ấn 309
Trang 20+, : a - Tinh sai so: M= Mt om - Mức độ tin cậy giữa sé trung binh mẫu và trung bình tổng quát: Ma - My t = ° nộ + mỂ
Sử dụng tạ để tìm chuẩu tin cậy Ÿ, dựa vào bổng Pischer-
Trang 21>
thần 4: KEY QUA VA Ban LUẬN
1
4.1- £ 2 ? + thự Atco ^
Tham khảo một số tài lieu /6,10/ và tầm hiểu kinh nghiệm
của nhân dân, chúng tơi đã thu được các mẫu thực vật la các bộ phận cĩ độc của 8 losi thực vật cĩ trên địa bàn Hà Nội và
các tỉnh miền Bắc Việt Nau (bảng 1) » Bảng 1 Danh mục cĩc thực vạt cĩ độc được khảo nghiệm ! ; ! 1 Boor srr Việt Nan : fen khoa học ‘ phận : đệc Ị ! ! độc !
11 Gây na ! Anona suuamosa L Phat ! +++
2! Cây xoan ta ! Melia azedurach L ! hat ! ++
3! ! !vo 1l +
4 1 Cay lin !iEvythrophiceum L † vỗ 1 ++
5 ! Cay ma tiền ! Strychnosnus vomica L {| hạt ! ++
6 † Gây than mát ! Miletio ichLhyocltomadrak | hat ! +++
T1 ! 11a 1 +
8! Gây củ đậu ! Rachyrhizus crosus L † hạt ! ` +++ 9 † Gây thầu đầu ! iticinus comusus L : that ! ++
10 1 Cay tric dao ! Nierium oleander L - tla oft +
Gấc mẫu thục vạt thu về được tách chiết theo 2 phương phấp (3.2.1), tu mgt uẫu thut Vặt chẳng tơi đã thu duye 2
đạng chế phẩm: chế piiẩm 1u chất chiết tỉnh thơ (bảng 2) và
đạng địch chiết Các thí nvuiệm tiến hành trên tằm, sau xanh, - gầu tơ va sâu khoang cho thấy tất cả cáo chế phẩm tách chiết
tì sếc mẫu thu được của ư loui thực vật đều cĩ tấc dung điệt, sâu KẾt quả nay phù hợp với kết quả điều tra cây cố độc tru
Trang 22Khổ năng diet sáu của uỗi cuế phẩn phụ thuộc vuo load thực vật, bộ phận cĩ độc; nồug độ chỗ phẩu, dung mỗi tách
chiết về lói sâu Với cũng uiƯ È dla tuực vật; các dung moi
tách chiết khác nhau co chế giẩm cĩ thả nặng điệt sấu khác
nhau Chế phẩm mã tiền - cồn điệt dược (10 ‡ O,44)% tu va
(13,5 + 0,57)% sâu khoang, ¡ã tiền - nước điệt được (2,6 ‡
“ ` + - 3 ~ 2h aa ` ~
0,63)% tim va 13,3% sau khouug , 8 nhung ma tien - axetƠn va ma ẽ
Bảng 2: kết quả sơclct các mẫu thực vật
! 1 BQ {Khoi Jugngy ! Khéi lugng 1 Cha
stp! „ Tên † phận ! truce ! sau ! chiet
! thyc vat ! cĩ 1 gdclet { sdclet e.! %
Trang 23tiền ~ mêtanơn khơng cĩ các đụng điệt tẫm và sâu khoang Mỗi
loại thực vật cĩ duug mỏi tách chiết thích hợp, tạo ra chế
phẩm cố tác đụng trừ gảu cao nhất Prong 4 đụng ơi nghiên cửu; mêtanơn 1ä đụng uỏi tách chiết thích hợp với hạt than
mất, lắ thần mĩt, hạt xuan, vỗ lim, cịn la dung mơi thích hợp với hạt mã tiền, axêtĩn với hẹt na, nước với hạt thầu dau
Ghế phẩm hạt thần mắt - mếtsaon diệt được trên 90% sâu xanh,
100% tầm; hạt thầu đầu ~ nuốc điệt được (54,4 ‡ 4,46) sâu
xanh và (50 # 5,62) sáu tờ Tác dụng của mỗi chế phẩm lên
những lồi sâu khác nhau là khác nhau Ghế phẩm hạt na - axê-
