Hiệu Quả Đáp Ứng Miễn Dịch Đối Với Vắc-Xin H5N1 Trên Đàn Gia Cầm Của Một Số Huyện Tại Tỉnh

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG ….  … NGÔ MỸ QUYÊN HIỆU QUẢ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI VẮC-XIN H5N1 TRÊN ĐÀN GIA CẦM CỦA MỘT SỐ HUYỆN TẠI TỈNH KIÊN GIANG Luận văn tốt nghiệp Ngành: BÁC SĨ THÚ Y Cần Thơ, 2010 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành: BÁC SĨ THÚ Y Tên đề tài: HIỆU QUẢ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI VẮC-XIN H5N1 TRÊN ĐÀN GIA CẦM CỦA MỘT SỐ HUYỆN TẠI TỈNH KIÊN GIANG Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: PGS TS Lưu Hữu Mãnh Ngô Mỹ Quyên MSSV: 3064541 Lớp: Thú Y K32A Cần Thơ, 2010 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề Tài: Hiệu đáp ứng miễm dịch vắc-xin H5N1 đàn gia cầm số huyện tỉnh Kiên Giang; Do sinh viên: Ngô Mỹ Quyên thực quan Thú y vùng VII thành phố Cần Thơ từ tháng 8/2010 đến tháng 11/2010 Cần Thơ ngày… tháng… năm 2010 Duyệt Bộ môn Cần Thơ ngày… tháng…năm 2010 Duyệt Giáo viên hướng dẫn Cần Thơ, ngày … tháng … năm … Duyệt Khoa Nông Nghiệp & SHƯD i LỜI CẢM ƠN - Sau thời gian năm ngồi giảng đường Đại Học Cần Thơ, với giảng dạy tận tình quý thầy cô, tiếp nhận kiến thức vô quý báu cho thân để vững tin bước vào đời Quyển luận văn tốt nghiệp hồn thành hướng dẫn tận tình thầy Lưu Hữu Mãnh, anh chị phòng xét nghiệm huyết học – quan thú y vùng VII Cần Thơ Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến ba mẹ người thân hết lòng lo lắng, động viên giúp đỡ tơi Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân quý thầy, cô Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng – Trường Đại Học Cần Thơ, đặc biệt thầy Lưu Hữu Mãnh, cô Bùi Thị Lê Minh tận tình hướng dẫn, dạy giúp cho tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Qua tơi xin tỏ lòng tri ân đến thầy Đỗ Trung Giã thầy Trần Ngọc Bích hai cố vấn học tập hai lớp Thú Y 32 Tôi xin gởi lời cảm ơn đến Nguyễn Bá Thành giám đốc quan thú y vùng VII, Nguyễn Thành Đức chi cục Trưởng chi cục Thú y tỉnh Kiên Giang tạo điều kiện thuận lợi trình làm luận văn tốt nghiệp Tôi xin cảm ơn anh Tiền Ngọc Tiên anh chị phịng chẩn đốn xét nghiệm – Cơ quan thú y vùng VII Cần Thơ, nhiệt tình giúp đỡ động viên tơi thời gian làm luận văn Cuối xin gửi lời cảm ơn đến người bạn lớp thú y K32, người chia sẻ buồn vui, gắn bó giúp đõ tơi suốt q trình học tập trường Sau tơi xin kính chúc q thầy anh chị dồi giàu sức khỏe, đạt nhiều thành công công tác sống ii MỤC LỤC Trang Trang tựa Trang duyệt Lời cảm ơn Mục lục Danh sách chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình – biểu đồ Tóm lược Chương : ĐẶT VẤN ĐỀ Chương : CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Khái quát bệnh cúm gia cầm 2.1.1 Căn nguyên gây bệnh 2.1.2 Hình thái - cấu tạo vi-rút cúm gia cầm 2.1.3 Sức đề kháng vi-rút cúm gia cầm 2.1.4 Quá trình sinh bệnh phương thức lây lan 2.1.5 Dịch tễ bệnh 2.1.6 Đường xâm nhập bệnh cúm gia cầm 2.1.7 Miễn dịch bệnh cúm gia cầm 2.2 Tình hình dịch cúm gia cầm 2.2.1 Trên giới 2.2.2 Tại Việt Nam 2.3 Tình hình nghiên cứu cơng tác giám sát huyết học Sau tiêm phòng