Chuong VII: QUY TRÌNH PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT

QUY TRÌNH QUY TRÌNH PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT VI SINH VẬT CHƯƠNG VI CHƯƠNG VI TỔNG SỐ TỔNG SỐ VI SINH VẬT HIẾU KHÍ VI SINH VẬT HIẾU KHÍ ( ( Aerobic Plate Count Aerobic Plate Count ) ) Tổng số vi sinh vật hiếu khí Tổng số vi sinh vật hiếu khí 1. Định nghĩa - Là những VSV tăng trưởng và hình thành khuẩn lạc trong điều kiện hiếu khí - Chỉ thị mức độ vệ sinh an toàn thực phẩm 2. Nguyên tắc - Theo phương pháp đổ đĩa - Ủ ở nhiệt độ 37 0 C/48h hoặc 30 0 C/72h 4. Thiết bị - Tủ ấm 30 0 C Tổng số vi sinh vật hiếu khí Tổng số vi sinh vật hiếu khí 3. Môi trường nuôi cấy - Saline Pepton Water (SPW) - Plate Count Agar (PCA) Chuẩn bị mẫu Chuẩn bị mẫu Đổ đĩa Đổ đĩa Nuôi ủ Nuôi ủ Đọc kết quả Đọc kết quả Chuẩn bị mẫu Chuẩn bị mẫu - Cắt mẫu: lượng mẫu cắt là 10g hoặc 25g - Đồng nhất mẫu bằng stomacher trong 30s - Pha loãng mẫu Đổ đĩa Đổ đĩa Nuôi ủ Nuôi ủ Ủ ở nhiệt độ 30 0 C trong 72 giờ Kết quả Kết quả N A (cfu/g) = --------------------------- n 1 Vf 1 + …… + n i Vf i - Đếm tất cả khuẩn lạc xuất hiện trên đĩa - Tính kết quả theo công thức: Ví dụ: Ví dụ: Khi phân tích 1g mẫu trong trường hợp cụ thể thu được kết quả như sau: Nồng độ pha loãng 10 -3 10 -4 Kết quả Đĩa 1 235 26 Đĩa 2 246 21 [...]... Coliform Coliform chịu nhiệt tổng số Nguyên tắc - Định lượng Coliform trên môi trường đặc trưng - Khẳng định Môi trường sử dụng - VRB - TSA - BGBL Quy trình phân tích Chuẩn bị mẫu Phân tích Đếm kết quả Khẳng định Phân tích - Sử dụng phương pháp đỗ đĩa Thể tích mẫu sử dụng: 1 ml Đổ môi trường TSA, chờ 1 – 2 giờ Đổ môi trường VRB Ủ 370C, 24h Đọc kết quả Khuẩn lạc đặc trưng cho Coliform: khuẩn lạc màu... α-naphtol KOH 40 % Chuẩn bị mẫu Tăng sinh Phân lập Khẳng định Nghiệm pháp IMViC Tăng sinh - Môi trường sử dụng: canh BGBL - Ủ ở nhiệt độ 440C trong 24h - Chọn những ống sinh hơi  cấy phân lập Phân lập - Môi trường sử dụng: EMB agar - Cấy chuyển từ BGBL  EMB, ủ ở nhiệt độ 370C trong 24h - Chọn những khuẩn lạc đặc trưng và cấy chuyển sang môi trường TSA Khẳng định - Thử nghiệm IMViC: + + - - Kết luận - Phát... lượng E.Coli ++ + PHA LOÃNG 10-1 370C/24h +- + - + - 10-2 10-3 ĐỊNH TÍNH E.COLI 1 Định nghĩa Sử dụng lactose và sinh hơi Sinh indol Sinh acid Không sử dụng citrate Feacal Coliform Nghiệm pháp IMViC phù hợp 2 Nguyên tắc - Định tính và xác định có hay không có E.Coli trong mẫu - Mẫu  BGBL  EMB  IMViC 3 Môi trường - Saline Pepton Water (SPW) - BGBL broth - EMB agar - TSA - MR – VP broth - Trypton broth... (cfu/ml) N n1vf1 +…+nivfi xR ĐỊNH LƯỢNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN Nguyên tắc • Mẫu được pha thành một dãy thập phân liên tiếp và mẫu được đưa vào môi trường thích hợp • Ủ và đọc số ống dương tính • Tra bảng Mac – crady  tính toán số lượng MẪU PHA LOÃNG LSB 370C/24h BGBL EC broth EMB IMViC 440C/24h Coliforms Coliform chịu nhiệt 440C/24h Trypton Kovac’s Feacal Coliform E.Coli Định lượng Coliforms ++ . QUY TRÌNH QUY TRÌNH PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT VI SINH VẬT CHƯƠNG VI CHƯƠNG VI TỔNG SỐ TỔNG SỐ VI SINH VẬT HIẾU KHÍ VI. BGBL Quy trình phân tích Quy trình phân tích Chuẩn bị mẫu Phân tích Đếm kết quả Khẳng định Phân tích Phân tích - Sử dụng phương pháp đỗ đĩa - Thể tích