tơn điệt được trên 60 sảu xauh và (13,3 # O,44)% sâu khoang
ð nồng độ 1000 ppm hgt xoan điệt được (ao ‡ 3,53)% sau xanh,
(48,T5 ‡ 3,11) sâu tơ Th khơng phải bao giờ cũng lá đối
tượng mẫn cảm nhất: chế phẩu vỏ liu - wétanén khéng điệt được tăm mà điệt được 22,6% sấu khoang; vỏ lim ở nồng độ 1000 ppm điệt được (235 † 1, 11)4 sâu xanh Oấc bộ phận cĩ độc khác nhau
của cùng một lồi thực vật cĩ dọ độc khắc nhau đổi với sâu
Hạt than mát ở nồng d6 1000 ppin điệt được (87,61 ‡ 2,89)% sẽu
xanh, ở nồng độ này, lế than mắt chỉ điệt được (43,3 ‡ 3;75)% sâu xanh Độ độc của mỗi thực vật đối với sâu cũng được thể hiện: ở nồng độ 1000 pøm cuế phẩn từ hạt củ đậu điệt được
(87,73 1 2,37)%, hgt ma tien diét duyc (57,05 #.O0;47)z, hạt xoan điệt duge (48,75 + 3,11)% sâu tơ Từ kết quả thăm đồ
này, chúng tơi chia độ độc của các nấu thực vật trên thành 3
mức độ: "
~ ft dgc (+): ché ph&a diét dudi 30% 8d sau thf nghiém
- Độc (++): ché pind digt tu 30 - 70% sdu
- Độc cao (tr+): chế phẩm điệt trên 70%
Hạt cỦ đậu, hạt then wit, hgt na 1a 3 loại hạt cĩ độ độc
Trang 24Bản g 2- Hiệu lực trù sâu của các chế phẩm tù hạt
than mat
Hing Chế phẩn tách chiết pang cách ngâm trong cac đúng mơi
an Sâu xanh 1s SBu Khoang
Dung | Thí nghiện - LDỐI chứng! Thí nghiện 1084 chứng
Trang 254.2 Hiệu lực trì sầu của mọi số chế phẩm
Hiển hanh đợt thí nghiệu thứ hai khảo sắt hiệu lực trù
sâu xanh, sâu tơ, sâu khoang của các chế, phẩm tách chiết tu
hạt thần mất, hạt cỦ đậu, hạt na Gốc chế phẩm tách chiết bằng
sơolet ở cáo nồng độ 10Ĩ, 200, 200, 400, 500, 1000 ppm va cac
chế phẩm là địch chiết của 3 loại hạt trong ngân trong % các
dung mơi được đùng để khảo sắt Các chế phẩm nay tác đụng lên
sâu rất nhanh; chi sau 1 ngày đã thấy sâu chết, trong đổ đã
cổ một số con chết ở trạng thai thối nhữn đen, số cịn lại thân
đuổi thẳng; bụng cĩ đốm đcna Tiếp tục đếm số sâu chết vao ngày thứ @ va thứ 3 sau thí nghiệu
48.16 Hạt than, mất
Ghế phẩu được tách chiếu tằng cách ngâu trong các dung
mơi được thử nghiệm trên sâu xanh và sảu khoang Số liệu thủ
"được trình bày ở bổng 3a Bảng này cho thấy: 4 chế phẩm hạt
than mat - nude, hạt than mai - cồn; hạt thần mát - axetơn và
hạt than mat - wétenén déu cho biệu lục trừ sâu khé cao (trên
9Q với sâu xanh và trên o0¿ với sảu khoang) Trong axétén va métan6én la dung méi tach chiét ché phd 6 hiệu lực trừ sâu
cao phẩt CN phẩm hạt thèu uất - axétén và hạt than mat - mé-
tanén digt được 97,5% sầu xuuh, ư2,54 và 90 sên khoang Chế
phẩm: hạt thần mét - nước cũng cho hiệu lực trừ sâu khả cao:
94;56 với sâu xanh va 6o,25% với sâu khoang Điều nay cĩ ý
nghie: quan trong trong thực tế, việc dùng nước lam dung mơi