vắc-xin cúm gia cầm Việt Nam 2.4 Tình hình tiêm phịng sử dụng vắc-xin Việt Nam 2.4.1 Một số vắc-xin cúm gia cầm sử dụng Việt Nam 2.4.2 Cơng tác tiêm phịng vắc-xin cúm gia 2.4.3 Tình hình chăn ni gia cầm cơng tác tiêm phịng Vắc-xin cúm gia cầm tỉnh Kiên Giang i ii iii iv v vi vii 2 6 9 11 11 12 14 15 15 16 17 Chương 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 3.1 Nội dung nghiên cứu 3.2 Phương tiện thí nghiệm 3.2.1 Thời gian, địa điểm đối tượng nghiên cứu 3.2.2 Dụng cụ - hóa chất 3.3 Phương pháp nghiên cứu 3.3.1 Quy trình tiêm phịng lấy mẫu xét nghiệm 3.3.2 Phương pháp lấy mẫu xét nghiệm 3.3.3 Phương pháp kiểm tra mẫu 3.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 20 20 20 20 20 21 21 22 24 27 Chương : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 iii 4.1 Kết đáp ứng miễn dịch đàn gà sau tiêm phòng 4.2 Kết đáp ứng miễn dịch đàn vịt sau tiêm phòng 4.3 So sánh hiệu đáp ứng miễn dịch đàn gà đàn vịt vắc-xin cúm gia cầm 4.4 Sự phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà đàn vịt 28 33 35 38 Chương : KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận 5.2 Đề nghị 40 40 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 PHỤ CHƯƠNG 43 iv DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.Các phân type vi-rút cúm gây bệnh cho người động vật Bảng Tình hình dịch cúm gia cầm số nước giới 12 Bảng Tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam 13 Bảng Số lượng gia cầm tỉnh Kiên Giang qua năm 17 Bảng Tình hình tiêm phòng cúm gia cầm tỉnh Kiên Giang năm 2009 đợt năm 2010 18 Bảng Tình hình tiêm phòng cúm gia cầm đợt năm 2010 huyện Giồng Riềng, An Minh, Hòn Đất 19 Bảng Số lượng mẫu huyết lấy huyện 23 Bảng Kết xét nghiệm huyết học gà 29 Bảng Kết xét nghiệm huyết học vịt 34 Bảng 10 Kết xét nghiệm huyết học gà vịt 36 Bảng 11 Hiệu giá kháng thể đàn gà đàn vịt 38 v DANH MỤC HÌNH – BIỂU ĐỒ DANH MỤC HÌNH Trang Hình Cơ chế vi-rút cúm H5N1 gây bệnh cúm người Hình Mơ hình cấu trúc vi-rút cúm Hình Các lồi nhiễm cúm A, nhóm HA NA Hình Chu kỳ phát triển bệnh cúm gia cầm loài chim từ loài chim sang người Hình Quy trình tiêm phịng lấy mẫu 21 Hình Kết xét nghiệm phản ứng HI 27 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ Phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà huyện 32 Biểu đồ Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt huyện 35 Biểu đồ So sánh đáp ứng miễn dịch gà vịt 37 Biểu đồ Sự phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà đàn vịt 39 vi TÓM LƯỢC Đề tài: “Hiệu Quả Đáp Ứng Miễn Dịch Đối Với Vắc-xin H5N1 Trên Đàn Gia Cầm số huyện tỉnh Kiên Giang” thực từ tháng 08/2010 đến tháng 11/2010, phòng xét nghiệm huyết học - Cơ Quan Thú Y Vùng VII Cần Thơ Mẫu huyết lấy từ 110 đàn gà vịt tiêm vắcxin phòng cúm gia cầm thuộc 27 xã huyện Giồng Riềng, An Minh Hòn Đất địa bàn tỉnh Kiên Giang Chúng tơi tiến hành xét nghiệm 540 mẫu (có 393 mẫu gà 147 mẫu vịt), nhằm đánh giá tỷ lệ bảo hộ gia cầm sau tiêm vắcxin phòng cúm thể độc lực cao Bằng phương pháp ngăn trở ngưng kết hồng cầu với kháng nguyên vi-rút cúm vô hoạt H5N1 (H5N1 Inactivated Ag/Vet Lap Agency/UK) dựa theo tiêu chí đánh giá