Kiểm Tra Hiệu Quả Đáp Ứng Miễn Dịch Đối Với Vaccine H5n1 Trên Đàn Gia Cầm Tại Huyện Đầm Dơi

Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG HÀ KIM MAI KIỂM TRA HIỆU QUẢ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI VACCINE H5N1 TRÊN ĐÀN GIA CẦM TẠI HUYỆN ĐẦM DƠI VÀ TRẦN VĂN THỜI CỦA TỈNH CÀ MAU Luận văn tốt nghiệp Ngành : BÁC SĨ THÚ Y Cần Thơ, 2010 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Luận văn tốt nghiệp Ngành : BÁC SĨ THÚ Y Tên đề tài: KIỂM TRA HIỆU QUẢ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI VACCINE H5N1 TRÊN ĐÀN GIA CẦM TẠI HUYỆN ĐẦM DƠI VÀ TRẦN VĂN THỜI CỦA TỈNH CÀ MAU Sinh viên thực : Hà Kim Mai MSSV: 3064522 Lớp: Thú Y K32 Giáo viên hướng dẫn : PGS.TS: Lưu Hữu Mảnh Cần Thơ, 2010 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài: Kiểm tra hiệu đáp ứng miễn dịch vaccine H5N1 đàn gia cầm huyện Đầm Dơi Trần Văn Thời tỉnh Cà Mau; sinh viên : Hà Kim Mai thực Cơ quan Thú Y Vùng VII từ tháng 8-2010 đến tháng 112010 Cần Thơ, ngày…tháng…năm 2010 Duyệt Của Giáo Viên Hướng Dẫn Cần Thơ, ngày…tháng…năm 2010 Duyệt Của Bộ Môn Cần Thơ, ngày….tháng….năm 2010 Duyệt khoa Nông Nghiệp & SHƯD Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only LỜI CÁM ƠN  Qua năm học tập trường Đại Học Cần Thơ, tơi nhận dìu dắt, giảng dạy tận tình thầy cơ, tiếp nhận nhiều kiến thức quý báu cho Giờ phải xa mái trường thân yêu này, xa bạn bè, thầy cô mến yêu, xin gởi lời cám ơn sâu sắc đến thầy cơ, gia đình bạn bè động viên, giúp đỡ tơi q trình học tập Tôi xin chân thành cảm ơn: * Ba mẹ người thân hết lòng lo lắng, động viên giúp đỡ * Quý thầy cô Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng – Trường Đại Học Cần Thơ, đặc biệt thầy Lưu Hữu Mãnh tận tình hướng dẫn, dạy em hồn thành luận văn * Các anh, chị tai Trung Tâm Thú Y Vùng VII Cần Thơ nhiệt tình giúp đỡ suốt thời gian học tập * Cuối xin gởi lời cám ơn đến bạn sinh viên lớp Thú Y K32, người chia sẻ vui buồn giúp đỡ thời gian học tập Cần Thơ, ngày tháng năm 2010 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only MỤC LỤC Trang tựa i Trang duyệt ii Lời cám ơn iii Mục lục iv Danh mục chữ viết tắt .v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Tóm lược viii CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 2: CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Bệnh cúm gia cầm 2.1.1 Khái niệm nguyên gây bệnh 2.1.2 Sức đề kháng virus 2.1.3 Đường lây truyền 2.1.4 Đường xâm nhập 2.1.5 Dịch tễ bệnh 2.2 Nguyên tắc sử dụng vaccine phòng chống cúm gia cầm 2.3 Tiêm phòng vaccine 2.4 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 2.5 Giám sát sau tiêm phòng CHƯƠNG 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 3.1 Phương tiện nghiên cứu 10 3.1.1 Thời gian, địa điểm đối tượng nghiên cứu 10 3.1.2 Dụng cụ hóa chất 10 3.2 Phương pháp nghiên cứu 11 3.2.1 Qui trình phát kháng thể cúm gia cầm phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu (HI) 12 3.2.2 Chuẩn độ kháng nguyên cúm gia cầm (HA) 13 3.2.3 Tiến hành phản ứng HI 15 3.2.4 Phương pháp xử lý thống kê 15 CHƯƠNG 4:KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .17 4.1 Kết kiểm tra huyết học đàn gà tỉnh Cà Mau 17 4.2 Kết kiểm tra huyết học đàn vịt tỉnh Cà Mau 18 4.3 Sự phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm gia cầm 19 4.4 So sánh hiệu giá kháng thể gà vịt 20 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 22 5.1 Kết luận 22 5.2 Đề nghị 22 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ CHƯƠNG Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT HAU: haemagglutinin unit HI: Hemagglutination inhibition OIE: Tổ Chức Dịch Tễ Thế Giới PBS: Phosphate Buffer Saline WHO: Tổ Chức Y Tế Thế Giới Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 3.2 Số mẫu lấy huyện Đầm Dơi 11 Bảng 3.3 