tấchc chiết se mang Lại hiệu quả kinh tế Cage Nhìn chung ở mỗi
chế phim, higu luc déi voi sau xanh lớn hon sau khoang ẻ chế phẩm được tếch chiết bằng phương phấp sơclet được khảo sất trên sâu xanh, sầu tư, sau khoang (bằng 2b): Chế
phẩm ở các nồng độ 100, 200, 300, 400, 500, 1000 ppm đều cĩ
hiệu lực điệt sâu Ở nồng độ 100 ppm là nồng độ nghiên cứu nhỗ nhất; hiệu lực của chế phẩm là 53, 752 với sâu xanh, 62, 23%
với pau tơ và 44,2# với sáu khoang Ở nồng độ 1000 ppm chế
phẩm cố hiệu lực trừ gâu cao nhất: 95 với sâu xanh, 84,378 vớt sậu tơ, 56,69% với sẽ&u khoang Ơ°các nồng đệ 500, 300,
200 ppa với sâu xanh, 400, 300, 200 ppm với sâu tơ, chế phẩm
Trang 26phẩm và hiệu lục của chế phẩm ở tùng nồng độ chưa cĩ mối
tương quan rõ rang, nhưng huần chung hiệu Lục độc của chế
phẩm cố xu huống tăng theo nồng độ Ở nột sổ nồng độ: 400 ppm với sâu xanh, 500 ppm với säu tơ và 200 ppm với sâu khoang,
hiệu lực của chế phẩm cĩ sự biển động Ghủng tơi cho ring ở eae nồng độ để, tỉ lệ chết của sâu, phụ thuộc rất nhiều vào các
yếu tổ cá thể: tỉnh mẫn; tính khang cia mỗi cá thể Tuy nhiên
các nồng ag nay cần phải được khảo sất thêm trên cấc lồi sâu
tương Ứng khi cĩ điều kiện
._ Nhìn chung ở mỗi nồng â nghiên cứu, chế phẩm hạt than mat đều cổ hiệu lực cao nhất đối với sâu xanh (58,75 - 95%),
sau "a6 dén sdu tơ (63,75 ~ 65%) và thấp nhất là với sâu
khoang (26-555) (đồ thị 1) Kết quả nay phù hợp với kết qua
thu được khi khảo ,nghiệu hiệu lực của các chế phẩm từ hạt thần
mat được tách chiết bằng các dung mơi (4.2.1) Nĩ nĩi lên
tính mẫn cảm của từng loại gảu đổi với cuế phẩm Theo mệt số
tác giả (Lê Trường, 1987; Đỗ Tất lợi; 1281) chất độc trừ sâu chỉ yếu trong hạt than mat 1à rotenon và sapotoxin Rotenon
số tác động mạnh đến sâu xaah và sáu tơ, trong khi đồ sâu
khoang (Prodenia litura) cố khả năng chịu đựng cao với rotenon Như thế kết quả chúng tơi thu dược 1à phù hợp Tuy nhiên;
ngồi rotenon tong hạt than mat cịn một số chất độc khác Co
thé chứng tác động đáng kể với sảu khoang như kết quả thu được Bằng hai phương phấp tách chiết: sdclet va ngâm trong
dung m6i, các chế phẩm từ hạt thun mát đều oố hiệu lực trừ sâu cao MỖi phương pháp đều cĩ tỉnh uu việt của nĩ: sơclet thÌ phức tạp, tốn nhiều cơng nhưng chế phẩm tạo ra lại gọn
nhẹ, đỗ vận chuyển và bảo quản, thích hợp với việc sản xuất trong cơng nghiệp; phương pháp ngảm thì đơn giản, thỦ cơng và cĩ thể sử dụng ngay nguồn nguyên liệu tại chỗ Tùy thuộc vao điều kiện thực tế, cố thể sử dụng một trong 2 phương phấp
trên /
» Chế phẩm sốclet của hụt thèn mát ở các nồng độ 100, 50,
25, 10 ppm được thí nghiện Liên bọ gậy (bằng 5): Ở nồng, - độ