cục Thú y, số mẫu dương tính lấy mức hiệu giá HI  1/16 tỷ lệ phải đạt 70% số mẫu có hiệu giá HI  1/16 Kết ghi nhận: tỷ lệ bảo hộ đàn gà huyện Giồng Riềng, An Minh, Hòn Đất 79,78% 68,33% 88,71% Tỷ lệ bảo hộ đàn vịt sau tiêm phòng vắc-xin H5N1 huyện Giồng Riềng Hòn Đất 94,38% 100% Hiệu giá kháng thể đàn gà chủ yếu tập trung cao mức hiệu giá 1/128, hiệu giá kháng thể đàn vịt tập trung chủ yếu mức hiệu giá 1/512 vii Chương 1: ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh cúm gia cầm (Influenza A virus) bệnh truyền nhiễm gây chủng vi-rút type A Đây bệnh nguy hiểm gia cầm, người số loài động vật hữu nhũ bậc thấp bệnh có tốc độ lây lan nhanh với tỷ lệ chết cao 80- 90% lên đến 100% đàn gia cầm bị nhiễm bệnh Dịch cúm gia cầm lần xâm nhập tới Việt Nam vào cuối năm 2003 sau nhanh chóng bùng phát thành trận đại dịch khắp tỉnh, thành nước làm chết tiêu hủy hàng triệu gia cầm gây thiệt hại to lớn cho ngành chăn nuôi gia cầm kinh tế nước Bệnh cúm gia cầm không gây thiệt hại gia cầm mà gây tác hại đến tính mạng người, lẽ dịch cúm gia cầm trở thành thách thức to lớn cho ngành Y tế quan Thú y năm qua Theo cảnh báo tổ chức Y tế giới (WHO) bệnh cúm gia cầm xảy diện rộng kéo dài, vi-rút cúm gia cầm có biến đổi gene tạo chủng vi-rút nguy hiểm người (www.vietbao.vn/Suc-khoe/WHO-2005) Do tính chất nguy hiểm tác hại to lớn nên việc ngăn chặn phòng tránh dịch bệnh tái phát mối quan tâm hàng đầu Chính phủ lãnh đạo địa phương Trong giải pháp phòng bệnh cúm gia cầm giải pháp tiêm ngừa vắc-xin coi giải pháp hàng đầu để khống chế lây lan dịch bệnh Từ năm 2009 đến tỉnh Kiên Giang nhờ thực nghiêm túc cơng tác tiêm phịng cho đàn gia cầm nên khống chế thành công dịch cúm gia cầm tình hình chăn ni phát triển ổn định Nhằm tiếp tục trì kết đạt chung tay nước tiến tới toán bệnh cúm gia cầm, chi cục Thú y tỉnh tập trung đạo công tác tiêm phòng đàn gia cầm đợt 1/2010 vào tháng Sau tiêm phịng, cơng tác giám sát huyết thực thường xuyên nhằm đánh giá khả bảo hộ Được đồng ý môn Thú Y, Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng, trường Đại Học Cần Thơ thực đề tài: “Hiệu Quả Đáp Ứng Miễn Dịch Đối Với Vắc-xin H5N1 Trên Đàn Gia Cầm số huyện tỉnh Kiên Giang” Với mục tiêu: - Đánh giá hiệu đáp ứng miễn dịch vắc-xin cúm gia cầm sau tiêm phòng huyện Giồng Riềng, An Minh Hòn Đất tỉnh Kiên Giang - So sánh hiệu đáp ứng miễn dịch đàn gà đàn vịt vắcxin tiêm phòng - Xã Vân Khánh Tây có 16/20 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt 80% - Xã Đông Hưng B có 11/20 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ 55% Kết xét nghiệm huyết học gà huyện An Minh có 123/180 mẫu dương tính, có tỷ lệ bảo hộ bình quân 68,33% Cụ thể huyện có xã đạt tỷ lệ bảo hộ theo quy định cuả cục Thú y (trên 70%) gồm: Vân Khánh (100%), Đơng Hịa (90%), Vân Khánh Tây (80%), Tân Thạnh (70%), thị trấn An Minh (70%) Và có xã chưa đạt tỷ lệ bảo hộ gồm: Đông Hưng (55%), Đông Hưng A (45%), Đông Thạnh (50%), Đông Hưng B (55%); điều cho thấy nguy bùng phát dịch cúm gia cầm lẻ tẻ, cục đàn gà xã chưa đạt tỷ lệ bảo hộ với vi-rút cúm gia cầm huyện An Minh Trên địa bàn huyện Hòn Đất: mẫu huyết lấy từ 18 