Số mẫu lấy huyện Trần Văn Thời 12 Bảng 4.1 Kết kiểm tra huyết học đàn gà 17 Bảng 4.2 Kết kiểm tra huyết học đàn vịt 18 Bảng 4.3 Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm gia cầm đàn gà vịt 19 Bảng 4.4 So sánh hiệu giá kháng thể gà vịt 20 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1 Cấu tạo virus cúm gia cầm Hình 2.2 Đường lây truyền bệnh HÌnh 3.1 Giai đoạn cho PBS vào đĩa xét nghiệm 16 Hình 3.2 Kết xét nghiệm 16 Hình 4.1 Phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà 19 Hình 4.2 Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt 19 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only TÓM LƯỢC Đề tài: “Kiểm tra hiệu đáp ứng miễn dịch vaccine H5N1 đàn gia cầm Huyện Đầm Dơi Trần Văn Thời tỉnh Cà Mau” thực từ tháng 08/2010 đến tháng 11/2010, phịng chẩn đốn xét nghiệm huyết Cơ Quan Thú Y Vùng VII Cần Thơ Chúng tiến hành xét nghiệm 196 mẫu huyết có 96 mẫu huyết gà (trong huyện Đầm Dơi có 57 mẫu huyết , huyện Trần Văn Thời có 39 mẫu huyết thanh) 100 mẫu huyết vịt (trong huyện Đầm Dơi có 55 mẫu huyết , huyện Trần Văn Thời có 45 mẫu huyết thanh) phương pháp ngăn trở ngưng kết hồng cầu HI Mẫu dương tính lấy mức hiệu giá HI ≥1/16 đàn gia cầm bảo hộ có 70% số mẫu có giá trị HI ≥1/16 Kết ghi nhận sau:Ở huyện Đầm Dơi tỷ lệ bảo hộ đàn gà 61,40%; vịt 83,63% Ở huyện Trần Văn Thời tỷ lệ bảo hộ đàn gà 71,79%; vịt 62,22% Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only CHƯƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ Theo Tổ Chức Dịch Tễ Thế Giới (OIE) bệnh cúm gia cầm bệnh truyền nhiễm nguy hiểm với tính chất lây lan mạnh Bệnh cúm gia cầm xảy nhanh chóng nặng loại gia cầm gà, vịt, gà tây số động vật khác, gây nhiều thiệt hại kinh tế gây chết 100% số gia cầm làm giảm sản lượng trứng cách nghiêm trọng, làm tăng chi phí thức ăn, quản lý chi phí khác dùng việc kiểm sốt ngăn chặn dịch Tổ Chức Y Tế Thế Giới (WHO) cảnh báo bệnh cúm xảy diện rộng kéo dài, virus cúm gia cầm có biến đổi gen tạo chủng virus nguy hiểm người Cúm gia cầm bắt đầu xuất Việt Nam từ cuối năm 2003, qua đợt dịch thiêu hủy gần 46 triệu gia cầm Ở tỉnh Cà Mau, ngồi ni trồng thủy sản số hộ dân phát triển thêm ngành chăn nuôi gia cầm không tránh khỏi thiệt hại mà dịch bệnh để lại Do biện pháp tiêu độc, khử trùng, vệ sinh môi trường… triển khai tích cực nhằm ngăn chặn dịch bệnh xảy Bên cạnh việc tiêm phịng vaccine xem biện pháp hỗ trợ hữu hiệu việc phòng chống hạn chế bệnh cúm gia cầm Để đánh giá hoạt động tiêm phòng vaccine cúm gia cầm đạt hiệu mức độ việc kiểm tra huyết học để phát kháng thể sau tiêm phòng vấn đề thực cần thiết Được giúp đỡ Cơ Quan Thú Y vùng VII chấp thuận Khoa Nông Nghiệp & SHƯD trường Đại học Cần Thơ thực đề tài: “ Kiểm tra hiệu đáp ứng miễn dịch vaccine H5N1 H5N2 đàn gia cầm huyện Đầm Dơi Trần Văn Thời tỉnh Cà Mau” nhằm đánh giá hiệu đáp ứng miễn dịch sau tiêm phòng vaccine đàn gia cầm phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI) 10 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only HÌnh 3.1 Giai đoạn cho PBS vào đĩa xét nghiệm Hình 3.2 Kết xét nghiệm 25 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết kiểm tra huyết học đàn gà tỉnh Cà Mau Chúng tiến hành xét nghiệm huyết học 96 mẫu huyết gà huyện tỉnh Cà Mau, kết bảng 4.1 cho thấy: đàn gà xã Phong Điền có 16/20 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 80%, chiếm tỷ lệ cao đảm bảo mức bảo hộ cho đàn gà Kế đến xã Khánh Lộc có 13/19 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 68,4% Kế đến xã Tân Trung có 17/27 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 62,9% Cuối xã Tân Đức có 18/30 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 60% Tỷ lệ bảo hộ với virus cúm đàn gà thấp nguyên nhân sau: - Tuổi, tình trạng thể lúc tiêm phịng, thao tác kỹ thuật