Trang 27
gậy tuổi 2, (99,5 ‡ O,11)% bọ gậy tuội 3 và (94,5 ‡ 0,87)%
bọ gậy tuổi 4 Nồng độ 10 ppm, nồng dộ nghiên cứu thấp nhất,
tũng điệt được (96,0 ‡ 0,25)% bg gay tuổi 2; (95,23 ‡ 0,23)% bọ
gậy-tuổi 3 và (93,5 + 0,47)% bọ gậy tuổi 4 Khả năng diệt bọ
gậy ca chế phẩm rất khả quan Gĩ thể áp dụng kết quả này để
điệt bọ gậy ở các cống rãnh
ở *
4.2.2 Hạt củ dau
_ KẾt qué thf nghiệm để khảo sát hiệu lục của chế phẩm
sơolet từ hạt cỦ đậu lên sâu xanh và sâu tơ được trình bay ở
bổng 4: Oác chế phẩm cĩ hiệu lực cao với sâu xanh, 400 va 500
ppm điệt trên 90 Nồng độ 100 ppn 1ä nồng độ nghiên cứu nhỏ
nhất hiệu lực cũng đạt tới g5 Đối với sâu tơ, khả năng diệt sậu của chế phẩm cũng khẽ cuu Hiệu lục của chế phẩm đạt 55% ở nồng độ 100 ppm và đạt 65% ở nồng độ 1000 ppm Nong độ 200 ppạ với sâu xanh và 500 ppm với sâu khoang, chế phẩm tù hạt củ:đậu cĩ tác động tương tụ như ở các nồng đệ 400 và 500 ppm
cỗa chế phẩm từ hạt than mất Nhẳn chung, hiệu lục của chế
phẩm ở mỗi nồng độ đối với sâu xanh lốn hơn sâu tơ Kết quả nạy phù hợp với nhậu xết củu Nguyễn Duy Trang /9/
4.2.3 Hạt nu
_ Ghé phẩm tách chiết bằng sưoclet được nghiên cứu trên sâu xanh và sâu tơ (bằng 6a):
Ghế phẩm chi cố hiệu lục điệt sâu cao Ở các nồng độ 1000
về 500 ppm voi sâu xanh va 1000 ppm với sâu tơ Ơ”nồng độ 1000 ppm, ché phẩm điệt 81, 25% sâu xanh, 80% sâu tơ; nồng độ
500 ppm, chế phẩm chỉ gãy chết 77,5% sâu xanh Nhần chung, ở
các nồng độ nghiên cứu thấp chế phẩm từ hạt na cố hiệu lực
thấp Chế phẩm biểu hiện hiệu lục đối với các sâu xanh cao
hơn sâu tơ ở các nồng độ nghiên cứu cao (1000 và 500 ppm),
trong khi đĩ ở các nồng độ thấp khơng cĩ sự biểu hiện này:
nồng độ 400 ppm cĩ hiệu lực 12,5% đổi với sâu xanh va 62,5% đối vối sâu tơ Nồng độ 200 ppm cĩ hiệu lực 50% đối với sâu xanh
va 55, 25% đổi với sâu tơ
Chế phẩm tấch chiết bằng cách ngàm trong các đụng mơi
Trang 28vay & bang 6b Qua bang nay eo tiuấy: đổi với sầu xanh, chế phẩm hạt na - sxetơn cĩ hiệu Lực cao nhất (H4, 21)¿ hạt, ne -
cồn; hat na ~ metanon cũng, cĩ Ligu lye đẳng ké (60,52 ve
13,68) Đổi với bạt này nước 1u đụng moi tổch chiết tạo chế
phẩm cỗ hiệu lực trù guu thấu s Gné phan hat na - nước cĩ hiệu
lực 25% với súu xanh, ĐỔI với gảu khozdgs tác dụng củu các chế phẩm từ hạt ne 1à rất thấp Ché pus hat na - métandn cổ hiệu lực cao nhất cũng chỉ đit duye 23,24 sâu khoang, cịn chế phẩm hạt na - nước chỉ digt được 6,5, sdu khoang 2 ^ ~ + % , , Kết quả trén cun,; cho tidy: bang hui phuong phap tach a ` , + sn as + y chiết từ hạt na các chế giấu cĩ hiệu lục cao đổi với sáu xanh ` a + 2 ` co + + ` “ va sâu tơ ĐỔi với sau khoaogz nộ cung co tac dung nhưng la rất + ^ thap, khong đẳng kể