đàn gà thuộc xã với kết xét nghiệm có 110/124 mẫu dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ bình quân cao 88,71% cụ thể xã sau - Xã Mỹ Thái có 10/10 mẫu dương tính tỷ lệ bảo hộ đạt 100% - Xã Nam Thái Sơn có 19/20 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt 95% - Xã Mỹ Phước có 14/15 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt 93,33% - Xã Mỹ Lâm có 2/10 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ 20% - Xã Sơn Bình có 13/15 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt 86,67% - Xã Bình Giang có 17/19 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt 89,47% - Xã Mỹ Hiệp Sơn có 10/10 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt 100% - Xã Mỹ Thuận có 15/15 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt 100% - Thị trấn Sóc Sơn có 10/10 mẫu dương tính, đạt 100% tỷ lệ bảo hộ Nhìn chung, tỷ lệ bảo hộ bình quân gà huyện Hòn Đất đạt tỷ lệ cao 88,71% có 8/9 xã đạt tỷ lệ bảo hộ theo quy định Cục Thú y (trên 70%) gồm xã: Mỹ Thái, Mỹ Hiệp Sơn, Mỹ Thuận, Thị trấn Sóc Sơn đạt tỷ lệ bảo hộ tối đa 100%; Nam Thái Sơn (95%), Mỹ Phước (93,33%), Bình Giang (89,47%), Sơn Bình (86,67%); có xã chưa đạt tỷ lệ bảo hộ xã Mỹ Lâm (20%) Khi so sánh tỷ lệ bảo hộ huyện cho thấy: - Tỷ lệ bảo hộ bình quân mẫu huyết gà thuộc huyện Giồng Riềng Hòn Đất đạt mức yêu cầu cục Thú y (trên 70%) nhiên có số xã huyện chưa đạt tỷ lệ bảo hộ Trong tỷ lệ bảo hộ đàn gà thuộc 31 huyện Hòn Đất (88,71%) cao so với huyện Giồng Riềng (79,78%), sai khác khơng có ý nghĩa thống kê (p = 0,079) - Tỷ lệ bảo hộ mẫu huyết đàn gà tính quy mơ tồn huyện An Minh tỷ lệ bảo hộ 68,33% thấp tiêu cục Thú y đưa Tỷ lệ bảo hộ thấp tỷ lệ bảo hộ đạt huyện Giồng Riềng Hịn Đất Điều lý giải do: khó khăn cơng tác tiêm phịng cụ thể khó khăn việc bắt giữ gà thả vườn để tiêm phòng nêu trên; tiêm phòng chưa đảm bảo kỹ thuật, đủ số lần tiêm theo quy định; tiêm chưa thời gian kỹ thuật đưa nên hiệu đáp ứng miễn dịch chưa đạt Trong đó, sai khác tỷ lệ bảo hộ gà huyện An Minh (68,33%) huyện Giồng Riềng (79,78%) có ý nghĩa thống kê (p = 0,053) Và so sánh tỷ lệ bảo hộ mẫu huyết gà huyện An Minh (68,33%) với Hòn Đất (88,71%) sai khác có ý nghĩa thống kê (p = 0,000) Nhìn chung, tính quy mơ tồn huyện tỷ lệ bảo hộ đáp ứng miễn dịch với vắc-xin phòng bệnh cúm gia cầm đàn gà huyện đạt tỷ lệ bảo hộ bình qn 77,35% có với mức hiệu giá kháng thể phân bố khác biểu đồ 50 46.34 tỷ lệ % 45 40 32.39 35 30 28.18 25 21.13 22.76 21.13 20.91 17.27 20 15 10 23.64 22.76 7.04 Giồng Riềng An Minh Hòn Đất 9.86 8.13 7.27 8.45 2.73 0 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 Mức hiệu giá Biểu đồ Phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà huyện Từ biểu đồ nhận thấy hiệu giá kháng thể đàn gà huyện Giồng Riềng tập trung cao mức hiệu giá 1/128 chiếm tỷ lệ 32,39% mức 1/32, 1/256, 1/64 thấp mức 1/16 Có thể nói hiệu giá kháng thể vi-rút cúm gia cầm chủ yếu tập trung từ mức hiệu giá 1/128 đến 1/512 chiếm tỷ lệ 32 62,9%, điều cho thấy lượng kháng thể diện thể gia cầm mức cao Tại huyện An Minh, mức hiệu giá tập trung cao mức hiệu giá 1/128 (46,34%), mức hiệu giá 1/64, 