tiêm phòng, liều tiêm., cách lấy mẫu bảo quản mẫu - Cách thức bảo quản sử dụng vaccine không quy cách (để vaccine tiếp xúc trực tiếp với ánh nắng)… Bảng 4.1 Kết kiểm tra huyết học đàn gà Huyện Đầm Dơi Trần Văn Thời Xã Số Hiệu giá kháng thể mẫu XN 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 Tỷ lệ mẫu bảo hộ (+) (%) Tân Trung 27 2 17 62,9a Tân Đức 30 5 18 60a Phong Điền 20 4 16 80b Khánh Lộc 19 1 2 13 68,4b 96 10 16 18 64 66,7 Tổng Mức độ ý nghĩa XN: xét nghiệm Số P=0,014 (+): dương tính 26 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only 4.2 Kết kiểm tra huyết học đàn vịt tỉnh Cà Mau Chúng tiến hành xét nghiệm huyết học 100 mẫu huyết vịt huyện tỉnh Cà Mau, kết bảng 4.2 cho thấy: đàn vịt xã Ngọc Chánh có 24/30 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 80% Kế đến xã Tân Tiến có 22/25 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 88% Cả xã cho tỷ lệ bảo hộ cao 70% Kế đến xã Lợi An có 15/24 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 62,50% Cuối xã Trần Hợi có 13/21 mẫu huyết cho kết dương tính, đạt tỷ lệ bảo hộ 61,9% Tỷ lệ bảo hộ với virus cúm đàn vịt xã thấp nguyên nhân sau: - Do tính đáp ứng sinh miễn dịch cá thể - Lượng kháng nguyên không đủ để gây đáp ứng miễn dịch, lượng kháng nguyên nhiều gây ức chế miễn dịch… Đây số nguyên nhân xảy ra, để xác định nguyên nhân nguyên nhân chủ yếu cần phải có nghiên cứu chuyên sâu với thời gian dài Bảng 4.2 Kết kiểm tra huyết học đàn vịt Huyện Xã Đầm Dơi Số Hiệu giá kháng thể mẫu XN 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 Số Tỷ lệ mẫu bảo hộ 1/512 (+) (%) Ngọc Chánh 30 24 80a Tân Tiến 25 3 22 88a Lợi An 24 2 3 15 62,5b Trần Hợi 21 3 2 13 61,9b 100 11 12 13 13 19 74 74 Trần Văn Thời Tổng Mức độ ý nghĩa XN: xét nghiệm P=0.000 (+): dương tính 4.3 Sự phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm gia cầm 27 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only Bảng 4.3 Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm gia cầm đàn gà vịt Gà Vịt Hiệu giá Số mẫu Tỷ lệ bảo hộ Số mẫu Tỷ lệ bảo hộ dương tính (%) dương tính (%) 1/16 6,25 8,12 1/32 10,93 11 14,86 1/64 10 15,63 12 16,22 1/128 14,06 13 17,56 1/256 16 25,00 13 17,56 1/512 18 28,13 19 25,68 Tổng 64 100 74 100 kháng thể Hình 4.1 Phân bố hiệu giá kháng thể đàn gà Hình 4.2 Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt 28.13 30 30 25 20 15.63 15 10 14.06 10.93 6.25 25.68 25 Tỷ lệ (%) Tỷ lệ (%) 25 20 14.86 16.22 17.56 17.56 1/32 1/64 1/128 1/256 15 10 8.12 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 Hiệu giá 1/16 Qua bảng 4.3 hình 4.1 cho thấy hiệu giá kháng thể tập trung cao mức hiệu giá 1/512 chiếm tỷ lệ cao 28.13% Kế đến mức hiệu giá 1/256 với tỷ lệ 25%, mức hiệu giá 1/64 Kế đến mức hiệu giá 1/128 chiếm tỷ lệ thấp 14.06% tiếp đến mức hiệu giá 1/32 với tỷ lệ 10.93%, thấp mức hiệu giá 1/16 chiếm tỷ lệ 6.25%.Nhìn chung hiệu giá kháng thể kháng virus cúm gia cầm đàn gà phần lớn tập trung mức hiệu giá 1/512 28 1/512 Hiệu giá Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software http://www.foxitsoftware.com For evaluation only Qua bảng 4.3 hình 4.2 cho thấy hiệu giá kháng thể tập trung cao mức hiệu giá 1/512 chiếm tỷ lệ 25.68%, mức hiệu giá 1/256 1/128 chiếm tỷ lệ 17.56% Kế đến mức hiệu giá 1/64 chiếm tỷ lệ 16.22% mức hiệu giá 1/32 chiếm tỷ lệ 14.86%, thấp mức hiệu giá 1/16 chiếm tỷ lệ 8.12% Nhìn chung hiệu giá kháng thể kháng virus cúm gia cầm đàn vịt phần lớn tập trung mức hiệu giá 1/256 1/512 Điều cho thấy hàm lượng kháng thể sinh thể gia cầm mức cao, đủ sức bảo hộ gia cầm an toàn trước nguy xâm nhiễm virus cúm gia cầm 4.4 So sánh hiệu giá kháng thể gà vịt Bảng 4.4 So sánh hiệu giá kháng thể gà vịt Loại gia cầm Gà Vịt Địa phương Số mẫu xét nghiệm Hiệu giá kháng thể ≥1/16 Hiệu giá kháng thể