Từ các số liệu ở các pang BL, 4, va ching toi ve duge
đồ thị 2 và đồ thi 3 Hai đồ tuị này chủ thầy: Gác chế phẩm
từ hạt thần mat, hạt et dau, hgt na đều cd hiệu lực trù sâu
cao nhất ở nồng 49 10C0 ppm Cac chế phẩm tu het than wat va
hạt củ đậu cây tỷ lệ cuết cao đối với sảu xanh và sảu tơ Đối
với sâu xanh, nhìn chung Ở các nịng do tương ứng, chế phẩm từ hạt củ đậu cố khả nững điợt sâu cao hơnchế phẩm từ hạt thần
mất ĐỔi với sâu tơ, chế phẩu từ hạt củ đậu chỉ cổ hiệu lực
cao hơn chế phẩm từ hụt thầu mắt ở các nồng độ 1000 và 400
Ppa ở các nồng độ nghiệu, cứu kháo, ảah hudng điệt sâu của các ché pham từ hạt thần mắt cao hơn từ các hạt khác Hạt na luơn
Gố hiệu lực trừ sáu thấp nhất đối với cả sảu xanh lẫn sâu tơ ` ~ x 2a eos Từ những số liệu ở bản, 2a, ob chúng tối đựng được biểu 4 > ` 2 ` Cồ 1 Biểu đồ này cho thấy, đối với bạt than mat và hạt na, nen ` x “ ` ~ ae e avétén va métenén la thưa, đụng lơi tách chiết tạo chế phẩm od + a ` a 2 ahs an ® z- ` mn tac dong tru sau cao nhat tồi vời cá sâu khoang Và sâu Xanh, + a ` ` ? eo = cả+ chế phẩm Lừ hạt thần sốt cố hiệu lực cáo hơn chế phẩm th e od hạt na rất nhiều + + ` ˆ ` ` ` + Heat na co tac dang tiu sau xeuh va suu tu Cấu cĩ cao sa +e , %, + ô ơ `* A a bin pkep để nàng sau lugng whan dap ung nhu cau trong nong ^ˆ a ee ¬ + - ` ` nghiệp ĐỐi với bạt than wit, su phan bd rong cda cay va sda ~ + xay , Ề `
lượng hat cao se ae ve hướng nghiều cựu để sản xuất thuốc trừ
Trang 29` +2 ; : 2 + “ a
Baug 4 Kha niug digt san cde cac ché phdm tu
4 ?
yt cu dau
` Ị Sâu xunh ! Sau tu
Nơng độ ! > som ee Poe ee eee ee
Trang 30Băng 6 Tốc dụng điệt sâu của các chế phẩm từ hạt na Bang Ga Chế phẩu tấch chiết bằng sơclLet
Nồng! Su sah 1 Sâ tờ
ag tee - eee ee eee ee tf 5+ - 5-7 - 5 =e
Trang 33Biểu đồ 1: Hiệu tực “tru sâu của các -ché ph:ẩm từ hạt than mat va hat na
dus eC tach chiết bằng các đụng mơi khác nhau 7 Độ, ICD ez SS
nạt than met ạt na Hạt than mát Fạt ne — Đầu xenh Sau xanh Sau khoang Sâu khoang
mm -
HH : Nưn AY : axéton
Trang 344.2 Kết quả g3 $u di egterezs
Điện di esteraza trong địch nghiền cơ thể cỦa sâu tơ bị xử lý Đổi các chế puẩn từ họt thén một, hạt củ đậu, hạt na
Bgteraza của những sẽu thí nghiệu khắc sấu đổi chứng về
SỔ lượng băng và độ đậm nhạt của băng Céc sâu đối chứng về
a6 băng Ít hơn những băng thể hiện rõ về đậm nét Ơ”các sâu
thf nghiém esteraza cĩ nhiều băng hơn nhưng rất mo’ Esteraza e
cua nhimg séu thi nghigm vdi cdc chế phẩm khác nhau cũng khác nhau về số băng 0 sau tư thí nghiệm với chế phẩm hạt dam xu
Ä kxng thần mất, esteraza cĩ nhiều nhất 6 băng, với chế phẩm
het đậu là 7 băng về hạt na cũng là 7 bồng Trong khi đổ