1/256; thấp mức hiệu giá 1/16, 1/512 tỷ lệ 0% Trên địa bàn huyện tỷ lệ bảo hộ số xã chưa đạt nhiên qua phân bố mức hiệu giá cho thấy xã đạt tỷ lệ bảo hộ 70% lượng kháng thể mức cao với mức hiệu giá chủ yếu tập trung mức hiệu giá 1/64 đến 1/256 chiếm tỷ lệ 91,86% Trên địa bàn huyện Hòn Đất, mức hiệu giá đàn gà tập trung cao mức hiệu giá 1/512 (28,18%), mức 1/128, 1/256, 1/64, thấp mức 1/16 (2,73%) Mức hiệu giá chủ yếu tập trung mức 1/128 đến 1/512 chiếm tỷ lệ 72,73% cho thấy tỷ lệ bảo hộ xã đạt yêu cầu cục Thú y đủ sức bảo hộ đàn trước công dịch cúm gia cầm 4.2 Kết đáp ứng miễn dịch đàn vịt sau tiêm phòng vắc-xin cúm gia cầm Kết qủa xét nghiệm 147 mẫu huyết vịt huyện Giồng Riềng Hịn Đất cho thấy có 142/147 mẫu dương tính tỷ lệ bảo hộ bình quân đạt cao (96,60%) Kết thể bảng 33 Bảng Kết xét nghiệm huyết học vịt Huyện Giồng Riềng Hòn Đất Xã Số mẫu XN Hiệu giá kháng thể Số mẫu 0,05) Các chữ a, b cột khác khác có ý nghĩa thống kê (p≤0,05) Thông qua kết ghi nhận bảng cho thấy Tại huyện Giồng Riềng: xét nghiệm 89 mẫu huyết vịt lấy 18 đàn xã với kết có 84/89 mẫu dương tính, tỷ lệ bảo hộ đạt cao 94,38% Cụ thể xã có tỷ lệ bảo hộ sau 34 - xã có tỷ lệ bảo hộ đạt cao 100% gồm: Ngọc Thuận, Hòa Lợi, Ngọc Chúc, Bàn Thạch, Thạnh Phước - Xã Vĩnh Thạnh có 9/10 mẫu dương tính tỷ lệ bảo hộ đạt 90% - Xã Hòa Thuận với 5/9 mẫu dương tính tỷ lệ bảo hộ 55,56% chưa đạt tỷ lệ bảo hộ theo quy định Khi tính theo quy mơ tồn huyện tỷ lệ bảo hộ huyện Giồng Riềng đạt 94,38% đạt tiêu chí cục Thú y, nhiên có xã Hịa Thuận chưa đạt tỷ lệ bảo hộ, điều cho thấy có xã Hòa Thuận bùng phát dịch cúm gia cầm có mầm bệnh cơng Huyện Hịn Đất: 58 mẫu huyết lấy từ 13 đàn xã cho kết 58/58 mẫu dương tính, tất xã huyện đạt tỷ lệ bảo hộ cao 100% Cho thấy đàn vịt cuả huyện Hòn Đất an tồn trước cơng vi-rút cúm gia cầm Nhìn chung, kết giám sát sau tiêm phòng đàn vịt huyện Giồng Riềng Hòn Đất đạt tỷ lệ bảo hộ cục Thú y quy định (trên 70%) xã không đạt, tỷ lệ bảo hộ đàn vịt huyện Hòn Đất (100%) cao so với huyện Giồng Riềng (94,38%) đồng thời sai khác có ý nghĩa thống kê (p = 0,013) Điều thể phân bố mức hiêu giá khảng thể khác biểu đồ 60 48.28 50 tỷ lệ % 40 34.52 Giồng Riềng 30 24.13 20 10 16.67 14.29 18.97 13.1 Hòn Đất 14.29 8.62 7.14 0 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 Mức hiệu giá Biể đồ Phân bố mức hiệu giá kháng thể đàn vịt huyện Từ biểu đồ nhận thấy mức hiệu giá đàn vịt huyện Giồng Riềng chủ yếu tập trung mức hiệu giá 1/64 đến 1/512 với tỷ lệ 78,58% cho 35 thấy lượng kháng thể tạo mức tốt Trong mức hiệu giá tập trung cao 1/64 (34,52%) thấp mức hiệu giá 1/16 (7,14%) Tại huyện Hòn Đất hiệu giá kháng thể tập trung cao mức 1/512 (53,44%) mức hiệu giá tốt thấp dần mức 1/128, 1/256, 1/64 thấp mức hiệu giá 1/32, 1/16 (0%) Có thể nhận thấy mức hiệu giá đàn vịt huyện chủ yếu tập trung mức 1/128 đến 1/512 chiếm tỷ lệ 91,38%; điều nói lên lượng kháng thể sinh mức cao đàn vịt huyện có tỷ lệ bảo hộ bền vững với vi-rút cúm gia cầm 4.3 So sánh hiệu đáp ứng miễn dịch đàn gà vịt vắc-xin cúm gia cầm Bảng 10 Kết xét nghiệm huyết học gà vịt Gà ∑số Huyện mẫu XN Mẫu XN Hg Vịt Hg Tỷ lệ Mẫu ≥1/16