esteraza của các sâu đối chứug tuưng đối giống nhau và đều cố 4 băng Cĩ thể, sự tic động của chế phẩn lên cơ thể sau lam
thay đổi hoạt độ của esterszu và mức dộ tác động của các chế phan khốc nhau lên estersza 15 khác nhau
4.4 Tắc độn¿ của cuế phẩm đối với chuột nhất trắng
Sau một thang thi nghiệu, tượng lượng chuột ở lơ dối
chứng về lơ thỶ nghiệu thuy đổi như nhau Khơng eĩ đấu hiệu
bệnh lý xuất hiện ở các 1ị thí nohiện‹ Các chuột cho uống các
chế phẩm tù hạt thầm mốt cố các củ động, ăn uống va mau lơng,
nhụ các chuật cho uống nước cất (đổi chứng) ‹ Số lượng hồng cầu va bach edu được trình bay ở bằng 7 và bang 3
_ù bằng 7 cho thấy, các loại chế phẩm từ hạt thần mát ảnh
hưởng khơng đồng kế đến số lượng Hồng cầu Sự biến động của
hồng cần khơng đáng kế và nŠằu trong giới ' hạn sinh lý bình
thường 3 giờ sau khi cho chuột 2000 pẹm dịch ehiết và 1000
ppm địch ngắm, sổ lượng bạch cầu cĩ túng lên khơng đẳng kể,
nhưng sau đĩ cĩ chiều hướng trở về bình thường
Như thế sổ lượng bạch cầu cĩ tăng lẻn sau khi cho chuột
uổng các chế phẩm SỐ lượng bạch cầu táng khí mạnh ở 3 giờ và
6 giờ sau khi cho uống che phẳng sau đĩ, giảm đần, nhưng vẫn
cao hơn đổi chứng Ở 4Ð giU s¿u khi thấ nghiện, liều càng cao
(tỳ 1000 ppm dén 3000 ppm) gay tang bach cầu nhiều hơn liều thấp (500 ppm) Dịch ngàm gúy tổng mgih hon địch chiết
8au khi thí nghiệm, chuýc được giải phẫu Gấc nội quan
Trang 35khơng cĩ hiện tượng ứ uốu hey vien tấy, khơng thấy các hiện tượng u nhọt Céc chuột đượu uốa¿ cĩc chế phẩm vẫn hoạt động
bình thường và vẫu cố khả nứng sinh adn
Những số liệu vn chĩ puep dus re nhan xéts Nhing ché phẩm điệt sảu tù hạt tha trút, bạt này hạt củ đậu vơ dộc đối
với chuột nhất trắng và cĩ tuể sử đụn,; trên đồng ruộng
Bang7- Anh hưởng, cho udne các chế phẩm tù bạ ạt then „mát
đổi với số Luge bons cầu (triệu/mm” máu) của clugt nhất Luẵng (n = `
Pod gian, ! ! I !
(giơ) ! 3 ! a ! 1z 1 24 1 48
TƠ ! ! ! ! !
ĐỐi chúng 18,9510, 1119, O2tu, 32149, 4240, 10! 3, BOLO, 3219, 1040, 30
2000 ppm !o ato, 23! 9, yotu, 30! 4, goto, 70!9, 22to, 15/9, a5to, 19
Trang 37¬ 22 ~ thần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Từ những kết quả thu được cĩ thể rút za các kết luận - gạu đây: `" o, 22 1 Trong bổn loại đụng nồi được sử dụng để tách chiết a ~ aA ` + xa na ` aaa 2
.(mêtenơn, axetơn, cồn va nước), mềtunơn và axêtơn tạo ra các
ohế phẩm cĩ hiệu lực điệt sầu cao
2 Gác chế phẩm tách chiết tù hạt, lấ, vỏ của ở lồi
thực vật: na, xoan ta; lim, mé tiền, thần mat, cây củ đậu,
` thầu dau, tric dao đều cĩ tác dụng điệt sâu Trong đĩ các
chế phẩm của hạt cỬ đậu, hạt thần mắt, hạt na cố hiệu lực tốt
nhất.”
3 Cac chế phẩm tách chiết từ hạt củ đậu, hạt than mất, hạt na co hiệu lực điệt sáu xunh và sâu tơ Riêng chế phẩm th hạt thần mát cịn diệt được cả sâu khoang và bọ gậy ở cấc lỔa tuổi khác nhau
Ề
i
9 , oO nồng đỗ 1000 ppm; các chế phẩm đều cĩ hiệu lực điệt sậu cao: từ hạt thèn mát diệt được 75% sâu xanh, 84,27 sâu
te, 55,69% sâu khoang; từ hạt củ đậu điệt được 100% sâu xanh,
88% sâu tơ; từ hạt na điệt được 81,25 sâu xenh, 8% sâu tơ
về 2 Bước đầu nhận thấy cĩ su sai khác _về 86 Lượng, và ag
age các băng của enziu cuteraza Ở sứu tơ thí nghiệm và đổi
ching Sy sai khác trên cĩ thể đo tác dụng của các chế phẩm
gây nên
6 Dưới tác động cho uống các chế phẩm từ hạt thàn mát,
hoạt động và hgoại hình, mũc độ tăng trọng cơ thể và trọng
lượng các nội quan, số lượng bồng cầu ở chuật nhắt trắng khơng
thay agi, số Lugng bych cau cĩ tăng lên 3 giờ sau khi cho uống ở các liều từ 1000 ppm - 3000 ppm, nhung sau do giảm aan va đạt đến giá trị bình thường sau 24 giv
7 Đề nghị nghiêu cứu ủng đụng cúc chế phẩm trên đồng
Trang 38xuộng-TÀi 1TEU THAU KHẢO
I Beng Vigt
1.x fron Quang Hùng Thuốc trù địch hại bao vệ cây trồng NXB
Gạo trồng trọt và bảo vệ thực vật, 1991, tre 22, 77, T8
‹Ì Rạrumttae S.4., Cơ sỞ hĩa học bao vệ thực vật, NXB KH, 1991, tr 114-116
3x Iuong Duy Kinh, Vo Vim Duc, Số tay sử dụng nơng được Cơng ty
thudc sét trang mién Nua, 1969, tr 10-11
4.“ Phạm Văn lầm, Một sé nghié: clu thuốc thảo mộc trừ sầu hại
trên thế giới, Tạp chí EVeV số 2, 1988
5 Phạn Văn lầm, Vai dẫn Liệu về tính chống thuốc của sảu hại " tyê ổ giới, Tạp chí 5VPV số 1, 1991 6 BŠ Tết Lợi, Những cảy thuốc và vị thuốc Việt Nam NXB Khoa hủ và kỹ thuật, Hà Nội, 1991 ` Nghiéu, Con trùng hoe dgi cucng NXB giáo đục cao đẳng, ^^ Nợng HỂi, 1960
8 Nguyễn Thị Minh Tam, Trần Cao Đường, Đồn Văn Hợi Ảnh hưởng
7a mot số chế phẩm tù tuụs vật dối với mộ t sổ loai sâu hại
'£au Tạp chí BV?V thẳng 2 1992, tr 26
9:xNgu yên Duy Trang, Một số kết quả bước đầu nghiên cứu những
cậy cĩ tính độc tru sản; tạp chỉ BWUV sé 2 1990
gện Duy Trang, Một số kết qua nghiên cứu sử đụng hạt củ Tam thuốc trừ sau, Tap chí BVWUV số 3w 1991
11.*1â Trường, Thuốc tru sau bing cdy ed, NXb Khoa học, Hà Nội,
.AÐ6T, tr 6~12 -
ì Ä Trường, Trồng va SỬ dung, rễ cây ruốc cĩ trừ sâu hại cây
trồng, NXB Nơng nghiệp, HÈ Nội, 1987, tr 12-13
£ + `
It Tieng nước đ1zoaL
12 Robert I Metcalf, Organic insecticides California, 1955, tr 1, 23, 37
14 Sehmutterer Hy ascher li.no., Natural pesticides from the neem tree and other tropicul plants, Eschborn, 1994 21, No 2, B2, 1550
16 Duong T.C., Hoi D.V and fia N.@ Thọ effects of sone plant
extracts on Globoderaw restuchienses Abstracts of 21 Inter-